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海藻中α-葡萄糖苷酶抑制剂的分离鉴定及其活性机理的研究以α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型为基础，以大型海藻为研究对象，旨在发现海藻中能够预防与治疗糖尿病以及抗艾滋病的活性物质。
在对青岛沿海海藻脂溶性提取物进行了普筛的基础上，以石莼为原料追踪并分离鉴定出了酶活性抑制剂SQ0；建立了快速准确测定海藻中SQG的方法，并测定了一些大型藻中SQG的含量及季节变化，为选择提取SQG的原料提供了依据；建立了大量制备SQG的方法，为深入研究SQG的活性机理和SQG进入动物试验阶段进行基础研究工作；研究并提出了SQG的酶抑制活性机理，为进行药理研究提供理论依据。
本文的工作由六部分组成，研究内容介绍如下：1、采用α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型对青岛沿海二十种海藻的脂溶性提取物进行了初步的活性筛选；初筛结果表明，海藻中普遍含有能够抑制α-葡萄糖苷酶活性的活性物质；2、对石莼中的活性组份进行了追踪并鉴定出了酶抑制活性物质1，2-二酚基-3-（6-脱氧-6-磺酸基-α-D-吡喃型葡萄糖苷基）-sn-甘油脂（SQG）。
3、建立了快速准确直接测定SQG含量的方法。
通过研究表明azure A比色法灵敏度高，检测限低（0.00442μmol），线性范围宽（0.00442-0.11488μmol），重现性好。
4、测定了二十二种海藻中SQG的含量以及部分海藻SQG含量的季节变化，发现石莼中SQG含量较高并且受季节影响少。
5、以石莼为原料建立了规模制备SQG的方法，为进一步研究SQG的生物活性奠定了基础。
6、通过对SQG的酶抑制活性研究，首次测得SQG的IC<sub>50</sub>为20μM。
不同SQG浓度下酶动力学研究结果表明SQG对α-葡萄糖苷酶的抑制属于非竞争性抑制，抑制常数K<sub>i</sub>为72.31μM;研究了SQG的构效关系并提出了SQG的酶抑制活性机理。
α-葡萄糖苷酶抑制剂体外筛选方法的研究朱文佳;寇自农;张曦;付绍平;朱靖博;萧伟【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2012(033)008【摘要】以对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷为底物,通过高效液相色谱定量分析水解产物对-硝基苯酚,确定α-葡萄糖苷酶的活性,建立新的α-葡萄糖苷酶抑制剂的体外筛选方法,为了提高筛选方法的灵敏度,对酶促反应条件进行了优化,并用阿卡波糖验证筛选方法的可靠性,结果测得阿卡波糖的IC50为2.07 mg/mL,与文献报道相近,说明该法可替代传统的Trembly法,并可用于α-葡萄糖苷酶抑制剂的高通量筛选.【总页数】5页(P171-175)【作者】朱文佳;寇自农;张曦;付绍平;朱靖博;萧伟【作者单位】大连工业大学食品学院,植物资源化学与应用研究所,辽宁大连116034;大连工业大学现代教育技术部,辽宁大连116034;大连工业大学食品学院,植物资源化学与应用研究所,辽宁大连116034;大连工业大学食品学院,植物资源化学与应用研究所,辽宁大连116034;大连工业大学食品学院,植物资源化学与应用研究所,辽宁大连116034;中药制药过程新技术国家重点实验室(筹),江苏连云港222001;中药制药过程新技术国家重点实验室(筹),江苏连云港222001;江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港222001【正文语种】中文【相关文献】1.基于谱效关系的α-糖苷酶抑制剂筛选方法研究 [J], 王利强;常春艳;娄婷婷;葛含光;王永芳;葛宝坤2.α-葡萄糖苷酶抑制剂和葡萄糖苷酶的作用机制研究 [J], 王文;王金虎;张小康;赵祥妤3.α-葡萄糖苷酶抑制剂的研究进展及食品源抑制剂的开发前景 [J], 聂莹;陈俊帆;苏东海;韭泽悟;李志姣;程永强4.天然来源α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选方法的研究进展 [J], 范莉;王业玲;唐丽5.α-葡萄糖苷酶抑制剂体外筛选反应体系的构建及其对乌龙茶的筛选 [J], 安品弟;褚克丹;马玉仙;蒋慧颖;陈静;杨江帆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
曹英，侯敏，易光平，等. 驼乳制品中抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性乳酸菌的筛选及益生特性研究[J]. 食品工业科技，2022，43（19）：191−201. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022020053CAO Ying, HOU Min, YI Guangping, et al. Screening and Probiotic Properties of Lactic Acid Bacteria Inhibiting α-Amylase and α-Glucosidase Activities in Camel Dairy Products[J]. Science and Technology of Food Industry, 2022, 43(19): 191−201. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022020053· 生物工程 ·驼乳制品中抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性乳酸菌的筛选及益生特性研究曹 英1，侯 敏2, *，易光平3，买尔哈巴·艾合买提2，薛 杉1，陈钢粮4，崔卫东2,*（1.新疆大学生命科学与技术学院，新疆乌鲁木齐 830052；2.新疆农业科学院微生物应用研究所/新疆特殊环境微生物实验室，新疆乌鲁木齐 830091；3.新疆阿勒泰蝗虫鼠害预测预报防治中心，新疆阿勒泰 836500；4.新疆旺源生物科技集团有限公司，新疆福海 836400）摘 要：目的：本研究以新疆阿勒泰地区的驼乳制品为研究对象，筛选对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶有抑制活性的优良乳酸菌。
方法：采用稀释涂布法分离纯化菌株，DNS 和pNPG 法筛选对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶有抑制活性的菌株，通过耐酸性、耐胆盐、模拟胃肠道环境耐受性、抑菌性、抗氧化活性实验评价菌株的益生特性。
三、α-葡萄糖苷酶抑制药目前临床上应用的α-葡萄糖苷酶抑制剂主要有阿卡波糖、伏格列波糖（倍欣）及米格列醇，目前国内仅有前两者，可使HbAlc下降0.5%～0.8%。
1．α-葡萄糖苷酶抑制药的作用机制α-葡萄糖苷酶抑制药的结构与寡糖非常相似，在肠道能竞争性抑制小肠黏膜刷状缘上的α-葡萄糖苷酶的活性，减缓对葡萄糖的吸收而降低餐后高血糖，也可避免餐后高胰岛素血症。
并能竞争性地与α-葡萄糖苷酶受体结合，且结合后不会被α-葡萄糖苷酶分解。
该药不会影响钠离子依赖性葡萄糖转运，故不影响口服葡萄糖的吸收，该药本身不促使胰岛素分泌，因此单药应用不会造成低血糖。
α-葡萄糖苷酶抑制剂通过降低小肠上段碳水化合物的吸收而利用整个肠道完成碳水化合物的吸收过程，减慢了葡萄糖的吸收速度。
2．α-葡萄糖苷酶抑制药的作用特点（1）阿卡波糖约有1%~2%被肠道吸收，生物利用度为0.52%~1.58%，在肠道经消化酶和肠道细菌分解的降解产物被吸收，约有35%经尿排出，51%在96 h内经粪便排出。
口服后半衰期3.7 h。
（2）伏格列波糖口服后约有2.7%~5.9%被肠道吸收。
（3）米格列醇口服后约有59%±15.7%经肾排出，其中95%以上24 h内排于尿中。
粪便中排出29%±9.1%，是不被吸收的药物。
3．α-葡萄糖苷酶抑制药的适应证①主要适用于以餐后血糖升高为主的2型糖尿病患者，尤其是肥胖及老年糖尿病患者。
②可由于其独特的作用机制，临床上常与磺脲类、双胍类或胰岛素联合应用。
③糖耐量减低者应用可减少2型糖尿病的发生。
4．α-葡萄糖苷酶抑制药的禁忌证①严重肾功能不全者，肌酐清除率低于25 ml/min。
②有严重的肠道疾病，如严重的腹壁疝、肠梗阻、肠溃疡等，以及明显的消化和吸收障碍的慢性胃肠功能紊乱者。
③糖尿病酮症酸中毒者。
④18岁以下者。
⑤孕妇及哺乳期妇女。
5．不良反应①消化道反应。
腹胀、腹泻、胃肠平滑肌痉挛、顽固性便秘、肠鸣音亢进、排气增多等。
中药中a-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选及其抑制动力学研究的开题报告一、选题背景和意义a-葡萄糖苷酶（α-glucosidase）是在消化系统中参与糖类分解与吸收的一种重要酶类，在人体内发挥着重要的作用。
过量的α-葡萄糖苷酶活性会导致血糖升高，出现糖尿病等代谢性疾病。
因此，寻找植物中的a-葡萄糖苷酶抑制剂，能有效抑制糖类的吸收，降低人体血糖含量，对预防和治疗糖尿病等相关疾病具有潜在的治疗价值。
中药中的化学成分种类多样，其中一部分化合物被发现有能够抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用。
为了寻找中草药中的a-葡萄糖苷酶抑制剂，本研究将从中草药中筛选可能具有抑制α-葡萄糖苷酶活性化合物，探讨其抑制动力学，为中草药的开发利用提供理论依据。
二、研究内容和方法本研究将从中草药中筛选可能具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的化合物，利用体外酶活测定方法对其抑制活性进行评价。
抑制活性强的化合物将进行进一步的抑制动力学研究，包括计算抑制常数（Ki）、测定酶活性对抑制剂浓度的响应曲线和半最大抑制浓度（IC50）等实验。
研究方法如下：1. 筛选活性化合物：选用常见的中草药材，按照常规提取方法制备中药提取物，利用体外酶活测定方法对其抑制α-葡萄糖苷酶的活性进行筛选。
2. 抑制动力学研究：确定活性化合物的IC50值，测定其对酶活性的影响曲线，计算Ki值，探讨其抑制动力学特性。
三、预期结果本研究预计通过对中药提取物进行筛选，得到数种具有较强抑制α-葡萄糖苷酶活性的化合物。
通过实验确定这些化合物的抑制动力学特性，包括IC50、Ki等参数，为进一步开发和利用这些化合物提供理论依据。
同时，本研究将从中草药提取物中筛选出具有降低血糖作用的化合物，为糖尿病等代谢性疾病的治疗提供科学依据。
四、研究进度安排第一年：1. 确定实验方案，搜集相关文献，制定实验计划；2. 提取中药提取物，进行a-葡萄糖苷酶体外酶活测定，并初步筛选出具有抑制a-葡萄糖苷酶活性的化合物；3. 将抑制活性较强的化合物选择出来，并进行抑制动力学研究。
肉桂抑制α-葡萄糖苷酶活性成分研究许芹永;朱靖博;王振中;肖伟【摘要】为寻找肉桂中具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的化学成分,采用高效液相色谱结合体外抑制α-葡萄糖苷酶活性筛选模型的方法,进行活性成分的跟踪分离,并对活性化合物进行酶抑制动力学研究.结果显示,肉桂石油醚提取物(IC50=350.37μg/mL)的活性明显高于阳性对照阿卡波糖(IC50=1028.99 μg/mL),从中分离出2个活性成分,分别鉴定为桂皮醛( IC50 =277.89 μg/mL)和肉桂酸(IC50=286.22 μg/mL).酶抑制动力学结果表明它们对α-葡萄糖苷酶的抑制类型均为非竞争性抑制,Ki值分别为178.07 μg/mL和229.43 μg/mL.%To search a-glucosidase inhibitors from Cortex Cinnamomi. The α-glucosidase inhibitor was isolated and purified by the bioactivity-guided method in vitro,combined with HPLC method which was used to analysis the inhibitory activity against a-glucosidase. The inhibitory kinetic of the isolations was also investigated. The petroleum ether extract of Cortex Cinnamomi showed strong inhibitory activity (IC50 =350. 37 μg/mL) .which was highe r than that of acarbose ( IC50 = 1028.99 μg/mL) ,and two active compounds were isolated and identified as trans-cinnamaldehyde ( IC50 = 277. 89 μg/mL) and cinnamic acid (IC50 =286.22 μg/mL). Both of them showed noneompetitive type on a-glucosidase with Ki value of 178.07 μg/mL and 229.43 μg/mL,respectively.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2012(024)009【总页数】4页(P1246-1249)【关键词】肉桂;α-葡萄糖苷酶;高效液相色谱;抑制剂;抑制类型【作者】许芹永;朱靖博;王振中;肖伟【作者单位】大连工业大学食品学院;大连工业大学食品学院;大连工业大学植物资源化学与应用研究所,大连116034;江苏康缘药业股份有限公司,连云港222001;江苏康缘药业股份有限公司,连云港222001【正文语种】中文【中图分类】R932肉桂为樟科植物肉桂(Cinnamomum cassia Presl)的干燥树皮，其性味辛、甘、大热，具有补火助阳，引火归源，散寒止痛，活血通经之功效［1］。
知母中α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取分离及鉴定
蓝萍;叶小利;李学刚;王亮;黄文文;柳明
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2010(032)011
【摘要】目的:筛选知母中降血糖的活性成分.方法:以α-葡萄糖苷酶为靶标,采用大孔吸附树脂色谱法和苇结晶等操作对知母的醇提物进行分离纯化.筛选知母中α-葡萄糖苷酶抑制剂.结果:知母30%醇洗脱物对α-葡萄糖苷酶抑制活性最强,对其进一步分离纯化,分离出知母中降血糖活性单体,经1H-NMR等结构鉴定为芒果苷.结论:芒果苷为知母中抑制α-葡萄糖苷酶的主要活性成分.
【总页数】4页(P1945-1948)
【作者】蓝萍;叶小利;李学刚;王亮;黄文文;柳明
【作者单位】西南大学药学院药用资源研究所,重庆400716
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.桑叶中α-葡萄糖苷酶抑制剂产生菌的分离鉴定及诱变选育 [J], 朱孟峰;许伟;邵荣;韦萍
2.产α-葡萄糖苷酶抑制剂的桑树内生细菌分离及鉴定 [J], 武婷婷;刘万振;生吉萍;王正荣;申琳
3.纸色谱法筛选知母中α-葡萄糖苷酶抑制剂 [J], 陈丽华;潘自红;曹云丽;马庆一
4.知母中α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取及性质研究 [J], 杨秀芳;陈梅;闫倩茹
5.藏药材诃子中3种α-葡萄糖苷酶抑制剂的分离与鉴定 [J], 马家麟;陈涛;谭亮;王环;李玉林
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口服降糖药α-葡萄糖苷酶抑制剂（AGI）比较总结（阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇）一、AGI家族成员二、AGI作用机制比较三、AGI抑酶谱差异比较四、AGI药动学参数差异比较五、AGI用法用量区别比较六、AGI降糖差异比较七、患者用药注意事项八、AGI常见不良反应比较九、AGI特殊注意事项比较α-葡萄糖苷酶抑制剂（AGI）是一种临床常用的口服降糖药，但它到底是一种怎样作用的降糖药物，不同的AGI之间又有怎样的区别呢？今天我们一起来了解一下。
一、AGI家族成员常见的AGI包括阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇。
认识他们从化学结构开始：表1 阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇三药比较图1 三药结构比较二、AGI作用机制比较糖类是人体最主要的供能物质。
食物中的糖包括多糖（淀粉）、双糖（包括麦芽糖、蔗糖等）、单糖（包括葡萄糖、果糖以及半乳糖）。
除单糖可以直接由小肠上皮细胞吸收入血外，其余均需经α-葡萄糖苷酶水解转化成单糖才能利用，也就是说如果抑制了α-葡萄糖苷酶活性就可以减少糖的吸收。
α-葡萄糖苷酶抑制剂的结构类似这些寡糖，能在寡糖与α-葡萄糖苷酶的结合位点与后者结合，可逆性抑制或竞争性抑制α-葡萄糖苷酶，减少寡糖分解为单糖，从而延缓肠道对单糖，特别是葡萄糖的吸收，使餐后血糖峰值渐变低平、波动减小，糖化血红蛋白（HbA1c）明显降低。
如阿卡波糖，它是一种生物合成的假性四糖，其化学结构类似于四个葡萄糖结合成寡糖。
用药教育：阿卡波糖等和碳水化合物（糖）化学结构相似，它会冒充碳水化合物，与肠道上水解碳水化合物的酶——α-葡萄糖苷酶结合，使真正的碳水化合物无法被水解，从而降低餐后血糖。
阿卡波糖等应在用餐前即刻整片吞服或与前几口食物一起咀嚼服用。
如果饭后服用，α-葡萄糖苷酶已经与碳水化合物结合，或碳水化合物已被α-葡萄糖苷酶水解，阿卡波糖等将无法发挥降糖作用。
注意：α-葡萄糖苷酶是麦芽糖酶、异麦芽糖酶、α-临界糊精酶、蔗糖酶和乳糖酶等组成的一类酶的总称。
应用α-葡萄糖苷酶抑制剂高通量筛选模型筛选降血糖中药张冉;刘泉;申竹芳;杜冠华【期刊名称】《中国医疗前沿》【年(卷),期】2007(000)010【摘要】目的建立筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂的体外高通量筛选模型,并对30味常用清热解表中药进行筛选.方法应用大鼠小肠上段提取的α-葡萄糖苷酶,以蔗糖作为底物,通过测定反应体系中葡萄糖的生成量来检测α-葡萄糖苷酶的活性.通过优化酶促反应条件,建立检测α-葡萄糖苷酶活性的比色测定法及其抑制剂体外筛选的方法,并对30味中药共72个样品进行高通量筛选.结果阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性与文献报道相近;筛选发现鸭跖草、山慈菇和桑叶等3味中药的不同极性提取物对α-葡萄糖苷酶有可重复的抑制作用.结论应用比色法建立的筛选模型可进行α-葡萄糖苷酶抑制剂的高通量筛选及中药相关活性物质的发现.【总页数】4页(P740-743)【作者】张冉;刘泉;申竹芳;杜冠华【作者单位】中国医学科学院-中国协和医科大学药物研究所国家药物筛选中心,国家教育部天然产物药物重点实验室,北京,100050;中国医学科学院-中国协和医科大学药物研究所国家药物筛选中心,国家教育部天然产物药物重点实验室,北京,100050;中国医学科学院-中国协和医科大学药物研究所国家药物筛选中心,国家教育部天然产物药物重点实验室,北京,100050;中国医学科学院-中国协和医科大学药物研究所国家药物筛选中心,国家教育部天然产物药物重点实验室,北京,100050【正文语种】中文【中图分类】R965【相关文献】1.α-葡萄糖苷酶抑制剂微量筛选模型的正交法构建和筛选 [J], 杨付梅;孙黔云2.用固定化酶筛选模型从天然产物中筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂 [J], 卢大胜;吕敬慈;雍克岚;陈旭;冯偲慜;顾慧娟3.微生物来源的α-葡萄糖苷酶抑制剂高通量筛选模型的建立和初步应用 [J], 于彩云;赵莉莉;张晶晶;魏涛4.中药α-葡萄糖苷酶抑制剂降糖作用活性成分及其筛选模型的研究新进展 [J], 邹毅5.中药α-葡萄糖苷酶抑制剂降糖作用活性成分及其筛选模型的研究新进展 [J], 邹毅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
164微量α﹣葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型及抑制类型的判断方法朱娟娟，尹忠平，陈继光，上官新晨，彭大勇，蒋艳（江西农业大学食品科学与工程学院，天然产物与功能食品重点实验室，江西南昌 330045）摘要：α-葡萄糖苷酶抑制剂能抑制碳水化合物水解，是高血糖人群降低餐后血糖的常用物质。
本文基于α-葡萄糖苷酶-PNPG 体外反应体系，建立了微量、快速的α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型，该模型的主要参数如下：酶浓度为0.05 U/mL ；底物浓度范围为0.05~1 mM ；反应温度为37 ℃；反应时间为6 min 。
以该模型检测了阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，并采用Lineweaver-Burk Plots 、Eadie-Hofstee Plots 、Hanes-Wolff Plots 、Eisenthal-Cornish-Bowden Direct Plots 、Non-linear Regression Analysis 五种方法对该酶促反应的动力学数据进行了详细的分析。
通过对数据处理的过程和结果的比较发现，该五种方法各有特点，各法所获得的V max 、K m 和K i 存在一定的差异，Non-linear-Regression Analysis 法更加简便、合理及可靠，是酶动力学数据处理的首选方法。
采用Non-linear-Regression Analysis 法计算，该模型中酶促反应的V max 为3.91×10-6 mmol/min ，K m 为0.12 mM ，阿卡波糖的K i 为90 μM 。
关键词：α-葡萄糖苷酶抑制剂；模型；动力学文章篇号：1673-9078(2016)12-164-170 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.12.026A Model for Screening Trace Amounts of α-Glucosidase Inhibitors andMethods for Judging Inhibition TypeZHU Juan-juan, YIN Zhong-ping, CHEN Ji-guang, SHANG GUAN Xin-chen, PENG Da-yong, JIANG Y an (Jiangxi Key Laboratory of Natural Product and Functional Food, College of Food Science and Engineering, JiangxiAgricultural University, Nanchang, 330045, China)Abstract: Alpha-glucosidase inhibitors can inhibit carbohydrate hydrolysis and are commonly used to decrease postprandial bloodglucose in individuals with hyperglycemia. A model for the rapid screening of trace amounts of alpha-glucosidase inhibitors was established based on the alpha-glucosidase-pNPG in vitro reaction system. The optimized parameters of this model were as follows: the enzyme concentration, substrate concentration, reaction temperature, and reaction time were 0.05 U/mL, 0.05~1 mM, 37 ℃, and 6 min, respectively. The inhibitory effect of acarbose was determined using this model, and the enzymatic reaction kinetics data were analyzed using five methods (Lineweaver-Burk plots, Eadie-Hofstee plots, Hanes-Wolff plots, Eisenthal-Cornish-Bowden direct plots, and Non-linear regression analysis). Data processing and comparison of results showed that these five methods had distinct characteristics as the K i , K m , and V max calculated by these five methods differed slightly. Non-linear Regression Analysis was more convenient, reasonable, and reliable, and therefore was the first choice for processing the data of enzyme kinetics. By this model, the V max (×10-6 mmol/min) and K m (mM) of enzymatic reaction were calculated to be 3.91 and 0.12, respectively and the K i (μM) of acarbose was 90.Key words: alpha-glucosidase inhibitor; model; kinetics据国际糖尿病联盟（IDF ）统计，2013年全世界糖尿病患者约3.82亿[1]。
我国约有5000万糖尿病患者，收稿日期：2015-12-24基金项目：国家自然科学基金资助项目（31460436，31260368）；江西省自然科学基金项目（20132BAB204004）作者简介：朱娟娟（1989-），女，硕士研究生，研究方向：天然产物与功能性食品通讯作者：尹忠平（1971-），男，博士，副教授，研究方向：天然产物与功能性食品居世界第二位[2]。
研究表明，高血糖是糖尿病的主要特征，也是导致糖尿病并发症的重要原因[2]。
糖耐量受损（IGT ）主要表现为餐后血糖升高，因此控制患者餐后血糖水平非常重要。
根据IDF 《Ⅱ型糖尿病全球指南》和《中国Ⅱ型糖尿病防治指南》，服用α-糖苷酶抑制剂是Ⅱ型糖尿病治疗的首选方法之一[3,4]。
膳食中碳水化合物的消化吸收是影响餐后血糖的关键因素，为了防止餐后高血糖，患者必须控制日常饮食中碳水化合物的摄入量，严重影响了患者的生活质量。
165为了控制好餐后血糖但又不太影响一日三餐，以碳水化合物为主要食物成分、餐后血糖受损的人群通常需要服用α-葡萄糖苷酶抑制剂。
因此，筛选新型、高活性α-葡萄糖苷酶抑制剂成为了研究的热点。
准确及快速筛选的前提是建立稳定高效的筛选模型，因而建立微量及快速的α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型具有重要的意义。
为了揭示酶抑制反应动力学机制，研究者建立了Lineweaver-Burk Plots （双倒数作图法）、Eadie-Hofstee Plots 、Hanes-Wolff Plots 、Eisenthal-Cornish-Bowden Direct Plots 和Non-linear Regression Analysis 等多种数据分析方法，其中最为常用的是双倒数作图法。
徐俊等[5]的研究表明，利用双倒数作图法判断酶反应抑制类型时须使反应处于非零级状态。
当底物浓度过高时，酶促反应为零级反应，反应速度将不随底物浓度改变而改变，此时不适用于双倒数作图分析。
本实验室研究发现，当底物浓度相对较低时，反应为非零级，但反应速度会在较短的时间内显著降低。
因此，双倒数作图法具有一定的局限性。
本文基于α-葡萄糖苷酶-PNPG 体外反应体系，建立了微量及快速的α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型，以此模型检测了阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用，并采用上述五种数据处理方法，对该酶抑制试验数据进行了详细地分析，比较了各方法的优缺点，可为酶抑制反应动力学数据分析和抑制类型判断提供参考和依据。
1 材料与方法 1.1 主要试剂α-葡萄糖苷酶（α-glucosidase ，EC 3.2.1.20）、4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（4-nitrophenyl-α-D- glucopyranoside ，PNPG ，026K1516），购自美国Sigma 公司；阿卡波糖，购自广州市亿邦医药科技公司；对硝基苯酚（PNP ）、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、β-巯基乙醇和甘油均为国产分析纯。
1.2 主要仪器设备酶标仪，SpectraMax M2，Molecular Devices 。
1.3 试验方法1.3.1 主要反应试剂的制备PB （磷酸缓冲液）：称取KH 2PO 4 4.559 g ，K 2HPO 4⋅3H 2O 7.646 g ，以去离子水定容稀释至500 mL ，调节pH 至6.8，再以0.22 μm 水系滤膜过滤，121 ℃灭菌20 min ，4 ℃贮存备用。
α-葡萄糖苷酶：将α-葡萄糖苷酶冻干粉溶于含50%甘油的PB （0.1 mM ，pH 6.8），配制成100 U/mL 的酶溶液，分装，-20 ℃冻存备用。
PNPG 、PNP 、阿卡波糖和β-巯基乙醇均以0.1 mM pH 6.8的PB 配制。
1.3.2 PNP 测定标准曲线的绘制以0.1 mM 、pH 6.8 PB 配制PNP 标准溶液，取不同体积加入96孔板中，同时每孔加入1.4 M 的β-巯基乙醇1.5 μL ，再以pH 6.8 PB 补足至200 μL ，得0、0.01、0.02、0.04、0.08、0.1、0.2、0.4、0.8、1、2、4、8、16、32和64（×10-6 mmol/L ）系列标准浓度，每一浓度设置3个平行，于λ=405 nm 下测定吸光度值。
以PNP 物质的量n （×10-6 mmol ）为纵坐标，OD 值A 为横坐标，绘制测定标准曲线。
测定回归方程为：Y=37.209X （R 2=0.9998）式中：X 为吸光度值，Y 为PNP 的物质的量。
1.3.3 微量α-葡萄糖苷酶体外反应模型的建立参考Luo 等[6]、Gao 等[7]和Y e 等[8]的方法，加以改进，建立基于96微孔板的微量、快速反应模型（α-葡萄糖苷酶-PNPG 反应体系）。
