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SDS作用下土壤中四环素类药物的解吸性能王勇力;刘金彦;王璐【摘要】高效液相色谱法可同时测定三种四环素类抗生素:四环素(TC)、金霉素(CTC)、差向金霉素(CQC),本文利用该方法分析SDS作用下四环素在土壤中的解吸性能.采用C18色谱柱(3.9 mm×150 mm,5μm),流动相为N,N-二甲基甲酰胺:水:2 mol/L磷酸溶液=28:70:2,紫外测定波长λ=365 nm,柱温35℃.四环素、金霉素、差向金霉素保留时间分别为1.40 min、10.64 min、8.62 min.实验结果表明,加入表面活性剂SDS对土壤中单一的四环素和三种四环素类药物都有解吸作用;在表面活性剂浓度为6 cmc,作用时间为10h的条件下,三种四环素类抗生素解吸作用都达到了60％以上.【期刊名称】《能源环境保护》【年(卷),期】2019(033)001【总页数】4页(P33-36)【关键词】高效液相色谱;四环素类抗生素;解吸作用;土壤【作者】王勇力;刘金彦;王璐【作者单位】内蒙古科技大学化学与化工学院,内蒙古包头014010;内蒙古科技大学化学与化工学院,内蒙古包头014010;内蒙古科技大学化学与化工学院,内蒙古包头014010【正文语种】中文【中图分类】X53由于四环素类抗生药物具有广谱抗生活性，可用于抗革兰阳性和阴性菌感染[1,2]，并且价格便宜，经常作为饲料添加剂给禽畜进食。
通过食物链进入人体富集，对人体产生伤害，同时动物的排泄物也会对土壤造成污染，其环境行为受到广泛关注[3,4]。
近年来，有人提出表面活性剂强化土壤修复技术，即利用表面活性剂增溶洗脱土壤颗粒上的吸附态药物污染物提高生物可利用性[5,6]。
研究表明阴离子表面活性剂能够有效的解吸土壤中的抗生素。
本文发现，高效液相色谱法可以同时测试动物饲料中常见的三种四环素类抗生素，四环素、金霉素、差向金霉素。
同时研究了在阴离子表面活性剂SDS的作用下，土壤中四环素类药物的解吸性能。
DOI :10.15906/11-2975/s.20210316基金项目:贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2019]2318号);贵州家禽产品质量安全风险监测专项(GZ2020JQFX01);家禽产品质量安全监测关键技术研究与示范项目(GZ2020JQFX0101)*通讯作者[摘要]为有效快速测定饲料中斑蝥黄和β-阿朴-8'-胡萝卜素酸乙酯含量,饲料经甲醇、正己烷和乙酸乙酯混合液萃取后,在氮气保护下浓缩,用甲基叔丁基醚-乙腈溶液复溶,注入超高效液相色谱仪中进行测定。
结果表明:斑蝥黄浓度为1.25~10.0μg/mL ,β-阿朴-8'-胡萝卜素酸乙酯为2.50~20.0μg/mL 线性关系良好;斑蝥黄和β-阿朴-8'-胡萝卜素酸乙酯的检测限为0.06mg/kg ,定量限为0.20mg/kg 。
斑蝥黄5个添加水平的平均回收率为72.8%~82.8%,相对标准偏差(RSD )为0.41%~1.06%;β-阿朴-8'-胡萝卜素酸乙酯5个添加水平的平均回收率为72.0%~82.8%,RSD 为0.46%~1.41%。
说明该方法简便、快速、灵敏度高、准确度好,适用于测定饲料中斑蝥黄和β-阿朴-8'-胡萝卜素酸乙酯含量。
[关键词]超高效液相色谱法;斑蝥黄;β-阿朴-8'-胡萝卜素酸乙酯;含量;饲料[中图分类号]S816.17[文献标识码]A[文章编号]1004-3314(2021)03-0078-05斑蝥黄又称角黄素、斑蝥黄质,化学名称为β,β-胡萝卜素-4,4-二酮(汪洪涛等,2003),存在于某种蘑菇、甲壳类、鱼类、藻类、蛋、血液、肝脏等中,含量极微(凌关庭等,1989),可增加禽皮肤、脚、酮体和蛋的颜色及亮度(王慧文等,2015),应用于鸡饲料中给“三黄鸡”和蛋黄着色(付叔海和刘婷,2017)。
β-阿朴-8'-胡萝卜素酸乙酯又叫阿朴胡萝卜素酸乙酯或阿朴酯,是类胡萝卜素中一种含氧的阿朴胡萝卜素类化合物(朱基美,2012),可用于蛋黄和鸡肉皮肤着色,对家禽的皮肤、脚胫和皮下脂肪着色有明显作用(张洪丽,2016)。
同时测定饲料中乙酰甲喹、喹乙醇、喹烯酮３种药物方法的研究摘要建立高效液相色谱法（HPLC）同时测定饲料中乙酰甲喹、喹乙醇、喹烯酮3种药物含量的方法，饲料中3种药物经磷酸盐缓冲液（pH值3.0）-乙腈-甲醇（55∶25∶20）超声提取，采用Waters公司C18（4.6×250mm，5μm）色谱柱，流速1.0mL/min，进样量20μL，柱温24℃，检测波长260nm。
该色谱条件下，3种药物分离良好，在2～100μg/mL之间，线性良好（r＞0.999 6），平均添加回收率均高于80%，RSD≤10%，检出限2mg/kg。
该方法操作简便易行，准确可靠，能够满足实际样品的分析要求。
关键词饲料药物测定；乙酰甲喹；喹乙醇；喹烯酮；高效液相色谱法喹乙醇、乙酰甲喹和喹烯酮是喹噁啉类合成抑菌药物，该类药物具有抗菌效果好、促生长、价格便宜等优点，被广泛添加到饲料中用于生产养殖，但由于不正确使用，中毒事件时有发生，同时该类药物的残留对人体具有潜在致癌性和产生抗药性的可能，国际上大多数国家将其列为限用药物。
我国对饲料中喹乙醇、乙酰甲喹和喹烯酮单个检测研究较多，但对于饲料中3种药物多残留检测方法研究较少。
因此，建立一种准确、高效地同时测定饲料中3种药物多残留的检测方法十分必要。
试验采用高效液相色谱法同时测定饲料中乙酰甲喹、喹乙醇、喹烯酮3种药物，该方法的建立将为饲料产品中其他喹噁啉类药物多残留检测提供参考。
1 材料与方法1.1药品、试剂喹乙醇、乙酰甲喹、喹烯酮对照品（纯度>98%）均购自中国兽医药品监察所；乙腈、甲醇：色谱纯，美国Fisher Chemical公司；二甲基甲酰胺、三乙胺、85%磷酸均为国产分析纯。
1.2 仪器与设备Agilent 1100高效液相色谱仪（二极管阵列检测器）；十万分之一天平、pH 酸度计（赛多利斯公司）；离心机（日立公司）；超声波仪（江苏昆山市超声仪器有限公司）；超纯水器（成都康林公司）。
超高效液相色谱法检测饲料中四种硝基呋喃类药物彭莺;吴治将;殷少有【摘要】对饲料中硝基呋喃类药物呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因和呋喃西林的超高效液相色谱检测方法进行了研究.采用0.1%甲酸水-乙腈超声提取样品中的待测物,经MCX固相萃取小柱净化后用超高效液相色谱法测定,检测波长为365nm.呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因在0.1-25 mg/L均与对应峰面积呈良好线性关系.对饲料进行硝基呋喃类药物的添加回收实验,添加质量浓度为0.25 mg/kg、5 mg/kg和100 mg/kg时,回收率在79.6%-85.5%之间,变异系数在3.9%-5.2%,方法检出限为0.25 mg/kg.结果表明,该法操作简便、灵敏、准确,适用于饲料中硝基呋喃类药物含量的测定.【期刊名称】《顺德职业技术学院学报》【年(卷),期】2010(008)001【总页数】3页(P13-15)【关键词】呋喃唑酮;呋喃它酮;呋喃西林;呋喃妥因;超高效液相色谱法【作者】彭莺;吴治将;殷少有【作者单位】广州市质量监督检测研究院,广东,广州,510110;顺德职业技术学院,机电工程系,广东,佛山,528333;顺德职业技术学院,机电工程系,广东,佛山,528333【正文语种】中文【中图分类】O657.7+2呋喃西林，亮黄色结晶性粉末；无臭，味初淡，余味发苦。
日光下色渐变深黄色。
极微溶于水，微溶于乙醇，溶于碱性溶液后色泽渐变为暗棕色，饱和水溶液酸碱度为5.5～7.5，是呋喃类药物中的一种，属于抗感染常用的药物，能干扰细菌的糖代谢过程和氧化酶系统而发挥抑菌或杀菌作用，主要干扰细菌糖代谢的早期阶段，导致细菌代谢紊乱而死亡，其抗菌谱较广，对多种革兰阳性和阴性菌有抗菌作用，对绿脓杆菌抗菌力弱，对假单孢菌属及变形杆菌属有耐药性。
在体外能抑制一般的细菌，高浓度时可杀菌。
呋喃妥因，是具有广谱抗菌性质，主要用于水产中疾病预防和治疗，对葡萄球菌、肠球菌、大肠杆菌、奈瑟球菌（淋球菌等）、枯草杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌等有良好的抗菌作用；对变形杆菌、克雷白杆菌、肠杆菌属、沙雷杆菌等作用较弱；对绿脓杆菌无效。
T logy科技分析与检测随着我国经济的快速发展，人们生活质量不断提高，广大消费者越来越关注食品安全问题。
抗生素的出现是人类历史上的一大壮举，它挽救了无数人的生命，创造了极大的经济利益，然而一些商家受利益驱使滥用抗生素，使得抗生素残留问题日益突出，给人们和环境造成了严重危害。
因此，急需建立一种简便、快速、重现性好以及灵敏度高的检测方法对其进行检测。
目前，用于抗生素残留检测的方法有液相色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、薄层色谱法、超临界流体色谱法、毛细管电泳法、液相色谱质谱联用技术、气相色谱质谱联用技术、免疫分析法和微生物检测方法等[1-2]。
其中，灵敏度高、选择性高以及分辨率高的高效液相色谱法脱颖而出，高效液相色谱法不仅可以对抗生素残留药物进行定性分析，还可以定量分析，因此，被广泛应用于食品抗生素残留药物的检测。
1 高效液相色谱法概述液相色谱法是在室温和常压下用大直径玻璃管柱通过液位差输送流动相的一种色谱方法，被称为经典的液相色谱法，该方法操作时间长，柱效低。
高效液相色谱法是在经典液相色谱法基础上引入气相色谱理论于20世纪60年代后期发展起来的，又称“现代液相色谱”“高分离度液相色谱”“高速液相色谱”“高压液相色谱”等，是采用高压输液系统，将不同极性的化合物和液体流动相泵入色谱柱，色谱柱内装有固定相，各成分在柱内被分离后进入检测器，通过检测器对试样进行检测和分析。
高效液相色谱系统主要由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据获取与处理系统以及馏分收集器等构成。
高效液相色谱法检测分析的试样不需要气化，只需制成溶液，不受样品挥发性的限制，可分析相对分子量大于400、热稳定性差、高沸点的有机物，高效液相色谱法的应用范围十分广泛，目前该方法主要应用于食品分析，如食品中抗生素残留以及农药残留的检测；药物分析，如天然产物中复杂组分的分析；生化分析，如代谢组学、蛋白质、多肽等生化样品的分析；环境分析，如检测水中微囊藻毒素；其他产品的分析，如检测化妆品中的违禁品。
中华人民共和国国家标准GB/T×××××-202×饲料中泰乐菌素、泰万菌素、替米考星的测定液相色谱-串联质谱法Determination of tylosin,tylvalosin and tilmicosin in feeds—Liquid chromatography-tandem mass spectrometry编制说明（征求意见稿）主要完成单位：四川省饲料工作总站《饲料中泰乐菌素、泰万菌素、替米考星的测定液相色谱-串联质谱法》国家标准制订编制说明（征求意见稿）一、工作简况（一）任务来源本标准的制定任务来源于国家标准化管理委员会，计划号合同编号为T-NY-2021-101-03，计划号为20203789-T-469，任务名称为《饲料中泰乐菌素、泰万菌素、替米考星的测定液相色谱-串联质谱法》。
本标准的技术归口单位是全国饲料工业标准化技术委员会，主要起草单位是四川省饲料工作总站和西南民族大学。
参考国内外相关检测方法，结合试验结果起草本标准。
（二）制定背景大环内酯类药物（MALs）是多由链霉菌产生的弱碱性抗生素，对革兰氏阳性菌和支原体具有良好的抗菌活性，临床上广泛用于治疗畜禽动物敏感菌引起的呼吸道、消化道和泌尿生殖系统感染[1-3]。
MALs 为无色弱碱性化合物，多呈负的旋光性由其整体结构决定，MALs易溶于有一定极性的有机溶剂，如甲醇、乙腈、乙酸乙酯、氯仿、乙醚等，在水和弱极性溶剂中微溶。
MALs在干燥状态下相当稳定，但其水溶液稳定性差。
在酸性条件(pH＜4)下，苷键易发生水解，氨基糖苷结构较中性糖苷稳定的多，正常水解碱性糖苷的条件往往导致大环结构分解；在pH6.8的水溶液中相对较稳定，此时水溶性下降，抗菌活性最高。
MALs的盐或酯较游离形式稳定。
大环内酯类药物达100多种，发展到现在共有3代，第一代有红霉素、泰乐菌素、北里霉素(吉他霉素)等；第二代有替米考星、阿齐霉素等；第三代有乙酰异戊酰基泰乐菌素（泰万菌素）、泰拉霉素（瑞可新）等。
三种农用抗生素降解真菌的筛选及其降解性能王强锋1，2，朱彭玲2，夏中梅1，2，王赟2，曾芸2，侯勇1，2*（1.四川省农业科学院生物技术核技术研究所，成都610066；2.四川省兰月科技有限公司，成都610207）收稿日期：2018-03-19录用日期：2018-06-15基金项目：四川省财政创新能力提升工程青年基金项目（2015QNJJ-002）；四川省财政创新能力提升工程优秀论文基金项目（2016LWJJ-001）；四川省科技支撑计划项目（2017SZ0188）作者简介：王强锋（1988—），男，四川平昌人，助理研究员，从事土壤与环境微生物研究。
E-mail ：wqf198808@朱彭玲与王强锋同等贡献*通信作者：侯勇E-mail ：yonghou@摘要：为了从重金属污染的土壤中分离筛选出能降解土霉素、诺氟沙星、磺胺二甲嘧啶的真菌菌株，利用抗生素作为唯一碳源进行抗生素降解真菌富集驯化培养，分离纯化耐受真菌，将纯化后的菌株回接到以抗生素作为唯一碳源的液体培养基中，运用高效液相色谱法（HPLC ）及紫外分光光度法对各菌株抗生素降解能力进行检测，并通过菌落形态学特征、ITS 序列和系统发育树对菌株进行分子鉴定。
筛选到4株抗生素降解真菌KS248、KS256、KS257、KS272，分别鉴定为轮状镰刀菌（Fusarium verticillioides ）、腐皮镰刀菌（Fusarium solani ）、聚多曲霉（Aspergillus sydowii ）、微紫青霉（Penicillium janthinellum ）。
其中，菌株KS248、KS256、KS257具有土霉素、诺氟沙星、磺胺二甲嘧啶降解能力；菌株KS272具有土霉素、诺氟沙星降解能力。
在抗生素初始浓度1500μg·L -1、30℃、150r·min -1条件下避光培养7d 后，菌株KS272降解土霉素、诺氟沙星能力最强，降解率分别达到40.29%、10.59%，菌株KS256降解磺胺二甲嘧啶能力最强，降解率达到18.53%。
高效液相色谱法测定血培养瓶中不同类别抗生素的浓度目的是验证血培养瓶里面不同类别的树脂对抗生素的吸附能力苯唑西林方法名称：苯唑西林钠原料药－苯唑西林－高效液相色谱法应用范围：本方法采用高效液相色谱法测定苯唑西林钠原料药中苯唑西林的含量。
本方法适用于苯唑西林钠原料药。
方法原理：供试品经水溶解并定量稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长225nm处检测苯唑西林钠的峰面积，计算出其含量。
试剂：1. 乙腈2. 磷酸3. 0.02mol/L磷酸二氢钾溶液4. 甲醇仪器设备：1. 仪器1.1 高效液相色谱仪1.2 色谱柱苯基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按苯唑西林峰计算应不低于2000。
1.3 紫外吸收检测器2. 色谱条件2.1 流动相：0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值至3.6) 乙腈甲醇=700 225 752.2 检测波长：225nm2.3 柱温：室温试样制备：1. 对照品溶液的制备精密称取苯唑西林对照品适量，加水溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.1mg的溶液，摇匀，即为对照品溶液。
2. 供试品溶液的制备精密称取供试品适量，加水溶解并定量稀释制成每1mL中约含0.1mg的溶液，摇匀，即为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。
“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长225nm处测定，即为供试品中C19H19N3O5S的含量。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸二氢钾溶液（取磷酸二氢钾 2.7g，用1000ml 水溶解，调节pH 值至 5.0）-乙腈(75：25)为流动相；检测波长为225nm。
取本品适量（约相当于苯唑西林25mg），置100ml 量瓶中，加0.05mol/L 氢氧化钠溶液1ml 溶液使溶解，放置3 分钟后，用流动相稀释至刻度，摇匀，得每1ml 中约含0.25mg 的苯唑西林与其降解杂质的混合溶液（1），另取氯唑西林对照品适量，加混合溶液（1）溶解并稀释制成每1ml 中约含氯唑西林0.1mg 的混合溶液（2），作为系统适应性试验溶液，取20μl 注入液相色谱仪，记录色谱图；杂质B1、B2 、D、氯唑西林峰的相对保留时间分别为0.4，0.5、0.9 和1.45，杂质D 峰与苯唑西林峰的分离度应大于1.5，苯唑西林峰与氯唑西林峰的分离度应大于2.5。
