口腔鳞癌细胞系中Podoplanin通过EGF-Src-Cas通路促进细胞迁移

第 50 卷第 1 期2024年 1 月吉林大学学报（医学版）Journal of Jilin University（Medicine Edition）Vol.50 No.1Jan.2024DOI：10.13481/j.1671‑587X.20240103PD-L1对人口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响曾洁1, 俞雪燕2, 罗婷3, 徐江1（1. 石河子大学第一附属医院口腔科，新疆石河子832000；2. 石河子大学第一附属医院病理科，新疆石河子832000；3. 新疆维吾尔自治区儿童医院检验科，新疆乌鲁木齐830000）［摘要］目的目的：探讨程序性细胞死亡配体1（PD-L1）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞中的表达及其对OSCC CAL27细胞生物学行为的影响，阐明其可能的作用机制。

方法方法：采用Western blotting法检测口腔上皮HOK细胞和OSCC CAL27、TCA8113和SCC15细胞中PD-L1蛋白表达水平。

免疫荧光染色法检测CAL27细胞中PD-L1蛋白表达和定位情况。

将CAL27细胞分为对照组（转染si-NC）和si-PD-L1组（转染si-PD-L1），Western blotting法检测2组细胞干扰效率，CCK-8法检测不同时间点2组细胞增殖活性，平板克隆实验检测2组细胞克隆形成数，细胞划痕愈合实验检测2组细胞划痕愈合率，Transwell小室实验检测2组细胞中迁移和侵袭细胞数。

结果结果：OSCC细胞中PD-L1蛋白表达水平均高于HOK细胞（P<0.05或P<0.01），PD-L1在CAL27细胞的细胞质和细胞核中均有表达。

CCK-8法和平板克隆实验，与对照组比较，不同时间点si-PD-L1组CAL27细胞增殖活性明显降低（P<0.05或P<0.01），克隆形成数明显减少（P<0.01）。

细胞划痕愈合实验，与对照组比较，si-PD-L1组CAL27细胞划痕愈合率明显降低（P<0.05或P<0.01）。

【D O I】10.3969 /j.issn. 1671 ~6450.2021. 04.015 论著•基础薏苡仁提取物经PDGFB/PDGFRp信号通路对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响王鹏，何健民，王军，高维岳基金项目：甘肃省人民医院院内科研基金项目（17GSSY44)作者单位：730000兰州，甘肃省人民医院口腔临床医疗中心通信作者：高维岳，E-mail:mjf0202@163. com【摘要】目的观察薏苡仁提取物（ESC)经血小板源性生长因子B(PDGFB)/血小板源性生长因子受体p (PDGFRp)信号通路对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。

方法2020年6 —8月于甘肃省人民医院实验室进行实验。

体外培养人口腔鳞癌CAL27细胞，设对照组（不予处理）、ESC低剂量组（10 |xmol/L)、ESC高剂量组（20 |xm〇l/L)和伊马替尼组（10 pm〇l/L)，培养2h后检测细胞增殖率、迁移能力和侵袭能力，同时采用蛋白免疫印迹法检测PDGFB、PDGFR(3、磷酸化PDGFRp(p-PDGFRp)、磷脂酰肌醇3激酶（PDK)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平。

结果与对照组比较,ESC低剂量组、ESC高剂量组及伊马替尼组CAL27细胞增殖率、迁移能力、细胞侵袭数及PDGFB、PDGFRp、p-PDGFRp、PDK、p-Akt蛋白表达均降低（P <0. 05),且伊马替尼组< ESC高剂量组< ESC低剂量组（f/P = 153. 452/0. 000、71. 294/0. 000、182. 524/0. 000、18. 265/0. 000、79. 628/0. 000、9. 628/0. 000、16. 572/0. 000、43. 827/0. 000) ;4组CAL27细胞Akt蛋白表达水平比较，差异无统计学意义（P >0. 05)。

第 49 卷第 4 期2023年 7 月吉林大学学报（医学版）Journal of Jilin University（Medicine Edition）Vol.49 No.4Jul.2023DOI：10.13481/j.1671‐587X.202304071-磷酸神经酰胺转运蛋白对人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生物学行为的影响张湘豫1,2, 胡溢洪1,2, 韩语诚1,2, 邹先琼1（1. 桂林医学院附属口腔医院口腔颌面外科，广西桂林541004；2. 桂林医学院基础医学院免疫学教研室，广西桂林541100）［摘要］目的目的：探讨1-磷酸神经酰胺转运蛋白（CPTP）对人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生物学行为的影响，阐明其相关作用机制。

方法方法：体外培养HSC-3细胞，分为对照组和实验组，分别采用pFlag-CMV4和pFlag-CPTP质粒进行转染，采用抗性筛选法构建稳定转染（稳转）CPTP的细胞。

采用Western blotting法和免疫荧光法检测2组细胞中CPTP蛋白表达水平，采用克隆形成实验和CCK-8法检测各组细胞中克隆形成数和细胞增殖活性，细胞划痕实验检测2组细胞划痕愈合率，Transwell小室实验检测2组细胞中侵袭细胞数。

小鼠随机分为对照组和实验组，分别注射pFlag-CMV4稳转HSC-3细胞和pFlag-CPTP稳转HSC-3细胞，制备小鼠皮下移植瘤模型，检测2组小鼠移植瘤体积和质量。

采用生物信息学方法对头颈部鳞状细胞癌（HNSCC）组织中CPTP差异表达基因进行富集分析。

采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测2组细胞中p53、血小板反应蛋白1（THBS1）和细胞周期蛋白G2（CCNG2）mRNA表达水平。

结果结果：与对照组比较，实验组细胞中CPTP蛋白表达量明显增加。

与对照组比较，实验组细胞中克隆形成数明显增加（P<0.01），细胞增殖活性和划痕愈合率明显升高（P<0.05或P<0.01），侵袭细胞数明显增加（P<0.01）。

口腔癌是发生于口腔的恶性肿瘤，其病理学分类80%为鳞状细胞癌，包括舌癌、牙龈癌、颊癌、上腭癌、唇癌、上下颌癌、口咽癌、口底癌、涎腺癌和上颌窦癌以及发生于面部皮肤的肿瘤［1，2］。

口腔癌是发生于头部和颈部较为常见的恶性肿瘤之一，发病率约占全身恶性肿瘤发病率的5%，口腔癌在我国的发病率约为（3.6~8.0）/10万人，已占全身恶性肿瘤发病率的第10位［3］。

口腔癌由于其进展快，癌细胞浸润范围广以及预后不良，对人类的生命和健康构成严重威胁。

口腔癌的治疗目前仍然是以手术为主，放疗、化疗为辅的综合治疗。

近几年来，中药在防治口腔癌前病变、鼻咽癌前病变上取得了显著成效，均发挥重要的作用［4］。

患者术前使用中药还可以提高患者机体免疫力，降低癌肿的毒性作用，从而减少转移和复发的机会；或在术前缩小水肿范围，明确癌肿体积边界，有利手术进行。

在放化疗中配合使用中药治疗亦可抑制肿瘤增殖，提高患者耐受性，减小毒副反应。

蒲公英（Dandelion ，Taraxacum ），属菊科多年生草本植物，具有极高的药食两用价值。

蒲公英作为传【摘要】目的制备蒲公英根水提物,研究其对人舌癌细胞Tca ⁃8113凋亡、迁移的影响。

方法水溶法制备蒲公英根水提物，并按一定浓度加至正常培养的人舌癌细胞Tca ⁃8113中。

流式细胞术用于分析蒲公英根水提物对Tca ⁃8113细胞凋亡的作用，Transwell 实验检测其对癌细胞迁移的影响，蛋白质印迹法检测各组癌细胞中磷脂酰肌醇⁃3⁃激酶⁃蛋白激酶B （PI3K/Akt ）途径中关键分子p ⁃Akt 、Bcl ⁃2等蛋白的表达差异。

结果10g/L ，20g/L 的蒲公英根水提物明显抑制癌细胞的增殖，进一步证实蒲公英根水提物可诱导Tca ⁃8113细胞凋亡；蒲公英根水提物降低p ⁃Akt 、Bcl ⁃2的蛋白表达并呈浓度依赖性。

结论蒲公英根水提物通过降低p ⁃Akt 、Bcl ⁃2表达促进人舌癌细胞Tca ⁃8113细胞凋亡，并降低其迁移能力。

口腔鳞状细胞癌口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma）是一种发生于口腔被覆鳞状上皮、具有不同程度鳞状分化的恶性上皮性肿瘤，特征是形成角化珠和/或出现细胞间桥。

临床特点·1.流行病学：口腔鳞状细胞癌是口腔最常见的恶性肿瘤，约占所有口腔恶性肿瘤的90%。

在中老年人群中发病率最高，其发病率随着地域的变化亦有不同。

多发生于烟酒、槟榔嗜好者，男性更易受累。

好发于舌、牙龈、颊、唇、口底、腭部等。

2.症状：临床表现变化大，很大程度上取决于肿瘤的部位和分期。

早期多表现为非均质性白斑、红斑、糜烂或溃疡。

多数表现为凹陷性溃疡性病变或蕈样肿块。

许多患者在最初发现时已发生局部淋巴结转移。

镜下观察·癌细胞胞质丰富，红染，伴角化珠形成不规则癌巢浸润横纹肌鉴别诊断·1、假上皮瘤样增生：是上皮的一种良性增生状态，由于炎症或肿瘤的刺激使被覆或邻近的鳞状上皮反应性过度增生，不规则延长的上皮脚深入到间质中，病变广泛甚至出现角化珠时看起来像浸润，尤其在横切面上，增生的上皮与表面上皮分离时似高分化鳞状细胞癌。

但是增生的上皮细胞核质比不高，异型性不明显。

2、坏死性唾液腺化生：是一种累及小涎腺的良性自限性病变。

典型的临床表现为腭部黏膜形成火山口样溃疡。

病理特点为小涎腺腺泡的坏死伴有导管明显增生和鳞状化生，病变组织仍保存唾液腺的小叶状结构。

鳞状上皮巢外形规则，多呈圆形，而不具备浸润性鳞状细胞癌的不规则状（有细胞坏死，而无角化），鳞化的上皮细胞形态温和，核异型性小。

坏死性涎腺化生鳞状上皮巢周边常有残留的肌上皮细胞，可通过calponin和α-smooth muscle actin免疫标记。

此外，坏死性唾液腺化生Ki-67指数低及p53常阴性或局灶阳性。

3、外生性生长的鳞状细胞癌：需要与疣状癌和乳头状鳞状细胞癌相鉴别。

外生性鳞状细胞癌由一个广基的瘤体构成，缺乏显著分支状的纤维血管轴心，肿瘤细胞有异型性。

趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移中的作用作者：尹东张佐高素等来源：《华西口腔医学杂志》2013年第01期[摘要] 目的检测趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在口腔鳞状细胞癌细胞中的表达及其在肿瘤细胞增殖和迁移中的作用。

方法采用逆转录聚合酶链式反应和Western blot法检测20例口腔鳞状细胞癌组织、颈部淋巴结组织、舌鳞状细胞癌细胞株Tca8113、颊鳞状细胞癌细胞株Bca885和10例正常口腔黏膜组织中CXCR4的表达，采用逆转录聚合酶链式反应检测CXCL12的表达，通过MTT法检测细胞的增殖能力，通过趋化实验观察CXCR4特异性配体CXCL12对口腔鳞状细胞癌细胞的趋化迁移作用。

结果 1）在口腔鳞状细胞癌组织、Tca8113细胞及Bca885细胞中，CXCR4 mRNA的相对表达量分别为2.31±1.13、1.89±1.20、1.67±1.10，CXCR4蛋白的相对表达量分别为1.36±0.15、1.85±0.34、1.97±0.23，正常口腔黏膜组织在mRNA及蛋白质水平均未检测到CXCR4表达。

口腔癌患者颈部淋巴结组织中，CXCL12 mRNA表达量的平均值为1.14±0.87，而口腔鳞状细胞癌组织和正常口腔黏膜组织未检测出CXCL12的表达。

2）口腔鳞状细胞癌细胞在CXCL12作用下增殖反应明显增强，CXCR4抗体可明显抑制肿瘤细胞的增殖。

3）趋化实验显示CXCL12可诱导口腔鳞状细胞癌细胞发生明显迁移，在30～100 ng·mL-1的范围内，诱导口腔鳞状细胞癌细胞迁移的作用呈明显量效关系。

结论 CXCR4/CXCL12受体配体系统可介导口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和迁移，在癌细胞向颈部淋巴结转移中发挥着重要作用。

[关键词] 口腔鳞状细胞癌；趋化因子受体；增殖；迁移[中图分类号] R 730.2 [文献标志码] A [doi] 10.7518/hxkq.2013.01.003 口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）是发生于口腔黏膜的鳞状细胞癌，具有局部侵袭力强且易向颈部淋巴结转移的特点，而颈部淋巴结转移对患者的预后影响很大。