培养基模拟灌装试验-TSB验证详解培养基模拟灌装试验-TSB 验证详解
针对TSB培养基，适用玻璃安瓿小容量注射剂产品一、关键点 1、培养基选择:基础培养基和选择性培养基。。。。。。本次讲解TSB培养基。一般为250g一瓶，每30g+1L注射用水配制。配制注意:注射用水不能热配，培养基不能通入氮气、二氧化碳等。目的是去除抑菌因素
2、生产线选择:
3、生产批次选择:
详见无菌附录
4、容器选择:易观察。应模拟全部规格，或计划中安排。容器应选择无色透
明
5、装量选择:足够微生物生长所需，能充分接触到内壁，采用倒瓶等容器大
小和装量应足够微生物生长和便于观察。一般装量为25~40% 如:5ml安瓿瓶，灌装2ml。并不一定要模拟某个品种的装量。
6、灌装速度选择:工艺范围内，快速和低速都有不同的模拟意义一般涉及洗
灌封联动的问题。比如安瓿瓶烘干灭菌的时间影响。 7、生产线人员选择:人员参与验证，或计划中安排
详见无菌附录
8、灌装数量选择:批量及置信区间选择等
详见无菌附录 2003验证指南
9、培养基试生长试验及培养后阳性对照试验:
试生长可参考:分别在30?,35?(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌)和23?,28?(白色念珠菌、黑曲霉)培养 7 天。应有对照组。
阳性对照:接种浓度均小于100cfu/ml
10、菌种选择:
中国药典
11、培养室选择及热分布:培养环境监控措施证明
对于很多企业来说，不可能会建设一个培养室。一般情况下，都是需要找个房间作培养室。这就需要培养室检查:23?,28? 与30?,35? 是否能稳定。这也与培养季节有关。
首先:空间是否合适、是否受认为干扰。必要时加锁
接着:制冷模式，测试最低控温;制热模式，测试最低控温。最后:选取不同测温点进行检测，以说明热分布均一。当放入培养瓶开始，应该已经是一个合格环境，并开始登记温湿度。期间应多次检查，并适当调节。
12、灌装环境监测项目及监测点选择:
分二关键部分:1:灌装区域 2:灌装设备所处环境项目:悬浮粒子、浮游菌、沉降菌等，详见无菌附录
注意:设备自带的检测项目不能取代验证需要的检测项目。换句话说:
设备的检测结果是否被认可的问题。
13、取样点及取样法选择:
对于过滤系统前后的培养基:微生物负载和无菌检查的取样，很难保证取样过程不染菌。
必须对取样人进行正规培训。何况取样必须是有资质，不得委托取样。验证中最好QA取样为佳。
14、更衣取样及监测选择:
无菌附录
15、常规操作及非常规操作模拟选择:
可参考如下:
设备模拟维修试验
模拟现场人员最大控制数
模拟灌装针/管调整、更换事件
模拟空瓶倒瓶、破瓶等故障事件
模拟药液瓶破瓶事件
模拟中控抽样处理的过程
16、工艺范围内最差条件挑战选择:最差条件，并非极端条件什么是最差条件,并不是关闭空调系统，脱掉无菌洁净服，就是最差条件。这是极端条件。任何最差条件选择时，应考虑是否属于工艺控制范围,
17、染菌调查项目选择:
可根据企业相关管理文件要求确定。
18、菌种鉴别方法选择:
如果没有鉴别能力，应进行耐热性检查。至少说明染菌产品，其不耐热。如更衣表面取样等。对于产品，需要另论。
19、生产环境及容器具、设备清洁、灭菌存放周期的选择:
参考最差条件要求及工艺控制，无菌装配
20、模拟工艺选择:
培养基模拟灌装试验，是将培养基代替产品，更易于染菌的办法。模拟工艺，就应选着有风险的操作，再去除抑菌操作。比如产品充氮气，这是抑菌。应由压缩空气代替等。 21:抑菌因素评估:
详见GMP指南-无菌产品
22:风险评估:
应从系统上评估，而非各工序进行风险评估。毕竟不是工艺验证。包括厂房、公用配套系统、工艺等等
23:不同阶段模拟产品控制及区分:
禁止使用纸质外箱进行区分隔离、培养。建议使用不锈钢格斗，带孔。不同模拟项目应有相应标识并在一个格斗或2个。格斗不能直接落地，尤其是在加热培养。
验证方案编码：STP-YZ-04702 A A A A药业有限公司 验证方案 项目名称培养基模拟灌装 方案日期 1
验证方案审批表
验证进度计划 3
培养基模拟灌装验证方案 目录 验证方案审批表 1. 验证目的 2.适用范围 3.职责 4.有关背景资料 5.验证项目、评价方法及结果 6．漏项与偏差 7．审阅本验证方案，并确认验证结果 8．验证总结 9.SOP的修订 10.再验证时间 11 证明
1.验证目的 培养基模拟灌装试验是用与实际生产工艺相同的条件与操作方法，包括生产环境，向安瓿内灌装经除菌过滤的液体培养基，然后将此模拟制品在适当条件下培养，以确认无菌工艺过程的可靠性。证明在本公司小容量注射剂车间生产线中灌装过程中所采用的各种方法和各种规程，防止微生物污染的水平达到可接受的合格标准的能力，或提供保证所生产产品的无菌性的可信限度达到可接受的合格标准的证据。充分验证无菌生产工艺的可靠性。同时评价生产操作人员的行为规范性。 我公司小容量注射剂车间于2011年3月5-6日进行过三批培养基无菌灌装验证，验证结果符合要求。由于小容量注射剂车间的纯化水系统、注射用水系统、空调净化系统于2011年8-10进行了改造和验证，关键生产设备如超声波洗瓶机、隧道干燥杀菌机、安瓿拉丝灌封机也于2011年9月进行了改造和验证，为充分验证无菌生产工艺的可靠性，故拟再次进行三批培养基模拟灌装验证。 2.验证范围 本验证方案适用于本公司小容量注射剂车间培养基模拟灌装生产验证，当上述条件改变时，应重新验证。 3.职责 3.1验证领导小组 3.1.1负责验证方案会审 3.1.2负责验证方案的批准 3.1.3负责对验证方案修改稿的批准 3.1.4负责验证报告审核、批准 3.2 验证小组 3.2.1 负责验证方案的起草和审核。 3.2.2负责按验证方案对有关人员进行培训。 3.2.3负责组织、协调本验证方案的实施。 3.2.4负责收集、整理和审核验证数据，起草验证报告（如方案执行有偏差，要完成OOS调查报告）。 3.3 小容量注射剂车间 3.3.1 负责验证方案的实施。 3.3.2 负责组织培训岗位操作人员。 3.4生产部 3.4.1协助验证方案的实施，提供必要的技术支持。 5
分发部门： 培养基模仿灌装（小容量注射剂）无菌生产工艺验证小组 一、概述 厂区无菌操作生产线，按GMP及其附录规定进行设计，是专用于小容量注射剂非最后灭菌产品生产使用。某某产品因无法进行F0≥8分钟湿热灭菌，以达到SAL≤10-6，但处方可以通过微生物滞留过滤器过滤，
故采用除菌过滤和无菌工艺相结合灭菌办法。 无菌生产工艺是制药领域中最难工艺之一，保证产品无菌是该工艺最大难点，减少无菌工艺药物污染风险两项重要办法为：①人员培训 ②无菌工艺验证。 按SFDA 化学药物注射剂基本技术规定：培养基灌装验证是对设备、环境以及人员操作一种系统验证，是判断无菌保证水平核心手段。故在正式生产前必要按某某产品生产工艺进行培养基模仿灌装验证。 1 本次验证核心生产工艺流程图 2 验证原理 将培养基暴露于设备、容器密封系统表面和核心环境条件中，并模仿实际生产完毕工艺操作。对装有培养基密闭容器进行培养以检查微生物生长并评价成果，拟定实际生产中产品污染也许性。对于失败验证进行菌种分析并调查，确认并解决也许导致失败因素后，重新进行验证。 3验证次数 按GMP 附录1规定因该生产线为新建厂区设施，为培养基模仿灌装实验初次验证，故需进行持续三个批次验证活动。 二、验证目 1通过该工艺验证活动证明新设计厂房采用既定无菌生产工艺能保证产品无菌规定； 2通过该工艺验证活动证明无菌操作有关人员资格，减少人员带入无菌风险；
3通过该工艺验证活动保证生产符合现行GMP法规规定。 三、验证范畴和实行时间 1本验证方案合用于厂区小容量注射剂车间无菌生产线正式投入使用前某某品种小容量注射剂无菌生产工艺培养基模仿灌装验证活动； 2筹划验证明行时间为3月~4月持续三个批次。 四、验证小组和职责 1 验证小组 依照验证内容和验证管理文献规定，成立验证小组，验证小构成员见下表，小组人员应在最后验证报告中签名确认。在验证明行前，方案起草人应对所有有关参加人员进行验证方案培训，做好培训记录，并将记录附于验证报告后。
培养基模拟灌装方案 一、背景简介 培养基是微生物学实验中的重要基础，常常需要进行大批量的灌装。传统的培养基灌装方式费时费力，而且操作不方便，难以达到高效的生产要求。为了提高灌装效率和质量，需要开发一种模拟灌装方案。 二、目标 1.提高培养基灌装效率。 2.提高培养基灌装的一致性。 3.减少人工操作。 4.提高灌装的质量控制能力。 三、实施步骤 1.设计灌装装置 根据培养基灌装的要求和目标，设计一种自动化的灌装装置。该装置应能够准确地控制培养基的体积，并能自动进行灌装和封口的操作。合理的设计可以提高灌装的效率和一致性。 2.开发控制系统 开发一套完整的控制系统，能够对灌装装置进行精确的控制。控制系统应包括灌装装置的控制软件和硬件，能够进行体积控制、灌装速度控制和封口力度控制等操作。通过控制系统，可以实现灌装的自动化和质量的控制。
3.优化工作流程 将培养基灌装的各个步骤进行优化，包括培养基的准备、灌装操作、封口操作等。通过合理安排工作流程，可以提高灌装的效率和一致性。可以考虑使用自动化设备对培养基进行混合、过滤、存储等处理，进一步减少人工操作。 4.培训操作人员 对操作人员进行培训，使其掌握操作流程和操作技巧。培训内容包括培养基的准备、灌装装置的操作、控制系统的使用等。操作人员应严格按照操作规程进行操作，以确保灌装的质量和一致性。 5.质量控制 建立一套完整的质量控制机制，包括对培养基的物理性质和化学性质进行检测和监控。可以使用专业的仪器对培养基进行pH值、溶解度、浓度等参数的检测，以确保灌装的质量和一致性。 6.不断改进 根据实际操作中的问题和需求，及时对模拟灌装方案进行改进。可以通过收集用户反馈、开展技术研究等方式，不断改进模拟灌装方案，提高其效率和质量控制能力。 四、预期效果 通过上述方案的实施，预期能够实现以下效果： 1.提高培养基灌装效率，节省人力和时间成本。 2.提高培养基灌装的一致性，减少灌装误差。
培养基模拟灌装试验-TSB验证详解培养基模拟灌装试验-TSB 验证详解 针对TSB培养基，适用玻璃安瓿小容量注射剂产品一、关键点 1、培养基选择:基础培养基和选择性培养基。。。。。。本次讲解TSB培养基。一般为250g一瓶，每30g+1L注射用水配制。配制注意:注射用水不能热配，培养基不能通入氮气、二氧化碳等。目的是去除抑菌因素 2、生产线选择: 3、生产批次选择: 详见无菌附录 4、容器选择:易观察。应模拟全部规格，或计划中安排。容器应选择无色透 明 5、装量选择:足够微生物生长所需，能充分接触到内壁，采用倒瓶等容器大 小和装量应足够微生物生长和便于观察。一般装量为25~40% 如:5ml安瓿瓶，灌装2ml。并不一定要模拟某个品种的装量。 6、灌装速度选择:工艺范围内，快速和低速都有不同的模拟意义一般涉及洗 灌封联动的问题。比如安瓿瓶烘干灭菌的时间影响。 7、生产线人员选择:人员参与验证，或计划中安排 详见无菌附录 8、灌装数量选择:批量及置信区间选择等 详见无菌附录 2003验证指南 9、培养基试生长试验及培养后阳性对照试验: 试生长可参考:分别在30?,35?(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌)和23?,28?(白色念珠菌、黑曲霉)培养 7 天。应有对照组。
阳性对照:接种浓度均小于100cfu/ml 10、菌种选择: 中国药典 11、培养室选择及热分布:培养环境监控措施证明 对于很多企业来说，不可能会建设一个培养室。一般情况下，都是需要找个房间作培养室。这就需要培养室检查:23?,28? 与30?,35? 是否能稳定。这也与培养季节有关。 首先:空间是否合适、是否受认为干扰。必要时加锁 接着:制冷模式，测试最低控温;制热模式，测试最低控温。最后:选取不同测温点进行检测，以说明热分布均一。当放入培养瓶开始，应该已经是一个合格环境，并开始登记温湿度。期间应多次检查，并适当调节。 12、灌装环境监测项目及监测点选择: 分二关键部分:1:灌装区域 2:灌装设备所处环境项目:悬浮粒子、浮游菌、沉降菌等，详见无菌附录 注意:设备自带的检测项目不能取代验证需要的检测项目。换句话说: 设备的检测结果是否被认可的问题。 13、取样点及取样法选择: 对于过滤系统前后的培养基:微生物负载和无菌检查的取样，很难保证取样过程不染菌。 必须对取样人进行正规培训。何况取样必须是有资质，不得委托取样。验证中最好QA取样为佳。 14、更衣取样及监测选择: 无菌附录 15、常规操作及非常规操作模拟选择:
培养基模拟生产验证 1概述： 对无菌灌装过程进行胰酪胨大豆肉汤培养基模拟灌装试验，通过对其污染率的测试，来确认预充式无菌灌装过程和各种规程防止微生物污染的水平能达到可接受的合格标准。 2目的与范围： 2.1无菌生产环境、人员消毒卫生状况与产品无菌保证的验证。 2.2用棉球擦拭的方法验证设备设施清洁消毒效果。 2.3验证的试验过程中监测底塞、卡式瓶的无菌性，使之始终符合卡式瓶生产工艺要求。2.4验证除菌过滤的可靠性，保证生产出合格的中间体半成品。 2.5验证物料转移过程中物料的无菌性，使之满足卡式瓶生产工艺需要。 2.6模拟无菌灌装试验来考察灌装操作过程微生物的污染率不大于0.1%，进而证明灌装工艺条件符合无菌灌装的工艺要求。 2.7通过轧盖密封后瓶内抽真空进行气密性测试，证明与轧盖相关的工艺条件符合卡式瓶生产工艺要求。 3职责： 3.1相关生产人员必须依照本规程进行生产操作。 3.2生产部门负责人及QA负责指导与监查本文件的执行。 3.3文件的修定和定期审核应由生产部门负责人员和QA负责。 3.4所有参与本验证过程的生产人员都必须依照本方案进行生产操作。 3.5验证过程应严格按照规定的内容进行，若因特殊原因确实需要变更时，应填写验证方案变更申请及批准书（附表1），报验证委员会批准。 4参考文献： 4.1 Validation of aseptic filling for solution drug product 4.2药品生产验证指南（2003版） 5设备及仪器：
6物料 7验证内容 7.1判断标准 产品无菌性的可信限：95% 产品允许污染的概率：警戒限为＜0.05%，可信限为＞0.1% 7.2培养基配制、灭菌和过滤： 7.2.1 按30g胰酪胨大豆培养基溶于1L蒸馏水的比例配制适量的培养基溶液，搅拌并加热溶解或直接量取70℃以上的蒸馏水，搅拌溶解后，，将盛放培养基的桶在蒸汽灭菌柜内121℃灭菌15分钟，待灭菌后自然冷却 7.2.2 配制用于验证分装生产线的无菌性的培养基溶液体积应满足灌装3000支以上的量（一般灌装5000支左右）。 7.2.3冷却后用已灭菌的0.22um的套筒过滤器过滤于已灭菌的相应容量的不锈钢桶中。注：过滤过程应遵守无菌操作。 7.3培养基无菌性试验：
无菌工艺验证-培养基模拟灌装试验培养基灌装试验方案LuiaStoppa 无菌药品生产-SFDAGMP检查员高级研讨会 Nanjing,thePeople’RepublicofChina–16-20November2022培训目的评估无菌生产模拟试验(培养基灌装或肉汤灌装) 了解在培养基灌装试验方案设计过程中的关键点，以符合法规要求学会如何对失败进行评估，以及可能带来的后果在团队中进行讨论 无菌药品生产-SFDAGMP检查员高级研讨会 2|Nanjing,thePeople’RepublicofChina,16-20November2022培训目的 无菌生产工艺: 无菌药品生产-SFDAGMP检查员高级研讨会 3|Nanjing,thePeople’RepublicofChina,16-20November2022培养基灌装的原则为什么无菌工艺的验证必须符合制药行业的规范？“无菌药品”的含义是“没有活体微生物”在无菌检测过程中，实际上并没有对每个产品进行检测，所以应采取所有努力减少污染的风险(洁净厂房、HVAC、压差、清洗程序、监测计划) 尽管采取这些措施，但污染永远是一个潜在的风险，因为无菌工艺操作是在一个受控但是非灭菌的环境中进行的，并且样品取样数量太小，所以只有严重污染才可能被发现。 无菌药品生产-SFDAGMP检查员高级研讨会 4|Nanjing,thePeople’RepublicofChina,16-20November2022
培养基灌装的原则制药相关法规:-法规：FDA“,无菌生产工艺生产无菌药品的行业指南–cGMP”-EUGMPPartI附录1–-PIC/SPI007-2“无菌生产工艺验证指南”虽然培养基灌装试验必须复制无菌生产条件，但是模拟试验与药品实际生产过程采取完全相同的方式是不可能的。什么培养基？灌装多少数量？多长时间？ 无菌药品生产-SFDAGMP检查员高级研讨会 5|Nanjing,thePeople’RepublicofChina,16-20November2022 无菌药品生产-SFDAGMP检查员高级研讨会 6|Nanjing,thePeople’RepublicofChina,16-20November2022培养基灌装的原则通常情况下，应该包括产品实际操作过程中可能发生的“最差条件” 必须考虑可能采取那些干预措施 无菌药品生产-SFDAGMP检查员高级研讨会 7|Nanjing,thePeople’RepublicofChina,16-20November2022模拟试验:液体无菌灌装生产线压盖机 压塞机 清洗设备隧道烘箱无菌药品生产-SFDAGMP检查员高级研讨会 8|Nanjing,thePeople’RepublicofChina,16-20November2022灌装设备 模拟试验:培养基 灌装方案需要考虑的关键因素:试验的数量和频率培养基(产品的替代品)灌装的数量容器(玻璃瓶)体积灌装体积生产速度(或灌装速度)灌装过程的持续时间工作班次监测措施干预措施–常规的和非常规的培养方法可接受
粉针剂无菌工艺验证——培养基模拟灌装试验 摘要】目的为确保粉针无菌分装生产过程对产品不产生污染，保证粉针生产药 品质量。方法先注入液体培养基，再以无菌甘露醇干燥粉为替代物，模拟分装 于注射剂瓶，盖胶塞，轧铝盖。分装样品先后在30～35℃与20～25℃下培养7d，并作阴性、阳性对照。结果无菌灌装环境及操作人员表面微生物检查合格, 阴性、阳性对照成立, 试验样品微生物未检出。结论无菌粉针灌装过程中，经培训的操 作人员在规定的洁净环境中按操作规程操作所生产的产品可以确保无菌。 【关键词】粉针剂无菌工艺验证培养基灌装试验 无菌药品的生产须满足其质量和预定用途的要求，应最大限度降低微生物、 各种微粒和热原的污染。生产人员的技能、所接受的培训及其工作态度是达到上 述目标的关键因素。无菌药品的生产必须严格按照精心设计并经验证的方法和规 程进行。产品的无菌或其它质量特性绝不能依赖于任何形式的最终处理或成品检验。 培养基模拟灌装试验——使用培养基作为药品的替代品（Placebo）进行无菌 模拟生产，对无菌工艺进行验证。培养基灌装在某种意义上是一种挑战性试验， 因为几乎在所有情况下，微生物在培养基中的繁殖和生长要比在实际产品中更容易。能全面反映整个生产过程采用无菌工艺生产无菌产品的能力。而且也是各国 药品法规要求的基本内容。 1 验证准备工作 1.1所有的相关设备及其工艺均应事先通过确认或验证, 如洁净生产区环境须 通过静态验证 (空气的悬浮粒子、浮游菌、沉降菌及表面微生物均应符合相应的 规定)，操作人员的卫生及其操作行为均须经过严格的培训, 生产主要设备 ( 如分 装机等)以及与生产相关的其它辅助工艺 ( 如淋洗、湿热灭菌、干热灭菌去热原、 除菌过滤等)，均须通过确认或验证。 1.2甘露醇粉末无菌的处理[1] 事先需要伽马辐照灭菌（钴60，用量约15～25kGy），并进行无菌性、抑菌 性和溶解度的测试。在甘露醇粉末的抑菌性试验中，每天观察微生物生长情况， 全部样品对照品试管中均有明显的微生物生长，说明甘露醇对枯草杆菌和白色念 珠菌均无抑制作用。甘露醇粉末溶解性试验中全部溶解。灌装时，每瓶内的粉末 量不宜过多，否则会对培养基溶液的促菌生长造成不良影响，实践证明，每5ml 液体培养基内甘露醇含量不宜超过0.3g。通过上述实验证明甘露醇粉末符合无菌 模拟灌装验证要求。 1.3培养基的微生物生长性能 培养基要经过微生物性能试验和无菌性能试验，证明本次制备的培养基符合 模拟灌装验证要求，以保证用于无菌模拟灌装装试验的培养基的有效性。实践证明，营养肉汤培养基或大豆胰蛋白胨液体培养基均适用于培养基模拟灌装试验。[2] 2 粉针剂无菌分装模拟验证 2.1验证方法 首先，严格按照培养基生产商的要求进行配制和灭菌, 然后将无菌培养基手 工灌装至一定数量的无菌注射剂瓶内。其次，按无菌分装标准操作程序分装无菌 甘露醇至灌有无菌培养基的注射剂瓶,对分装过程进行记录。分装后按分装顺序分 别进行编号，分装后的全部样品应在14天内每天检查培养的全部样品的微生物
培养基模拟灌装验证
一、目的 建立培养基模拟灌装验证的管理规程，确保培养基模拟灌装验证符合生产工艺及GMP要求。 二、适用范围 适用于制剂车间生产的产品需要培养基模拟灌装验证的整个工艺过程，包括从部件、材料的灭菌准备，一直到完成灌装和容器密封的整个过程。 三、责任者 制剂车间、生产部、公用事业部、质量控制部、物流部、质量保证部及验证部遵照执行。 四、缩写与定义 1. 最差条件（worst case） 在SOP范围内（或超出），由工艺参数的上、下限和相关因素组成的一个或一系列条件。与理想条件相比时，最差条件使产品或者生产工艺失败的几率为最大，这样的条件不一定导致产品或生产工艺的失败。 2. 干预（Intervention） 操作人员在无菌操作区域内的操作活动。 3. 正常干预（Inherent Interventions） 在无菌工艺灌装过程中发生的正常的在计划中的活动（例如，设备安装、装量调节、胶塞的再补给、灌装容器的再补给、环境监测、取样等等）。 4. 纠正干预（Corrective Interventions）
在无菌工艺灌装过程中的纠正或调整的活动，其不属于计划性。（例如，灌装容器的破损、倒瓶、掉塞、更换灌装针、灌装设备维修） 五、健康、安全和环境 无 六、程序 1. 验证小组职责： 1.1 验证部 1.1.1 负责编制培养基模拟灌装验证管理规程。 1.1.2 协助起草并审核培养基模拟灌装验证方案及培养基模拟灌装验证报告。 1.1.3 验证工作的组织与协调，参与并监督培养基模拟灌装验证的实施，模拟灌装样品的接收、培养及结果观察。 1.1.4 对验证过程中偏差、变更处理过程追踪。 1.2 质量保证部 1.2.1 审核培养基模拟灌装验证方案及培养基模拟灌装验证报告。 1.2.2 验证工作的组织与协调，参与并监督培养基模拟灌装验证的实施，负责验证过程中取样。 1.2.3 负责培养基模拟灌装验证环境监控，参与模拟灌装样品的接收、培养及结果观察。 1.2.4 参与验证过程中偏差、变更处理。
培养基模拟灌装 【基本概念】 无菌工艺模拟试验就是指采用微生物培养基替代产品(无菌粉末分装的培养基灌装试验实际 是将产品替代品溶入培养基中，不是直接替代产品)对无菌工艺进行评估的验证技术。无菌 工艺模拟试验也被称为培养基灌装或培养基灌装试验。通常需要将培养基暴露于设备、容器 密封系统的表面和关键环境条件中，并模拟实际生产完成工艺操作。然后，将装有培养基的 密闭容器进行培养以检查微生物的生长，并对结果进行评价，借以确定实际生产中产品被污 染的概率。 【法规】 [1]中国GMP 无菌附录 第四十七条无菌生产工艺的验证应当包括培养基模拟灌装试验。 应当根据产品的剂型、培养基的选择性、澄清度、浓度和灭菌的适用性选择培养基。应当尽 可能模拟常规的无菌生产工艺，包括所有对无菌结果有影响的关键操作，及生产中可能出现 的各种干预和最差条件。 培养基模拟灌装试验的首次验证，每班次应当连续进行3次合格试验。空气净化系统、设备、
生产工艺及人员重大变更后，应当重复进行培养基模拟灌装试验。培养基模拟灌装试验通常 应当按照生产工艺每班次半年进行1次，每次至少一批。 培养基灌装容器的数量应当足以保证评价的有效性。批量较小的产品，培养基灌装的数量应 当至少等于产品的批量。培养基模拟灌装试验的目标是零污染，应当遵循以下要求: (一)灌装数量少于5000支时，不得检出污染品。 (二)灌装数量在5000至10000支时: 1.有1支污染，需调查，可考虑重复试验; 2.有2支污染，需调查后，进行再验证。 (三)灌装数量超过10000支时: 1.有1支污染，需调查; 2.有2支污染，需调查后，进行再验证。 (四)发生任何微生物污染时，均应当进行调查。 [2]EU GMP Annex 1 Manufacture of Sterile Medicinal Products 66. Validation of aseptic processing should include a process simulation test using a nutrient medium (media fill).Selection of the nutrient medium should be made based on dosage form of the product and selectivity, clarity, concentration and suitability for sterilisation of the nutrient medium. 67. The process simulation test should imitate as closely as possible the routine aseptic manufacturing process and include all the critical subsequent manufacturing steps. It should also take into
培养基模拟灌装试验验证方案 一、研究目的和意义 培养基的生产过程中，灌装是一个重要环节。灌装的准确与否直接关 系到培养基的质量和效果。为了验证培养基灌装的准确性以及提高生产效率，进行培养基模拟灌装试验是必要的。本文从试验方案的制定、具体步 骤和结果分析等方面进行探讨。 二、试验方案的制定 1.确定试验目标：验证培养基模拟灌装的准确性和可操作性。 2.选择适当的试验设备：选择一台能够准确模拟真实灌装流程的设备，例如自动灌装机。 3.确定试验参数：确定试验中需要测量和记录的参数，例如灌装速度、灌装量、灌装时间等。 4.制定操作流程：制定灌装试验的具体操作流程，包括设备准备、样 品准备、灌装过程、数据采集等。 5.确定试验样品：选择一种常用的培养基作为试验样品，根据生产需 求确定灌装量。 三、具体步骤 1.设备准备：检查试验设备的工作状态，确保设备正常运行。 2.样品准备：准备试验样品，确保培养基的质量符合规定要求。 3.灌装过程：根据试验方案确定灌装参数，将培养基灌装到目标容器中。
4.数据采集：在灌装过程中记录和采集重要数据，例如灌装速度、灌 装量、灌装时间等。 5.重复试验：进行多次试验，以获取可靠的数据并验证试验结果的可 重复性。 四、结果分析 1.数据处理：整理试验数据，计算平均值、标准差等统计数据。 2.数据分析：对试验结果进行分析，比较不同试验之间的差异和变异 程度。 3.结果评估：评估培养基模拟灌装试验的准确性和可操作性，根据试 验结果确定是否需要调整灌装参数。 4.结论和建议：根据试验结果提出相应的结论和建议，为实际生产中 的培养基灌装提供参考依据。 五、实施方案 1.确定试验计划：按照前述步骤制定实施方案，并明确各个步骤的操 作要求和注意事项。 2.实施试验：按照试验方案进行试验，并确保每个步骤的操作准确无误。 3.数据分析和结果评估：对试验结果进行数据处理、分析和评估。 4.撰写报告：根据试验结果撰写试验报告，包括试验目的、试验方案、试验结果等内容。
培养基模拟灌装验证方案 一、背景介绍 在微生物实验室中，培养基的灌装是一个重要的实验步骤。正确的培 养基灌装可以保证实验的准确性和可重复性。因此，为了验证培养基模拟 灌装的准确性和精确度，制定一套验证方案是必要的。 二、实验目的 验证培养基模拟灌装的准确性和精确度，以确保其符合实验要求。 三、验证方案 1.设计验证样本 选择不同容器（如试管、烧杯、培养皿）作为验证样本，并准备标准 培养基。 2.准备仪器和设备 准备一个称量器、一个热源、一个培养基灌装器和一组各种验证样本。 3.确定灌装重量 使用称量器称量灌装前和灌装后的每个验证样本的重量，并记录下来。 4.培养基灌装 将标准培养基加热至适当温度，在无菌条件下使用培养基灌装器向每 个验证样本中加入等量的培养基。 5.测量灌装后重量 将每个灌装后的验证样本再次称重，记录下灌装后的重量。
6.计算灌装精度 计算每个验证样本的灌装精度，公式如下所示： 灌装精度=(灌装后重量-灌装前重量)/灌装前重量×100% 7.统计结果 将每个验证样本的灌装精度记录下来，并计算平均值和标准偏差。 8.结果分析 比较平均值和标准偏差是否在可接受的范围内。如果平均值接近100%，且标准偏差较小，则说明培养基模拟灌装的准确性和精确度较高。 9.结论 根据实验结果，得出对培养基模拟灌装的准确性和精确度的评价，并提出改进建议和措施。 四、改进建议和措施 1.定期校准设备：确保培养基灌装器的准确性和精确度，定期进行校准和检验。 2.培训操作人员：培训操作人员掌握培养基灌装的正确方法和技巧，提高实验操作的准确性。 3.优化工艺流程：对于培养基灌装的每个步骤进行优化，优化流程，提高操作效率和质量。 4.质量控制：建立培养基灌装的质量控制体系，制定相关的质量控制标准和标准操作规程，确保每次灌装的准确性和精确度。
培养基模拟灌装无菌生产工艺验证方案 一、研究目的及背景 无菌生产是制药和食品工业中至关重要的一项工艺。培养基是无菌生 产过程中不可或缺的一部分，它提供了细菌、真菌等微生物的生长所需的 营养物质。因此，为了确保产品质量和安全性，对培养基的无菌灌装工艺 进行验证是非常重要的。 本研究的目的是验证培养基的无菌灌装工艺的有效性，以确保生产过 程中的无菌状态。通过验证，可以确定灌装工艺的可行性和合理性，并提 供指导和保障无菌生产的稳定性和安全性。 二、研究方法 1.确定灌装工艺的关键参数和控制点：包括温度、压力和速度等因素。通过前期的实验研究和参考相关文献资料，确定灌装工艺的最佳参数设置。 2.建立合适的实验方案：选择合适的微生物作为试验菌株，并使用合 适的培养基进行培养。根据已有的灌装工艺参数，进行一定数量的灌装试验，并尽可能模拟实际生产过程。 3.进行灌装工艺验证试验：根据实验方案，按照一定的时间和数量进 行培养基的灌装试验。同时，进行相应的对照试验，采集样品进行微生物 学检验。 4.微生物学检验：采集灌装好的培养基样品，通过无菌条件下培养， 观察是否有微生物生长。并进行定性定量分析，以判断培养基是否被污染。
5.数据分析和结果评估：根据实验结果，对培养基的无菌灌装工艺进 行评估。比较实验组和对照组的差异，并统计相关数据，计算灌装工艺的 合格率和不合格率。 6.结果报告和验证方案调整：将实验结果进行总结和分析，撰写验证 方案报告。根据结果对灌装工艺进行调整和改进，并制定相应的控制措施。 三、实施计划和进度安排 1.研究期限：本研究计划为期三个月。 2.实施计划： -第一周：搜集相关文献资料，确定研究目的和方法。 -第二周：设计实验方案，确定试验菌株和培养基。 -第三周至第五周：进行实验，进行灌装试验并采集样品。 -第六周至第七周：进行微生物学检验，观察和分析实验结果。 -第八周：数据分析和结果评估，撰写验证方案报告。 -第九周至第十二周：根据结果调整灌装工艺，并制定相应的控制措施。 四、预期成果和意义 1.提供培养基的无菌灌装工艺验证方案，为无菌生产提供指导和保障。 2.确保产品质量和安全性，减少可能的污染和损失。 3.提高灌装工艺的可行性和合理性，提高生产效率和降低成本。 4.对灌装工艺进行调整和改进，提高无菌生产的稳定性和可靠性。
安徽国森药业有限公司 培养基模拟灌装验证方案 执行日期2015.10.08文件编码：YZ-GY-XZ-001-2015（P） 颁发部门质量管理部颁发日期2015.09.25 目录 1.验证会签表 (2) 2.概述 (3) 3.验证目的 (3) 4.小容量安瓿瓶生产的工艺流程、操作区域、主要生产设备及生产安排 (3) 5.风险评估 (6) 6.实施验证相关的文件 (14) 7.验证前的确认 (15) 8.模拟灌装的实施 (16) 9.模拟灌装过程中的取样、监控及检测 (21) 10.模拟灌装的培养基培养及观察 (26) 11.模拟灌装的培养基培养结束后的促微生物生长试验 (26) 12.安瓿瓶的完整性测试 (27) 13.培养基模拟灌装结果的评价 (27) 14.培养基模拟灌装失败原因的调查 (27) 15.再验证周期 (28) 16.验证时间安排 (29) 17.验证相关记录及填写要求 (29)
文件起草、审核、批准： 起草人审核人审核人批准人部门生产管理部质量管理部生产负责人质量受权人姓名陈圆何勇夏蕴琼李瑛 签名 日期 执行日期 1.验证会签表 本次验证由质量管理部、生产管理部、小水针车间共同参与，成立验证领导小组。小组成员及分工如下： 姓名部门职务职责签到 夏蕴琼生产负责人 该验证项目组长，审核验证方案，指导、监 督验证的实施。 李瑛质量负责人 审核验证方案，指导验证实施，对偏差情况组织调查分析，对验证实施结果进行总体分析和评价。批准验证方案，审核验证报告。 汪承华动力工程部主任负责设备等动力系统的正常运转 陈圆生产管理部经理 起草验证方案及验证报告，组织、协调按验 证方案进行模拟灌装。 何勇质量管理部QA主管负责组织对验证过程进行监控，监督指导培养基培养后的目视检查，收集、整理本次验证的相关记录，汇总填写验证记录。 张得青质量管理部QC主管负责对灌装后培养基培养条件的确认和记录。 对验证的各项检验结果进行复核、判定 郑跃小容量车间 负责组织目检人员对培养后的培养基逐支 目视检查。
XXXXX制药有限公司 培养基无菌灌装模拟试验 再验证方案 文件编号： YZML101P -09 所在车间：冻干粉针车间 起草人：日期： 2009年6月25日审核人：日期：2009年7月04日批准人：日期： 2009年7月05日
验证方案的起草与审批 验证方案的起草 验证方案的审批 验证进度计划 提出完整的验证计划，经验证小组批准后实施，整个验证活动分三个阶段完成。
验证方案目录 第一部分：概述 (4) 1、验证目的 (4) 2、验证概述 (4) 3、验证领导小组分工及职责 (4) 4、被模拟工艺 (5) 5、模拟试验中使用的设备设施 (6) 6、培养基的选择 (6) 7、微生物培养条件 (7) 8、工艺模拟的批量，批次 (7) 9、灌装体积、灌装速度及灌装用容器的确定 (7) 10、验证最差条件 (7) 11、可接受的合格标准 (8) 第二部分：试验实施 (9) 1、试验实施前的准备工作 (9) 1.1 培养基无菌性试验 (9) 1.2 培养基促生长试验 (9) 1.3 无菌环境控制与监测 (9) 2、试验实施过程 (11) 2.1厂房、空间清洁 (11) 2.2试验相关工序准备 (12) 2.3培养基配置、除菌过滤过程 (12) 2.4模拟灌装 (12) 2.5模拟冻干 (13) 2.6轧盖 (13) 2.7微生物培养 (13) 3、盖胶塞密闭系统挑战试验 (15) 4、偏差的处理 (15) 5、试验结果分析与评估 (16) 6、验证的维护 (17)
第一部分：概述 1、验证目的 评价一个无菌工艺操作能力的最有用的方法之一是工艺模拟，其提供了一个可能影响最终产品无菌的无菌工艺操作变更进行评价的方法，它可以用于鉴别无菌操作工艺中，可以导致产品微生物污染的潜在缺陷，通过模拟无菌冻干粉针的灌装试验，证明冻干粉针灌装过程中所采用的无菌灌装工艺参数和相关的SOP对于防止微生物污染水平达到可接受的合格标准，或提供保证所生产产品的无菌性的可信限度达到可接受的合格标准的证据。无菌工艺人员的资格和保证，以及验证生产系统的要素（包括厂房、公用系统、设备）和生产过程中工艺变化因素（物料、人员、方法）对产品质量，尤其是无菌结果影响的程度，以证明以后在正常生产条件下能生产出符合规定标准的无菌产品。 2、验证概述 冻干粉针生产线主要包括胶塞清洗机、超声波洗瓶机、隧道烘箱、灌装机、轧盖机,和贴签机。根据GMP的要求，在厂房、设施、设备均已经过全面验证的情况下，且操作人员熟练掌握了岗位SOP后，用大豆胰蛋白胨消化肉汤培养基代替无菌原料进行了模拟灌装培养基试验，可以直观、方便、准确地反映出无菌灌装过程的污染情况及问题。本次验证在第一次验证通过的基础上进行的再验证，根据再验证安排，车间经过六个生产后，再次考察车间的无菌保证。 3、验证领导小组分工及职责 公司成立验证领导小组，负责所有验证工作的领导和组织，负责审批验证方案和验证报告。 验证领导小组针对每一个具体验证项目成立专门验证工作小组，负责该验证项目的验证方案起草、实施、组织与协调，负责验证结果记录与评定，负责完成验证报告。 3.1验证小组成员
*ml灌装线培养基模拟灌装验证方案 审批 目录 1. 介绍…………………………………………………………………………………………… ..3 2.目的 (4)
3.范围 (4) 4.职责 (4) 4.1.生产部职责.................................................................................. 错误！未定义书签。 4.2.质量保证部职责 (4) 4.3 质量控制部职责 (4) 4.4.设备部、物资管理部门各职责......................................................... 错误！未定义书签。 5. 法规和指南…………………………………………………………………………………… ..4 5.1.法规 (5) 5.2.指南 (5) 6.参考文件 (5) 7.生产工艺描述 (7) 7.1.工艺流程图 (7) 7.2.模拟灌装验证流程图 (8) 7.2.1模拟灌装过程流程图 (9) 7.3.生产工艺过程描 (10) 7.3.1 产品生产规模 (10) 7.3.2 生产制度 (10) 7.3.3 生产前检查 (10) 7.3.4 操作前检查 (10) 7.3.5 生产操作 (10) 7.3.6 轧盖 (10) 7.4.基本原理 (10) 7.5.工艺： (11) 7.6.人员： (11) 7.7.设备和器具： (11) 7.8.运行频次和周期 (12) 7.9.运行数量 (12) 7.10.模拟物料和培养基 (12) 7.11.密闭和开放系统 (12) 7.12.风险评估 (13) 7.13.工艺风险分析 (15) 7.14.模拟项目 (17) 7.14.1 模拟灌装过程 (17) 7.14.2 灌装机各分装器具经灭菌后的无菌组装 (17) 7.14.3 模拟最多进入灌装间的人数 (17) 7.14.4 人员干预 (17)
培养基灌装试验方案 一、实验目的与背景 培养基灌装试验是为了确保培养基的质量和纯净度，在实验室和生产 过程中能够得到准确的结果。准确无菌的培养基是微生物学和生物工程领 域研究的基础，因此培养基灌装试验对于保证实验结果的准确性和可重复 性至关重要。 二、试验原理 培养基灌装试验主要通过将清洁的培养基倒入无菌的培养皿中，并在 一定的温度下进行高温高压灭菌处理，以确保培养基中的菌落全部被杀灭，从而保证培养基的无菌纯度。试验中需要注意培养基的制备过程，避免任 何杂质的进入。 三、试验步骤 1.准备工作 a.清洁工作台和灌装设备，确保无尘无菌。 b.收集所需的培养基和培养皿，确保其无菌。 c.检查灌装设备和灌装管道的清洁状况，确保其完好无损。 2.培养基制备 a.根据实验需求，准备相应的培养基成分和配方。 b.将所需的试剂按照配方在适量的蒸馏水中溶解并充分搅拌，直到完 全溶解。
c.将溶解好的培养基通过过滤器过滤，以去除其中的杂质和微生物。 d.检查过滤后的培养基的透明度和颜色，确保其质量良好。 3.培养基灌装 a.将已经清洁的培养皿摆放在无菌工作台上。 b.使用无菌的吸管或灌装器将准备好的培养基小心地倒入培养皿中，确保避免任何杂质的进入。 c.倒入的培养基要留有一定的空间，以防止培养基在灭菌处理时翻滚溢出。 d.灌装完成后，封闭培养皿，确保其密封性能良好。 4.培养基灭菌 a.将灌装好的培养皿放入适当的灭菌设备中，设置合适的温度和时间参数。 b.灭菌设备应根据厂家的使用说明进行操作，以确保高温高压条件下的灭菌能够达到要求。 c.灭菌完成后，取出培养皿，检查其外观和密封性能，确保其没有任何变化。 d.根据实验需求，可以进行进一步的培养基质量检测，如菌落数目、无菌纯度等。 四、试验注意事项 1.严格按照操作规程进行操作，确保各个步骤的无菌操作。
无菌制剂培养基模拟灌装工艺 验证(总39页) -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1 -CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除
验证小组人员名单
培养基模拟灌装验证方案
目录 1 概述 2 验证目的 3 适用范围 4 相关部门职责 5 验证条件 6 验证引用的文件 7 培养基 8 培养基模拟灌装试验条件 9 培养基模拟灌装试验的频率 10培养基模拟灌装量和灌装数量的确定 11培养基模拟灌装最差条件的设计 12培养基配制和无菌灌装操作过程 13 取样计划 14试验样品的培养 15 试验结果评价 16环境监控和微生物限度控制 17清场与清洁 18培养基灌装过程监控记录 19偏差调差 20纠偏措施 21异常情况处理程序 22变更 23拟定再验证周期 24验证结果评定与结论 附录附录1：人员培训 附录2：系统验证及设备验证确认
附录3：纯化水检验报告单 附录4：注射用水检验报告单 附录5：环境监测报告单 附录6：胰酪胨大豆肉汤培养基适应性实验结果 附录7：胰酪胨大豆肉汤培养基灵敏度检查结果 附录8：培养基及内包材确认 附录9：最差条件确认 附录10：内包材检验结果 附录11：未参加培养灌装瓶原因说明 附录12：培养基的培养观察记录 附录13：培养基的培养阳性结果和培养基灌装失败情况说明 附录14：培养基灌装过程中监控统计表 附录15：灌装生产结束清洁记录 附录16：质控过程监控 产品基本信息： 1 概述 培养基模拟灌装主要用的是胰酪胨大豆肉汤培养基，适用于黑龙江天龙药业江北新厂滴眼剂车间生产线。依据批准的滴眼剂车间培养基模拟灌装验证方案，实施培养基模拟灌装试验；评价无菌生产工艺的可信限度达到可接受的合格标准，确认滴眼剂车间生产过程的可靠性，有效性。本方案规定了滴眼剂车间培养基模拟灌装的验证方法和标准。 2 验证目的 通过对滴眼剂灌装过程中采用与正常生产工艺相同的条件和操作方法（包括生产环境等），向8ml滴眼瓶内灌装经过除菌过滤的无菌培养基，在适当条件下培养，并对培养品观察、结果判定的验证，来确定滴眼剂车间生产无菌灌装工艺的无菌保证水平，判定无菌生产要素是否能够达到可接受的合格标准的能力，以确认无菌生产工艺过程的可靠性。 3 适用范围