蒲公英糖蛋白的体外抗氧化研究_钟洁
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蒲公英多糖对仔猪生长性能、血清抗氧化和免疫功能的影响许万鑫;时言超;张爱忠;赵磊;李沐阳【期刊名称】《饲料工业》【年(卷),期】2024(45)11【摘要】试验旨在研究蒲公英多糖(TMP)对仔猪生长性能、血清抗氧化和免疫功能的影响。
选用健康、体重相近的21日龄仔猪48头,随机分成4组,每组4个重复,每个重复3头猪。
对照组饲喂基础日粮,试验组分别饲喂在基础日粮中添加0.5、1.0、2.0 g/kg蒲公英多糖的试验日粮,试验期30 d。
测定仔猪生长性能、血清抗氧化指标和免疫指标。
结果表明:日粮中添加2.0 g/kg蒲公英多糖显著提高了仔猪的平均日增重和平均日采食量(P<0.05)。
日粮中添加0.5、1.0、2.0 g/kg蒲公英多糖显著提高了血清碱性磷酸酶(AKP)活性和总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05),显著降低了皮质酮(COR)、丙二醛(MDA)、蛋白质羰基(PC)含量(P<0.05);日粮中添加1.0、2.0 g/kg蒲公英多糖显著提高了胰岛素(INS)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),日粮中添加1.0 g/kg蒲公英多糖显著降低了谷丙转氨酶(GPT)活性(P<0.05);日粮中添加2.0 g/kg蒲公英多糖显著提高了胰岛素样生长因子-1(IGF-1)含量(P<0.05)。
日粮中添加1.0、2.0 g/kg蒲公英多糖显著提高了免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、白细胞介素-2(IL-2)含量及溶菌酶(LZM)活性(P<0.05)。
综上所述,日粮中添加1.0~2.0 g/kg蒲公英多糖对断奶仔猪生长性能、抗氧化和免疫功能均具有促进作用。
【总页数】5页(P32-36)【作者】许万鑫;时言超;张爱忠;赵磊;李沐阳【作者单位】黑龙江八一农垦大学动物科技学院【正文语种】中文【中图分类】S816.7【相关文献】1.甘草多糖对断奶仔猪生长性能、血常规、血清生化指标及抗氧化性能的影响2.母源性博落回提取物对宫内发育迟缓断奶仔猪生长性能、血清抗氧化和免疫功能的影响3.壳寡糖对断奶仔猪生长性能、血清抗氧化及免疫功能的影响4.富硒恩施堇叶碎米荠对断奶仔猪生长性能、血清抗氧化及免疫功能的影响5.日粮添加杜仲叶粉对断奶仔猪生长性能、血清抗氧化指标和免疫功能的影响因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
第39卷总第110期 2018年6月西北民族大学学报(自然科学版)Journal of Northwest Minzu University (Natural Science)!o l.39,No.2June,2018蒲公英根提取物的体内抗氧化活性刘佳慧!,刘阳!,王冬梅2西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730030;2.西北民族大学实验中心,甘肃兰州730030)[摘要]利用乙醇索式提取方法提取蒲公英根中的总黄酮类物质.以生理盐水和芦丁作阴阳性对照,高、中、低剂量提取物(50mg/kg、150mg/kg、300mg/kg)对衰老模型小鼠灌胃给药,测定小鼠血清和肝组织中的超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)活性和丙二醛(M DA)水平,分析提取物的抗氧化活性.结果表明:蒲公英根总黄酮类物质的提取率约为6.55 %,中、高剂量的根提取物可增加机动物体内SOD、GSH- P x的酶活力,降低M D A含量,具有与 芦丁相似的抗衰老抗氧化作用.[关键词]蒲公英根;总黄酮类;体内抗氧化[中图分类号]1282 [文献标识码]A[文章编号]1009-2102(2018)02-0053-04氧化和自由基的产生是机体衰老和疾病的最大威胁[1].糖尿病、心脑血管疾病、慢性肾功能衰竭、缺 血-再灌注损伤&衰 有氧应激.植物中有效成分的药理人类的保健作用等的研究中药材研究领域的.植物天然总黄酮有 糖、降血脂& 疏松、抗氧化和消除自由基等生物活性作用,还可降低罹患结、前 、乳 症的风险[2#].植物提取物具有安全、稳定、可控、无毒 ,因此,从植物中寻找高效、廉价、无毒的天然抗氧化剂已成为目前保健医学发展的一个必然趋势[4].蒲公英$](T a r a x acUm〇f f1Cn a la)别号婆婆丁、丁奶奶、灯笼草及奶汁草等,是一种多年生草本植物和中药材$].其性味苦寒,具有消痛散结的作用,为中医传统毒药物,赋有“天 生素”的美称.蒲公英富生素及矿,如钾、镁、铁、钙、铜等,含有 活 分,如生物碱类、有机酸类及黄酮类化合, 有抗肿瘤、防衰老、降血糖、降血脂等药理功用[2’5],国内 有对蒲公英整株抗氧化性的研究.实 产蒲公英的根为实验材料,提取根中的总黄酮类物质,对提取物的体内抗氧化性活性探讨#蒲公英中生物活的研究 发利用奠定一些实验基础.1材料与方法1.1 原料、试剂与仪器蒲公英:于9月底采摘于兰州某高校榆中校区,依据《中国药物志》本地生蒲公英属药用蒲公英(T. officnala).试样预处理:经恒温干燥、粉碎于干燥容器中备用.[收稿日期]2018-04-02[基金项目]西北民族大学校级开放项目(SYSKF-2017161 ;SYSKF-2017163).[通讯作者]刘冬梅,女#,硕士,主要从事微生物学与免疫学方面的研究.[作者简介]刘佳慧,女,研究方向:免疫学.53试验动物:健康雄性小鼠36只,雌鼠24只,用基础饲料适应性喂养1周后,随机分为六组,每组雄鼠6只,雌鼠4只.分组后记录每只体重约19 . 22g.超氧化物歧化酶(S O D)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(G S H-p x)试剂盒、丙二醛(M D A)试剂盒;芦 丁、D-半乳糖、乙醇、乙醚、硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等均为分析纯试剂.设备及器材:干燥烘箱,离心机,电热恒温水浴锅,紫外可见光分光光度计,粉碎机,玻璃勻浆器等. 1.2 实验方法1.2.1芦丁的标准曲线采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色体系测定[6].分别移取芦丁标准品溶液〇.〇、1.〇、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0m l与25m l容量瓶中,初加30%乙醇至12.5m l,加人5%N a N O21m l,6m in后加人 10%A l(N O3)31m l,6m in后加 1m o l/L N a O H 10m l,再用 30%乙醇定容,摇勻,15m in后以 空白试剂为参比,510n m波长处测定吸光度.以芦丁浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制标准曲线. 1. 2. 2蒲公英根总黄酮的提取将采集的蒲公英根清洗晾晒,65X干燥烘箱中烘干36h后粉碎,过80目筛,每次准确称取蒲公英根粉末5.0g,放人圆底烧瓶中,加人200m l无水乙醇,用索式提取法50X下萃取2h,将所得溶液用旋转蒸发仪蒸馏[2]浓缩得到总黄酮粗提取物.提取物中总黄酮定量以芦丁为标准品,采用显色体系进行定量测定[7].总黄酮物质的提取率计算公式:提取率/% + C X V X n/m X 100%公式中,+提取液稀释倍数;C:被测液中黄酮类物质浓度(g/m L);V:提取液体积(m L);m:蒲公英干粉的质量(g).1.2.3动物抗氧化实验实验设计共六组,分别为阴阳性对照组、模型组和给药组.阳性对照组、模型组和给药组皮下注射D -半乳糖300m g八k g •d).造模同时各组灌胃给药,小鼠每天灌胃一次,连续28天;阳性对照组芦丁100m g八kg •d)灌胃,阴性对照组灌等量生理盐水,给药组以分别高、中、低剂量提取物(50m g / (k g •d)、150m g/(k g •d)、300m g/(k g •d)灌胃.1.2.4测试样品的处理和指标检测动物喂养结朿后,禁食12 h,摘眼球取血,3000 r p m离心5 m+分离血清备用$].颈椎脱臼法处死小鼠后无菌取出小鼠肝脏,用冰冷的生理盐水洗涤数次,滤纸吸干水分,称取0.5g放人无菌平皿中剪碎,转人玻璃勻浆器,加相应试剂盒中的提取液5m l,冰浴勻浆为10 %的肝组织勻浆,4X、8000g离心 10m m,取上清液置冰上待用.小鼠血清和肝组织各指标的检测方法参照试剂盒说明.超氧化物歧化酶(SO D)活力采用羟胺法;谷胱甘 肽过氧化物酶(G S H-p x)活力测定采用比色法;丙二醛(M D A)含量测定采用硫代巴比妥酸(F A)测定法.1.2.5数据分析试验数据用E x c e l进行整理,结果用X± S表8,用Spss S ta tistics V17. 0法进行t检验.2结果与分析2.1 蒲公英根总黄酮的提取芦丁标准溶液在509n m处有最大吸收峰,以芦丁浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制标准曲线见图1.拟合得回归方程:%+ 0.0744X-0. 2946,R2 + 0.9995.蒲公英根总黄酮的提取率6.55 %.董默$]报 道的蒲公英提取率为4. 33%.本实验总黄酮提取物的提取率较高,原因可能与取样仅为蒲公英根部有关,有研究[6]认为蒲公英整株中根的总黄酮含量最高.2.2提取物对S O D、G S H酶活性和M D A的影响衡量抗氧化能力常用的指标有超氧化物歧化酶(S O D)、谷胱甘肽过氧化物酶(G S H-P x)和丙二醛54(M D A )[7].用不同剂量蒲公英根的提取物对小鼠灌胃给药后,提取物对小鼠血清和肝组织中S O D 、G S H 酶活性和M D A 的影响,结果见表1.3.表!提取物对小鼠血清和肝组织中S O D 的影响(x ± = 10)超氧化物歧化酶(SOD )姐 刀U血清/(U/mg prot )+ (U/mg prot )阳性对照组210.18a ±43.91418.27±35.48阴性对照组145.19±45.91354.97±40.09模型组112.73b ±31.36267.53±24.36低剂量组154.779±47.25372.94±65.15中剂量组246.56c ±59.48472.97±68.38高剂量组286.53c ±67.34494.01 ±80.68表2提取物对小鼠血清和肝组织中GSH -P x 的影响(x ±= 10)(x ± = 10)组另1」谷胱甘肽过氧化物酶(GSH -Px )血清/(nmol /min/mg prot )月干(nmol /min/mg prot )阳性对照组235.84a ±44.70255.22b ±62.92阴性对照组218.63±39.34233.06±43.51模型组204.73b ±31.36230.53±24.36低剂量组255.98b ±48.76234.818±45.26中剂量组278.39b ±33.37244.688±51.78高剂量组299.80@±55.70251.01b ±58.43表3提取物对小鼠血清和肝组织中M D A 相对含量的影响(X ± S , w = 10)组另0丙二醛(M DA )血清 /(nmol /mgprot )月干(nmol /mgprot )阳性对照组 2.89±0.421.87±0.59阴性对照组2.28a ±0.891.72±0.45模型组 3.64b ±0.402.35±0.36低剂量组 2.47b ±0.621.99±0.51中剂量组 1.75c ±0.541.77±0.49高剂量组1.56<±0.45 1.55±0.44注:与阴性对照组相比<!">0.05,#"<0.05,c "<0.01.从表中的实验数据可以看出,实验中衰老小鼠的模型造模是成功的.模型组与阴性对照组相比,小 鼠的血清和组织中的S O D 、G S H -P x 的酶活力均下降显著,M D A 含量上升明显(P <0.05).超氧化物歧化酶(S O D )是体内一种重要的氧 基清除剂,对机体的氧化与抗氧化平衡有着重要55的作用.体内自由基水平失衡时会导致肿瘤、衰老、炎症等各种疾病[3],S O D能清除超氧离子自由基o r•,保护细胞免受损伤,其活力的高低与疾病的发生发展有着密切的关系.实验数据显示:低剂量给药组和阴性对照组之间无显著差异(p>〇.05 ),中、高剂量组和阳性对照组显著高于阴性对照组(P< 0.01),蒲公英根提取物浓度与S O D活性呈正相关,酶的活性随提取物浓度的增加而升高.中高剂量蒲公英根提取物可明显提高小鼠血清和肝脏中S O D活性.过氧化脂质(L P O)是自由基对不饱和脂肪酸引发的脂质过氧化作用的最终产物,其含量的多少反映组织细胞的脂质过氧化速率或强度.G S H-P x是细胞内抗脂质过氧化作用的酶性防御体系的主要成分,可催化L P O分解生成相应的醇,防止L P O均裂和引发脂质过氧化作用的链式支链反应,减少L P O 的生成以保护机体免受损害.本实验中,提取物低剂量给药组与阴性对照组间G S H-P x活性无显著差异(P>0.05),中、高剂量组G S H活性显著高于阴性对照组(P<0.01),蒲公英根提取物对G S H活性的影 响呈正相关.根提取物可清除脂类氢过氧化物,清除H2O2.丙二醛(M D A)是体内脂类过氧化物的主要代表,其水平的高低可以反映体内不饱和脂质的过氧化程度,间接地反映机体产生自由基的水平和细胞膜的损伤程度[8].实验数据显示,各处理组与阴性对照组中小鼠肝脏和血清中M D A的影响存在显著差异(P<0.01),低剂量组与阳性对照组之间无显著差异(P>0.05),随着提取物浓度与M D A的含量呈负相关.近年来研究表明糖尿病和高血压、慢性肾功能衰竭、缺血-再灌注损伤等以及衰老均伴有氧应激.G S H-P x活性降低可能是动脉粥样硬化发生的独立危险因素,与动脉粥样硬化、原发性高血压、心肌炎 等均密切有关[2’3’11].G S H-P x降低还可能与脑智力发育障碍,大脑缺血、缺氧损伤、神经变性及重金属中毒有关.综合分析实验数据,阳性对照组与提取物中、高剂量给药组中,小鼠血清和组织中的S O D、G S H-P x的酶活力、M D A含量相近,这些实验组与模型组比较,实验结果差异显著(P<0.05),说明中、高剂量的蒲公英根总黄酮提取物和芦丁有相似的作用,能抵抗由D-半乳糖引起的衰老现象.植物中有效成分的药理及对人类的保健作用等的研究已成为中药材研究领域的热点$].虎眼万年青、银杏叶、蒲公英、姜黄素和某些中草药提取物中活性成分,如皂苷、生物碱、总黄酮、萜类内酯、有机酸 类、糖类、氨基酸类、香豆素类等的抗氧化研究均有文献报道$,11].本实验中,蒲公英根总黄酮的提取率达6.55%,中、高剂量根提取物可有效地提高机体内S O D、G S H-P x的酶活力、降低M D A水平,说明甘肃本地生蒲公英根中总黄酮类物质的含量较高,有较好的抗自由基、抗衰老的活性.作为天然抗氧化剂的来源,本地区蒲公英根有一定的开发和利用价值.参考文献:$]陆海峰,罗建华,蒙春越,等.蒲公英总黄酮提取及对羟自由基清除作用$].广州化工,2009,37(3) (01-103.$]杨楠,贾晓斌,张振海,孙娥,严红梅.黄酮类化合物抗肿瘤活性及机制研究进展$].中国医药科技,2015,40(3)(73381.$]楚小晶.姜黄素类似物的抗氧化活性及其对PC12细胞氧化损伤保护作用的研究[D].苏州大学硕士论文,2015. [4]吴杰,黄丹.蒲公英黄酮生物活性研究$].饲料研究,2016(4)(4-38.$]王廷璞,李一婧,马伟超,等.蒲公英中黄酮类化合物提取工艺优化及鉴定[].中兽医医药杂志,2011,2(2)35-38.$]冉靓,刘廷婷.蒲公英黄酮提取工艺的优化$].安徽农业科学,2011,39(26)(5917-15919.$]严力群,丁万隆,朱殿龙,等.坝上地区金莲花及其茎叶总黄酮的测定$].中医药现代化中药研究,2009,11(3): 407-409$]董默,韩婷.蒲公英黄酮类物质提取条件的优化与含量测定$].氨基酸和生物资源,2014,36(3)(2-74.$]杨保求,马飞军,蒲云峰.新疆芜菁皂苷的体内抗氧化活性研究$].食品研究与开发,2016,37(16) (-9.$0]高璐,王滢,饶胜其,等.葡萄籽原花青素提取物对衰老模型小鼠抗氧化作用[].食品科学,2014,35⑵)(53-256.[11] PriyaBatra,Anil K Sharma.Anti-cancer potential o f flavonoids:recent trends and future perspectives^}].Biotech,2013,3(6):439.—DO—56。
蒲公英护肤作用研究
张卫明;吴国荣;马世宏;赵伯涛
【期刊名称】《中国野生植物资源》
【年(卷),期】2001(020)003
【摘 要】本文对蒲公英全草中有护肤、抗菌作用的成分进行了测定.研究结果表明,
蒲公英总抗化能力较强,抗氧化物质和抗氧化酯类较丰富.蒲公英提取物时酪氨酸酶
活性的阻滞率较高,体外去除超氧阴离子的作用明显.另含有绿原酸等抗菌成分.
【总页数】3页(P15-17)
【作 者】张卫明;吴国荣;马世宏;赵伯涛
【作者单位】南京野生植物综合利用研究院,210042;南京师范大学生命科学学
院,210097;南京野生植物综合利用研究院,210042;南京野生植物综合利用研究
院,210042
【正文语种】中 文
【中图分类】TQ658
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