补气类中药对大鼠胃溃疡EGFR、bFGFR蛋白表达的影响

・１０９６・　ＣＨＩＮＥＳＥ　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＩＮＴＥＧＲＡＴＩＶＥ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＯＮ　ＣＡＲＤＩＯ一／ＣＥＲＥＢＲＯＶＡＳＣＵＩ　ＡＲ　ＤＩＳＥＡＳＥ　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ　２０ｌ３　Ｖｏ１．１　１　Ｎｏ　９　

中免疫相关细胞的黏附，从而延缓ＡＳ的进展。　参考文献：　［１］张剑峰，张丹参．三七总皂苷药理作用研究进展［Ｊ］．医学综述，　２００７，１３（６）：４７２—４７４．　［２］刘桂林，窦迎春，刘粉叶，等．三七总皂苷对ｏｘＬＤＬ诱导的人脐静　脉内皮细胞ＣＤ４０，ＶＣＡＭ一１表达的影响［Ｊ］．山东大学学报（医学　版），２ｏ１ｏ，４８（１ｏ）：１４—１９．　［３］Ｌｉｖａｋ　ＫＪ，Ｓｃｈｍｉｔｔｑｅｎ　ＴＤ．Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｄａｔａ　ｕｓｉｎｇ　ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ＰＣＲ　ａｎｄ　ｔｈｅ　２一Ｄｅｌｔａ　Ｄｅｌｔａ　Ｃ（Ｔ）　Ｍｅｔｈｏｄ［Ｊ］．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００１，２５（４）：４０２—４０８．　［４］Ｌｕｓｉｓ　ＡＪ．Ａｔｈｅｒｏｓｃ１ｅｒ０ｓｉｓ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２０００，４０７（２）：２３３—２４１．　Ｆｓ］Ｒｕａｎ　ＸＺ，Ｍｏｏｒｈｅａｄ　ＪＦ，Ｔａｏ　ＪＬ，ｅｔ　ａ１．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　ｄｙｓｒｅｇｕｌａ—　ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｏｗ—ｄｅｎｓｉｔｙ　ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｖａｓｃｕｌａｒ　ｓｍｏｏｔｈ　ｍｕｓｃｌｅ　ｃｅｌｌｓ　ｂｙ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ　ＥＪ］．Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ　Ｔｈｒｏｍｂ　Ｖａｓｃ　Ｂｉｏｌ，２００６，２６：１１５Ｏ一１１５５．　［６］Ｌｉｕ　ＳＸ，Ｈｏｕ　ＦＦ，Ｇｕｏ　ＺＪ，ｅｔ　ａ１．Ａｄｖａｎｃｅｄ　ｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｐｒｏｄ　ｕｃｔｓ　ａｃｃｅｌｅｒａｔｅ　ａｔｈｅｒ０ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｓｔｒｅｓｓ　ａｎｄ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ　ｒＪ１．Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ　Ｔｈｒｏｍｂ　Ｖａｓｃ　Ｂｉｏｌ，２００６，２６：　１１５６—１１６２．　［７］　Ｓｈｅｎ　ＬＨ，Ｚｈｏｕ　Ｌ，Ｗａｎｇ　ＢＹ，ｅｔ　ａ１．０ｘｉｄｉｚｅｄ　ｌｏｗ—ｄｅｎｓｉｔｙ　ｌｉｐｏｐｒｏ—　ｔｅｉｎ　ｉｎｄｕｃｅｓ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＲＡＷ２６４．７　ｍｕｒｉｎｅ　ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ　ｉｎｔｏ　ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ—ｌｉｋｅ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２００８，１９９：２５７—　２６４．　［８］Ｈａｄｉ　ＨＡ，Ｃａｒｒ　ＣＳ，Ａｌｓｕｗａｉｄｉ　Ｊ．Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ：Ｃａｒｄｉｏ—　ｖａｓｃｕｌａｒ　ｒｉｓｋ　ｆａｃｔｏｒｓ，ｔｈｅｒａｐｙ，ａｎｄ　ｏｕｔｃｏｍｅ［Ｊ］．Ｖａｓｃ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｒｉｓｋ　Ｍａｎａｇ，２００５，１：１８３—１９８．　［９］Ｒｅｉｎｄｅｒｓ　ＭＥ，Ｓｈｏ　Ｍ，Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ　ＳＷ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｏａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＣＤ４０　ｌｉｇａｎｄ—ＣＤ４０　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｉｍｎｍｎｏｌ，２００３，１７１：１５３４—　１５４１．　［１Ｏ３饶丹，姜红，曾秋棠．黏附分子细胞间黏附分子一１／Ｅ选择索与冠　心病［Ｊ］．心血管病学进展，２００５，２６（３）：２７８—２８１．　［１１］　Ｓｉｎｇｈ　ＲＪ，Ｍａｓｏｎ　ＪＣ，Ｌｉｄｉｎｇｔｏｎ　ＥＡ，ｅｔ　ａ１．Ｃｙｔｏｋｉｎｅ　ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ　ｖａｓｃｕｌａｒ　ｃｅｌｌ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌｅ—ｌ（ＶＣＡＭ一１）ｅｃｔｏｄｏｍａｉｎ　ｒｅ—　ｌｅａｓｅ　ｉｓ　ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｂｙ　ＴＭＰ一３［Ｊ］．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ　Ｒｅｓ，２００５，６７（１）：　３９—４９．　［１２］　

［１３］　

［１４］　Ｂｌａｎｋｅｎｂｅｒｇ　Ｓ，Ｒｕｐｐｒｅｃｈｔ　ＨＪ，Ｂｉｃｋｅｌ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ｃｅｌｌ　ａｄ—　ｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　ａｎｄ　ｄｅａｔｈ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｒｔｅｒｙ　ｄｉｓ　ｅａｓｅ［Ｊ］．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００ｌ，１Ｏ４：１３３６—１３４２．　Ｄａｎｓｋｙ　ＨＭ．Ｂａｒｌｏｗ　ＣＢ，Ｌｏｍｉｎｓｋａ　Ｃ．ｅｔ　ａ１．Ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｏｆ　ｎｌｏｎｏ　ｃｙｔｅｓ　ｔｏ　ａｒｔｅｒｉａｌ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ　ａｎｄ　ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｔｈｅｒ０ｓｃＩｅｒｏｓｉｓ　ａｒｅ　ｃｒｉｔｉｃａｌｌｙ　ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｏｎ　ｖａｓｃｕｌａｒ　ｃｅｌｌ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌｅ一１　ｇｅｎｅ　ｄｏｓａｇｅ［Ｊ］．ＡｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒＴｈｒｏｍｂＶａｓｃ　Ｂｉｏｌ，２００１，２１：ｌ６６２—１６６７．　Ｂａｒｒｉｎｇｈａｕｓ　ＫＧ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓ　ＪＷ，Ｔｈａｔｔｅ　ＪＳ，ｅｔ　ａ１．Ａｌｐｈａ４　ｂｅｔａ１　ｉｎｔｅ　ｇｒｉｎ（ＶＬＡ一４）ｂｌｏｃｋａｄｅ　ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ　ｂｏｔｈ　ｅａｒｌｙ　ａｎｄ　ｌａｔｅ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｎｅｏｉｎｔｉｍａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ｃａｒｏｔｉｄ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ　Ｅ一／一ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｊ　Ｖａｓｃ　Ｒｅｓ，２００４，４１：２５２　２６０．　作者简介：刘桂林，女，主治医师，讲师，医学博士．现工作于山东中医药　大学第－－－Ｊｌ￣床学院（邮编：２５０００１）；窦迎春，工作于山东中医药大学基础　医学院；乔云，工作于山东大学齐鲁医院。　（收稿日期：２ｏ１３—０ｌ一１８）　（本文编辑王雅洁）　

补气类中药对大鼠胃溃疡　

ＥＧＦＲ、ｂＦＧＦＲ蛋白表达的影响　

李廷荃，化金凤，索炜，贾力莉　

摘要：目的　观察补气类中药对大鼠胃溃疡表皮生长因子（ＥＧＦＲ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦＲ）蛋白表达的影响。方法　大鼠分为正常组、模型组、人参组、太子参组、洛赛克组，每组１２只。制作大鼠胃溃疡模型２４　ｈ后给药，药物干预后１４　ｄ、２１　ｄ，取　胃组织观察溃疡发生情况，ＨＥ染色观测病理组织，免疫组化法检测胃黏膜ＥＧＦＲ、ｂＦＧＦＲ蛋白的表达。结果　术后１４　ｄ，人参组、　太子参组ＥＧＦＲ表达比例明显高于模型组（Ｐ＜Ｏ．０５），术后２１　ｄ人参组、太子参组ｂＦＧＦＲ表达为１４　ｄ比较明显升高（Ｐ＜０．０５）。　洛赛克组各时点ＥＧＦＲ和ｂＦＧＦＲ表达不显著，明显低于中药组。结论　人参组、太子参能促进大鼠胃溃疡愈合，早期促进ＥＧＦＲ　表达，溃疡愈合后期ｂＦＧＦＲ表达亦增加。　关键词：胃溃疡；补气类中药；表皮生长因子；碱性成纤维细胞生长因子；蛋白表达　

中圈分类号：　８５．５文献标识码：Ａ　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２—１３４９．２０１３．０９．０３９文章编号：１６７２—１３４９（２０１３）０９—１０９６—０２　

消化性溃疡是临床常见病、多发病，具有慢性、反复发作的　特点，溃疡的复发与溃疡愈合质量有关，溃疡愈合质量又与溃疡　

边缘表皮生长因子（ＥＧＦＲ）和碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦ—　

ＧＦ）及其受体表达有关＿１］。中医认为补气类中药能托疮生肌，　

鼓舞气血生长，常用于溃疡久溃不敛，具有生肌长肉，促进组织　

修复的作用，与ＥＧＦＲ、ｂＦＧＦ在溃疡愈合过程中的作用相似。　

本研究观察人参、太子参对大鼠胃溃疡愈合过程中ＥＧＦＲ、ｂＦ—　

ＧＦＲ表达的影响。　１材料与方法　

１．１材料　

１．１．１动物　ＳＤ大鼠适应性饲养１周后随机分为５组，即正　

常组、模型组、人参组、太子参组、洛赛克组，每组１２只。　

１．１．２药物灌胃药物均采用山西省中医院中药房免煎剂。　

江阴天江药业有限公司生产。　

１）为山西省自然科学基金（Ｎｏ．２０１００１１０４８—３）　１．１．３　主要试剂　ＥＧＦＲ、ｂＦＧＦＲ免疫组化试剂盒，武汉博士　

德生物工程有限公司生产。　１．２造模与药物干预大鼠适应性饲养１周后随机分为５组，　除正常组外，其余各组采用Ｏｋａｂｅ乙酸涂抹法制作大鼠胃溃疡　

模型　］。术后当日给大鼠自由饮水，次日开始自由饮食。在造　

模结束后２４　ｈ，人参组、太子参组均以５　ｇ／ｋｇ给药，洛赛克组２Ｏ　

ｍｇ／ｋｇ给药，模型组、正常组灌服生理盐水。各组给药量为１Ｏ　

ｍｌ／ｋｇ，每日１次。　

１．３检测项目与方法　

ｌ＿３．１取材　以上动物在药物干预后１４　ｄ、２ｌ　ｄ，从各组ｌ｝ｊ随　机取出６只，以３　的戊巴比妥钠麻醉后（之前大鼠禁食２４　ｈ），　

剖腹取胃，沿胃大弯剪开，以生理盐水洗净后，放置在冰袋　的　

器皿中。留取距溃疡边缘（２～３）ｍｌＴｌ胃组织，沿经溃疡中心最　长轴中点纵切；

若无溃疡，则在相同部位，即胃小弯角切迹下方　中西医结合心脑血管病杂志２０１３年９月第１１卷第９期　

约５　ｍｍ处切取１　ｃｍ×１　ｃｍ大小的胃组织。迅速浸入４　多聚　

甲醛中固定。进行常规石蜡包埋，用ＡＩＷＡ切片机切取４　ｍ　

切片，用于免疫组化、病理组织学检查。　

ｌ＿３．２　观察溃疡发生情况ＨＥ染色观测病理组织，免疫组化　

法检测胃黏膜ＥＧＦＲ、ｂＦＧＦＲ蛋白的表达。　１．４统计学处理采用ＳＰＳＳ１３．０分析，计量资料用均数±标　

准差（　±ｓ）表示，多个样本均数比较采用方差分析，多个样本均　

数间两两比较采用ＬＳＤ法。　

２结　果　

２．１各组大鼠溃疡愈合情况（见表１）　表１各组溃疡发生数比较　例　

２．２大鼠胃溃疡组织学变化术后１４　ｄ，空白组大鼠胃黏膜结　

构完整，腺体排列整齐，未见明显的炎性细胞浸润；模型组见明　

显溃疡，可见大量坏死组织，肌层纤维结构不清，固有层大量炎　细胞浸润，血管扩张；人参组、太子参组溃疡较轻，固有层、黏膜　

肌层可见炎性细胞浸润，黏膜肌层水肿较轻，中度血管扩张，溃　

疡底部见有肉芽组织和瘢痕形成，黏膜肌层增厚，新生血管较丰　富；洛赛克组溃疡程度也较轻，仍有大量炎细胞、中性粒细胞浸　

润，微血管较少。术后２１　ｄ，模型组２例明显溃疡，固有层和黏　膜层仍有大量炎细胞浸润，固有层血管扩张明显，黏膜上皮脱　

落，其中人参组、太子参组溃疡愈合较佳，洛赛克组溃疡也愈合，　

但固有层、黏膜肌层仍有少量炎细胞中性粒细胞浸润。　

２．３　胃黏膜ＥＧＦＲ、ｂＦＧＦＲ蛋白的表达　术后１４　ｄ，正常组　ＥＧＦＲ和ｂＦＧＦＲ略有表达，但明显低于其他组别（Ｐ＜０．０５），　

人参组、太子参组ＥＧＦＲ表达比例高于模型组（Ｐ＜０．０５），洛赛　

克组ＥＧＦＲ和ｂＦＧＦ表达比例明显无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。　

详见表２。　

表２术后１４　ｄ　ＥＧＦＲ、ｂＦＧＦＲ阳性细胞　及染色结果（　±Ｓ）　

与模型组比较，１）Ｐ＜Ｏ．０５；与太子参组比较，２）Ｐ％０．０５　注：一为无色，＋为浅黄色，＋＋为棕黄色，＋＋＋为棕褐色。　

术后２１　ｄ，空白组ＥＧＦＲ和ｂＦＧＦ略有表达，但明显低于其　

他组别（Ｐ＜０．０　５），模型组ＥＧＦＲ和ｂＦＧＦ表达上升（Ｐ＜　

０．０５），人参组、太子参组ＥＧＦＲ表达与１４　ｄ比较无统计学意