日立l-8900氨基酸自动分析仪原理
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氨基酸分析仪原理、分类及几种氨基酸分析仪的比较概述氨基酸分析仪是一种分析仪器,采用经典的阳离子交换色谱分离、茚三酮柱后衍生法,对蛋白质水解液及各种游离氨基酸的组分含量进行分析。
工作原理通常细分为两种系统:蛋白水解分析系统(钠盐系统)和游离氨基酸分析系统(锂盐系统),利用不同浓度和pH值的柠檬酸钠或柠檬酸锂进行梯度洗脱。
其中钠盐系统一次最多分析约25种氨基酸,速度较快,基线平直度好;锂盐系统一次最多分析约50种氨基酸,速度较慢,基线一般不如钠盐系统好。
应用全自动氨基酸分析仪主要应用:各种物质中18种氨基酸的定性定量分析。
1.饲料上的应用:质量控制:各种饲料必需氨基酸的含量和它们之间的比例必须恰当,测定原料和产品中的氨基酸含量,以达到保证质量的目的。
真伪鉴别:鱼粉氨基酸组成特点是赖氨酸、蛋氨酸含量高,氨基酸分析结果很容易就可以区别它的真伪。
2.农业、食品、饮料及玉米、大豆、小麦等农作物的氨基酸含量进行检测;对果汁、饮料进行真伪的鉴别;检验测定茶氨酸来鉴别真伪茶叶;对酱油级别的认定。
分类氨基酸分析仪按其分离和检测方法的不同可分为两大类型。
第一类是基于阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生光度法测定的经典方法(IEC)。
此类方法于1972年获诺贝尔奖,是当今国际标准和国家标准以及仲裁和涉外的方法。
第二类是所有基于反相色谱分离、柱前衍生、荧光或紫外检测的高效液相法(HPLC)以及阴离子交换分离直接安培法检测的离子色谱法(IC)。
选型指南1、原理。
基于阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生、光度法测定的离子交换色谱法(IEC)。
此类方法由Stein和Moore两人1958年发明,并于1972年获诺贝尔奖,是当今国际标准和国家标准以及仲裁和涉外的方法。
2、重要指标。
满足分析需要的技术指标如分离度、重复性等要求,而其中的分离度又是更为重要的指标,因为,色谱理论一般以分离度达到1.2作为两峰基本分离的判定前提,只有峰分开了,才有意义去讨论定性和定量的重复性。
日立L-8900全自动氨基酸分析仪标准操作规程一. 目的为规范日立L-8900全自动氨基酸分析仪的基本操作、维护保养、异常处理程序,防止人为操作失误,确保氨基酸分析仪正常运转,特制定本程序。
二.适用范围本程序适用于日立L-8900全自动氨基酸分析仪。
三.责任1. 本程序的实施者为氨基酸分析仪操作者,各实验室负责人对本程序的实施情况进行监督。
2. 日常运行及维护、定期维护、定期点检及保养由氨基酸分析仪操作者负责。
四. 内容1.联机(1)打开电脑。
(2)打开L-8900主机电源。
(3)双击桌面的图标,进入1-1画面,双击图标,进入程序。
1-1(4)在菜单栏中依次点击和,出现1-2画面,单击联机。
大约两分钟,初始化完毕。
中Uninitialized变成Idle,图1-2变成了图1-3,各个组件可以进行控制了。
初始化完毕后,分离柱的温度逐渐上升,分离柱的温度会升到50℃。
如果打开反应柱的柱温控制,则温度大约20分钟升到135℃。
1-21-32、手动各组件控制操作(1)泵1和泵2点击,出现2-1的画面。
设置泵1,流量0.1ml/分钟,B6 100%。
点击打开泵1。
泵打开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-1点击,出现2-2的画面,设置泵2,流量0.1ml/分钟,R3 100%。
点击打开泵2。
泵打开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-2(2)自动进样器点击,出现2-3的画面,设置Sampler Wash不少于3次。
2-3(3)分离柱柱温箱点击,出现2-4画面,设置柱温50℃,设置ON,打开柱温箱。
柱温箱打开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-4(4)反应柱柱温箱点击,出现2-5画面,设置柱温135℃,设置ON,打开柱温箱。
柱温箱打开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-5(5)钨灯点击,出现2-6画面,设置ON,打开钨灯。
钨灯打开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-63、编辑方法(1)Stand By 程序(a)依次点击、、出现3-1-1的画面。
日立L-8900全自动氨基酸分析仪标准操作规程一. 目的为标准日立L-8900全自动氨基酸分析仪的根本操作、维护保养、异常处理程序,防止人为操作失误,确保氨基酸分析仪正常运转,特制定本程序。
二. 适用范围本程序适用于日立L-8900全自动氨基酸分析仪。
三.责任1. 本程序的实施者为氨基酸分析仪操作者,各实验室负责人对本程序的实施情况进展监督。
2. 日常运行及维护、定期维护、定期点检及保养由氨基酸分析仪操作者负责。
四. 内容1.联机〔1〕翻开电脑。
〔2〕翻开L-8900主机电源。
〔3〕双击桌面的图标,进入1-1画面,双击图标,进入程序。
1-1〔4〕在菜单栏中依次点击和,出现1-2画面,单击联机。
大约两分钟,初始化完毕。
中Uninitialized变成Idle,图1-2变成了图1-3,各个组件可以进展控制了。
初始化完毕后,别离柱的温度逐渐上升,别离柱的温度会升到50℃。
如果翻开反响柱的柱温控制,则温度大约20分钟升到135℃。
1-21-32、手动各组件控制操作〔1〕泵1和泵2点击,出现2-1的画面。
设置泵1,流量0.1ml/分钟,B6 100%。
点击翻开泵1。
泵翻开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-1点击,出现2-2的画面,设置泵2,流量0.1ml/分钟,R3 100%。
点击翻开泵2。
泵翻开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-2〔2〕自动进样器点击,出现2-3的画面,设置Sampler Wash不少于3次。
2-3〔3〕别离柱柱温箱点击,出现2-4画面,设置柱温50℃,设置ON,翻开柱温箱。
柱温箱翻开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-4〔4〕反响柱柱温箱点击,出现2-5画面,设置柱温135℃,设置ON,翻开柱温箱。
柱温箱翻开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-5〔5〕钨灯点击,出现2-6画面,设置ON,翻开钨灯。
钨灯翻开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-63、编辑方法〔1〕Stand By 程序〔a〕依次点击、、出现3-1-1的画面。
日立L-8900全自动氨基酸分析仪简易操作规程一、联机1、打开电脑。
2、打开主机电源。
3、双击桌面的图标,进入1-1画面,双击图标,进入程序。
1-14、在菜单栏中依次点击和,出现1-2画面,单击联机。
大约两分钟,初始化完毕。
中Uninitialized变成Idle,图1-2变成了图1-3,各个组件可以进行控制了。
初始化完毕后,分离柱的温度逐渐上升。
分离柱的温度会升到50℃。
1-21-3二、手动各组件控制操作1、泵1和泵 2点击,出现2-1的画面。
设置泵1,流量0.ml/min,B1 100%。
点击打开泵1。
泵打开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-1点击,出现2-2的画面,设置泵2,流量0.1ml/分钟,R3 100%。
点击打开泵2。
泵打开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-22、自动进样器点击,出现2-3的画面,设置Sampler Wash不少于3次。
2-32-43、反应柱柱温箱点击,出现2-5画面,设置柱温135℃,设置ON,打开柱温箱。
柱温箱打开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-52-6三、编辑方法1、依次点击、、出现3-1-1的画面。
3-1-12、选中,点击。
再依次点击、,出现3-1-2的画面。
3-1-23、在设置中选中各个柱,其余参数默认。
4、将方法另存为L8900分析方法,文件名及路径均可自选。
注意一定不要覆盖原来的方法,一定得另存。
注意将梯度设为3-3-1所示,其余参数默认。
3-3-12、保存方法。
四、编辑Sequence1、依次点击、、,出现4-1画面。
选中,其余参数默认。
4-12、点击,出现4-2画面,根据需要填写各个参数。
4-23、点击,出现4-3画面,根据需要填写各个参数。
4-34、点击,出现4-4画面,根据需要填写各个参数。
4-45、点击,出现4-5画面。
4-56、通过复制、编辑,最终将Sequence编辑如图4-6所示。
注意此时第一行是再生程序(RG),进样体积为0,Run Type是Unknown,第二行是标准样品,三行起是未知样。
氨基酸自动分析仪氨基酸是蛋白质的组成成分,是蛋白质化学研究的主要内容之一。
蛋白质是一切生命物质的基础,因此,探讨和揭示生命现象的发生、生长、新陈代谢、遗传变异过程,都与氨基酸的研究有关。
随着近代物理学、化学和电子学的飞速发展,氨基酸的分析技术亦在不断更新。
氨基酸分析仪是本世纪50年代研制的,仅40多年,已发展到现在的进样、分离、检测和数据处理全部自动化的程度。
检出量由微克分子到毫微克分子,分析时间由原来的24小时到现在的半个小时,分析技术的提高促进了其他科学领域的发展。
一、氨基酸自动分析仪的进展用于氨基酸分析的方法很多,有纸色谱法、柱色谱法、薄层色谱法、电泳法及气相色谱法等。
一般认为离子交换柱色谱法是较为精确的检测方法,氨基酸分析仪就是在此基础上研制成功的。
1951年Moor和Stein采用离子交换树脂色谱,用茚三酮试剂显色和分光光度计检测而设计,后来在Spaekman的协助下,使分析操作自动化。
迄今氨基酸分析仪的条件和自动程度有了很大的改观,其特点主要表现以下几个方面。
⒈树脂粒径减小近年来制成的小颗粒球状树脂,使氨基酸分析仪得到很大改进。
由于树脂粒径减小就对应地增加等量树脂的总面积,使现在少量树脂达到过去大量树脂的分离效果,从而减小了树脂柱的内径和体积,节省了试剂用量,缩短了分析时间。
树脂的粒径从200→20→10→5µm。
⒉色谱柱内径缩小树脂粒径减小使填充树脂床的色谱柱内径减小,由过去的粗长柱变为微柱。
色谱柱内径的变化为18→6→2.8→1.75mm。
⒊输压泵压力增高一般氨基酸分析仪采用低压泵,其施加于输液的压力只有几9.80665×104Pa,以后增加至几十9.80665×104Pa,现在发展到2068×104Pa。
⒋分析时间缩短由于树脂粒径的改善,色谱柱内径缩小和泵压增高,使分析时间大大缩短。
蛋白质水解液的分析时间从过去的24小时缩短到现在的半个小时左右。