生化试剂参数..

生化试剂主要参数及意义
反应方向(response direction)
正向反应（UP/INC/+）：吸光度增加。
负向反应（DOWN/DEC/-）：吸光度下降。
测定温度 30℃、37℃、25℃ 样本体积（sample volum） 一般为2-35μl ，以0.1μ l步进。 试剂量（regengt volum） 一般为20-300μ l ，以1μ l步进。 不同机型生化分析仪的样本量及试剂量限制不同，样本与试剂可根据比例进行增 大或减少。
零级动力学法：（连续监测法，用于酶活性监测）样本与试剂反应，反应物
可匀速生成某个产物，如NADH，在特定波长下吸光度均匀的增大或减小，增 大或减小的速度与样本浓度呈正比。如碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等。
生化试剂主要参数及意义
一级动力学法：（两点速率法）
生化试剂主要参数及意义
零级动力学法：（连续监测法，用于酶活性监测）
小数位（Decimal Places） 主要根据项目参考范围的小数位进行设定，一般0-2位。
生化试剂其他参数及意义
双份界限（Duplicate Limit） 也称离散性，是同一个标准液两次测定吸光度的差值，表示试剂和仪 器的重复性,此值越小表示试剂和仪器的精密度越高 敏感性界限(Sensitivity Limit) 可以检测的最低吸光度值，也就是检测最低浓度的可靠性 第一标准吸光度界限(S1 Abs.limt) 通常指零浓度标准品的吸光度界限，在终点法和速率法中计算方式不 同
淡蓝色字体标注参数设定时一般为机器默认。
各机型生化分析仪概括介绍
AU400 AU2700
AU640
AU480
各机型生化分析仪概括介绍
试剂位 R1/R2 项目 ( 双) 速度 无 ISE 样本 (ul) R1 (ul) R2 (ul) 反应液 (ul)
机型
AU
系 列
AU400 AU600 AU640 AU2700 AU5600
日 立 系 列
各机型生化分析仪概括介绍
Beckman CX5
Beckman LX20
各机型生化分析仪概括介绍
机型 试剂位 R1/R2 项目 速度 无 ISE 样本 (ul) R1 (ul) R2 (ul) 反应液 (ul)
BeckmamHale Waihona Puke Baidu
CX4 CX5 CX7 CX9 LX20
24 24 24 24 41
各机型参数特点
• 不同机型试剂加入相应时间(分钟) HITACHI R1 R2(1.5) R3(5) R4(9)
P800 C501 OLYMPUS ABBOTT
R1 R1 R1 R1
R2(1.5) R3(5) R4(9) R2(1.5) R3(5) R2(3.3) R2(5.1)
各机型参数特点
• 不同机型读点间隔时间及最大读点数
48/48 48/48 48/48 48/48
38 48 48 48
400 800 800 1600 2640
2-50 2-50 2-50 1.6-
25-300 25-300 25-300 15-250 120-430 150-550
各机型生化分析仪概括介绍
各机型生化分析仪概括介绍
试剂位 机型 项目 （双） 速度 无 ISE 800 2400 86 32 49 36 800 360 360 200 600 86 800 1.5-35 20-270 样本 (ul) 2-35 20-270 7600D 7170S 7060 7080 7020 7150 7180 16 45/45 32/32 33/33 40 32/32 33/33 2-20 2-35 3-50 2-25 2-50 20-270 50-350 20-270 20-350 150-355 250-500 150-320 180-500 250120-300 150-380 R1 (ul) R2 (ul) 反应液 (ul) R1/R2 7600P 44
生化试剂其他参数及意义
试剂吸光度范围(Linearity） 线性度不能超过设定界限，超限时说明吸光度的变化量之间已经不成 线性或说明底物不足，检测结果会变低。
试剂线性范围（Dynamic Range/Technical Limit） 与试剂/样本比值有关，超出范围的样本应增加样本量重测或样本稀释 后重测。
生化试剂主要参数及意义
测定波长（wavelength）： 不同生化分析仪具备不同的波长。可选择单波长或双波长。
主波长（main
wavelength/primary wavelength ）
根据待测物质在特定波长下具有最大吸收峰来选择主波长。
副波长（次波长sub
wavelength/second wavelength ）
生化试剂其他参数及意义
反应过程吸光度界限(Absorbance Limit) 在动力学反应中,由于高浓度（活性）样本使底物耗尽，所测吸光度已 不可靠,使高浓度的样本测定值低很多,甚至为负值。为能正确反映测定 结果，需设置底物耗尽限(某一特定吸光度)，是在反应时间内反应没有 发生底物耗尽时所能达到的最小(反应曲线向下)或最大(反应曲线向上) 的吸光度值 ，该吸光度即为吸光度界限。可用于确保高浓度（活性） 样本结果的准确性。
次波长
Sub) Sub) Wavelength sec Secondary Wavelength Wavelenght Secondary
不同机型所具波长数目不同，一般波长分布为 从紫外线到红外线 340-800nm。参数设定时可选择与项目要求相近的波长。
各机型参数特点
不同机型反应时间：仪器的一个分析周期中，试剂 和样本混合最后一点测定读数时间 常见仪器可以选择的时间 COBAS P800 :1~10、15、22分钟 C501: 3~10分钟 HITACHI ：3、5、8、10、15、22分钟 OLYMPUS固定时间： 8.3分钟 ABBOTT固定时间：9.6 分钟 BECKMAN可达时间：975秒
两点终点法：（又称固定时间法）样本与试剂混匀一定时间后先读取吸光度
A1，延迟一定时间后读取吸光度A2，计算吸光度差值与标准比较求得结果。 如肌酐苦味酸法等。可消除内源性物质干扰。
生化试剂主要参数及意义
动力学法
一级动力学法：（两点速率法）样本与试剂反应不断消耗反应物，反应速度
不断减小，吸光度变化不断减小，在特定时间段内进行监测，该时间段内吸 光度升高或降低与样本浓度成正比，如同型半胱氨酸、总胆汁酸等。
生化试剂主要参数及意义
校正方法（Calibration Type）： 可采用标准液（校准液）定标方式或理论K值方式获取标准曲线。
线性定标（
Linear/AB）：
两点定标，标准曲线呈直线。
非线性定标（Spline/4AB/polygonal）：
多点定标，标准曲线近似于直线。
理论K值
（Factor/MB）：
24 29 33 33 70
225 600 900 900 800
3-25 3-69 3-25 3-25 3-25 200-327/6-75 225-325
系 列
各机型参数特点
不同机型分析方法
表示方法 常用选择项
COBAS Asaay Rate A/2Pont rate/1 Ponit/2 Point end HITACHI Assay code Rate A/2Pont rate/1 Ponit/2 Point end OLYMPUS Method RATE/FIXED/END BECKMAN Reaction type RATE1/2/END1/2
可不选择设定。副波长可消除样本溶血，血清浑浊的干扰影响，副波 长与主波长越接近越好。
检测时吸光度值为主波长的吸光度减去副波长的吸光度。
生化试剂主要参数及意义
分析时间：
孵育时间（incubate
time）
一点终点法的孵育时间是指样本与试剂开始到反应终点的时间；两点 终点法是指第一个吸光度反应点开始到第二个吸光度点为止时间。一 般为5min。
ABBOTT Reaction defintion Rate /Flex Rate/End
各机型参数特点
不同机型反应方向
表示方法 可选择项
COBAS INC/DEC HITACHI INC/DEC OLYMPUS Reaction Slope BECKMAN Reaction Direction
INC/DEC INC/DEC +/Positive/Negative
生化试剂其他参数及意义
试剂吸光度上限、下限/试剂吸光度界限(OD Limt) 常用规定波长及光径下的吸光度值表示。终点法常在0点读数，连续监 测法常以反应监测起始点来判读该吸光度值。 可用于判断试剂质量。检测试剂空白时，若超过此参数的限值，则提 示试剂可能失效。 底物耗尽限额(substrate exhaust limit) 连续监测法或两点终点法时设置。 根据吸光度上升或下降设定MAX-OD/MIN-OD，吸光度超过设定界限 时，代表样品酶活非常高，底物消耗太快，所测得结果不能代表真实 酶活力。
多用于连续监测法测定酶活时，无需定标曲线，根据摩尔消光系数计 算得到结果。 106× V V：反应体系总体积（ml）；v：样本体积（ml） F= —————— ɛ：摩尔消光系数（cm2/mol） L：比色杯光径（cm）；106：将mol换算为μmol ɛ×v×L
生化试剂其他参数及意义
试剂吸光度上限、下限/试剂吸光度界限(OD Limt) 底物耗尽限额(substrate exhaust limit) 试剂吸光度线性范围(Linearity） 试剂线性范围（Technical Limit） 前区检查限(Prozone Check Limt) 方程式（Fomular） 小数位（Decimal Places） 双份界限（Duplicate Limit） 敏感性界限(Sensitivity Limit) 第一标准吸光度界限(S1 Abs.limt) 反应过程吸光度界限(Absorbance Limit)
生化试剂各机型参数确定
目录
生化试剂主要参数及意义 生化试剂其他参数及意义
各机型生化分析仪概括介绍
各机型参数特点
生化试剂主要参数及意义
生 化 试 剂 说 明 书 中 各 参 数 （ 例 ： 脂 肪 酶 ）
生化试剂主要参数及意义
项目名称 方法类型 反应方向 测定波长 测定温度 样本体积 试剂量 分析时间 校正方法
生化试剂其他参数及意义
前区检查限(Prozone Check Limt) 主要用于免疫比浊法项目，可根据项目要求选YES或NO，比较终点法 后两个读数点的差别，如果后一点比前一点的吸光度低，表示已经有 抗原过剩，样本应稀释后重测 方程式（Fomular） Y=aX+b a为截距，b为斜率。用于校正检测结果，一般a为1.000，b为0.000，
读点间隔(秒) P800 18 C501 8 HITACHI 18 OLYMPUS 18 ABBOTT 17
BECKMAN 非连续性
最大读点数 34 70 35/68 27/14 33
ABBOTT
Reaction Mode
Up/Down
各机型参数特点
不同机型测定波长
主波长
COBAS HITACHI OLYMPUS BECKMAN ABBOTT Wave(Main/ Wave(Main/ Wavelength pri Primary Wavelength Wavelength Primary
延迟时间（delay
time）
加入第二反应试剂后到第一个吸光度监测点开始的时间。即样本与反 应试剂（第二试剂）混匀开始至第一个吸光度选择点之间的时间。单 试剂一般设置为30s，双底物反应或酶类反应一般设置为1-3min。
连续监测时间（
continuous monitoring time）
在延迟时间后的零级反应开始，监测至少4个点（3个吸光度变化值）， 一般为1-2min。
生化试剂主要参数及意义
项目名称(test name)： 常以项目的英文缩写来设置。 方法类型(assay/Method )（适用于仪器的方法）： 方法类型主要分为：终点法和动力学法
终点法 一点终点法：样本与试剂混匀一定时间后读取反应终点吸光度，如血糖氧化
酶法、总蛋白双缩脲法、白蛋白溴甲酚绿法等。