大肠菌群测定原始记录
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大肠菌群、沙门氏菌GB/T23780检测原始记录1.样品名称:样品编号:洁净室编号:温度: ℃ 湿度: %2.检测标准:GB/T 23780-2009附录A A.23.检测仪器:恒温水浴锅KJ-E-WSW-025-18恒温培养箱□KJ-E-WSW-001-17 □KJ-E-WSW-002-17 □ KJ-E-WSW-044-18□KJ-E-WSW-023-17 □KJ-E-WSW-041-18 □ KJ-E-WSW-048-19□KJ-E-WSW-101-20□KJ-E-WSW-102-204.培养基:LST肉汤BPW肉汤TTB增菌液SC增菌液BS琼脂沙门显色琼脂XLD琼脂培养基5.检测项目及步骤:采样方法:□涂抹法将经过灭菌的方框(框内面积为50cm2)放在待测面上,用经过灭菌的镊子取无菌医用棉拭子,蘸上无菌生理盐水擦拭方框中间部分后,将棉球投人盛有50mL无菌生理盐水的三角瓶中送检。
贴纸法将无菌规格纸(5X5cm2,纸质要薄而软)用无菌生理盐水泡湿后,用经过灭菌的镊子取两张分别贴合于待测面后,取下放人盛有50mL无菌生理盐水的三角瓶中送检。
大肠菌群:检测步骤:采样生理盐水即为待测原液,选取2个~3个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种3管LST肉汤,每管1 mL至与LST 肉汤中,36 ℃培养( )。
沙门氏菌:检测步骤:取取样生理盐水25mL到225mL BPW中于36℃培养( ~ );移取1mL前增菌培养液,转种于10mL TTB内,于42℃培养,同时另取1mL,转种于10mL SC内,于36℃培养( ~ );分别用接种环取增菌培养液1环,划线接种BS琼脂平板和沙显琼脂平板。
挑取平板上5个可疑菌落进行鉴定。
检测员/日期:复核人/日期:。
养生坊大肠菌群检验原始记录表检样名称:样品编号:检验依据:大肠菌群(MPN/100ml)检验方法:每个样品,选择三个连续稀释度的样品稀释液。
1:10稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤,每管10ml;1:100和1:1000稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤,每管1ml。
将接种管置于36±1℃培养48±2h。
观察试管的产气情况:检查导管内是否有气泡产生,如所有LST肉汤管均未产气,则可报告为大肠菌群阴性。
稀释倍数第一稀释倍数1:10 第二稀释倍数1:100第三稀释倍数1:1000结果菌落数取样日期:检验时间:检验员:检样名称:样品编号:检验依据:大肠菌群(MPN/100ml)检验方法:每个样品,选择三个连续稀释度的样品稀释液。
1:10稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤,每管10ml;1:100和1:1000稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤,每管1ml。
将接种管置于36±1℃培养48±2h。
观察试管的产气情况:检查导管内是否有气泡产生,如所有LST肉汤管均未产气,则可报告为大肠菌群阴性。
稀释倍数第一稀释倍数1:10 第二稀释倍数1:100第三稀释倍数1:1000结果菌落数取样日期:检验时间:检验员:检样名称:样品编号:检验依据:大肠菌群(MPN/100ml)检验方法:每个样品,选择三个连续稀释度的样品稀释液。
1:10稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤,每管10ml;1:100和1:1000稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤,每管1ml。
将接种管置于36±1℃培养48±2h。
观察试管的产气情况:检查导管内是否有气泡产生,如所有LST肉汤管均未产气,则可报告为大肠菌群阴性。
稀释倍数第一稀释倍数1:10 第二稀释倍数1:100第三稀释倍数1:1000结果菌落数取样日期:检验时间:检验员:。
微生物检验原始记录(大肠菌群)检验原始记录编号:报告类别:微生物共页项目:大肠菌群coliforms 检验地点:样品名称:样品编号:样品状态:符合检验要求;其他境条件:实验依据及步骤GB4789.3-2016样品稀释固体和半固体样品:称取25g样品置盛有225ml生理盐水或磷酸盐缓冲液的无菌均质容器内均质,或放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中拍击式均质器拍打,制成为1:10样品匀液。
依次进行10倍递增稀释。
液体样品:以无菌吸管吸取25ml样品置盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中混匀,为1:10样品匀液。
样品匀液的ph应在6.5-7.5之间,必要时分别用1mol/lNaOH或1mol/lHcL调节。
取1mL1∶10稀释匀液沿管壁缓缓注入9ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用一支无菌吸管反复吹打,使其混合均匀,制成1:100样品匀液。
按上述操作顺序做10倍递增稀释液,每稀释一次,换用一支1mL灭菌吸量管。
从样品匀液制备到样品接种完毕,全过程不得超过15min。
初发酵试验(9管法)每个样品,选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液(液体样品可以选择原液),每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤(大肠菌群测定:如果超过1ml,则用双料LST肉汤)36℃±1℃培养24h±2h,观察倒管内是否有气泡产生。
产气者进行复发酵试验,未产气则继续培养至48±2h,产期进行复发酵试验。
未产气者为大肠菌群阴性。
复发酵试验(证实试验)用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环,移种于煌绿糖胆盐肉汤(BGLB)管中,36℃±1℃培养48h±2h,,观察产气情况。
数据分析与结果一、菌落计数根据证实为大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告大肠菌群的最可能数。
菌落总数、大肠菌群检验原始记录
产品名称:规格型号:检验报告编号:
检验依据:GB/T4789.2 GB/T4789.3 检测项目:菌落总数、大肠菌群生产批量:
所使用主要仪器:电热恒温培养箱、手提式压力灭菌锅、电热恒温干燥箱、显微镜。
一、菌落总数
取 5 份样品,分别取25g做为测试样品,加入225 mL无菌生理盐水,均质,制成1:10样品均液,用1ml 灭菌吸管吸取1:10的稀释液1ml加入9ml灭菌生理盐水的试管内,振荡摇匀做成1:100稀释液,以此法制备10倍系列递增稀释液,依据样品污染状况的估计,选取2个适宜稀释度的样品稀释液,每个稀释度各吸取1ml稀释液放入无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。
同时吸取1ml稀释液放入两个无菌平皿中做空白对照。
将凉至46℃的营养琼脂培养基注入培养皿内15~20ml混匀,待琼脂凝固后,翻转平板置36℃±1℃
二、大肠菌群
依据标准要求,选择稀释好的2个稀释度检测,培养基为结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA),置于36°C±1°C培养18-24h。
证实实验:挑选10个不同类型典型和可疑菌落,接种煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤管,36°C±1°C培养24-48h。
观察产气情况,凡BGLB肉汤管产气,即可报告大肠菌群阳性。
检验:复核:审核:检验日期:。
食品大肠菌群检验原始记录样品编号:检验开始时间:年月日样品名称:检验完成时间:年月日检测项目:大肠菌群检测依据:GB4789.3-2016(第二法)平板计数法,按菌落总数测定方法制备l00、10-1、10-2、10-3、10-4……稀释液。
选择2-3个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种2个无菌平板,每皿1ml,同时取1ml生理盐水加入两个无菌平皿内作空白对照,及时将15-20ml冷至46℃的VRBA倾注平皿,小心旋转平皿混合均匀,待琼脂凝固再加3-4mlVRBA覆盖,36±1℃培养18-24h,观察,可疑菌落分别移种BGLB肉汤管中,进行证实实验,36±1℃培养24-48h,观察,产气者记为大肠菌群阳性。
注:○+产气;+有可疑菌落;-不产气或无可疑菌落;电子天平编号:使用状况试验前:试验后:培养箱编号:使用状况试验前:试验后:检测人:校核人:审核人:食品菌落总数检验原始记录样品编号:检验开始时间:年月日样品名称:检验完成时间:年月日检测项目:菌落总数检测依据:GB4789.2-2016无菌操作称(量)取样品25g或ml加入225ml的无菌生理盐水中,均质2分钟,做成1℃10样品液。
取1℃10稀释液1ml加入到9ml生理盐水中,混匀,做成1℃100样品均液。
以上法制备10倍系列稀释样品均液。
选择2-3个适宜稀释度的样品均液,吸取1ml样品均液于无菌平皿内,每个稀释度做2个平皿。
同时,分别吸取1ml空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照,及时将15-20ml冷至46℃的平板计数培养基倾注平皿,转动平皿使其混合均计算及结果:菌落总数(CFU/g,ml):电子天平编号:使用状况试验前:试验后:培养箱编号:使用状况试验前:试验后:检测人:校核人:审核人:。
检验原始记录
共页第页
样品名称样品编号
检验环境温度℃相对湿度% 菌落总数的测定(依据GB4789.2-2010检验)
主用仪器:培养箱
检验项目检测结果
样品稀释度10 10 10
菌落数,个
两稀释液之比
空白对照
菌落总数cfu/g
培养温度36℃±1℃培养时间:48 h±2h
主检校核日期
大肠菌群的测定(依据GB4789.3-2010检验)
主用仪器:培养箱
接
种量0.1g×3
初发酵试验LST肉汤管
复发酵试验BGLB肉汤管0.01g×3
初发酵试验LST肉汤管
复发酵试验BGLB肉汤管
0.001g×3
初发酵试验LST肉汤管
复发酵试验BGLB肉汤管
查大肠菌群最可能数(MPN)检索表[MPN/ ]::
培养温度36℃±1℃培养时间:48 h±2h
备注:‘+’表示阳性;‘-’表示阴性。
主检校核日期。
微生物检验原始记录
检测项目:□大肠菌群
样品名称样品编号样品状态和特性生产单位
使用仪器设备及实验
环境生化培养箱、压力蒸汽灭
菌器
依据GB4789.3
检测项目培养基10010-110-210-310-4空白
平板计数结晶紫中性红胆盐琼脂
证实试验
选择的平板可
疑菌落数
稀释倍数
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、
煌绿乳
糖胆盐
肉汤、大肠菌落数CFU/ml(g)
检测人:
检验日期:年月日
验讫日期:年月日。