体外培养人退变髓核细胞的生物学性状

髓核细胞表型对干细胞治疗椎间盘退变的意义

刘玉端;于占革

【期刊名称】《医学综述》

【年(卷),期】2017(023)009

【摘 要】椎间盘退变导致的下腰痛是社会的主要负担之一,而卧床休息、理疗、抗炎药物治疗及手术治疗等传统治疗方法仅能在短期或一定程度上缓解椎间盘退变给患者带来的痛苦,并不能使患者的生活质量得到显著改善.目前,细胞移植对于椎间盘退行性疾病的治疗有较好的前景,且能更好地衡量功能恢复的效果.其中,了解移植细胞能否产生健康髓核组织至关重要.髓核细胞的表型是独特的,它由一组能反映其生理功能的特征性标志物的表达构成.未来,髓核细胞及其祖细胞的独特生理功能的表型标记将对干细胞治疗椎间盘退变具有重要意义.%The low back pain caused by

degeneration of the disc is one of the major social burdens,and bed

rest,physical therapy,anti-inflammatory drug therapy and surgical

treatment and other traditional treatment methods can only relieve the

pain of patients caused by disc degeneration in a short term or to some

extent,and cannot significantly improve the patient′s quality of life.At

present,cell transplantation for the treatment of degenerative diseases of

the disc is more promising,and can better measure the effect of functional

Ｊ０“ｍⅡｆ　，　坪∞　，　蜘，月　ｐ　，２０１５　Ｏｃｔ，　。１．２９，Ｎｏ．５　中日友好医院学报２０１５年第２９卷第５期　２８７　

体外培养人脂肪干细胞生物学特陛的初步探究　

胡晓根ｔ，张文健ｚ，王在ｚ，马海欢　，薛志强　，齐慧颉　，黄文罡　，高占巍　

（１．中日友好医院整形外科，北京１０００２９；２．中日友好医院临床研究所，北京１０００２９）　

摘要　目的：探讨体外培养脂肪干细胞（ＡＤＳＣｓ）生物学特性，为ＡＤＳＣｓ细胞研究和应用奠定基础。方法：从人　体吸脂手术废弃脂肪中分离、纯化ＡＤＳＣｓ，免疫荧光检测其表面抗原表型ＣＤ４４、ＣＤ２９，倒置相差显微镜观察细　胞形态，对细胞团和细胞形状描述，ＭＴＹ法测定细胞生长曲线，并且体外成脂诱导分化。结果：体外培养ＡＤＳＣｓ　呈梭形，成纤维细胞样生长，细胞增殖能力强，免疫荧光染色表明ＡＤＳＣｓ表达ＣＤ４４、ＣＤ２９，ＡＤＳＣｓ具有多向分　化潜能。可以诱导分化成脂肪细胞，细胞生长周期稳定具有干细胞特性。结论：从吸脂手术废弃脂肪中容易分离　获得脂肪干细胞．该细胞具有干细胞特性，增殖能力好，具备临床美容修复等方面潜在应用价值，在再生医学领　域有重要临床应用前景。　关键词：脂肪干细胞；细胞培养：生物学特性　中图分类号：Ｒ３２９．２＋８　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１—００２５（２０１５）０５—０２８７—０３　ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００１—００２５．２０１５．０５．００７　

Ｐｒｉｍａｒｙ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ａｄｉｐｏｓｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ／／ＨＵ　Ｘｉａｏ—ｇｅｎ，ＺＨＡＮＧ、Ｖｅｎ－ｊＪａｎ，Ⅵ　ＮＧ　Ｚａｉ，ｅｔ　ａｌ，，Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ－Ｊａｐａｎ　Ｆｒｉｅｎｄｓｈｉｐ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，２０１５　Ｏｃｔ，２９（５）：２８７－２８９　Ａｂｓｔｒａｅｔ　０ｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ａｄｉｐｏｓｅ—ｄｅｒｉｖｅｄ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ（ＡＤＳＣｓ）ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｆｏｒ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｒｅ—　ｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＡＤＳＣｓ　ｗｅｒｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｄｉｓｃａｒｄｅｄ　ｆａｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｌｉｐｏｓｕｃｔｉｏｎ　ａｓｐｉｒａｔｅｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ．Ａｆｔｅｒ　ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｉｎｓｅ．ｔｈｅ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ＡＤＳＣｓ　ｗｅｒｅ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ．Ｔｈｅ　ｂｉｏ—ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ＡＤＳＣｓ　ｗｅｒｅ　ａｎａ．　１ｙｚｅｄ．　ｎｌｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ａｎｔｉｇｅｎｓ　ｏｆ　ＡＤＳＣｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｎｆｉｒｍｅｄ　ｂｙ　ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ｌａｂｅｌｉｎｇ　ｏｆ　ＣＤ４４　ａｎｄ　ＣＤ２９．Ｔｈｅ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ｗｅｒｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｕｎｄｅｒ　ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．Ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＡＤＳＣｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ＭＴＴ　ｍｅｔｌ１０ｄ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｏｆ　ＡＤＳＣｓ　ｗａｓ　ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：　ｒＩｌｅ　ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ　ａｓｓａｙ　ｄｅｍｏｎ．　ｓｔｒａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ＡＤＳＣｓ　ｗｉｔｈ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｍａｒｋｅｒｓ　ＣＤ４４　ａｎｄ　ＣＤ２９　ｉｎ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＡＤＳＣｓ　ｗｅｒｅ　ｓｉｍｉｌａｒ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅｙ　ｗｅｒｅ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ．Ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＡＤＳＣｓ　ｗｅｒｅ　ｓａｍｅ　ａｓ　ｔｙｐｉｃａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌ１．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：　ｅ　ＡＤＳＣｓ　ａｒｅ　ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ　ｓｏｕｒｃｅ　ｏｆ　ａｄｕｈ　ｍｕｈｉｐｏｔｅｎｔ　ｃｅｌｌｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ａｄｉｐｏｓｅ　ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｔｈｅｙ　ａｒｅ　ｗｏｒｔｈｙ　ｆｏｒ　ｆｕｒｔｈｅｒ　ｓｔｕｄｙ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　ａｄｉｐｏｓｅ—ｄｅｒｉｖｅｄ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ；ｃｅｌｌ　ｃｕｌｔｕｒｅ；ｂｉｏｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ　Ａｕｔｈｏｒ’Ｓ　ａｄｄｒｅｓｓ　Ｐｌａｓｔｉｃ　Ｓｕｒｇｅｙ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｃｈｉｎａ—Ｊａｐａｎ　Ｆｒｉｅｎｄｓｈｉｐ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００２９，Ｃｈｉｎａ　

兔髓核细胞原代培养及其生物学特性的实验研究

白亦光;刘康;冯刚;陈竹;杨泽龙;宋桂芹

【期刊名称】《西部医学》

【年(卷),期】2013(25)8

【摘 要】目的 建立兔髓核组织体外直接分离培养的方法及其相关生物学特性的测定.方法 取2周龄健康日本大耳白兔,无菌条件下分离出椎间盘凝胶状髓核组织,直接加入含有20％ FBS的DMEM培养液中培养,倒置显微镜下观察原代髓核细胞的形态；细胞爬片培养后进行甲苯胺蓝和番红O染色观察；通过RT-PCR法,免疫组化法检测Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达；MTT法绘制髓核细胞生长曲线.结果 髓核细胞甲苯胺蓝和番红O染色显示阳性；Ⅱ型胶原免疫组织化学染色和蛋白聚糖免疫组化荧光检测呈阳性；RT-PCR鉴定发现细胞Ⅱ型胶原mRNA和蛋白聚糖mRNA表达阳性；MTT生长曲线与体外细胞培养时生长过程相符.结论 成功建立了髓核组织直接分离培养方法,原代髓核细胞生长状态良好,为组织工程髓核的种子细胞研究提供了实验依据.

【总页数】4页(P1136-1139)

【作 者】白亦光;刘康;冯刚;陈竹;杨泽龙;宋桂芹

【作者单位】南充市中心医院·川北医学院第二临床医学院组织工程与干细胞研究所,四川南充637000;南充市中心医院·川北医学院第二临床医学院组织工程与干细胞研究所,四川南充637000;南充市中心医院·川北医学院第二临床医学院组织工程与干细胞研究所,四川南充637000;南充市中心医院·川北医学院第二临床医学院组织工程与干细胞研究所,四川南充637000;南充市中心医院·川北医学院第二临床医学院组织工程与干细胞研究所,四川南充637000;川北医学院医学生物学教研室

【正文语种】中 文

【中图分类】R394.2

【相关文献】

1.平面和三维培养对兔髓核细胞增殖和基质合成影响的实验研究 [J], 朱磊;吴小涛;董寅生;王运涛;邱匀峰;张福勇;鲍军平

2.兔髓核细胞原代培养及独活寄生汤对其细胞周期的影响 [J], 卢建华;苏陈颖;钱志钢;王靖;俞冰;张春丽;柯高峰

改良法原代培养兔髓核细胞及其生物学特性

陶凤华;李锋;潘峰;陈文坚;周松

【期刊名称】《华中医学杂志》

【年(卷),期】2008(032)004

【摘 要】目的 探索兔髓核细胞培养的最佳方法,并检测其生物学特性.方法 以DMEM /F12 (1∶1,添加FBS 10%,pH 7.2) 作为基础培养液,用酶消化及机械剪切法原代培养髓核细胞,检测细胞生长形态及代谢.结果 髓核细胞多为多角形,另有细胞为圆形或椭圆形,内含空泡;改良法较酶消化组单层培养细胞增殖能力较强.结论

改良法髓核细胞生长状态良好, 为椎间盘组织工程髓核细胞的培养奠定了基础.

【总页数】2页(P240-241)

【作 者】陶凤华;李锋;潘峰;陈文坚;周松

【作者单位】430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科;430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科;430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科;430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科;430030,武汉,华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科

【正文语种】中 文

【中图分类】R3

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3.重组人骨形态发生蛋白7腺病毒载体构建及在原代培养兔髓核细胞中的表达 [J],

石健;赵新刚;侯铁胜;黄盛东;龚德军;李春青

4.独活寄生汤含药血清对PLGA/Fibrin复合支架培养兔髓核细胞代谢影响的研究

[J], 杨洋;徐卫星;俞雷钧;王健;宋红浦;刘建;范顺武;辛龙

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