输卵管妊娠中整合素β3及细胞基质成分层粘连蛋白及纤粘连蛋白表达的研究
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2007年4月第l4卷第ll期(旬刊)JPMT,April.2007,Vo1.14 盟0.11(Issued EveryTen ・1369・
输卵管妊娠_中整合素I33及细胞基质成分层粘连蛋白
及纤粘连蛋白表达的研究
侯玉兰,王绍娟,郭端英
(深圳市龙岗中心医院,广东深圳518116)
[摘要]目的:探讨整合素 、层粘连蛋白及纤粘连蛋白在输卵管妊娠发生中起到的作用。方法:采用流式细
胞定量分析技术检测输卵管妊娠患者输卵管黏膜上皮、宫内膜及正常输卵管黏膜上皮、正常宫内早孕宫蜕膜组织中整
合素 、层粘连蛋白及纤粘连蛋白表达。结果:整合素艮的表达输卵管妊娠组输卵管上皮明显高于子宫内膜上皮(P
<0.05)及正常输卵管上皮(P<0.05),低于正常子宫蜕膜,但差异无显著性(P>0.05);输卵管妊娠组子宫内膜上皮
明显低于正常子宫蜕膜(P<0.05),高于正常输卵管上皮,差异无显著性(P>0.05);正常输卵管上皮明显低于正常子
宫蜕膜(P<0.05)。层粘连蛋白的表达输卵管妊娠组输卵管上皮明显高于子宫内膜上皮(P<0.05)及正常输卵管上
皮(P<0.05),低于正常子宫蜕膜,但差异无显著性(P>0.05);输卵管妊娠组子宫内膜上皮明显低于子宫蜕膜上皮
(P<0.05),高于正常输卵管上皮但差异无显著性(P>0.05);正常输卵管上皮明显低于子宫蜕膜上皮(P<0.05)。
纤粘连蛋白的表达输卵管妊娠组输卵管上皮高于子宫内膜上皮(P<0.05)及正常输卵管上皮(P<0.05),低于正常子
宫蜕膜但差异无显著性(P>0.05);输卵管妊娠组子宫内膜上皮低于正常子宫蜕膜(P<0.05),高于正常飧卵管上皮 但差异无显著性(P>0.05);正常输卵管上皮明显低于正常子宫蜕膜(P<0.05)。结论:整合素p"层粘连蛋白及纤
粘连蛋白参与胚泡异位着床于输卵管内,可能在输卵管妊娠发生过程中起到一定的作用。
[关键词]整合素 ;细胞外基质;层粘连蛋白;纤粘连蛋白;输卵管妊娠
[中图分类号]R714.22 1[文献标识码]A[文章编号]1671-5098(2007)11-1369-02
To Study the Expression of Integrin and Extracellular Matrix of Fibronectin and Laminin
in Tubal Pregnancy
HOU Yu—lan.WANG Shao-juan,GUO Duan—ying
(Longgang Central Hospital of Shenzhen,Shenzhen,Guangdong 518116,China) Abstract:Objective To investigate the rule of integrin B3 fibronectin and laminin in tubal Pregnancy.Methods Flow
crtometry was resorted to demonstrate the expression of integrin B3,fibronectin and laminin in tubal epithelium and endometri—
um of tubal pregnancy,normal tubal epithelium and normal deeidual cells.Results The expression of integrin B3 in tubal epi・
thelium of tubal pregnancy was higher than that in normal tubal epithelium and normal deeidual cells(P<0.05).However,
expression of integrin p3,in endometrium of tubal pregnancy was lower than that in normal deeidual cells(P<0.05).Laminin
in tubal epithelium of tubal pregnancy Was higher than that in normal tubal epithelium,but lower than that in normal deeidual cells(P<0.05).Fibronectin in tubal epithelium of tubal pregnancy was higher than that in normal tubal epithelium,but lower
than that in normal deeidual cells(P>0.05).Conclusion Integrin ,fibronectin,laminin participated in ectopic implantation
and might play a key role in tubal pregnancy.
Key words:Integrin B3;Extraeellular matrix;Fibronectin;Laminin;Tubal Pregnancy
整合素B 及纤粘连蛋白(Fibronectin,FN)、层粘连蛋白
(Laminin,LN)均为粘附分子家族的成员。整合素B3以细胞
外基质为配体,介导细胞和基质粘附,从而控制细胞与基底 膜的结合以及细胞游走,其配体结合位点是精氨酸一甘氨 酸一冬氨酸(RGD)的三肽结构 。FN与I 是两种细胞外
基质分子,与整合素家族互为配体。它们不仅有连接和支持
细胞、组织的作用,而且可以影响细胞形态,促进细胞粘附,
调控细胞迁移、增殖及传递细胞信息,对于胚胎的植入至关重 要。、
1材料与方法 1.1研究对象收集本院妇科自2005年6月至2006年8
月经腹腔镜或开腹手术治疗,并在临床及病理上明确诊断为
输卵管妊娠的病例,选取其中在腹腔镜下无盆腔粘连、组织病 理切片未见有慢性炎症改变及术前3个月未接受激素类药物 治疗或服用避孕药物的病例,取其输卵管黏膜组织及其子宫
内膜组织作为研究组1,共27例,年龄为18岁一41岁,孕龄
为7周一9周;收集平时月经周期规则,有正常生育史,因子 宫肌瘤等疾病手术治疗及要求行输卵管结扎者而在黄体中期 手术切除的正常输卵管黏膜组织作为对照组1,共23例,年
龄为34岁~47岁;另收集在本院门诊因正常宫内早孕而行 人工流产术者的子宫蜕膜组织作为对照组2,共20例,年龄
在19岁~38岁,孕龄为7周一10周,对照组均要求为术前3
个月未接受激素类药物治疗或服用避孕药物的病例。
1.2标本采集取标本组织各0.5 g,70%冷乙醇固定,4 oC
冰箱保存。 1.3主要试剂与仪器 鼠抗人CD 61 SZ 21(整合素 抗
体),FN抗体(120.5)为Santa Cruze公司产品;LM抗体(兔
抗EHS)为美国Sigma公司产品。抗体稀释度1:1
00。流 维普资讯 http://www.cqvip.com ・l370・ !生 月第l4卷第11期(旬刊)JPMT,April.2007,Vo1.14.No.11(Issued Everv Ten
式细胞仪为FACS 420(Becton Dickinson),分析软件为BDIS. CONSORT 30,仪器变异系数(CV)<5%。
1.4输卵管内膜、蜕膜组织样品制备采用机械法(网搓)
制备单细胞悬液 ;取单细胞样品1×10 /ml;加入0.1 ml工 作液浓度的抗体(-抗)混匀,置温室30 min;加入PBS缓冲
液10 ml;离心1 000 r/min 5 min,弃上清;加入相应二抗IgG 工作液0.1 ml,温室孵育30 min;重复加PBS缓冲液及离心步
骤2次;加入1 ml PBS混匀;经300目网过滤至样品管中;以 流式细胞仪检测样品中整合素B,、FN、LN阳性细胞数。
1.5统计学分析资料输入计算机系统采用SPSS 10.32软 件进行t检验。 2结果 输卵管黏膜、蜕膜组织中整合素B 、LN、FN的表达,见表
1。 表1输卵管黏膜、蜕膜组织中整合素133的表达 ( ±s)
p3 38.5±6.58 20.32±5.30 18.95±4.85 41.34±6.36
LN 40.2l土5.43 22.28±6.98 21.47土7.9O 42.57土7.38
FN 30.57±6.85 23.20±9.12 l9.45±5.87 34.45±6.44
由表1可见,整合素B,的表达情况:输卵管妊娠组输卵
管上皮明显高于子宫内膜上皮(P<0.05)及正常输卵管上皮
(P<0.05),低于正常子宫蜕膜,但差异无显著性(P>0. 05);输卵管妊娠组子宫内膜上皮明显低于正常子宫蜕膜(P
<0.05),高于正常输卵管上皮,差异无显著性(P>0.05);正 常输卵管上皮明显低于正常子宫蜕膜(P<0.05)。 LN的表达情况:输卵管妊娠组输卵管上皮明显高于子宫
内膜上皮(P<0.05)及正常输卵管上皮(P<0.05),低于正常 子宫蜕膜,但差异无显著性(P>0.05);输卵管妊娠组子宫
内膜上皮明显低于子宫蜕膜上皮(P<0.05),高于正常输卵
管上皮但差异无显著性(P>0.05);正常输卵管上皮明显低 于子宫蜕膜上皮(P<0.05)。
FN的表达情况:输卵管妊娠组输卵管上皮高于子宫内膜 上皮及正常输卵管上皮,低于正常子宫蜕膜,但差异无显著
性(P>0.05);输卵管妊娠组子宫内膜上皮低于正常子宫蜕 膜,高于正常输卵管上皮,差异无显著性(P>0.05);正常输 卵管上皮明显低于正常子宫蜕膜(P<0.05)。
3讨论 异位妊娠中约95%为输卵管妊娠,输卵管具有适宜于胚
泡着床的结构,并可表达“着床窗”期一些特异分子,是妊娠 发生的基础;同时胚胎经此通道向子宫输送时,输卵管病理状 况所导致的胚泡滞留也使妊娠成为可能 J。输卵管妊娠的
发生需要同时具备两种情况,一是胚胎在输卵管内而不是在 子宫内获得了着床的能力,二是与此同时输卵管黏膜上皮在 着床期也具备了接收胚胎的能力。目前所知,胚胎的着床受
到粘附分子、细胞因子、激素及免疫等多方面因素的影响其中 细胞粘附分子,尤其是整合素、FN、LN在胚胎着床中的作用
至关重要。整合素是一类普遍存在于细胞表面的跨膜糖蛋 白,由 、B两个亚单位以非共价键形式连接成的异二聚体分
子,介导细胞与细胞、细胞和细胞外基质(ECM)之间相互作 用,发挥其粘附和信号转导两大基本功能,参与胚胎发育、
免疫应答、创伤修复、恶性肿瘤转移等生理和病理过程。滋养
细胞表面也同时存在整合素B,及其配基,通过整合素与配基 的相互识别、结合完成子宫内膜和胚胎之间的接触和粘附。 在黄体中期至早孕蜕膜中均有表达,在滋养细胞上也有表
达,参与滋养细胞的粘附过程 。Sulz等 采用免疫组化方
法研究发现整合素a,B,在容受期不仅在子宫内膜有表达, 而且在输卵管黏膜上皮细胞上也有表达,且与子宫植入窗开