生化试剂参数..共34页文档
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CHEMISTRY ACP ALB ALP ALT AM 货号270010036008201110060180006051000503601850111018018001803601870111050018005003600930TEST ACP ALB ALP ALT AM SAMPLE VOL.20371025 DILUTION0101000 REAGENT VOL.1-STEP250300270290250 DILUTION00000 2-STEP50[N] DILUTION00000 WAVE-LENGTH-1410600410340340 WAVE-LENGTH-2450700480410700 METHOD RATE END RATE RATE END REACTION+++--FIRST-POINT-160439 LAST-POINT-1166161616 FIRST-POINT-2N/A N/A N/A N/A N/A LAST-POINT-2N/A N/A N/A N/A N/A NO LAG-TIME YES NO YES YES NO TURBIDITY NO NO NO NO NO PROZONE CHECK NO NO NO NO NO REAGENT OD L-0.5-0.5-0.5-0.5-0.5 H 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 SERUM BLANK L N/A N/A N/A N/A N/A REAGENT OD H N/A N/A N/A N/A N/A MIN-OD-0.5-0.5-0.5-0.5-0.5 MAX-OD 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 LINEARITYDYNAMIC RANGE L00000 H8060100010001180 UNIT U/L g/L U/L U/L umol/L CORRELATION FACTORA=11111 B=00000 COUNT11111 DILUTION VOLUME00000 CONDENSE VOLUME00000 MONITOR SPAN11111 AGC POINT00000 K.FACTOR1308.42628.260780上述参数仅供参考,详情请参阅试剂说明及仪器说明。
实验室常用生化试剂配方1.常用抗生素配制以及使用说明(参考链霉菌室操作手册2019版)抗生素英文名称及缩写抗性基因贮藏液浓度(mg/ml) 10025(无水乙醇配) 50 25 50 50 25(DMSO配) 100 50 3525(0.15M NaOH配) 50(DMSO配)50 50MM使用终浓度(μg/ml)链霉菌2CMYEME大肠杆菌LA或LB氨苄青霉素氯霉素潮霉素卡那霉素壮观霉素链霉素硫链丝菌素红霉素阿泊拉霉素紫霉素萘锭酮酸 TMPAmpicillin, Amp bla Chloramphenicol, Cml Hygromycin, Hyg Kanamycin, Km Spectinomycin, Spc Streptomycin, Str Thiostrepton, Thio Erythomycin, Ery Apramycin, Am Viomycin,Vio Nalidixic acid Trimethoprimcat hyg aac/aph aadA str tsr ermE aac(3)IV vph-* 10 10 2 5 10 5 100 10-- 25 25 20 25 10 - 50------ 2.5 - 550-100 25 - 25 50 25 25 20 10-30注意事项:(1) –表示无记录或不能使用,贮存液除特别说明外均用无菌水配制,配制过程请确保抗生素粉末充分溶解混匀后再分装;(2)Km 和Am有交叉抗性,同时具有这两种抗性基因时应适当提高抗生素的量,并设置阴性对照;(3)Hyg、Vio易见光分解,配制好后应用锡箔纸包好,使用过程中建议避光操作。
有些抗生素需要在低盐的环境(如DNA培养基)下筛选效率较高,如Hyg, Km, Vio(4)用无菌水配制的抗生素需在超净工作台内用0.22 μm一次性过滤器过滤除菌并分装;氯霉素、TMP、硫链丝菌素可以在超净工作台外配制分装,无需过滤除菌,但需确保配制贮存液所用溶剂(无水乙醇、DMSO)未遭受污染,建议配制氯霉素时使用新的无水乙醇,不要使用抽提质粒或总DNA时用的无水乙醇,以防止污染;DMSO,即二甲亚砜,易挥发,有剧毒;(5)长期不用的抗生素请置于-20℃保存,抗生素粉末按照使用说明一般置于4℃保存,经常使用时可以暂置于4℃保存;(6)抗生素的实际使用浓度请结合实验经验进行适当调整;(7)配制抗生素时应尽量一次性称取抗生素粉末,配制过程中建议穿工作服,戴一次性橡胶手套及口罩,及时清理称量配制抗生素时使用的台面及器具,以避免抗生素及溶剂对自身的损伤及对工作环境的污染。
在特定的温度下,一般是37度,待测物质直接或是间接或试剂中的底物发生反应,使整个液体环境的吸光度或是颜色发生变化,这个变化可能是变深或变淡,根据朗伯比尔定律,然后我们用数字光电设备去监测发生的变化,把颜色转化成电信号再转化成数字,电脑再加以计算,套入我们预先设定好的公式,这样就有结果了。
*朗伯比尔定律又称比尔定律,是光吸收的基本定律,适用于所有的电磁辐射和所有的吸光物质,包括气体、固体、液体、分子、原子和离子。
光被吸收的量正比于光程中产生光吸收的分子数目,在我们生化分析上通俗的说就是光通过颜色均匀的液体光被吸收的多少或是颜色的变化和液体中物质的浓度成线性关系。
例如AST和GLU的检测原理:L-天门冬氨酸+ α-酮戊二酸—AST—草酰乙酸+ L-谷氨酸草酰乙酸+ NADH +H+ —MDH— L-苹果酸+ NAD+ + H2ONADH在340nm有吸收峰,所以NADH的减少速度就可以反应出AST的含量葡萄糖 + H2O + O2 —葡萄糖氧化酶—H2O2 + 葡萄糖酸2 H2O2+ 4-氨基安替比林+酚—过氧化物酶—醌亚胺(红色)+ 4 H2O生成红色的醌亚胺在500nm波长就可以检测到。
一、分析方法的选择:常见的分析方法有:终点法,速率法。
1 终点法:一般分一点终点法和两点终点法,一点法其原理是经过一定反应时间后,反应达到平衡时进行的一点分析。
例如:溴甲酚绿法测定白蛋白均用该法。
对于反应快的物质选用一点终点分析法。
二点终点法,是用二点的吸光度之差进行计算。
2速率法:也叫速度法或连续监测法,多数用于酶活力的测定。
所有酶活力测定均选用速率法。
其原理是根据酶所催化反应的速率来测定酶活力的大小,实际操作时要注意反应的方向,正反应和负反应。
二、双波长测定中辅波长的选择:双波长的应用是为了消除样品中对测定有干扰的物质的影响,而实际应用中选择第二波长主要用于消除脂血、溶血、黄疸等的干扰。
例如:钼酸铵法测定无机磷,其测定波长为340nm,对于溶血样品,血红蛋白在340nm有较强吸收,其吸光度同380nm处吸光度相同,选用380nm作辅助波长,可消除溶血对测定的干扰。
试剂的配制(1) 2,4—二硝基苯肼溶液Ⅰ.在15 mL浓硫酸中,溶解3g 2,4—二硝基苯肼。
另在70 mL 95%乙醇里加20 mL水。
然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中,搅动混合均匀即成橙红色溶液。
(若有沉淀应过滤)Ⅱ.将1.2g 2,4—二硝基苯肼溶于50 mL 30%高氯酸中。
配好后储于棕色瓶中,不易变质。
I法配制的试剂2,4—二硝基苯肼浓度较大,反应时沉淀多便于观察。
Ⅱ法配制的试剂,由于高氯酸盐在水中溶解度很大,因此便于检验水溶液中的醛且较稳定,长期贮存不易变质。
(2)饱和亚硫酸氢钠水溶液先配制40 %亚硫酸氢钠水溶液。
然后在每100 mL的40 %亚硫酸氢钠水溶液中,加不含醛的无水乙醇25 mL,溶液呈透明清亮状。
由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质,所以上述溶液也可按下法配制:将研细的碳酸钠晶体(Na2CO3·10H2O)与水混合,水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜。
然后在混合物中通入二氧化硫气体,至碳酸钠近乎完全溶解,或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中,至碳酸钠全部溶解为止。
配制好后密封放置,但不可放置太久,最好是用时新配。
(3)Schiff(希弗)试剂在100 mL热水里溶解0.2 g品红盐酸盐(也有叫碱性品红或盐基品红),放置冷却后,加入2g亚硫酸氢钠和2 mL浓盐酸,再用蒸馏水稀释到200 mL。
或先配制10 mL二氧化硫的饱和水溶液,冷却后加人0.2g品红盐酸盐,溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色,用蒸馏水稀释至200 mL。
此外,也可以将0.5 g品红的盐酸盐溶于100 mL热水中,冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失,加人0.5 g活性炭,振荡过滤,再用蒸馏水稀释至500 mL。
本试剂所用的品红是para-rossaniline(或称para-fuchsin,又称假红)。
此物与另一类似物rossaniline(或称fuchsin,称洋红)不同,现以它们的盐酸盐为例,对比结构式如下:C NH2 NH2NH2CH2IH-CNH2NH2CI-++3NH2品红溶液原是桃红色,被二氧化硫饱和后变成无色的Schiff试剂,其变化过程如下:C NH2 NH2NH2C NH2NH2+3NH2CI-+H2SO4SO3H+HCI NH2NH2 CSO3H +NHNHHC2SO2HSO2H 2SO2NH2Schiff试剂应密封贮存于暗冷处,倘若受热见光或露置空气中过久,试剂中的二氧化硫易失,结果又显桃红色,遇此情况,应再通入二氧化硫,使颜色消失后使用。
附件1:生化项目试剂技术要求生化项目开放试剂(同时适配AU2700、日立008AS、日立7180,按毫升报价)附件2:综合评分明细表附件3:采购文件书装订顺序采购文件书装订顺序1、封面(公司、项目、联系人、联系方式)2、目录3、品目及报价表(格式见附件3)4、规格型号、配置及偏离表(格式见附件3)5、企业营业执照(复印件)6、组织机构代码证、税务登记证(复印件)7、法定代表人授权书(原件,格式见附件3)暨经办人授权书,法定代表人、经办人身份证(复印件)8、生产厂家授权书(投标人不是生产厂家的)9、如是医疗器械,须提供“中华人民共和国医疗器械生产企业许可证”和“中华人民共和国医疗器械经营企业许可证”(复印件)10、如是医疗器械,须提供“医疗器械产品注册证和注册登记表”(复印件)11、如有产品质量和企业管理体系认证(考核),请提供的有效证明文件的复印或扫描件,质量管理体系认证包括FDA、CE、ISO等认证(提供中文翻译复印件)12、质量检测中心或法定机构出具的产品检测报告,性能自测报告,出厂检验报告的复印或扫描件13、如有其他证书:产品在技术、节能、安全、环保和自主创新方面获得的认证证书或制造厂家和产品所获国家级荣誉称号等复印或扫描件14、产品执行标准(提供产品注册标准:YZB等资料供评审)15、产品质量及货源保证书16、售后服务承诺书,包括质量保证范围,售后服务体系、人员培训计划等,并提供相关人员证明材料,要求见评分办法“售后服务”说明;17、如有,提供进口原材料证明书或产品报关资料等18、产品说明书或与投标医疗耗材型号一致的产品彩页资料和其他有关介绍资料。
19、业绩证明文件(用户名单及联系人与联系方式,格式见附件3),并提供相应证明文件,要求见评分办法“业绩”说明。
20、能满足采购人需求的配送及维保的证明文件。
如有物流公司配送,请提供配送证明材料:配送商基本情况、配送商营业执照复印件、配送商经营许可证复印件21、如有,国家规定的其它相关资质证明文件或其它涉及特许经营许可的须提供相关证书。
附录1 生物实验室常用试剂的配制一、检验酸碱性的试剂1.酚酞试液取0.1g酚酞,溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里,装在试剂瓶内密闭保存。
酚酞试液在碱性溶液中呈红色。
2.甲基橙试液甲基橙是橙黄色粉末或晶状鳞片。
取0.1g甲基橙溶解在100mL蒸馏水里制成。
当pH值由3.1~4.4时,颜色为红至黄色。
3.甲基红试液甲基红是红紫色晶体或红色粉末。
把0.1g甲基红溶在100mL60%乙醇里制得。
当pH值由4.4~6.2时,颜色由红色至黄色。
4.麝香草酚酞(百里酚酞)试液把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在100mL 90%乙醇里制得。
当pH值由9.4~10.6时,颜色为无色至蓝色。
5.溴甲酚紫指示剂将0.1g溴甲酚溶于9.25mL的0.02mol/L氢氧化钠溶液中,加蒸馏水稀释至250mL制得。
当pH值由6.2~6.8时,颜色由淡黄色变为淡紫色,变色点在pH 6.7。
6.溴甲酚绿试液溴甲酚绿是黄色晶体或红棕色粉末。
把0.1g溴甲酚绿溶于100mL 20%乙醇中,或把0.1g溴甲酚绿与2.9mL 0.05mol/L 氢氧化钠溶液研匀,用水稀释到100mL制得。
当pH值由3.8~5.4时,颜色由黄至蓝色。
7.甲基紫(结晶紫)试液把0.1g深绿紫色的甲基紫溶解在100mL的水里制得。
当pH值由0.13~0.5时,颜色由黄至绿;pH值由1.0~1.5时,颜色由绿至蓝;pH值由2.0~3.0时,颜色由蓝至紫。
8.甲酚红指示剂把0.1g深红色的甲酚红溶解于100mL 50%的乙醇中,或将0.1g甲酚红与5.3mL 0.05mol/L氢氧化钠研匀,用水稀释到100mL制得。
当pH值由0.2~1.8时颜色由红至黄;pH值由7.0~8.8时,颜色由亮黄至紫红。
甲酚红指示剂遇少量二氧化碳,能快速变色,反应灵敏,效果明显。
9.刚果红试纸(红色)把 0.5g峋果红溶解于1L水中,加入5滴乙酸,滤纸用温热溶解液浸透后,取出晾干。
生化试剂质量衡量标准
1、实验纯(LR,黄标签):主成分含量高,纯度较差,杂质含量不做选择,只适用于一般化学实验和合成制备。
2、当量试剂(3N、4N、5N):主成分含量分别为99.9%、99.99%、99.999%以上。
3、指示剂和染色剂(ID或SR,紫标签):要求有特有的灵敏度。
4、光谱纯:主要成分纯度为99.99%
5、质量级别:优级纯(GR,绿标签):主成分含量很高、纯度很高,适用于分析和研究工作,有的可作为基准物质。
6、分析纯(AR,红标签):主成分含量很高、纯度较高,干扰杂质很低,适用于工业分析及化学实验。
相当于国外的ACS级(美国化学协会标准)
7、级(ZD):按照用户要求的质量控制指标,为特定用户订做的生物试剂。
8、化学纯(CP,蓝标签):主成分含量高、纯度较高,存在干扰杂质,适用于化学实验和合成制备。
9、电子纯(MOS):适用于电子产品生产中,电性杂质含量极低。
实验室常用生化试剂配方实验室中常用的生化试剂有很多种,下面是一些常见的生化试剂及其配方的介绍:1.磷酸缓冲液(PBS)PBS是一种常用的缓冲液,用于洗涤细胞和组织,以及稀释试剂等。
它的配方通常包括:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.44g-KH2PO4:0.24g将以上试剂溶解于1L去离子水中,调节pH至7.42. Tris缓冲液Tris缓冲液用于调节溶液的pH值,常用于分子生物学实验。
其配方为:- Tris-HCl:12.11 g将Tris-HCl溶解于1L去离子水中,调节pH至所需值。
3.氢氧化钠(NaOH)溶液NaOH是一种常用的碱试剂,可用于调节pH、溶解蛋白质等。
其常见配方为:-NaOH:4g将NaOH溶解于1L去离子水中。
4.氯仿/异丙醇提取液氯仿/异丙醇提取液常用于分离DNA或RNA。
其配方为:-氯仿:24mL-异丙醇:25mL-TE缓冲液:1mL将以上试剂混合,并轻轻摇匀。
5.碳酸氢钠(NaHCO3)缓冲液NaHCO3是一种常用的缓冲液,可用于调节溶液的pH值。
其配方为:-NaHCO3:8.4g将NaHCO3溶解于1L去离子水中,调节pH至所需值。
6.绿色荧光蛋白(GFP)提取液GFP提取液用于提取含有GFP标记的蛋白质。
其配方为:- Tris-HCl(pH 7.5):50 mM-NaCl:150mM-EDTA:1mM- Triton X-100:1%将以上试剂混合,并用PBS稀释至所需浓度。
7.锌离子(Zn2+)溶液锌离子溶液可用于一些酶活性实验。
其配方为:-ZnSO4·7H2O:2.19g将ZnSO4·7H2O溶解于1L去离子水中。
8.溶血液溶血液常用于红细胞计数等实验。
其配方为:-生理盐水:9mL-甲苯:1mL将以上试剂混合,即可得到溶血液。
这只是一小部分生化试剂配方的介绍,实验室中常用的试剂配方非常多,根据具体实验的需要,需要选择合适的试剂及其配方。
我公司进口科研生化试剂的质量标准公布在科研事业中,劣质的生化试剂使得实验可靠性得不到好的保证。
上海沪鼎生物不断努力加快生物科研试剂的创新和发展,全面提升科研试剂的质量,专业的销售和技术服务团队,迎得了国内外厂商的一致好评。
我公司进口科研生化试剂的质量标准公布: 1.当量试剂:主成分含量分别为99.9%、99.99%、99.999%以上。
2.指定级:按照用户要求的质量控制指标,为特定用户订做的化学试剂。
化学品的含量测定都是以此为基准,通过测定来确定其含量。
3.优级纯:主成分含量很高、纯度很高,合用于精确分析和研究工作,有的可作为基准物质。
4.分析纯:主成分含量很高、纯度较高,干扰杂质很低,合用于产业分析及化学实验。
因此,这些化学试剂的质量就显得十分重要。
5.化学纯:主成分含量高、纯度较高,存在干扰杂质,合用于化学实验和合成制备。
分类标准:化学品纯度、级别的划分,由于国家标准的起草已经远远不能满足科研生产的需要,而且,严重阻碍了我国化学试剂的生产。
仅靠现有的几个国家标准和行业标准,很难将数量如此庞大的化学试剂给出一个质量规范来;我们也不可能将所有的化学品给出一个国家质量标准来,甚至,一提到试剂,人们首先想到的是分析纯还是化学纯,甚至,人们在购买时,不论用途如何,非分析纯不买。
这也是目前许多本来没有国家标准的品种,却莫名其妙、毫无根据地赋予产品一个红色AR标签的造假原因。
更是由于在实际使用中,许多情况并不需要真正的分析纯,不法厂商才故意将工业品加贴分析纯标签,混淆纯度级别,虽然大多数情况不会出现质量事故,但却严重干扰了真正的标准物质分析纯的生产和使用。
化学试剂分为: 1.标准试剂:按照国际规范和技术要求,以明确作为分。
生物化学实验常用试剂的配制方法使用Ctrl+F 组合键可以快速的查找所需的配方。
1、0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L ;配制量2L配置方法1.准确称取氢氧化钠40g。
2.用去离子水溶解并稀释至2L。
2、0.5mol/L盐酸溶液组份浓度0.5mol/L ;配制量2L配置方法1.准确量取盐酸83.4mL。
2.用去离子水稀释至2L。
3、含0.5mol/L氯化钠的0.5mol/L氢氧化钠溶液组份浓度0.5mol/L氯化钠、0.5mol/L氢氧化钠;配制量1L配置方法1.准确量取氯化钠29.3g。
2.准确量取氢氧化钠20g。
3.用去离子水稀释至1L。
注意:此溶液供回收纤维素时使用。
4、0.2%葡萄糖标准溶液组份浓度0.2%;配制量1L配置方法1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中,在70℃干燥2小时。
2.干燥器中冷却至室温,重复干燥,冷却至恒重。
3.准确称取葡萄糖2.000g。
4.用去离子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。
5、250μg/mL牛血清白蛋白标准液组份浓度250μg/mL ;配制量2L配置方法1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。
2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。
3.4℃保存。
6、Folin试剂甲配置方法1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中,加入50g无水碳酸钠,溶解,待用。
2.称取0.5g 酒石酸钾钠,溶于80mL去离子水中,加入0.25g硫酸铜?5水,溶解。
3.将1:2:去离子水按20:4:1的比例混合即可。
4. 4℃保存,可用一周。
7、Folin试剂乙配置方法:1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠?2水25.0359g,钼酸钠?2水6.2526g,去离子水175mL,85%磷酸12.5mL,浓盐酸25mL,充分混合。
2.回流10小时,再加硫酸锂37.5g,去离子水12.5mL及数滴溴。
3.然后开口沸腾15min,以驱除过量的溴,冷却后定容到250mL。
实验室常用技术参数资料一、核酸及蛋白质常用数据1.核苷三磷酸的物理常数2.常用核酸的长度与分子量3.常用核酸蛋白换算数据(1)重量换算1μg=10-6g1pg=10-12g1ng=10-9g 1fg=10-15g(2)分光光度换算:1A260双链DNA=50μg/ml1A260单链DNA=30μg/ml1A260单链RNA=40μg/ml(3)DNA摩尔换算:1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端1μg pBR322 DNA=0.36pmol1pmol 1000bp DNA=0.66μg1pmol pBR322=2.8μg1kb双链DNA(钠盐)=6.6×105道尔顿1kb单链DNA(钠盐)=3.3×105道尔顿1kb单链RNA(钠盐)=3.4×105道尔顿(4)蛋白摩尔换算:100pmol分子量100,000蛋白质=10μg100pmol分子量50,000蛋白质=5μg100pmol分子量10,000蛋白质=1μg氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿(5)蛋白质/DNA换算:1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质10,000MW蛋白质=270bp DNA30,000MW蛋白质=810bp DNA50,000MW蛋白质=1.35kb100,000MW蛋白质=2.7kb DNA4.常用蛋白质分子量标准参照物5.常用DNA分子量标准参照物续上表二、常用缓冲液1.分子克隆常用缓冲液2.磷酸缓冲液(1)25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※(2)25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制※※:用蒸馏水将混合的两种1mol/L贮存液稀释至1000ml,根据Henderson-Hasselbalch方程计算其pH 值:pH=pK’+1g([质子受体]/[质子供体])在此,pK’=6.86(25℃)。
3.电泳缓冲液测序凝胶加样缓冲液98%去离子甲酰胺10mol/L EDTA(pH8.0)0.025%二甲苯青FF0.025%溴酚蓝甲酰胺:许多批号的试剂级甲酰胺,其纯度符合使用要求,无须再进行处理。
实验室常用技术参数资料一、核酸及蛋白质常用数据1.核苷三磷酸的物理常数2.常用核酸的长度与分子量3.常用核酸蛋白换算数据(1)重量换算1μg=10-6g1pg=10-12g1ng=10-9g 1fg=10-15g(2)分光光度换算:1A260双链DNA=50μg/ml1A260单链DNA=30μg/ml1A260单链RNA=40μg/ml(3)DNA摩尔换算:1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端1μg pBR322 DNA=0.36pmol1pmol 1000bp DNA=0.66μg1pmol pBR322=2.8μg1kb双链DNA(钠盐)=6.6×105道尔顿1kb单链DNA(钠盐)=3.3×105道尔顿1kb单链RNA(钠盐)=3.4×105道尔顿(4)蛋白摩尔换算:100pmol分子量100,000蛋白质=10μg100pmol分子量50,000蛋白质=5μg100pmol分子量10,000蛋白质=1μg氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿(5)蛋白质/DNA换算:1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质10,000MW蛋白质=270bp DNA30,000MW蛋白质=810bp DNA50,000MW蛋白质=1.35kb100,000MW蛋白质=2.7kb DNA4.常用蛋白质分子量标准参照物5.常用DNA分子量标准参照物续上表二、常用缓冲液1.分子克隆常用缓冲液2.磷酸缓冲液(1)25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※(2)25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制※※:用蒸馏水将混合的两种1mol/L贮存液稀释至1000ml,根据Henderson-Hasselbalch方程计算其pH 值:pH=pK’+1g([质子受体]/[质子供体])在此,pK’=6.86(25℃)。
3.电泳缓冲液测序凝胶加样缓冲液98%去离子甲酰胺10mol/L EDTA(pH8.0)0.025%二甲苯青FF0.025%溴酚蓝甲酰胺:许多批号的试剂级甲酰胺,其纯度符合使用要求,无须再进行处理。