兽药残留样品前处理技术

汇总｜兽药残留检测前处理类型由于兽药残留种类繁多、在样品中残留水平低、基质复杂、干扰物质多等，使样品前处理技术，即分离纯化技术成为兽药残留分析的重点和难点。

目前，兽药残留的样品前处理方法主要有液液萃取、固相萃取、固相微萃取、免疫亲和色谱、分子印迹、超临界流体萃取、基质固相分散技术、微波辅助萃取、凝胶渗透色谱和超声波辅助提取等。

液液萃取液液萃取(liquid-liquid extraction， LLE)是利用待测物在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中分配系数的不同而达到分离纯化的目的，是兽药残留分析中一种常用的前处理技术。

有国外学者将肉类样品用乙腈除蛋白，正己烷脱脂后，加乙酸乙脂液液萃取，利用超高效液相色谱串联质谱技术对肉中的24 种磺胺类药物残留进行了测定。

也有学者等运用液液萃取结合低温纯化技术作为前处理技术，测定了牛奶中大环内酯类抗生素，得到了良好的回收率。

液液萃取对实验条件和仪器要求不高，但操作繁琐、有机溶剂消耗大，污染严重，逐渐被一些新的前处理方法所取代。

固相萃取固相萃取(solid phase extraction， SPE)是目前兽药残留检测中最为常用的一种样品前处理技术。

它是利用固体吸附剂将样品中目标化合物吸附，使其与样品基质及干扰化合物分离，再用洗脱液洗脱下来从而达到分离和富集的目的。

固相萃取技术由于具有操作简单快速、消耗有机溶剂少、样品回收率高、易于自动化等优点，在样品前处理中得到广泛应用。

目前，固相萃取技术已可用在磺胺类、四环素类、阿维菌素类、氯霉素类、喹诺酮类、激素类、β -受体激动剂等多类兽药残留的定量分析中。

有学者采用固相萃取结合液相色谱方法测定了鸡肉组织中的喹诺酮类药物。

对比了Oasis HLB，Oasis MAX， SDB-RPS 三种不同填料固相萃取柱的萃取效率，最终得出SDB-RPS 填料的固相萃取柱的萃取效果最好。

固相微萃取固相微萃取(solid phase microextraction， SPME)技术是20 世纪90 年代兴起的一项新颖的样品净化富集技术，属于非溶剂型选择性萃取法。

分析检测鸡蛋中兽药多残留ELISA检测统一前处理技术优化及应用伍宏凯1，贾晶莹2，姜传黎3，贾良曦2*（1.广东省农产品质量安全中心，广东广州 510230；2.北京维德维康生物技术有限公司，北京 100095；3.湖北跃莱生物科技有限公司，湖北武汉 430100）摘 要：目的：建立一种适用于鸡蛋中莫能菌素、大观霉素、利巴韦林和多西环素快速检测的统一前处理技术。

方法：基于药物的回收率与基质效应，优化筛选样品统一前处理过程中乙腈体积、磷酸浓度及PBS浓度和pH值，确定鸡蛋样本兽药多残留统一前处理方法，并评价统一前处理条件下兽药多残留检测的准确度和精密度，比较优化前处理方法与试剂盒前处理方法检测结果。

结果：优化后前处理组合条件为采用6 mL乙腈、100 μL 15%磷酸进行药物提取，pH值7.0的0.05 mol·L-1 PBS作为样品稀释液，鸡蛋中药物残留回收率为82.18%～114.79%，批内RSD低于10%，批间RSD低于15%。

与试剂盒前处理方法相比，最终检测结果无显著性差异（P＞0.05）。

结论：本研究优化的前处理方法具有操作简单、检测时间短、结果可靠性高等优点，为鸡蛋中多种兽药残留的快速检测提供了可靠的前处理方法。

关键词：鸡蛋；兽药多残留；前处理Optimisation and Application of a Unified Pre-Treatment Technique for Elisa of Multi-Residues of Veterinary Drugs in Eggs WU Hongkai1, JIA Jingying2, JIANG Chuanli3, JIA Liangxi2*(1.Guangdong Agricultural Products Quality and Safety Centre, Guangzhou 510230, China; 2.Beijing WDWK Biotechnology Co., Ltd., Beijing 100095, China; 3.Hubei Yuelai Biotechnology Co., Ltd., Wuhan 430100, China) Abstract: Objective: To establish a unified pre-treatment technique suitable for the rapid detection of monensin, spectinomycin, ribavirin and doxycycline in eggs. Method: Based on the recovery and matrix effect of each drug, the volume of acetonitrile, the concentration of phosphoric acid and the concentration and pH of PBS during the unified pre-treatment of screening samples were optimized to determine the unified pre-treatment method for multi-residues of veterinary drugs in egg samples. The accuracy and precision of the multi-residue assay of veterinary drugs under unified pre-treatment conditions were evaluated, and the optimised pre-treatment method was compared with the kit pre-treatment method. Result: The optimized pre-treatment combination conditions were: 6 mL of acetonitrile, 100 μL of 15% phosphoric acid were used for drug extraction, and 0.05 mol·L-1 PBS at pH 7.0 was used as the sample diluent solution, the recoveries of the drug residues in eggs ranged from 82.18% to 114.79% with intra-batch relative standard deviation (RSD) lower than 10% and inter-batch RSD lower than 15%. Compared with the pre-treatment method of the kits, there was no significant difference in the final assay results (P＞0.05). Conclusion: The unified multi-residues pre-treatment method established in this study has the advantages of simple operation, short detection time and high reliability of results, which provides a reliable pre-treatment method for the rapid detection of multiple veterinary drug residues in eggs.Keywords: egg; multi-residue veterinary drugs; pre-treatment我国禽产品产量连续20年位居世界第一，蛋品生产量占全世界总量的43%，但出口量却远远低于作者简介：伍宏凯（1980—），男，广东湛江人，本科，兽医师。

动物源性食品中兽药多残留快速检测技术及精确质量数据库的建立一、本文概述随着畜牧业的快速发展，兽药在动物源性食品生产中的应用日益广泛，兽药残留问题逐渐凸显，对食品安全和人体健康构成了潜在威胁。

建立一种快速、准确的兽药多残留检测技术，并构建精确的质量数据库，对于保障动物源性食品的安全性和提升兽药监管水平具有重要意义。

本文旨在探讨动物源性食品中兽药多残留快速检测技术的研究进展，并阐述精确质量数据库的建立方法与应用价值。

文章首先综述了目前国内外兽药多残留检测技术的现状和发展趋势，包括免疫分析法、色谱法、质谱法等多种检测方法的优缺点和适用范围。

在此基础上，文章重点介绍了几种新型的快速检测技术，如基于纳米材料的检测技术、生物传感器技术等，这些技术具有快速、灵敏、高通量等优点，为兽药多残留检测提供了新的思路和方法。

本文还详细阐述了精确质量数据库的建立过程，包括数据采集、数据处理、数据存储和数据挖掘等方面。

通过整合各种兽药残留数据，建立全面、准确、可靠的兽药残留数据库，为兽药监管和食品安全风险评估提供有力支持。

文章对兽药多残留快速检测技术和精确质量数据库的建立进行了展望，认为未来应加强技术创新和跨学科合作，推动兽药残留检测技术的进一步发展和完善，为保障动物源性食品的安全性和促进畜牧业的可持续发展做出更大贡献。

二、动物源性食品中兽药多残留问题的现状与挑战随着养殖业的快速发展，动物源性食品中兽药多残留问题逐渐凸显，成为全球性的食品安全难题。

兽药多残留不仅会对动物和人类健康产生直接危害，还会影响生态环境安全。

建立快速、准确、灵敏的兽药多残留检测技术及精确质量数据库至关重要。

目前，动物源性食品中兽药多残留问题的现状严峻。

一方面，养殖过程中为预防和治疗动物疾病，大量使用抗生素、激素等兽药，导致兽药残留问题日益严重。

另一方面，一些不法养殖者为了追求经济利益，滥用兽药，甚至使用违禁药物，进一步加剧了兽药多残留问题。

由于兽药种类繁多，不同药物之间的残留代谢规律复杂，也给兽药多残留检测带来了巨大挑战。

兽药残留分析中样品前处理方法综述张俊升*，谭梅，杨建鸣，王琼，李良（云南省兽药饲料检测所，云南昆明650021）摘要：样品前处理方法是兽药残留分析的保障，文章介绍了八种目前国内常用的前处理方法：超声波辅助提取、超临界流体萃取、固相萃取、固相微萃取、微波辅助萃取、基质固相分散、加速溶剂萃取、免疫亲和色谱。

现代兽药残留分析方法通常包括样品前处理和测定方法两部分，测定技术是核心，而样品前处理方法是保障。

样品前处理的好坏直接影响到分析的各项指标、成本和效率，占用了将近70％的分析工作量。

兽药残留分析样品的前处理包括提取与净化。

提取是将样品中的目标物溶解分离出来的操作步骤，根据兽药的性质、样品种类、实验条件，可选用的常规提取方法有振荡法、索氏抽提法等。

由于某些样品组成复杂，提取后往往还需经过净化步骤以达到待测物与干扰杂质分离，净化的基本原理主要为液-液作用、液-固作用、液-气作用及化学反应。

柱层析法是最常用的净化方法之一，层析柱填料一般为弗罗里硅土、氧化铝以及活性炭。

经典的样品前处理方法不仅操作繁琐、费时，提取与净化效率低，容易引入误差，且需要使用大量有毒溶剂，另外由于对被测目标物质的最低检出限要求越来越低，其目标物质的稳定性也在随时间发生变化，这给分析测试带来了一定困难，因此亟需发展简单、快速、有效的样品前处理方法。

目前，为适应多种类大批量样品的快速分析，样品前处理的手段在不断更新，并且也逐渐向仪器化、自动化方向发展。

近年来发展较快的方法主要有超声波辅助提取(Sonication-assisted Extraction,SAE)法、超临界流体萃取(Supercritical Fluid Extraction,SFE)法、微波辅助萃取(Microwave Aided Extraction,MAE、固相萃取(Solid Phase Extraction,SPE)、固相微萃取(Sol-id-Phase M icroextraction,SPM E)等方法。

1.水样、土样、植物样品、奶样及肉类样品的常规农药残留前处理技术包括那些步骤，指出不同样品前处理技术的差异性？答：水样、土样、植物样品、奶样及肉类样品的常规农药残留前处理技术包括以下步骤：(1)提取技术：水样可直接用溶剂提取或用吸附剂吸附后提取。

土样、作物及动物组织的提取方法：振荡浸取法：将样品切碎后加入适当溶剂，在振荡器中通过一定时间的振荡浸泡，而将农药残留提取出来的方法；组织捣碎法：将样品放入捣碎机中，加入适当的提取剂后高速捣碎，使溶剂与细微试样反复紧密接触的提取方法；消化法：主要用于动物组织样品，用消化试剂将样品组织破坏分解后，再用溶剂提取检测成份的方法；索式提取器提取：将样品放入提取器中，用适当的提取溶剂连续提取检测成分的方法；超声波提取法：快速、且操作简便；提取仅需数十秒至几分钟的时间；酸消化法：高氯酸和冰醋酸混合液（1：1）；碱消化法：乙醇钾（10%氢氧化钾乙醇溶液）；消化试剂的用量为样品量的2-3倍。

酸消化的控制温度为80-90度，碱消化要求比酸消化调节严格，消化温度在65度，消化时间控制在30分钟；消化法：只适用于动物性组织样品的处理，不适合于含淀粉较多样品的残留分析。

(2)浓缩技术常用的浓缩方法：自然蒸发法；通气（空气或氮气）吹出法；仪器浓缩法。

前两种只适用于体积小、易挥发的样品。

K-D浓缩器：特点：目前最广泛使用的一种方法；省去了定溶这一步；使用比较方便。

使用中要注意的问题：提取液仅能加到K-D瓶的1/3高度，不能过高；水浴温度一般不超过80℃旋转蒸发器：使用注意事项：样品不能浓缩干；操作步骤一定要小心。

如关机时，首先关闭旋转开关，然后握住圆底烧瓶的颈，再打开真空开关。

否则容易损害仪器。

(3) 净化技术净化概念：从待测样品提取液中将农药与杂质分离开并除去杂质的步骤。

杂质：脂肪、蜡质、色素、有机酸和糖等。

净化方法：液-液分配法、柱层析法、吹蒸法、磺化法、薄层色谱法等。

施用于作物上的农药，其中一部分附着于作物上，一部分散落在土壤、大气和水等环境中，环境残存的农药中的一部分又会被植物吸收。

兽药残留的检测方法
兽药残留的检测方法包括：
1. 高效液相色谱法：将样品中的兽药残留物通过柱子分离，然后使用UV或荧光检测器检测。

2. 质谱法：使用质谱仪检测样品中的兽药残留物，可检测出更低浓度的残留物。

3. 酶联免疫吸附试验法：利用特定的抗体对兽药残留物进行检测，可以进行多重残留的检测。

4. 光谱学方法：使用紫外光谱、红外光谱、拉曼光谱等方法对样品中的兽药残留物进行检测。

5. 火焰原子吸收光谱法：对样品进行预处理后，使用火焰原子吸收光谱仪进行检测。

6. 电化学法：利用电化学传感器对兽药残留物进行检测，具有灵敏度高、实时性好等优点。