日立l-8900氨基酸自动分析仪原理
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氨基酸分析仪原理、分类及几种氨基酸分析仪的比较概述氨基酸分析仪是一种分析仪器,采用经典的阳离子交换色谱分离、茚三酮柱后衍生法,对蛋白质水解液及各种游离氨基酸的组分含量进行分析。
工作原理通常细分为两种系统:蛋白水解分析系统(钠盐系统)和游离氨基酸分析系统(锂盐系统),利用不同浓度和pH值的柠檬酸钠或柠檬酸锂进行梯度洗脱。
其中钠盐系统一次最多分析约25种氨基酸,速度较快,基线平直度好;锂盐系统一次最多分析约50种氨基酸,速度较慢,基线一般不如钠盐系统好。
应用全自动氨基酸分析仪主要应用:各种物质中18种氨基酸的定性定量分析。
1.饲料上的应用:质量控制:各种饲料必需氨基酸的含量和它们之间的比例必须恰当,测定原料和产品中的氨基酸含量,以达到保证质量的目的。
真伪鉴别:鱼粉氨基酸组成特点是赖氨酸、蛋氨酸含量高,氨基酸分析结果很容易就可以区别它的真伪。
2.农业、食品、饮料及玉米、大豆、小麦等农作物的氨基酸含量进行检测;对果汁、饮料进行真伪的鉴别;检验测定茶氨酸来鉴别真伪茶叶;对酱油级别的认定。
分类氨基酸分析仪按其分离和检测方法的不同可分为两大类型。
第一类是基于阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生光度法测定的经典方法(IEC)。
此类方法于1972年获诺贝尔奖,是当今国际标准和国家标准以及仲裁和涉外的方法。
第二类是所有基于反相色谱分离、柱前衍生、荧光或紫外检测的高效液相法(HPLC)以及阴离子交换分离直接安培法检测的离子色谱法(IC)。
选型指南1、原理。
基于阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生、光度法测定的离子交换色谱法(IEC)。
此类方法由Stein和Moore两人1958年发明,并于1972年获诺贝尔奖,是当今国际标准和国家标准以及仲裁和涉外的方法。
2、重要指标。
满足分析需要的技术指标如分离度、重复性等要求,而其中的分离度又是更为重要的指标,因为,色谱理论一般以分离度达到1.2作为两峰基本分离的判定前提,只有峰分开了,才有意义去讨论定性和定量的重复性。
日立L-8900全自动氨基酸分析仪标准操作规程一. 目的为规范日立L-8900全自动氨基酸分析仪的基本操作、维护保养、异常处理程序,防止人为操作失误,确保氨基酸分析仪正常运转,特制定本程序。
二.适用范围本程序适用于日立L-8900全自动氨基酸分析仪。
三.责任1. 本程序的实施者为氨基酸分析仪操作者,各实验室负责人对本程序的实施情况进行监督。
2. 日常运行及维护、定期维护、定期点检及保养由氨基酸分析仪操作者负责。
四. 内容1.联机(1)打开电脑。
(2)打开L-8900主机电源。
(3)双击桌面的图标,进入1-1画面,双击图标,进入程序。
1-1(4)在菜单栏中依次点击和,出现1-2画面,单击联机。
大约两分钟,初始化完毕。
中Uninitialized变成Idle,图1-2变成了图1-3,各个组件可以进行控制了。
初始化完毕后,分离柱的温度逐渐上升,分离柱的温度会升到50℃。
如果打开反应柱的柱温控制,则温度大约20分钟升到135℃。
1-21-32、手动各组件控制操作(1)泵1和泵2点击,出现2-1的画面。
设置泵1,流量0.1ml/分钟,B6 100%。
点击打开泵1。
泵打开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-1点击,出现2-2的画面,设置泵2,流量0.1ml/分钟,R3 100%。
点击打开泵2。
泵打开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-2(2)自动进样器点击,出现2-3的画面,设置Sampler Wash不少于3次。
2-3(3)分离柱柱温箱点击,出现2-4画面,设置柱温50℃,设置ON,打开柱温箱。
柱温箱打开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-4(4)反应柱柱温箱点击,出现2-5画面,设置柱温135℃,设置ON,打开柱温箱。
柱温箱打开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-5(5)钨灯点击,出现2-6画面,设置ON,打开钨灯。
钨灯打开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-63、编辑方法(1)Stand By 程序(a)依次点击、、出现3-1-1的画面。
日立L-8900全自动氨基酸分析仪标准操作规程一. 目的为标准日立L-8900全自动氨基酸分析仪的根本操作、维护保养、异常处理程序,防止人为操作失误,确保氨基酸分析仪正常运转,特制定本程序。
二. 适用范围本程序适用于日立L-8900全自动氨基酸分析仪。
三.责任1. 本程序的实施者为氨基酸分析仪操作者,各实验室负责人对本程序的实施情况进展监督。
2. 日常运行及维护、定期维护、定期点检及保养由氨基酸分析仪操作者负责。
四. 内容1.联机〔1〕翻开电脑。
〔2〕翻开L-8900主机电源。
〔3〕双击桌面的图标,进入1-1画面,双击图标,进入程序。
1-1〔4〕在菜单栏中依次点击和,出现1-2画面,单击联机。
大约两分钟,初始化完毕。
中Uninitialized变成Idle,图1-2变成了图1-3,各个组件可以进展控制了。
初始化完毕后,别离柱的温度逐渐上升,别离柱的温度会升到50℃。
如果翻开反响柱的柱温控制,则温度大约20分钟升到135℃。
1-21-32、手动各组件控制操作〔1〕泵1和泵2点击,出现2-1的画面。
设置泵1,流量0.1ml/分钟,B6 100%。
点击翻开泵1。
泵翻开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-1点击,出现2-2的画面,设置泵2,流量0.1ml/分钟,R3 100%。
点击翻开泵2。
泵翻开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-2〔2〕自动进样器点击,出现2-3的画面,设置Sampler Wash不少于3次。
2-3〔3〕别离柱柱温箱点击,出现2-4画面,设置柱温50℃,设置ON,翻开柱温箱。
柱温箱翻开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-4〔4〕反响柱柱温箱点击,出现2-5画面,设置柱温135℃,设置ON,翻开柱温箱。
柱温箱翻开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-5〔5〕钨灯点击,出现2-6画面,设置ON,翻开钨灯。
钨灯翻开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-63、编辑方法〔1〕Stand By 程序〔a〕依次点击、、出现3-1-1的画面。
日立L-8900全自动氨基酸分析仪简易操作规程一、联机1、打开电脑。
2、打开主机电源。
3、双击桌面的图标,进入1-1画面,双击图标,进入程序。
1-14、在菜单栏中依次点击和,出现1-2画面,单击联机。
大约两分钟,初始化完毕。
中Uninitialized变成Idle,图1-2变成了图1-3,各个组件可以进行控制了。
初始化完毕后,分离柱的温度逐渐上升。
分离柱的温度会升到50℃。
1-21-3二、手动各组件控制操作1、泵1和泵 2点击,出现2-1的画面。
设置泵1,流量0.ml/min,B1 100%。
点击打开泵1。
泵打开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-1点击,出现2-2的画面,设置泵2,流量0.1ml/分钟,R3 100%。
点击打开泵2。
泵打开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-22、自动进样器点击,出现2-3的画面,设置Sampler Wash不少于3次。
2-32-43、反应柱柱温箱点击,出现2-5画面,设置柱温135℃,设置ON,打开柱温箱。
柱温箱打开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-52-6三、编辑方法1、依次点击、、出现3-1-1的画面。
3-1-12、选中,点击。
再依次点击、,出现3-1-2的画面。
3-1-23、在设置中选中各个柱,其余参数默认。
4、将方法另存为L8900分析方法,文件名及路径均可自选。
注意一定不要覆盖原来的方法,一定得另存。
注意将梯度设为3-3-1所示,其余参数默认。
3-3-12、保存方法。
四、编辑Sequence1、依次点击、、,出现4-1画面。
选中,其余参数默认。
4-12、点击,出现4-2画面,根据需要填写各个参数。
4-23、点击,出现4-3画面,根据需要填写各个参数。
4-34、点击,出现4-4画面,根据需要填写各个参数。
4-45、点击,出现4-5画面。
4-56、通过复制、编辑,最终将Sequence编辑如图4-6所示。
注意此时第一行是再生程序(RG),进样体积为0,Run Type是Unknown,第二行是标准样品,三行起是未知样。
氨基酸自动分析仪氨基酸是蛋白质的组成成分,是蛋白质化学研究的主要内容之一。
蛋白质是一切生命物质的基础,因此,探讨和揭示生命现象的发生、生长、新陈代谢、遗传变异过程,都与氨基酸的研究有关。
随着近代物理学、化学和电子学的飞速发展,氨基酸的分析技术亦在不断更新。
氨基酸分析仪是本世纪50年代研制的,仅40多年,已发展到现在的进样、分离、检测和数据处理全部自动化的程度。
检出量由微克分子到毫微克分子,分析时间由原来的24小时到现在的半个小时,分析技术的提高促进了其他科学领域的发展。
一、氨基酸自动分析仪的进展用于氨基酸分析的方法很多,有纸色谱法、柱色谱法、薄层色谱法、电泳法及气相色谱法等。
一般认为离子交换柱色谱法是较为精确的检测方法,氨基酸分析仪就是在此基础上研制成功的。
1951年Moor和Stein采用离子交换树脂色谱,用茚三酮试剂显色和分光光度计检测而设计,后来在Spaekman的协助下,使分析操作自动化。
迄今氨基酸分析仪的条件和自动程度有了很大的改观,其特点主要表现以下几个方面。
⒈树脂粒径减小近年来制成的小颗粒球状树脂,使氨基酸分析仪得到很大改进。
由于树脂粒径减小就对应地增加等量树脂的总面积,使现在少量树脂达到过去大量树脂的分离效果,从而减小了树脂柱的内径和体积,节省了试剂用量,缩短了分析时间。
树脂的粒径从200→20→10→5µm。
⒉色谱柱内径缩小树脂粒径减小使填充树脂床的色谱柱内径减小,由过去的粗长柱变为微柱。
色谱柱内径的变化为18→6→2.8→1.75mm。
⒊输压泵压力增高一般氨基酸分析仪采用低压泵,其施加于输液的压力只有几9.80665×104Pa,以后增加至几十9.80665×104Pa,现在发展到2068×104Pa。
⒋分析时间缩短由于树脂粒径的改善,色谱柱内径缩小和泵压增高,使分析时间大大缩短。
蛋白质水解液的分析时间从过去的24小时缩短到现在的半个小时左右。
不同种类啤酒中氨基酸含量的分析[摘要]本论文是以啤酒为研究对象,探索不同种类啤酒中氨基酸的含量。
本实验先对啤酒进行预处理,之后对预处理后的样品进行研究。
啤酒中的氨基酸含量通过日立L-8900氨基酸全自动分析仪测定,该仪器灵敏、快速、提供数据准确可靠、分辨率高、操作简单、分析周期短。
通过一系列实验之后,得出精酿啤酒比市售啤酒的总游离氨基酸含量高,且精酿啤酒与市售啤酒中的脯氨酸含量均为最高;而且精酿啤酒相较于市售啤酒口感更佳;两种啤酒中部分必需氨基酸高于FAO/WHO理想氨基酸构成比例,而部分则低于FAO/WHO理想氨基酸构成比例。
[关键词]啤酒;氨基酸分析仪;游离态氨基酸第一章绪论啤酒主要由是麦芽、啤酒花、水等原料组成。
它是继饮用水和茶之后人类饮用的第三大饮料[1]。
啤酒约含有17种氨基酸,其中7种是必不可少的,不是人体合成且必不可少的氨基酸。
啤酒中的氨基酸有两种形式:1.以蛋白质或蛋白质的形式存在2.存在于溶解状态的啤酒中。
啤酒中的游离氨基酸含量越高,越接近人体蛋白质的氨基酸组成,消化吸收时人体的营养价值越高。
课题旨在通过对不同种类啤酒游离氨基酸含量的测定,确定啤酒中含有氨基酸,并比较精酿啤酒与市售啤酒中游离氨基酸不同,为了获得更高含量的啤酒中的游离氨基酸。
“工业啤酒”:当麦芽汁和啤酒花煮沸至10°C以下时,添加制作Lager型啤酒的酵母,但添加后,它会下沉至麦芽汁的最低端。
发酵罐也较大,可实现批量生产,发酵时间短,一般为7天,以控制时间成本。
过滤和母线灭菌将在发酵后进行,以延长啤酒的保质期。
“精酿啤酒”:当将麦芽汁和啤酒花煮沸并冷却至15℃时,加入制造Ale型啤酒的酵母。
添加后,将在麦芽汁顶部开始发酵,发酵时间更长,一般需要2个月左右。
为了确保啤酒的原始风味和味道,通常在发酵后不进行过滤和灭菌。
1.1啤酒的营养价值⑴啤酒含有多种氨基酸:啤酒约有十多种氨基酸,其中,光我们人体必需吸收的氨基酸就有7种,仅缺色氨酸这一种。
氨基酸自动分析仪氨基酸是蛋白质的组成成份,是蛋白质化学研究的要紧内容之一。
蛋白质是一切生命物质的基础,因此,探讨和揭露生命现象的发生、生长、新陈代谢、遗传变异进程,都与氨基酸的研究有关。
随着近代物理学、化学和电子学的飞速进展,氨基酸的分析技术亦在不断更新。
氨基酸分析仪是本世纪50年代研制的,仅40连年,已进展到此刻的进样、分离、检测和数据处置全数自动化的程度。
检出量由微克分子到毫微克分子,分析时刻由原先的24小时到此刻的半个小时,分析技术的提高增进了其他科学领域的进展。
一、氨基酸自动分析仪的进展用于氨基酸分析的方式很多,有纸色谱法、柱色谱法、薄层色谱法、电泳法及气相色谱法等。
一样以为离子互换柱色谱法是较为精准的检测方式,氨基酸分析仪确实是在此基础上研制成功的。
1951年Moor和Stein采纳离子互换树脂色谱,用茚三酮试剂显色和分光光度计检测而设计,后来在Spaekman的协助下,使分析操作自动化。
迄今氨基酸分析仪的条件和自动程度有了专门大的改观,其特点要紧表现以下几个方面。
⒈树脂粒径减小最近几年来制成的小颗粒球状树脂,使氨基酸分析仪取得专门大改良。
由于树脂粒径减小就对应地增加等量树脂的总面积,使此刻少量树脂达到过去大量树脂的分离成效,从而减小了树脂柱的内径和体积,节省了试剂用量,缩短了分析时刻。
树脂的粒径从200→20→10→5µm。
⒉色谱柱内径缩小树脂粒径减小使填充树脂床的色谱柱内径减小,由过去的粗长柱变成微柱。
色谱柱内径的转变为18→6→→。
⒊输压泵压力增高一样氨基酸分析仪采纳低压泵,其施加于输液的压力只有几×104Pa,以后增加至几十×104Pa,此刻进展到2068×104Pa。
⒋分析时刻缩短由于树脂粒径的改善,色谱柱内径缩小和泵压增高,使分析时刻大大缩短。
蛋白质水解液的分析时刻从过去的24小时缩短到此刻的半个小时左右。
⒌仪器灵敏度提高由于仪器的不断改良,使灵敏度大为提高,过去仪器的最高灵敏度已远不及此刻仪器的最低灵敏度。
酸水解—全自动氨基酸分析仪测定蜂蜜中17种氨基酸摘要运用酸水解法和全自动氨基酸分析技术,建立蜂蜜中氨基酸的测定方法。
17种氨基酸的线性范围为1~100 μmoL/L,线性回归系数均在0.999以上,加标回收率为88%~106%。
该方法测定了蜂蜜中的17种氨基酸,结果令人满意。
关键词蜂蜜;全自动氨基酸分析仪;酸水解;氨基酸;测定蜂蜜是蜜蜂采集花蜜酿制的,而花是植物的生殖器官,植物的精华大部分聚集于此,蜜蜂采集植物的“精华”,含有多种分解酶的唾液与其融合酿造而成的,是大自然奉献给人类的天然保健食品,味道甜蜜且营养丰富。
蜂蜜主要成分除葡萄糖和果糖外,还富含人体必需的多种氨基酸营养成分[1]。
不同产地、不同花种蜂蜜主要成分基本相同,但是其中的氨基酸含量不尽相同。
目前氨基酸的分析方法[2]主要有化学方法、荧光光谱法、电化学方法和分光光度法等。
其中荧光光谱法具有较高的灵敏度和较低的检出限,特别是全自动氨基酸分析仪[3-7](荧光检测器)分析法具有较高的灵敏度和较强的操作和分析自动化能力。
本文运用酸水解-全自动氨基酸分析仪法技术,建立了快速、简便而准确测定油菜蜜、洋槐蜜、紫云英蜜、枣花蜜等安徽省常见4种蜂蜜中17种氨基酸检测的方法,并解析天然蜂蜜中氨基酸的含量。
现将该测定方法总结如下。
1 材料与方法1.1 主要仪器与试剂仪器:日立L-8900氨基酸自动分析仪(配有荧光检测器),干燥箱,真空泵,水解管:耐压螺盖玻璃管(体积为20~30 mL)。
试剂:盐酸(优级纯),重蒸苯酚,柠檬酸钠的缓冲溶液,茚三酮溶液(二甲基亚砜150 mL+pH值5.2乙酸锂溶液50 mL+水合茚三酮4 g+还原茚三酮0.12 g)。
混合氨基酸标准溶液2.5 mmoL/mL,SIGMA。
1.2 仪器分析条件检测器类型:荧光检测器(VIS);检测波长:570、440 nm;色谱柱:离子交换柱,柱温60 ℃;进样体积:20 μL;流动相;柠檬酸缓冲液,流速0.4 mL/min;柱后反应柱的柱温:135 ℃。