1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的 DNA 片段中，普通需使用
A. 同种限制酶
B.两种限制酶
C. 同种连接酶
D.两种连接酶
2．基因工程常用的受体有
①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞
A. ①②③④
B. ①②③
C. ②③④
D.①②④
3．有关基因工程的表达正确的选项是
A.限制酶只在获得目的基因时才用
B.重组质粒的形成是在细胞完成的
C.质粒都可作为载体
D.蛋白质的构造成份为合成目的基因提供资料
4．以下哪项不是基因工程中时常使用的用来运载目的基因的载
体 A.细菌质粒 B.噬菌体 C.动植物病毒 D.细菌核区的 DNA
5．基因工程是在 DNA 份子水平上发展设计施工的。在基因操作的根本步骤中，不发展碱基互补配对的是
A.人工合成目的基因
B. 目的基因与运载体结合
C.将目的基因导入受体细胞
D. 目的基因的检测表达
6．不是基因工程法生产的药物是
A.干扰素
B.白细胞介素
C.青霉素
D. 乙肝疫苗
7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是
A.限制酶和连接酶
B.限制酶和水解酶
C.限制酶和运载酶
D.连接酶和运载酶
8．以下哪项表达不是运载体必须具备的条件
A.具有某些标记基因
B.决定宿主细胞的生存
C.能够在宿主细胞中复制
D.有一个或者多个限制酶切点
9．水母发光蛋白由 236 个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用
A.促使目的基因导入宿主细胞中
B.促使目的基因在宿主细胞中复制
C.使目的基因容易被检测和选择
D.使目的基因容易成功表达 10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才干到达检测疾病的目
的。这里的基因探针是指
A.用于检测疾病的医疗器械
B.用放射性同位素或者荧光份子等标记的 DNA 份子
C.合成β—球蛋白的 . DNA .
D.合成苯丙氨酸羟化酶的 DNA 片段
11．基因工程第一步的一种法是把所需的基因从供体细胞别离出来，这要利用限制性切酶。一种限制性切酶能识别 DNA 子中的 GAATTC 顺序，切点在 G 和 A 之间，这是应用了酶的
A．高效性 B.专一性 C．多样性 D.
催化活性受外界条件影响
12．XX 医学遗传研究所成功哺育出第一头携带白蛋白的转基因牛，还研究出一种可大大提高基因表达水平的新法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高 30 多倍，转基因动物是指
A.提供基因的动物
B.基因组中增加外源基因的动物
C.能产生白蛋白的动物
D.能表达基因信息的动物
13．作为基因的运输工具——运载体，必须具备的条件之一及理由是
A.能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因
B.具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达
C.具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合
D.对宿主细胞无伤害，以便于重组 DNA 的鉴定和选择
14 ．以下黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是：
A．①② B．①③ C．①④ D．②③
15．以下平末端属于同一种限制酶切割而成的是
A.①③
B. ①④
C. ②③
D.②④
16．以下有关基因工程的表达中，不正确的选项
是 A.DNA 连接酶将黏性末端的碱基对连接起
来
B.基因探针是指用放射性同位素或者荧光份子等标记的 DNA 份子
C.基因治疗主要是对有基因缺陷的细胞发展替换
D.蛋白质中氨基酸序列可为合成目的基因提供资料
17．以下属于 PCR 技术的条件的是
①单链的脱氧核苷酸序列引物②目的基因所在的 DNA 片段
③脱氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA 连接酶⑥DNA 聚合酶
⑦DNA 限制性切酶
A.①②③⑤
B. ①②③⑥
C. ①②③⑤⑦
D.①②④⑤⑦
18．以下有关 PCR 技术的表达正确的选项是
A.作为模板的 DNA 序列必须不断的加进每一次的扩增之中
B.作为引物的脱氧核苷酸序列必须不断的加进每一次的扩增之中
C.反响需要的 DN .A 聚合酶必须不断的加进反响之中.
D.反响需要的 DNA 连接酶必须不断的加进反响之中
19．蛋白质工程中，直接需要发展操作的对象
是 A.氨基酸构造 B.蛋白质的空间构造
C.肽链构造
D.基因构造
20．有关基因与酶关系的表达正确的选项
是 A.每一个基因都控制合成一种酶
B.酶的遗传信息编码在含子的碱基序列中
C.基因的转录、翻译都需要酶
D. 同一辈子物体不同细胞的基因和酶是一样的
21．某科学家从细菌中别离出耐高温淀粉酶〔Amy〕基因 a,通过基因工程的法，将
a 转到马铃薯植株中，经检测发现Amy 在成熟块茎细胞中存在。这一过程涉及
A. 目的基因进入受体细胞后，可随着马铃薯的 DNA 份子的复制而复制，传给子
代细胞并表达
B.基因 a 导入成功后，将抑制细胞原有的新代，开辟新的代途径
C.细菌的 DNA 份子较小，可直接作为目的基因，导入受体中不需要整合到马铃
薯的 DNA 份子中
D. 目的基因来自细菌，可以不需要运载体直接导入受体细胞
22．以下关于质粒的表达，正确的选项是
A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器
B.质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状双链 DNA 份子
C.质粒惟独在侵入宿主细胞后在宿主细胞复制
D.细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立发展
23．关于基因工程的表达，正确的选项是
A.基因工程时常以抗菌素抗性基因为目的基因
B.细菌质粒是基因工程常用的运载体
C.通常用一种限制性核酸切酶处理含目的基因的 DNA，用另一种限制酶处理运
载体 DNA
D.为育成抗除草剂的农作物新品种导入的抗除草剂的基因只能以受精卵为受体24．以下育种没有使用生物工程技术的是
A.获取高产青霉素的菌
B.获得能分泌含抗体的乳汁的母牛
C.生长较快的鲤鲫鱼
D.利用工程菌生产的人胰岛素
25．科学家将含人的α—胰蛋白酶基因的DNA 片段，注射到羊的受精卵中，该受精卵发育的羊能分泌含α一抗胰蛋白质的奶。这一过程没有涉及
A.DNA 以其一条链 为模板合成.
RNA
B DNA 按照碱基互补配对原那末自我复制 C. RNA 以自身为模板自我复制
D. 按照 RNA 密码子的罗列顺序合成蛋白质
26 ．1979 年，科学家将动物体的能
合成胰岛素的基因与大肠杆菌 DNA 份子重组， 并且在大肠杆 体表达成功。请根据图答复以 问题： 〔 1 〕 此 图 表 示 的 是 采 取 从
____________ 中获取目的基因 过
程。 〔 2 〕 图 中 ① DNA 是 以 ______________ 为模板，
___________ 形 成 单 链 DNA ，在酶的作用下合成 链 DNA ，从而获得了所需
的
的基因。
〔3〕图中②代表的是________，在它的作用下将质粒〔______DNA 〕切出______ 末端。 〔4〕图中③代表___________________DNA ，含______________________。
〔5〕图中④表示将__________________。⑤表示____________DNA 随大肠杆菌 的繁殖
而发展_____________。
27 ．干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血中提取，每升人血只能提取 0.5μg ，
所以价格昂贵。现在美国加利福尼亚州的基因公司用如以下列图的式生产干扰 素。试分析原理和优点。
〔1〕从人的淋巴细胞中获取出干扰素基因，普通可用 _______的法，此 基因在
基因工程中称为。
〔2〕此基因与细菌的质粒相结合要依靠，其作用部位是磷酸二酯键，然后将目
的 基因移植到酵母菌体，酵母菌在基因工程中叫。
〔3〕科学家在培养转基因植物时，常用中的质粒做运载体。质粒是基因工程最
常 用的运载体，它具备运载体的哪些条件. ①；②；
胰腺
原胰岛素信使 RNA
反转录酶
① DNA
⑤
大肠杆菌
质粒
②
③ ④
.
双 要
够 的 菌 下
③。④
〔4〕细菌质粒能与干扰素基因能够拼接其原
因是___________________。人的干扰素
基因在酵母菌体合成为了人的干扰素，说明 了__________。
28．科学家将人的生长素基因与大肠杆菌的
DNA 份子发展重组，并成功地在大肠
杆 菌中得以表达。过程如右图据图答复： (1)人的基因之所以能与大肠杆菌的 DNA 分
子发展重组，原因是
_______________________________________ (2)过程①表示的是采取的法来获取目的基
因 。 其 过 程 可 表 示 为 ：
___________________ 。
(3)图中(3)过程用人工法，使体外重组的DNA
份子转移到受体细胞，主要是借鉴细菌或者病毒___细胞的途径。普通将受体大 肠杆菌用 处理，使细胞处于能_____________________的生理状态，这种细胞 称为_______________细胞，再将表达载体溶于缓冲液中与___________混合， 在一定的温度下完成转化。
(4)检测大肠杆菌 B 是否导入了质粒或者重组质粒，可采用的法是，理由是：。 (5)如果把已经导入了普通质粒 A 或者重组质粒的大肠杆菌， 放在含有四环素的培养
基 上培养，发生的现象是，原因是：。 29〔8 分〕为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河 三角洲等盐碱地的开辟利用备受关注。我国科学家 应用耐盐基因哺育出了耐盐水稻新品系。
〔1〕获得耐盐基因后，构建重组 DNA 份子所用的 限制性切酶作用于图中的处， DNA 连接酶作用于 处。〔填“a 〞或者“b 〞〕
〔2〕将重组 DNA 份子导入水稻受体细胞的常用法 有农杆菌转化法和法。
〔3〕为了确定耐盐转基因水稻是否哺育成功，既要用放射性同位素标记的作探针 发展份子杂交检测，又要用法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。
30、以重组 DNA 技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。 请答复以下问题。 〔1〕获得目的基因的法通常包括和。
。
.
.
〔2〕切割和连接 DN
.
A 份子所使用的酶分别是和。 .
〔3〕运送目的基因进入受体细胞的载体普通选用病毒或者，后者的形状成。 〔4〕由于重组 DNA 份子成功导入受体细胞的频率， 所以在转化后通常需要发展操 作。
〔5〕将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能 和序列上是一样的。
31．〔8 分〕 [生物-现代生物科技专题]
继哺乳动物乳腺生物反响器研发成功后，膀胱生物反响器的研究也取得了一定进 展。最近，科学家哺育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素 并分泌到尿液中。请答复：
〔1〕将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用法是。 〔2〕发展基因转移时，通常要将外源基因转入中，原因是。 〔3〕通常采用技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。
〔4〕在研制膀胱生物反响器时，应使外源基因在小鼠的细胞中特异表达。 32、图为某种质粒表到载体简图，小箭头所指分别为限制性切酶 EcoRI 、BamHI 的 酶切位点， amp R 为青霉素抗性基因， tct R 为四环素抗性基因， P 启动子， T 为终止 子， ori 为复制原点。 目的基因的两端分别有包括 EcoRI 、BamHI 在的多种酶的酶切 位点。 据图答复：
〔1〕将含有目的基因的 DNA 与质粒该表达载 体 分别用 EcoRI 酶切，酶切产物用DNA 连接酶 进 展连接后，其中由两个 DNA 片段之间连接形 成 的产物有、、
三种 。假设要从这些连接产物中别离出重组质 粒， 需要对这些连接产物发展。
〔2〕用上述 3 种连接产物与无任抗药性的原核宿主细胞发展转化实验。之后将这 些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物 是；
〔3〕在上述实验中，为了防止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末 端发生任意连接，酶切时应选用的酶是 。 33 ．基因工程又叫基因拼接技术。
(1)在该技术中， 切割 DNA 的工具是限制酶，它能识别某一特定核苷酸序列， 使两 个
核苷酸之间的断开。 限制酶切割产生的 DNA 片段末端有两种形式， 分别是、。
. v .
(2)基因工程中常用 . “份子缝合针〞是连接酶，根据酶的来源 不.
同可分为、 两
类，其中前者只可以连接，后者既可以连接也可以连接。 34 ．生物学家通过基因工程哺育出了能够通过乳房生物反响器生产人的血清蛋白。 〔1〕 “份子手术刀〞 _ _ ， 〔2〕 “份子缝合针〞 ，
〔3〕 “份子运输车〞。
〔4〕操作步骤：从人的____________获取目的基因；目的基因与____________结 合构建基因表达载体；在基因表达载体中还应插入 ___________和终止子。然 后把基因表达载体导入牛的 ____________ ，通过发育形成的牛体细胞含人的
_________________，成熟的牛产的的奶中含有___________________，证明基 因操作成功。
〔5〕人的基因在牛体能表达,说明人和牛___________
35．〔14 分〕在哺育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因〔kan 〕常作为标记基 因，惟独含卡那霉素抗性基因的细胞才干在卡那霉素培养基上生长。以下列图为获 得抗虫棉的技术流程。
抗虫基因 A
请据图答复：构建 重组质粒 导入 土壤农杆菌 培养选B
择
含重组质粒土壤农杆菌
含 kan 质〔1粒〕A 过程需要的酶有_____________________________________________。
〔2〕B 过程及其结果表达了质粒作为运载体必须具备的两个条件是 染
_______________D ________________________________C ________________________
〔3〕C 过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须参加___________。 〔4〕如果利用 DNA 份子杂交原理对再生植株发展检测， D 过程应该用
_______________________________________________________________作为探 针。
〔5〕科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。 ①将转基因植株与________________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那 霉素敏感型的数量比为 1：1。 ②假设该转基因植株自交，那末
其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比 为________。 ③假设将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，那末获得的再生植
株群体中抗卡那霉素型植株占____________%。
基因工程练习题答案
. v .
转基因抗虫植株。 检测 再生植株 分化 愈伤组织 诱导选择
离体棉花叶片组织
..
26〔1〕基因文库〔2〕mRNA 逆(反)转录〔3〕特定的限制性切酶环状黏性〔〕4 重组原胰岛素基因(目的基因)〔5〕将目的基因导入受体细胞重组扩增 27．〔1〕
人工合成目的基因〔2〕DNA 连接酶、受体细胞
〔3〕土壤农杆菌①能够在宿主细胞中自我复制②具有一个至多个限制酶切点，以便与外源基因连接③具有某些标记基因，便于发展目的基因的鉴定和筛
选。④对受体细胞无害
〔4〕它们具有共同的物质根抵和构造根抵，以及具有一样的黏性末端。不同生物共用一套密码子。
28.〔1〕人的基因与大肠杆菌 DNA 的组成成份一样，构造一样，并且具有一样的
黏性末端(2) 反转录法(逆转录法)(从 CDNA 文库中获取)
(3)侵染 Ca2+ 吸收围环境中的 DNA 份子感受态感受态细胞
(4)将得到的大肠杆菌 B 涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的，
说明已导入了质粒 A 或者重组质粒，反之那末没有导入。因为普通质粒 A
和重组质粒上都有抗氨苄青霉素基因
(5)有的能生长，有的不能生长导入普通质粒 A 的细菌能生长，因为普通质粒
A 上有四环素抗性基因；导入重组质粒的细菌不能生长，因为目的基因正
插在四环素抗性基因中，破坏了其构造和功能。
29、〔1〕a a〔2〕基因枪法〔花粉管通道法〕
〔3〕耐盐基因〔目的基因〕一定浓度盐水浇灌〔移栽到盐碱地中〕
30、〔1〕化学合成〔人工合成〕酶切获取〔从染色体 DNA 别离/从生物细胞别离〕
〔2〕限制性核酸切酶〔限制酶〕 DNA 连接酶〔连接酶〕〔3〕质粒小型环
状〔双链环状、环状〕〔4〕低筛选〔5〕氨基酸
31、〔1〕显微注射〔2〕受精卵〔或者早期胚胎〕受精卵〔或者早期胚胎细胞〕具
有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达〔3〕DNA 份子杂交〔核酸探针〕
〔4〕膀胱上皮
32、〔1〕目的基因－载体连接物载体－载体连接物目的基因－目的基因连.
. .
接物别离纯化
〔2〕载体－载体连接物目的基因－载体连接物载体－载体连接物
〔3〕启动子 mRNA 〔4〕 EcoRI 和 BamHI
33. 〔1〕磷酸二酯键黏性末端平末端
〔2〕 E ·coliDNA、T 连接酶、黏性末端、黏性末端、平末端
4
34.〔1〕限制性切酶〔或者限制酶〕〔2〕DNA 连接酶〔3〕基因进入受体细胞的载
体〔4〕基因组文库载体启动子受精卵血清蛋白基因人的血清蛋白〔5〕共用一套密码子
35、〔1〕限制性切酶和 DNA 连接酶〔2〕具有标记基因；能在宿主细胞中复
制并稳定保存〔3〕卡那霉素〔4〕放射性同位素〔或者荧光份子〕标记的抗虫
基因〔5〕①非转基因植株②3：1 ③100
1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的 DNA 片段中，普通需使用 A. 同种限制酶 B.两种限制酶 C. 同种连接酶 D.两种连接酶 2．基因工程常用的受体有 ①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞 A. ①②③④ B. ①②③ C. ②③④ D.①②④ 3．有关基因工程的表达正确的选项是 A.限制酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成是在细胞完成的 C.质粒都可作为载体 D.蛋白质的构造成份为合成目的基因提供资料 4．以下哪项不是基因工程中时常使用的用来运载目的基因的载 体 A.细菌质粒 B.噬菌体 C.动植物病毒 D.细菌核区的 DNA 5．基因工程是在 DNA 份子水平上发展设计施工的。在基因操作的根本步骤中，不发展碱基互补配对的是 A.人工合成目的基因 B. 目的基因与运载体结合 C.将目的基因导入受体细胞 D. 目的基因的检测表达 6．不是基因工程法生产的药物是 A.干扰素 B.白细胞介素 C.青霉素 D. 乙肝疫苗 7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是 A.限制酶和连接酶 B.限制酶和水解酶 C.限制酶和运载酶 D.连接酶和运载酶 8．以下哪项表达不是运载体必须具备的条件 A.具有某些标记基因 B.决定宿主细胞的生存 C.能够在宿主细胞中复制 D.有一个或者多个限制酶切点 9．水母发光蛋白由 236 个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用 A.促使目的基因导入宿主细胞中 B.促使目的基因在宿主细胞中复制 C.使目的基因容易被检测和选择 D.使目的基因容易成功表达 10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才干到达检测疾病的目 的。这里的基因探针是指 A.用于检测疾病的医疗器械 B.用放射性同位素或者荧光份子等标记的 DNA 份子
第二章 1. 名词解释：核酸内切酶、核酸内切限制酶、同裂酶、同尾酶、核酸外切酶、末端脱氧核苷酸转移酶 答： 核酸内切酶：是一类从多核苷酸链的内部催化磷酸二酯键断裂的酶。 核酸内切限制酶：是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列（4—8bp），并由此处切割DNA双链的核酸内切酶。 同裂酶：识别位点的序列相同的限制性内切酶。 同尾酶：识别的序列不同，但能切出相同的粘性末端。 核酸外切酶：是一类从多核苷酸链的一头开始催化降解核苷酸的酶。 末端脱氧核苷酸转移酶：可以不需要模板，在单链DNA或突出的双链DNA 3’-OH端随机 添加dNTPs的酶 2. 限制性内切核酸酶的命名原则是什么？ 答：限制性内切核酸酶按属名和种名相结合的原则命名的，即：属名+种名+株名+序号； 首字母：取属名的第一个字母，且斜体大写； 第二字母：取种名的第一个字母，斜体小写； 第三字母：(1)取种名的第二个字母，斜体小写； (2)若种名有词头，且已命名过限制酶，则取词头后的第一字母代替。 第四字母：若有株名，株名则作为第四字母，是否大小写，根据原来的情况而定，但用正体。 顺序号：若在同一菌株中分离了几种限制酶，则按先后顺序冠以I、Ⅱ、Ⅲ、…等，用正体。 3．部分酶切可采取的措施有哪些？ 答：1）缩短保温时间 2）降低反应温度 3）减少酶的用量 4. 在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'中含有一个6bp 的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么? 答：回文序列是：5'-CATA TG-3， 5．什么是限制性内切核酸酶的星号活性? 受哪些因素影响? 答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变，限制酶的特异性就会松 动，识别的序列和切割都有一些改变，改变后的活性通常称第二活性，而将这种因 条件的改变会出现第二活性的酶的右上角加一个星号表示，因此第二活性又称为星 活性。 概括起来，诱发星活性的因素有如下几种：(1)高甘油含量(>5％, v／v)；(2)限制性 内切核酸酶用量过高(>100U／ugDNA)；(3)低离子强度(<25 mmol／L)；(4)高pH(8．0 以上)；(5)含有有机溶剂，如DMSO，乙醇等；(6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如 Mn2+，Cu2+，C02+，Zn2+等)。 第三章 1．如何将野生型的λ噬菌体改造成为一个理想的载体? 答：①删除λ噬菌体的非必需区，留出插入空间；并在余下的非必须区内制造限制酶切点 ②引进某些突变表型，作为选择标记 ③突变某些基因，使它成为安全载体 ④删除λDNA必须区段上常用的限制酶切点
作业一： 一、名词解释： 1、基因：是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸 序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。 2、基因组该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子 3、操纵子:原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然 后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。 4、启动子:是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至少一个转录起始点。在 真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。 5、增强子:是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约20 0bp的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。增强子通常占100～200bp长度，也和启动子一样由若干组件构成，基本核心组件常为8～12bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。 6、基因表达：是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转 变成具有生物活性的蛋白质分子。 二、简答题 1、说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。 答：限制性内切核酸酶采用三字母的命名原则,即属名+种名+株名的各一个首字母,再加上序号. 基本原则: 3-4个字母组成,方式是:属名+种名+株名+序号; 首字母: 取属名的第一个字母,且斜体大写;第二字母: 取种名的第一个字母,斜体小写;第三字母: (1)取种名的第二个字母,斜体小写;(2)若种名有词头,且已命名过限制酶,则取词头后的第一字母代替.第四字母: 若有株名,株名则作为第四字母,是否大小写,根据原来的情况而定,但用正体. 顺序号: 若在同一菌株中分离了几种限制酶,则按先后顺序冠以I,Ⅱ,Ⅲ,…等,用正体. 2、什么是限制性内切核酸酶的星号活性？受哪些因素影向？ 答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变，限制酶的特异性就会松动，识别的序列和切割都有一些改变，改变后的活性通常称第二活性，而将这种因条件的改变会出现第二
基因工程练习题 一、单项选择题 1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，一般需使用 A.同种限制酶 B.两种限制酶 C.同种连接酶 D.两种连接酶 2．基因工程常用的受体有 ①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞 A.①②③④ B.①②③ C.②③④ D.①②④ 3．有关基因工程的叙述正确的是 A.限制酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成是在细胞内完成的 C.质粒都可作为载体 D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料 4．下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体 A.细菌质粒 B.噬菌体 C.动植物病毒 D.细菌核区的DNA 5．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是 A.人工合成目的基因 B.目的基因与运载体结合 C.将目的基因导入受体细胞 D.目的基因的检测表达 6．不是基因工程方法生产的药物是 A.干扰素 B.白细胞介素 C.青霉素 D.乙肝疫苗 7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是 A.限制酶和连接酶 B.限制酶和水解酶 C.限制酶和运载酶 D.连接酶和运载酶 8．下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件 A.具有某些标记基因 B.决定宿主细胞的生存 C.能够在宿主细胞中复制 D.有一个或多个限制酶切点 9．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中，这种蛋白质的作用 A.促使目的基因导入宿主细胞中 B.促使目的基因在宿主细胞中复制 C.使目的基因容易被检测和选择 D.使目的基因容易成功表达 10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是指 A.用于检测疾病的医疗器械 B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子 10 / 1 C.合成β—球蛋白的DNA D.合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段 11．基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA子中的GAATTC顺序，切点在G和A之间，这是应用了酶的 A．高效性 B.专一性 C．多样性 D.催化活性受外界条件影响
高中生物选修三“基因工程”综合练习 (20题含答案) 请回答下列有关克隆技术和基因编辑的问题： 1）克隆技术是指通过人工手段复制出与原体完全一样的 生物体。目前，克隆技术主要分为三种：体细胞核移植克隆、胚胎分裂克隆和基因克隆。其中，最常见的克隆方法是。 2）基因编辑技术是指通过改变生物体的基因序列来实现 对其性状的调控。CRISPR/Cas9系统是目前最常用的基因编辑技术之一，其中CRISPR指的是，Cas9则是。 3）基因编辑技术的应用非常广泛，其中包括疾病基因治疗、农业生产、生物安全等领域。以疾病基因治疗为例，基因编辑技术可以通过修复或替换患者体内的有缺陷基因，从而达到治疗疾病的目的。目前，基因编辑技术已经被用于治疗包括血友病在内的多种疾病。 答案：（1）体细胞核移植克隆（1分）（2）“类细菌重 复间隔簇”、“CRISPR相关蛋白9”（1分）（3）血友病（1分）逆转录病毒载体是目前应用较多的动物基因工程载体之一。它可以将外源基因插入到受体细胞染色体中，使外源基因随染色体DNA一起复制和表达。研究发现逆转录病毒基因组
（RNA）的核心部分包括三个基因：gag基因（编码病毒的核 心蛋白）、pol基因（编码逆转录酶）、env基因（编码病毒 的表面糖蛋白）。位于这些基因的两端有LTR序列（含有启 动子、调节基因等），控制着逆转录基因组核心基因的表达及转移。下图展示了构建逆转录病毒载体及用于培育转基因小鼠的过程。 1）逆转录病毒的遗传信息储存在RNA中，其中包含四 种核苷酸排列顺序中的四种脱氧核苷酸。 2）过程②中，外源基因一定要插入到病毒DNA的LTR 序列中的启动子后，其主要目的是控制外源基因的表达。 3）过程③中，导入病毒蛋白编码基因（gag，pol和env）的目的是合成组成病毒的蛋白质。 4）过程④中，逆转录病毒载体感染的细胞一般选择内细 胞团细胞，因为这类细胞能发育成新个体的各种组织器官（具有发育的全能性），处于囊胚期。
高三生物基因工程练习题及答案 第一节：选择题 1. 现代基因工程技术的突破是建立在下列发现的基础之上的： A. DNA双螺旋结构 B. 基因重组的概念 C. DNA复制的机制 D. 基因的表达调控机制 正确答案：A. DNA双螺旋结构 2. 下列哪个是基因工程的主要应用领域： A. 农业领域 B. 医学领域 C. 环保领域 D. 以上都是 正确答案：D. 以上都是 3. 基因工程按操作方式可分为以下几类，下面哪个选项顺序正确： A. 提取、分离、重组、转移 B. 分离、转移、提取、重组
C. 提取、分离、转移、重组 D. 分离、提取、转移、重组 正确答案：C. 提取、分离、转移、重组 4. 以下哪项不属于基因工程的基本技术之一： A. PCR B. SDS-PAGE C. DNA测序 D. 基因克隆 正确答案：B. SDS-PAGE 5. 哪个技术代表了原创性的DNA测序方法，为测序领域的巨大进步奠定了基础： A. Sanger测序法 B. PCR法 C. 杂交技术 D. 聚合酶链式反应技术 正确答案：A. Sanger测序法 第二节：填空题
1. 基因工程主要通过重组DNA来完成基因的操纵和转移。其中，常用的DNA序列寻找方法是______。 答案：PCR （聚合酶链式反应） 2. 基因工程筛选转化细胞常用的方法是______。 答案：筛选抗生素（抗生素筛选法） 3. 基因工程中，将外源基因与载体进行重组，得到重组DNA，这个过程称为______。 答案：基因克隆 4. 基因工程常用的工具酶是______。 答案：限制性内切酶 5. 将基因工程所重组得到的DNA片段转入细胞内部的过程称为 ______。 答案：转化（也可接受转染） 第三节：解答题 1. 请描述一下基因工程中的PCR技术的原理和应用。 答案：PCR（聚合酶链式反应）技术是一种体外人工合成DNA片段的技术。其原理是通过DNA解旋、引物延伸和DNA复制等步骤，使得DNA在体外被无限制地复制增加。PCR技术能够在短时间内扩增特定的DNA序列，具有高度灵敏性和特异性。在基因工程中，PCR技
基因工程习题集 一、名词解释：（20×4/） 1、基因 2、克隆 3、基因定位 4、PCR 5、基因工程工具酶 6、组织培养 7、限制性核酸内切酶 8、受体细胞 9、生物技术 10、基因沉默 11、重组DNA技术12、逆转录酶13、单克隆抗体14、核移植技术 15、细胞融合16、胞内酶17、凝胶过滤18、固定化酶 19、蛋白质工程 20、生物反应器 二、单项选择题：(60×2/) 1．下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（） A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒D．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良2．在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（）A．用mRNA为模板逆转录合成DNA B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成 C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D．由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA 3．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导人棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不．正确的是（） A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少 B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染 D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的 4．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是（） A．人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍B．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵 C．在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中 D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA 5.科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。以下有关该基因工程的叙述，错误的是（） A.采用反转录的方法得到的目的基因有内含子 B.基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的 C.马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞
专题1 《基因工程》单元测试题 一、单选题(每小题只有一个正确答案) 1.在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是( ) A．限制酶和DNA连接酶 B．限制酶和水解酶 C．限制酶和载体 D． DNA连接酶和载体 2.下列说法正确的是( ) A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B．用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌 C．质粒是基因工程中惟一用作运载目的基因的载体 D．利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程不能称为“克隆” 3.某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。 下列有关叙述错误的是( ) A．步骤①所代表的过程是反转录 B．步骤②需使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶 C．步骤③可用CaCl2处理大肠杆菌，使其从感受态恢复到常态 D．检验Q蛋白的免疫反应特性，可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体特异性 反应试验 4.与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是( ) A．反转录酶 B． RNA聚合酶 C． DNA连接酶 D．解旋酶 5.转基因抗虫棉的研制过程中，为了检测抗虫基因是否成功导入，最简捷有效的方法是( ) A．用DNA探针检测受体细胞中的目的基因是否存在 B．用DNA探针检测受体细胞中的目的基因是否转录出相应的mRNA C．直接将培育出的棉株叶片饲喂原本的棉花害虫 D．检测标记基因是否正常地表达出来
6.下列哪项不是表达载体所必需的组成( ) A．目的基因 B．启动子 C．终止子 D．抗青霉素基因 7.下列说法正确的是( ) A．限制性核酸内切酶的识别序列是GAATTC，只能在G和A之间切断DNA B． DNA连接酶能够将任意2个DNA片段连接在一起 C．质粒是能够自主复制的小型双链环状DNA分子 D．基因工程的载体只有质粒一种 8.应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。下图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中不正确的是( ) A．图中①～⑤过程中都发生了碱基互补配对现象 B．图中①过程需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶 C．将PrG导入细胞Ⅱ，则Ⅱ最可能是浆B细胞 D．图中⑤过程需要的培养基中一定含有植物激素和无机养料 9.在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是( ) A．化学合成法 B．基因组文库法 C． cDNA文库法 D．多聚酶链式反应 10.中国新闻网报道，阿根廷科学家近日培育出了世界上第一头携带有两个人类基因的牛，因此有望生产出和人类母乳极其类似的奶制品。下列叙述正确的是( ) ①该技术将导致定向变异 ②DNA连接酶将目的基因与载体黏性末端的碱基对连接起来 ③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料
《基因工程》 一、选择题（每小题 分，共 分） ．基因工程的创始人是 。 ．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有 不太恰当。 由作用于同一 序列的两种酶构成 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对 进行修饰 不同的宿主系统具有不同的限制 修饰系统 ．在 的 链上，基因的起始密码子是 （或 ） ． 限制性内切核酸酶可以特异性地识别 。 双链 的特定碱基对 双链 的特定碱基序列 特定的三联密码 以上都正确 ．末端转移酶是合成酶类，具有 活性。 聚合酶 聚合酶 内切酶 外切酶 ．下面关于松弛型质粒 性质的描述中， 是不正确的。 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。 可以在氯霉素作用下进行扩增。 通常带有抗药性标记。 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。 ．关于 的最正确的说法是 。 同 互补的单链 同 互补的双链 以 为模板合成的双链 以上都正确 ．关于 ，下列说法中哪一项不正确 是最常用的 连接酶。 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。 不但能连接粘性末端。 最适温度 ℃ 。 ．下列关于建立 文库的叙述中， 是错误的 从特定组织或细胞中提取 或 用反转录酶合成 的对应单链 以新合成的单链 为模板合成双链 新合成的双链 克隆到载体上，并导入受体细胞 ．用下列方法进行重组体的筛选，只有 说明外源基因进行了表达。 印迹 原位菌落杂交 二、填空题（每空 分，共 分） ．限制性内切核酸酶分为三类，基因工程中应用的是 。 ．为了防止 的自身环化，可用 去双链 。 ．切口平移 法标记 探针时应用的酶是 。 ．基因工程中的 种主要类型的载体是 、 、 。
6.2基因工程及其应用（含答案) 一、单选题 1．改良缺乏某种抗病性的水稻品种，不宜采用的方法是（） A．诱变育种B．单倍体育种 C．基因工程育种D．杂交育种 2．下列说法正确的是 A．基因工程能够按照人类意愿改造生物 B．所有转基因食品都不安全，不能食用 C．所有转基因生物都很安全，应无限制推广 D．我国对转基因生物没有规定 3．下列实践活动包含基因工程技术的是 A．水稻F1 花药经培养和染色体加倍，获得基因型纯合新品种 B．抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦 C．将含抗病基因的重组DNA 导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株D．用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆4．某生物的基因型为AaBB,通过下列技术可以分别将它转变为以下基因型的生物:①AABB②aB③AaBBC④AAaaBBBB。则以下排列正确的是() A．诱变育种、转基因技术、花药离体培养、细胞融合 B．杂交育种、花药离体培养、转基因技术、多倍体育种 C．花药离体培养、诱变育种、多倍体育种、转基因技术 D．多倍体育种、花药离体培养、诱变育种、转基因技术 5．基因工程的正确操作步骤是（） ①使目的基因与运载体结合 ②将目的基因导入受体细胞 ③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求 ④提取目的基因 A．③②④①B．②④①③ C．④①②③D．③④①② 6．下列各项中育种原理相同的一组是 A．太空椒与抗虫棉 B．抗除草剂的玉米和无子西瓜 C．高产优质杂交水稻和高产青霉素菌株
D．无子西瓜和八倍体小黑麦 7．下列关于培育生物新品种的叙述，正确的是 A．杂交育种培育的新品种必须是纯合子 B．单倍体育种是为了获取单倍体新品种 C．空间诱变育种获得的优良性状均可稳定遗传 D．培育三倍体转基因植物，可以防止基因污染 8．下列不能作为基因工程操作工具的是（） A．限制酶B．DNA连接酶 C．DNA聚合酶D．噬菌体 9．各种育种方法或技术都有其优劣之处，下列相关叙述不正确的是（） A．传统的育种方法周期长，可选择的范围有限 B．通过人工诱变，人们有目的地选育新品种，能避免育种的盲目性 C．杂交育种难以将不同物种的优良基因集中在一起 D．基因工程可以实现基因在不同物种之间的转移，人们可以定向选育新品种 10．下列新品种是利用分子生物学和基因工程的手段，将某种生物的基因转移到相应生物体内而获得的是 A．高产青霉素菌株B．高产优质杂交水稻 C．“太福一号”小麦D．转基因抗冻番茄 11．下列几种育种方法，能改变原有基因的分子结构的是() A．诱变育种B．单倍体育种 C．基因工程育种D．杂交育种 12．下列有关生物遗传变异的叙述中，正确的是（） A．三倍体无子西瓜高度不育，但其无子性状可遗传 B．单倍体的体细胞中不存在同源染色体，其植株比正常植株弱小 C．转基因技术是通过直接导入外源基因，使转基因生物获得新性状 D．家庭中仅一代人出现过的疾病不是遗传病，若几代人中都出现过才是遗传病13．下图中的①②③表示培育番茄新品种的三种育种方法。下列说法不正确的是()。
《基因工程》 一、选择题（每小题1.5分，共15分） 1．基因工程的创始人是 ( )。 A A. Kornberg B W. Gilbert C P. Berg D S. Cohen 2．关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。 A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成 B 这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶 C 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰 D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统 3．在DNA的3’-5’链上，基因的起始密码子是 ( ) A ATG（或GTG） B AGT C TAG D TGA 4．II限制性内切核酸酶可以特异性地识别 ( )。 A 双链DNA的特定碱基对 B 双链DNA的特定碱基序列 C 特定的三联密码 D 以上都正确 5．末端转移酶是合成酶类，具有( )活性。 A 3’→5’DNA聚合酶 B 5’→3’DNA聚合酶 C 5’→3’DNA内切酶 D 5’→3’DNA外切酶 6．下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中，( )是不正确的。 A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。 B 可以在氯霉素作用下进行扩增。 C 通常带有抗药性标记。 D 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。 7．关于cDNA的最正确的说法是( )。 A 同mRNA互补的单链DNA B 同mRNA互补的双链DNA C 以mRNA为模板合成的双链DNA D 以上都正确 8．关于T4 DNA Ligase，下列说法中哪一项不正确? ( ) A 是最常用的DNA连接酶。 B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。 C 不但能连接粘性末端。 D 最适温度37 ℃。 9．下列关于建立cDNA文库的叙述中，( )是错误的? A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNA B 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA C 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA D 新合成的双链DNA克隆到载体上，并导入受体细胞 10．用下列方法进行重组体的筛选，只有( )说明外源基因进行了表达。 A Southem blot B Northem blot C Western印迹 D 原位菌落杂交 二、填空题（每空1分，共25分） 1．限制性内切核酸酶分为三类，基因工程中应用的是____________ _。 2．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。 3．切口平移(nick translation)法标记DNA探针时应用的酶是_____ ___ __。 4．基因工程中的3种主要类型的载体是_______________、_____________、__________。 5．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是、和。 6．黏粒(cosmid)是杂合载体。 7．引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1) (2) 、 (3) (4) 。 8．Northern印迹和Southern印迹有两点根本的区别：(1)_ __、，(2)________ 9．PCR反应中常用的酶是______ _ 。
基因工程原理练习题及其答案 一、填空题 1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。 3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。 4．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的___________。 5．限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自_______，第二、三两个字母取自_________，第四个字母则用___________表示。 6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。 7．第一个分离的限制性内切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。8．限制性内切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。 9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。 10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。 11．EDTA是____________离子螯合剂。 12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。 13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。 14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。15．反转录酶除了催化DNA的合成外，还具有____________的作用，可以将DNA- RNA杂种双链中的___________水解掉。 16．基因工程中有3种主要类型的载体：_______________、_____________、______________。 17．就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：_______________、_____________、______________。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 18．一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测 不出质粒，这种现象叫。 19．pBR322是一种改造型的质粒，它的复制子来源于，它的四环素抗性基因来自于，它的氨苄青霉素抗性基因来自于。 20．Y AC的最大容载能力是，BAC载体的最大容载能力是。 21．pSCl01是一种复制的质粒。 22．pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC系列的载体是通过 和两种质粒改造而来。它的复制子来自，Amp 抗性基因则是来自。 23．噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有两方面的原因：一是；二是。 24．野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是 和。 25．黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自、COS位点序列来自，最大的克隆片段达到kb。 26．野生型的λ噬菌体DNA不宜作为基因工程载体，原因是：(1) (2) (3) 。 27．噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的，其中来自质粒的主要结构是，而来自噬菌体的主要结构是。 28．λ噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DNA片段后，总的长度应在噬菌体基 因组的的范围内。 29．在分离DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠檬酸钠等，其目的是 。 30．用乙醇沉淀DNA时，通常要在DNA溶液中加人单价的阳离子，如NaCl和NaAc， 其目的是。 31．引物在基因工程中至少有4个方面的用途：(1) (2) (3) (4) 。 32．Clark发现用Taq DNA聚合酶得到的PCR反应产物不是平末端，而是有一个突出 碱基末端的双链DNA分子。根据这一发现设计了克隆PCR产物的。 33．在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在 。 34．乙醇沉淀DNA的原理是。 35．假定克隆一个编码某种蛋白质的基因，必须考虑其表达的三个基本条件：
《基因工程》 、选择题（每小题 1.5分，共15分） 1. 基因工程的创始人是（）。 A A. Kornberg B W. Gilbert C P. Berg D S. Cohen 关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有）不太恰当。 由作用于同一 DNA 序列的两种酶构成B 这一系统中的核酸酶都是II 类限制性内切核酸酶 这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对 DNA 进行修饰 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统 在DNA 的3 ' -5 '链上，基因的起始密码子是 （） (或 GTG ) B AGT C TAG D TGA 双链DNA 的特定碱基对 双链DNA 的特定碱基序列 特定的三联密码 5' .3' DNA 内切酶D 5' 3 ' DNA 外切酶 F 面关于松弛型质粒（relaxed plasmid ） 性质的描述中，（） 是不正确的。 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，因而有较多的拷贝数。 同严紧型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。 关于T4 DNA Ligase ，下列说法中哪一项不正确 从特定组织或细胞中提取 DNA 或RNA B 用反转录酶合成mRNA 的对应单链DNA 以新合成的单链 DNA 为模板合成双链DNA 新合成的双链DNA 克隆到载体上，并导入受体细胞 、填空题（每空1分，共25分） 基因工程中的3种主要类型的载体是 野生型的M13不适合用作基因工程载体，主要原因是 杂合载体。 Northern 印迹和Southern 印迹有两点根本的区别: PCR 反应中常用的酶是 II 限制性内切核酸酶可以特异性地识别 （） 末端转移酶是合成酶类，具有 活性。 关于cDNA 的最正确的说法是（ 同mRNA 互补的单链 DNA 以mRNA 为模板合成的双 链 DNA D 同mRNA 互补的双链DNA 以上都正确 A ATG 以上都正确 3’ DNA 聚合酶C C 通常带有抗药性标记。D B 可以在氯霉素作用下进行扩增。 是最常用的DNA 连接酶。B 不但能连接粘性末端，还能连接齐平末端。 不但能连接粘性末端。 最适温度37 °C 。 下列关于建立cDNA 文库的叙述中 ） 是错误的？ 10 .用下列方法进行重组体的筛选，只有 （）说明外源基因进行了表达。 A Southem blot B Northem blot C Western 印迹D 原位菌落杂交 限制性内切核酸酶分为三类 基因工程中应用的是 为了防止DNA 的自身环化 可用 去双链DNA 切口平移(nick translation) 法标记DNA 探针时应用的酶是 黏粒(cosmid)是 引物在基因工程中至少有4个方面的用途：⑴ (2) (1)_ 二、，(2).
基因工程习题及答案.doc 1. 在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（B ） A ? I 类限制酶 B. II 类限制酶 111类限制酶 D.核酸内切酶 2. 下列关于同裂酶的叙述错误的是（B A. 是从不同菌种分离到的不同的酶, 也称异源同工酶。 B. 它们的识别序列完全相同。 C. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。 D. E. 两种同裂酶的切割产物连接后, 可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。 3. 多数限制酶消化DNA 的最佳温度是 37 °C B. 30 °C C. 25 °C D. 16 °C E. 33 °C 4. 下列关于限制酶的叙述错误的是（ 5. A. B. C. D. E. ［类限制酶反应需要Mg2+、 II 类限制酶反应需要Mg2+、 111类限制酶反应需要Mg2+、 ATP 和S-腺昔蛋氨酸。 ATP o ATP ， S-腺昔蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。 I 、III 类限制酶对DNA 有切割和甲基化活性，II 类限制酶对DNA 只有切割活性而无甲基化活性。 TT 类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。 如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA 上识别6bp 的切割概率为（D ） A. 1/44
C. 1/64 D. 1/46 E. 1/106 6.多数II 类限制酶反应最适PH 是（C ） A. PH:2-4 B. PH:4-6 C. PH:6-8 D. PH:8-10 E. PH:4T0 7.下列关于限制酶反应的说法错误的是（D ） A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嗜嚏、腺噂吟或尿嗜嚏被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。 B. 许多限制酶对线性DNA 和超螺旋DXA 底物的切割活性是有明显差异的。 8. C. D. E. 有些限制酶对同一 DNA 底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。 限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液，是由于磷酸根会抑制限制酶反应。 BSA 对许多限制酶的切割活性都有促进作用，所以酶切反应中常加入一定量的BSA o II 类限制酶反应中必须的阳离子是（C ） 单选题 E. RNAase 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。 第二章习题 A. Na + B. Ca2+ C. Mg2+
基因工程试题及答案
作业一： 一、名词解释： 1、基因：是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。 2、基因组该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子 3、操纵子:原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。 4、启动子:是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至少一个转录起始点。在真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。 5、增强子:是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约200b p的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中
(4)高pH(8.0以上)；(5)含有有机溶剂，如DMSO，乙醇等； (6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如Mn2+，Cu2+，C02+，Zn2+等)。 3、影响DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些？ 答：（1）DNA的纯度（2）DNA甲基化的程度（3）酶切消化反应的温度（4）DNA的分子结构（5）核酸内切限制酶的缓冲液 4、什么是Klenow酶？有哪些活性？在基因工程中有什么作用？ 答：Klenow酶是1974年Klenow用枯草杆菌蛋白酶水解DNA聚合酶I，得到两个片段，其中大片段的分子量为75kDa，它具有5'-3'聚合酶和3'-5'外切核酸酶的活性，小片段具有5'-3'外切核酸酶活性。由于大片段失去了DNA聚合酶I
第二章习题 一、单选题 1.在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（ B ） A．I类限制酶 B. II类限制酶 C. III类限制酶 D.核酸内切酶 E. RNAase 2.下列关于同裂酶的叙述错误的是( B ) A. 是从不同菌种分离到的不同的酶,也称异源同工酶。 B. 它们的识别序列完全相同。 C. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。 D. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。 E. 两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。 3. 多数限制酶消化DNA的最佳温度是（ A ） A. 37℃ B.30℃ C.25℃ D.16℃ E.33℃ 4. 下列关于限制酶的叙述错误的是( B ) A. I类限制酶反应需要 Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸。 B. II类限制酶反应需要Mg2+、ATP。 C. III类限制酶反应需要Mg2+、ATP，S-腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。 D. I、III类限制酶对DNA有切割和甲基化活性，II类限制酶对DNA只有切割活性而无甲基化活性。 E. II类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。 5. 如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA上识别6bp的切割概率为( D ) A. 1/44 B. 1/66 C. 1/64 D.1/46 E. 1/106 6. 多数II类限制酶反应最适PH是 ( C ) A. PH:2-4 B. PH:4-6 C. PH:6-8 D. PH:8-10 E. PH:4-10 7. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( D ) A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。 B. 许多限制酶对线性DNA和超螺旋DNA底物的切割活性是有明显差异的。 C. 有些限制酶对同一DNA底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。 D. 限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液，是由于磷酸根会抑制限制酶反应。 E. BSA对许多限制酶的切割活性都有促进作用，所以酶切反应中常加入一定量的BSA。 8. II类限制酶反应中必须的阳离子是（ C ）
基因工程习题及参考答案01 绪论部分 一、填空题 1 .基因工程是年代发展起来的遗传学的一个分支学科。基因工程技术的诞生，使人 们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统的生物技术时代， 走向的时代。 2 .随着基因工程技术的诞生和发展，人类可以通过、和等三 种主要生产方式，大量取得过去只能从组织中提取的珍稀蛋白，用于研究或治病。 3 .Cohen等在年构建了第一个有功能的重组DNA分子。 4 .基因工程的两个基本特点是：(1),(2)。 5 .基因克隆中三个基本要点是：;和。 6 .年，美国斯坦福大学等在上发表了题为：“将 新的遗传信息插入SV40病毒DNA的生物化学方法：含有入噬菌体基因和E.coli半乳糖 操纵子白^环状SV40DNA”的论文，标志着基因工程技术的诞生。这一工作具有划时代的意义，但是他们并没有。 7 .克隆基因的主要目的有四：(1);(2); (3) ；(4)。 二、选择题(单选或多选) ()1.因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是 (a)A.Komberg(b)W.Gilbert(c)P.Berg(d)B.McClintock ()2.第一个作为重组DNA载体的质粒是() (a)pBR322(b)ColEl(c)pSCl01(d)pUCl8 ()3.第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是() (a)EcoRI(b)EcoB(c)EcoC(d)EcoRn ()4.PBerg构建SV40二聚体时用了几种不同的酶，其中()的作用是制造隐蔽的5'端。 (a)末端转移酶(b)入外切核酸酶(c)外切酶出(d)DNA连接酶 三、简答题 1 .为什么说基因工程技术是60年代末70年代初发展起来的？ 2 .重组DNA的含义是什么？ 3 .如何理解基因工程的两个特点？ 4 .在Cohen构建有生物功能重组体的第一步实验中，用EcoRI切割了R6-5质粒，然后转化E.coliC600, 在卡那霉素抗性子板上筛选到了pSCl02,它是由R6-5的三个EcoRI片 段组成，请推测这个质粒具有什么遗传特性？ 5 .什么是动物乳腺生物反应器？ 四、问答题 1 .S.NCohen于1973年构建了三个重组体，pSCl02,pSCl05,pSCl09请说明这三个 重组体是如何获得的？各说明了什么？ 2 .基因克隆是如何使含有单个基因的DNA片段得到纯化的？ 五、概念题 1.遗传工程 2.生物技术 3.基因工程 4.细胞工程 5.细胞分泌工程 6.酶工程 7.蛋白质工程 8.发酵工程 9.移动基因10.断裂基因 11.重叠基因12.假基因
2022-2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试精选专练V（带答案） 一.综合考核题库(共35题) 1. 如果知道某一基因的功能及其相应的蛋白质的氨基酸序列组成，可以通过何种方法克隆该基因？ 正确答案:可以通过合成核苷酸探针或设计简并PCR引物从cDNA文库或基因组文库中筛选。或者利用相应的抗体从cDNA表达文库中筛选相应的克隆。 2. ________________是一种耐热的依赖DNA的DNA聚合酶。 正确答案:TaqDNA聚合酶 3. 基因重组的载体必须具备下列哪些特点： A、本身是一个复制单位，能在受体细胞中复制 B、插入外源DNA后也不影响自身的复制 C、易于进入受体细胞 D、通过自身的酶系在受体细胞中复制 E、通常带有抗性基因，易于筛选和鉴定 正确答案:A,B,C,E 4. __________通常是指通过基因工程、抗体工程、细胞工程技术等制备生物药品用于疾病诊断、预防和治疗的行业。 正确答案:生物制药 5. _________是指编码产物能够被快速测定，常用来判断外源基因是否已经成功导入寄主细胞并检测其表达活性的一类特殊用途的基因。 正确答案:报告基因
______________也叫做依赖于RNA的DNA聚合酶或RNA指导的DNA聚合酶。 正确答案:逆转录酶 7. 在微生物遗传学和分子遗传学研究领域中的技术上的三大发明对基因工程的诞生起到了决定性的作用，这三大发明是下列哪些 A、利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶体外切割和连接DNA片段 B、遗传密码子的破译 C、质粒改造成载体以携带DNA片段克隆 D、逆转录酶的使用 E、明确了DNA的双螺旋结构和半保留复制机制 正确答案:A,C,D 8. 构建GST蛋白表达系统的载体是为了使目标蛋白以哪种方式表达? A、融合表达 B、分泌表达 C、独立表达 D、包涵体表达 正确答案:A 9. 克隆基因目的蛋白的表达形式主要有哪些类型？ 正确答案:表达蛋白按溶解特性通常包括：不溶性蛋白和可溶性蛋白两类，具体包括如下几种结构形态：包涵体型蛋白、融合型蛋白、分泌型蛋白。 10. ______________是应用最广也是研究最深入的DNA聚合酶。 正确答案:大肠杆菌DNA聚合酶I 11. 欲将一真核生物的结构基因克隆后转移到原核生物(如E．coli)中进行表达，克隆时应注意哪些问题？正确答案:应注意的问题有：启动子、密码子、剪接、分泌。