泛素连接酶Cbl对TRAIL诱导JurkatT细胞凋亡调节作用
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可溶性人TRAIL分子对Jurkat细胞的杀伤作用唐蓓;何凤田;蔡绍皙【期刊名称】《中华微生物学和免疫学杂志》【年(卷),期】2004(024)009【摘要】目的研究可溶性人TRAIL蛋白(sTRAIL)对Jurkat细胞的生长抑制效应及凋亡诱导作用. 方法通过RT-PCR扩增人TRAIL分子胞外区41~281的密码子,利用大肠杆菌DH5α表达该可溶性片段,经纯化和复性后,诱导Jurkat细胞,通过显微镜、台盼蓝排斥试验、MTT法、流式细胞仪和DNA断裂实验检测细胞增殖和细胞凋亡. 结果 sTRAIL蛋白纯度达90%以上.用0.5~10.0μg/ml的蛋白诱导Jurkat 细胞12 h以上细胞的生长和增殖即被显著抑制,并且观察到凋亡峰及DNA的片段化等凋亡的特征性变化,细胞的生长抑制率与凋亡率也呈剂量依赖和时间依赖关系. 结论利用大肠杆菌制备的sTRAIL41-281蛋白对Jurkat细胞具有明显的增殖抑制效应和凋亡诱导作用.【总页数】5页(P682-686)【作者】唐蓓;何凤田;蔡绍皙【作者单位】400044,重庆大学生物力学与组织工程教育部重点实验室;400038,重庆,第三军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室;400044,重庆大学生物力学与组织工程教育部重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.DR5在TRAIL诱导Jurkat细胞凋亡中的作用2.三氧化二砷增强TRAIL杀伤人A549细胞的作用及机制研究3.携带TRAIL的骨髓间充质干细胞联合吉西他滨对人胰腺癌细胞Panc-1的杀伤作用4.重组人可溶性TRAIL分子诱导细胞凋亡机理探讨5.重组人可溶性TRAIL分子诱导白血病细胞株凋亡的研究因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
蛋白泛素化连接酶-概述说明以及解释1.引言1.1 概述蛋白泛素化连接酶是一类重要的酶家族,它在细胞中起着关键的调控作用。
这些酶能够通过连接泛素蛋白(ubiquitin)与特定的底物蛋白发生共价结合,从而改变底物蛋白的结构、功能或寿命。
蛋白泛素化连接酶在细胞生物学领域引起了广泛的研究兴趣,并被认为是细胞调控的重要分子开关。
蛋白泛素化连接酶的三维结构非常复杂,通常由多个亚基组成。
每个亚基都能够发挥不同的功能,例如选择底物蛋白、连接泛素以及调节酶的活性等。
根据不同的功能和结构特点,可以将蛋白泛素化连接酶分为多个子家族,例如泛素连接酶E1、泛素连接酶E2和泛素连接酶E3等。
这些子家族之间相互协作,共同完成蛋白泛素化的过程。
蛋白泛素化连接酶在细胞中具有多种重要功能。
首先,它能够调控蛋白质的稳定性和降解,通过将泛素连接到底物蛋白上,促使其被泛素化体系识别并降解。
这一过程在细胞代谢、细胞周期调控以及细胞应激等生理过程中起着重要的作用。
其次,蛋白泛素化连接酶还能够参与信号转导通路的调控。
通过连接泛素到特定的信号蛋白上,蛋白泛素化连接酶能够调控信号通路的活性和稳定性,从而影响细胞的生理功能。
近年来,蛋白泛素化连接酶的研究取得了重大进展。
科学家们通过研究相关基因的功能缺陷以及酶的结构特点,揭示了蛋白泛素化连接酶在细胞调控中的机制和作用。
此外,还发展了多种蛋白泛素化连接酶的药物靶点,为开发新的药物治疗策略提供了新思路。
未来的研究将进一步深入探索蛋白泛素化连接酶的生物学功能,加深对其调控机制的理解,并努力寻找更多与其相关的疾病治疗途径。
总之,蛋白泛素化连接酶作为细胞调控中的重要分子开关,具有广泛的功能和多样的调控机制。
对其研究的深入,将为我们揭示细胞调控的奥秘,促进疾病治疗的发展。
在本文中,我们将系统概述蛋白泛素化连接酶的基本概念、分类和功能,并综述其调控机制和研究进展,以期为读者提供全面的了解和研究方向的展望。
文章结构部分的内容可以包括以下几点:1.2 文章结构本文将从以下几个方面对蛋白泛素化连接酶进行详细介绍:1.2.1 蛋白泛素化的基本概念和作用在这一部分,我们将介绍蛋白泛素化的基本概念,包括蛋白泛素化的定义、泛素与目标蛋白的结合方式以及泛素化修饰对目标蛋白功能的影响。
2011年10月第31卷第10期基础医学与临床Basic &Clinical Medicine October 2011Vol.31No.10收稿日期:2010-11-02修回日期:2011-03-16基金项目:扬州环境资源职业技术学院基金(07001)*通信作者(corresponding author ):yejilin126yejilin@126.com文章编号:1001-6325(2011)10-1120-04研究论文TRAIL 诱导Hela 细胞凋亡的线粒体信号通路叶记林1*,刘永春2,于有江1,刘延庆3(1.扬州环境资源职业技术学院医学系,江苏扬州225127;2.江苏省苏北人民医院,江苏扬州225000;3.扬州大学医学院,江苏扬州225001)摘要:目的探讨TRAIL 诱导人宫颈癌Hela 细胞凋亡的线粒体通路。
方法琼脂糖凝胶电泳判断细胞凋亡;激光共聚焦、Western blot 、荧光免疫和caspase-3活性检测测定细胞线粒体膜电位(MMP )、BCL-2蛋白、细胞色素c (Cyt c )和凋亡诱导因子(AIF )蛋白在细胞中的定位以及caspase-3活性。
结果TRAIL 能诱导Hela 细胞凋亡,有凋亡细胞特有的DNA 梯状条带。
同时,TRAIL 具有时间依赖性致MMP (P <0.05,P <0.01)减小和BCL-2蛋白含量明显下降,线粒体Cyt c 蛋白释放,AIF 蛋白向细胞质、细胞核转移,caspase-3活性增强(作用10h 后达到2.25ʃ0.20倍,P <0.05)。
结论TRAIL 诱导Hela 细胞凋亡途径之一是通过线粒体信号通路进行的。
关键词:TRAIL ;Hela 细胞;细胞凋亡;线粒体中图分类号:R 737.33文献标志码:ATRAIL induced apoptosis in Hela cells by mitochondrial signal pathwayYE Ji-lin 1*,LIU Yong-chun 2,YU You-jiang 1,LIU Yan-qing 3(1.Medical Science Department ,Yangzhou Vocational College of Environment and Resources ,Yangzhou 225127;2.Subei People's Hospitalof Jiangsu Province ,Yangzhou 225000;3.Medical Academy ,Yangzhou University ,Yangzhou 225001,China )Abstract :ObjectiveTo explore the mitochondrial pathway in the apoptosis of Hela cells induced by TRAIL.MethodsApoptotic cells were detected by DNA electrophoresis.The mitochondria membrane potential (MMP ),the expressions of BCL-2,the location of Cyt c and AIF ,the caspase-3activity were tested by confocal laser mi-croscopy ,western blot ,immunofluorescence and caspase-3activity assay.ResultsTRAIL can induce apoptosis inHela cells.DNA ladders were showed on agarose gel electrophoresis.At the same time ,TRAIL induced the de-crease of MMP (P <0.05,P <0.01)and BCL-2,the release of Cyt c ,the translocation of mitochondrial AIF to cytoplasm and nuclei ,the increase of caspase-3activity (the activity increased to 2.25ʃ0.20fold in 10h treated cells ,P <0.05)in the time-dependent manner.Conclusions TRAIL induce the apoptosis of Hela cells throughinvolves mitochondrial signal pathway.Key words :TRAIL ;hela cel1s ;apoptosis ;mitochondria肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necro-sis factor related apoptosis inducing ligand ,TRAIL )是肿瘤坏死因子配体超家族中的一个新成员。
去泛素化在NF-κB信号通路调节中的作用Edward W Harhaj1, Vishva M Dixit21Department of Microbiology and Immunology, Sylvester Comprehensive Cancer Center, The University of Miami, Miller School of Medicine, 1550 NW 10 Avenue, Miami, FL 33136, USA; 2Department of Physiological Chemistry, Genentech Inc., 1 DNA Way,South San Francisco, CA 94080, USA核因子kappa B(NF-κB)是一种非常关键的调控因子,参与多种生物功能,包括先天和适应性的免疫以及细胞的生存等。
NF-κB的激活严格受到一种慢性信号的调节,这一信号会导致持续性的炎症以及癌症。
由关键信号分子E3连接酶介导的泛素化途径对NF-κB信号通路具有重要的调控作用。
去泛素化(DUBs)可抵抗E3连接酶,因此在下调NF-κB信号通路以及维持稳态时,其有重要的作用。
通过特异的去泛素化,如A20和CYLD,可以了解NF-κB信号通路的下调途径,进而为慢性疾病以及癌症提供治疗的可能。
核因子kappa B(NF-κB)/Rel代表了一种真核转录因子家族,这一家族是基因的主要调控因子,可以控制先天和适应性的免疫反应。
NF-κ B 家族的蛋白都含有约300个氨基酸组成的RHD 结构域,这一结构域包括DNA结合区、核定位区以及二聚化区。
NF-κ B 家族成员可以形成同源或异源的二聚体,包括p65/RelA, c-Rel, RelB, p105/p50 以及p100/p52。
在细胞质中,NF-κB被抑制蛋白或IκBs抑制,所以呈现非活性状态,这些抑制蛋白可以阻止NF-κB的核定位以及与DNA的结合。
TRAIL——肿瘤治疗的有效途径赵杰;章必成【期刊名称】《临床误诊误治》【年(卷),期】2012(025)004【总页数】3页(P76-78)【关键词】肿瘤坏死因子类;衔接蛋白类,信号转导;肿瘤;治疗;研究【作者】赵杰;章必成【作者单位】430070武汉,广州军区武汉总医院肿瘤科;430070武汉,广州军区武汉总医院肿瘤科【正文语种】中文【中图分类】R730.5肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)是肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)超家族成员之一。
1995年Wiley等[1]首先克隆出TRAIL蛋白,与死亡因子配体(FasL)具有较高同源性,能通过与死亡受体(death receptor,DR)结合参与诱导凋亡的过程。
由于TRAIL能够选择性诱导肿瘤细胞凋亡,而对正常细胞无此作用,作为当前临床肿瘤治疗领域研究的热点,为抗肿瘤治疗提供了一个有效途径。
本文就TRAIL受体诱导的信号转导途径及其在肿瘤治疗方面的研究进展进行综述。
1 TRAIL的识别TRAIL是一种Ⅱ型跨膜蛋白,其胞外区C端有1个同源三聚体亚单位结构,能在体内特定蛋白酶的作用下从细胞表面水解形成可溶性TRAIL单体。
3个TRAIL可溶性单体与Cys230螯合的锌离子形成具有活性的同源三聚体,可与DR结合而发挥细胞毒作用。
TRAIL广泛表达于脾、胸腺、小肠、结肠、胎盘、卵巢、前列腺等多种组织细胞中,而在人脑、肝及睾丸等组织中无表达[2]。
TRAIL具有特异性诱导转化细胞、病毒感染细胞和肿瘤细胞发生凋亡的作用,而对正常细胞无影响。
此外,在激活的免疫细胞,如NK细胞、T细胞、NKT细胞、树突状细胞及巨噬细胞中也有TRAIL表达,这说明TRAIL参与了机体的免疫调节,具有维持宿主免疫及免疫稳态的功能。
TRAIL联合化疗药物诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的研究佟海侠;马力;金红丽;陆春伟;张继红;张锦华【期刊名称】《中国医科大学学报》【年(卷),期】2006(035)004【摘要】目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合化疗药物治疗神经母细胞瘤(NB)的作用及其可能机制.方法:不同浓度的TRAIL、化疗药物或TRAIL和化疗药物联合处理NB细胞株SMS-KCNR,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞毒作用,应用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率,透射电镜对凋亡细胞进行形态学观察.结果:KCNR细胞对TRAIL不敏感,对化疗药物相对敏感,存在剂量依赖性细胞毒效应;TRAIL与亚毒性浓度的化疗药物联用对细胞的杀伤作用显著增强;透射电镜可见到典型的细胞凋亡特征.结论:KCNR对TRAIL不敏感,但TRAIL与亚毒性浓度化疗药物联用可增强杀伤效应,这种细胞毒作用主要由凋亡介导.【总页数】3页(P348-350)【作者】佟海侠;马力;金红丽;陆春伟;张继红;张锦华【作者单位】中国医科大学附属第二医院检验科,辽宁,沈阳,110004;中国医科大学附属第二医院感染科;开原市中医院检验科;中国医科大学公共卫生学院劳动卫生学教研室;中国医科大学附属第二医院检验科,辽宁,沈阳,110004;中国医科大学附属第二医院检验科,辽宁,沈阳,110004【正文语种】中文【中图分类】R73-36【相关文献】1.IFN-γ增强TRAIL诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的研究 [J], 吕凡;施诚仁;张弛;吴燕;潘伟华2.MYCN基因表达抑制促TRAIL诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的研究 [J], 王俊;吕凡;邬文杰;王雅杰3.IFNγ、TRAIL及化疗药联合诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的研究 [J], 佟海侠;张继红;陆春伟;张锦华4.去甲基药、化疗药及TRAIL联合诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的研究 [J], 张继红;佟海侠;陆春伟;李爱敏;张锦华5.肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合低剂量顺铂诱导多药耐药人卵巢癌细胞凋亡的实验研究 [J], 张薏;王英红;潘晓琳;赵霞;李洪安;张祖娟;陈继明因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
交联抗DR5单抗YM366EC诱导的Jurkat细胞凋亡机制探讨白慧玲;杜耀武;王雪垠;李淑莲;王靖;刘广超;马远方【期刊名称】《现代免疫学》【年(卷),期】2007(27)4【摘要】为探讨抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的死亡受体5(DR5)单抗-YM366EC引起Jurkat细胞凋亡信号转导通路,阐明抗DR5抗体的抗肿瘤效应机制。
观察了交联366EC对Jurkat细胞的形态变化,细胞增殖和细胞凋亡率影响。
进一步用Western blot法检测YM366EC作用于Jurkat细胞不同时间Bcl-2、Cyt-C、Bax、Caspase 3、Caspase 9的表达变化。
结果发现DR5抗体YM366EC单独应用无凋亡作用,但抗小鼠IgG交联366EC后可致Jurkat细胞染色质边集、断裂,细胞出芽,形成凋亡小体,并可直接诱导TRAIL敏感的Jurkat细胞凋亡。
Western blot检测到随着抗体诱导时间的延长Jurkat细胞Bel-2蛋白表达减少;Cyt-C、Bax、有活性的Caspase 3和Caspase 9蛋白的表达增加。
结果表明交联抗DR5抗体YM366EC对Jurkat细胞增殖有明显的抑制作用,诱导的Jurkat细胞凋亡的分子机制涉及到Cyt-C、Bax、Caspase 3、Caspase 9。
【总页数】5页(P269-273)【关键词】交联;Jurkat细胞;YM366EC;凋亡;流式细胞术;免疫印迹【作者】白慧玲;杜耀武;王雪垠;李淑莲;王靖;刘广超;马远方【作者单位】河南大学免疫学研究所,细胞与分子免疫学重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R392.1【相关文献】1.抗人DR5功能性单克隆抗体诱导Jurkat细胞凋亡的线粒体途径的分子机制 [J], 杜耀武;柴立辉;黄红莹;白慧玲;赵粤萍;马远方2.抗人DR5单克隆功能抗体mDRA-6诱导Jurkat细胞凋亡的Caspase路径机制研究 [J], 杜耀武;刘广超;王靖;赵粤萍;李淑莲;蒋祺;蔡静;马远方3.交联抗人DR5单抗-YM366EC诱导Jurkat细胞凋亡机制研究 [J], 白慧玲;杜耀武;王雪垠;李淑莲;王靖;刘广超;马远方4.交联抗人DR5单抗诱导的Jurkat细胞凋亡的信号转导 [J], 白慧玲;杜耀武;王雪银;李淑莲;王靖;刘广超;马远方5.抗人DR5功能性抗体mDRA-6诱导人白血病Jurkat细胞凋亡的机制 [J], 杜耀武;刘广超;王靖;赵粤萍;李淑莲;陈居果;蒋祺;蔡静;马远方因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。