常见霉菌形态观察

霉菌的形态观察一、实验目的1、掌握观察霉菌形态的基本方法，观察常见几种霉菌的菌丝形态2、学会霉菌浸片的制作方法二、实验原理霉菌菌丝观察不能用水作介质制片，因为菌丝会因渗透作用而膨胀，目前，霉菌制片时最理想的介质是乳酸苯酚油。

制片时常用乳酸石炭酸棉蓝作染色液。

此染色液制成的霉菌浸片除有一定染色效果外，细胞不变形，还具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间。

霉菌和放线菌相似，由于其菌丝较粗，形成的菌落较疏松，呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状，一般比细菌菌落大几倍到几十倍。

菌落的表面和培养基背面往往呈现不同的颜色。

霉菌菌落中，处于菌落中心的菌丝菌龄较大，位于边缘的则年幼。

三、实验器材曲霉（Aspergillus sp．）、青霉（Penicillium sp．）、根霉（Rhizopus sp．）和毛霉（Mucor sp．）的马铃薯培养基斜面乳酸石炭酸棉蓝染色液、20％甘油、马铃薯培养基、无菌吸管、显微镜、载玻片、盖玻片、U形棒、、滤纸、接种钩、酒精灯、、大头针、玻璃纸、镊子、刀片四、方法与步骤1、制作霉菌浸片观察于清洁载玻片上，滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，。

取生长好的霉菌平板，用两根大头针小心挑取含少量孢子的菌丝少许，并在乳酚棉蓝液上摊开，小心盖上盖玻片，注意不要产生气泡。

用低、高倍镜观察。

对于根霉和毛霉的培养物，可轻轻打开培养皿，将皿盖（有菌的一面朝上）置于显微镜低倍镜下直接观察，或将皿底（有菌的一面朝上）置于显微镜低倍镜下，观察皿边缘的菌丝。

2、载玻片观察法(1)将略小于培养皿底内径的滤纸放入皿内，再放上U形玻棒，其上放一洁净的载玻片，然后将二个盖玻片分别斜立在载玻片的两端，盖上皿盖，把数套（根据需要而定）如此装置的培养皿叠起，包扎好，灭菌后备用。

图14-1 载玻片培养示意图1 平皿2 U型玻璃棒3 载玻片4 培养物5 盖玻片6 滤纸(2)在上述载玻片的一边滴加融化的马铃薯培养基，点种孢子，并将盖玻片盖与其上，要求中央的培养基直径不大于0.5cm，盖、载玻片间距离不高于0.1mm。

实验八霉菌的形态观察一、实验原理霉菌的营养体是分枝的菌丝体。

霉菌在潮湿条件下生长繁殖长出丝状、绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。

菌丝分为营养菌丝与气生菌丝，营养菌丝匍匐于培养基的表面或生于培养基内吸收养料，从营养菌丝上长出伸于空中的菌丝为气生菌丝系，可分化出产生孢子的结构。

菌丝的直径一般比细菌和放线菌大得多。

菌丝在显微镜下观察呈管状，有的有横隔膜将菌丝分割为多个细胞，有的菌丝无横隔膜整个菌丝体为1个单细胞。

霉菌的菌落形态较大，质地较疏松，颜色各不相同。

霉菌无性繁殖或有性繁殖可形成不同类型的孢子。

菌丝、孢子及菌落等特征，因霉菌的种类而异，因而为种类鉴定非常重要的依据。

由于霉菌的菌丝体较粗，而且孢子容易飞散，若在水中溶易变形，显微测量时与实际值存在人为偏差，故观察时将其置于棉蓝乳酚油中，既有保持其正常的形态、使细胞不易干燥及杀菌防腐作用，还因棉蓝染料的存在而对菌丝与孢子具有染色作用，真菌的显微观察时常用棉蓝乳酚油作为浮载剂。

二、主要仪器及设备曲霉(Aspergillus sp．)，青霉(Penicillium sp．)，根霉(Rhizopus sp．)；棉蓝乳酸油染色液，载玻片，盖玻片，解剖针，滤纸，显微镜等。

三、操作步骤1、取95%酒精浸泡的载玻片1块，火焰烧去酒精；2、冷却后在载玻片中央滴棉蓝乳酚油1滴；3、以解剖针从霉菌菌落上挑少许菌丝体置于染液中；4、以解剖针使菌丝体在染液中充分展开；5、将1洁净的盖玻片盖于染液上，以滤纸吸去盖玻片边缘过剩的染液；6、显微镜下20X、40X物镜观察绘图。

四、注意事项1、菌丝体在浮载剂中必须充分展开；2、盖盖玻片时必须斜着缓慢放下，否则在盖上异形成气泡。

五、实验报告1、绘制有隔菌丝与无隔菌丝图2、绘制青霉菌及曲霉菌的分生孢子梗图。

3、霉菌显微观察制片与细菌有何不同？II 四大类细胞型微生物的菌落特征比较观察一、实验原理菌落形态是指某种微生物在一定的培养基上由单个菌体形成的群体形态。

微生物实验报告几种常见酵母菌、霉菌的形态结构观察姓名：学号：系别：班级：日期：同组成员：一、摘要通过对酵母菌、霉菌形态结构观察，了解酵母菌、霉菌形态结构的形态结构知识。

实验结果为：1、酵母菌一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬性。

菌落形态与细菌相似，但较大较厚，呈乳白色或红色，表面湿润、粘稠，易被挑起。

2二、实验目的1、学习酵母菌、霉菌形态结构。

2、学习酵母菌、霉菌观察方法。

3、了解酵母菌、霉菌在实际中的意义。

三、实验原理酵母菌：酵母菌多呈圆形、卵圆形，有的呈分支的菌丝状。

无性繁殖以出芽生殖为主，少数以分裂方式繁殖；有性生殖是通过不同遗传性的细胞接合产生子囊孢子的方式进行。

子囊孢子可用孔雀绿进行染色观察。

观察细胞形态和内部结构可采用染色的方法。

美蓝是无毒性的染料，新陈代谢旺盛的细胞具有较强的还原能力，使美蓝从蓝色的氧化型变成无色的还原型；而死亡细胞无此还原力，故被染成蓝色。

霉菌：霉菌可产生复合分枝的菌丝体，分基内菌丝、气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍/高倍显微镜即可观察。

四、实验材料与仪器1、菌种：产黄青霉、黑曲霉、黑根霉、总状毛霉、酿酒酵母、热带假丝酵母斜面菌种。

2、培养基：PDA培养基、0.05%美蓝染液、5%孔雀绿染液、半固体PDA培养基、乳酸苯酚固定液等。

3、仪器及用具：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、镊子、滴管、吸水纸等。

五、实验内容和步骤酵母菌形态观察1、酵母菌活体观察及死亡率的鉴定（1）取酿酒酵母PDA斜面，以无菌水洗下菌苔制成菌悬液。

（2）取洁净载玻片一张，滴加0.05%美蓝染液1滴于载玻片中央，用接种环取酵母菌悬液与染色液混匀，染色2-3min，加盖玻片，在高倍镜下观察酵母菌个体形态。

实验五霉菌的形态观察一、目的要求学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。

了解四类常见霉菌的基本形态特征。

二、基本原理霉菌具有分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。

直接制片观察法:将培养物置于乳酸石炭酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。

用此法制成的霉菌制片的特点是:细胞不变形;具有防腐作用，不易干燥，能保持较长时间;能防止孢子飞散;染液的蓝色能增强反差。

载玻片培养观察法:用无菌操作将淀粉琼脂培养基薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。

这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。

三、材料及器材1. 菌种：毛霉、根霉、青霉、曲霉的培养物。

2. 培养基：马铃薯琼脂或察氏琼脂培养基。

3. 溶液和试剂：乳酸石炭酸棉蓝染色液。

4. 仪器或其他用具：无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片，解剖针，镊子，50%乙醇，20%的甘油以及显微镜等。

四、实验方法1. 直接制片观察法在载玻片上加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，用解剖针从霉菌菌落边缘处挑取少量已产孢子的霉菌菌丝，先置于50%乙醇中浸一下以洗去脱落的孢子，再放在载玻片上的染液中，用解剖针小心地将菌丝分散开。

盖上盖玻片，置低倍镜下观察，必要时换高倍镜观察。

2. 载玻片培养观察法（1）琼脂块的制作。

取已灭菌的马铃薯琼脂培养基6mL～7mL注入另一灭菌平皿中，使之凝固成薄层。

用解剖刀切成0.5 cm2～1cm2的琼脂块，并将其移至培养室中的载玻片上。

（2）接种。

用尖细的接种针挑取很少量的孢子接种于琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。

接种量要少，尽可能将分散的孢子接种在琼脂块边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察。

（3）培养。

先在平皿的滤纸上加3mL～5mL灭菌的20%甘油，盖上皿盖，28℃培养。

实验2 霉菌的形态观察一、实验目的1. 学会对霉菌的制片方法。

2.了解和熟悉毛霉、根霉、曲霉、青霉的形态构造。

二、实验原理霉菌除少数为单细胞外，基本构造都是分枝或不分枝的菌丝。

菌丝体无色透明或呈暗褐色至黑色；或呈现鲜艳的颜色。

在固体培养基上长成绒毛状或棉絮状。

菌丝内部构造在显微镜下观察时皆呈管状。

低级的霉菌其丝状管道中无横隔，因此其菌丝体内含有许多细胞核。

而在一些比较高等的霉菌丝状管道中皆有横隔，由横隔将菌丝隔成许多细胞。

霉菌的繁殖方式很多，有各种各样无性及有性的繁殖方式，是分类时的重要依据，另外菌丝体与菌落形态的特征也是鉴别的依据。

霉菌菌丝和孢子通常比细菌和放线菌粗得多。

常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此用低倍镜即可观察。

观察霉菌形态有多种方法，常用的有以下三种：（1）直接制片观察法：是将培养物置于乳酸石炭酸溶液中，制成霉菌制片镜检。

用此溶液制成的霉菌制片的特点是：细胞不变形、具有防腐作用、不易干燥、能保持较长时间、能防止孢子分散等。

必要时，还可用树胶封固，制成永久标本长期保存。

（2）载玻片培养观察法（如下图）：用无菌操作将少量培养基琼脂置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片与盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。

培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。

这种方法可以保持霉菌的自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。

（3）玻璃纸培养观察法：霉菌与放线菌的玻璃纸培养观察方法相似。

该方法用于观察不同生长阶段的霉菌的形态，也可获得良好的效果。

三、实验试剂与仪器1. 菌种：毛霉、根霉、曲霉、青霉等。

2. 溶液或试剂：乳酸石炭酸液3. 仪器或其他用具：显微镜、擦镜纸、接种环、接种钩、载玻片、盖玻片等。

四、实验步骤霉菌形态的观察——直接制片观察法观察霉菌时，除直接观察斜面或平皿的菌落外，制取霉菌标本时，由于菌丝粗大而且孢子很容易分散，放在水中观察细胞容易变形，因此，在制作标本时不用水，而用乳酸石炭酸溶液。

霉菌的形态观察作者：喻曙光学号：班级：生院2010级生命基地生北周五第四组同组者：。

【实验目的】1、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法2、了解四类常见霉菌（曲霉、毛霉、青霉、根霉）的基本形态特征【实验原理】霉菌霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约 3～10μm ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。

观察方法观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。

载玻片培养观察法（小室培养法）用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。

培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。

这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。

【实验器材】1.菌种：曲霉 (Aspergillus sp.) ，青霉，根霉 (Rhizopus sp.) ，毛霉（Mucor sp.），培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物2.培养基：马铃薯培养基（简称PDA）（配方见附表）3.仪器或其他用具：平皿，载玻片，盖玻片，无菌吸管，U 型玻棒，解剖刀，镊子，50%乙醇，20%甘油，显微镜，接种环，酒精灯等【实验步骤】1.载玻片培养观察法（小室培养法）（1）.培养小室的灭菌：在平皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一Ｕ形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖，包扎后于110℃灭菌20～30分钟，烘干备用。

（2）.琼脂薄片的制作：取已灭菌的马铃薯琼脂培养基各6～7ml 注入另两个灭菌平皿中，使之凝固成薄层。

通过无菌操作，用解剖刀将其切成 1cm x 1cm的琼脂块，并将其移至上述培养室中的载玻片上（每片放两块 )。