蝴蝶兰组织培养论文

农技服务园艺作物·55·2017，34（24）蝴蝶兰的组织培养概述卢　舒，林浩群（揭阳市农业科学研究所，广东 揭阳 522000）作者简介：卢舒（1988.7-），女，广东省揭阳人，初级农艺师，主要从事农艺工作，研究方向：农作物新品种技术研究。

［摘要］本文从蝴蝶兰外植体选择、培养基、激素和添加物的选择、原球茎的增殖与生根壮苗等几方面概述了蝴蝶兰的组织培养技术的研究进展，为其组培技术研究提供参考。

［关键词］蝴蝶兰；农业；组织培养；快速繁殖蝴蝶兰(Phalaenopsis aphrodite Rchb. F.)为兰科蝴蝶兰属，由于它的花形较为优美、色彩多样且鲜丽、花期较长而享有“兰花皇后”的美誉，观赏价值和经济价值都很高，是世界上四大最具商业价值观赏热带兰的其中一个。

蝴蝶兰为单茎性气生兰，较少侧芽生成，再生能力不高，不利于一般的分株繁殖；且无胚乳的种子在自然环境中难以萌发，难以满足市场的大量需求。

农业科研工作者一直在探索蝴蝶兰优质种苗快速繁殖的方法，其中应用植物组织培养技术进行快速繁殖已经成为蝴蝶兰种苗繁殖最好的方法。

组织培养方法可以缩短繁育周期，获得大量成株，还可以保持种质优良性状。

本文从外植体选择、培养基、激素和添加物的选择、原球茎的增殖与生根壮苗等几方面概述了蝴蝶兰的组织培养的研究进展，以期为蝴蝶兰的生产发展提供有益的信息。

１外植体的选择　对外植体培养成功与否的其中一个主要影响因素就是外植体的来源，花梗芽、叶片、茎尖和根等都是蝴蝶兰组织培养中经常利用的诱导原球茎的外植体。

由于组织培养的分化能力和分化程度与品种、选取的器官有关，所以要成功地进行蝴蝶兰组织培养就要选择合适的外植体进行无菌操作。

1.1花梗芽蝴蝶兰花梗芽是最佳的组培培养外植体，具有易取材、易消毒、对母株损伤小、诱导率高等优点。

从蝴蝶兰产生花梗到花谢期间，绿色的花梗都可以取材，一般越嫩的花梗诱导出的原球茎生长状况越好。

蝴蝶兰的离体培养研究蝴蝶兰是兰科(Orchidaceae)蝴蝶兰属(Phalaenopsis)中一种重要的观赏植物。

离体培养是蝴蝶兰工厂化育苗的一个重要途径。

本研究利用组织培养技术，对蝴蝶兰进行离体培养，并就离体培养中体细胞胚胎的发生、褐化等相关问题进行研究，取得如下结果。

探讨了离体状态下，影响蝴蝶兰休眠花梗腋芽萌发的因素。

研究发现，外源激素是诱导萌发必不可少的因素。

MS+5.0 mg/L BA+0.5 mg/L NAA培养基较适合休眠芽的诱导。

中间部位的花梗腋芽较上部腋芽容易萌发。

以蝴蝶兰的花梗腋芽为外植体，诱导休眠芽萌发得到不定芽。

对不定芽的无菌叶片进行原球茎诱导。

利用正交设计方法探讨了培养基类型、6-BA、NAA、AC四种因素对蝴蝶兰叶片诱导原球茎的影响。

结果表明：6-BA是影响蝴蝶兰叶片诱导原球茎的主要因素，培养基类型次之，NAA和AC的影响程度较弱。

蝴蝶兰叶片诱导原球茎的最优组合是MS+5.0 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+0.1 g/L AC+150ml/L CM。

研究了影响原球茎的增殖的因素。

采用正交设计方法探讨了培养基类型、6-BA、NAA、有机添加物四种因素对原球茎增殖的影响。

结果表明：3 g/L HyponexNo.1+5 mg/L BA+1 mg/L NAA+150 ml/L CM的培养基较适合原球茎的增殖，原球茎的增殖系数可以达到理论最大值5.5。

对于根诱导和组培苗移栽的研究表明：NAA对于根的诱导影响较大；Hyponex No.1培养基中附加一定浓度的NAA和6-BA能诱导小苗生根；添加0.5 g/LAC能提高苗的平均根数和平均根长；对根诱导较佳的培养基是：3 g/L Hyponex No.1+0.1 mg/LBA+1 mg/L NAA+0.5 g/L AC+100 ml/L土豆汁。

对以原球茎为外植体诱导愈伤组织和体细胞胚胎发生的研究表明：蔗糖对愈伤组织诱导的影响最大；最佳诱导愈伤组织的培养基组合为VW+0.3 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+40 g/L蔗糖或VW+0.1 mg/L BA+0.1 mg/L 2，4-D+60 g/L蔗糖。

收稿日期:2002-10-08文章编号:1008-9632(2003)03-0019-03蝴蝶兰的组织培养研究秦　凡,周吉源(华中师范大学生命科学学院,武汉　430079)摘　要:探讨蝴蝶兰的组织培养技术和方法。

实验表明:改良型M 1培养基诱导原球茎有良好的效果,M 1+BA 5.0mg/L 对花梗芽的诱导最合适,M 1+BA3.0mg/L 对茎尖诱导原球茎最合适。

降低分裂素浓度后,原球茎可以分化成完整植株,壮苗阶段以改良型M 2+BA 0.1mg/L +NAA 0.5mg/L 效果较佳。

移栽基质选用水苔,成活率高。

关键词:蝴蝶兰;组织培养;原球茎中图分类号:Q943.1文献标识码:A 蝴蝶兰[phalaenopsis]为兰科蝴蝶兰属植物,它是一种热带气生兰,俗称“洋兰”。

蝴蝶兰花型似蝴蝶,形态美妙、色彩丰富、花期长,在热带兰中素有“兰花皇后”之美称[1],是近年来在国际花卉市场上最受欢迎的洋兰。

蝴蝶兰是单茎气生兰,植株极少发育侧枝,因此对其进行常规的无性繁殖,以及依靠种子萌发进行繁殖,增殖速度极慢,难以满足市场要求,而组织培养是进行大量繁殖的最有效手段。

目前我国进行蝴蝶兰组织培养研究,大多集中在台湾地区以及沿海地区,华中地区少见关于蝴蝶兰组织培养、移栽的报道。

本实验室根据华中地区的气候特点,开展了蝴蝶兰组织培养、移栽等方面的研究,现报道如下:1　材料、方法111　材料:供试材料取自湖北省林业局花卉大市场二年生成花,取其花梗和幼茎,其中花梗为45天以前的全部幼嫩花序。

112　灭菌:将花梗从母体切下,再将花梗切成带芽的小段,同时将茎上面叶子和茎下面根部分别切去,留带茎尖的茎段约1cm 。

首先将花梗段,茎段分别放入5%漂白粉溶液中漂洗20分钟,最后放入0.1%升汞溶液和75%酒精溶液中消毒备用。

113　培养基:M 1、M 2、M 3三种基本培养基。

附加活性炭0.2%,蔗糖2.0%,琼脂0.7%,pH 值调至5.0～5.5。

蝴蝶兰的栽培管理技术摘要：蝴蝶兰为兰科（Orchidaceae）蝴蝶兰属（Phalaenopsis）单子叶植物，简称Phal..。

蝴蝶兰的商品化大规模栽培十分成功，主要用于切花和盆花销售。

在兰花商品市场上占有相当大的比例。

本文通过了对蝴蝶兰培养技巧的了解，讨论了蝴蝶兰在不同环境的培养，并给出了建议。

关键词：蝴蝶兰；环境；主要因素；栽培管理0 前言蝴蝶兰的组织培养最早报道于1949年，当时Rotor成功地在试管中培养出了花梗苗。

但是大量的应用研究是在20世纪60年代以后，尤其是20世纪70～80年代。

所选用外植体材料有花梗侧芽、茎、叶片、根尖等。

近10年来，国内外许多学者对蝴蝶兰的组织培养作了大量的研究工作，建立了比较成功的工厂化育苗快繁技术，积累了较多的方法和经验。

蝴蝶兰特征明显，根系十分发达，在原产地靠发达的根系附着生在树干和岩石上，茎甚短，叶片呈带形或矩圆形，较厚、肉质、茎顶部不断长出新叶，气生根从节部长出来，花序从叶腋间抽出，花的大小，色泽有较大的差异，花有白色、紫红色、黄色、绯红、微绿色或花瓣上有紫色条纹。

有些品种有双色或三色，花期3～4月，观赏期60～70天。

1 栽培流程1.1 出瓶苗瓶苗移栽前，将培养瓶放到栽培温室中炼苗3～4天，小心将苗从瓶内取出，用清水将培养基及琼脂冲洗干净，切勿伤断根，再用消毒液或高锰酸钾稀溶液（0.05%）浸泡5分钟，可以提高移栽成活率，且对污染苗移栽效果比较明显。

然后将苗取出分级晾干。

双叶距大于5cm的苗为特级苗，3～5cm的苗为一级苗，2～3cm的苗为二级苗。

晾干后的小苗用水苔包裹根，露出叶片和茎基，通常特级苗直接种植于7cm盆中，一级苗种植于5cm盆中，盆底需垫3～5块塑料粒，以便透水，防止盆孔被水苔堵塞。

二级苗种植于128孔的穴盘中或植于育苗盘中，小于2cm的苗可弃去或撒植于育苗盘中。

1.2 第1次换盆及换盆后的管理蝴蝶兰小苗在5cm盆中栽培3.5～4.5个月后，双叶距可达12cm左右，此时需进行第1次换盆，将苗从5cm盆中取出，用水苔包裹其根系，轻轻压入白色透明的8.3cm塑料软盆中，盆底同样需垫3～5块泡沫塑料块，以便于透水换盆后喷施杀菌液，3天内不可浇水，但需保持环境湿润。

简述蝴蝶兰的组织培养方法蝴蝶兰是一种极具有形象性和色彩鲜明的植物，其种类繁多，吸引着众多花友的青睐。

蝴蝶兰培植简单易行，其组织培养也十分容易，而且效果卓著。

本文就简述蝴蝶兰的组织培养方法，以期帮助花友们更好地养护蝴蝶兰。

一、选择合适的蝴蝶兰蝴蝶兰的种类及其色彩繁多，首先应根据自己的需求与喜好，在花店等地选择合适的蝴蝶兰。

蝴蝶兰应当处于正常生长状态，花朵特别是花瓣均匀、紧实，根系及叶片绿润有光泽，没有病虫害。

二、组织培养1.行插穗在蝴蝶兰培养开始前，需要将其插穗。

插穗使蝴蝶兰的根系较为疏松，利于植物的延伸生长。

将蝴蝶兰插入潮湿的细沙中，则可为植株提供良好的水分分布，促进蝴蝶兰的生长发育。

2.理肥料施用植物有两种基础营养元素，即氮元素和磷元素。

在蝴蝶兰培养过程中，需要为植株施加肥料，以满足其生长所需。

氮元素主要可利用于叶片的生长，而磷元素则可利用于花朵的发育。

3.湿管理蝴蝶兰生长所需的温湿数值较为丰富，其适宜的温湿应当保持在温度15度至25度，湿度为60%至70%之间。

其中，温度应当尽量高，以有利于蝴蝶兰的发育，而湿度则应当保持适中，以防止出现病害的发生。

3.照蝴蝶兰喜欢充足而柔和的光照环境，所以应尽可能地将蝴蝶兰移至开窗处，使其能够接受到丰富的太阳辐射，以帮助植物供能发育。

在白天，应保持植株所处的窗口敞开，以让花朵能够更好地吸收阳光。

4.分补充蝴蝶兰容易受到水分缺乏的影响，因此组织培养过程中，应定期给植株补充水分，最好是在上午和傍晚时段为植物浇水，以保证植株的温湿度，使植株继续保持良好的生长状态。

五、结束语以上就是蝴蝶兰的组织培养方法，相信只要秉持着耐心及遵循以上方法，便可以让蝴蝶兰更好地长出更美丽的花朵，为室外环境带来绚丽多彩的视觉享受，让花友们体验独特的植物魅力。

蝴蝶兰组织培养与快速繁殖技术研究张雅晨;姜亚博;周烽明;顾季春;顾福根【期刊名称】《现代农业科技》【年(卷),期】2011(000)023【摘要】以残败花梗为外植体进行组织培养,建立了蝴蝶兰的无菌繁殖体系,研究了培养基中不同种类植物生长调节物质及其浓度比例对休眠芽的萌发、丛生芽的诱导以及试管苗生根的影响,筛选出了最佳培养基组成;研究了活性炭、PVP、温度、暗培养对培养基褐化的影响。

结果表明：在1/2 MS＋6-BA 3.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L＋10%香蕉汁＋3%蔗糖＋0.6%琼脂的培养基上休眠芽的诱导效果最好,诱导率可达87.5%;在1/2 MS＋6-BA 6.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋10%香蕉汁＋3%蔗糖＋0.6%琼脂的培养基上丛生芽的诱导效果最好,增殖系数可达3.15;在1/2 MS ＋NAA 0.5 mg/L＋活性炭1 000 mg/L＋3%蔗糖＋0.6%琼脂的培养基上生根效果最好,生根率可达95%,平均每株生根3.11条左右,炼苗后移植成活率可达90%。

【总页数】3页(P254-256)【作者】张雅晨;姜亚博;周烽明;顾季春;顾福根【作者单位】苏州大学医学部,江苏苏州215123;苏州大学医学部,江苏苏州215123;苏州大学医学部,江苏苏州215123;苏州大学医学部,江苏苏州215123;苏州大学医学部,江苏苏州215123【正文语种】中文【中图分类】Q943.1【相关文献】1.蝴蝶兰“大辣椒”组织培养与快速繁殖 [J], 武爱龙;吴建阳;卓海容2.蝴蝶兰组织培养快速繁殖技术研究 [J], 朱志国;黄承钧;陶陶;闻治江3.蝴蝶兰组织培养与快速繁殖技术研究进展 [J], 肖丽红;黄鑫文;陈创国4.蝴蝶兰组织培养与快速繁殖技术研究 [J], 侯庆莉5.蝴蝶兰幼嫩花梗组织培养和快速繁殖 [J], 张彦妮;边红琳;陈立新因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

蝴蝶兰组培研究进展张丹桂201310010125集贤创新实验131班蝴蝶兰(Phalaenopsis spp.)为兰科多年生附生草本，花形态优美似蝶，枝叶繁茂，花期持久，观赏价值极高，在热带素有“兰花皇后”的美誉。

蝴蝶兰是目前兰科植物中栽培最广泛的种类之一，同时也是室内绿化美化的新型观赏花卉，国内外市场对其需求量越来越大。

但是，由于蝴蝶兰是单茎性气生兰，植株很少发育侧枝，很难采用常规分株方式进行无性繁殖；其种子也不含胚乳或其他组织，在自然条件下萌发率极低，因此无法利用播种方式进行有性繁殖。

而采用组织培养方法进行种苗繁殖是目前蝴蝶兰大规模生产的唯一途径。

本文概述了近年来蝴蝶兰的组织培养与快繁技术的研究进展。

外植体繁殖途径糊蝶兰组培的过程一般分为外植体的诱导、继代增殖、壮苗、生根、健化移栽5个阶段。

目前，国内外蝴蝶兰组培研究主要集中在外植体的选择、基本培养基选择、植物激素种类和配比浓度、褐变防治措施等方面。

1.外植体选择及培养方法关于糊蝶兰组培外植体选择方面的报道较多，不同外植体各有优缺点。

常见的用作组培的外植体有种子（曾宋君,彭晓明,张京丽,等.蝴蝶兰的组织培养和快速繁殖[J].武汉植物学研究,2000,18(4):344- 346. 章玉平,刘成运,胡鸿钧,等.蝴蝶兰无菌萌发技术的研究[J].武汉植物学研究,2004,22(1):82- 86.）、叶片（李成慧,蔡斌,单丽丽,等.应用正交设计法探讨蝴蝶兰叶片类原球茎的诱导[J]. 扬州大学学报(农业与生命科学版),2004,25(2):76- 78.）、花梗节间（鲁雪华,郭文杰,徐立晖,等.蝴蝶兰花梗节间段培养繁殖的初步研究[J].园艺学报,2002,29(5):491- 492. 刘福林,李淑萍.蝴蝶兰花梗的组织培养和植株再生[J].商丘师范学院学报,2001,17(6):98- 99.）、根尖（曾宋君,彭晓明,张京丽,等.蝴蝶兰的组织培养和快速繁殖[J].武汉植物学研究,2000,18(4):344- 346.）、花梗腋芽（刘林,李淑兰.温度、节位和BA 对蝴蝶兰花茎腋芽生长的影响[J].北方园艺,2003(5):50- 51.）等。

2014年第8期现代园艺

蝴蝶兰组织培养初探冯光惠渊榆林学院生命科学学院袁陕西榆林719000冤

摘要院以蝴蝶兰组培苗花梗节间为材料袁通过对原球茎状体的诱导和增殖试验袁研究不同类型培养基对蝴蝶兰组

培快繁的影响袁根据试验及数据分析袁筛选出适宜的培养基配方袁以期探讨蝴蝶兰组织培养快繁技术袁建立蝴蝶兰组培再生技术体系遥结果表明袁在本试验设计范围内袁最适宜原球茎诱导的培养基为院MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L曰最适宜原球茎的增殖培养基为院1/3MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L+30g/L香蕉汁遥关键词院蝴蝶兰曰培养

1试验方法

1.1原球茎的诱导

在蝴蝶兰组培研究中袁原球茎的诱导是在基础培养基内添加一定种类及浓度的植物生长调节剂袁由幼叶尧根尖尧茎尖等外植体脱分化而产生胚性愈伤组织袁进而形成原球茎体遥在超净工作台上袁用酒精灯灼烧解剖刀20s袁待自然冷却后袁在诱导生成的休眠芽中切取带叶腋茎段部位约1cm袁用自来水冲洗30min袁再用70％酒精消毒30s袁0.1％升汞溶液灭菌5min袁无菌水清洗3～5次袁切割后分别插入不同培养基中进

行原球茎诱导培养袁每瓶培养基中放置3个茎段遥培养温度为25℃袁光照强度为2000lx袁光照时数12h/d遥定期观察记录原球茎诱导情况袁分别记录数据袁统计各培养基中的诱导率遥1.2原球茎的增殖

在蝴蝶兰的组培快繁研究中袁影响原球茎增殖的因素较为复杂袁主要有试验中所使用的蝴蝶兰品种尧原球茎切割体积尧外植体的选择尧培养的环境条件以及增殖培养基的选择等遥在原球茎状体形成后袁在超净工作台上取出袁用经过酒精灯20s灼烧袁并自然冷却后的解剖刀切成4mm×4mm小块袁然后放入增殖培养基中袁每瓶培养基内放5小块袁将接种好的培养基在温度25℃袁光强1500～2000lx袁光照时数为10h/d的条件下培养遥定期观察统计增殖株数袁统计各培养基

的增殖系数遥2试验结果

2.1不同激素配比对原球茎形成的影响

蝴蝶兰的组织培养蝴蝶兰属单茎类兰花,其常规繁殖方法有分株法和播种法。

在常规繁殖中，有三个难以解决的问题：第一，用分株繁殖方法增殖缓慢，不利于新品种的推广；第二，种子繁殖困难，因兰花种子十分微小，胚很细弱，种子中几乎没有贮藏营养物，在自然条件下，绝大多数种子会在发芽过程中夭折，只有少数种子遇到菌根才能萌芽；第三，病毒感染严重，降低种性。

采用无菌播种和组织培养的方法进行蝴蝶兰的无性系繁殖，可以在一定程度上解决上述三个问题，成为目前大量繁殖蝴蝶兰的主要途径。

外植体的选择和消毒取蝴蝶兰花梗在自来水下用细软毛刷轻刷表面，并吸干表面水分，剪成2一3cm长的茎段。

在工作台上按以下程序进行灭菌处理：将材料放入经高温灭菌过的烧杯中；加入70％的酒精浸泡20秒；0.1％的HgCl消毒8分钟，分2次进行，每次4分钟，灭菌后用无菌水冲洗5次，每次2分钟；用解剖刀切除坏死部分后，接入培养基。

用此方法既能有效地消毒又不会对培养材料产生毒害，培养材料接入培养基后无褐化坏死现象出现。

无菌材料的试管培养培养材料的选择是蝴蝶兰组培决繁的关键。

腋芽节位以下第3、4节花梗芽是最适宜的外植体，而谷胧甘肽200mg/L既能很好地抑制褐化，又能促进试管苗的生长和分化，是蝴蝶兰组织培养中最合适的褐化抑制剂。

B5+GA32.0mg/L＋NAAO.lmg/L是较适宜的愈伤组织诱导培养基，B5+6BA1.0mg/L＋NAAO.2mg/L是较适宜的分化培养基，1/2MS+IBA1.2mg/L＋NAA0.05mg/L及2%蔗糖是较适宜的生根培养基。

将消毒后的无菌培养材料接种在愈伤组织诱导培养基上，其培养基为B5+GA32.0mg/L＋NAAO.lmg/L，培养基pH调至5.8，培养室温度控制在24士2℃。

接种后遮光放置4一5天，而后每天光照12小时，2周后，切口处开始膨大，产生淡绿色瘤状愈伤组织，并不断增大。

4周后将愈伤组织切下转接到分化培养基B5+6BA1.0mg/L＋NAA0.2mg/L上，转瓶后愈伤组织的体积和重量成指数级增加，4周左右愈伤组织表面出现较大绿色颗粒，并形成芽点，继而分化出丛生芽。

‘阿里山’蝴蝶兰组织培养及其驯化移栽技术林秀莲;马骁勇【摘要】以蝴蝶兰新品种‘阿里山’为试材进行组培快繁研究,包括花梗腋芽不定芽的诱导、丛生芽增殖、生根培养以及组培苗炼苗移栽技术.结果表明,1/4MS +4 mg·L-1 BA +0.3 mg·L-1 NAA最适合不定芽诱导,诱导率可达82.5％;利用1/2MS+7 mg·L-1 BA +0.8 mg·L-1 NAA培养基进行培养时,丛生芽增殖系数达到3;利用改良1/2KC+1 mg·L-1 NAA+100 g·L-1香蕉泥培养基培养时,生根率高达100％;组培苗驯化28d,移栽成活率达93.3％.【期刊名称】《亚热带农业研究》【年(卷),期】2015(011)001【总页数】4页(P31-34)【关键词】蝴蝶兰;组织培养;驯化;移栽【作者】林秀莲;马骁勇【作者单位】惠州农业学校,广东惠州516023;惠州农业学校,广东惠州516023【正文语种】中文【中图分类】S682.31蝴蝶兰(Phalaenopsis spp.)属兰科蝴蝶兰属植物，有“兰中皇后”之美誉，观赏价值和经济价值较高，备受消费者青睐。

引进台湾地区新品种可丰富蝴蝶兰市场，在引进新品种的同时，建立快速繁殖优化体系显得尤为重要。

惠州市近年畅销的蝴蝶兰品种包括内山姑娘、大辣椒等，这些品种有性繁殖的品系后代易分离，颜色深浅不一，随着栽培年数的增加，易发生颜色淡化等品种退化现象。

组织培养技术可以克服这些问题。

从现有文献资料[1-5]来看，蝴蝶兰的组织培养技术较为成熟，但对生根组培苗驯化移栽研究相对较少，而生根苗的移栽成活率是商品效益高低的关键因素之一[6]，对移栽的基质、水分、温度、湿度等研究尤为重要。

本文拟对台湾引进的大红蝴蝶兰新品种‘阿里山’进行花梗诱导、丛生芽增殖、生根培养等研究，并初步分析了该品种的驯化移栽技术，以期建立简便、实用、高效的产业化蝴蝶兰繁殖体系，满足花卉市场需求。