正常与退变髓核细胞和细胞内Ⅱ型胶原蛋白的研究

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日期：型年』月￡日

日期：笙！！年—』￡月篁二＿一日（本声明的版权归山西医科大学所有，未经许可，任何单位及任何个人不得擅自使用）

万方数据目录摘要………………………………………………………………………………………………………………．．ＩＡＢＳＴＲＡＣＴ…………………………………………………………………………………………………．．ＩＩ前言……………………………………………………………………………………………………………ＩＩＩｌｌｌ月Ｕ舌……………………………………………………………………………………………………………

材料与方法……………………………………………………………………………………１结喜民………………………………………………………………………………………………………………．．４讨论………………………………………………………………………………………………………………７ｐ付图………………………………………………………………………………………………………………１３结论…………………………………………………………………………．…………………………………．．１４参考文献……………………………………………………………………………………。１５综ｉ苤……………………………………………………………………………………………………．．………．２０个人简历…………………………………………………………………………………．．２８致谢………………………………………………………………………………………．……………………．．２９

万方数据正常与退变髓核细胞及细胞内ＩＩ型胶原蛋白的研究摘要目的：对正常与退变椎间盘髓核细胞（Ｎｕｃｌｅｕｓｐｕｌｐｏｓｕｓｏｆｉｎｔｅｒｖｅｒｔｅｂｒａｌｄｉｓｃ）ＩＩ

型胶原蛋白免疫荧光染色及番红“Ｏ”染色进行比较；方法：取自３例脊柱侧弯和３例椎间盘突出症的自愿患者术中所取出的废弃髓核组织，经培养后每个病人测量２６个细胞，正常组和退变组各测量７８个细胞。对正常与退变椎间盘髓核细胞内的ＩＩ型胶原蛋白进行免疫荧光染色观察及定量测定，；髓核细胞行番红“Ｏ”染色观察及灰度值测定。结果：Ａ．免疫荧光染色：退变椎间盘髓核细胞呈纺锤形，类圆形，梭形及不规则形，细胞染色轻、模糊，细胞内仅可见极少量荧光颗粒；ＩＩ型胶原表达显著降低（Ｐ＜０．０５）；Ｂ．番红“Ｏ”染．色：退变髓核细胞形态不规则，胞核形态也不规则，染色淡，细胞突起和胞浆的染色也不均匀，部分细胞的组织结构分解，完整性丧失，细胞排列混乱、稀疏，有的可观察到少量细胞坏死区；图像灰度值相比无差异（Ｐ＞０．０５）。

结论：人正常与退变椎间盘髓核细胞比较，退变的髓核细胞明显减少、甚至凋亡，细胞内的ＩＩ型胶原蛋白含量也减少显著。关键词：人椎问盘髓核细胞，ＩＩ型胶原蛋白免疫荧光染色，番红“Ｏ”染色

万方数据西医科人学倾十。譬ｆ讧论文Ｎｏｒｍａｌａｎｄｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅｎｕｃｌｅｕｓｐｕｌｐｏｓｕｓｃｅｌｌｓａｎｄ

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万方数据日Ｕ旨椎间盘是一个用于连接相邻两个椎体独特复杂的纤维性结构，不仅可以保持脊柱的高度，而且是脊柱的负重、运动及吸收震荡的重要结构，同时它也维持脊柱的生理曲度和正常姿势。髓核、纤维环和软骨终板三部分组成了椎间盘。它们有着各自的生理功能：髓核在椎间盘的中央偏后位置，占据椎间盘５０％～６０％的横断面积，主要由蛋白多糖、水和ＩＩ型胶原构成，由于具有吸水特性的蛋白多糖紧密附着在ＩＩ型胶原上，使其有良好的弹性和膨胀性，可以吸收震荡缓冲外力；纤维环由紧密环绕髓核外层的胶原纤维构成，其胶原纤维含量明显高于髓核，使其具有很好的张力强度，更好的吸收震荡保持脊柱运动的稳定；软骨终板则是透明软骨，也具有吸收震荡作用，保持脊柱的弹性，同时也是椎间盘内物质代谢交换的通道。这些成分合理的组织在一起维持椎间盘正常生理功能。脊索细胞和软骨样细胞两种细胞存在于人类的髓核中，１０岁后脊索细胞基本消失，成人髓核中主要含有类软骨样细胞…Ｉ。后者随着年龄的增长逐渐分泌胶原纤维、细丝及致密颗粒。胶原纤维构成了人体椎间盘的框架，在椎间盘中共有１５种胶原纤维，其中Ｉ型和ＩＩ型最多。Ｉ型胶原体积小，主要集中于纤维环的外层，耐受张力和剪力能力强，不能耐受压力。ＩＩ型体积大，主要在纤维环和髓核移行区及髓核中，髓核中主要含ＩＩ型胶原，易于变形可耐受强的压力。近代研究表明，人髓核的退变的生理过程与年龄密切相关，１２岁时髓核组织中的脊索细胞逐渐转变为髓核细胞，２０岁时椎间盘已有退行性的改变，伴随着年龄的不断增长或者外伤的影响，椎间盘的弹性及抗负荷能力也逐渐减退。在椎问盘中起关键作用的两种大分子胶原和蛋白多糖的含量发生巨大的变化。椎间盘退变以细胞水平来解释，可归结为其细胞数量的减少及细胞合成软骨特有的基质成分，也就是Ｉｌ型胶原和蛋白聚糖功能的降低Ｍ２。免疫荧光细胞化学是依据抗原抗体反应的原理，将标记有已知的抗原或抗体上荧光素的荧光标记物作为分子探针检查分布在细胞或组织内的相应抗原（或抗体），所形成的抗原抗体复合物含有荧光素，这样幂｜ｊ用荧光显微镜观察该标本，

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