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实时荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌在结核性胸膜炎诊断中的价值摘要目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测结核分枝杆菌在结核性胸膜炎诊断中的价值。
方法对362例临床确诊的结核性胸膜炎患者、可疑结核性胸膜炎患者和非结核性胸膜炎患者的胸水标本采用涂片、实时荧光定量PCR两种方法进行检测，对其结果进行对比分析。
结果362例胸水标本中，涂片阳性率为4.42%（16/362），PCR检测阳性率为24.31%（88/362）。
胸水涂片、PCR检测102例临床确诊的结核性胸膜炎患者胸水标本阳性率分别为11.76%（12/102）和50.98（52/102）；检测160例临床可疑结核性胸膜炎患者胸水阳性率分别为2.50%（4/160）和22.50%（36/160）。
两种方法的阳性检测率比较差异有统计学意义（χ2=10.654，P＜0.05）。
100例非结核性胸膜炎患者胸水标本涂片及PCR检测均为阴性。
结论荧光定量-聚合酶链反应（FQ-PCR）快速诊断结核性胸膜炎与涂片法相比较具有快速、灵敏、高特异性等优点。
关键词结核分枝杆菌；胸水涂片；荧光定量聚合酶链反应；结核性胸膜炎结核分枝杆菌（mucobacterium tuberculosos，MTB）是兼性的细胞内致病菌，它能够导致进行性疾病和无症状的潜伏感染，其中潜伏感染占世界人口的1/3，并且每年有900万新增结核病例，200万人死于结核病[1]。
本次采用荧光定量PCR技术检测临床标本中结核分枝杆菌并与涂片抗酸染色两种方法，对胸水标本进行检测，以评价FQ-PCR检测结核分枝杆菌在结核性胸膜炎诊断中的应用。
现报告如下。
1 资料与方法1. 1 一般资料2011年1月～2014年3月本院住院和门诊胸部影像学诊断为胸腔积液的患者362例。
其中临床确诊：102例结核性胸膜炎，160例可疑结核性胸膜炎，100例非结核性胸膜炎（其中肺癌12例，其他呼吸系统疾病患者88例）全部患者根据X线、细菌学、免疫学、病理学等检查进行了确诊。
分子信标荧光定量PCR快速检测结核分枝杆菌方法的初步研究徐亚军;周子人;林琳;刘渠;刘衡川【期刊名称】《四川大学学报：医学版》【年(卷),期】2008(39)4【摘要】目的建立分子信标荧光定量PCR快速检测结核杆菌方法,为临床结核病的诊断提供特异性强、灵敏度高、可标准化、自动化的检测方法。
方法根据GenBank数据库公布的结核分枝杆菌IS6110基因的保守序列,设计引物与分子信标探针,建立结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法;以10种细菌作对照分析该方法的特异性与灵敏度;应用已建立的方法检测结核分枝杆菌,评价其应用价值。
结果所建立的分子信标荧光定量PCR检测10种细菌,只有结核分枝杆菌有荧光信号,与其他细菌无交叉反应,4拷贝/PCR反应体系的结核分枝杆菌都能有效检出。
对100株结核分枝杆菌的检测结果为阳性,单一检测时间仅需2h。
结论分子信标荧光定量PCR检测方法快速、灵敏度高、特异性强,可用于快速诊断结核病,为结核病的诊断与治疗提供新的检测手段。
【总页数】3页(P661-663)【关键词】结核分枝杆菌;分子信标;荧光定量PCR;IS6110;快速检测【作者】徐亚军;周子人;林琳;刘渠;刘衡川【作者单位】四川大学华西公共卫生学院医学检验学教研室,成都610041;深圳市龙岗区疾病预防控制中心【正文语种】中文【中图分类】R115【相关文献】1.分子信标实时荧光PCR检测登革病毒方法初步建立 [J], 高博;黄野能;王宇平;张建明2.分子信标荧光定量PCR检测结核分枝杆菌的反应体系优化方法对比研究 [J], 陆巧荣;方梅;洪志强;余志祥;胡朝友3.分子信标荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌方法建立及其临床应用 [J], 方梅;陆巧荣;洪志强4.分子信标荧光定量PCR检测H3N2亚型猪流感病毒方法的建立 [J], 禹思宇;周宇;唐连飞;孟芳;袁晓芬;梁斌5.基于分子信标探针的荧光定量PCR方法检测转基因食品 [J], 刘光明;苏文金;蔡慧农;蔡海松;林新坚;张伟光因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
荧光定量PCR法用于诊断肺结核患者痰液中结核分枝杆菌DNA的临床价值1. 引言1.1 背景肺结核是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，全球范围内仍然是公共卫生问题。
传统的肺结核诊断方法包括痰涂片检测和培养，但这些方法存在着一定的局限性，比如对于低菌载量的患者可能无法及时诊断。
需要发展一种更加灵敏、特异且快速的诊断方法来提高肺结核患者的早期诊断率和治疗效果。
本研究旨在探讨荧光定量PCR法在肺结核患者痰液中结核分枝杆菌DNA诊断中的临床应用及其优势与局限性，为肺结核的早期诊断和治疗提供更为可靠的辅助手段。
1.2 研究目的本研究旨在探讨荧光定量PCR法在肺结核患者痰液中检测结核分枝杆菌DNA的临床价值。
具体目的包括：1. 评估荧光定量PCR法在肺结核病原体检测中的敏感性和特异性，以及其与传统的细菌培养方法的比较。
通过比较两种方法的结果，评估PCR法的准确性和可靠性。
2. 探究荧光定量PCR法在痰液样本中检测结核分枝杆菌DNA的效率，分析其在早期诊断和治疗监测中的应用前景。
3. 检验荧光定量PCR法在肺结核患者中具有的快速、灵敏度高、操作简便等优势，以及其在临床实际操作中可能遇到的局限性。
通过对研究目的的实际操作和数据分析，本研究旨在为开展更有效的肺结核患者诊断和治疗提供科学依据和临床指导。
2. 正文2.1 荧光定量PCR法在结核病诊断中的应用qPCR可快速检测结核分枝杆菌DNA的存在并定量其数量，对结核病早期诊断具有重要意义。
传统的痰涂片检测方法需要耗时较长且存在一定的假阴性率，而qPCR技术能够在数小时内从样本中提取出结核分枝杆菌的DNA并定量检测，大大缩短了诊断时间，提高了诊断准确性。
qPCR还可以实现对结核菌株的分型和耐药基因的检测，为制定个体化的治疗方案提供重要依据。
通过qPCR技术可以快速判断结核病患者感染的结核菌株类型，以及是否存在耐药基因，进而为合理选择抗结核药物提供指导。
qPCR技术还可以在结核病治疗过程中监测患者的治疗效果，及时调整治疗方案，防止病原体耐药或复发。
实时荧光定量检测诊断结核病的价值结核病是由结核分枝杆菌(简称结核杆菌)引起的一种传染性疾病，其严重性主要由其患病率、死亡率和传染性高等特点所决定。
近年来，随着人们生活水平的提高和社会发展的进步，结核病呈现出不同程度的反弹或复发趋势，已成为全球公共卫生领域所面临的一项重大挑战，而实时荧光定量检测方法在结核病检测以及诊断方面发挥着重要的作用。
实时荧光定量检测方法是利用聚合酶链反应（PCR）技术，对样品中的DNA进行快速扩增并同时进行荧光检测，实现快速准确的结核杆菌定量检测。
经多项研究已证明，该方法有以下几方面的优点：其一，实时荧光定量检测方法具有快速快准时的特点。
该方法只需要3-4小时便可完成检测过程，而且样品检测的准确性高，能够检测到非常低浓度的结核杆菌，从而有助于尽早诊断出结核病。
此外，该方法还可以在短时间内进行大规模筛查，从而有助于降低结核病在社群中的传播风险。
其二，实时荧光定量检测方法具有高度的敏感性和特异性。
该方法可以检测染色体DNA中结核杆菌特异的基因序列，其灵敏度可以达到10CFU /ml，检测结果可靠性高，不会受到细胞外或免疫抑制剂的影响。
此外，与传统的涂片法或淋巴结活检法相比，该方法避免了样品的深层应用，有助于减少患者的疼痛和病因风险。
其三，实时荧光定量检测方法对不同类型结核杆菌的检测也具有一定的优势。
对于利福平和抗酸杆菌的产生敏感性降低，实时荧光定量检测方法仍然可以保持相对良好的灵敏度和特异性，并且对于结核杆菌的判断也具有很高的准确性，不会产生假阳性或假阴性的情况。
实时荧光定量检测方法的发展，对于结核病的预防、早期诊断和及时治疗，都具有重要的作用，有助于降低结核病的传播风险和病死率，提高患者的生活质量。
但是，该方法在应用中也存在一些局限性和不足之处，如技术要求复杂、设备昂贵、检测时需要保持RNA酶的隔离状态等，因此在实际应用中需要慎重考虑。
综述来看，实时荧光定量检测方法是一种简单、快速、准确的结核病诊断方法，其对结核病的早期诊断和及时治疗起到了重要的作用。
荧光定量PCR法用于诊断肺结核患者痰液中结核分枝杆菌DNA的临床价值1. 引言1.1 研究背景肺结核是一种由结核分枝杆菌引起的传染病，在全球范围内具有较高的发病率和死亡率。
目前，肺结核的诊断主要依靠痰液培养和酸杆菌染色等传统方法，但这些方法存在着一定的局限性，例如需要较长的检测时间、易受外界因素干扰等。
寻求一种更加准确、灵敏和快速的诊断方法对于减少肺结核的传播和提高患者的治疗效果至关重要。
本研究旨在通过荧光定量PCR法对肺结核患者的痰液样本进行分析，探讨该技术在肺结核诊断中的应用及其临床意义，并为未来临床应用提供重要的借鉴。
1.2 研究目的研究目的旨在探究荧光定量PCR法在诊断肺结核患者痰液中结核分枝杆菌DNA方面的临床应用价值。
具体地，通过比较荧光定量PCR 法与传统方法在检测肺结核患者痰液中结核分枝杆菌DNA的效果，分析荧光定量PCR法的优势和不足之处。
考察痰液中结核分枝杆菌DNA 的检测结果对肺结核患者疾病状况的影响，以及对肺结核的早期诊断和治疗的指导作用。
通过研究，旨在为临床医生提供更准确、快速、可靠的诊断手段，提高肺结核患者的治疗效果和预后，为肺结核的防控工作提供科学依据，促进公共卫生健康事业的发展。
1.3 研究意义肺结核是一种严重的传染病，严重威胁着全球人类的健康。
目前，肺结核的诊断主要基于临床症状、痰液检测和影像学检查，然而这些方法存在着一定的局限性，包括诊断灵敏度不高、操作复杂、耗时长等问题。
需要开发新的快速准确的诊断方法来提高肺结核的诊断率，降低传染性病例的传播风险。
荧光定量PCR法在诊断肺结核患者痰液中结核分枝杆菌DNA方面具有重要的临床应用价值。
通过本研究的深入探讨，我们可以更好地认识其在肺结核诊断中的作用，为临床提供更准确、更快速的诊断方法，促进肺结核的早期发现和及时治疗。
2. 正文2.1 荧光定量PCR法的原理荧光定量PCR法的原理是基于聚合酶链式反应（PCR）技术的基础上，通过引入荧光探针来实现DNA的定量检测。
抗酸染色、实时荧光定量PCR、Tspot-TB联合检测对结核病的诊断价值研究摘要：2022年3月至2023年3月在四川省泸州市人民医院接受常规医学检查的77名健康体检者为对照组，69名确诊肺结核患者列为实验组。
接受抗酸染色、实时荧光定量PCR或T-SPOT.TB检测。
通过统计三种方法的灵敏度、特异度、准确率分析单独检测或者联合检测的临床诊断价值。
抗酸染色准确率低，只能用作初筛。
在临床诊断中，采用实时荧光定量PCR或T-SPOT.TB联合抗酸染色均可显著提高结核病诊断的准确度。
对于抗酸染色阴性的可疑结核病患者，更推荐使用T-SPOT.TB再次筛查。
关键词：抗酸染色；实时荧光定量PCR；T-SPOT.TB；结核病结核病（TB）是由结核分枝杆菌（MTB）感染引起的慢性传染病。
结核病是全世界单一病原菌致死人数最多的疾病。
世界卫生组织发布《2022年全球结核病报告》[1]，报告显示，中国新发结核病患者数为78万较2020年的84.2万有所下降。
在30个结核病高负担国家中我国估算结核病发病数排第三位，占全球结核病例的7.4%[2]。
临床统计数据显示，结核病的治疗成功率约为85%[3]，并且临床上常出现漏诊或误诊的情况，约有80%的肺结核患者无法在肺结核影像学发现，及时准确的诊断和治疗不仅有助于减少结核病死亡结局的发生，还可以进一步减少结核病的传播。
传统结核病诊断技术包括痰涂片、菌培养及药物敏感试验。
痰涂片镜检见MTB为金标准，此类方法灵敏度低，易漏检，但是因为它的易操作和低成本使得其仍在广泛使用。
菌培养出MTB也视为检验金标准，但是培养时间过长，延误病情。
目前临床常使用的结核诊断技术有实时荧光定量PCR（Xpert MTB/RIF）、线性探针技术以及基因芯片技术，结核感染T细胞斑点试验（T–SPOT. TB）干酪样肉芽肿诊断等，这些新技术兼备高灵敏度和特异度。
如今为了提高MTB的检出率，临床上常联合多种检测技术进行辅助诊断。
结核分支杆菌（TB）核酸检测标准操作规程1.目的：规范结核分支杆菌（TB）核酸检测操作流程，保证检测结果的准确性。
2.应用范围：PCR实验室。
3.职责：3.1 文件编写：PCR实验室技术员。
3.2 文件审核：PCR实验室负责人。
3.3 文件审批：实验室主任。
3.4 执行：PCR实验室所有工作人员。
4. 参考文献：4.1《中山大学达安基因股份有限公司结核分支杆菌核酸扩增（PCR）荧光检测试剂盒说明书》4.2《中山大学达安基因股份有限公司DA7600核酸序列检测系统用户手册》5. 内容：5.1 检测方法：PCR-荧光探针法。
5.2 实验原理：用一对结核分支杆菌(TB)特异性引物和一条结核分支杆菌(TB)特异性荧光探针，配以PCR反应液、耐热DNA聚合酶（Taq酶）、四种核苷酸单体（dNTPs）等成分，通过PCR体外扩增法，即高温变性、低温退火、适温延伸进行DNA扩增，并对PCR全过程进行实时监测，从而检测结核分支杆菌核酸。
主要用于TB感染的辅助诊断及其疗效监测的标准。
5.3 性能参数：5.3.1 检测下限：5.0×102基因拷贝/ml。
5.3.2 线性范围：5.0×102～5.0×108基因拷贝/ml。
5.4 标本采集：由合作单位按照以下要求进行采集。
5.4.1 标本类型：痰液、肺及支气管灌洗液、尿液等。
5.4.1.1 痰液：清晨从肺深部咳出痰液，取1～3 ml置于无菌玻璃管内，密封送检；婴幼儿用密闭容器与无菌吸痰器相连，吸取痰液，密封送检。
5.4.1.2 肺及支气管灌洗液：收集灌洗液1～3 ml置于无菌玻璃管内，密封送检；5.4.1.3 尿液：用无菌5ml玻璃管收集中段尿1～3ml，密封送检。
5.4.2 标本保存：标本采集后保存于2～8℃。
5.4.3 运送条件：标本运送采用冰壶。
5.5 设备和试剂：5.5.1 设备： DA7600荧光定量PCR仪、低速水平离心机、生物安全柜、台式高速离心机、移液器、混匀器、恒温水浴箱/干式恒温器、冰箱（4℃、-20℃）、移动/固定紫外灯、冷冻离心机。
荧光定量PCR技术在结核分枝杆菌检测中的应用应春妹;汪雅萍;张灏旻;陈小颖;于嘉屏【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2007(027)011【摘要】目的探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)在结核分枝杆菌检测中的价值.方法收集患者痰液、灌洗液、胸水和尿液等标本,分别作涂片检测(萋纳染色和荧光染色)和FQ-PCR检测,比较两者的阳性率.结果 169例标本中,萋纳染色阳性共7例(4.1%),38例疑似标本中荧光染色阳性共15例,FQ-PCR检测结核分枝杆菌 DNA 阳性共17例(10.1%),FQ-PCR与荧光染色符合率为88.2%.结论涂片检查结核分枝杆菌阳性率较低,FQ-PCR法检测结核分枝杆菌 DNA阳性率高于涂片法,可列入结核分枝杆菌实验诊断的常规项目.【总页数】2页(P1400-1401)【作者】应春妹;汪雅萍;张灏旻;陈小颖;于嘉屏【作者单位】上海交通大学,医学院仁济医院检验科,上海,200127;上海交通大学,医学院仁济医院检验科,上海,200127;上海交通大学,医学院仁济医院检验科,上海,200127;上海交通大学,医学院仁济医院检验科,上海,200127;上海交通大学,医学院仁济医院检验科,上海,200127【正文语种】中文【中图分类】R378.911【相关文献】1.荧光定量PCR技术在结核分枝杆菌检测中的应用 [J], 肖慧霞;王晓平;王福锐;刘晓妮2.分子信标荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌方法建立及其临床应用 [J], 方梅;陆巧荣;洪志强3.临床微生物检测中荧光定量PCR技术的应用研究 [J], 张月玲;马涛;庞世超;郭改玲4.荧光定量PCR技术在食品快速检测中的应用 [J], 丁博群;刘珊娜5.结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术在脊柱结核检测中的应用 [J], 王新刚;卫建民;杨俊松;王自立;冯万立;夏斌;吕会强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
荧光定量PCR对结核分枝杆菌DNA的检测分析牛宁奎;王自立;施建党;师志云;赵志军【期刊名称】《白求恩军医学院学报》【年(卷),期】2012(010)003【摘要】目的探讨宁夏某医院患者结核分枝杆菌(TB)DNA检测的临床应用价值.方法用荧光定量PCR技术对754例结核疑似患者进行TB的DNA检测,比较不同标本类型、不同年份、不同性别感染情况.结果 TB总阳性率为7.82%,尿液和痰液阳性率较高,分别为19.44%和15.58%;男性和女性阳性率分别为7.69%和7.98%;＞51岁年龄组人群TB病原体感染者所占比例最高(30.51%);2009、2010和2011年阳性检出率分别为10.81%、10.00%和5.15%.结论 2011年TB的DNA 感染率明显降低.【总页数】2页(P235-236)【作者】牛宁奎;王自立;施建党;师志云;赵志军【作者单位】750004,银川,宁夏医科大学总医院脊柱外科;750004,银川,宁夏医科大学总医院脊柱外科;750004,银川,宁夏医科大学总医院脊柱外科;750004,银川,宁夏医科大学总医院医学实验中心;750004,银川,宁夏医科大学总医院医学实验中心【正文语种】中文【中图分类】R378.91+1【相关文献】1.荧光定量PCR在脑脊液结核分枝杆菌DNA检测中的应用 [J], 王俊妨;靳颖;牛伟霞;刘锦2.荧光定量PCR方法检测脑脊液中结核分枝杆菌DNA的意义 [J], 崔中锋;史继静3.荧光定量PCR检测痰结核分枝杆菌DNA的应用价值 [J], 张桂花4.荧光定量PCR检测痰结核分枝杆菌DNA的应用价值 [J], 张东浩;李影5.荧光定量PCR法用于诊断肺结核患者痰液中结核分枝杆菌DNA的临床价值 [J], 谢景齐;周娇红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
