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细黄链霉菌抑制草莓重茬病的效果研究

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细黄链霉菌抑制草莓重茬病的效果研究
摘要 以实验室保存的抗生菌为出发菌株，选择一株对引起草莓重茬病的镰
刀菌、丝核菌拮抗作用强的菌株，经鉴定为细黄链霉菌，确定生产培养基为豆饼
粉4%、锯末12%、甘薯粉12%、细肥土35%、石灰2.0%，种龄为20～24 h的
液体菌种，接种量为5%，培养基湿度在30%～35%，发酵初期室内湿度控制在
60%左右，基质开始转粉时降低空气湿度在50%左右。

关键词 草莓重茬病；细黄链霉菌；抗生菌
草莓重茬病一直是困扰草莓生产的重要问题，尤其是随着设施产业的不断扩
大，这个问题越来越突出。目前，草莓要连续种植普遍采用的方法就是溴甲烷土
壤熏蒸法，但该药的使用成本高，药效时间短，且溴甲烷是剧毒气体，对大气臭
氧层破坏严重。大量有毒药剂的使用使土壤的理化性质进一步恶化，肥力降低，
有毒物质积累，严重影响草莓的品质和产量。造成作物重茬的主要原因是土传病
害和土壤营养元素的缺乏[1-2]。同一作物的耕作、施肥、灌溉等方式固定不变，
连年耕作，使土壤环境恶化，肥力降低，有毒物质积累，有益微生物菌群数量减
少，引发病原微生物的大量滋生[3]。同一作物根系分布范围及深浅一致，吸收
养分相同，极易导致某种营养的消耗量增加，该耕作层某种养分缺失，在连作作
物中表现更为严重。

1 材料与方法
1.1 试验材料
供试草莓拮抗菌株：实验室保存的多株放线菌株。草莓土传病菌：镰刀菌
（Fusaricm oxysporum）、丝核菌（Rhizoctonia solani Kuho），从保定满城草莓园
分离并保存。供试培养基：放线菌培养采用高氏1号合成培养基，土传病菌培养
采用PDA培养基。靶标菌株：镰刀菌（Fusaricm oxysporum）、丝核菌（Rhizoctonia
solani Kuho）。试验菌株：放线菌J-32。栽培盆：20 cm的塑料盆，取田间细肥土，
灭菌，每盆装土10 kg。栽培槽（长×宽=100 cm×30 cm）装土，500 mL罐头瓶、
纱布、牛皮纸若干。

1.2 试验方法
1.2.1 抗生菌菌株的筛选。①菌种活化：将实验室保存的放线菌种活化备用，
靶标菌活化。②菌株筛选方法：将活化好的放线菌株，在高氏1号培养基平板上
培养3 d后，分别以镰刀菌和丝核菌为靶标菌，采用对峙培养法测定拮抗作用。
方法为：取活化的靶标菌菌饼（Φ5 mm）置于PDA平板（Φ90 mm）一侧，用接
种环挑取适量拮抗菌在平板另一侧，30 ℃培养5 d后测量抑菌带宽度，每处理
设3次重复[4]。

1.2.2 室内盆栽试验。为了进一步验证放线菌株J-32对草莓致病菌的抑菌效
果及其在土壤中的定殖性能，特进行室内盆栽试验。回接靶标菌，分别测定其对
土传病害的防治效果。将放线菌J-32的斜面制成含孢子量为1×106个/mL的孢
子悬液，摇匀后接入盆栽草莓的根际，每株秧苗接入2 mL，1周后以同样方法
制备靶标菌菌悬液接入草莓的根际，每株秧苗接入2 mL。以不接放线菌的处理
为对照（CK）。①以丝核菌测定放线菌J-32的防治效果：选用苗龄20 d的草莓
苗移栽到盆中，每盆5株，5次重复。②以镰刀菌测定优选菌株的防治效果：选
用苗龄2个月的草莓苗移植到栽培槽中，每槽10株，5次重复。

1.2.3 J-32菌剂生产工艺的确定。液体种子制备方法：培养基含玉米粉2%、
豆饼粉2%、淀粉1%，摇瓶培养，转速180 r/min，28～30 ℃培养24 h。固体种
子制备方法：培养基含小米100 g、KNO3 0.1%、MgSO4 0.05%、NaCl 0.05%、
K2HPO4 0.05%、牛肉浸膏0.1%、麸皮10%，调pH值至7.0～7.2。将以克氏瓶
（高氏1号培养基）培养成熟的J-18菌孢子接入固体种子培养基中，培养5～7 d，
孢子成熟后作为固体种子备用。

2 结果与分析
2.1 放线菌对靶标菌的抑菌效果
8株放线菌对靶标菌均有较好的抑制作用，其中J-88对镰刀菌抑制作用最大，
其次为J-32；J-32对丝核菌的抑制作用最大，其次为J-88，具体见表1。

2.2 盆栽草莓发病情况
在试验中观察发现，加入抗生菌后草莓苗生长健壮，发病率低，具体见表2。
2.3 J-32菌剂生产工艺的确定
2.3.1 培养基质的选择。试验选择8组培养基质配方，分别接入液体菌种，
30 ℃温箱培养。观察生长情况，并以培养结束后测定孢子数，确定较适宜的培
养基质，其中较好的2组培养基质的培养结果见表3。

由于第2组物料成本相对较低，所以在此培养基的基础上做正交试验，进一
步确定各种成分的具体含量，因素水平见表4，正交试验结果见表5。4个因素
的主次关系为：豆饼粉>锯末>甘薯粉>细肥土>石灰。最优的培养基组合为：豆
饼粉4%、锯末12%、甘薯粉12%、细肥土35%、石灰2.0%。

为了验证最优组合，将出发培养基，正交试验表现最好的培养基和最优组合
培养基进行试验验证，验证结果见表6。

2.3.2 发酵培养。发酵原料及其培养条件同浅盘培养。发酵培养5～6 d后，
基质全部出现粉色孢子，此时即可出料。且在40～45 ℃条件下，干燥至含水量
10%～15%，粉碎后包装备用，并从中取样平板测定孢子数。经5个批次的生产
试验表明，菌丝生长健壮、整齐、含菌量高，培养结果见表7。
3 结论与讨论
先用靶标菌对试验室保存的放线菌进行初选，然后进行对草莓主要拮抗菌的
抑菌试验，与肥效菌株的拮抗试验对菌株进一步优选，确定J-32细黄链霉菌
（Streptomyces microflavus）为草莓抗重茬菌剂的生产菌株。

放线菌的培养基的影响大小依次为，豆饼粉>锯末>甘薯粉>细肥土>石灰，
在菌丝生长期需要的培养基水分要高达到60%，在孢子形成期培养基水分不能超
过50%。复合菌剂在土壤中形成有益微生物群体优势，抑制有害微生物的繁殖，
抑制土传病害，降低发病率[5-7]。

4 参考文献
[1] 李保国，陈超，郭素萍，等.无公害草莓重茬病防治剂对草莓生长的影响
[J].河北果树，2005（1）：7-10.

[2] 李彦慧，李保国，刘雪春，等.原美草莓重茬病防治剂对草莓矿质元素利
用效果的研究[J].河北农业大学学报，2005，28（6）：58-63.

[3] 李保会，李青云，李建军，等.复合微生物菌肥对连作草莓产量和品质的
影响[J].河北农业科学，2007，11（1）：15-17.

[4] 田连生，王伟华，石万龙，等.利用木霉防治大棚草莓灰霉病[J].植物保
护，2000，26（2）：47-48.

[5] 冯宗友，薛立辉，戴厚升，等.“利乐资生”通用型复合微生物肥在草莓生
产中的应用效果研究[J].现代农业科技，2010（16）：277-279.

[6] 蔡艳华，王连君，王雨娟，等.不同配方酵素菌肥对草莓产量和品质的影
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[7] 李智，杨旭，牛彦波，等.放线菌固体培养基原料筛选与确定的研究[J].
黑龙江农业科学，2003，（5）：30-31.

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引起草莓重茬病的几个关键因素

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引起草莓重茬病的几个关键因素
草莓重茬病也叫草莓重茬障碍。

草莓在同一地块长期连作，往往会造成病虫害的滋生和蔓延，土壤有机质含量下降，浅层单一盐分的浓度障碍加重，使草莓生长潜力逐年下降。

重茬问题也是制约保护地草莓生产的一大障碍，在连续种植草莓的地块上，植株萎蔫，果实不能正常膨大，直至植株死亡，造成严重减产。

草莓重茬病因
①土壤微生物平衡失调
土壤中存在着两大类微生物，一类是对草莓植株生长有益的微生物，另一类是对草莓植株生长有害的微生物，二者处在一种动态的变化中，当有益微生物数量多时，草莓植株表现为高度抗病，当有害微生物数量多时，草莓植株表现为易感病。

同一地块连续多年栽种草莓，导致土壤微生物群发生很大变化，线虫和病原菌大量增殖积累，病虫害发生严重。

草莓黄萎病和枯萎病病菌存活在土壤中，由植株根部机械损伤处侵入根中，开花结实期地温升高，病菌繁殖蔓延较快，叶片变小，叶柄变短，长势衰弱，植株矮化，须根变成黑褐色而腐烂，最后全株枯死。

②土壤养分平衡失调
保护地内草莓多年重茬后，浅土层有害盐类积累，土壤的理化性质恶化，由于连年栽植草莓苗，土壤有机质含量逐年下降，土壤中草莓所需要的养分逐年减少，草莓根际周围的养分平衡失调使养分缺乏而减产。

③根系分泌物积累
草莓根系在正常生理代谢中，常分泌一些对自身有害的物质，草莓连作使有害物质逐年积累，致使草莓生长受阻，发育不良，造成减产。

3种微生物菌剂对基质栽培草莓生长发

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朱　丽，殷　敏，任荣荣，等．３种微生物菌剂对基质栽培草莓生长发育、果实产量品质和病害的影响［Ｊ］．江苏农业科学，２０２３，５１（１）：１５５－１６０．ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０２３．０１．０２３３种微生物菌剂对基质栽培草莓生长发育、果实产量品质和病害的影响朱　丽１，２，３，殷　敏１，任荣荣１，姬振蒙１，孙传文４，陈晓东２，赵密珍２，乔玉山３（１．江苏沿海地区农业科学研究所新洋试验站，江苏盐城２２４０４９；２．江苏省农业科学院果树研究所／江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室，江苏南京２１００１４；３．南京农业大学园艺学院，江苏南京２１００９５；４．江苏省盐城市盐都区农业农村局，江苏盐城２２４０００） 摘要：探究不同微生物菌剂与化学农药试剂对草莓基质栽培下植株生长发育、鲜果产量、品质和抗氧化能力的影响，以草莓品种宁玉为试材，采用高架种植技术，比较灌施清水（ＣＫ）、宁盾微生物菌剂（ＪＮ）、哈茨木霉菌（ＪＨ）、寡雄腐霉菌（ＪＧ）、代森锰锌＋多菌灵（ＹＤＤ）和吡唑醚菌酯（ＹＢ）６种处理下草莓生长势、物候期变化和果实质量等指标的变化特征。

结果表明，３种菌剂处理后的草莓植株在叶片数、株高、花序数和花梗长等生长指标上高于ＣＫ和药剂处理，并且发病率较低，有较好防病促生效果。

而草莓鲜果产量和品质，ＪＮ处理表现较好，其第１花序的平均株产果数是ＣＫ、药剂和其他２种菌剂的１．３３～１０．００倍，果实可溶性糖含量也比其他处理提高１０．３７％～６６ ６７％，果实总酚含量、过氧化氢酶活性和植物原花青素含量等抗氧化物指标均显著上升。

综上可得，微生物菌剂可促进草莓生长发育，其中施用宁盾微生物菌剂（ＪＮ）可有效提高草莓鲜果产量和品质、降低植株发病率，在生产上具有较好应用潜力。

关键词：草莓；微生物菌剂；生长发育；鲜果产量；果实品质 中图分类号：Ｓ６６８．４０６ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－１３０２（２０２３）０１－０１５５－０６收稿日期：２０２２－０１－１９基金项目：江苏现代农业产业技术体系建设项目（编号：ＪＡＴＳ［２０２１］４２４）。

【LorMe周刊】多多益善：与农作物共生的链霉菌

【LorMe周刊】多多益善：与农作物共生的链霉菌

【LorMe周刊】多多益善：与农作物共⽣的链霉菌作者：孙天宇，南京农业⼤学博⼠在读，主要研究根际抑病核⼼放线菌群互作及调控。

周刊主要展⽰LorMe团队成员优秀周报，每周定期为您奉上学术盛宴！本期周刊介绍链霉菌对于主导作物营养吸收和维持作物健康⽅⾯未来的⽅向，以及农业上使⽤这些微⽣物的风险和效益。

原⽂于2017年发表在《Trends in Plant Science》。

导读链霉菌是放线菌门的⼀个主要分⽀，这些⾰兰⽒阳性丝状原核⽣物普遍存在于⼟壤和海洋沉积物中，也存在于植物的根际或根内。

鉴于其丰富的次⽣代谢物的合成潜⼒，⼏⼗年来，⼈们在医学领域对链霉菌属进⾏了⼴泛研究。

但与之相⽐，与植物互作的链霉菌并没有引起⼈们过多的注意。

近年来，随着基因组学、代谢组学和⽣物技术的进步，为链霉菌的研究提供了重要的技术⽀撑，也为农业上链霉菌次级代谢产物的应⽤打下了基础。

在本篇综述⽂章中，我们提出了链霉菌对于主导作物营养吸收和维持作物健康⽅⾯的展望，也讨论了在农业上使⽤这些微⽣物的风险和回报。

充分利⽤链霉菌代谢物进⾏农业⽣产关于链霉菌的复合⽣物学已引起学术界和⼯业界的⼴泛关注，科学家试图在⼈类疾病中寻找具有⽣物活性的次⽣代谢物。

因此，⽬前对存在于这些⽣物体⽣命周期的代谢物⽣物合成的调节具有⼴泛的知识背景。

基因组测序技术的出现彻底改变了链霉菌⾮核糖体肽合成酶（NRPS）和聚酮体合成酶（PKS）⽣物合成基因簇代谢产物的⽣产。

核⼼链霉菌基因组的存在，加快了与农业相关菌株的⼯程化进展。

此外，⽐较基因组的分析显⽰出链霉菌的次级代谢产物基因簇具有⾼度的多样性。

因此，解决这些问题将有助于⽣物技术的进⼀步创新。

⽬前已经知道链霉菌在次⽣代谢物⽣产⽅⾯的巨⼤潜⼒。

⼀些链霉菌是通过转基因和诱变进⾏的⽣物技术⼯程菌，可作为宿主从抗遗传操纵的菌株中产⽣代谢物。

关于链霉菌的发育和转录调控也已具备⼤量的背景知识。

最近，合成⽣物学⼯具的增加正在为解决链霉菌遗传⼯程中长期存在的局限性，进⾏创新并为可接受的⽅法铺平道路。