基因工程习题集
一、名词解释：（20×4/）
1、基因
2、克隆
3、基因定位
4、PCR
5、基因工程工具酶
6、组织培养
7、限制性核酸内切酶
8、受体细胞
9、生物技术 10、基因沉默
11、重组DNA技术12、逆转录酶13、单克隆抗体14、核移植技术
15、细胞融合16、胞内酶17、凝胶过滤18、固定化酶 19、蛋白质工程
20、生物反应器
二、单项选择题：(60×2/)
1．下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（）
A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒D．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良2．在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（）A．用mRNA为模板逆转录合成DNA B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成
C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D．由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA 3．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导人棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不．正确的是（）
A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少
B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失
C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染
D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的
4．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是（）
A．人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍B．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵
C．在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中
D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA
5.科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。以下有关该基因工程的叙述，错误的是（）
A.采用反转录的方法得到的目的基因有内含子
B.基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的
C.马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞
D.用同一种限制酶，分别处理质粒和含目的基因的DNA ，可产生黏性末端而形成重组DNA
分子
6.有关基因工程概念的理解正确的是 （ ）
A.操作对象是脱氧核苷酸
B.对DNA 进行改造和重组只能在细胞内完成的
C.打破远缘杂交不育的障碍
D.不能定向改造生物的遗传性状
7.右图是某一DNA 片段，下列关于该图的叙述，正确的是（ ）
A ．若图中的ACT 能决定一个氨基酸，则AC 可称为一个密码子
B ．限制性内切酶和DNA 连接酶都可作用于②处
C ．若该片段能与RNA 聚合酶结合，则该片段为 基因的编码区
D ．DNA 复制过程需要解旋酶作用于①处，而转录不需要
8. 有关DNA 限制性内切酶的理解正确的是 （ ）
A ．主要存在于微生物中 B.一种限制酶可以识别多种特定的核苷酸序列
C. 一种限制酶能在不同的切点上切割DNA 分子
D.其化学本质是DNA
9.在遗传工程技术中，限制性内切酶主要用于 （ ）
A.目的基因的提取和导入
B.目的基因的导入和检测
C.目的基因与运载体结合和导入
D.目的基因的提取和与运载体结合
10. 下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是： （ ）
A ．①②
B ．①③
C ．①④
D ．②③
11.下图所示为限制酶切割某DNA 分子的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是 （ ）
A.CTTAAG ，切点在C 和T 之间
B.CTTAAG ，切点在G 和A 之间
C.GAATTC ，切点在G 和A 之间
D.GAATTC ，切点在C 和T 之间
12 在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA 片段中，需使用 （ ）
A.同种限制酶
B.两种限制酶
C.同种连接酶
D.两种连接酶
13. 基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内
切酶。一种限制性内切酶能识别DNA 子中的GAATTC 顺序，切点在G 和A 之间，这是应用了①－T －－－
C G －－－C －－－－A G T T A A
②－－－C －－T －－－－G T A A C C ③
－－C
－－－－G T T A A ④A －－C －－－－G T A G C －T －G A A C T T
G C T T
G A A T
酶的（）
A．高效性 B.专一性 C．多样性 D.催化活性受外界条件影响
14在基因工程中用来修饰改造基因的工具是（）
A.限制酶和连接酶
B.限制酶和水解酶
C.限制酶和运载酶
D.连接酶和运载酶
15.作为基因的运输工具——运载体，必须具备的条件之一及理由是（）
A．能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因
B．具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达
C．具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合
D．它的参与才能够使目的基因在宿主细胞中复制并稳定保存
16.下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体（）
A.细菌质粒
B.噬菌体
C.动植物病毒
D.细菌核区的DNA
17.下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件（）
A.具有某些标记基因
B.决定宿主细胞的生存
C.能够在宿主细胞中复制
D.有多个不同的限制酶切点
18. 人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是
A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性
B.有利于对目的基因是否导入进行检测
C.增加质粒分子的分子量
D.便于与外源基因连接
19. 下列关于质粒的叙述，正确的是（）
A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器
B.质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子
C.质粒只有在侵入宿主细胞后在宿主细胞内复制
D.细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行
20. 细菌抗药性基因存在于（）
A．核DNA B．质粒 C．RNA D．小的直线型DNA
21.基因工程中，科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是（）
A.结构简单，操作方便
B.遗传物质含量少
C. 繁殖速度快
D.性状稳定，变异少
22.下列不属于获取目的基因的方法是（）
A.“鸟枪法”
B.转录法
C.反转录法
D.根据已知氨基酸序列合成法
23．基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合，②将目的基因导入受体细胞，③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求，④提取目的基因，正确的操作顺序是
A. ③②④①
B. ②④①③
C. ④①②③
D. ③④①②
24.用“鸟枪法”提取目的基因的步骤为（）
①用限制性内切酶将供体细胞DNA切成许多片段②将许多DNA片段分别载入运载体
③选取目的基因片段插入运载体④找出带有目的基因的细胞，并分离出目的基因
⑤让供体DNA片段在受体细胞内大量繁殖⑥通过运载体转入不同的受体细胞
A．①③④⑤⑥ B．①②⑥⑤④ C．①②③④⑤⑥ D．①②③④⑤
25. 苏云金芽孢杆菌的抗虫基因之所以能在棉花的叶肉细胞中准确地表达出来，主要是因为（）
A.目的基因能在植物细胞核中进行复制
B.目的基因与棉花DNA的基本结构相同
C.不同生物共用一套遗传密码
D.不同生物具有相同的一套遗传信息26．1976年，美国的H.Boyer教授首次将人的生长抑制素释放因子的基因转移到大肠杆菌，并获得表达，此文中的“表达”是指该基因在大肠杆菌（）A.能进行DNA复制 B.能传递给细菌后代
C. 能合成生长抑制素释放因子
D.能合成人的生长素
27. 在利用基因工程培育抗虫棉的过程中，将目的基因导入受体细胞这三个步骤后，在全部受体细胞中，能够摄入抗虫基因的受体细胞占（）A．全部B．大部分 C．一半 D．很少
28.控制细菌合成抗生素的基因、控制放线菌主要性状的基因、控制病毒抗原特异性的基因依次在（）
①核区大型环状DNA ②质粒上③细胞染色体上④衣壳内核酸上
A．①③④ B．①②④ C．②①③ D．②①④
29. 不是基因工程方法生产的药物是（）
A.干扰素
B.白细胞介素
C.青霉素
D.乙肝疫苗
30.应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是指
A.用于检测疾病的医疗器械
B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子
C.合成β—球蛋白的DNA
D.合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段
31. 水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用（）
A.促使目的基因导入宿主细胞中
B.促使目的基因在宿主细胞中复制
C.使目的基因容易被检测出来
D.使目的基因容易成功表达
32.基因治疗是把健康的外源基因导入（）
A.有基因缺陷的细胞中
B.有基因缺陷的染色体中
C.有基因缺陷的细胞器中
D.有基因缺陷的DNA分子中
33.基因治疗是指（）
A.把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的
B.对有基因缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的
C.运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变恢复正常
D.运用基因工程技术，把有基因缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的
34.科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并分泌抗体。相关叙述不正确的是（）
A．该技术将导致定向的变异 B．受精卵是理想的受体细胞
C．垂体分泌的催乳素能促进效应B细胞产生抗体 D．宜采用人工合成法获得目的基因
35. 1993年，我国科学工作者培育成的抗棉铃虫的转基因抗虫棉，其抗虫基因的来源（）
A.普通棉花的基因突变
B.棉铃虫变异形成的致死基因
C.寄生在棉铃虫体内的线虫
D.苏云金芽孢杆菌体内的抗虫基因
36. “工程菌”是指（）
A.用物理或化学方法诱发菌类自身某些基因得到高效表达的菌类细胞株系
B.用遗传工程的方法，把相同种类不同株系的菌类通过杂交得到新细胞株系
C.用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系
D.从自然界中选取能迅速增殖的菌类
37. 下列有关基因工程的叙述中，不正确的是（）
A.DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来
B.基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子
C.基因治疗主要是对有基因缺陷的细胞进行替换
D.蛋白质中氨基酸序列可为合成目的基因提供资料
38. 下列关于基因成果的叙述，错误的是（）
A.在医药卫生方面，主要用于诊断治疗疾病
B.在农业上主要是培养高产、稳产、品质优良和具有抗药性的农作物
C.在畜牧养殖业上培育出了体形巨大、品质优良的动物
D.在环境保护方面主要用于环境监察测和对污染环境的净化
39．有关基因工程的叙述正确的是（）
A.限制酶只在获得目的基因时才用
B.重组质粒的形成是在细胞内完成的
C.质粒都可作为载体
D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料
40．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是指（）
A．人工合成的免疫球蛋白的DNA分子 B．人工合成的苯丙氨酸羟化酶的DNA分子 C．用放射性同位素或荧光分子等标记的蛋白质分子
D．用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子
41．基因工程常用的受体有（）
①大肠杆菌②枯草杆菌③支原体④动植物细胞
A.①②③④
B.①②③
C.②③④
D.①②④
42．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是（）
A.人工合成目的基因
B.目的基因与运载体结合
C.将目的基因导入受体细胞
D.目的基因的检测表达
43. 上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋白的转基因牛，还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，转基因动物是指（）
A.提供基因的动物
B.基因组中增加外源基因的动物
C.能产生白蛋白的动物
D.能表达基因信息的动物
44. 下列平末端属于同一种限制酶切割而成的是（）
A.①③
B.①④
C.②③
D.②④
45．下列属于PCR技术的条件的是（）
①单链的脱氧核苷酸序列引物②目的基因所在的DNA片段③脱氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA连接酶⑥DNA聚合酶⑦DNA限制性内切酶
A.①②③⑤
B.①②③⑥
C.①②③⑤⑦
D.①②④⑤⑦
46．下列有关PCR技术的叙述正确的是（）
A.作为模板的DNA序列必须不断的加进每一次的扩增当中
B.作为引物的脱氧核苷酸序列必须不断的加进每一次的扩增当中
C.反应需要的DNA聚合酶必须不断的加进反应当中
D.反应需要的DNA连接酶必须不断的加进反应当中
47．蛋白质工程中，直接需要进行操作的对象是（）
A.氨基酸结构
B.蛋白质的空间结构
C.肽链结构
D.基因结构
48．某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶（Amy）基因a,通过基因工程的方法，将a转到马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。这一过程涉及（）
A.目的基因进入受体细胞后，可随着马铃薯的DNA分子的复制而复制，传给子代细胞
B.基因a导入成功后，将抑制细胞原有的新陈代谢，开辟新的代谢途径
C.细菌的DNA分子较小，可直接作为目的基因，导入受体中不需要整合到马铃薯的DNA分子中
D.目的基因来自细菌，可以不需要运载体直接导入受体细胞
49．采用基因工程的方法培养抗虫棉，下列导入目的基因的作法正确的是（）
①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中
③将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组导入细菌，用该细菌感染棉花体细胞，再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组，注射到棉花子房，并进入受精卵
A.①②
B.②③
C.③④
D.④①
50．植物基因工程往往需要接受外来DNA的细胞经有丝分裂形成植株。细胞每次分裂时DNA 都复制一次，每次复制都是（）A.母链和母链，子链和子链，各组成一条子代DNA B.每条子链和它的母链组成子代DNA
C.每条子链随机地和两条母链之一组成子代DNA
D.母链降解，重新形成两个子代DN
三、填空（45×1/，共45分）
1．(8分)基因工程又叫基因拼接技术。
(1)在该技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的为模板，成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成。
(2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、。若将真核基因在原核细胞中表达，对该目的基因的基本要求是。
(3)假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性内切酶切割运载体与且的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物至少有种环状DNA分子，它们分别是。
2．（10分）回答有关真核细胞中遗传信息及其表达的问题。
（1）将同位素标记的尿核苷（尿嘧啶和核糖的结合物）加入细胞培养液中，不久在细胞核中发现被标记的__________、__________、___________。
（2）将从A细胞中提取的核酸，通过基因工程的方法，转移到另一种细胞B中，当转
入____________时，其遗传信息在B细胞中得到表达并能够复制传给下一代，当转入____________时，在B细胞中虽能合成相应的蛋白质，但性状不会遗传。①—GGCCTGAAGAGAAGT—
②—CCGGACTTCTCTTCA—
（3）已知某基因片段碱基排列如右图。由它控制合成的多肽中含有“—脯氨酸—谷氨
酸—谷氨酸—赖氨酸—”的氨基酸序列。（脯氨酸的密码子是：CCU 、CCC 、CCA 、CCG ；谷氨
酸的是GAA 、GAG ；赖氨酸的是AAA 、AAG ；甘氨酸的是GGU 、GGC 、GGA 、GGG 。）
（1）翻译上述多肽的mRNA 是由该基因的________链转录的（以图中①或②表示），此
m RNA 的碱基排列顺序是：__________________________________。
（2）若该基因由于一个碱基被置换而发生突变，所合成的多肽的氨基酸排列顺序成为
“—脯氨酸—谷氨酸—甘氨酸—赖氨酸—”。写出转录出此段多DNA 单链的碱基排列顺序：
____________________________。
3．（3分）
（1）限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G ↓GATCC —，限制性内切酶Ⅱ的识别序列
和切点是—↓GATC —。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后形成的黏性未端。___________________________
②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后形成的黏性未端。_____________________
③在DNA 连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性未端能否连接起来？
为什么？________________________________________________________
4. （共13分）科学家将人的生长素基因与大肠杆菌的
DNA 分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中的以表达。
操作过程如图，请根据图回答问题：
（1）获取目的基因的方法，一是 ；二是 。
过程⑴表示的是采取___________的方法来获取目的基
因。
（2）图中⑴过程是以原_______________为模板，
___________形成DNA 单链，再进一步合成DNA 双链。
（3）如何使目的基因与质粒结合形成重组质粒?
答： 。
（4）图中⑴过程用人工方法，使体外重组的DNA 分子转移到受体细胞内，主要是借鉴
细菌或病毒___________细胞的途径。一般将受体大肠杆菌用___________处理，以增大____________的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。
（5）目前把重组质粒导入细菌细胞时效率不高，有的只导入普通质粒A ，只有极少数合成人生长素的RNA 注： 抗氨苄青霉素基因 四环素抗性基因 a 点为目的基因与质粒A 的结合点 质粒A 目的基因（人生 长激素基因） 质粒重组 细菌B 转化的细菌 工程菌
导入 检测、筛选 结合 ⑶ ⑴ ⑵ a
导入的是重组质粒，而大部分根本没有导入质粒。检测大肠杆菌B是否导入质粒或重组质粒
开采用的方法是__________________________________，原理是
__________________________________________。
（6）如果把已经导入普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上
培养，发生的现象是________________________，原理是_______ ________________。
5.（共5分）在植物基因工程中，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体．把目的基因重组
人Ti质粒上的T-DNA片段中，再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。
(1)科学家在进行上述基因操作时，要用同一种分别切割质粒和目的基因，
质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过而黏合。
(2)将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有
抗除草剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的T-DNA片段，因此可
以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交F1代中，仍具有抗除草剂特性的植株
占总数的，原因
是。
（3）种植上述转基因油菜，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基
因污染”。如果把目的基因导人叶绿体DNA中，就可以避免“基因污染”，原因
是。
6．（共6分）将人的抗病毒干扰基因“嫁接”到烟草的DNA分子中，可使烟草获得抗病毒的
能力，形成转基因产品。试分析回答：
(1).人的基因工程之所以能接到植物体中去，原因是：______________________。
(2).烟草具有抗病毒能力，说明烟草体内产生：______________________。
(3).不同生物间基因移植成功，说明生物共有一套____ _______。
(4).烟草DNA分子被“嫁接”上或“切割”掉某个基因，实际并不影响遗传信息的表达
功能。这说明_________________________________。
(5).该工程应用与、于实践，将给农业、医药等诸多领域带来革命，目前已取得了许多
成就，请你列举你所知道的或你所设想应用该工程的一个具体实例：
_____________________________________。
(6).有人认为，转基因新产品也是一把双刃剑，有如船能载舟也能覆舟，甚至可能带来
灾难性的后果，你是否支持这一观点？如果支持，请你举出一个可能出现的灾难性后果的实
例：
_____________________________________________________________________________。
四、简答题（20×8/）
1．何谓基因工程，它的优点是什么？（8分）
2．试述基因工程理论依据。（8分）
3．何谓基因沉默，它的作用机制有哪些？（8分）
4．试述天然DNA的来源和用途。（8分）
5．设计PCR的引物应遵守哪些原则？（8分）
6．用哪些分子生物学方法可以检测转基因植物中的外源基因（至少写出5种）？（8分）7．试述组织培养的原理和愈伤组织A的来源和用途。（8分）
8．试述作为克隆载体的DNA分子必须具备的条件。（8分）
9．试述构建质粒克隆载体的基本策略。（8分）
10．试述选择受体细胞的原则，植物受体细胞有哪些？（8分）
11．目前常用的转基因方法有哪些，各有何特点？（8分）
12．何谓启动子，试述启动子具有哪些特征？（8分）
13．试从基因工程本身的性质来分析基因工程存在的安全性问题。（8分）
14．试写出常用分离克隆植物基因的方法和各自的优缺点。（8分）
15．试比较原核生物结构基因与真核生物结构基因的组成。（8分）
16．目前常用的转基因方法有哪些，各有何特点？（8分）
17．PCR反应的基本原理是什么？如何设计PCR的引物？（8分）
18．用哪些方法可以检测转基因植物中的外源基因，如何检测？（8分）
19．列举出五个以上的生物技术产品。（8分）
20．1979年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌体内表达成功。请根据图回答问题：（12分）
胰腺
反转录酶
质粒
②
⑤
③
① DNA 大肠杆菌
原胰岛素信使RNA
④
（1）此图表示的是采取____________合成基因的方法获取______________基因的过程。（2）图中①DNA是以______________为模板，___________形成单链DNA，在酶的作用下合成双链DNA，从而获得了所需要的基因。
（3）图中②代表的是_____________酶，在它的作用下将质粒（________状DNA）切出__________末端。
（4）图中③代表______________________DNA，含______________________。
（5）图中④表示将__________________。⑤表示_________________DNA随大肠杆菌的繁殖而进行__________________。
基因工程练习题 一、单项选择题 1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，一般需使用 A.同种限制酶 B.两种限制酶 C.同种连接酶 D.两种连接酶 2．基因工程常用的受体有 ①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞 A.①②③④ B.①②③ C.②③④ D.①②④ 3．有关基因工程的叙述正确的是 A.限制酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成是在细胞内完成的 C.质粒都可作为载体 D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料 4．下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体 A.细菌质粒 B.噬菌体 C.动植物病毒 D.细菌核区的DNA 5．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是 A.人工合成目的基因 B.目的基因与运载体结合 C.将目的基因导入受体细胞 D.目的基因的检测表达 6．不是基因工程方法生产的药物是 A.干扰素 B.白细胞介素 C.青霉素 D.乙肝疫苗 7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是 A.限制酶和连接酶 B.限制酶和水解酶 C.限制酶和运载酶 D.连接酶和运载酶 8．下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件 A.具有某些标记基因 B.决定宿主细胞的生存 C.能够在宿主细胞中复制 D.有一个或多个限制酶切点 9．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用 A.促使目的基因导入宿主细胞中 B.促使目的基因在宿主细胞中复制 C.使目的基因容易被检测和选择 D.使目的基因容易成功表达 10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是指 A.用于检测疾病的医疗器械 B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子
作业一： 一、名词解释： 1、基因：是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸 序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。 2、基因组该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子 3、操纵子:原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然 后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。 4、启动子:是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至少一个转录起始点。在 真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。 5、增强子:是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约20 0bp的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。增强子通常占100～200bp长度，也和启动子一样由若干组件构成，基本核心组件常为8～12bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。 6、基因表达：是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转 变成具有生物活性的蛋白质分子。 二、简答题 1、说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。 答：限制性内切核酸酶采用三字母的命名原则,即属名+种名+株名的各一个首字母,再加上序号. 基本原则: 3-4个字母组成,方式是:属名+种名+株名+序号; 首字母: 取属名的第一个字母,且斜体大写;第二字母: 取种名的第一个字母,斜体小写;第三字母: (1)取种名的第二个字母,斜体小写;(2)若种名有词头,且已命名过限制酶,则取词头后的第一字母代替.第四字母: 若有株名,株名则作为第四字母,是否大小写,根据原来的情况而定,但用正体. 顺序号: 若在同一菌株中分离了几种限制酶,则按先后顺序冠以I,Ⅱ,Ⅲ,…等,用正体. 2、什么是限制性内切核酸酶的星号活性？受哪些因素影向？ 答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变，限制酶的特异性就会松动，识别的序列和切割都有一些改变，改变后的活性通常称第二活性，而将这种因条件的改变会出现第二
高中生物选修三“基因工程”综合练习 (20题含答案) 请回答下列有关克隆技术和基因编辑的问题： 1）克隆技术是指通过人工手段复制出与原体完全一样的 生物体。目前，克隆技术主要分为三种：体细胞核移植克隆、胚胎分裂克隆和基因克隆。其中，最常见的克隆方法是。 2）基因编辑技术是指通过改变生物体的基因序列来实现 对其性状的调控。CRISPR/Cas9系统是目前最常用的基因编辑技术之一，其中CRISPR指的是，Cas9则是。 3）基因编辑技术的应用非常广泛，其中包括疾病基因治疗、农业生产、生物安全等领域。以疾病基因治疗为例，基因编辑技术可以通过修复或替换患者体内的有缺陷基因，从而达到治疗疾病的目的。目前，基因编辑技术已经被用于治疗包括血友病在内的多种疾病。 答案：（1）体细胞核移植克隆（1分）（2）“类细菌重 复间隔簇”、“CRISPR相关蛋白9”（1分）（3）血友病（1分）逆转录病毒载体是目前应用较多的动物基因工程载体之一。它可以将外源基因插入到受体细胞染色体中，使外源基因随染色体DNA一起复制和表达。研究发现逆转录病毒基因组
（RNA）的核心部分包括三个基因：gag基因（编码病毒的核 心蛋白）、pol基因（编码逆转录酶）、env基因（编码病毒 的表面糖蛋白）。位于这些基因的两端有LTR序列（含有启 动子、调节基因等），控制着逆转录基因组核心基因的表达及转移。下图展示了构建逆转录病毒载体及用于培育转基因小鼠的过程。 1）逆转录病毒的遗传信息储存在RNA中，其中包含四 种核苷酸排列顺序中的四种脱氧核苷酸。 2）过程②中，外源基因一定要插入到病毒DNA的LTR 序列中的启动子后，其主要目的是控制外源基因的表达。 3）过程③中，导入病毒蛋白编码基因（gag，pol和env）的目的是合成组成病毒的蛋白质。 4）过程④中，逆转录病毒载体感染的细胞一般选择内细 胞团细胞，因为这类细胞能发育成新个体的各种组织器官（具有发育的全能性），处于囊胚期。
高三生物基因工程练习题及答案 第一节：选择题 1. 现代基因工程技术的突破是建立在下列发现的基础之上的： A. DNA双螺旋结构 B. 基因重组的概念 C. DNA复制的机制 D. 基因的表达调控机制 正确答案：A. DNA双螺旋结构 2. 下列哪个是基因工程的主要应用领域： A. 农业领域 B. 医学领域 C. 环保领域 D. 以上都是 正确答案：D. 以上都是 3. 基因工程按操作方式可分为以下几类，下面哪个选项顺序正确： A. 提取、分离、重组、转移 B. 分离、转移、提取、重组
C. 提取、分离、转移、重组 D. 分离、提取、转移、重组 正确答案：C. 提取、分离、转移、重组 4. 以下哪项不属于基因工程的基本技术之一： A. PCR B. SDS-PAGE C. DNA测序 D. 基因克隆 正确答案：B. SDS-PAGE 5. 哪个技术代表了原创性的DNA测序方法，为测序领域的巨大进步奠定了基础： A. Sanger测序法 B. PCR法 C. 杂交技术 D. 聚合酶链式反应技术 正确答案：A. Sanger测序法 第二节：填空题
1. 基因工程主要通过重组DNA来完成基因的操纵和转移。其中，常用的DNA序列寻找方法是______。 答案：PCR （聚合酶链式反应） 2. 基因工程筛选转化细胞常用的方法是______。 答案：筛选抗生素（抗生素筛选法） 3. 基因工程中，将外源基因与载体进行重组，得到重组DNA，这个过程称为______。 答案：基因克隆 4. 基因工程常用的工具酶是______。 答案：限制性内切酶 5. 将基因工程所重组得到的DNA片段转入细胞内部的过程称为 ______。 答案：转化（也可接受转染） 第三节：解答题 1. 请描述一下基因工程中的PCR技术的原理和应用。 答案：PCR（聚合酶链式反应）技术是一种体外人工合成DNA片段的技术。其原理是通过DNA解旋、引物延伸和DNA复制等步骤，使得DNA在体外被无限制地复制增加。PCR技术能够在短时间内扩增特定的DNA序列，具有高度灵敏性和特异性。在基因工程中，PCR技
基因工程习题集 一、名词解释：（20×4/） 1、基因 2、克隆 3、基因定位 4、PCR 5、基因工程工具酶 6、组织培养 7、限制性核酸内切酶 8、受体细胞 9、生物技术 10、基因沉默 11、重组DNA技术12、逆转录酶13、单克隆抗体14、核移植技术 15、细胞融合16、胞内酶17、凝胶过滤18、固定化酶 19、蛋白质工程 20、生物反应器 二、单项选择题：(60×2/) 1．下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（） A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒D．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良2．在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（）A．用mRNA为模板逆转录合成DNA B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成 C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D．由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA 3．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导人棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不．正确的是（） A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少 B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染 D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的 4．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是（） A．人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍B．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵 C．在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中 D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA 5.科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。以下有关该基因工程的叙述，错误的是（） A.采用反转录的方法得到的目的基因有内含子 B.基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的 C.马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞
专题1 《基因工程》单元测试题 一、单选题(每小题只有一个正确答案) 1.在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是( ) A．限制酶和DNA连接酶 B．限制酶和水解酶 C．限制酶和载体 D． DNA连接酶和载体 2.下列说法正确的是( ) A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B．用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌 C．质粒是基因工程中惟一用作运载目的基因的载体 D．利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程不能称为“克隆” 3.某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。 下列有关叙述错误的是( ) A．步骤①所代表的过程是反转录 B．步骤②需使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶 C．步骤③可用CaCl2处理大肠杆菌，使其从感受态恢复到常态 D．检验Q蛋白的免疫反应特性，可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体特异性 反应试验 4.与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是( ) A．反转录酶 B． RNA聚合酶 C． DNA连接酶 D．解旋酶 5.转基因抗虫棉的研制过程中，为了检测抗虫基因是否成功导入，最简捷有效的方法是( ) A．用DNA探针检测受体细胞中的目的基因是否存在 B．用DNA探针检测受体细胞中的目的基因是否转录出相应的mRNA C．直接将培育出的棉株叶片饲喂原本的棉花害虫 D．检测标记基因是否正常地表达出来
6.下列哪项不是表达载体所必需的组成( ) A．目的基因 B．启动子 C．终止子 D．抗青霉素基因 7.下列说法正确的是( ) A．限制性核酸内切酶的识别序列是GAATTC，只能在G和A之间切断DNA B． DNA连接酶能够将任意2个DNA片段连接在一起 C．质粒是能够自主复制的小型双链环状DNA分子 D．基因工程的载体只有质粒一种 8.应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。下图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中不正确的是( ) A．图中①～⑤过程中都发生了碱基互补配对现象 B．图中①过程需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶 C．将PrG导入细胞Ⅱ，则Ⅱ最可能是浆B细胞 D．图中⑤过程需要的培养基中一定含有植物激素和无机养料 9.在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是( ) A．化学合成法 B．基因组文库法 C． cDNA文库法 D．多聚酶链式反应 10.中国新闻网报道，阿根廷科学家近日培育出了世界上第一头携带有两个人类基因的牛，因此有望生产出和人类母乳极其类似的奶制品。下列叙述正确的是( ) ①该技术将导致定向变异 ②DNA连接酶将目的基因与载体黏性末端的碱基对连接起来 ③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料
基因工程期末试题及答案 一、选择题（每题2分，共20分） 1. 基因工程是指利用现代生物技术手段对DNA进行操作和控制的一种技术。 2. 基因工程的主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。 3. DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。 4. 在基因工程中，限制性内切酶用于切割DNA分子，产生特定片段。 5. 基因工程可以产生转基因生物，通过对生物基因进行改造，使其具有特定的特性。 6. CRISPR/Cas9是一种常用的基因编辑工具，可以精确地修改基因组中的特定片段。 7. 基因工程在医学领域可以用于基因治疗，通过修复或替换异常基因，治疗遗传性疾病。 8. 在农业领域，基因工程可以用于改良作物，提高产量和抗病虫害能力。 9. PCR是一种常用的基因扩增技术，可以通过复制DNA片段来放大特定基因。 10. DNA梯度离心是基因工程中常用的分离DNA片段的方法。
二、问答题（每题10分，共30分） 1. 请简要介绍基因工程的基本原理和主要方法。 基因工程的基本原理是通过对DNA进行操作和控制来改变生物的遗传性状。其主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。基因克隆是通过将特定DNA片段放入载体中，然后转化到宿主细胞中，使重组DNA在宿主细胞中大量复制。PCR是一种基因扩增技术，通过在DNA复制过程中加入特定引物，使特定基因片段在体外大量扩增。DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。 2. 什么是转基因生物？请举例说明。 转基因生物是指经过基因工程改造，将外源基因导入到目标生物体中，使其具有新的遗传性状的生物。例如，将耐旱基因导入水稻，使其具有抗旱能力；将Bt毒素基因导入棉花，使其具有抗虫能力。 3. 基因工程在医学领域有哪些应用？举例说明。 基因工程在医学领域可以用于基因治疗、疫苗研发等。例如，利用基因工程技术可以修复或替换患者体内异常基因，治疗遗传性疾病。另外，基因工程也可以用于疫苗研发，通过基因工程技术将病原体的基因导入宿主细胞，产生病原体的抗原蛋白，从而刺激免疫系统产生抗体，用于预防传染病。 4. 基因工程在农业领域有哪些应用？举例说明。 基因工程在农业领域可以用于改良作物、提高产量和抗病虫害能力等。例如，通过基因工程技术将耐盐碱基因导入水稻，使其适应盐碱
基因工程课后习题答案 【篇一：基因工程习题及答案】 选题 1. 在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（b） a ． i 类限制酶 b. ii 类限制酶 c. iii 类限制酶 d. 核酸内切酶 e. rnaase 2. 下列关于同裂酶的叙述错误的是 (b ) a. 是从不同菌种分离到的不同的酶 , 也称异源同工酶。 b. 它们的识别序列完全相同。 c. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。 d. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。 e. 两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别 位点。 3. 多数限制酶消化 dna 的最佳温度是（a） a. 37 ℃ b.30 ℃ c.25 ℃ d.16 ℃ e.33 ℃ 4. 下列关于限制酶的叙述错误的是 (b) a. i 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp 和 s- 腺苷蛋氨酸。 b. ii 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp 。 c. iii 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp ， s- 腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。 d. i 、 iii 类限制酶对 dna 有切割和甲基化活性， ii 类限制酶对 dna 只有切割活性而无甲基化活性。 e.ii 类限制酶要求严格的识别 序列和切割点，具有高度精确性。 5. 如果一个限制酶识别长度为 6bp , 则其在 dna 上识别 6bp 的切 割概率为 ( d ) a. 1/44 b. 1/66 c. 1/64 d.1/46 e. 1/106 6. 多数 ii 类限制酶反应最适 ph 是 (c ) a. ph:2-4 b. ph:4-6 c. ph:6-8 d. ph:8-10 e. ph:4-10 7. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( d) a.限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。 b.许多限制酶对线性 dna 和超螺旋 dna 底物的切割活性是有明显差 异的。
2022-2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试题库全真模拟卷3套（含答案） （图片大小可自由调整） 全文为Word可编辑，若为PDF皆为盗版，请谨慎购买！ 第1卷 一.综合考核题库(共30题) 1.迄今所发现的限制性内切核酸酶既能作用于双链DNA，又能作用于单链DNA。 正确答案:错误 2.核酸分子杂交探针必须满足的条件不包括 A、单链结构 B、足够长度 C、不含互补区 D、只能是DNA 正确答案:D 3.DNA沿凝胶平面垂直方向移出并移除到膜上，转移后各个DNA片段在膜上的相对位置与凝胶中的相对位置一样，因此也称为_____________。 正确答案:印迹 4.欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用S1核酸酶切割或正确答案:DNA聚合酶补平 5.欲将一真核生物的结构基因克隆后转移到原核生物(如E．coli)中进行表达，克隆时应注意哪些问题？正确答案:应注意的问题有：启动子、密码子、剪接、分泌。 6.分离总DNA比分离总RNA困难的原因是无处不在的耐高温的DNA酶的存在。 正确答案:错误 7.Amp是（）的表示 A、氨苄青霉素 B、卡那霉素 C、氯霉素 D、四环素 正确答案:A 8.利用DNA自动测序时通常进行标记的是( ) A、ddNTP B、引物 C、dATP D、dNTP 正确答案:A 9.显微注射技术一般是在显微镜下将目的DNA分子注射进入动物受精卵的哪一部位中，从而产生转基因动物 A、雌原核 B、雄原核 C、极体 D、核仁 正确答案:B 10.何谓星活性？ 正确答案:在非最适反应条件下，有些限制性核酸内切酶能切割和识别与特定识别序列相似的序列，这种改变的特殊活性叫做星活性。
基因工程试题答案 选择题有多选项，需要同学们自己确定对错，只有几道是多选。 一、单项选择题（共计150题） 1.因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是( c ) (a)A.Kornberg (b)W.Gilbert (c)P.Berg (d)B.McClintock 2.第一个作为重组DNA载体的质粒是( c ) (a)pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8 3.关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( b )不太恰当。 (a)由作用于同一DNA序列的两种酶构成 (b)这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶 (c)这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰 (d)不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统 4.Ⅱ型限制性内切核酸酶：( b ) (a)有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列 (b)仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供 (c)限制性识别非甲基化的核苷酸序列 (d)有外切核酸酶和甲基化酶活性 (e)仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供 5.下面有关限制酶的叙述哪些是正确的?( bde，c待定) (a)限制酶是外切酶而不是内切酶 (b)限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割 (c)同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的（星活性怎么办？？？不确定） (d)一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA，产生黏末端 (e)一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端 6.第一个被分离的Ⅱ类酶是：( c ) (a)EcoK(b)HindⅢ(c)HindⅡ(d)EcoB 7.在下列进行DNA部分酶切的条件中，控制哪一项最好：( b ) (a)反应时间(b)酶量(c)反应体积(d)酶反应的温度 8.在下列试剂中，那一种可以螯合Ca2+离子?( d ) (a)EDTA (b)柠檬酸钠(c)SDS (d)EGTA 9.在下列工具酶中，那一种可以被EGTA抑制活性?( d ) (a)S1单链核酸酶(b)末端转移酶(c)碱性磷酸酶(d)Bal 31核酸酶（钙离子依赖酶） 10.限制性内切核酸酶可以特异性地识别：( b ) (a)双链DNA的特定碱基对(b)双链DNA的特定碱基序列 (c)特定的三联密码(d)以上都正确 11.限制性核酸内切酶切割DNA后产生：a
基因工程题库及答案汇编 一、填空题 1．基因工程是年代发展起来的遗传学的一个分支学科。基因工程技术的诞生，使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统的生物技术时代，走向的时代。 2．随着基因工程技术的诞生和发展，人类可以通过、和等三种主要生产方式，大量取得过去只能从组织中提取的珍稀蛋白，用于研究或治病。 3．Cohen 等在年构建了第一个有功能的重组DNA 分子。 4．基因工程的两个基本特点是：(1)，(2)。 5．基因克隆中三个基本要点是：；和。 6．年，美国斯坦福大学等在上发表了题为：“将新的遗传信息插入SV40 病毒DNA 的生物化学方法：含有λ噬菌体基因和E．coli 半乳糖操纵子的环状SV40 DNA”的论文，标志着基因工程技术的诞生。这一工作具有划时代的意义，但是他们并没有。7．克隆基因的主要目的有四：(1)；(2)；(3)；(4)。 填空题答案 1． 70；按人们的需要而定向地改造和创造具有新的遗传性品种。2．细菌发酵；真核细胞培养；乳腺生物反应器。3． 1973 4． (1)分子水平上的操作；(2)细胞水平上的表达。5．克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择 6． 1972；P．Berg；Proc．Natl．Acad．Sci．USA；证明体外重组的 DNA 分子具有生物学功能 7． (1)扩增 DNA； (2)获得基因产物；(3)研究基因表达调控；(4)改良生物的遗传性 二、选择题(单选或多选) 1．因研究重组DNA 技术而获得诺贝尔奖的科学家是( ) (a)A．Komberg (b)W．Gilbert (c)P．Berg (d) B．McClintock 2．第一个作为重组DNA 载体的质粒是( ) (a) pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8 3．第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是( ) (a)EcoRI (b)EcoB (c)EcoC (d)EcoRⅡ 4．P Berg 构建SV40 二聚体时用了几种不同的酶，其中( )的作用是制造隐蔽的5’端。 (a)末端转移酶(b)λ外切核酸酶(c)外切酶Ⅲ(d)DNA 连接酶 选择题(单选或多选)答案：1．C；2．C；3．a；4．b。 三、简答题 1．为什么说基因工程技术是60 年代末70 年代初发展起来的? 答：这是因为：(1)1967 年发现了连接酶；(2)大肠杆菌的转化技术是 1970 年获得突破；(3)限制性内切核酸酶的分离始于 1970 年；(4)Berg 在 1972 年构建了第一个重组的 DNA 分子。 2．重组DNA 的含义是什么? 答：将一个生物的 DNA 片段插入到一个载体中，并引入到另一生物体中进行繁殖。 3．如何理解基因工程的两个特点? 答：基因工程的两个基本特点是分子水平的操作和细胞水平的表达。分子水平的操作包括 DNA 分离、切割和连接(还有其他一些 DNA 的修饰等)。由于体外重组 DNA 的最终目的是要改变生物的遗传性，所以分子水平的操作和细胞水平的表达是基因工程的两个最基本的特点。 4．在Cohen 构建有生物功能重组体的第一步实验中，用EcoRI 切割了R6-5 质粒，然后转化E．coli C600，在卡那霉素抗性子板上筛选到了pSCl02，它是由R6-5 的三个EcoRI 片段组成，请推测这个质粒具有什么遗传特性? 答：至少可说明两点：(1)pSC 102 含有复制起点，是一个独立的复制子；(2)重组 DNA分子中的卡那霉素抗性基因得到了表达。 5．什么是动物乳腺生物反应器? 答：能够分泌乳汁的转基因动物生产其他来源的基因产品，并通过乳腺分泌出来。 四、问答题 1．S．N Cohen 于1973 年构建了三个重组体，pSCl02，pSCl05，pSCl09 请说明这三个重组体是如何获得的?各说明了什么? 答：pSCl02：用 EcoRI 切割 R6-5，混合转化大肠杆菌，在卡那霉素抗性平板上选择了一个克隆，并从该克隆中分离了重组质粒 DNA，命名为 pSCl02。该质粒是由质粒 R 6-5的 EcoRI 酶切片段Ⅲ、V 和Ⅷ在体内连接的，说明可以利用体内连接构建重组体。 pSCl05：作者分别用 EcoRI 切割质粒 pSC 101、pSC 102,然后加入 DNA 连接酶进行连接后转化大肠杆菌，在四环素和卡那霉素双抗性的平板上筛选到 pSC 105。说明用质粒作为载体，体外连接可得到有功能的重组体。 pSCl09：pSC 101 与 RSF 1010 的共整合，即用 EcoRl 分别切割这两个质粒，然后在体外进行重组。说明两个独立的复制子体外重组后仍具有生物功能。 2．基因克隆是如何使含有单个基因的DNA 片段得到纯化的? 答：大分子量的 DNA 会含有许多特殊限制性内切核酸酶的限制位点，因此用一种限制酶处理一完整染色体或整个基因组会产生许多不同的 DNA 片段，每一个片段带有基因组的一个不同的基因或一个不同的小片段。当全部片段与用同种限制酶处理过的载体分子混合时(图
第二章习题 一、单选题 1.在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（ B ） A．I类限制酶 B. II类限制酶 C. III类限制酶 D.核酸内切酶 E. RNAase 2.下列关于同裂酶的叙述错误的是( B ) A. 是从不同菌种分离到的不同的酶,也称异源同工酶。 B. 它们的识别序列完全相同。 C. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。 D. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。 E. 两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。 3. 多数限制酶消化DNA的最佳温度是（ A ） A. 37℃ B.30℃ C.25℃ D.16℃ E.33℃ 4. 下列关于限制酶的叙述错误的是( B ) A. I类限制酶反应需要 Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸。 B. II类限制酶反应需要Mg2+、ATP。 C. III类限制酶反应需要Mg2+、ATP，S-腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。 D. I、III类限制酶对DNA有切割和甲基化活性，II类限制酶对DNA只有切割活性而无甲基化活性。 E. II类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。 5. 如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA上识别6bp的切割概率为( D ) A. 1/44 B. 1/66 C. 1/64 D.1/46 E. 1/106 6. 多数II类限制酶反应最适PH是 ( C ) A. PH:2-4 B. PH:4-6 C. PH:6-8 D. PH:8-10 E. PH:4-10 7. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( D ) A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。 B. 许多限制酶对线性DNA和超螺旋DNA底物的切割活性是有明显差异的。 C. 有些限制酶对同一DNA底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。 D. 限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液，是由于磷酸根会抑制限制酶反应。 E. BSA对许多限制酶的切割活性都有促进作用，所以酶切反应中常加入一定量的BSA。 8. II类限制酶反应中必须的阳离子是（ C ）
《基因工程》 一、选择题（每小题1.5分，共15分） 1．基因工程的创始人是 ( )。 A A. Kornberg B W. Gilbert C P. Berg D S. Cohen 2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。 A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成 B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶 C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰 D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统 3．在DNA的3’-5’链上，基因的起始密码子是 ( ) A ATG（或GTG） B AGT C TAG D TGA 4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别 ( )。 A 双链DNA的特定碱基对 B 双链DNA的特定碱基序列 C 特定的三联密码 D 以上都正确 5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。 A 3’→5’DNA聚合酶 B 5’→3’DNA聚合酶 C 5’→3’DNA内切酶 D 5’→3’DNA外切酶 6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。 A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。 B 可以在氯霉素作用下进行扩增。 C 通常带有抗药性标记。 D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。 7．关于cDNA的最正确的说法是( )。 A 同mRNA互补的单链DNA B 同mRNA互补的双链DNA C 以mRNA为模板合成的双链DNA D 以上都正确 8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确? ( ) A 是最常用的DNA连接酶。 B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。 C 不但能连接粘性末端。 D 最适温度37 ℃。 9．下列关于建立cDNA文库的叙述中，( )是错误的? A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNA B 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA C 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA D 新合成的双链DNA克隆到载体上，并导入受体细胞 10．用下列方法进行重组体的筛选，只有( )说明外源基因进行了表达。 A Southem blot B Northem blot C Western印迹 D 原位菌落杂交 二、填空题（每空1分，共25分） 1．限制性内切核酸酶分为三类，基因工程中应用的是____________ _。 2．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。 3．切口平移(nick translation)法标记DNA探针时应用的酶是_____ ___ __。 4．基因工程中的3种主要类型的载体是_______________、_____________、__________。 5．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是、和。 6．黏粒(cosmid)是杂合载体。 7．引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1) (2) 、 (3) (4) 。 8．Northern印迹和Southern印迹有两点根本的区别：(1)_ __、，(2)________ 9．PCR反应中常用的酶是______ _ 。
阶段质量检测（一）基因工程 （时间:45分钟，满分:100分） 一、选择题（每小题3分，共45分） 1.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（） A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和载体 B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C.只要是细菌中的质粒都可以直接作为基因工程中的载体 D.载体必须具备的条件之一是有多个限制酶切割位点，以便与外源基因进行连接 2.（浙江高考）天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（） A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B B.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B C.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞 D.将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞 3.日本下村修、美国沙尔菲和钱永健因在发现绿色荧光蛋白（GFP）等研究方面做出突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。GFP在紫外光的照射下会发出绿色荧光。依据GFP 的特性，你认为该蛋白在生物工程中的应用价值是（） A.作为标记基因，研究基因的表达 B.作为标记蛋白，研究细胞的转移 C.注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠 D.标记噬菌体外壳，示踪DNA路径 4•下列有关质粒的叙述，正确的是（） A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B.质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA C.质粒只有在侵入宿主细胞后，才能在宿主细胞内复制 D.基因工程中常用的载体除了质粒外，还有核DNA、动植物病毒以及入噬菌体的衍生物 5•下列有关基因工程的叙述正确的是（） A.用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的DNA片段可获得相同的黏性末端 B.以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同 C.检测到受体细胞中含有目的基因就标志着基因工程育种已经成功