蝴蝶兰的组织培养[1]

蝴蝶兰组织培养及诱变育种的研究进展刘亮,易自力3,蒋建雄,彭筱娜,黄丽芳　(湖南农业大学细胞工程实验室,湖南长沙410128)摘要　从蝴蝶兰(phalaenopsis)的组织培养及诱变育种两个方面进行了探讨。

就当前蝴蝶兰外植体的选择、培养基的选择、原球茎增殖、生根壮苗、炼苗移栽化学诱变几个方面作了详细的讨论。

关键词　蝴蝶兰;组织培养;诱变育种中图分类号　Q943.1 文献标识码　A 文章编号　0517-6611(2007)27-08451-02R esearch P rogress in the Tissue Culture and Mutation B reeding of Phalaenopsis spp.LIU Liang et al　(Cell Engineer Lab of Hunan Agriculture University,Changsha,Hunan410128)Abstract　T he research progress in the tissue culture and mutation breeding of Phalaenopsis,including the effect of ex plants,m edium,multiplication of protocorm2like b ody,m eth od of rooting and seedling strengthening,transplantation and chem om orph osis and s o on,was discussed,in order to provide in for2 m ation for this field.K ey w ords　Phalaenopsis spp.;T issue culture;Mutation breeding 蝴蝶兰(phalaenop sis)为兰科蝴蝶兰属兰花,原产于我国台湾、菲律宾、印度尼西亚、泰国、马来西亚等地[1]。

蝴蝶兰的组织培养研究本试验以蝴蝶兰原优良品种满天红花梗为外植体，对休眠芽萌发诱导、叶片原球茎诱导、原球茎增殖、根诱导和组培苗的移栽等方面进行初步研究，得出以下结果： 1、花梗休眠芽的诱导在夏季、秋季、春季三个季节选取含休眠芽的花梗节段进行培养，对污染率、休眠芽萌发诱导率和芽生长状况进行了比较。

试验表明秋季选取的花梗外植体灭菌效果最好，休眠芽萌发诱导率最高。

MS+BA 5.0培养基较适合休眠芽的诱导。

2、无菌苗叶片的原球茎诱导本试验以无菌苗叶片为外植体诱导原球茎产生，结果表明，BA浓度5.0mg·L^-1最适合叶片原球茎诱导，添加15％（V／V）椰乳（CW）能提高原球茎的诱导率，并有利于原球茎的生长。

MS+BA 5.0+CW 15％培养基较适合诱导叶片产生原球茎，诱导率最高达到38％。

3、原球茎的增殖在MS培养基中添加一定浓度的BA和果汁能提高原球茎的增殖率。

另外，添加聚乙烯吡咯烷酮（PVP）100～200mg·L^-1能有效控制培养基的酚污染、提高原球茎的增殖率。

MS+BA 5.0+CW 15％培养基较适合原球茎的增殖。

J‘西大学祝眨d卜学位论文4、根的诱导在1/2 Ms培养基中附加一定浓度NAA（0 .1一0.5mg’L一’）和多效哇MET（0 .1⁰.5mg’L一‘）与BA配合，能诱导小苗生根。

用多效哇诱导生根，幼苗矮壮，叶片较绿，有利提高幼苗的移栽成活率。

添加0.39一’活性炭（AC）能大大提高生根苗的平均根数和平均根长。

对根诱导较适合的培养基是:1/2 MS+B A 2.0+NAA 0.卜AC或1/ZMS+BA 2.0+MET 0.3。

5、组培苗移栽土上!苦篇乐左牙湘于丁石，卜Z戈寸汗吞目J 立伏禽己七心不破万县‘nl翻云六刁一谁才曰丢，卜Z人叹产1才曰日之习隆百冬观兀笠气1土刃尺水万万U圣a猫田联硒平葵啊权人。

蝴蝶兰组织培养研究进展摘要通过不同培养基、不同激素及添加物对蝴蝶兰各培养再生途径的影响进行了概述,为蝴蝶兰的组培技术研究提供参考。

关键词蝴蝶兰;组织培养;研究进展蝴蝶兰(Phalaenopsis)属热带或亚热带的兰科植物,深受人们的喜爱,研究和开发蝴蝶兰的组织培养具有重要的意义[1]。

组织培养是蝴蝶兰快速繁殖的有效方式,目前主要有3条途径:一是利用蝴蝶兰杂交种子在无菌条件下诱导发芽,获得再生植株[2];二是从离体器官诱导产生原球茎(Protocorm like-body,以下简称PLB),通过原球茎的增殖、分化获得再生植株,即原球茎再生途径[3,4];三是通过离体器官诱导产生丛生芽,通过培养丛生芽获得再生植株,即器官再生途径[4-7]。

1无菌播种再生途径蝴蝶兰经人工授粉可获得种子,但种子个体极其微小,结构简单,没有胚乳,只有1层极薄的种皮,通常在自然状态下很难萌发,需经组织培养无菌播种才能获得植株。

在蝴蝶兰开花时选择优良植株进行自交或杂交授粉,生长4～6个月后尚未开裂的蒴果可用于试管无菌播种。

由于蒴果内种子数量达几千万之多,1个蒴果便可繁殖出成千上万的植株[8]。

通过无菌播种人工培养,能够在短期内获得大量幼小植株,是现阶段经济有效的快速繁殖方法,也是工厂化育苗的重要途径。

种子无菌播种10d后胚明显膨大,呈鹅黄色,陆续变成绿色,约1个月的时间形成原球茎)。

随后,原球体拉长,同时原球体上伴随着长出白色根毛状物,接着在顶端生长点处长出芽鞘,芽鞘不断长大,形成第1片鞘叶。

至2个月时,于第1片鞘叶对面长出第2片鞘叶,随着鞘叶的生长,2～3个月的时间在2片鞘叶之间长出真叶。

最后,转移到新的培养基上形成再生植株[8-10]。

魏翠华等[9]研究发现,添加香蕉汁对蝴蝶兰种子发芽、原球体形成以及叶片的生长具有促进作用,水解乳蛋白对种子萌发有抑制作用,比较光照和黑暗2种培养条件,种子萌发无明显差异。

章玉平等[10]研究表明,外源植物生长调节剂对种子萌发有抑制作用,天然物质如苹果汁、香蕉汁、胰蛋白胨和活性炭对种子萌发具有促进作用。

不同外植体对蝴蝶兰原球茎诱导率的影响
二、原球茎途径
培养基： 原球茎诱导培养基：包括MS、1 /2MS、VW、B5、KC、 花宝及其改良型等,由于蝴蝶兰品种差异及外植体来源
T
不同导致不同品种及外植体对最适培养基的选择有所不 同。 原球茎增殖培养基：改良KC和1/2MS的培养基最佳。
二、原球茎途径
激素：
编号
培养基
Code
Medium
1
MS+NAA0.50 mg/L+6-BA2.00 mg/L
2
MS+NAA1.00 mg/L+6-BA2.00 mg/L
3
MS+NAA2.00 mg/L+6-BA2.00 mg/L
4
MS+NAA0.50 mg/L+6-BA3.00 mg/L
5
MS+NAA1.00 mg/L+6-BA3.00 mg/L
蝴蝶兰组织培养技术
班级：13级园艺班 学生：杨惠、杨颖霖、柯壮
LOGO
蝴蝶兰
兰科蝴蝶兰属，原产亚热带 雨林地区。其气根露在叶片周 围，既有吸收空气中养分的作 用，还有生长光合作用。新春 时节，从叶腋中抽出长长的花 梗，并开出形如蝴蝶飞舞般的 花朵，深受人们青睐，有“洋 兰王后”之称。分布在马来西 亚、印度尼西亚，及中国台湾 等地。
6
MS+NAA2.00 mg/L+6-BA3.00 mg/L
7
MS+NAA0.50 mg/L+KT0.10 mg/L
8
MS+NAA1.00 mg/L+KT0.10 mg/L
9
MS+NAA2.00 mg/L+KT0.10 mg/L

后”之美誉。
蝴蝶兰属的拉丁学名是由Phala（蛾蝶）和Opsis（模样） 组成，意指花外形似蛾蝶。该属植物约有4个原生种，主要 分布在南北纬度23度之间，从喜马拉雅山经印度、缅甸、 中国南部、马来西亚、菲律宾、澳大利亚和新几内亚。我 国云南南部、西藏南部、广东南部、海南和台湾一线为该 属植物的最北分布界限。
生根与炼苗：
1、生根： MS+IAA0.5 70多天 后，具4～5条根 的 小苗，可出瓶种植。 2、炼苗：置于室温 7～10d后，打开瓶 盖2天，取出小苗假 植于水苔上。
商业化生产
参考文献：
[1]谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国林业 出版社,1997.
[2]孙可群,张应麟.花卉及观赏树木栽培手册[M].北京:中国林 业出版社,1985. [3]王华芳.花卉无土栽培[M].北京:金盾出版社,1997. [4]李浚明.植物组织培养教程[M].北京:中国农业出版社,1992. [5]郭凤昌,朱宪宸.菊花组织培养育苗技术[J].北方园艺,1998. [6]王荣钦.外植体部位、激素浓度对卡特兰、蝴蝶兰圆球茎形 成和增殖的影响[J].福建热作科技,2000. [7]谭文澄.观赏植物组织培育技术[M].北京:中国林业出版 社,2001.
培养：
1、选材与消毒:75%酒精30S，0.1%升汞5min ①种子 ： MS+BA0.5㎎/L +NAA0.1㎎/L+3%蔗糖。 60天。 ②花梗：1/2MS+BA5.0㎎/L +NAA0.5㎎/L培养基。 培养4周左右。 2、初代培养 ①种子： MS+BA5.0㎎/L 培养基上。60天，4cm高 实生苗 ②花梗：MS+BA5.0㎎/L 培养基上。4w苞叶处丛生 小芽

蝴蝶兰组织培养关键技术探讨首先是无菌培养技术。

无菌培养是蝴蝶兰组织培养的基础步骤，能够有效控制外界的微生物对植物的污染。

在无菌环境中进行组织培养必须具备一定的操作技巧和设备。

在培养基制备过程中，需要对培养基进行高压蒸汽消毒或滤过过滤，以确保培养基的无菌性。

在组织培养过程中还需采取一系列无菌操作，如组织的消毒处理、转移时避免接触空气等。

其次是组织愈伤与再生技术。

组织愈伤是指植物组织在应激或外界刺激作用下出现非正常的增殖现象。

对于蝴蝶兰来说，组织愈伤与再生是进行组织培养的关键步骤。

在组织愈伤培养中，可以通过调节培养基中的激素类型与浓度，促使愈伤组织的形成。

而后续的再生过程则需要恰当的培养基配方和培养条件来促进愈伤组织进一步分化为叶片、茎或芽等。

激素配方也是蝴蝶兰组织培养中的一个重要环节。

激素是促使组织发生增殖与分化的关键因子，合理配方的激素能够提高培养效果。

在蝴蝶兰组织培养中，通常会使用生长素（如NAA、IAA等）和细胞分裂素（如BA、KT等）来促进愈伤组织的生长和分化。

但需要注意的是，过量使用激素会导致愈伤组织过度生长、变异等问题，因此需要根据实际情况进行激素配方，以达到最佳效果。

最后是质壁分离技术。

质壁分离技术是蝴蝶兰组织培养中分离不同种类细胞的重要手段。

通过质壁分离可以获得纯种植物的组织或细胞，进行遗传改良和基因工程研究。

在蝴蝶兰的质壁分离过程中，需要先进行组织消毒处理，然后通过特定的酶解剂或物理方法分离细胞的质壁。

质壁分离技术的成功与否直接影响到培养后续的成活率和生长发育情况。

蝴蝶兰组织培养的关键技术包括无菌培养、组织愈伤与再生、激素配方以及质壁分离等。

这些关键技术的掌握对于蝴蝶兰的高效培养和研究具有重要意义。

未来的研究需要进一步深入探讨和改进这些技术，以促进蝴蝶兰组织培养技术的发展与应用。

简述蝴蝶兰的组织培养方法蝴蝶兰是一种极具有形象性和色彩鲜明的植物，其种类繁多，吸引着众多花友的青睐。

蝴蝶兰培植简单易行，其组织培养也十分容易，而且效果卓著。

本文就简述蝴蝶兰的组织培养方法，以期帮助花友们更好地养护蝴蝶兰。

一、选择合适的蝴蝶兰蝴蝶兰的种类及其色彩繁多，首先应根据自己的需求与喜好，在花店等地选择合适的蝴蝶兰。

蝴蝶兰应当处于正常生长状态，花朵特别是花瓣均匀、紧实，根系及叶片绿润有光泽，没有病虫害。

二、组织培养1.行插穗在蝴蝶兰培养开始前，需要将其插穗。

插穗使蝴蝶兰的根系较为疏松，利于植物的延伸生长。

将蝴蝶兰插入潮湿的细沙中，则可为植株提供良好的水分分布，促进蝴蝶兰的生长发育。

2.理肥料施用植物有两种基础营养元素，即氮元素和磷元素。

在蝴蝶兰培养过程中，需要为植株施加肥料，以满足其生长所需。

氮元素主要可利用于叶片的生长，而磷元素则可利用于花朵的发育。

3.湿管理蝴蝶兰生长所需的温湿数值较为丰富，其适宜的温湿应当保持在温度15度至25度，湿度为60%至70%之间。

其中，温度应当尽量高，以有利于蝴蝶兰的发育，而湿度则应当保持适中，以防止出现病害的发生。

3.照蝴蝶兰喜欢充足而柔和的光照环境，所以应尽可能地将蝴蝶兰移至开窗处，使其能够接受到丰富的太阳辐射，以帮助植物供能发育。

在白天，应保持植株所处的窗口敞开，以让花朵能够更好地吸收阳光。

4.分补充蝴蝶兰容易受到水分缺乏的影响，因此组织培养过程中，应定期给植株补充水分，最好是在上午和傍晚时段为植物浇水，以保证植株的温湿度，使植株继续保持良好的生长状态。

五、结束语以上就是蝴蝶兰的组织培养方法，相信只要秉持着耐心及遵循以上方法，便可以让蝴蝶兰更好地长出更美丽的花朵，为室外环境带来绚丽多彩的视觉享受，让花友们体验独特的植物魅力。

蝴蝶兰组培增殖培养的方法蝴蝶兰（Phalaenopsis）是一种受欢迎的花卉，组培增殖培养是繁殖蝴蝶兰的一种有效方法。

以下是一般的蝴蝶兰组培增殖培养的步骤：1.原植株的选择：选择健康、无病虫害的母株作为组培的原材料。

确保母株的组织状态良好，这对于组培成功至关重要。

2.材料消毒：对用于组培的材料，如培养基、器皿等进行彻底的消毒。

这可以通过高温蒸汽灭菌或化学消毒方法来实现。

3.原植株的消毒：将选定的母株进行表面消毒，通常使用漂白剂或其他合适的消毒剂来处理。

这有助于消除植物表面的细菌和真菌。

4.分离组织：从母株中分离出适当的组织，通常是茎的无菌端。

这个过程需要在无菌条件下进行，以避免外界微生物的污染。

5.培养基的配制：配制适用于蝴蝶兰组培的培养基，确保其中包含足够的营养元素、植物生长激素和其他必要的组分。

6.培养基接种：将分离出的蝴蝶兰组织放置在培养基中，确保每个组织片段都有足够的培养基供其生长。

7.培养条件的控制：维持适宜的温度、湿度和光照条件，这是组培蝴蝶兰成功生长的关键因素。

8.培养基的定期更换：定期更换培养基，以确保组培过程中的植物组织得到充足的营养，并防止过多的积累物质。

9.生根和分化：在适当的时候，蝴蝶兰的组织会开始生根和分化，形成新的植株。

这通常需要在培养基中添加适当的植物生长激素。

10.移栽到土壤中：一旦组培植物生长到足够的大小，可以将其移栽到适宜的土壤中，继续进行生长和开花。

11.定期监测和管理：对组培植物进行定期的观察和监测，确保其健康状况，必要时采取适当的管理措施。

在进行蝴蝶兰组培增殖培养时，保持无菌条件和合适的环境是至关重要的。

此外，了解植物生长激素的使用和培养基成分的影响对于成功进行组培培养也是非常重要的。

整个过程需要耐心和细致的操作，以确保蝴蝶兰在组培中获得良好的生长和繁殖。

在超净工作台或无菌室内准备好接种用的器具、容器等，并用酒精等消毒剂进行 表面消毒。
外植体接种
将消毒好的外植体切取一定大小的部分，接种到准备好的培养基上，并注意避免 污染。
培养条件
温度控制
蝴蝶兰组织培养的温度应控制 在25℃左右，并保持恒温培 养。
光照条件
培养过程中需要提供适宜的光照 ，一般使用日光灯进行补光，并 控制光照时间和强度。
接种方式
接种方式包括斜面接种和平面接种等，不同的接种方式对蝴 蝶兰组织培养的效果也有所不同。接种时需要注意外植体的 位置、大小、深度等因素，以促进蝴蝶兰组织的生长发育。
04
蝴蝶兰组织培养的应用前景
快速繁殖蝴蝶兰
繁殖速度快
通过组织培养技术，可以快速 繁殖大量的蝴蝶兰，并且可以 保证每一株蝴蝶兰的品质和性
通过组织培养技术，可以大量繁殖蝴蝶兰苗木，降低生产成本，提高种植效率， 同时保护自然生态环境。
研究蝴蝶兰的组织培养技术，对于保护和开发利用蝴蝶兰资源，丰富我国花卉品 种，提高花卉产业的经济效益和生态效益都具有重要的意义。
02
蝴蝶兰组织培养的基本流程
材料的选取和准备
适宜外植体选择
应选取健康无病害的蝴蝶兰植株作为外植体，并尽量选取其 中幼嫩的部位如茎尖、侧芽等。
细胞培养
通过组织培养技术，可以建立蝴蝶兰的细胞培养体系，进而实现大规模的细 胞培养生产，为提取细胞产物提供充足的原材料。
05
结论
研究总结
成功建立了蝴蝶兰组织培养技术体系，确定了合 适的培养基配方、消毒处理和继代培养条件，实 现了植株快速繁殖和种质保存。
通过研究不同来源和不同成熟度种子的胚培养， 建立了高效胚培养体系，为蝴蝶兰种质创新和新 品种培育提供了新的途径。

01
技术要求高
组织培养技术需要专业的知识和 技能，操作过程复杂，成本较高 。
变异风险
02
03
培养条件严格
长期进行组织培养可能导致基因 突变和变异，影响植物的遗传稳 定性。
组织培养需要在特定的温度、湿 度、光照等条件下进行，对设施 要求较高。
对未来研究的展望
优化培养条件
进一步研究蝴蝶兰组织培养的最优条件，提高培 养效率和成功率。
定期观察记录培养情况，及 时调整培养条件，促进蝴蝶 兰的生长和发育。
03
蝴蝶兰组织培养的关键技术
外植体的选择与处理
外植体的选择
选择健康、无病虫害的蝴蝶兰植株作 为外植体来源，通常使用花梗、叶片 、根等部位。
外植ห้องสมุดไป่ตู้的处理
对外植体进行消毒处理，去除表面微 生物，保证无菌条件，为后续培养打 下基础。
培养条件与环境控制
温度控制
适宜的温度是蝴蝶兰组织培养的重要条件，通常控制在25℃左右 ，以促进细胞分裂与增殖。
光照调节
适当的光照强度和时间对蝴蝶兰组织培养至关重要，通常使用散射 光或弱光，避免阳光直射。
湿度控制
保持培养环境相对湿度在70%-80%之间，以防止培养基过度干燥 或湿度过高。
细胞分裂与增殖
细胞分裂
在外植体上诱导细胞分裂，形成愈伤组织，进而分化出新的 植株。
组织培养技术在植物繁殖、种质资源 保存、基因工程和细胞工程等领域具 有广泛的应用价值。
02
蝴蝶兰组织培养的基本步骤
材料的选取与处理
选取健康、无病虫害的蝴蝶兰 植株作为材料来源。
对选取的材料进行清洗，去除 泥土和残叶。
将材料切割成适当大小的小块 ，一般以2-3厘米长的茎段为宜 。

蝴蝶兰的组织培养蝴蝶兰属单茎类兰花,其常规繁殖方法有分株法和播种法。

在常规繁殖中，有三个难以解决的问题：第一，用分株繁殖方法增殖缓慢，不利于新品种的推广；第二，种子繁殖困难，因兰花种子十分微小，胚很细弱，种子中几乎没有贮藏营养物，在自然条件下，绝大多数种子会在发芽过程中夭折，只有少数种子遇到菌根才能萌芽；第三，病毒感染严重，降低种性。

采用无菌播种和组织培养的方法进行蝴蝶兰的无性系繁殖，可以在一定程度上解决上述三个问题，成为目前大量繁殖蝴蝶兰的主要途径。

外植体的选择和消毒取蝴蝶兰花梗在自来水下用细软毛刷轻刷表面，并吸干表面水分，剪成2一3cm长的茎段。

在工作台上按以下程序进行灭菌处理：将材料放入经高温灭菌过的烧杯中；加入70％的酒精浸泡20秒；0.1％的HgCl消毒8分钟，分2次进行，每次4分钟，灭菌后用无菌水冲洗5次，每次2分钟；用解剖刀切除坏死部分后，接入培养基。

用此方法既能有效地消毒又不会对培养材料产生毒害，培养材料接入培养基后无褐化坏死现象出现。

无菌材料的试管培养培养材料的选择是蝴蝶兰组培决繁的关键。

腋芽节位以下第3、4节花梗芽是最适宜的外植体，而谷胧甘肽200mg/L既能很好地抑制褐化，又能促进试管苗的生长和分化，是蝴蝶兰组织培养中最合适的褐化抑制剂。

B5+GA32.0mg/L＋NAAO.lmg/L是较适宜的愈伤组织诱导培养基，B5+6BA1.0mg/L＋NAAO.2mg/L是较适宜的分化培养基，1/2MS+IBA1.2mg/L＋NAA0.05mg/L及2%蔗糖是较适宜的生根培养基。

将消毒后的无菌培养材料接种在愈伤组织诱导培养基上，其培养基为B5+GA32.0mg/L＋NAAO.lmg/L，培养基pH调至5.8，培养室温度控制在24士2℃。

接种后遮光放置4一5天，而后每天光照12小时，2周后，切口处开始膨大，产生淡绿色瘤状愈伤组织，并不断增大。

4周后将愈伤组织切下转接到分化培养基B5+6BA1.0mg/L＋NAA0.2mg/L上，转瓶后愈伤组织的体积和重量成指数级增加，4周左右愈伤组织表面出现较大绿色颗粒，并形成芽点，继而分化出丛生芽。

园艺园林 282023.01蝴蝶兰组织培养技术要点分析张 婷(广东省惠州市农业科学研究所，广东 惠州 516000)摘要：近年来蝴蝶兰开始频繁出现在各地区的花卉市场中，因此，相关科研单位、企业开始逐渐增加对其生产投入以及组织培养力度。

但是，现阶段蝴蝶兰生产所有的组织培养基配方、培养环境以及规格苗生产中栽培基质等尚未与国际先进水准齐平，导致蝴蝶兰产业在实际发展中受到严重限制。

本文主要是对蝴蝶兰组织培养技术要点进行分析。

关键词：蝴蝶兰；组织培养技术；原球茎本文研究了蝴蝶兰组织培养的相关技术，通过实验论证了在散射光环境下幼叶诱导蝴蝶兰原球茎能够达到最佳效果。

最佳培养基为MS+6-BA6毫克/升水解乳蛋白500毫克/升+蔗糖5克/升（pH=5.4）；最适增殖培养基为MA+6-BA2毫克/升+NAA1毫克/升+水解乳蛋白500毫克/升+蔗糖25克/升+琼脂5克/升（pH=5.4）；最适生根长苗培养基为1/2MS+IBA1.5毫克/升+NAA0.05毫克/升+0.3%活性炭+蔗糖25克/升+琼脂5克/升（pH=5.4）。

1 蝴蝶兰组织培养技术的注意事项1.1 培养基添加物对蝴蝶兰增值与分化的影响一般可以在蝴蝶兰组织培养中添加适量天然物质，能够供给蝴蝶兰幼苗微量营养成分、生长激素等，像是在其中加入120毫克/升香蕉泥，就能够对原有pH值进行缓冲，以此达到壮苗与生根作用。

相关资料指出，在培养基中加入适量椰乳或香蕉泥，能够促进原球茎的增值。

在蝴蝶兰丛生芽中加入一定的添加物，能够促进和诱导幼苗生根。

而在其内加入高浓度活性炭，能够促进原球茎增值。

1.2 原球茎继代中褐化的防治蝴蝶兰与其他兰科植物类似，原球茎状体在继代培养过程中易褐变死亡，很难增值。

通过将1克/升活性炭加入到培养基中，并在合适时间内将原球茎褐化的部分进行切除，并重新配置新鲜的培养基，防治外植体出现褐变死亡，将10%椰子水加入培养基中，能够让原球茎更快生长，在其增值环节中有效抑制褐变现象。

蝴蝶兰的组织培养技术蝴蝶兰的组织培养技术蝴蝶兰为兰科多年生附--生草本，又名蝶兰，是兰科植物中栽培最为广泛的种类之一，主要分布在热带及亚热带地区。

其花形奇特，色彩艳丽，花期持久，素有“兰中皇后”的美誉，具有极高的观赏和经济价值，在国内外花卉市场上极受欢迎。

蝴蝶兰是单茎气生兰，植株上极少发育侧枝，比其他种类的兰花更难于进行常规无性养殖。

组织培养是建立蝴蝶兰快速养殖无性系的重要手段。

1 外植体的选择蝴蝶兰的茎尖、茎段、叶片、花梗侧芽、花梗节间、根尖等部位都已有培养成功的报道，方法各异，难度各有高低。

蝴蝶兰不同外植体的成活率有差异，其中花梗侧芽的成活率最高，达75%；其次为花梗，成活率为 62.5%；叶片和根尖最差，分别为12.5%和 7.5%。

针对不同外植体，取材方法也不同，通常取花梗节之间1~2cm长的幼嫩部分，切取长 2~3mm 的切段作为外植体。

2 基本培养基的选择蝴蝶兰组织培养所采用的基本培养基包括 MS、1/2MS、VW、B5、KC、花宝及其改良型等，其中1/2MS对蝴蝶兰原球茎增殖效果最好。

3 外源激素的选择目前常使用的外源激素主要是生长素类（如IAA、2,4-Ｄ和NAA）和细胞分裂素类（如BA、ZT、KT）。

蝴蝶兰组织培养中常用的细胞分裂素为 6-BA，较高浓度（1~8mg/L）的 6-BA 能促进蝴蝶兰原球茎增殖，较低浓度（0.1~0.5mg/L）的 6-BA 则能促进原球茎分化。

适宜浓度的 6-BA 配合较低浓度的 NAA，更有利于原球茎的增殖，2.0mg/L 6-BA 和 0.3mg/L NAA配合使用是蝴蝶兰原球茎增殖的最佳组合。

4 培养基添加物对蝴蝶兰增殖和分化的影响蝴蝶兰组织培养中常加入一些天然物质如椰乳、香蕉泥、番茄汁、苹果汁等，这些物质能提供一些必要的微量营养成分、生理活性物质和生长激素等，如加入100~200mg/L香蕉泥，具有较大的 pH 缓冲作用，有利于兰科植物的壮苗和生根。

T R O PI C A L F O R E ST R Y V O L．41N0．1M甜．2018蝴蝶兰(．满天红品和)硇组织培荠技市研夯符洁，何书奋，陈运雷，麦志通(三亚市林业科学研究院，海南三亚572023)摘要：对蝴蝶兰(满天红品种)的组织培养快速繁殖技术进行研究。

主要方法以蝴蝶兰(满天红品种)的嫩叶、茎尖、花梗侧芽为外植体，进行蝴蝶兰原球茎诱导、增殖组织培养。

结果表明。

M S+6．0m g／L6-BA+0．1m g／L N A A+100m g／L椰乳是诱导蝴蝶兰原球茎形成的最佳培养基，茎尖诱导率达82．5％；M S+I．0m g／L N A A+2．0m g／L6-B A是蝴蝶兰原球茎增殖的最佳培养基，增殖系数达5．34。

在生产上，可采用试管苗生根继代培养的方法进行满天红的快速繁殖。

关键词：满天红；外植体；组织培养中图分类号：$682．31文献标识码：B dd：10．3969／j．i ss n．1672-0938．2013．01．013St udy on t i ss ue cul t ur e t echni que i n phalaenopsi s(r ed sky vari e t i es)Fu Ji e l H e Shuf en',,Che n Y unl ei2，M ai Z hi t on92For e st r y I ns t i t ut e of Sanya C i t y，Sanya，H a i na n572023)ham m er：s t udy on t he t e chnol ogy of t i ss ue cul t ur e and r a pi d pr opa gat i on of P hal ae nopsi s r r ed s ky vari et i es)．111e m ai n m et hods i S t ake or chi d(r e d s ky var i et i es)l eaves，st em t i p and pedi cel buds as expl ant s，f or Phal a enopsi sPLB s。

蝴蝶兰组织培养培养基配方一、蝴蝶兰组织培养培养基配方的重要性哎呀，宝子们！咱得先知道蝴蝶兰组织培养培养基配方那可太重要啦。

你想啊，蝴蝶兰多好看呀，就像个小仙子一样在花丛里。

要是能把这个配方弄好，就能培育出好多好多漂亮的蝴蝶兰呢。

这不仅能让我们的世界变得更美丽，说不定还能在花卉市场上赚一笔小钱钱哦。

二、基础成分1. 大量元素大量元素那可是培养基里的“主力军”呢。

比如说氮元素，就像给蝴蝶兰的成长加了个小马达，让它的叶子长得绿油油的。

磷元素也不能少呀，它能让蝴蝶兰的根长得壮壮的，就像给根打了一针强心剂。

钾元素呢，就像是一个小卫士，让蝴蝶兰能够抵御各种小毛病。

一般来说，硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾这些都是常见的大量元素来源呢。

2. 微量元素微量元素虽然量少，但是“作用大着呢”。

像铁元素，它要是不足，蝴蝶兰可能就会变得病恹恹的，叶子发黄。

还有锰、锌、铜等元素，它们就像小调料一样，缺了哪一个，蝴蝶兰的生长就会出问题。

咱们可以用一些专门的微量元素添加剂来保证这些元素的供应。

3. 有机物有机物可是给蝴蝶兰提供能量和营养的“小点心”哦。

蔗糖是最常见的有机物啦，它就像甜甜的糖果一样，给蝴蝶兰提供能量，让它能茁壮成长。

还有琼脂，这个东西可神奇了，它能让培养基变成固体，就像给蝴蝶兰做了个小床，让它可以舒舒服服地躺在上面生长。

三、特殊添加物1. 植物生长调节剂植物生长调节剂就像是蝴蝶兰的“私人小教练”。

比如说生长素，它能让蝴蝶兰的细胞快快分裂，让它长得更快。

细胞分裂素呢，能让蝴蝶兰的芽多多长出来，就像给它开了个长芽小开关。

但是这些东西可不能加太多哦，就像吃饭一样，吃多了会撑着的。

2. 维生素维生素对于蝴蝶兰来说，就像我们人类吃的保健品一样。

像维生素B1，它能让蝴蝶兰的新陈代谢变得更好，让它能够更好地吸收营养。

如果没有维生素，蝴蝶兰可能就会生长缓慢，像个小懒虫一样。

四、不同阶段的配方调整1. 诱导阶段在诱导阶段呢，我们要让蝴蝶兰的外植体开始生长。

蝴蝶兰的组织培养方法蝴蝶兰[phalaenopsis ]为兰科蝴蝶兰属植物,它是一种热带气生兰,俗称“洋兰”。

蝴蝶兰花型似蝴蝶,形态美妙、色彩丰富、花期长,在热带兰中素有“兰花皇后”之美称,。

蝴蝶兰种类丰富,分布广,东起菲律宾、新几内亚,南达澳大利亚北部,西苏门答腊,北到我国台湾、云南、四川西部均有原种(野生的蝴蝶兰) 存在,约有50 多种,其中我国有7 种,全部为附生兰。

蝴蝶兰商品化大规模栽培十分成功，是近年来在国际花卉市场上最受欢迎的洋兰。

从离体器官诱导产生类原球茎，通过类原球茎的增殖培养，得到大量幼苗，为实现蝴蝶兰工厂化生产奠定了基础。

类原球茎是一类呈珠粒状的幼嫩器官（种子萌发时先是胚的膨大,种皮破裂,一定时间后发育成肉眼可见浅黄色的原胚呈球状,称为原球茎，由其它外植体诱导产生的称类原球茎），在兰科植物中多以这种器官发育、增殖和分化。

蝴蝶兰的组培快繁有胚培养、叶片培养和腋芽培养,腋芽培养形成试管苗,再以丛生芽的方式增殖快繁,可以有效地保持母本的优良性状,变异率最低。

1 材料与方法（1）材料取已过盛花期带休眠芽的花梗作为外植体材料。

（2）材料消毒与接种切下其带芽茎段,长约2 - 3cm ,用自来水清洗干净,在饱和漂白粉上清液中浸泡15 min ,浸泡时不断搅动,浸泡后的茎段用流水冲洗干净,置于超净工作台上,先用75 %的酒精消毒30 s ,无菌水清洗1 次,再用0. 1 %的升汞浸泡10 min ,经无菌水冲洗数次,将带芽茎段接种到经设计的不同激素组合的诱导培养基上,重复3 。

（3）培养基的配制花梗腋芽诱导培养基为1/ 2MS +BA2. 5 mg/L + NAA0. 2 mg/L 。

增殖培养基为1/ 2 MS + BA3. 5 mg/L + KT1. 0 mg/L + NAA0. 5 mg/L + 椰乳10 %。

生根培养基为1/ 2MS + BA1. 5 mg/L +NAA0. 3 mg/L + 80 g/L 香蕉泥以上培养基p H 均为5. 52 结果在培养条件每天光照12 h ,光强1 600Lx ,温度25 ±2 ℃获得以下效果。