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霉菌检查的实验报告引言霉菌是一类微生物，常见于自然环境中的土壤、植物、空气和水体中。
而在日常生活和工作环境中，霉菌也常常存在，尤其是在潮湿、不透气或没有良好通风的环境中。
霉菌的存在对人体健康有一定的影响，例如引起过敏反应、呼吸道症状和感染性疾病等。
因此，对于霉菌的检测和监测显得十分重要。
本实验旨在通过采集样本、培养和计数霉菌的方法，检查不同环境中的霉菌污染情况，为日后的霉菌防控提供依据。
材料与方法材料- 霉菌培养基- 霉菌培养皿- 96% 乙醇溶液- 棉签- 培养皿密封膜- 防护手套- 实验室安全镜方法1. 采集样本：在实验室、家庭、学校等不同环境中，使用棉签轻轻擦拭表面，以采集潜在的霉菌样本。
每个样本应采集相应表面积的样品，避免重复采集同一区域。
2. 培养：将擦拭得到的样本均匀涂抹在霉菌培养基上，并用标签注明采样地点和日期。
每个样本应培养两个培养皿作为重复样本。
3. 密封：将培养皿密封，以防止空气中其它微生物的污染。
4. 孵化：将培养皿置于30C恒温箱中培养，培养时间为48小时。
5. 观察：在孵化结束后，观察培养皿上是否有霉菌的生长，并进行分类和计数。
6. 记录：记录每个样本的霉菌分类和计数结果。
结果与讨论经过培养和观察，我们得到了不同样本的霉菌计数结果，并根据霉菌的外形和颜色进行了分类。
以下是实验结果的总结：采样地点霉菌数量霉菌分类-实验室25 黑色霉菌(Aspergillus niger)家庭15 白色霉菌(Penicillium)学校20 红色霉菌(Fusarium)从实验结果可以看出，不同环境中的霉菌数量和种类存在差异。
实验室中，黑色霉菌(Aspergillus niger) 的数量最多，可能与实验室设备的不透气性和潮湿度高有关。
家庭中的霉菌主要是白色霉菌(Penicillium)，可能与家居环境的通风不良和潮湿度有关。
学校中的霉菌则以红色霉菌(Fusarium) 为主，可能与学校环境的潮湿度和食堂食品储存有关。
一、实验目的1. 了解菌落形态的基本概念和分类。
2. 掌握观察菌落形态的方法和技巧。
3. 通过观察不同菌种的菌落特征，学会鉴别菌种。
二、实验原理菌落是指单个微生物细胞在适宜的培养基上繁殖后形成的肉眼可见的子细胞群体。
菌落形态是指菌落的大小、形状、颜色、质地、边缘、表面等特征。
菌落形态是菌种鉴定的重要依据之一。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等纯培养菌种。
2. 仪器：显微镜、接种环、接种针、培养皿、培养基、酒精灯、无菌操作台等。
四、实验步骤1. 菌落培养将纯培养菌种接种于适宜的培养基上，置于恒温培养箱中培养。
2. 菌落观察（1）无菌操作：将接种环、接种针等工具在火焰上灼烧灭菌，待冷却后进行操作。
（2）挑取菌落：用接种环或接种针挑取少量菌落，置于显微镜载玻片上。
（3）制片：在载玻片上滴加适量的生理盐水，用接种环将菌落涂抹均匀。
（4）观察：将制片置于显微镜下，调整镜头，观察菌落形态。
3. 菌落特征描述根据观察到的菌落形态，描述其大小、形状、颜色、质地、边缘、表面等特征。
五、实验结果与分析1. 细菌菌落特征（1）形态：细菌菌落多为圆形、不规则形或椭圆形。
（2）大小：细菌菌落直径一般为0.5-5mm。
（3）颜色：细菌菌落颜色多样，如白色、黄色、绿色、红色等。
（4）质地：细菌菌落质地有粘稠、粘稠带皱褶、粘稠带颗粒、粘稠带膜状等。
（5）边缘：细菌菌落边缘有整齐、不规则、波状等。
2. 放线菌菌落特征（1）形态：放线菌菌落呈放射状、扇形、菊花形等。
（2）大小：放线菌菌落直径一般为0.5-5mm。
（3）颜色：放线菌菌落颜色多样，如白色、黄色、红色、黑色等。
（4）质地：放线菌菌落质地有粘稠、粘稠带皱褶、粘稠带颗粒等。
（5）边缘：放线菌菌落边缘有整齐、不规则、波状等。
3. 酵母菌菌落特征（1）形态：酵母菌菌落呈圆形、不整齐、菌丝状等。
（2）大小：酵母菌菌落直径一般为0.5-5mm。
（3）颜色：酵母菌菌落颜色多样，如白色、黄色、红色、黑色等。
实验五霉菌的形态观察、微生物的测微与计数一．实验目的1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法，初步了解霉菌的形态特征及鉴别依据。
2.学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定微生物大小的方法。
3.了解血球计数板的构造和使用方法。
学习使用血球记数板测定微生物数量的方法。
4.总结并掌握细菌、放线菌和霉菌的鉴别方法。
二、实验原理1. 霉菌定义及用途⏹霉菌不是真菌分类中的名词，而是丝状真菌的统称。
⏹霉菌在自然界中广泛分布，与食品的关系密切，是人类在实践活动中最早利用的一种微生物，如早期进行的酱和酱油的制作等。
⏹霉菌也可以使食品发生腐败变质或产生毒素，影响人体健康甚至危及生命。
2.霉菌特征⏹霉菌可产生分支的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
⏹菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
⏹霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多（约3-10um)，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍。
因此，用低倍镜即可观察。
3.霉菌的菌落⏹松：由于霉菌的菌丝较粗较长，菌丝体疏松，因而形成的菌落也比较疏松，呈绒毛状、棉絮状或蜘蛛网状；⏹大：菌落形态较大，一般比细菌和放线菌的菌落大几倍到几十倍，有时会长满整个培养皿；⏹干：外观干燥，不透明；⏹挑：菌落与培养基间的连接紧密，不易挑取；⏹颜色：由于基内菌丝、气生菌丝、孢子颜色不同，不同的霉菌菌落表面呈现不同的颜色，菌落正反面、边缘与中心颜色常不一致。
同一种霉菌在不同的培养基上或不同的培养条件下所形成的菌落特征可能有所不同。
但同一种霉菌在相同的培养条件下和培养基上所形成的菌落特征相对稳定。
菌落特征是霉菌鉴定的重要依据之一。
4、霉菌的菌丝形态⏹构成霉菌营养体的基本单位是菌丝。
菌丝的宽度一般为3-10μm，比放线菌菌丝宽很多倍，其菌可伸长并产生分枝。
许多分枝的菌丝相互交织在一起，称为菌丝体。
⏹一部分菌丝存在于培养基质中吸收营养，称为基内菌线或营养菌丝。
生物实验报告生物实验报告「篇一」霉菌的培养与形态学观察：实验一真菌培养基的配制与灭菌实验目的：（1）了解培养基的配置原理和方法，掌握分离培养微生物的有关准备工作。
（2）掌握高压灭菌方法及原理实验原理：（1）培养基的制备原理：培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。
从营养角度分析：营养：碳源、氮源、能源、生长素、水分和无机盐等?适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力?一定的氧化还原电位?合适的渗透压。
琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。
加琼脂制成的培养基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。
但多次反复融化，其凝固性降低。
（2）湿热灭菌原理－高压蒸汽灭菌在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。
在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。
在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
实验材料与方法配制培养基所需器材实验设备：高压蒸汽灭菌器。
实验器材：500ml三角烧瓶、蓝盖瓶、5ml刻度吸管、培养基、天平、砝码。
称量纸、药勺、500ml、100ml量筒、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐、平皿、剪刀等。
培养基等集中放讲台前高压桶内，送到洗刷室统一高压灭菌条件及注意事项高压灭菌条件：121.3℃，15min。
含糖培养基113℃，15min。
倒平板电炉加热灭菌好的培养基打开平皿包装倒平板（10块）注意事项：空气环境无菌（应在酒精灯火焰周围无菌区）。
a.在酒精灯火焰处，倾斜打开瓶口。
b.瓶口要过火焰。
c.左手掀开平皿小口。
d.倾注满皿底再多一点，约10ml（7cm直径平皿）。
e.推放一边要轻缓，不能晃起琼脂挂壁，易在培养过程中污染杂菌。
f.完全凝固再翻转平板放塑料筐内，4℃备用。
分析与讨论（1）如何证明培养基灭菌是否彻底?把灭菌后的培养基按灭菌锅内的不同位置，每处抽取数管(瓶)，标上记号，置25℃～30℃培养一周左右进行检查。
第1篇一、实验目的1. 熟悉光学显微镜的使用方法和操作技巧。
2. 掌握微生物、细胞等生物样本的形态观察技术。
3. 了解不同类型显微镜的原理和适用范围。
4. 培养实验操作规范和数据分析能力。
二、实验原理形态观察技术是生物学研究中的重要手段，通过观察生物样本的形态、结构和功能，可以了解生物体的生长发育、生理功能和病理变化等。
光学显微镜是常用的形态观察工具，利用光学原理放大生物样本，使其在显微镜下呈现出清晰的图像。
三、实验材料与仪器材料：1. 细菌培养物2. 酵母菌培养物3. 霉菌培养物4. 细胞培养物仪器：1. 光学显微镜2. 显微镜载物台3. 显微镜目镜和物镜4. 显微镜照明系统5. 显微镜成像系统（可选）6. 载玻片7. 盖玻片8. 吸水纸9. 美蓝染液10. 碘液11. 滴管12. 镊子四、实验步骤1. 显微镜使用培训：首先，对实验人员进行显微镜使用培训，包括显微镜的结构、操作方法、注意事项等。
2. 样本制备：- 将细菌、酵母菌、霉菌和细胞培养物分别接种于琼脂平板，培养至适当生长阶段。
- 用无菌操作将菌落或细胞刮取，制成悬液。
- 将悬液滴于载玻片中央，盖上盖玻片。
3. 染色：- 根据样本类型，选择合适的染色方法，如美蓝染色法、碘液染色法等。
- 将染色液滴于盖玻片边缘，使染色液慢慢渗入样本中。
4. 显微镜观察：- 将载玻片放置于显微镜载物台上，调整焦距，观察样本形态。
- 观察不同样本的形态、大小、结构等特征，并记录观察结果。
5. 数据记录与分析：- 将观察结果记录于实验记录表中，包括样本类型、观察部位、形态特征、数据等。
- 对观察结果进行分析，总结不同样本的形态特点。
6. 显微镜成像（可选）：- 使用显微镜成像系统，将观察结果拍摄成图像，以便于后续分析和分享。
五、实验结果与分析1. 细菌：细菌为单细胞生物，呈球状、杆状或螺旋状。
观察结果显示，细菌菌体大小不一，形态各异。
2. 酵母菌：酵母菌为单细胞真菌，呈卵圆形、椭圆形或球形。
实验七霉菌的培养和观察摘要通过在一定固定环境下培养根霉，毛霉，曲霉，青霉四种霉菌，先通过菌种的外形对其有一个“宏观”的认识，然后再在显微镜低倍或高倍镜下分别观察四种菌的形态，孢子囊及孢子形态，菌丝形态等方面。
发现根霉，曲霉和青霉菌丝均有横隔；青霉的分生孢子小梗呈扫帚状等现象。
关键词土豆培养基（PDA）分生孢子梗（Conidiophore）载片培养一、实验目的（1）学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
（2）了解四类霉菌（根霉、毛霉、黑曲霉、青霉）的基本形态。
二、实验原理霉菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和繁殖菌丝组成，其菌丝比细菌及放线菌粗几倍到几十倍。
可以采取直接制片和透明胶带法观察，也可以采取载玻片培养观察法，通过无菌操作将薄层培养基琼脂置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，使菌丝体在盖玻片和载玻片之间的培养基中生长，将培养物直接置于显微镜下可观察到霉菌自然生长状态并可连续观察不同发育期的菌体结构特征变化。
对霉菌可利用乳酸石炭酸棉蓝染液进行染色，盖上盖玻片后制成霉菌制片镜检。
石炭酸可以杀死菌体及孢子并可防腐，乳酸可保持菌体不变形，棉蓝使菌体着色。
同时，这种霉菌制片不易干燥，能防止孢子飞散，用树胶封固后可制成永久标本长期保存。
三、实验器材1、菌种根霉（Rhizopus），毛霉（Mucor），黑曲霉（Aspergillus niger），青霉（Penicillium）2、试剂马铃薯20g，蔗糖2g，琼脂2g，水100mL，20%甘油等。
3、仪器分析天平，玻璃棒，三角瓶，小烧杯，加热器，漏斗，纱布，培养皿，载玻片，盖玻片，U 型玻棒，解剖刀，镊子，接种环，移液管，酒精灯，显微镜等。
四、实验内容（1）配制马铃薯培养基配制200ml马铃薯培养基（PDA），其成分配比及配制方法见附录。
灭菌后无菌操作，取培养基分别倒少量于灭菌培养皿中，使之凝固成薄层。
再将这一层培养基用解剖刀切割为若干1cm²左右的琼脂块。
设计霉菌生长实验报告实验目的本实验旨在观察霉菌在不同条件下的生长情况，并探究其生长因素。
实验材料- 霉菌样本：白色霉菌（Aspergillus oryzae）- 培养基：琼脂实验步骤1. 准备琼脂培养基。
按照说明书的配方将琼脂粉溶解于适量的水中，加热煮沸，搅拌使其均匀。
2. 倒入培养皿。
将煮沸的琼脂培养基倒入培养皿中，每个培养皿倒入适量的琼脂，待琼脂凝固成固体状态。
3. 制备接种株。
在无菌条件下，取一小块霉菌样本放入无菌试管中，加入适量的无菌水悬浮液，并进行均匀搅拌。
4. 接种。
将接种株均匀地涂抹在培养皿上，保证整个琼脂表面都有霉菌接种。
5. 标记。
在每个培养皿上用无菌针在容器底部刻上编号，方便后续观察。
6. 实验组设置。
针对不同试验条件，设置不同的实验组，如温度、湿度等。
7. 实验条件控制。
将培养皿放入恒温箱或恒温培养箱中，控制温度、湿度，并确保充足的光照。
8. 观察和记录。
每天观察各实验组霉菌生长情况，记录其外观、颜色、大小等特征，并拍照保存。
实验结果与分析1. 温度对霉菌生长的影响：在恒温箱中设置不同温度，如20C、25C、30C和35C，观察霉菌生长情况。
- 结果：实验结果显示，在30C条件下，霉菌生长最为良好，菌丝密集，菌落生长较快；而在20C和35C条件下，霉菌生长较为缓慢。
- 分析：霉菌对温度的适应性较强，适宜的温度对其生长有促进作用，但过高或过低的温度会抑制其生长。
2. 湿度对霉菌生长的影响：在恒湿箱中设置不同湿度，如60%、70%、80%和90%，观察霉菌生长情况。
- 结果：实验结果显示，在80%湿度条件下，霉菌生长最为旺盛，菌丝生长茂密；而在60%和90%湿度条件下，霉菌生长较为缓慢。
- 分析：霉菌对湿度的适应性较强，适宜的湿度对其生长有促进作用，但过干或过湿的环境会抑制其生长。
结论通过本次实验观察和分析可以得出以下结论：- 霉菌的生长受到温度和湿度的影响，适宜的温度和湿度有助于其生长。
山东大学实验报告2017年11月6日________________________________________ _________________________ 科目：微生物学实验题目：霉菌的培养及形态观察姓名：丁志康一、目的要求1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
2.了解四类常见霉菌的基本形态特征。
二、基本原理霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多（约为3-10μm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍镜即可观察。
观察霉菌的形态有多种方法，常用的有下列三种：1. 直接制片观察法：是将培养物置于乳酸石碳酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。
用此染色制成的霉菌制片的特点是：细胞不变形；具有防腐作用，不易干燥，能保持较长时间；能防止孢子飞散；染色的蓝色能增强反差。
必要时，还可用树胶封固，制成永久标本长期保存。
2．载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌就在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。
培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。
这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期培养物。
3．玻璃纸培养观察法：玻璃纸是一种透明的半透膜，将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后将霉菌接种于玻璃纸上，经培养，霉菌在玻璃纸上生长形成菌苔。
观察时，揭下玻璃纸，固定在载玻片上直接镜检。
这种方法既能保持霉菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态特征。
本次试验使用的是第二种方法，即载玻片培养观察法。
三、器材1、菌种：曲霉，青霉，根霉和毛霉培养2-5d的马铃薯斜面培养物。
2、培养基：土豆琼脂培养基。
3、溶液或试剂：蒸馏水。
4、仪器或其他用具：无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片，U形玻棒，解剖针，解剖刀，镊子，95%乙醇以及显微镜等。
微生物学实验报告题目：霉菌的形态观察姓名：学号：年级班级：组别：同组者：时间：【实验器材】1．菌种曲霉( Aspergillus sp. ) ，青霉，根霉( Rhizopus sp. ) 和毛霉（Mucor sp. ）培养2~5d 的马铃薯琼脂平板培养物。
2．培养基马铃薯培养基（简称PDA）3．仪器或其他用具无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片，U型玻棒，解剖刀，镊子，50%乙醇，20%的甘油以及显微镜等。
【目的要求】1．学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
2．了解四类常见霉菌的基本形态特征。
【基本原理】霉菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和繁殖菌丝组成，其菌丝比细菌及放线菌粗几倍到几十倍。
可以采取直接制片和透明胶带法观察，也可以采取载玻片培养观察法，通过无菌操作将薄层培养基琼脂置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，使菌丝体在盖玻片和载玻片之间的培养基之间的培养基中生长，将培养物直接置于显微镜下可观察到霉菌自然生长状态并可连续观察不同发育期的菌体结构特征变化。
【操作步骤】1．培养小室的灭菌在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一U形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖、包扎后于110℃灭菌20~30min，烘干备用。
2．琼脂块制备通过无菌操作，用解剖刀由马铃薯琼脂薄层平板上切下1cm2左右的琼脂块，将其移至培养小室的载玻片上，每片两块。
3．接种通过无菌操作，用接种针从黑曲霉或黑根霉马铃薯琼脂平板培养物中挑取很少量孢子，接种于小室中琼脂块边缘上，将盖玻片覆盖在琼脂块上。
4．培养通过无菌操作，在培养小室中圆滤纸片上加3~5mL灭菌的20%甘油（用于保持湿度），盖上皿盖，于28℃培养7天。
5．镜检取出载玻片用低倍镜和高倍镜镜检。
【实验结果】1．图片：四种霉菌的形态假根孢子囊匍匐菌丝图一：根霉（10×10）图二：曲霉（10×10）足细胞孢子梗横隔图三：曲霉孢子（10×40）图四：曲霉足细胞（10×40）分生孢子梗图五：毛霉（10×10）图六：青霉（10×10）黑曲霉和黑根霉在形态特征上有何区别？答：黑根霉菌丝无隔，有匍匐菌丝和假根，假根着生处有直立的向上孢子囊梗，其顶端膨大成孢子囊，孢子囊底部有半球形囊轴。
实验七霉菌的培养和观察摘要通过在一定固定环境下培养根霉，毛霉，曲霉，青霉四种霉菌，先通过菌种的外形对其有一个“宏观”的认识，然后再在显微镜低倍或高倍镜下分别观察四种菌的形态，孢子囊及孢子形态，菌丝形态等方面。
发现根霉，曲霉和青霉菌丝均有横隔；青霉的分生孢子小梗呈扫帚状等现象。
关键词土豆培养基（PDA）分生孢子梗（Conidiophore）载片培养一、实验目的（1）学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
（2）了解四类霉菌（根霉、毛霉、黑曲霉、青霉）的基本形态。
二、实验原理霉菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和繁殖菌丝组成，其菌丝比细菌及放线菌粗几倍到几十倍。
可以采取直接制片和透明胶带法观察，也可以采取载玻片培养观察法，通过无菌操作将薄层培养基琼脂置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，使菌丝体在盖玻片和载玻片之间的培养基中生长，将培养物直接置于显微镜下可观察到霉菌自然生长状态并可连续观察不同发育期的菌体结构特征变化。
对霉菌可利用乳酸石炭酸棉蓝染液进行染色，盖上盖玻片后制成霉菌制片镜检。
石炭酸可以杀死菌体及孢子并可防腐，乳酸可保持菌体不变形，棉蓝使菌体着色。
同时，这种霉菌制片不易干燥，能防止孢子飞散，用树胶封固后可制成永久标本长期保存。
三、实验器材1、菌种根霉（Rhizopus），毛霉（Mucor），黑曲霉（Aspergillus niger），青霉（Penicillium）2、试剂马铃薯20g，蔗糖2g，琼脂2g，水100mL，20%甘油等。
3、仪器分析天平，玻璃棒，三角瓶，小烧杯，加热器，漏斗，纱布，培养皿，载玻片，盖玻片，U 型玻棒，解剖刀，镊子，接种环，移液管，酒精灯，显微镜等。
四、实验内容（1）配制马铃薯培养基配制200ml马铃薯培养基（PDA），其成分配比及配制方法见附录。
灭菌后无菌操作，取培养基分别倒少量于灭菌培养皿中，使之凝固成薄层。
再将这一层培养基用解剖刀切割为若干1cm²左右的琼脂块。
霉菌的形态观察实验报告
目录
1. 实验目的
1.1 掌握霉菌的形态观察方法
1.2 学习霉菌的形态特征
1.3 理解霉菌的生长环境需求
2. 实验步骤
2.1 准备实验材料
2.2 培养霉菌样本
2.3 进行形态观察
2.4 记录观察结果
3. 实验结果
3.1 霉菌的颜色、形状、大小等形态特征描述
3.2 霉菌在不同培养基上的生长情况
3.3 形态观察对霉菌种类的判断
4. 实验讨论
4.1 霉菌形态特征与生长环境的关系
4.2 霉菌在生活中的应用与危害
4.3 形态观察在霉菌研究中的重要性
5. 实验结论
5.1 通过形态观察，可以准确识别不同种类的霉菌 5.2 霉菌的生长环境对其形态特征有一定影响
5.3 形态观察是研究霉菌的重要手段
6. 参考文献。
食品微生物实验篇一：霉菌的培养与形态学观察：实验一真菌培养基的配制与灭菌实验目的：〔1〕了解培养基的配置原理和方法，掌握别离培养微生物的有关准备工作。
〔2〕掌握高压灭菌方法及原理实验原理：〔1〕培养基的制备原理：培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。
从营养角度分析：营养：碳源、氮源、能源、生长素、水分和无机盐等；适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力；一定的氧化复原电位；适宜的渗透压。
琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。
加琼脂制成的培养基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。
但屡次反复融化，其凝固性降低。
〔2〕湿热灭菌原理－高压蒸汽灭菌在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。
在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。
在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
实验材料与方法配制培养基所需器材实验设备：高压蒸汽灭菌器。
实验器材：500ml三角烧瓶、蓝盖瓶、5ml刻度吸管、培养基、天平、砝码、称量纸、药勺、500ml、100ml量筒、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐、平皿、剪刀等。
培养基等集中放讲台前高压桶内，送到洗刷室统一高压灭菌条件及考前须知高压灭菌条件：121.3℃，15min。
含糖培养基113℃，15min。
倒平板电炉加热灭菌好的培养基翻开平皿包装倒平板〔10块〕考前须知：空气环境无菌〔应在酒精灯火焰周围无菌区〕。
a.在酒精灯火焰处，倾斜翻开瓶口。
b.瓶口要过火焰。
c.左手掀开平皿小口。
d.倾注满皿底再多一点，约10ml〔7cm直径平皿〕。
e.推放一边要轻缓，不能晃起琼脂挂壁，易在培养过程中污染杂菌。
f.完全凝固再翻转平板放塑料筐内，4℃备用。
分析与讨论〔1〕如何证明培养基灭菌是否彻底把灭菌后的培养基按灭菌锅内的不同位置，每处抽取数管(瓶)，标上记号，置25℃～30℃培养一周左右进行检查。
山东大学实验报告2017年11月6日________________________________________ _________________________ 科目：微生物学实验题目：霉菌的培养及形态观察姓名：丁志康一、目的要求1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
2.了解四类常见霉菌的基本形态特征。
二、基本原理霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多（约为3-10μm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍镜即可观察。
观察霉菌的形态有多种方法，常用的有下列三种：1. 直接制片观察法：是将培养物置于乳酸石碳酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。
用此染色制成的霉菌制片的特点是：细胞不变形；具有防腐作用，不易干燥，能保持较长时间；能防止孢子飞散；染色的蓝色能增强反差。
必要时，还可用树胶封固，制成永久标本长期保存。
2．载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌就在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。
培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。
这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期培养物。
3．玻璃纸培养观察法：玻璃纸是一种透明的半透膜，将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后将霉菌接种于玻璃纸上，经培养，霉菌在玻璃纸上生长形成菌苔。
观察时，揭下玻璃纸，固定在载玻片上直接镜检。
这种方法既能保持霉菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态特征。
本次试验使用的是第二种方法，即载玻片培养观察法。
三、器材1、菌种：曲霉，青霉，根霉和毛霉培养2-5d的马铃薯斜面培养物。
2、培养基：土豆琼脂培养基。
3、溶液或试剂：蒸馏水。
4、仪器或其他用具：无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片，U形玻棒，解剖针，解剖刀，镊子，95%乙醇以及显微镜等。
实验八霉菌的形态观察一、实验原理霉菌的营养体是分枝的菌丝体。
霉菌在潮湿条件下生长繁殖长出丝状、绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。
菌丝分为营养菌丝与气生菌丝，营养菌丝匍匐于培养基的表面或生于培养基内吸收养料，从营养菌丝上长出伸于空中的菌丝为气生菌丝系，可分化出产生孢子的结构。
菌丝的直径一般比细菌和放线菌大得多。
菌丝在显微镜下观察呈管状，有的有横隔膜将菌丝分割为多个细胞，有的菌丝无横隔膜整个菌丝体为1个单细胞。
霉菌的菌落形态较大，质地较疏松，颜色各不相同。
霉菌无性繁殖或有性繁殖可形成不同类型的孢子。
菌丝、孢子及菌落等特征，因霉菌的种类而异，因而为种类鉴定非常重要的依据。
由于霉菌的菌丝体较粗，而且孢子容易飞散，若在水中溶易变形，显微测量时与实际值存在人为偏差，故观察时将其置于棉蓝乳酚油中，既有保持其正常的形态、使细胞不易干燥及杀菌防腐作用，还因棉蓝染料的存在而对菌丝与孢子具有染色作用，真菌的显微观察时常用棉蓝乳酚油作为浮载剂。
二、主要仪器及设备曲霉(Aspergillus sp．)，青霉(Penicillium sp．)，根霉(Rhizopus sp．)；棉蓝乳酸油染色液，载玻片，盖玻片，解剖针，滤纸，显微镜等。
三、操作步骤1、取95%酒精浸泡的载玻片1块，火焰烧去酒精；2、冷却后在载玻片中央滴棉蓝乳酚油1滴；3、以解剖针从霉菌菌落上挑少许菌丝体置于染液中；4、以解剖针使菌丝体在染液中充分展开；5、将1洁净的盖玻片盖于染液上，以滤纸吸去盖玻片边缘过剩的染液；6、显微镜下20X、40X物镜观察绘图。
四、注意事项1、菌丝体在浮载剂中必须充分展开；2、盖盖玻片时必须斜着缓慢放下，否则在盖上异形成气泡。
五、实验报告1、绘制有隔菌丝与无隔菌丝图2、绘制青霉菌及曲霉菌的分生孢子梗图。
3、霉菌显微观察制片与细菌有何不同？II 四大类细胞型微生物的菌落特征比较观察一、实验原理菌落形态是指某种微生物在一定的培养基上由单个菌体形成的群体形态。
姓名系年级学号科目题目组别同组者：一、【目的要求】1．学习并掌握霉菌的形态观察法——小室培养法；2．了解四类常见霉菌（青、根、毛、曲霉）的形态特征；3．巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。
二、【实验原理】1.霉菌可产生分枝的菌丝体，分为基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据（本次实验观察青霉、曲霉、根霉和毛霉菌四种霉菌）。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约 3-10μm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。
2.观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。
3.载玻片培养观察法（小室培养法）：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。
培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。
这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。
三、【实验器材】1．菌种：曲霉，青霉，根霉和毛霉培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物2．培养基：马铃薯培养基（简称PDA）（配方见附表）3.仪器和其他用品：平皿，载玻片，盖玻片，无菌吸管，U 型玻璃棒，解剖刀，镊子，50%乙醇，20%甘油，显微镜，接种环，酒精灯等四、【实验内容】1．配培养基：根据报告后附录准确称取实验所需各种物质的质量，配置PDA培养基150ml，121℃灭菌20分钟；2．培养小室的准备及灭菌：在八个平皿底部各铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再各放一个姓名系年级学号科目题目组别同组者：Ｕ形玻璃棒，其上各放一洁净载玻片和四块盖玻片，盖上平皿盖，加上两个空平皿，包扎后于121℃灭菌30分钟，烘干备用；3．琼脂薄片的制作：取已灭菌的马铃薯琼脂培养基分别注入两个灭菌平皿（事先在平皿底部画上1cm X 1cm或1.2cm X 1.2cm的方格）中，使之凝固成薄层。
山东大学实验报告2017年11月6日
________________________________________ _________________________科目：微生物学实验题目：霉菌的培养及形态观察姓名：丁志康
一、目的要求
1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
2.了解四类常见霉菌的基本形态特征。
二、基本原理
霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多（约为3-10μm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍镜即可观察。
观察霉菌的形态有多种方法，常用的有下列三种：
1. 直接制片观察法：是将培养物置于乳酸石碳酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。
用此染色制成的霉菌制片的特点是：细胞不变形；具有防腐作用，不易干燥，能保持较长时间；能防止孢子飞散；染色的蓝色能增强反差。
必要时，还可用树胶封固，制成永久标本长期保存。
2．载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌就在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。
培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。
这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期培养物。
3．玻璃纸培养观察法：玻璃纸是一种透明的半透膜，将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后将霉菌接种于玻璃纸上，经培养，霉菌在玻璃纸上生长形成菌苔。
观察时，揭下玻璃纸，固定在载玻片上直接镜检。
这种方法既能保持霉菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态特征。
本次试验使用的是第二种方法，即载玻片培养观察法。
三、器材
1、菌种：曲霉，青霉，根霉和毛霉培养2-5d的马铃薯斜面培养物。
2、培养基：土豆琼脂培养基。
3、溶液或试剂：蒸馏水。
4、仪器或其他用具：无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片，U形玻棒，解剖针，解剖刀，镊子，95%乙醇以及显微镜等。
四、操作步骤
（1）、培养小室的灭菌：在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一U形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖、包扎后于121℃灭菌30min，烘干备用。
（2）、琼脂块的制作：取已灭菌的马铃薯琼脂培养基6～7mL注入另一灭菌平皿
中，使之凝固成薄层。
用解剖刀切成0.5～1cm2的琼脂块，并将其移至上述培养室
中的载玻片上（每片放两块，如右图）。
（3）、接种：用尖细的接种针挑取少量的孢子接种于琼脂块边缘上，用无菌镊
子将盖玻片覆盖在琼脂块上。
（接种量要少，尽可能将分散的孢子接种在琼脂块边
缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察。
）
（4）、培养：先在平皿的滤纸上加10mL左右灭菌的纯净水（用于保持平皿内的湿度），盖上皿盖，28℃培养。
（5）、镜检：根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置于低倍镜下观察，必要时换高倍镜。
五、实验结果
1.实验照片
毛霉（10×10，示繁殖菌丝及孢子囊）根霉（10×10，示孢子囊及假根）
青霉（10×40，示分生孢子）黑曲霉（10×10，示足细胞及孢子囊）
六、思考题
（1）你主要根据那些形态特征来区分上述四种霉菌？
①菌丝：毛霉与根霉菌丝无隔，而青霉与黑曲霉的菌丝有隔。
②菌落：毛霉的菌落气生菌丝极发达，延伸范围大，菌丝蓬松，颜色相对较白；根霉的菌落气生菌
丝也很发达，但较毛霉少，菌丝灰色或褐色，在菌落表面有时能看到黑色小点；青霉的菌落相对较小，气生菌丝不发达，颜色呈青绿色，边缘青白色；黑曲霉的菌落也相对较小，气生菌丝不发达，颜色呈黑褐色或棕褐色。
③菌种特征：青霉的孢子囊呈帚状，孢子为一连串的分生孢子；黑曲霉的孢子囊为球形，分生孢子分布在孢子囊外，且黑曲霉在繁殖菌丝与营养菌丝连接处常有一膨大的足细胞；毛霉与根霉的孢子囊都为球形，但根霉具有假根，而毛霉没有。
（2）根据载玻片培养观察法的基本原理，你认为上述操作过程中的哪些步骤可以根据具体情况做一些改进或可用其他的代替方法？
①实验中为了保湿在平皿中加入的是无菌水，但是用20%的甘油保湿效果会更好，用量也更少，不易洒出，建议用甘油替代无菌水保湿。
②培养用的琼脂块需要足够薄才利于观察，这对实验者对平板中培养基量的把握的要求比较高，建议可以改成涂层法，即用滴管吸取少量未凝固的培养基滴加到载玻片上，之后均匀涂抹开，涂出两个区域代替两片琼脂块，凝固后接种并盖上盖玻片。
（3）你认为在显微镜下，细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的主要区别是什么？
①大小：这四者在显微镜下大小有显著差异，酵母菌与霉菌很大，低倍镜就可见，放线菌较小，需要高倍镜，而细菌必须在油镜下才可看见。
②形态：霉菌与放线菌在显微镜下看到的都是缠绕的菌丝体，而酵母菌看到的是一个个卵圆形的个体，细菌则形态多样，大多为球状、杆状、螺旋状、链状等。
七、附：马铃薯培养基1000mL配料表
马铃薯：200 g
蔗糖：20 g
琼脂：15~20 g
水：1000 mL
pH：自然
*马铃薯去皮，切成块煮沸半小时，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，溶化后补足水至1000 mL。
121℃灭菌30min。
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