《基因工程》
一、选择题(每小题1、5分,共15分)
1.基因工程的创始人就是 ( )。
A A、 Kornberg
B W、 Gilbert
C P、 Berg
D S、 Cohen
2.关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有( )不太恰当。
A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成
B 这一系统中的核酸酶都就是Ⅱ类限制性内切核酸酶
C 这一系统中的修饰酶主要就是通过甲基化作用对DNA进行修饰
D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统
3.在DNA的3’-5’链上,基因的起始密码子就是 ( )
A ATG(或GTG)
B AGT
C TAG
D TGA
4.II限制性内切核酸酶可以特异性地识别 ( )。
A 双链DNA的特定碱基对
B 双链DNA的特定碱基序列
C 特定的三联密码
D 以上都正确
5.末端转移酶就是合成酶类,具有( )活性。
A 3’→5’DNA聚合酶
B 5’→3’DNA聚合酶
C 5’→3’DNA内切酶
D 5’→3’DNA外切酶
6.下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中,( )就是不正确的。
A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制,因而有较多的拷贝数。
B 可以在氯霉素作用下进行扩增。
C 通常带有抗药性标记。
D 同严紧型质粒融合后,杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。
7.关于cDNA的最正确的说法就是( )。
A 同mRNA互补的单链DNA
B 同mRNA互补的双链DNA
C 以mRNA为模板合成的双链DNA
D 以上都正确
8.关于T4 DNA Ligase,下列说法中哪一项不正确? ( )
A 就是最常用的DNA连接酶。
B 不但能连接粘性末端,还能连接齐平末端。
C 不但能连接粘性末端。
D 最适温度37 ℃。
9.下列关于建立cDNA文库的叙述中,( )就是错误的?
A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNA
B 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA
C 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA
D 新合成的双链DNA克隆到载体上,并导入受体细胞
10.用下列方法进行重组体的筛选,只有( )说明外源基因进行了表达。
A Southem blot
B Northem blot
C Western印迹
D 原位菌落杂交
二、填空题(每空1分,共25分)
1.限制性内切核酸酶分为三类,基因工程中应用的就是____________ _。
2.为了防止DNA的自身环化,可用_____________去双链DNA__________________。
3.切口平移(nick translation)法标记DNA探针时应用的酶就是_____ ___ __。
4.基因工程中的3种主要类型的载体就是_______________、_____________、__________。
5.野生型的M13不适合用作基因工程载体,主要原因就是、与。
6.黏粒(cosmid)就是杂合载体。
7.引物在基因工程中至少有4个方面的用途:(1) (2) 、 (3) (4) 。
8.Northern印迹与Southern印迹有两点根本的区别:(1)_ __、,(2)________
9.PCR反应中常用的酶就是______ _ 。
10.感受态的大肠杆菌细胞在温度为______ _时吸附DNA, _________时摄人外源DNA。
11、用碱法分离质粒DNA时,染色体DNA之所以可以被除去,就是因为。
12、除具有较低的分子量外,一个理想的质粒载体必需包括______、__________、_______三个部分。
13.转基因植物操作中常用的载体就是。
14、 pcDNA3、1用于。
三、名词解释(每小题4分,共20分)
1.目的基因:
2.基因工程:
3.载体:
4.Western印迹:
5.核酸分子杂交:
四、简答题(每小题10分,共20分)
1、基因工程的基本操作程序?
2、怎样制备目的基因?
《基因工程》评分标准与参考答案
一、选择题:每小题1、5分,共15分;多选不得分。
1d; 2b; 3a; 4b; 5b; 6c; 7c; 8c; 9a; 10c
二、填空题: 每空1分,共25分
1.II类酶。
2.碱性磷酸酶;5’端的磷酸基团
3.DNA聚合酶I。
4.质粒DNA;病毒DNA;质粒与病毒DNA杂合体
5.没有合适的限制性内切核酸酶识别位点;选择标记
6.质粒与λ噬菌体
7.合成探针;合成cDNA;用于PCR反应;进行序列分析
8.印迹的对象不同:Northern就是RNA,Southern就是DNA;)电泳条件不同,前者就是变性条件,后者就是非变性电泳
9.Tag DNA 聚合酶
10.0?C;42?C
11.染色体变性后来不及复性
12.复制起点;选择标记;克隆位点
13.Ti质粒
14.外源基因导入哺乳动物细胞
三、名词解释(每小题4分,共20分)
1.在基因工程中被操作的DNA序列;又称外源基因(foreign gene/exogenous gene),主要就是指编码蛋白质的结构基因(structural gene);它们可以从自然界中已有的物种基因组(genome)中分离出来,也可以用人工的方法合成。
2.按照人们的意愿,进行严密的设计,通过体外DNA重组与转基因等技术,有目的地改造生物种性,生产生物活性物质,甚至创造新物种的技术。
3.携带外源基因进入受体细胞的DNA分子。
4.Western印迹就是将蛋白质经电泳分离后从凝胶中转移到固相支持物上;然后用特异性的抗体进行检测;可说明基因就是否进行了表达。
5.用标记的探针检测出DNA或RNA同源序列的技术;原理就是碱基互补;常用的有Southern blot、Northern blot与原位杂交。
四、简答题(20分)
1. 目的基因的制备;目的基因与载体连接;目的基因导入受体细胞;目的基因的表达与检测。或者:转、接、切、增、检(加以解释)。
2. 直接分离法、构建基因文库分离法、PCR扩增法、人工合成法等。(加以解释)
五、实验与论述题(20分)
①由于基因已被测序,可通过RT-PCR方法克隆该基因;
②也或通过基因文库分离法获得该基因;
③基因可以在大肠杆菌中作为融合蛋白质或分泌蛋白质进行表达。
具体操作如下:
④制备目的基因;⑤连接到T-载体;⑥转化大肠杆菌,提质粒;⑦测序;⑧酶切,回收目的基因,连接到原核表达载体;⑨再转化大肠杆菌,大量培养;⑩分离、纯化与检测表达产物。
一、1.若已知工质的绝对压力P=，环境压力Pa=，则测得的压差为(B)A.真空pv= B.表压力pg=.真空pv= D.表压力p g= 2.简单可压缩热力系的准平衡过程中工质压力降低，则(A) A.技术功为正 B.技术功为负 C.体积功为正 D.体积功为负 3.理想气体可逆定温过程的特点是(B)=0 =>W
基因工程基本过程 基因工程（genetic engineering），也叫基因操作、遗传工程，或重组体DNA 技术。它是一项将生物的某个基因通过基因载体运送到另一种生物的活性细胞中，并使之无性繁殖（称之为"克隆"）和行使正常功能（称之为"表达"），从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。一般说来，基因工程是专指用生物化学的方法，在体外将各种来源的遗传物质（同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工合成的DNA片段）与载体系统（病毒、细菌质粒或噬菌体）的DNA 结合成一个复制子。这样形成的杂合分子可以在复制子所在的宿主生物或细胞中复制，继而通过转化或转染宿主细胞、生长和筛选转化子，无性繁殖使之成为克隆。然后直接利用转化子，或者将克隆的分子自转化子分离后再导入适当的表达体系，使重组基因在细胞内表达，产生特定的基因产物。 常用的工具酶 限制性内切酶—主要用于DNA分子的特异切割 DNA甲基化酶—用于DNA分子的甲基化 核酸连接酶—用于DNA和RNA的连接 核酸聚合酶—用于DNA和RNA的合成 核酸酶—用于DNA和RNA的非特异性切割 核酸末端修饰酶—用于DNA和RNA的末端修饰 其它酶类--用于生物细胞的破壁、转化、核酸纯化、检测等。 主要过程有为四步： 一．获得目的基因 有多种方法可获得目得基因 1.构建cDNA文库分离目的基因 过程： （1）从真核细胞中提取mRNA，以其为模板，在反转录酶的作用下合成cDNA的第一条链。 （2）以第一条链为模板，以反转录酶或DNA聚合酶Ｉ作用下合成cDNA的第二条链。 （3）在甲基化酶作用下使cDNA甲基化。
（4）接头或衔接子连接。 （5）凝胶过滤分离cDNA。 （6）通过核酸探针法或免疫反应法从cDNA文库中分离特异cDNA克隆。 2.人工化学合成法 适于已知的核苷酸序列且校小的ＤＮＡ片断合成，常用方法有磷酸二酯法、磷酸三酯法、亚磷酸三酯法、固相合成法、自动化合成法等。 过程：先用以上方法合成基因DNA不同部位的两条链的寡核苷短片段，再退火成为两端形成粘性末端的DNA双链片段。然后将这些DNA片段按正确的次序进行退火连接起来形较长的ＤＮＡ片段，再用连接酶连接成完整的基因。 3.利用PCR技术直接扩增目的基因 PCR（Polymerase Chain Reaction）法，又称为聚合酶链反应或PCR扩增技术，已知待扩增目的基因或DNA片段两侧的序列，根据该序列化学合成聚合反应必需的双引物，类似于DNA的天然复制过程，用ＰＣＲ法进行扩增，特异地合成目的cDNA链，用于重组、克隆。 二．载体的选择与制备 1.载体的选择（以质粒为例） ⑴载体必须是复制子。 ⑵具有合适的筛选标记，便于重组子的筛选。 ⑶具备多克隆位点（MCS），便于外源基因插入。 ⑷自身分子量较小，拷贝数高。 ⑸在宿主细胞内稳定性高。 (6)应具有很强的启动子，能为大肠杆菌的RNA聚合酶所识别 (7)应具有阻遏子，使启动子受到控制，只有当诱导时才能进行转录。 (8)应具有很强的终止子，以便使RNA聚合酶集中力量转录克隆的外源基因，而不转录其他无关的基因，且所产生的mRNA较为稳定。 (9)所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号。 2.制备有多种分离质粒的方法，如碱裂解法、煮沸裂解法、层析柱过滤法等。 目前一般使用碱变性法制备质粒DNA。这个方法主要包括培养收集细菌菌体，裂解细胞，将质粒DNA与染色体DNA分开及除去蛋白质和RNA。
1．cDNA克隆与基因组克隆有何不同? 2．怎样将一个平末端DNA片段插入到EcoRI限制位点中去? 3．在Cohen构建有生物功能重组体的第一步实验中，用EcoRI切割了R6-5质粒，然后转化E．coli C600，在卡那霉素抗性子板上筛选到了pSCl01，它是由R6-5的三个EcoRI片段组成，请推测这个质粒具有什么遗传特性? 4．某学生在用EcoRI切割外源DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因? 5．在序列5’—CGAACATATGGAGT-3’中含有一个6bp的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么? 6．用连接酶将Sau 3AI('GATC)切割的DNA 与经BamHI(G 'GATCC)切割的DNA连接起来后，能够被BamHI切割的机率有多大(用百分比表示)? 7．用Klenow酶填补的办法可使5’黏性末端转变成平末端。这种方法常使DNA 上的某些限制酶的识别位点消失。请 问，对于下列限制酶，用这种方法处
理会不会使它们的识别序列都消失? Sau 3AI('GATC)；Taq I(T 'CGA)， BssHⅡ(G 'CGCGC)。 8.以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码动物激素的基因，并使之在大肠杆菌中进行表达，简要说明实验中可能遇到的问题及可能的解决办法。 9．假定你分离到一个E．coli的Thr-突变体，并推测有可能是ThrA基因突变。 请设计一个方案用PCR从染色体DNA 扩增突变的ThrA基因，测定突变的序 列。(注：E．coli野生型的ThrA基因 的序列是已知的) 10．酵母人工染色体要在酵母细胞中稳定存在，必须有哪些基本的结构? 11．用EcoRI和HindⅢ分别切割同一来源的染色体DNA，并进行克隆，在前者的克隆中筛选到A基因，但在后者的克隆中未筛选到A基因，请说明原因。 12．一个携带有氨苄和卡那霉素抗性基因的质粒被仅在卡那霉素基因中有识别位点的EcoRI消化。消化物与酵母DNA连接后转
2011-2012硅酸盐专业《热工基础》期末试题A卷 一、名词解释：（30分） 1、流体的密度—— 2、静压强—— 3、体积流量—— 4、发热量—— 5、相对湿度—— 6、黑体—— 7、干燥—— 8、完全燃烧—— 9、高温系数—— 10、干球温度—— 二、填空：（25分） 1.煤的工业分析法组成主要由__________、__________、__________、__________四种。 2.空气过剩系数是指_________________与__________________之比。 3.表示固体和液体燃料组成的基准有__________、__________、__________、__________四种。 4.传热的基本方式有__________ 、__________和__________。 5、在燃烧学中空气分为__________和________，而在干燥学中空气分为_________和________。 6、不完全燃烧分为______________和______________。 7、表示湿度的方法有三种：________、_____________、_________其中_____是为了测定方便； ______表示空气的相对干燥能力；________便于干燥计算。 三、简答题：（25分） 1、燃烧计算的内容有哪些？ 2、如何对煤进行工业分析？ 3、如何根据雷诺准数的大小来判断流体的流态？ 4、冬天用手接触相同温度的铁块和木块时感到铁块比木块凉，这是为什么？
5、流态有几种？表现形式有何不同？如何判定？ 五、计算题（20分） 1、水从三段串联管路流过，管路直径分别为：d1=100mm, d2=50mm, d3=25mm, ω3=10m/s,求ω1和ω2. 2、已知标态下CO2的密度为1.96kg/m3, O2的密度为1.43kg/m3，CO 的密度为1.25kg/m3, N2的密度为1.25kg/m3。今测得某水泥回转窑窑尾废气的体积百分比：CO2 =28.8% ，O2=1.0% ，CO =0.2%，N2=70%，求此废气标态时的密度。 3、一炉壁由耐火砖砌成，厚度δ=250mm，耐火砖内表面温度t1=1000℃, 外表面温度t2=100℃, 耐火砖平均导热系数为λ=1.28W/(m.℃)。求通过炉壁的热流量。
基因工程的基本内容 基因工程的基本内容一.本周教学内容：基因工程的基本内容二.学习内容：本周学习基因工程的操作过程，指导进行基因工程操作时需要的基本工具：限制酶、连接酶、运载体，了解他们的特点，及其在基因工程中的应用。理解基因工程操作的基本步骤，理解如何提取目的基因，怎样将目的基因导入受体细胞，怎样鉴定试验的成果等等。基因工程的基本内容 一. 本周教学内容： 基因工程的基本内容 二.学习内容： 本周学习基因工程的操作过程，指导进行基因工程操作时需要的基本工具：限制酶、连接酶、运载体，了解他们的特点，及其在基因工程中的应用。理解基因工程操作的基本步骤，理解如何提取目的基因，怎样将目的基因导入受体细胞，怎样鉴定试验的成果等等。了解基因工程对现代社会的贡献及基因工程应用的发展。 三. 学习重点： 1. 基因工程的概念 2. 基因工程的操作工具 3. 运载体的基本条件 4. 基因工程的基本操作步骤
5. 基因工程的应用和发展 四. 学习难点： 1. 基因工程工具：限制酶、运载体 2. 运载体的基本要求 3. 基因工程的操作步骤 4. 如何检测基因操作 5. 基因工程应用的两面性 五. 学习过程： （一）概念：基因工程——又叫基因拼接技术或DNA重组技术。 是指在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。 概念要点： 1. 在DNA分子水平上进行设计操作的 2. 在生物体外实现的基因改造 3. 对受体细胞进行无性繁殖 4. 重组基因最终表达获得性状 （二）基因操作的工具 1. 抗虫棉的培育：将抗虫的基因从某种生物（如苏云金芽孢杆菌）中提取出来，“插入”到棉花的细胞中，与棉细胞
基因工程 一名词解释 DNA，1、限制与修饰系统：限制酶的生物学功能一般被认为是用来保护宿主细胞不受外源DNA的感染，可讲解外 来 从而阻止其复制和整合到细胞中。一般来说，与限制酶相伴而生的修饰酶是甲基转移酶，或者说是甲基化酶，能保护 自身的 DNA不被讲解。限制酶和甲基转移酶组成限制与修饰系统。 2、各种限制与修饰系统的比较 Ⅱ型Ⅰ型Ⅲ型 识别位点4~6bp，大多为回文序列二分非对称5~7bp 非对称 切割位点在识别位点中或靠近识别位点无特异性，至少在识别位点外100bp 识别位点下游 24~26bp 简答 1. 何谓 Star activity？简述Star activity的影响因素及克服方法？ 答：在极端非标准条件下，限制酶能切割与识别序列相似的序列，这个改变的特征称为星星活性。 pH 引起星星活性的的因素：①高甘油浓度（>5%）；②酶过量（ >100U/μl ）；③低离子强度（ <25mmol/L）；④高(> ；⑤有机溶剂如DMSO （二甲基亚砜）、乙醇、乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺等；⑥用其它二价阳离子 星星活性的抑制措施：①减少酶的用量，避免过量酶切，减少甘油浓度；②保证反应体系中无有机溶剂或乙醇；③提高离子强度到100 ～ 150mM（在不抑制酶活性的前提下）；④降低反应pH至；⑤使用Mg2+作为二价阳离子。 2. 试回答影响限制性内切核酸酶切割效率的因素？（影响酶活性的因素？） 答：外因：反应条件、底物纯度（是否有杂质、是否有盐离子和苯酚的污染）、何时加酶、操作是否恰当，反应体系的选择、反应时间的长短 内因：星星活性、底物甲基化、底物的构象 3、 DNA末端长度对酶切割的影响 答：限制酶切割 DNA 时，对识别序列两端的非识别序列有长度要求，也就是说在识别序列两端必须要有一定数量的 核苷酸，否则限制酶将难以发挥切割活性。在设计PCR引物时，如果要在末端引入一个酶切位点，为保证能够顺利切 割扩增的 PCR产物，应在设计的引物末端加上能够满足要求的碱基数目。一般需加 3 ～4 个碱基对。 4、何为载体？一个理想的载体应具备那些特点？ 答：将外源 DNA 或目的基因携带入宿主细胞的工具称为载体。载体应具备：①在宿主细胞内必须能够自主复制（具 备复制原点）；②必须具备合适的酶切位点，供外源DNA 片段插入，同时不影响其复制；③有一定的选择标记，用于 筛选；④其它：有一定的拷贝数，便于制备。 5 抗性基因（ Resistant gene）是目前使用的最广泛的选择标记，常用的抗生素抗性有哪几种？并举两例说明其原理？ 答：氨苄青霉素抗性基因（ ampr）、四环素抗性基因（tetr ）、氯霉素抗性基因（ Cmr）、卡那霉素和新霉素抗性基因（ kanr , neor ）以及琥珀突变抑制基因supF 。 ⑴青霉素抑制细胞壁肽聚糖的合成，与有关的酶结合，抑制转肽反应并抑制其活性。氨苄青霉素抗性Ampr 编码一个酶，可分泌进入细胞的周质区，并催化β - 内酰胺环水解，从而解除氨苄青霉素的毒性。 ⑵四环素与核糖体 30S 亚基的一种蛋白质结合，从而抑制核糖体的转位。 Tetr 编码一个由 399 个氨基酸组成的膜 结合蛋白，可阻止四环素进入细胞。 6. 何为α - 互补？如何利用α - 互补来筛选插入了外源DNA 的重组质粒？ 答：α - 互补指 lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β - 半乳糖苷酶阴性的突变体之间实现互补。α - 互补是基于在两个不同的缺陷β－半乳糖苷酶之间可实现功能互补而建立的。实现α- 互补主要有两部分组成：LacZ △ M15 ，放在 F 质粒或染色体上，随宿主传代；LacZ' ，放在载体上，作为筛选标记，当在 LacZ' 中插入一个片断后，将不可避免地导致产生无α- 互补能力的β－半乳糖苷酶片断。在诱导物IPTG 和底物 X-gal （同时可作为生色剂）的作用下，含重组质粒的菌落不能产生有活性的β－半乳糖苷酶，不能分解 X-gal ，呈现白色，而含非重组质粒的菌落则呈现兰色。以此达到筛选的目的。 7、试简述λ噬菌体的裂解生长状态Lytic growth 和溶原状态 Lysogenic state 两种循环的分化及其调节过程？ 答：裂解生长状态是λ噬菌体在宿主中大量复制并组装成子代λ噬菌体颗粒，导致宿主细胞裂 解。溶原状态为λ噬菌体基因组 DNA 通过位点专一性重组整合到宿主染色体DNA 中随宿主的繁殖传到子代细胞。调节过程：由感染复数
皮肤生理学 今天主讲的内容是皮肤生理学，内容包括：1、皮肤的功能与构造；2、皮肤的附属构造；3、皮肤受损的修复；4、皮肤的老化 皮肤系统位于体表，其功能是提供保护，皮肤包括2大部分，一个是外层的表皮，一个是内层的真皮。皮肤的衍生物包括毛发、指甲、腺体、神经接受器，这个基本的生理常识大家应该很熟悉。 刚才提到皮肤是为人体提供保护的功能，可以说是人体的第一道屏障，包括衍生物在内，都可以提供身体防护的功能，如果说皮肤受损，造成细菌侵入，譬如表皮划伤，出现伤口，此时才有人体的第二道防线，也就是白血球加以吞噬，因此，皮肤对保护身体扮演着相当重要的角色。 下面，我们先详细讲讲第一部分，皮肤的功能与构造。 先说对一个，功能，分为四大功能。 第一个就是刚才说的保护。包括抵御来自外界的机械的、化学的、温度的、辐射的、细菌的伤害。 第二个功能，是调节体温。我们身体中90%的体热，是由汗水来发散热，也可以防止体温、水分及化学物质过度流失。 第三个功能，接受外来刺激。譬如神经接受器，负责接受身体外在的感觉，痛痒等。 第四个功能，也是营养师最关切的一个知识点，就是皮肤可以合成维生素D及其他荷尔蒙。 下面说说皮肤构造。 讲之前，我先给大家发个图。
这是皮肤活组织的切片局部 这部分就是表皮层 大家可能对这张切片中的皮肤结构及各组织不大好辨认，没关系，我发一张清晰模拟图。
下面我就拿这2张图来一一讲解 皮肤因覆盖整个体表，是人体最大的器官之一，成年人为例，其表面积约为19000平方厘米，厚度约为0.5-3mm。包含三种不同的组织，上皮组织、结缔组织、蜂窝组织，最外层的构造为表皮，是属于复层鳞状上皮组织，内层为较厚的真皮，是属于结缔组织的构造，在真皮底下则是皮下层，但此处严格说并不属于皮肤构造，而是由蜂窝组织及脂肪组织所组成，其中，蜂窝组织还一个名词，就是疏松结缔组织，蜂窝组织及脂肪组织之间，则是由表浅筋膜相互连接。 大家切过猪肉没？我们切猪肉的时候，会发现在猪肉结缔组织下面，有一层透明的薄膜，那就是表浅筋膜。 下面我就给大家发一张表，是外皮系统的构造分类
热工基础题库 一、选择题 基本概念 1.与外界只发生能量交换而无物质交换的热力系统称为。B A、开口系统 B、闭口系统 C、绝热系统 D、孤立系统 2.与外界既无能量交换又无物质交换的热力系统称为。D A、开口系统 B、闭口系统 C、绝热系统 D、孤立系统 3.开口系统与外界可以有。D A、质量交换 B、热量交换 C、功量交换 D、A+B+C 4.与外界有质量交换的热力学系统是：A A、开口系统 B、闭口系统 C、绝热系统 D、孤立系统 5.下列与外界肯定没有质量交换但可能有热量交换。B A、绝热系统 B、闭口系统 C、开口系统 D、孤立系统 6.实现热功转换的媒介物质称为。C A、系统 B、气体 C、工质 D、蒸气 7.工质应具有良好的和。A A、流动性/膨胀性 B、耐高温性/导热性 C、耐高压性/纯净 D、耐腐蚀性/不易变形 8.若闭系处于热力学平衡状态，则内部工质的处处一致。A A、压力和温度 B、压力和比容 C、比容和温度 D、压力、温度和比容 9.稳定状态是平衡状态，而平衡状态是稳定状态。B A、一定/一定 B、不一定/一定 C、一定/不一定 D、不一定/不一定 10.均匀状态是平衡状态，而平衡状态是均匀状态。C A、一定/一定 B、不一定/一定 C、一定/不一定 D、不一定/不一定 11.下列组参数都不是状态参数。C A、压力；温度；比容 B、内能；焓；熵 C、质量；流量；热量 D、膨胀功；技 术功；推动功 12.下列组参数都是状态参数。A A、焓；熵；比容 B、膨胀功；内能；压力 C、热量；比热；温度 D、技术功；动能；位能 13.下列答案是正确的。B A、10℃=43.8℉=285.15K B、10℃=50℉=283.15K C、10℃=40.2℉=285.15K D、10℃=42℉=283.15K 14.摄氏温度变化1℃与热力学绝对温度变化1K相比，有。B A、前者大于后者 B、两者相等 C、后者大于前者 D、不一定 15.摄氏温度变化1℃与华氏温度变化1℉相比，有。B A、前者大于后者 B、两者相等 C、后者大于前者 D、不一定 16.若大气压力为100KPa，真空度为60KPa，则绝对压力为。D A、160KPa B、100KPa C、60KPa D、40KPa 17.若大气压力为100KPa，表压力为60KPa，则绝对压力为。A A、160KPa B、100KPa C、60KPa D、40Kpa 18.在工程热力学计算中使用的压力是。A A、绝对压力 B、表压力 C、真空压力 D、大气压力 19.若大气压力为0.1Mpa，容器内的压力比大气压力低0.004Mpa，则容器的B。 A、表压力为0.096Mpa B、绝对压力为0.096Mpa C、真空度为0.104Mpa D、表压力为0.104Mpa
(1) 连接酶 ①来源: 结接成果— ②功能：只能连接. 四.基因进入受体细胞的载体一“分 (2) T4DNA连接酶 子运输车” ①来源: ②功能：既可以连接. 又可以连接 时效率比较低。 【拓展】比较DNA连接酶?与DNA ONA连接 酶DNA聚合酶 作 用 实 质 都是催化两个核晋酸之间形成 是 否 需 模板 — 连 接 0 NA链 链链 作用 过程 在两个 DNA片段之 间形成 将 加 到已存在的核昔 酸链上，形成 作用 将两个 ONA片段连 合成 聚介酶 1.基因工程中最常用的载体 ⑴来源: 等微生物 (2)结构：裸露的、结构简单、独立于 之外，并具有 分子。 2.基因的载体必须具备的条件 个限制酶切 削位点，供外源DNA片段(基丙)插入其 中 。 (2)能在宿主细胞内 介到染色体DNA上，随染色体DNA进行 (3)有特姝的. ，如四环素抗性基因等，供重组DNA的鉴定和选择。 (4)必须是 彳j 害。 (5 ) 进行操作。 的，不会对受体细胞 适合，以便提取和在体外 3.载体的种类：除质粒外，还有
4.在进行基因工程操作中，真正被用作的 。 载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行 1. 2基因工程的基本操作程序 一.基因工程的基本操作程序③PCR扩增的前提：要有一段已知目的 的获取。基因的，以便根据这一序列合成引 2?的构建。 3.将目的基因 4,目的基因的 二、目的基因的获取 1.目的基因主要是的结构基因。 2?获取目的基因的方法 （1）从基因文库中获取目的基因 ①基因文库概念：将含有某种生物不同 基因的许多，导入 的群体中储存?各个分別含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。 ②基因文库分类：可分为 库和，文库（如cDNA文 库）。 ⑵利用PCR技术扩增目的基因 ①PCR技术是的缩写。PCR 是一项在生物体 的核酸合成技术。 ② PCR技术的原理：ONA ④PCR扩增的条件： （目的基因），原料—— （即dCTP、d&TP、dGTP、dTTP）.耐高温的 （Taq 酶）。 ⑤PCR扩增的过程 a变性：加热到90?95°C, ONA受热变性后 b?复性（退火人冷却到55-60r. 结合 C.延伸：加热到70?75乜，在热稳＞1^的 （Taq酶）的作用下进行延伸 ⑥结果：目的基因以__________ 的方式成指 数形式扩增。 ⑶人工合成法：如果基因比较. 学方法宜接人工合成。 比较 用化【拓展】PCR技术和DNA复制的
基因工程练习题 1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( ) A、将目的基因从染色体上切割出来 B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C、将目的基因与运载体结合 D、将目的基因导入受体细胞 2、基因工程中常用细菌等原核生物作受体细胞的原因不包括( ) A、繁殖速度快 B、遗传物质相对较少 C、多为单细胞，操作简便 D、DNA为单链，变异少 3、基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是( ) A、限制酶只用于切割获取目的基因 B、载体与目的基因可以用同一种限制酶处理 C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶 D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测 4、运用现代生物技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中，为检测实验是否成功，最方便的方法是检测棉花植株是否有( ) A、抗虫基因 B、抗虫基因产物 C、新的细胞核 D、相应性状 5、转基因动物转基因时的受体细胞是( ) A、受精卵 B、精细胞 C、卵细胞 D、体细胞 6、基因工程中常见的载体是( ) A、质体 B、染色体 C、质粒 D、线粒体 7、水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly、Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是( ) A、促使目的基因导入宿主细胞中B、促使目的基因在宿主细胞中复制 C、使目的基因容易被检测出来 D、使目的基因容易成功表达 8、运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白质，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，据以上信息，下列叙述正确的是( ) A、Bt基因的化学成分是蛋白质 B、Bt基因中有菜青虫的遗传物质 C、转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因 D、转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物 9、人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成，通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( ) A、大肠杆菌 B、酵母菌 C、T 噬菌体 D、质粒DNA 4 10、不属于质粒被选为基因运载体的理由是（） A．能复制 B.有多个限制酶切点C．具有标记基因D．它是环状DNA
工程热力学期末试卷 建筑环境与设备工程专业适用 （闭卷，150分钟） 班级 姓名 学号 成绩 一、简答题(每小题5分，共40分) 1. 什么是热力过程？可逆过程的主要特征是什么？ 答：热力系统从一个平衡态到另一个平衡态，称为热力过程。可逆过程的主要特征是驱动过程进行的势差无限小，即准静过程，且无耗散。 2. 温度为500°C 的热源向热机工质放出500 kJ 的热量，设环境温度为30°C ，试问这部分热量的火用（yong ）值（最大可用能）为多少？ 答： =??? ? ?++- ?=15.27350015.273301500,q x E 303.95kJ 3. 两个不同温度（T 1,T 2）的恒温热源间工作的可逆热机，从高温热源T 1吸收热量Q 1向低温热源T 2放出热量Q 2，证明：由高温热源、低温热源、热机和功源四个子系统构成的孤立系统熵增 。假设功源的熵变△S W =0。 证明：四个子系统构成的孤立系统熵增为 （1分） 对热机循环子系统： 1分 1分 根据卡诺定理及推论： 1分 4. 刚性绝热容器中间用隔板分为两部分，A 中存有高压空气，B 中保持真空，如右图所示。若将隔板抽去，试分析容器中空气的状态参数（T 、P 、u 、s 、v ）如变化，并简述为什么。 答：u 、T 不变，P 减小，v 增大，s 增大。 自由膨胀 12iso T T R S S S S S ?=?+?+?+?W 1212 00ISO Q Q S T T -?= +++R 0S ?= iso S ?=
5. 试由开口系能量程一般表达式出发，证明绝热节流过程中，节流前后工质的焓值不变。（绝热节流过程可看作稳态稳流过程，宏观动能和重力位能的变化可忽略不计） 答：开口系一般能量程表达式为 绝热节流过程是稳态稳流过程，因此有如下简化条件 ， 则上式可以简化为： 根据质量守恒，有 代入能量程，有 6. 什么是理想混合气体中某组元的分压力？试按分压力给出第i 组元的状态程。 答：在混合气体的温度之下，当i 组元单独占有整个混合气体的容积（中容积）时对容器壁面所形成的压力，称为该组元的分压力；若表为P i ，则该组元的状态程可写成：P i V = m i R i T 。 7. 高、低温热源的温差愈大，卡诺制冷机的制冷系数是否就愈大，愈有利？试证明你的结论。 答：否，温差愈大，卡诺制冷机的制冷系数愈小，耗功越大。（2分） 证明：T T w q T T T R ?==-= 2 2212ε，当 2q 不变，T ?↑时，↑w 、↓R ε。即在同样2q 下(说明 得到的收益相同)，温差愈大，需耗费更多的外界有用功量，制冷系数下降。（3分） 8. 一个控制质量由初始状态A 分别经可逆与不可逆等温吸热过程到达状态B ，若两过程中热源温度均为 r T 。试证明系统在可逆过程中吸收的热量多，对外做出的膨胀功也大。
专题一基因工程 1. 1 DNA 重组技术的基本工具 一、基因工程的基本概念 1.概念：基因工程是指按照人们的愿望，进 行严格的设计，并通过 _____________________________ 和 ____________ 等技术，赋予生物以新的 ，从而创造出更符合人们需要的 新的 ___________ 禾n 。由于基因 工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工 的，因此又叫做 2. 基本原理： 3. 理论基础 (1)不同生物的基因可以拼接的结构基础一 —细胞生物的遗传物质都是 ________________________ ，都是 以 ________________ 为基本单位构成的双链大 分子。 ⑵目的基因转入后可以表达的基础一一所 有生物共用一套 ⑶ (1) 状O ⑵ O 生物遗传信息的表达都遵循 4.优点 目的性强，能 的改造生物的性 —的障碍。 分子手术刀 克服 ______________ 限制性核酸内切酶 1. 简称： __________ 2. 来源：主要是从 而来。 3.功能特点：特异性，即识别双链 DNA 分子某种特定 ________________ ,并且使每一条链 中 _______________ 的两个核苷酸之间的 ___________ 断开。 4.酶切结果： ___________ 末端和 ______ 画出EcoR I 酶切后的结果： GAATTC CTTAAG t 三、DNA 连接酶一一“分子缝合针” 中分离纯化 末端。 1.作用实质：将双链 DNA 片段“缝合” 起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之 间的 __________ O 2.作用前提：两个DNA 分子必须含有 3.种类 (1) E ? coli DNA 连接酶 ① 来源： ______________ ② 功能：只能连接 _________ ⑵T 4DNA 连接酶 ① 来源： ________________ ② 功能：既可以连接— 连接 ___________ ，但连接 比较低。 ，又可以 时效率 四、基因进入受体细胞的载体一一“分子运 输车” 1. 基因工程中最常用的载体一一 — (1) 来源： ___________ 等微生物 (2) 结构：裸露的、结构简单、独立于 ______________ 之外，并具有 ________________ 的 ____________ 分子。 2. 基因的载体必须具备的条件
基因工程测试题 一、选择题： 1.人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成。通过转基因技术可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( ) A.大肠杆菌 B.酵母菌 C.肺炎双球菌 D.乳酸菌 2.下列有关基因工程的叙述，正确的是( ) A．DNA连接酶将碱基对之间的氢键连接起来 B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变 C．限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大 D．常用的载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等 3.我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是( ) A.抗虫基因的提取和运输需要专用的工具酶和载体 B.重组DNA分子中替换一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C.抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染 D.转基因抗虫棉是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的 4.如图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kan r)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养
基上生长。下列叙述正确的是( ) A.构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶 B.愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株 C.卡那霉素抗性基因(kan r)中有该过程所利用的限制性核酸内切酶 的识别位点 D.抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传 5.上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，以下与此有关的叙述中正确的是( ) A.“转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物 B.“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因 C.只有从转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中含有 D.转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，不能合成人白蛋白 6.下列关于蛋白质工程和基因工程的比较，不合理的是( )
一、判断题： 1. 平衡状态一定稳定状态。 2. 热力学第一定律的实质是能量守恒定律； 3．公式d u = c v d t 适用理想气体的任何过程。 4．容器中气体的压力不变则压力表的读数也绝对不会改变。 5．在T —S 图上，任意二条可逆绝热过程线不能相交。 6．膨胀功与流动功都是过程的函数。 7．当把一定量的从相同的初始状态压缩到相同的终状态时，以可逆定温压缩过程最为省功。 8．可逆过程是指工质有可能沿原过程逆向进行，并能恢复到初始状态的过程。 9. 根据比热容的定义式 T q d d c ，可知理想气体的p c 为一过程量； 10. 自发过程为不可逆过程，非自发过程必为可逆过程； 11．在管道作定熵流动时，各点的滞止参数都相同。 12．孤立系统的熵与能量都是守恒的。 13．闭口绝热系的熵不可能减少。 14．闭口系统进行了一个过程，如果熵增加了，则一定是从外界吸收了热量。 15．理想气体的比焓、比熵和比定压热容都仅仅取决与温度。 16．实际气体绝热节流后温度一定下降。 17．任何不可逆过程工质的熵总是增加的，而任何可逆过程工质的熵总是不变的。 18. 不可逆循环的热效率一定小于可逆循环的热效率； 19．混合气体中质量成分较大的组分，其摩尔成分也一定大。 20．热力学恒等式du=Tds-pdv 与过程可逆与否无关。 21．当热源和冷源温度一定，热机工质能够做出的最大功就是在两热源间可逆热机对外输出的功。 22．从饱和液体状态汽化成饱和蒸汽状态，因为气化过程温度未变，所以焓的变化量Δh=c p ΔT=0。 23．定压过程的换热量q p =∫c p dT 仅适用于理想气体，不能用于实际气体。 24．在p －v 图上，通过同一状态点的定熵过程的斜率大于定温过程的斜率。
基因工程的基本工具 一、基因工程的概念： 二、基因工程的原理和优点： 三、基因工程的基本工具 1.分子手术刀： （1）来源： （2）作用： （3）不同类限制酶的区别： （4）与DNA连接酶的异同点： 相同点： 不同点： 2.分子缝合针： （1）分类： （2）作用： （3）区别： （4）与DNA聚合酶的异同点： 区别： 相同点： 3.分子运输车： （1）作用： （2）种类： （3）质粒是什么？ （4）质粒的特点及每一个特点的作用： <1>.特点： 作用： <2>.特点： 作用：
<3>.特点： 作用： 基因工程的基本操作程序 一、目的基因的获取 1.目的基因指什么： 2.获取目的基因的来源： 3.获取目的基因的方法 1.条件： 2.基因文库的分类： 基因组文库： 部分基因文库（cDNA文库）： 3.基因文库的构建流程 4.两种基因文库的区别： 1.条件： 2.中文名称： 3.原理： 4.原料：
5.过程及每一步的作用： 第一步： 第二步： 第三步： 1.条件： 二、基因表达载体的构建（核心步骤） 1.基因表达载体的结构元件 1①目的基因 2启动子： 3终止子： 4标记基因： 5复制原点 2.构建基因表达载体的目的： 3.构建的方法：[理解单酶切和双酶切的区别] 三、将目的基因导入受体细胞（转化） 1.植物细胞（充当受体细胞）的转化 1农杆菌： 2Ti质粒： 3总体思路： 4农杆菌侵染植物时的机理： ⑤适用范围：
注意事项： 注意事项： 2.动物细胞（充当受体细胞）的转化 1技术： 2具体谁来充当受体细胞： 3.微生物细胞（充当受体细胞）的转化 Ca2+转化法： 四、目的基因的检测与鉴定 1.分子水平的检测 目的： 方法： 结果： 目的： 方法： 结果： 目的： 方法： 结果： 2.个体水平的检测
第一章绪论 1基因:是指DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。 2管家基因与奢侈基因：具有相同遗传信息的同一个体细胞间其所利用的基因并不相同，有的基因活动是维持细胞基本代谢所必须的，而有的基因则在一些分化细胞中活动，这正是细胞分化、生物发育的基础。前者称为管家基因，而后者被称为奢侈基因 结构基因与调节基因：结构基因是可以转录成为各种RNA（rRNA,tRNA,snRNA）直接行使功能，或者转录成信使RNA（mRNA）然后翻译成多肽链，最终形成各种功能蛋白质和酶。从广义上讲，任何一种能够调节或限制其他基因活性的基因都可以叫做调节基因。 移动基因：转座子属于可移动的遗传因子 重叠基因：它的同一部分DNA可以编码两种不同的蛋白质，也就是说同一部份DNA存在2个重叠基因 3基因组:是指一个生物体、细胞器或病毒的全部基因 4断裂基因:被间隔序列间隔成若干个部分，而形成不连续形式的基因，是真核基因的普遍形式 5假基因:是一类在基因组中稳定存在，序列组成也酷似正常基因，但不能表现出任何功能的DNA序列。 6启动子：DNA链上能指示RNA转录起始的DNA序列称为启动子，(1)-35序列提供RNA聚合酶全酶识别位点，(2)-10序列是酶与DNA紧密结合的位点，(3)RNA 合成的起始点 7复制子：DNA 中发生复制的独立单位称为复制子(Replicon)，这是一段具有特殊结构的DNA序列，载体有复制起点才能使与它结合的外源基因在宿主细胞中独立复制繁殖。 8增强子：就是远离转录起始点（1 ~ 30 kb）、决定基因的时间、空间特异性表达、增强启动子转录活性的DNA序列，其发挥作用的方式通常与方向、距离无关。9单克隆抗体：由单一细胞克隆生成的抗体是单克隆抗体，所有这些抗体分子都是相同的并以同样的亲合力结合在抗源的相同部位上 10黏性末端：由限制性内切酶切割后在双链DNA的切口处产生交替互补的单链末端 11操纵子：是指染色体控制蛋白质（酶）合成的功能单位，操纵子包括调节基因、操纵基因和结构基因 12终止子：模板DNA上存在终止转录的特殊信号称为终止子。 13克隆：是指从一个共同祖先无性繁殖下来的一群遗传上同一的DNA分子细胞或由个体所组成的特殊的生物群体
皮肤生理学知识 第一章皮肤的总述 第二章皮肤生理结构及功能 第三章皮肤基本功能 第四章皮肤类型的划分及判别方法 第五章问题性皮肤分类 第六章斑形成的原因 第七章斑点部位判断身体 第一章皮肤的总述 1、人体和外界直接接触的是皮肤，一个成人的皮肤表面积约为1.5—2平方米 2、是人体最大的器官，占人体体重的5—15% 3、厚度约0.5-4mm(不包括皮下脂肪层)。手掌与脚掌的皮肤最厚,眼睑、外阴等处皮肤最薄。
第二章皮肤生理结构及功能 （一）皮肤的结构 一、表皮 在皮肤的表面，表皮内没有血管，但有丰富的神经末梢，可以感受到触觉和痛觉。因部位的不同，表皮的厚度在0.07-2毫米之间。 表皮层由外到里又可分为： 1、角质层 2、透明层 3、颗粒层 4、生发层（有机层\基底层） 角质层: 角质层在美容学上称为“死皮”，它是由多层已经死亡并已角化的上皮细胞组成。主要成分为软性角蛋白，角质蛋白不溶于水，因此角质层有防止体内水份过度蒸发的作用。若破坏了角质层，一些物理或化学因素必然会使皮肤受伤。角质层最主要的功能是保护功能 透明层: 透明层只存在于我们的手掌和足底皮肤中。具有防止毒物进入内部细胞，阻止体温散失的作用。有一定的保护作用 颗粒层： 有核的活细胞组成，可以中和酸性物质，其中兰格罕细胞能够分泌免疫物质。含有晶样角素，晶样角素可以折射阳光，减弱紫外线的伤害，但其极易被盐、碱所破坏
胞的脱落和修复表皮的缺损。生发层又可分为基底层与棘状层。 棘状层： A、呈弱酸性（PH值4.5-----5.5）是有核的活细胞，具有分裂能力，起到基底层与表皮外层之间的桥梁作用。 B、储存淋巴液，为细胞提供营养。可感知外界刺激如:热，痛，压力等。 基底层： 由基底细胞和黑色素母细胞组成。 基底细胞：具有很强的分裂繁殖能力。当皮肤受伤时，只要基底细胞不被破坏，皮肤一般不会留疤痕。 黑色素母细胞：可产生黑色素颗粒并可吸收阻挡紫外线射入体内。人的肤色深浅是由皮肤中喊有黑色素颗粒的多少决定的。 二、真皮 真皮可分为乳头层和网状层，二者无明显的分界。 真皮层的纤维结缔组织有三种：胶原纤维，弹力纤维，网状纤维。含有皮肤中60%的水分，真皮使皮肤富有弹性。如这三种纤维减少，就易产生皱纹。 真皮内有血管、神经、淋巴管、毛发和腺体等。 三、皮下组织 A、由疏松结缔组织和大量脂肪组织组成， B、有保温、防寒、缓冲外力、保护内部组织的作用。 四、皮肤的附属器 皮肤的附属器有：皮脂腺、汗腺、毛囊、毛发、指甲等。 A、皮脂腺：由腺体和导管两部分组成。可分泌油脂。 B、汗腺：分大小汗腺，可排泄汗液、毒素和水分。一种在皮肤表面做酸性分泌，而另一种在毛囊做碱性分泌，容易受细菌感染，产生异味，这就是“狐臭”。 C、毛囊分布全身（除手掌、脚掌）。