生化试剂参数

生化试剂各机型参数确定
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目录
➢生化试剂主要参数及意义 ➢生化试剂其他参数及意义 ➢各机型生化分析仪概括介绍 ➢各机型参数特点
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生化试剂主要参数及意义
生
化
试
剂
说
明
书
中
各
参
数
（
例
：
脂
肪
酶
）
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生化试剂主要参数及意义
✓项目名称 ✓方法类型 ✓反应方向 ✓测定波长 ✓测定温度 ✓样本体积 ✓试剂量 ✓分析时间 ✓校正方法
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生化试剂主要参数及意义
ü校正方法（Calibration Type）：
可采用标准液（校准液）定标方式或理论K值方式获取标准曲线。
u线性定标（ Linear/AB）：
两点定标，标准曲线呈直线。
u非线性定标（Spline/4AB/polygonal）：
多点定标，标准曲线近似于直线。
u理论K值 （Factor/MB）：
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生化试剂其他参数及意义
ü试剂吸光度上限、下限/试剂吸光度界限(OD Limt) 常用规定波长及光径下的吸光度值表示。终点法常在0点读数，连续监 测法常以反应监测起始点来判读该吸光度值。 可用于判断试剂质量。检测试剂空白时，若超过此参数的限值，则提 示试剂可能失效。
ü底物耗尽限额(substrate exhaust limit) 连续监测法或两点终点法时设置。 根据吸光度上升或下降设定MAX-OD/MIN-OD，吸光度超过设定界限时， 代表样品酶活非常高，底物消耗太快，所测得结果不能代表真实酶活 力。
检测时吸光度值为主波长的吸光度减去副波长的吸光度。
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生化试剂主要参数及意义
✓分析时间： 孵育时间（incubate time） 一点终点法的孵育时间是指样本与试剂开始到反应终点的时间；两点 终点法是指第一个吸光度反应点开始到第二个吸光度点为止时间。一 般为5min。 延迟时间（delay time） 加入第二反应试剂后到第一个吸光度监测点开始的时间。即样本与反 应试剂（第二试剂）混匀开始至第一个吸光度选择点之间的时间。单 试剂一般设置为30s，双底物反应或酶类反应一般设置为1-3min。 连续监测时间（ continuous monitoring time） 在延迟时间后的零级反应开始，监测至少4个点（3个吸光度变化值）， 一般为1-2min。
ü测定温度 30℃、37℃、25℃
ü样本体积（sample volum） 一般为2-35μl ，以0.1μl步进。
ü试剂量（regengt volum） 一般为20-300μl ，以1μl步进。
不同机型生化分析仪的样本量及试剂量限制不同，样本与试剂可根据比例进行增大
或减少。
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生化试剂主要参数及意义
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生化试剂主要参数及意义
一级动力学法：（两点速率法）
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生化试剂主要参数及意义
零级动力学法：（连续监测法，用于酶活性监测）
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生化试剂主要参数及意义
ü反应方向(response direction) u正向反应（UP/INC/+）：吸光度增加。 u负向反应（DOWN/DEC/-）：吸光度下降。
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生化试剂主要参数及意义
ü项目名称(test name)： 常以项目的英文缩写来设置。 ü方法类型(assay/Method )（适用于仪器的方法）： 方法类型主要分为：终点法和动力学法 u终点法 u一点终点法：样本与试剂混匀一定时间后读取反应终点吸光度，如血糖氧化 酶法、总蛋白双缩脲法、白蛋白溴甲酚绿法等。 u两点终点法：（又称固定时间法）样本与试剂混匀一定时间后先读取吸光度 A1，延迟一定时间后读取吸光度A2，计算吸光度差值与标准比较求得结果。 如肌酐苦味酸法等。可消除内源性物质干扰。
✓测定波长（wavelength）： 不同生化分析仪具备不同的波长。可选择单波长或双波长。
主波长（main wavelength/primary wavelength ） 根据待测物质在特定波长下具有最大吸收峰来选择主波长。 副波长（次波长sub wavelength/second wavelength ） 可不选择设定。副波长可消除样本溶血，血清浑浊的干扰影响，副波 长与主波长越接近越好。
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生化试剂主要参数及意义
动力学法
一级动力学法：（两点速率法）样本与试剂反应不断消耗反应物，反应速度 不断减小，吸光度变化不断减小，在特定时间段内进行监测，该时间段内吸 光度升高或降低与样本浓度成正比，如同型半胱氨酸、总胆汁酸等。
零级动力学法：（连续监测法，用于酶活性监测）样本与试剂反应，反应物 可匀速生成某个产物，如NADH，在特定波长下吸光度均匀的增大或减小，增 大或减小的速度与样本浓度呈正比。如碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等。
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生化试剂其他参数及意义
ü 试剂吸光度范围(Linearity） 线性度不能超过设定界限，超限时说明吸光度的变化量之间已经不成 线性或说明底物不足，检测结果会变低。 ü试剂线性范围（Dynamic Range/Technical Limit） 与试剂/样本比值有关，超出范围的样本应增加样本量重测或样本稀释 后重测。
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生化试剂其他参数及意义
ü前区检查限(Prozone Check Limt) 主要用于免疫比浊法项目，可根据项目要求选YES或NO，比较终点法后 两个读数点的差别，如果后一点比前一点的吸光度低，表示已经有抗 原过剩，样本应稀释后重测
多用于连续监测法测定酶活时，无需定标曲线，根据摩尔消光系数计
算得到结Hale Waihona Puke Baidu。
106× V
F= —————— ɛ×v×L
V：反应体系总体积（ml）；v：样本体积（ml）
ɛ：摩尔消光系数（cm2/mol） L：比色杯光径（cm）；106：将mol换算为μmol
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生化试剂其他参数及意义
ü试剂吸光度上限、下限/试剂吸光度界限(OD Limt) ü底物耗尽限额(substrate exhaust limit) ü试剂吸光度线性范围(Linearity） ü 试剂线性范围（Technical Limit） ü前区检查限(Prozone Check Limt) ü方程式（Fomular） ü小数位（Decimal Places） ü双份界限（Duplicate Limit） ü敏感性界限(Sensitivity Limit) ü第一标准吸光度界限(S1 Abs.limt) ü反应过程吸光度界限(Absorbance Limit)