食物中氨基酸的测定方法
测定食物中的胱氨酸使用过甲酸氧化-氨基酸自动分析仪法，测定色氨酸使用荧光分光光度法，测定其它氨基酸使用氨基酸自动分析仪法。
一、氨基酸自动分析仪法
1.原理
食物蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸，经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后，与茚三酮溶液产生颜色反应，再通过分光光度计比色测定氨基酸含量。一份水解液可同时测定天冬，苏，丝，谷，脯，甘，丙，缬，蛋，异亮，亮，酪，苯丙，组，赖和精氨酸等16种氨基酸，其最低检出限为10pmol。
2.适用范围
GB/T14965-1994食物中氨基酸的测定方法。
本法适用于食物中的16种氨基酸的测定。其最低检出限为10pmol。本方法不适用于蛋白质含量低的水果、蔬菜、饮料和淀粉类食物的测定
3.仪器和设备
3.1真空泵
3.2恒温干燥箱
3.3水解管：耐压螺盖玻璃管或硬质玻璃管，体积20～30ml。用去离子水冲洗干净并烘干。
3.4真空干燥器（温度可调节）
3.5氨基酸自动分析仪。
4.试剂
全部试剂除注明外均为分析纯，实验用水为去离子水。
4.1浓盐酸：优级纯
4.26mol/L盐酸：浓盐酸与水1：1混合而成。
4.3苯酚：需重蒸馏。
4.4混合氨基酸标准液（仪器制造公司出售）：0.0025mol/L
4.5缓冲液：
4.5.1 pH2.2的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠（Na3C6H5O7.2H2O）和16.5ml浓盐酸加水稀释到1000ml，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至2.2 4.5.2 pH3.3的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和12ml浓盐酸加水稀释到1000ml，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节至pH至3.3。
4.5.3 pH4.0的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和9ml浓盐酸加水稀释到1000ml，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至4.0。
HPLC法测定阿胶中6种氨基酸的含量
王翠芬;吕彩莲;彭思梅;黄玉兰;陈建萍
【摘 要】目的：通过柱前衍生化,高效液相色谱(HPLC)法测定阿胶中6种氨基酸的含量。方法色谱柱为Hypersil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)；流动相A：乙腈-0.1mol/L乙酸钠(7：93),用乙酸调节pH为6.5,流动相B：乙腈-水(4：1),梯度洗脱；柱温为42℃；流速为1.0 ml/min；检测波长254 nm；异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生化。结果30 min内6种氨基酸分离完全,峰面积与浓度的线性关系良好,
r=0.999。加样回收率97.33%~100.17%, RSD<3。结论 HPLC法测定阿胶中6种氨基酸的含量方法操作流程简单、快速、准确,可用于该制剂的质量控制和检验。%Objective To determine content of 6 kinds of amino acids in Ejiao by
HPLC method. Methods The column was Hypersil C18 (4.6 mm x 250 mm,
5μm); the A of the mobile phase: Acetonitrile -0.1mol/L sodium acetate
(7:93), the PH adjusted to 6.5 with acetic acid, the B of the mobile phase:
Acetonitrile water (4:1), Gradient elution; the column temperature was 42℃;
the flow rate was 1 ml/min; the detection wavelength was 254 nm; Phenyl
was othiocyanate (PITC) pre column derivatization.Results 6 kinds of amino
氨基酸分析仪的基本分析原理
氨基酸分析仪是一种用于定量分析样品中各种氨基酸的仪器。其基本分析原理是通过将样品中的氨基酸分离、检测和定量，从而确定样品中各种氨基酸的含量。
首先，样品中的氨基酸需要被分离出来。一种常用的方法是利用离子交换色谱技术。离子交换色谱是通过样品中氨基酸的酸性基团和碱性基团与固定在色谱柱上的阴、阳离子交换剂之间的离子交换作用进行分离的。通过调整溶剂和柱温等条件，可以实现对氨基酸的选择性分离。
其次，分离出的氨基酸需要被检测。最常用的检测方法是紫外吸收检测。氨基酸在紫外区域有特定的吸收峰，对应着特定的波长。通过测量样品在不同波长下的吸光度，可以得到吸收峰的强度。根据吸光度和吸光度与浓度之间的关系，可以计算出样品中各种氨基酸的浓度。
最后，根据样品中氨基酸的浓度，通过一定的计算公式，可以定量地确定样品中各种氨基酸的含量。通常，会利用标准曲线法，即利用已知浓度的氨基酸标准溶液制备一系列浓度不同的标准曲线。将样品中各种氨基酸的吸光度值与标准曲线进行比较，就可以得到各种氨基酸的浓度。
综上所述，氨基酸分析仪通过分离、检测和定量的步骤，可以对样品中的氨基酸进行分析，从而确定样品中各种氨基酸的含量。
HPLC法同时测定阿胶强骨口服液中4种氨基酸
程丽;汪婷;武嘉林
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2017(039)003
【摘 要】目的 建立HPLC法同时测定阿胶强骨口服液(阿胶、黄芪、熟地等)中4种氨基酸的含有量.方法 该药物0.1 mol/L盐酸提取液的分析采用Welch XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A为0.1 mol/L醋酸钠缓冲液-乙腈(93∶7),B为乙腈-水(4∶1),梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长254 nm;柱温43℃.结果 L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸分别在0.8～80
μg/mL(r=0.999 9)、1.6～160 μg/mL (r=0.999 8)、0.7～70 μg/mL(r=0.999 8)、1.2 ～ 120 μg/mL(r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率(n=9)分别为100.2％、99.7％、100.1％、100.5％,RSD分别为1.6％、1.5％、1.3％、1.5％.结论 该方法灵敏准确,重复性和稳定性良好,可用于阿胶强骨口服液的质量控制.
【总页数】4页(P636-639)
【作 者】程丽;汪婷;武嘉林
【作者单位】新疆医科大学中医学院,新疆乌鲁木齐830054;新疆医科大学中医学院,新疆乌鲁木齐830054;新疆华世丹药业股份有限公司,新疆乌鲁木齐830011
【正文语种】中 文
【中图分类】R927.2 【相关文献】
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