逍遥散防治阿尔茨海默病的作用及配伍机制_王虎平
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【Abstract】 Objective To investigate the effect of Xiaoyao Powder on the memory function and activity of SOD，MDA，ChAT and AchE in serum of Alzheimer＇s disease （ AD） model mice and discuss the effect and mechanism of Xiaoyao Powder on the AD and explain the compatibility mechanism of combination of Shugan，Yangxue and Jianpi of Xiaoyao Powder． Methods 60 SPF mice were divided into the blank control，model and Quanfang，Shugan Jianpi，Shugan Yangxue，Jianpi Yangxue groups，with 10 mice in each group． AD model mice was made by injecting D-gal． While，AD model mice was prevented by Quanfang，Shugan Jianpi，Shugan Yangxue，Jianpi Yangxue of Xiaoyao Powder． At the 41st day，the ability of learning and memory training was done． At 42nd day，the memory function was detected and then to measure content of SOD，MDA，ChAT，AchE in serum． Ｒesults Quanfang，Shugan Jianpi，Shugan Yangxue，Jianpi Yangxue of Xiaoyao Powder could improve memory function of AD model mice，and could improve SOD，ChAT and decrease MDA and AchE，but the effect of Quanfang group of Xiaoyao Powder was most obvious． Conclusions Xiaoyao powder can better improve the memory function，antioxidant activity and neurotransmitter of A D model mice，has better prevention and treatment on the AD． The Shugan，Yangxue，Jianpi is effective in preventing and treating AD prescription structure．
The effect and compatibility mechanism of Xiaoyao Powder on the Alzheimer＇s disease WANG Hu-Ping，WU Hong-Yan． Gansu University of Chinese Medicine，Lanzhou 730000，Gansu，China
础与临床应用研究。 第一作者： 王虎平（ 1980-） ，男，硕士，在读博士，主要从事老年病的中医
药防治研究。
单元药组的拆方配对研究。
1 材料与方法 1. 1 主要材料 60 只 KM 种 SPF 级小鼠，（ 20 ± 2） g，雌、雄各 半，购自甘肃中医药大学动物中心，实验动物合格证号： SCXK （ 甘） 2004-0006。逍遥散各组成生药（ 柴胡、薄荷、当归、白芍、 白术、茯 苓、煨 姜、甘 草） 均 购 自 甘 肃 中 医 药 大 学 附 属 医 院。 SOD、MDA、AchE、ChAT 试剂盒及考马斯亮蓝蛋白测试盒均购 自南京建成生物化学试剂有限公司，批号： 20100522； D-半乳糖 购自北 京 中 泰 化 学 试 剂 公 司，批 号： 20100514。小 鼠 跳 台 仪 （ DT-200） 、小鼠避暗自动测试仪（ BA-200） 均购自成都泰盟科 技有限公司。 1. 2 方法 60 只 KM 种 SPF 级小鼠，随机分为空白组、模型 组、逍遥散全方组、疏肝健脾组、疏肝养血组、健脾养血组，每组 10 只。空白组小鼠每天腹腔注射生理盐水 24 ml / kg，其余各组 小鼠每天腹腔注射 D-半乳糖 120 mg / kg（ 浓度为 5 mg / ml） 复制 AD 小鼠模型〔6〕。造模同时，空白组及模型组小鼠每天灌胃生 理盐水 0. 2 ml /10 g，逍遥散全方及各配伍药组小鼠每天灌胃各 组对应药物水煎液 0. 2 ml /10 g。逍遥散方中各组成药物的剂
基金项目： 国家自然科学基金项目（ No． 81060284 ） ； 甘肃省中药药理与 毒理学重点实验室开放基金项目（ No． ZDSYS-KJ-2013-010） ； 甘肃中医药大学中青年基金项目（ No． 2010-11）
1 甘肃省中医方药挖掘与创新转化重点实验室 甘肃省中药药理与 毒理学重点实验室 甘肃省中药新产品创制工程实验室 通讯作者： 吴红彦（ 1963-） ，男，博士生导师，教授，主要从事复方物质基
【Key words】 Xiaoyao Powder； Alzheimer＇s disease； Memory function； SOD； MDA； ChAT； AchE
阿尔茨海默病（ AD） 是一种进行性发展的神经系统退行性 疾病，现代医学对其发病机制的认识处于几种“学说”阶段，相 应的对症治疗不能满足临床患者的需求。前期研究中，本课题 组以调和肝脾之名方逍遥散（ 《太平惠民和剂局方》） 对 AD 小 鼠模型进行了干预研究，初步确证了逍遥散对 AD 的防治作 用〔1 ～ 5〕。为了进一步探索逍遥散防治 AD 的配伍结构、精选防 治 AD 的主要药物，本研究以记忆功能及血清超氧化物歧化酶 （ SOD） 、丙二醛（ MDA） 、胆碱乙酰转移酶（ ChAT） 、乙酰胆碱酯 酶（ AchE） 活性为考察指标对逍遥散进行了疏肝、健脾、养血为
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中国老年学杂志 2016 年 8 月第 36 卷
逍遥散防治阿尔茨海默病的作用及配伍机制
王虎平1 吴红彦1 （ 甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000）
〔摘 要〕 目的 探讨逍遥散对 D-半乳糖致阿尔茨海默病（ AD） 小鼠模型记忆能力及血清超氧化物歧化酶（ SOD） 、胆碱乙酰转移酶（ ChAT） 、 乙酰胆碱酯酶（ AchE） 活性与丙二醛（ MDA） 水平的影响。方法 60 只 KM 种 SPF 级小鼠随机分为空白组、模型组、逍遥散全方组、疏肝健脾组、疏肝 养血组、健脾养血组，每组 10 只。腹腔注射 D-半乳糖复制拟 AD 小鼠模型并以逍遥散全方及各配伍药组进行干预，给药第 41 天 进行学习能力训练， 第 42 天进行记忆功能测试，然后股动脉取血测定血清 SOD、ChAT、AchE 活性及 MDA 水平。结果 逍遥散全方及各配伍药组皆可延长小鼠记忆潜伏 时间，减少错误次数，提高血清 SOD、ChAT 活性，降低 AchE 活性与 MDA 水平，但记忆功能及血清 SOD、MDA、ChAT、AchE 的改善皆以逍遥散全方组 最明显。结论 逍遥散能较好地改善拟 AD 模型小鼠记忆功能、抗氧化能力及中枢神经递质活性。疏肝、健脾、养血是有效防治 AD 的统一体，缺一 不可。
2结果 2. 1 逍遥散对 AD 模型小鼠记忆功能的影响（ 跳台法） 模型 组小鼠记忆潜伏时间缩短，错误次数增多，与空白组相比差异显 著（ P ＜ 0. 01） 。逍遥散全方及各配伍药组均可延长小鼠记忆潜伏时 间、减少错误次数，与模型组相比差异显著（ P ＜ 0. 01或P ＜ 0. 05） ； 但差异以逍遥散全方组最明显，且与疏肝健脾组、疏肝养血组及健 脾养血组相比有统计学意义（ P ＜ 0. 05） 。见表 1。 2. 2 逍遥散对 AD 模型小鼠记忆功能的影响（ 避暗法） 模型 组小鼠记忆潜伏时间缩短，错误次数增多，与空白组相比差异显 著（ P ＜ 0. 01） 。逍遥散全方及各配伍药组均可延长小鼠记忆潜伏 时间、减 少 错 误 次 数，与 模 型 组 相 比 差 异 显 著 （ P ＜ 0. 01 或 P ＜ 0. 05） ； 但差异以逍遥散全方组最明显，且与疏肝健脾组、疏肝 养血组及健脾养血组相比有统计学意义（ P ＜ 0. 05） 。见表 2。
错误次数（ 次）
1． 04 ± 0． 712） 4． 39 ± 1． 15 1． 81 ± 0． 942） 3． 07 ± 0． 981） 3） 2． 95 ± 1． 031） 3） 3． 02 ± 1． 141） 3）
表 2 逍遥散对 AD 模型小鼠记忆功能的 影响（ 避暗法） （ x ± s）
组别
空白组 模型组 逍遥散全方组 疏肝健脾组 疏肝养血组 健脾养血组
n 记忆潜伏时间（ s）
9 215． 22 ± 83． 742） 10 69． 34 ± 74． 37 9 191． 94 ± 82． 172） 10 114． 95 ± 81． 231） 3） 8 127． 53 ± 78． 511） 3） 10 193． 43 ± 77． 981）
表 1 逍遥散对 AD 模型小鼠记忆功能的 影响（ 跳台法） （ x ± s）
组别
空白组 模型组 逍遥散全方组 疏肝健脾组 疏肝养血组 健脾养血组
n 记忆潜伏时间（ s）
9 264． 31 ± 96． 732） 10 78． 22 ± 93． 17 9 184． 33 ± 93． 722） 10 124． 57 ± 90． 281） 3） 8 129． 43 ± 84． 311） 3） 10 132． 44 ± 87． 921） 3）
The effect and compatibility mechanism of Xiaoyao Powder on the Alzheimer＇s disease WANG Hu-Ping，WU Hong-Yan． Gansu University of Chinese Medicine，Lanzhou 730000，Gansu，China
础与临床应用研究。 第一作者： 王虎平（ 1980-） ，男，硕士，在读博士，主要从事老年病的中医
药防治研究。
单元药组的拆方配对研究。
1 材料与方法 1. 1 主要材料 60 只 KM 种 SPF 级小鼠，（ 20 ± 2） g，雌、雄各 半，购自甘肃中医药大学动物中心，实验动物合格证号： SCXK （ 甘） 2004-0006。逍遥散各组成生药（ 柴胡、薄荷、当归、白芍、 白术、茯 苓、煨 姜、甘 草） 均 购 自 甘 肃 中 医 药 大 学 附 属 医 院。 SOD、MDA、AchE、ChAT 试剂盒及考马斯亮蓝蛋白测试盒均购 自南京建成生物化学试剂有限公司，批号： 20100522； D-半乳糖 购自北 京 中 泰 化 学 试 剂 公 司，批 号： 20100514。小 鼠 跳 台 仪 （ DT-200） 、小鼠避暗自动测试仪（ BA-200） 均购自成都泰盟科 技有限公司。 1. 2 方法 60 只 KM 种 SPF 级小鼠，随机分为空白组、模型 组、逍遥散全方组、疏肝健脾组、疏肝养血组、健脾养血组，每组 10 只。空白组小鼠每天腹腔注射生理盐水 24 ml / kg，其余各组 小鼠每天腹腔注射 D-半乳糖 120 mg / kg（ 浓度为 5 mg / ml） 复制 AD 小鼠模型〔6〕。造模同时，空白组及模型组小鼠每天灌胃生 理盐水 0. 2 ml /10 g，逍遥散全方及各配伍药组小鼠每天灌胃各 组对应药物水煎液 0. 2 ml /10 g。逍遥散方中各组成药物的剂
基金项目： 国家自然科学基金项目（ No． 81060284 ） ； 甘肃省中药药理与 毒理学重点实验室开放基金项目（ No． ZDSYS-KJ-2013-010） ； 甘肃中医药大学中青年基金项目（ No． 2010-11）
1 甘肃省中医方药挖掘与创新转化重点实验室 甘肃省中药药理与 毒理学重点实验室 甘肃省中药新产品创制工程实验室 通讯作者： 吴红彦（ 1963-） ，男，博士生导师，教授，主要从事复方物质基
【Key words】 Xiaoyao Powder； Alzheimer＇s disease； Memory function； SOD； MDA； ChAT； AchE
阿尔茨海默病（ AD） 是一种进行性发展的神经系统退行性 疾病，现代医学对其发病机制的认识处于几种“学说”阶段，相 应的对症治疗不能满足临床患者的需求。前期研究中，本课题 组以调和肝脾之名方逍遥散（ 《太平惠民和剂局方》） 对 AD 小 鼠模型进行了干预研究，初步确证了逍遥散对 AD 的防治作 用〔1 ～ 5〕。为了进一步探索逍遥散防治 AD 的配伍结构、精选防 治 AD 的主要药物，本研究以记忆功能及血清超氧化物歧化酶 （ SOD） 、丙二醛（ MDA） 、胆碱乙酰转移酶（ ChAT） 、乙酰胆碱酯 酶（ AchE） 活性为考察指标对逍遥散进行了疏肝、健脾、养血为
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中国老年学杂志 2016 年 8 月第 36 卷
逍遥散防治阿尔茨海默病的作用及配伍机制
王虎平1 吴红彦1 （ 甘肃中医药大学，甘肃 兰州 730000）
〔摘 要〕 目的 探讨逍遥散对 D-半乳糖致阿尔茨海默病（ AD） 小鼠模型记忆能力及血清超氧化物歧化酶（ SOD） 、胆碱乙酰转移酶（ ChAT） 、 乙酰胆碱酯酶（ AchE） 活性与丙二醛（ MDA） 水平的影响。方法 60 只 KM 种 SPF 级小鼠随机分为空白组、模型组、逍遥散全方组、疏肝健脾组、疏肝 养血组、健脾养血组，每组 10 只。腹腔注射 D-半乳糖复制拟 AD 小鼠模型并以逍遥散全方及各配伍药组进行干预，给药第 41 天 进行学习能力训练， 第 42 天进行记忆功能测试，然后股动脉取血测定血清 SOD、ChAT、AchE 活性及 MDA 水平。结果 逍遥散全方及各配伍药组皆可延长小鼠记忆潜伏 时间，减少错误次数，提高血清 SOD、ChAT 活性，降低 AchE 活性与 MDA 水平，但记忆功能及血清 SOD、MDA、ChAT、AchE 的改善皆以逍遥散全方组 最明显。结论 逍遥散能较好地改善拟 AD 模型小鼠记忆功能、抗氧化能力及中枢神经递质活性。疏肝、健脾、养血是有效防治 AD 的统一体，缺一 不可。
2结果 2. 1 逍遥散对 AD 模型小鼠记忆功能的影响（ 跳台法） 模型 组小鼠记忆潜伏时间缩短，错误次数增多，与空白组相比差异显 著（ P ＜ 0. 01） 。逍遥散全方及各配伍药组均可延长小鼠记忆潜伏时 间、减少错误次数，与模型组相比差异显著（ P ＜ 0. 01或P ＜ 0. 05） ； 但差异以逍遥散全方组最明显，且与疏肝健脾组、疏肝养血组及健 脾养血组相比有统计学意义（ P ＜ 0. 05） 。见表 1。 2. 2 逍遥散对 AD 模型小鼠记忆功能的影响（ 避暗法） 模型 组小鼠记忆潜伏时间缩短，错误次数增多，与空白组相比差异显 著（ P ＜ 0. 01） 。逍遥散全方及各配伍药组均可延长小鼠记忆潜伏 时间、减 少 错 误 次 数，与 模 型 组 相 比 差 异 显 著 （ P ＜ 0. 01 或 P ＜ 0. 05） ； 但差异以逍遥散全方组最明显，且与疏肝健脾组、疏肝 养血组及健脾养血组相比有统计学意义（ P ＜ 0. 05） 。见表 2。
错误次数（ 次）
1． 04 ± 0． 712） 4． 39 ± 1． 15 1． 81 ± 0． 942） 3． 07 ± 0． 981） 3） 2． 95 ± 1． 031） 3） 3． 02 ± 1． 141） 3）
表 2 逍遥散对 AD 模型小鼠记忆功能的 影响（ 避暗法） （ x ± s）
组别
空白组 模型组 逍遥散全方组 疏肝健脾组 疏肝养血组 健脾养血组
n 记忆潜伏时间（ s）
9 215． 22 ± 83． 742） 10 69． 34 ± 74． 37 9 191． 94 ± 82． 172） 10 114． 95 ± 81． 231） 3） 8 127． 53 ± 78． 511） 3） 10 193． 43 ± 77． 981）
表 1 逍遥散对 AD 模型小鼠记忆功能的 影响（ 跳台法） （ x ± s）
组别
空白组 模型组 逍遥散全方组 疏肝健脾组 疏肝养血组 健脾养血组
n 记忆潜伏时间（ s）
9 264． 31 ± 96． 732） 10 78． 22 ± 93． 17 9 184． 33 ± 93． 722） 10 124． 57 ± 90． 281） 3） 8 129． 43 ± 84． 311） 3） 10 132． 44 ± 87． 921） 3）
