基因工程试题库答案
基因工程练习题一、单项选择题1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA
片段中，一般需使用A.同种限制酶B.两种限制酶C.同种连接酶D.两种连接酶2．基因工程常用的受体有①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞
A.①②③④
B.①②③
C.②③④
D.①②④3．有关基因工程的叙述正确的是A.限制酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成是在细胞内完成的C.质粒都可作为载体D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料4．下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体A.细菌质粒B.噬菌体C.动植物病毒D.细菌核区的DNA5．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是A.人工合成目的基因B.目的基因与运载体结合C.将目的基因导入受体细胞D.目的基因的检测表达6．不是基因工程方法生产的药物是A.干扰素B.白细胞介素C.青霉素D.乙肝疫苗7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是A.限制酶和连接酶B.限制酶和水解酶C.限制酶和运载酶D.连接酶和运载酶8．下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因B.决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制D.有一个或多个限制酶切点9．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用A.促使目的基因导入宿主细胞中B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测和选择D.使目的基因容易成功表达10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是指A.用于检测疾病的医疗器械B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C.合成β—球蛋白的DNA
上一页下一页D.合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段11．基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺序，切点在G 和A之间，这是应用了酶的A．高效性 B.专一性C．多样性D.催化活性受外界条件影响12．上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋白的转基因牛，还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，转基因动物是指A.提供基因的动物B.基因组中增加外源基因的动物C.能产生白蛋白的动物D.能表达基因信息的动物13．作为基因的运输工具——运载体，必须具备的条件之一及理由是A.能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B.具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C.具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合D.对宿主细胞无伤害，以便于重组DNA的鉴定和选择14．下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是：
A．①②B．①③ C．①④ D．②③15．下列平末端属于同一种限制酶切割而成的是
A.①③
B.①④
C.②③
D.②④16．下列有关基因工程的叙述中，不正确的是A.DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来B.基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA 分子C.基因治疗主要是对有基因缺陷的细胞进行替换D.蛋白质中氨基酸序列可为合成目
的基因提供资料17．下列属于PCR技术的条件的是①单链的脱氧核苷酸序列引物②目的基因所在的DNA片段③脱氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA连接酶⑥DNA聚合酶⑦DNA限制性内切酶A.①②③⑤B.①②③⑥C.①②③⑤⑦D.①②④⑤⑦
上一页下一页18．下列有关PCR技术的叙述正确的是A.作为模板的DNA序列必须不断
的加进每一次的扩增当中B.作为引物的脱氧核苷酸序列必须不断的加进每一次的扩增当中C.反应需要的DNA聚合酶必须不断的加进反应当中D.反应需要的DNA连接酶必须不断的加进反应当中19．蛋白质工程中，直接需要进行操作的对象是A.氨基酸结构B.蛋白质的空
间结构C.肽链结构D.基因结构20．有关基因与酶关系的叙述正确的是A.每个基因都控制
合成一种酶B.酶的遗传信息编码在内含子的碱基序列中C.基因的转录、翻译都需要酶D.
同一生物体不同细胞的基因和酶是相同的21．某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶（Amy）基因a,通过基因工程的方法，将a转到马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块
茎细胞中存在。这一过程涉及A.目的基因进入受体细胞后，可随着马铃薯的DNA分子的复制而复制，传给子代细胞并表达B.基因a导入成功后，将抑制细胞原有的新陈代谢，开辟新的代谢途径C.细菌的DNA分子较小，可直接作为目的基因，导入受体中不需要整合到马铃薯的DNA分子中D.目的基因来自细菌，可以不需要运载体直接导入受体细胞22．下列
关于质粒的叙述，正确的是A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B.质粒
是细菌细胞质中能自主复制的小型环状双链DNA分子C.质粒只有在侵入宿主细胞后在宿主细胞内复制D.细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行23．关于基因工程的叙述，正确的是A.基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因B.细菌质粒是基因工程常用
的运载体C.通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种限制酶处理运
载体DNAD.为育成抗除草剂的农作物新品种导入的抗除草剂的基因只能以受精卵为受体24．下列育种没有使用生物工程技术的是A.获取高产青霉素的菌B.获得能分泌含抗体的
乳汁的母牛
上一页下一页C.生长较快的鲤鲫鱼D.利用工程菌生产的人胰岛素25．科学家将含人
的α—胰蛋白酶基因的DNA片段，注射到羊的受精卵中，该受精卵发育的羊能分泌含α
一抗胰蛋白质的奶。这一过程没有涉及A.DNA以其一条链为模板合成RNAB DNA按照碱基
互补配对原则自我复制C. RNA以自身为模板自我复制D. 按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质二、简答题二、简答题26．1979年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因
与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌体内表达成功。请根据图回答问题：（1）
此图表示的是采取从____________中获取目的基因的过程。（2）图中①DNA是以
______________为模板，③___________形成单链DNA，在酶的作用下合成双链DNA，从而
获得了所需要的基因。（3）图中②代表的是________，在它的作用下将质粒（______DNA）切出______末端。（4）图中③代表___________________DNA，含
______________________。（5）图中④表示将__________________。⑤表示
____________DNA随大肠杆菌的繁殖而进行_____________。27．干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血中提取，每升人血只能提取0.5μg，所以价格昂贵。现在美国加利福尼亚州的基因公司用如下图的方式生产干扰素。试分析原理和优点。（1）从人的淋巴细胞
中获取出干扰素基因，一般可用 _______的方法，此基因在基因工程中称为。（2）此基
因与细菌的质粒相结合要依靠，其作用部位是磷酸二酯
上一页下一页键，然后将目的基因移植到酵母菌体内，酵母菌在基因工程中叫。（3）
科学家在培养转基因植物时，常用中的质粒做运载体。质粒是基因工程最常用的运载体，
它具备运载体的哪些条件？①；②；③。④
。（4）细菌质粒能与干扰素基因能够拼接其原因是___________________。人的干扰
素基因在酵母菌体内合成了人的干扰素，说明了__________。28．科学家将人的生长素基
因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如右图据图回答：(1)人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是
_______________________________________(2)过程①表示的是采取的方法来获取目的基因。其过程可表示为：___________________。(3)图中(3)过程用人工方法，使体外重组
的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴细菌或病毒___ 细胞的途径。一般将受体大肠
杆菌用处理，使细胞处于能_____________________的生理状态，这种细胞称为
_______________细胞，再将表达载体溶于缓冲液中与___________混合，在一定的温度下
完成转化。(4)检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒，可采用的方法是，理由是：。
(5)如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培养，发生的现象是，原因是：。29（8分）为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河
三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新
品系。（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的处，DNA连接酶作用于处。（填“a”或“b”）（2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和法。（3）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性
同位素标记的作探针进行分子杂交检测，又要用方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。30、以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。
上一页下一页（1）获得目的基因的方法通常包括和。（2）切割和连接DNA分子所使
用的酶分别是和。（3）运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或，后者的形状成。（4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率，所以在转化后通常需要进行操作。（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和序列
上是相同的。31．（8分）[生物-现代生物科技专题]继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其
膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：（1）将人的生长激素基
因导入小鼠受体细胞，常用方法是。（2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入中，
原因是。（3）通常采用技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。（4）在研制膀胱生
物反应器时，应使外源基因在小鼠的细胞中特异表达。32、图为某种质粒表到载体简图，
小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI 的酶切位点，amp R为青霉素抗性基因，
tct R为四环素抗性基因，P启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端
分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。
据图回答：（1）将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用ＤＮＡ连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有、、三种。若
要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行。（2）用上述3种连接
产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素
的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是；（3）在上述实验中，为了防
止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是。33．基因工程又叫基因拼接技术。
上一页下一页(1)在该技术中，切割DNA 的工具是限制酶，它能识别某一特定核苷酸
序列，使两个核苷酸之间的断开。限制酶切割产生的DNA 片段末端有两种形式，分别是、。(2)基因工程中常用“分子缝合针”是连接酶，根据酶的来源不同可分为、两类，其中前者只可以连接，后者既可以连接也可以连接。34．生物学家通过基因工程培
育出了能够通过乳房生物反应器生产人的血清蛋白。（1）“分子手术刀” _ _ ，（2）“分子缝合针” ，（3）“分子运输车” 。（4）操作步骤：从人的____________获取
目的基因；目的基因与____________结合构建基因表达载体；在基因表达载体中还应插入
___________和终止子。然后把基因表达载体导入牛的____________，通过发育形成的牛
体细胞含人的_________________，成熟的牛产的的奶中含有___________________，证明
基因操作成功。（5）人的基因在牛体内能表达,说明人和牛___________
35．（14分）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan ）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的
技术流程。
请据图回答：（1）A 过程需要的酶有
_______________________________________________。（2）B 过程及其结果体现了质粒
作为运载体必须具备的两个条件是
_______________________________________________________________________。（3）
C 过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入___________。（4）
如果利用DNA 分子杂交原理对再生植株进行检测，D 过程应该用抗虫基因含kan 质粒
上一页下一页_______________________________________________________________作为探针。（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
①将转基因植株与________________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏
感型的数量比为1：1。②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则
获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占____________%。
上一页下一页基因工程练习题答案1—5 ADDDC 6—10 CABCB 11—15 BBABB 16—20 ABBDC 21—25 ABBAC26（1）基因文库（2）mRNA 逆(反)转录（3）特定的限制性内切酶环
状黏性（4）重组原胰岛素基因(目的基因)（5）将目的基因导入受体细胞重组扩增27．（1）人工合成目的基因（2）DNA连接酶、受体细胞（3）土壤农杆菌①能够在宿主细胞中自我复制②具有一个至多个限制酶切点，以便与外源基因连接③具有某些标记基因，
便于进行目的基因的鉴定和筛选。④对受体细胞无害（4）它们具有共同的物质基础和结
构基础，以及具有相同的黏性末端。不同生物共用一套密码子。28.（1）人的基因与大肠
杆菌DNA的组成成分相同，结构相同，并且具有相同的
黏性末端 (2) 反转录法(逆转录法)(从CDNA文库中获取)(3)侵染 Ca2+吸收周围环境
中的DNA分子感受态感受态细胞(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培
养基上，能够生长的，说明已导入了质粒A或重组质粒，反之则没有导入。因为普通质粒
A和重组质粒上都有抗氨苄青霉素基因(5)有的能生长，有的不能生长导入普通质粒A的细菌能生长，因为普通质粒A上有四环素抗性基因；导入重组质粒的细菌不能生长，因为目
的基因正插在四环素抗性基因中，破坏了其结构和功能。29、（1）a a（2）基因枪法
（花粉管通道法）（3）耐盐基因（目的基因）一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）30、（1）化学合成（人工合成）酶切获取（从染色体DNA分离/从生物细胞分离）（2）限制
性核酸内切酶（限制酶） DNA连接酶（连接酶）（3）质粒小型环状（双链环状、环状）（4）低筛选（5）氨基酸31、（1）显微注射（2）受精卵（或早期胚胎）受精卵（或早期胚胎细胞）具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达（3）DNA分子杂交（核酸探针）（4）膀胱上皮32、（１）目的基因－载体连接物载体－载体连接物目的基因－目的基因
连接物分离纯化（２）载体－载体连接物目的基因－载体连接物载体－载体连接物（３）
启动子mRNA （４）EcoRI和BamHI33. （1）磷酸二酯键黏性末端平末端连接酶、黏性末端、黏性末端、平末端（2）E·coliDNA、T434.（1）限制性内切酶（或限制酶）（2）DNA连接酶（3）基因进入受体细胞的载体（4）基因组文库载体启动子受精卵血清蛋白基
因人的血清蛋白（5）共用一套密码子35、（1）限制性内切酶和DNA连接酶（2）具有标
记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存（3）卡那霉素（4）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因（5）①非转基因植株②3：1 ③100
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基因工程练习题 一、单项选择题 1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，一般需使用 A.同种限制酶 B.两种限制酶 C.同种连接酶 D.两种连接酶 2．基因工程常用的受体有 ①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞 A.①②③④ B.①②③ C.②③④ D.①②④ 3．有关基因工程的叙述正确的是 A.限制酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成是在细胞内完成的 C.质粒都可作为载体 D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料 4．下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体 A.细菌质粒 B.噬菌体 C.动植物病毒 D.细菌核区的DNA 5．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是 A.人工合成目的基因 B.目的基因与运载体结合 C.将目的基因导入受体细胞 D.目的基因的检测表达 6．不是基因工程方法生产的药物是 A.干扰素 B.白细胞介素 C.青霉素 D.乙肝疫苗 7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是 A.限制酶和连接酶 B.限制酶和水解酶 C.限制酶和运载酶 D.连接酶和运载酶 8．下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件 A.具有某些标记基因 B.决定宿主细胞的生存 C.能够在宿主细胞中复制 D.有一个或多个限制酶切点 9．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用 A.促使目的基因导入宿主细胞中 B.促使目的基因在宿主细胞中复制 C.使目的基因容易被检测和选择 D.使目的基因容易成功表达 10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是指 A.用于检测疾病的医疗器械 B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子
1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的 DNA 片段中，普通需使用 A. 同种限制酶 B.两种限制酶 C. 同种连接酶 D.两种连接酶 2．基因工程常用的受体有 ①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞 A. ①②③④ B. ①②③ C. ②③④ D.①②④ 3．有关基因工程的表达正确的选项是 A.限制酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成是在细胞完成的 C.质粒都可作为载体 D.蛋白质的构造成份为合成目的基因提供资料 4．以下哪项不是基因工程中时常使用的用来运载目的基因的载 体 A.细菌质粒 B.噬菌体 C.动植物病毒 D.细菌核区的 DNA 5．基因工程是在 DNA 份子水平上发展设计施工的。在基因操作的根本步骤中，不发展碱基互补配对的是 A.人工合成目的基因 B. 目的基因与运载体结合 C.将目的基因导入受体细胞 D. 目的基因的检测表达 6．不是基因工程法生产的药物是 A.干扰素 B.白细胞介素 C.青霉素 D. 乙肝疫苗 7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是 A.限制酶和连接酶 B.限制酶和水解酶 C.限制酶和运载酶 D.连接酶和运载酶 8．以下哪项表达不是运载体必须具备的条件 A.具有某些标记基因 B.决定宿主细胞的生存 C.能够在宿主细胞中复制 D.有一个或者多个限制酶切点 9．水母发光蛋白由 236 个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用 A.促使目的基因导入宿主细胞中 B.促使目的基因在宿主细胞中复制 C.使目的基因容易被检测和选择 D.使目的基因容易成功表达 10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才干到达检测疾病的目 的。这里的基因探针是指 A.用于检测疾病的医疗器械 B.用放射性同位素或者荧光份子等标记的 DNA 份子
第二章习题 一、单选题 1.在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（ B ） A．I类限制酶 B. II类限制酶 C. III类限制酶 D.核酸内切酶 E. RNAase 2.下列关于同裂酶的叙述错误的是( B ) A. 是从不同菌种分离到的不同的酶,也称异源同工酶。 B. 它们的识别序列完全相同。 C. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。 D. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。 E. 两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。 3. 多数限制酶消化DNA的最佳温度是（ A ） A. 37℃ B.30℃ C.25℃ D.16℃ E.33℃ 4. 下列关于限制酶的叙述错误的是( B ) A. I类限制酶反应需要 Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸。 B. II类限制酶反应需要Mg2+、ATP。 C. III类限制酶反应需要Mg2+、ATP，S-腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。 D. I、III类限制酶对DNA有切割和甲基化活性，II类限制酶对DNA只有切割活性而无甲基化活性。 E. II类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。 5. 如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA上识别6bp的切割概率为( D ) A. 1/44 B. 1/66 C. 1/64 D.1/46 E. 1/106 6. 多数II类限制酶反应最适PH是 ( C ) A. PH:2-4 B. PH:4-6 C. PH:6-8 D. PH:8-10 E. PH:4-10 7. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( D ) A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。 B. 许多限制酶对线性DNA和超螺旋DNA底物的切割活性是有明显差异的。 C. 有些限制酶对同一DNA底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。 D. 限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液，是由于磷酸根会抑制限制酶反应。 E. BSA对许多限制酶的切割活性都有促进作用，所以酶切反应中常加入一定量的BSA。 8. II类限制酶反应中必须的阳离子是（ C ）
基因工程课后习题答案 【篇一：基因工程习题及答案】 选题 1. 在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（b） a ． i 类限制酶 b. ii 类限制酶 c. iii 类限制酶 d. 核酸内切酶 e. rnaase 2. 下列关于同裂酶的叙述错误的是 (b ) a. 是从不同菌种分离到的不同的酶 , 也称异源同工酶。 b. 它们的识别序列完全相同。 c. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。 d. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。 e. 两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别 位点。 3. 多数限制酶消化 dna 的最佳温度是（a） a. 37 ℃ b.30 ℃ c.25 ℃ d.16 ℃ e.33 ℃ 4. 下列关于限制酶的叙述错误的是 (b) a. i 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp 和 s- 腺苷蛋氨酸。 b. ii 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp 。 c. iii 类限制酶反应需要 mg2+ 、 atp ， s- 腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。 d. i 、 iii 类限制酶对 dna 有切割和甲基化活性， ii 类限制酶对 dna 只有切割活性而无甲基化活性。 e.ii 类限制酶要求严格的识别 序列和切割点，具有高度精确性。 5. 如果一个限制酶识别长度为 6bp , 则其在 dna 上识别 6bp 的切 割概率为 ( d ) a. 1/44 b. 1/66 c. 1/64 d.1/46 e. 1/106 6. 多数 ii 类限制酶反应最适 ph 是 (c ) a. ph:2-4 b. ph:4-6 c. ph:6-8 d. ph:8-10 e. ph:4-10 7. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( d) a.限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。 b.许多限制酶对线性 dna 和超螺旋 dna 底物的切割活性是有明显差 异的。
高中生物选修三“基因工程”综合练习 (20题含答案) 请回答下列有关克隆技术和基因编辑的问题： 1）克隆技术是指通过人工手段复制出与原体完全一样的 生物体。目前，克隆技术主要分为三种：体细胞核移植克隆、胚胎分裂克隆和基因克隆。其中，最常见的克隆方法是。 2）基因编辑技术是指通过改变生物体的基因序列来实现 对其性状的调控。CRISPR/Cas9系统是目前最常用的基因编辑技术之一，其中CRISPR指的是，Cas9则是。 3）基因编辑技术的应用非常广泛，其中包括疾病基因治疗、农业生产、生物安全等领域。以疾病基因治疗为例，基因编辑技术可以通过修复或替换患者体内的有缺陷基因，从而达到治疗疾病的目的。目前，基因编辑技术已经被用于治疗包括血友病在内的多种疾病。 答案：（1）体细胞核移植克隆（1分）（2）“类细菌重 复间隔簇”、“CRISPR相关蛋白9”（1分）（3）血友病（1分）逆转录病毒载体是目前应用较多的动物基因工程载体之一。它可以将外源基因插入到受体细胞染色体中，使外源基因随染色体DNA一起复制和表达。研究发现逆转录病毒基因组
（RNA）的核心部分包括三个基因：gag基因（编码病毒的核 心蛋白）、pol基因（编码逆转录酶）、env基因（编码病毒 的表面糖蛋白）。位于这些基因的两端有LTR序列（含有启 动子、调节基因等），控制着逆转录基因组核心基因的表达及转移。下图展示了构建逆转录病毒载体及用于培育转基因小鼠的过程。 1）逆转录病毒的遗传信息储存在RNA中，其中包含四 种核苷酸排列顺序中的四种脱氧核苷酸。 2）过程②中，外源基因一定要插入到病毒DNA的LTR 序列中的启动子后，其主要目的是控制外源基因的表达。 3）过程③中，导入病毒蛋白编码基因（gag，pol和env）的目的是合成组成病毒的蛋白质。 4）过程④中，逆转录病毒载体感染的细胞一般选择内细 胞团细胞，因为这类细胞能发育成新个体的各种组织器官（具有发育的全能性），处于囊胚期。
高三生物基因工程练习题及答案 第一节：选择题 1. 现代基因工程技术的突破是建立在下列发现的基础之上的： A. DNA双螺旋结构 B. 基因重组的概念 C. DNA复制的机制 D. 基因的表达调控机制 正确答案：A. DNA双螺旋结构 2. 下列哪个是基因工程的主要应用领域： A. 农业领域 B. 医学领域 C. 环保领域 D. 以上都是 正确答案：D. 以上都是 3. 基因工程按操作方式可分为以下几类，下面哪个选项顺序正确： A. 提取、分离、重组、转移 B. 分离、转移、提取、重组
C. 提取、分离、转移、重组 D. 分离、提取、转移、重组 正确答案：C. 提取、分离、转移、重组 4. 以下哪项不属于基因工程的基本技术之一： A. PCR B. SDS-PAGE C. DNA测序 D. 基因克隆 正确答案：B. SDS-PAGE 5. 哪个技术代表了原创性的DNA测序方法，为测序领域的巨大进步奠定了基础： A. Sanger测序法 B. PCR法 C. 杂交技术 D. 聚合酶链式反应技术 正确答案：A. Sanger测序法 第二节：填空题
1. 基因工程主要通过重组DNA来完成基因的操纵和转移。其中，常用的DNA序列寻找方法是______。 答案：PCR （聚合酶链式反应） 2. 基因工程筛选转化细胞常用的方法是______。 答案：筛选抗生素（抗生素筛选法） 3. 基因工程中，将外源基因与载体进行重组，得到重组DNA，这个过程称为______。 答案：基因克隆 4. 基因工程常用的工具酶是______。 答案：限制性内切酶 5. 将基因工程所重组得到的DNA片段转入细胞内部的过程称为 ______。 答案：转化（也可接受转染） 第三节：解答题 1. 请描述一下基因工程中的PCR技术的原理和应用。 答案：PCR（聚合酶链式反应）技术是一种体外人工合成DNA片段的技术。其原理是通过DNA解旋、引物延伸和DNA复制等步骤，使得DNA在体外被无限制地复制增加。PCR技术能够在短时间内扩增特定的DNA序列，具有高度灵敏性和特异性。在基因工程中，PCR技
基因工程习题集 一、名词解释：（20×4/） 1、基因 2、克隆 3、基因定位 4、PCR 5、基因工程工具酶 6、组织培养 7、限制性核酸内切酶 8、受体细胞 9、生物技术 10、基因沉默 11、重组DNA技术12、逆转录酶13、单克隆抗体14、核移植技术 15、细胞融合16、胞内酶17、凝胶过滤18、固定化酶 19、蛋白质工程 20、生物反应器 二、单项选择题：(60×2/) 1．下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（） A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒D．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良2．在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（）A．用mRNA为模板逆转录合成DNA B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成 C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D．由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA 3．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导人棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不．正确的是（） A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少 B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染 D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的 4．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是（） A．人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍B．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵 C．在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中 D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA 5.科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。以下有关该基因工程的叙述，错误的是（） A.采用反转录的方法得到的目的基因有内含子 B.基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的 C.马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞
作业一： 一、名词解释： 1、基因：是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸 序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。 2、基因组该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子 3、操纵子:原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然 后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。 4、启动子:是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至少一个转录起始点。在 真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。 5、增强子:是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约20 0bp的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。增强子通常占100～200bp长度，也和启动子一样由若干组件构成，基本核心组件常为8～12bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。 6、基因表达：是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转 变成具有生物活性的蛋白质分子。 二、简答题 1、说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。 答：限制性内切核酸酶采用三字母的命名原则,即属名+种名+株名的各一个首字母,再加上序号. 基本原则: 3-4个字母组成,方式是:属名+种名+株名+序号; 首字母: 取属名的第一个字母,且斜体大写;第二字母: 取种名的第一个字母,斜体小写;第三字母: (1)取种名的第二个字母,斜体小写;(2)若种名有词头,且已命名过限制酶,则取词头后的第一字母代替.第四字母: 若有株名,株名则作为第四字母,是否大小写,根据原来的情况而定,但用正体. 顺序号: 若在同一菌株中分离了几种限制酶,则按先后顺序冠以I,Ⅱ,Ⅲ,…等,用正体. 2、什么是限制性内切核酸酶的星号活性？受哪些因素影向？ 答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变，限制酶的特异性就会松动，识别的序列和切割都有一些改变，改变后的活性通常称第二活性，而将这种因条件的改变会出现第二
专题1 《基因工程》单元测试题 一、单选题(每小题只有一个正确答案) 1.在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是( ) A．限制酶和DNA连接酶 B．限制酶和水解酶 C．限制酶和载体 D． DNA连接酶和载体 2.下列说法正确的是( ) A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B．用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌 C．质粒是基因工程中惟一用作运载目的基因的载体 D．利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程不能称为“克隆” 3.某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。 下列有关叙述错误的是( ) A．步骤①所代表的过程是反转录 B．步骤②需使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶 C．步骤③可用CaCl2处理大肠杆菌，使其从感受态恢复到常态 D．检验Q蛋白的免疫反应特性，可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体特异性 反应试验 4.与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是( ) A．反转录酶 B． RNA聚合酶 C． DNA连接酶 D．解旋酶 5.转基因抗虫棉的研制过程中，为了检测抗虫基因是否成功导入，最简捷有效的方法是( ) A．用DNA探针检测受体细胞中的目的基因是否存在 B．用DNA探针检测受体细胞中的目的基因是否转录出相应的mRNA C．直接将培育出的棉株叶片饲喂原本的棉花害虫 D．检测标记基因是否正常地表达出来
6.下列哪项不是表达载体所必需的组成( ) A．目的基因 B．启动子 C．终止子 D．抗青霉素基因 7.下列说法正确的是( ) A．限制性核酸内切酶的识别序列是GAATTC，只能在G和A之间切断DNA B． DNA连接酶能够将任意2个DNA片段连接在一起 C．质粒是能够自主复制的小型双链环状DNA分子 D．基因工程的载体只有质粒一种 8.应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。下图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中不正确的是( ) A．图中①～⑤过程中都发生了碱基互补配对现象 B．图中①过程需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶 C．将PrG导入细胞Ⅱ，则Ⅱ最可能是浆B细胞 D．图中⑤过程需要的培养基中一定含有植物激素和无机养料 9.在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是( ) A．化学合成法 B．基因组文库法 C． cDNA文库法 D．多聚酶链式反应 10.中国新闻网报道，阿根廷科学家近日培育出了世界上第一头携带有两个人类基因的牛，因此有望生产出和人类母乳极其类似的奶制品。下列叙述正确的是( ) ①该技术将导致定向变异 ②DNA连接酶将目的基因与载体黏性末端的碱基对连接起来 ③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料
基因工程试题及答案 1简述基因工程的定义和现代生物技术的内容 基因工程是利用DNA体外重组或PCR扩增技术从某种生物基因组中分 离感兴趣的基因，或是用人工合成的方法获取基因，然后经过一系列切割，加工修饰，连接反应形成重组DNA分子，再将其转入适当的受体细胞，以 期获得基因表达的过程. 现代生物技术的内容：基因工程技术、蛋白质工程技术、细胞（组织）工程技术、酶工程技术、发酵工程技术 2请简述基因工程中使用的主要酶类和它们的功能限制性内切酶—主 要用于DNA分子的特异切割DNA甲基化酶—用于DNA分子的甲基化核酸酶—用于DNA和RNA的非特异性切割核酸聚合酶—用于DNA和RNA的合成核 酸连接酶—用于DNA和RNA的连接 核酸末端修饰酶—用于DNA和RNA的末端修饰 其它酶类--用于生物细胞的破壁，转化，核酸纯化，检测等3载体必 备的功能元件是什么，各有什么功能 至少有一个复制起点，因而至少可在一种生物体中自主复制。至少应 有一个克隆位点，以供外源DNA插入。至少应有一个遗传标记基因，以指 示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞。 4何为α互补，它在载体构建中有何作用 β—半乳糖苷酶基因有1021AA，基因产物不具酶活性，装配为四聚 体后才有酶活。该蛋白质可分为两部分：α链和β链。前者负责四聚体 装配，后者具β—半乳糖苷酶活性；只有当两者都存在时，才会表现出
酶活性，该作用称之为α-互补作用。这两个部分可独立存在，分别由两个基因编码。为α链编码的基因称之为lacZα(编码145AA)。这两个基因（LacZ和LacZα）均可作为标记基因。通过其是否具有β—半乳糖苷酶活性作为构建载体的筛选标志。 β—半乳糖苷酶基因的优点: a.酶催化某-Gal水解为兰色产物，检测直观 https://www.doczj.com/doc/3c19228111.html,cZα编码5'-端可容许很大的变化而不影响酶活性 https://www.doczj.com/doc/3c19228111.html,cZα和β链基因的分别表达可使载体小而容量大 5简述利用T7噬菌体启动子的pET系列表达载体的工作原理。 pET载体及其表达系统pET-5a：在载体的基本结构上加入了T7噬菌体启动子序列及其下游的几个酶切位点。当外源基因插入到这些酶切位点后，就可在特定的宿主细胞中诱导表达。T7噬菌体启动子：只能由T7噬菌体的RNA聚合酶识别并启动转录，而大肠杆菌的RNA聚合酶不能作用于T7噬菌体启动子。用于表达的宿主细胞必须能表达T7噬菌体的RNA聚合酶。常用的pET表达载体的宿主菌：大肠杆菌BL21（DE3）。通过宿主控制T7RNA聚合酶的量来实现的，即在宿主细胞中引入一个带有T7噬菌体的溶菌酶编码基因的质粒，如pLyS或pLyE，它们分别低量和高量表达T7噬菌体的溶菌酶。该溶菌酶可抑制T7RNA聚合酶的活性，从而减少在未诱导情况下外源基因的表达。使启动子的控制效应更严谨。在pET载体上装载lacⅠ基因，提高阻抑物的浓度。可利用T7-lac启动子（在T7启动子序列下游装入一个由25bp组成的lacO操纵子序列），当阻抑物结合在lacO位点时，即使存在T7RNA聚合酶，外源基因也无法表达。只有当诱导物存在时，才能解开T7RNA聚合酶基因和外源基因表达的双重阻遏。6请简述PCR引物设计的要点
基因工程期末试题及答案 一、选择题（每题2分，共20分） 1. 基因工程是指利用现代生物技术手段对DNA进行操作和控制的一种技术。 2. 基因工程的主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。 3. DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。 4. 在基因工程中，限制性内切酶用于切割DNA分子，产生特定片段。 5. 基因工程可以产生转基因生物，通过对生物基因进行改造，使其具有特定的特性。 6. CRISPR/Cas9是一种常用的基因编辑工具，可以精确地修改基因组中的特定片段。 7. 基因工程在医学领域可以用于基因治疗，通过修复或替换异常基因，治疗遗传性疾病。 8. 在农业领域，基因工程可以用于改良作物，提高产量和抗病虫害能力。 9. PCR是一种常用的基因扩增技术，可以通过复制DNA片段来放大特定基因。 10. DNA梯度离心是基因工程中常用的分离DNA片段的方法。
二、问答题（每题10分，共30分） 1. 请简要介绍基因工程的基本原理和主要方法。 基因工程的基本原理是通过对DNA进行操作和控制来改变生物的遗传性状。其主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。基因克隆是通过将特定DNA片段放入载体中，然后转化到宿主细胞中，使重组DNA在宿主细胞中大量复制。PCR是一种基因扩增技术，通过在DNA复制过程中加入特定引物，使特定基因片段在体外大量扩增。DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。 2. 什么是转基因生物？请举例说明。 转基因生物是指经过基因工程改造，将外源基因导入到目标生物体中，使其具有新的遗传性状的生物。例如，将耐旱基因导入水稻，使其具有抗旱能力；将Bt毒素基因导入棉花，使其具有抗虫能力。 3. 基因工程在医学领域有哪些应用？举例说明。 基因工程在医学领域可以用于基因治疗、疫苗研发等。例如，利用基因工程技术可以修复或替换患者体内异常基因，治疗遗传性疾病。另外，基因工程也可以用于疫苗研发，通过基因工程技术将病原体的基因导入宿主细胞，产生病原体的抗原蛋白，从而刺激免疫系统产生抗体，用于预防传染病。 4. 基因工程在农业领域有哪些应用？举例说明。 基因工程在农业领域可以用于改良作物、提高产量和抗病虫害能力等。例如，通过基因工程技术将耐盐碱基因导入水稻，使其适应盐碱
《基因工程》 、选择题（每小题 1.5分，共15分） 1. 基因工程的创始人是（）。 A A. Kornberg B W. Gilbert C P. Berg D S. Cohen 关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有）不太恰当。 由作用于同一 DNA 序列的两种酶构成B 这一系统中的核酸酶都是II 类限制性内切核酸酶 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对 DNA 进行修饰 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统 在DNA 的3 ' -5 '链上，基因的起始密码子是 （） (或 GTG ) B AGT C TAG D TGA 双链DNA 的特定碱基对 双链DNA 的特定碱基序列 特定的三联密码 5' .3' DNA 内切酶D 5' 3 ' DNA 外切酶 F 面关于松弛型质粒（relaxed plasmid ） 性质的描述中，（） 是不正确的。 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。 关于T4 DNA Ligase ，下列说法中哪一项不正确 从特定组织或细胞中提取 DNA 或RNA B 用反转录酶合成mRNA 的对应单链DNA 以新合成的单链 DNA 为模板合成双链DNA 新合成的双链DNA 克隆到载体上，并导入受体细胞 、填空题（每空1分，共25分） 基因工程中的3种主要类型的载体是 野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是 杂合载体。 Northern 印迹和Southern 印迹有两点根本的区别: PCR 反应中常用的酶是 II 限制性内切核酸酶可以特异性地识别 （） 末端转移酶是合成酶类，具有 活性。 关于cDNA 的最正确的说法是（ 同mRNA 互补的单链 DNA 以mRNA 为模板合成的双 链 DNA D 同mRNA 互补的双链DNA 以上都正确 A ATG 以上都正确 3’ DNA 聚合酶C C 通常带有抗药性标记。D B 可以在氯霉素作用下进行扩增。 是最常用的DNA 连接酶。B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。 不但能连接粘性末端。 最适温度37 °C 。 下列关于建立cDNA 文库的叙述中 ） 是错误的？ 10 .用下列方法进行重组体的筛选，只有 （）说明外源基因进行了表达。 A Southem blot B Northem blot C Western 印迹D 原位菌落杂交 限制性内切核酸酶分为三类 基因工程中应用的是 为了防止DNA 的自身环化 可用 去双链DNA 切口平移(nick translation) 法标记DNA 探针时应用的酶是 黏粒(cosmid)是 引物在基因工程中至少有4个方面的用途：⑴ (2) (1)_ 二、，(2).
2022-2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试精选专练V（带答案） 一.综合考核题库(共35题) 1. Ti质粒 正确答案:是根癌农杆菌染色体外的遗传物质，为共价闭合双链环状DNA分子。 2. DNA连接酶反应的时间一般为_____________就足以取得较好的连接效果。 正确答案:30min 3. 基因重组的载体必须具备下列哪些特点： A、本身是一个复制单位，能在受体细胞中复制 B、插入外源DNA后也不影响自身的复制 C、易于进入受体细胞 D、通过自身的酶系在受体细胞中复制 E、通常带有抗性基因，易于筛选和鉴定 正确答案:A,B,C,E 4. 利用限制性核酸内切酶降解基因组DNA，通常选择几个碱基识别序列的限制性核酸内切酶 A、4 B、5 C、6 D、7 正确答案:A 5. 基因克隆中低拷贝数的质粒载体是不起作用的。 正确答案:错误
6. 下列哪种酶的发现是PCR反应能迅速发展和广泛应用的主要原因 A、TaqDNA聚合酶 B、核酸内切酶 C、T4多核苷酸激酶 D、S1核酸酶 正确答案:A 7. 基因操作的两大关键技术是 A、工具酶与载体 B、转化细胞和供体细胞 C、基因克隆和基因重组 D、克隆载体和表达载体 正确答案:A 8. 基因工程最知名的也是饱受争议的应用之一是_____________。 正确答案:转基因食品 9. 主要用来提高扩增特异性的特殊PCR是 A、反转录PCR B、Real-Time PCR C、巢式PCR D、反向PCR 正确答案:C 10. 基因工程中所用的大肠杆菌菌株是__________的菌株，这样可以避免从中分离出来的DNA，不被限制性核酸内切酶完全消化或完全不被消化。 正确答案:甲基化酶失活突变 11. 基因治疗是把健康的外源基因导入
基因工程题库及答案汇编 一、填空题 1．基因工程是年代发展起来的遗传学的一个分支学科。基因工程技术的诞生，使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统的生物技术时代，走向的时代。 2．随着基因工程技术的诞生和发展，人类可以通过、和等三种主要生产方式，大量取得过去只能从组织中提取的珍稀蛋白，用于研究或治病。 3．Cohen 等在年构建了第一个有功能的重组DNA 分子。 4．基因工程的两个基本特点是：(1)，(2)。 5．基因克隆中三个基本要点是：；和。 6．年，美国斯坦福大学等在上发表了题为：“将新的遗传信息插入SV40 病毒DNA 的生物化学方法：含有λ噬菌体基因和E．coli 半乳糖操纵子的环状SV40 DNA”的论文，标志着基因工程技术的诞生。这一工作具有划时代的意义，但是他们并没有。7．克隆基因的主要目的有四：(1)；(2)；(3)；(4)。 填空题答案 1． 70；按人们的需要而定向地改造和创造具有新的遗传性品种。2．细菌发酵；真核细胞培养；乳腺生物反应器。3． 1973 4． (1)分子水平上的操作；(2)细胞水平上的表达。5．克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择 6． 1972；P．Berg；Proc．Natl．Acad．Sci．USA；证明体外重组的 DNA 分子具有生物学功能 7． (1)扩增 DNA； (2)获得基因产物；(3)研究基因表达调控；(4)改良生物的遗传性 二、选择题(单选或多选) 1．因研究重组DNA 技术而获得诺贝尔奖的科学家是( ) (a)A．Komberg (b)W．Gilbert (c)P．Berg (d) B．McClintock 2．第一个作为重组DNA 载体的质粒是( ) (a) pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8 3．第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是( ) (a)EcoRI (b)EcoB (c)EcoC (d)EcoRⅡ 4．P Berg 构建SV40 二聚体时用了几种不同的酶，其中( )的作用是制造隐蔽的5’端。 (a)末端转移酶(b)λ外切核酸酶(c)外切酶Ⅲ(d)DNA 连接酶 选择题(单选或多选)答案：1．C；2．C；3．a；4．b。 三、简答题 1．为什么说基因工程技术是60 年代末70 年代初发展起来的? 答：这是因为：(1)1967 年发现了连接酶；(2)大肠杆菌的转化技术是 1970 年获得突破；(3)限制性内切核酸酶的分离始于 1970 年；(4)Berg 在 1972 年构建了第一个重组的 DNA 分子。 2．重组DNA 的含义是什么? 答：将一个生物的 DNA 片段插入到一个载体中，并引入到另一生物体中进行繁殖。 3．如何理解基因工程的两个特点? 答：基因工程的两个基本特点是分子水平的操作和细胞水平的表达。分子水平的操作包括 DNA 分离、切割和连接(还有其他一些 DNA 的修饰等)。由于体外重组 DNA 的最终目的是要改变生物的遗传性，所以分子水平的操作和细胞水平的表达是基因工程的两个最基本的特点。 4．在Cohen 构建有生物功能重组体的第一步实验中，用EcoRI 切割了R6-5 质粒，然后转化E．coli C600，在卡那霉素抗性子板上筛选到了pSCl02，它是由R6-5 的三个EcoRI 片段组成，请推测这个质粒具有什么遗传特性? 答：至少可说明两点：(1)pSC 102 含有复制起点，是一个独立的复制子；(2)重组 DNA分子中的卡那霉素抗性基因得到了表达。 5．什么是动物乳腺生物反应器? 答：能够分泌乳汁的转基因动物生产其他来源的基因产品，并通过乳腺分泌出来。 四、问答题 1．S．N Cohen 于1973 年构建了三个重组体，pSCl02，pSCl05，pSCl09 请说明这三个重组体是如何获得的?各说明了什么? 答：pSCl02：用 EcoRI 切割 R6-5，混合转化大肠杆菌，在卡那霉素抗性平板上选择了一个克隆，并从该克隆中分离了重组质粒 DNA，命名为 pSCl02。该质粒是由质粒 R 6-5的 EcoRI 酶切片段Ⅲ、V 和Ⅷ在体内连接的，说明可以利用体内连接构建重组体。 pSCl05：作者分别用 EcoRI 切割质粒 pSC 101、pSC 102,然后加入 DNA 连接酶进行连接后转化大肠杆菌，在四环素和卡那霉素双抗性的平板上筛选到 pSC 105。说明用质粒作为载体，体外连接可得到有功能的重组体。 pSCl09：pSC 101 与 RSF 1010 的共整合，即用 EcoRl 分别切割这两个质粒，然后在体外进行重组。说明两个独立的复制子体外重组后仍具有生物功能。 2．基因克隆是如何使含有单个基因的DNA 片段得到纯化的? 答：大分子量的 DNA 会含有许多特殊限制性内切核酸酶的限制位点，因此用一种限制酶处理一完整染色体或整个基因组会产生许多不同的 DNA 片段，每一个片段带有基因组的一个不同的基因或一个不同的小片段。当全部片段与用同种限制酶处理过的载体分子混合时(图