动静脉内瘘成形术前血管彩超检查临床意义
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础。
综 上所述 , B MS C s 作为一种理想的种子细胞 , 可从骨髓 中分离 、 纯化并进行扩增 , 为下一步 B M S C s 的体内移植 奠定 了基础。其在体 外培养 中增殖能力强 ,经体外诱导分化的成骨细胞生长 良好 , 表现 m与典型的成骨细胞相似 的形态特 和生物学特性 ,且周期短 、 重
一
其 作为 干细胞 T程提 供 了有力 的科 学证 明 。骨髓 间 充质 干细胞 f MS C s ) 具 有多 向分化潜 能 , 一定条件下可 向成 骨细胞 、 软骨细胞 、 肌 细胞 , 神经细胞等分化 。 是组织T程 中理想的种子细胞来源 。 如何分 离到高纯度的 M S C s 是组织 工程 实验的前提 。常用的分离 方法有 密 度梯度离心法 , 全骨髓贴壁筛选分离法 , 流式细胞仪 和免疫磁珠分离 法 。本实验采用通过密度梯度离心法结合贴壁细胞法获得纯度较高 的 MS C s , 在成骨诱 导剂定 向诱导分 化作用下 , 证实 MS C s 具有 向成
复性好 。在骨组织T程 中有 良好的应用前景 , 为临床 开展 自 体成骨 细胞修复骨缺损奠定 了基础 。
参考文献:
【 】 ] P r o c k o p D J . Ma r r o w s t r o m a I c e l l s a s s t e m c e l l s f o r n o n h e ma t o p o i e t i c i t s s u e s 叽
医学信息 2 0 1 3年 2月第 2 6卷第 2期( 上半月) Me d i c a l I n f o r ma t i o n . F e b . 2 0 1 3 . V o 1 . 2 6 . N o . 2
3讨 论
的其他成熟细胞。 但本实验结果仍不能说明 B M S C s 的纯化程度以及 其他细胞或 因素对实验 的影 响, 因此细胞表型标志物 的探索 和寻求 仍是干细胞组织丁程 的重要研究方 向。
S c i e n c e , 1 9 9 7 , 2 7 6 ( 5 3 0 9 ) : 7 1 —7 4 [ 2 ] P i t t e n g e r M F , Ma c k a y A M, B e c k S C, e t a 1 . Mu l t i l i n e a g e p o t e n i t a l o f a d u l t h mn a n me s e n c h y ma l s t e m c e l l s J [ ] S c i e n c e . 1 9 9 9 : 2 8 4 . 【 3 】 韦庆军 , 等 免 骨 髓 间 充 质 干 细 胞 的 分 离培 养鉴 定 及 B r d U 标 记 的体 外研 究 【 I 】 . 广 西 医科 大 学 学 报 , 2 0 1 1 , 2 8 ( 2 ) .
本研究从细胞培养 的光镜 和 电镜下 对细 胞形态进行 了细致 的 观察 ,从形态学的角度证实 了 B MS C s 的形态及 _ T程研究 的迅 速发展 , 为创 伤或 骨病等原 因造成
的难治性骨缺损找到了新的途径。种子细胞的研究是组织 T程研究
的前提 。体 内 B MS C s 在骨组织 受创 伤刺激和局部 微环境因素 的影 响, 能够进行增殖 , 并经骨原细胞 、 前成骨细胞最终分化 为成骨细胞 以参与组织更新和创伤修复等。 骨组织T程研 究中 , 由于 B M S C s 取 材方便 , 操作简单 , 可反复提取 , 对机体 的创伤小 , 并且 可 自体移植 , 因而 B M S C s 作为骨组织丁程的种子细胞具有 良 好 的应用前景1 4 , 5 1 由于 M S C s 在 骨髓 中的密度很低 ,而且随着年龄的增长逐渐减 少。 研究表明 , 月龄越小的兔 B M S C s 活力好 , 6 w龄兔的 B M S C s 生命 力及生长势头均不 如 4 w龄兔 旺盛L 6 1 。故本研究采用 4 w龄新西兰大 白兔作 为实验动物 , 旨在 获取活力状 态更好 的兔 B M S C s 。但 4 w龄 兔体积较小 , 四肢骨更细 , 骨髓穿 刺的难度较大 , 细胞 获取 的量更为 有限 , 本实验采用全骨髓 冲洗结合密 度梯度离心与贴壁培 养方式分 离培养兔 B M S C s , 结果证实 该方法 能够在牺 牲少量实验动物的基础 上简便有效 的获取高纯度 多数量 的兔 B MS C s , 同时也避免 了由于实 验者穿刺技术及实验动物月龄小 , 体 积小等诸多主客 观原 因造成 的 反复穿刺对细胞活力 、 实验动物本身 及实验 进度等产生消极影响【 7 】 。 目前报道 已知 的诱导 B MS C向成骨细胞 分化 的因子主要有地塞 米松 、 维生素 C 、 8 一甘油磷酸钠等。并已成 为经典成 骨诱导方法. 其 诱导机制及诱 导结果 已有很多报道f 8 . 9 1 。地塞米松对兔骨髓 间充干细 胞诱导作用表现为能促进成骨细胞分化生成 。 本研究使用含有 1 0 % 胎牛血清( V B S ) 的低糖 D M E M培养 基 , 有 研究表 明低 糖培养 基较高 糖培养 基更利 于骨髓 间充质干细胞的生长。 般认为 :碱性磷酸酶 , o s t e o p o n t i n 。 骨涎蛋 白是 成骨分化到不
[ 4 ] De a n s RJ ; Mo s e l e y AB Me s e n c h y ma l s t e m c e l l s : b i o l o g y a n d p o t e n t i a l c l i n i c a l