6 植物组织培养实验二PPT课件
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植物组培实验报告实验二、培养基的配制及灭菌一、实验目的1、熟悉植物组织培养的一般工作流程。
2、了解培养基的成分、类型及特点。
3、能正确进行培养基的配制及灭菌操作。
二、实验原理植物组织培养是一项技术性强、无菌条件要求高的工作,对场地有一定的要求,需配备必要的仪器设备和器皿、器械,还必须熟练掌握每个环节的操作技术。
植物组织培养的一般程序包括拟定培养方案、初代培养、继代扩繁、生根壮苗培养及驯化移栽,其基本操作技术包括培养基的配制及灭菌、外植体的选择与消毒、无菌接种与培养、试管苗生根与驯化移栽等。
三、实验内容1、培养基的成分以MS培养为例,其成分可以分为水、无机盐、有机物、天然复合物、培养体的支持材料等五大类。
1.水作用:原生质体的组成成分,代谢过程的介质和溶媒。
它是生命活动过程中。
配制:培养基母液时要用蒸馏水:配培养基时可用自来水。
但在少量研究上尽量用蒸馏水。
2.无机元素大量元素,指浓度大于0.5mmol/l的元素,有N、P、K、Ca、Mg、S等。
其作用是:(1)N功能:是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分,是生命结构和功能物质不可缺少的。
供应形式:含有NO3-N又含NH4-N。
NH4-N对植物生长较为有利。
在制备培养基时以这两种形式供应。
供应的物质有KNO3、、NH4NO3等。
有时,也添加氨基酸。
(2)P功能:是磷脂的主要成分,而磷脂又是细胞膜、细胞核的重要组成部分。
磷也是核酸、ATP、辅酶等的组成成分。
组织培养中,磷不仅增加养分、提供能量,而且也促进对N的吸收,增加蛋白质在植物体中的积累。
供应形式:常用的物质有KH2PO4或NaH2PO4等。
(3)K功能:K对碳水化合物合成、转移、以及氮素代谢等有密切关系,它具有活化酶的作用。
K增加时,蛋白质合成增加,维管束、纤维组织发达,对胚的分化有促进作用。
但浓度不易过大,一般为1~3mg/l 为好。
供应形式:制备培养基时,常以KCl、KNO3 等盐类提供。