蝴蝶兰组织培养术
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蝴蝶兰的组织培养蝴蝶兰[phalaenopsis]为兰科蝴蝶兰属植物,它是一种热带气生兰,俗称“洋兰”。
蝴蝶兰花型似蝴蝶,形态美妙、色彩丰富、花期长,在热带兰中素有“兰花皇后”之美称,。
蝴蝶兰种类丰富,分布广,东起菲律宾、新几内亚,南达澳大利亚北部,西苏门答腊,北到我国台湾、云南、四川西部均有原种(野生的蝴蝶兰)存在,约有50多种,其中我国有7种,全部为附生兰。
蝴蝶兰商品化大规模栽培十分成功,是近年来在国际花卉市场上最受欢迎的洋兰。
从离体器官诱导产生类原球茎,通过类原球茎的增殖培养,得到大量幼苗,为实现蝴蝶兰工厂化生产奠定了基础。
类原球茎是一类呈珠粒状的幼嫩器官(种子萌发时先是胚的膨大,种皮破裂,一定时间后发育成肉眼可见浅黄色的原胚呈球状,称为原球茎,由其它外植体诱导产生的称类原球茎),在兰科植物中多以这种器官发育、增殖和分化。
蝴蝶兰的组培快繁有胚培养、叶片培养和腋芽培养,腋芽培养形成试管苗,再以丛生芽的方式增殖快繁,可以有效地保持母本的优良性状,变异率最低。
1材料与方法(1)材料取已过盛花期带休眠芽的花梗作为外植体材料。
(2)材料消毒与接种切下其带芽茎段,长约2-3cm,用自来水清洗干净,在饱和漂白粉上清液中浸泡15min,浸泡时不断搅动,浸泡后的茎段用流水冲洗干净,置于超净工作台上,先用75%的酒精消毒30s,无菌水清洗1次,再用0.1%的升汞浸泡10min,经无菌水冲洗数次,将带芽茎段接种到经设计的不同激素组合的诱导培养基上,重复3。
(3)培养基的配制花梗腋芽诱导培养基为1/2MS+BA2.5mg/L+NAA0.2 mg/L。
增殖培养基为1/2MS+BA3.5mg/L+KT1.0mg/L+ NAA0.5mg/L+椰乳10%。
生根培养基为1/2MS+BA1.5mg/L+NAA0.3mg/L+80 g/L香蕉泥以上培养基p H均为5.52结果在培养条件每天光照12h,光强1600Lx,温度25±2℃获得以下效果。
蝴蝶兰的组织培养快速繁殖技术蝴蝶兰属兰科蝶兰属, 蝴蝶兰以花姿似蝴蝶翩翩飞舞而得名, 属于单茎类的兰花, 但茎极短, 被大片的椭圆形叶所遮盖, 几乎无法明显的看出来。
花茎的长短因品种之不同而差异甚大, 可有10~100cm 不等, 而花朵的大小也因品种不同有所差异。
有花的直径大于15cm 的大花种, 也有小于2cm 的小花种。
而花色则有越来越多的趋势, 计有纯白、粉红、紫红、黄、绿、黄色带赤斑纹、白色红唇、白底红条纹等,不胜枚举。
常规繁殖较慢, 常通过组织培养加快繁殖, 现对其组织培养技术介绍如下。
1 原球茎的诱导培养1.1 茎尖的培养将除去叶的茎用流水冲洗干净, 再用10%的漂白粉溶液表面消毒15min, 除去叶原基后, 用5%的漂白粉溶液灭菌10min, 用无菌水冲洗干净。
在无菌条件下将茎尖及叶基部腋芽切成大小约2~3mm 的方块, 进行接种。
1.2 蝴蝶兰的诱导培养基为VW、KC、MS、BK 古川仁郎用培养基附加15%的椰乳进行液体和固体培养。
液体培养时, 至于以160 转/min 速度震荡培养, 10d 左右更换新的培养液。
培养温度为25 ℃, 光强2 000LX , 每天光照16~24h, 1 个月左右诱导出原球茎, 这时可转移到固体培养基上继续培养。
也可取试管苗植株的直径约为0.30mm 的茎尖, 不需消毒接种在MS+6- BA3mg/l 的培养基上, 培养温度为23~27 ℃, 光强1 500LX, 14d 后茎尖膨大, 颜色转绿, 3 个月后, 原球茎直径生长达6mm。
1.3 叶片培养取试管实生苗叶片为外殖体, 实生苗年龄以3~4 个月为最好, 其诱导率及每个外殖体上的原球茎增殖的个数最高。
田中道男1975 年报道, 对于120d 的小苗,可将整叶切下直接插入培养基中, 效果比将叶切断好。
并且取自第1 叶的外殖体, 原球茎形成率较老叶好; 将幼叶片切断进行培养时, 中间部分原球茎形成率比顶部和基部好; 成年植株用叶片基部好; 切断大小与诱导率直接相关, 切断太小成活率低, 以0.50cm左右为最好。
蝴蝶兰组织培养关键技术探讨首先是无菌培养技术。
无菌培养是蝴蝶兰组织培养的基础步骤,能够有效控制外界的微生物对植物的污染。
在无菌环境中进行组织培养必须具备一定的操作技巧和设备。
在培养基制备过程中,需要对培养基进行高压蒸汽消毒或滤过过滤,以确保培养基的无菌性。
在组织培养过程中还需采取一系列无菌操作,如组织的消毒处理、转移时避免接触空气等。
其次是组织愈伤与再生技术。
组织愈伤是指植物组织在应激或外界刺激作用下出现非正常的增殖现象。
对于蝴蝶兰来说,组织愈伤与再生是进行组织培养的关键步骤。
在组织愈伤培养中,可以通过调节培养基中的激素类型与浓度,促使愈伤组织的形成。
而后续的再生过程则需要恰当的培养基配方和培养条件来促进愈伤组织进一步分化为叶片、茎或芽等。
激素配方也是蝴蝶兰组织培养中的一个重要环节。
激素是促使组织发生增殖与分化的关键因子,合理配方的激素能够提高培养效果。
在蝴蝶兰组织培养中,通常会使用生长素(如NAA、IAA等)和细胞分裂素(如BA、KT等)来促进愈伤组织的生长和分化。
但需要注意的是,过量使用激素会导致愈伤组织过度生长、变异等问题,因此需要根据实际情况进行激素配方,以达到最佳效果。
最后是质壁分离技术。
质壁分离技术是蝴蝶兰组织培养中分离不同种类细胞的重要手段。
通过质壁分离可以获得纯种植物的组织或细胞,进行遗传改良和基因工程研究。
在蝴蝶兰的质壁分离过程中,需要先进行组织消毒处理,然后通过特定的酶解剂或物理方法分离细胞的质壁。
质壁分离技术的成功与否直接影响到培养后续的成活率和生长发育情况。
蝴蝶兰组织培养的关键技术包括无菌培养、组织愈伤与再生、激素配方以及质壁分离等。
这些关键技术的掌握对于蝴蝶兰的高效培养和研究具有重要意义。
未来的研究需要进一步深入探讨和改进这些技术,以促进蝴蝶兰组织培养技术的发展与应用。
简述蝴蝶兰的组织培养方法蝴蝶兰是一种极具有形象性和色彩鲜明的植物,其种类繁多,吸引着众多花友的青睐。
蝴蝶兰培植简单易行,其组织培养也十分容易,而且效果卓著。
本文就简述蝴蝶兰的组织培养方法,以期帮助花友们更好地养护蝴蝶兰。
一、选择合适的蝴蝶兰蝴蝶兰的种类及其色彩繁多,首先应根据自己的需求与喜好,在花店等地选择合适的蝴蝶兰。
蝴蝶兰应当处于正常生长状态,花朵特别是花瓣均匀、紧实,根系及叶片绿润有光泽,没有病虫害。
二、组织培养1.行插穗在蝴蝶兰培养开始前,需要将其插穗。
插穗使蝴蝶兰的根系较为疏松,利于植物的延伸生长。
将蝴蝶兰插入潮湿的细沙中,则可为植株提供良好的水分分布,促进蝴蝶兰的生长发育。
2.理肥料施用植物有两种基础营养元素,即氮元素和磷元素。
在蝴蝶兰培养过程中,需要为植株施加肥料,以满足其生长所需。
氮元素主要可利用于叶片的生长,而磷元素则可利用于花朵的发育。
3.湿管理蝴蝶兰生长所需的温湿数值较为丰富,其适宜的温湿应当保持在温度15度至25度,湿度为60%至70%之间。
其中,温度应当尽量高,以有利于蝴蝶兰的发育,而湿度则应当保持适中,以防止出现病害的发生。
3.照蝴蝶兰喜欢充足而柔和的光照环境,所以应尽可能地将蝴蝶兰移至开窗处,使其能够接受到丰富的太阳辐射,以帮助植物供能发育。
在白天,应保持植株所处的窗口敞开,以让花朵能够更好地吸收阳光。
4.分补充蝴蝶兰容易受到水分缺乏的影响,因此组织培养过程中,应定期给植株补充水分,最好是在上午和傍晚时段为植物浇水,以保证植株的温湿度,使植株继续保持良好的生长状态。
五、结束语以上就是蝴蝶兰的组织培养方法,相信只要秉持着耐心及遵循以上方法,便可以让蝴蝶兰更好地长出更美丽的花朵,为室外环境带来绚丽多彩的视觉享受,让花友们体验独特的植物魅力。
蝴蝶兰组织培养关键技术探讨植物组织培养技术在近几十年中得到了广泛应用。
它可以被用来繁殖新的植株、提取次生代谢产物、进行基因转化等。
在这些应用中,蝴蝶兰也是一个极具潜力的实验对象。
蝴蝶兰作为世界上最具代表性和最广泛应用的兰花之一,在组织培养中也有着重要的地位。
但是,由于蝴蝶兰组织培养的复杂性,使得研究人员需要更深入的了解这个体系才能更好地应用。
蝴蝶兰种植材料的选择选择合适的种植材料是组织培养的第一个步骤。
在蝴蝶兰中,筒状茎是最常用的组织培养种植材料。
它们是由花茎和叶子部分加厚而成的。
筒状茎可以容易地被分离成许多芽体和芽触须,因此只需要少量的筒状茎就能开展大规模地组织培养介质的配置蝴蝶兰不同发育阶段对培养基成分的要求也不同。
早期的幼苗需要较多的氮源和较低的磷酸盐浓度,以促进株高生长,而成熟后的植物则需要较少的氮源,较多的磷酸盐,以便生成较多的花茎和花蕾。
不同类型的蝴蝶兰组织在培养基配方上也存在差异。
对于直立型蝴蝶兰,培养基中磷酸盐的浓度可以略高,可增加花序的分化,而对于地生型蝴蝶兰,氮源的含量应该增加以增进它们的生长和发展。
植物生长调节剂的添加植物生长调节剂可以增进不同种类的蝴蝶兰的生长和分化。
常用的生长调节剂包括IAA、IBA、NAA、BA、KT、ZN、GA3、2、4-D 等,而它们的作用机制也不尽相同。
对于蝴蝶兰来说,BA 往往是组织培养中最重要的激素,它能促进幼苗生长和芽体分化。
KT 可以促进花序分化,GA3和2、4-D 对于不同种类蝴蝶兰都可以促进植株延长生长和徒长。
因此,在不同的生长阶段和应用场景中,需要选用不同的生长调节剂组合。
温度、湿度和光照等培养条件适宜的温度、湿度和光照都是组织培养中非常关键的因素。
温度以25℃ ~ 28℃ 为宜,湿度以 80% ~ 90% 为宜,植株和试管应避免暴露在直接阳光下。
在实际应用中,还需要针对不同的种类和品种,进行合理的调整和修正,以达到最优的生长效果。
蝴蝶兰组织培养技术研究蝴蝶兰组织培养技术研究一、实验目的1.能够正确选取外植体,并最其进行前处理2.能够有效防止外植体褐变的发生。
3.能够正确进行继代培养与壮苗正根培养。
4.能够利用无菌播种方式进行种子繁殖。
5.培养团队精神、责任心和科学的思维能力。
二、实验原理随着植物组织培养技术在植物快繁上的应用,近年来,对蝴蝶兰组织培养研究较多的是用胚、幼叶、茎尖和根尖、花梗腋芽等多种器官为外植体进行组织培养研究,由于所选外植体材料各异,难度也有高低,虽然有些技术已经用于大规模工厂化生产,但仍面临一些困难,有待于进一步探索和完善。
根据目前蝴蝶兰的发展状况,本文将在以花梗侧芽、茎尖、叶片为外植体材料进行组织快繁技术上作深入的探讨和研究。
三、实验仪器及试剂花梗腋芽诱导培养基为1/ 2MS +BA2. 5 mg/L + NAA0. 2 mg/L 增殖培养基为1/ 2 MS + BA3. 5 mg/L + KT1.0 mg/L + NAA0.5 mg/L + 椰乳10 %。
生根培养基为1/ 2MS + BA1. 5 mg/L +NAA0.3 mg/L + 80 g/L 香蕉泥诱导培养基为1/3MS+NAA0.5~1.0毫克/升+6-BA3.0~5.0毫克/升+椰乳15%+蔗糖30克/升+琼脂6克/升,或KC+NAA1.0毫克/升+6-BA5.0毫克/升+椰乳15%+蔗糖20克/升+琼脂6克/升柠檬酸300毫克/升以上培养基p H 均为5.6四、实验步骤与方法(一)花梗腋芽和顶芽组织培养快速繁殖技术蝴蝶兰为总状花序,通常由花梗基部算起在第4或至第7节才会分化花朵。
除最基部一节外,剥开位于该节位以上各节的苞片都可看到腋芽,近顶端的节含有未完全分化的花原始体,花轴基部的芽往往为休眠芽,常具有苞片覆盖,连同花序的顶端,都是花梗腋芽组织培养的好材料。
1.花梗腋芽的培养途径对花梗腋芽有两条培养途径,一是切取带腋芽的花梗茎段培养;二是不带花梗组织剥取茎尖生长点培养。
蝴蝶兰组织培养及体胚发生技术研究的开题报告一、选题背景和意义蝴蝶兰属于兰科植物中的高档花卉,在国内和国际市场上具有广泛的市场需求和经济价值。
由于野生种类的环境受到破坏,采摘野生种类已经受到限制,培育高品质蝴蝶兰成为了重要的发展方向。
组织培养技术是目前蝴蝶兰种质创新和繁殖方式的关键技术之一,对于快速繁殖优质、高产、抗病虫害的蝴蝶兰品种具有至关重要的作用。
二、研究目的和内容本研究的目的是探究蝴蝶兰的组织培养技术和体胚发生技术,以实现对蝴蝶兰生长发育过程的控制和调节,进而能够用于高品质蝴蝶兰的繁殖和遗传育种。
具体的研究内容包括:1. 蝴蝶兰花器官培养技术研究:通过对花茎、花粉、花柱等试管内培养的组织细胞进行生长观察和培养条件优化,实现各花器官的快速繁殖。
2. 蝴蝶兰体胚发生技术研究:通过优化外植体处理、植物生长调节物质的添加和培养基成分的调整等手段,实现蝴蝶兰体胚形成和发育,以及体胚转化和培养。
3. 蝴蝶兰品种优化和选育研究:在蝴蝶兰组织培养和繁殖技术的基础上,对蝴蝶兰种质资源进行繁育,筛选并鉴定具有优良性状的优良品种。
三、研究方法和步骤1. 蝴蝶兰花器官培养技术研究:(1)准备组织培养器材和培养基,包括培养瓶、试管等。
(2)剥离蝴蝶兰的各个器官组织。
(3)优化培养条件,包括培养基的配方、光照强度、温度、湿度等。
(4)对各器官组织的培养和生长情况进行观察和记录。
2. 蝴蝶兰体胚发生技术研究:(1)收集蝴蝶兰的植物外植体,处理后进行培养。
(2)筛选适合的培养基配方,添加生长激素、维生素和糖类等营养物质。
(3)调节培养条件,加强光照和通气。
(4)观察育苗的生长状况,测量外植体的发育情况和体胚的数量和质量指标。
3. 蝴蝶兰品种优化和选育研究:(1)选取具有潜在育种价值的蝴蝶兰品种。
(2)对外植体进行组织培养和体胚发生培养,育成大量的蝴蝶兰无性系。
(3)评价优良品种的性状,进行品种鉴定。
(4)推广优良品种,用于实际生产和市场需求。
蝴蝶兰的组织培养蝴蝶兰属单茎类兰花,其常规繁殖方法有分株法和播种法。
在常规繁殖中,有三个难以解决的问题:第一,用分株繁殖方法增殖缓慢,不利于新品种的推广;第二,种子繁殖困难,因兰花种子十分微小,胚很细弱,种子中几乎没有贮藏营养物,在自然条件下,绝大多数种子会在发芽过程中夭折,只有少数种子遇到菌根才能萌芽;第三,病毒感染严重,降低种性。
采用无菌播种和组织培养的方法进行蝴蝶兰的无性系繁殖,可以在一定程度上解决上述三个问题,成为目前大量繁殖蝴蝶兰的主要途径。
外植体的选择和消毒取蝴蝶兰花梗在自来水下用细软毛刷轻刷表面,并吸干表面水分,剪成2一3cm长的茎段。
在工作台上按以下程序进行灭菌处理:将材料放入经高温灭菌过的烧杯中;加入70%的酒精浸泡20秒;0.1%的HgCl消毒8分钟,分2次进行,每次4分钟,灭菌后用无菌水冲洗5次,每次2分钟;用解剖刀切除坏死部分后,接入培养基。
用此方法既能有效地消毒又不会对培养材料产生毒害,培养材料接入培养基后无褐化坏死现象出现。
无菌材料的试管培养培养材料的选择是蝴蝶兰组培决繁的关键。
腋芽节位以下第3、4节花梗芽是最适宜的外植体,而谷胧甘肽200mg/L既能很好地抑制褐化,又能促进试管苗的生长和分化,是蝴蝶兰组织培养中最合适的褐化抑制剂。
B5+GA32.0mg/L+NAAO.lmg/L是较适宜的愈伤组织诱导培养基,B5+6BA1.0mg/L+NAAO.2mg/L是较适宜的分化培养基,1/2MS+IBA1.2mg/L+NAA0.05mg/L及2%蔗糖是较适宜的生根培养基。
将消毒后的无菌培养材料接种在愈伤组织诱导培养基上,其培养基为B5+GA32.0mg/L+NAAO.lmg/L,培养基pH调至5.8,培养室温度控制在24士2℃。
接种后遮光放置4一5天,而后每天光照12小时,2周后,切口处开始膨大,产生淡绿色瘤状愈伤组织,并不断增大。
4周后将愈伤组织切下转接到分化培养基B5+6BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L上,转瓶后愈伤组织的体积和重量成指数级增加,4周左右愈伤组织表面出现较大绿色颗粒,并形成芽点,继而分化出丛生芽。
蝴蝶兰的组织培养技术蝴蝶兰的组织培养技术蝴蝶兰为兰科多年生附--生草本,又名蝶兰,是兰科植物中栽培最为广泛的种类之一,主要分布在热带及亚热带地区。
其花形奇特,色彩艳丽,花期持久,素有“兰中皇后”的美誉,具有极高的观赏和经济价值,在国内外花卉市场上极受欢迎。
蝴蝶兰是单茎气生兰,植株上极少发育侧枝,比其他种类的兰花更难于进行常规无性养殖。
组织培养是建立蝴蝶兰快速养殖无性系的重要手段。
1 外植体的选择蝴蝶兰的茎尖、茎段、叶片、花梗侧芽、花梗节间、根尖等部位都已有培养成功的报道,方法各异,难度各有高低。
蝴蝶兰不同外植体的成活率有差异,其中花梗侧芽的成活率最高,达75%;其次为花梗,成活率为 62.5%;叶片和根尖最差,分别为12.5%和 7.5%。
针对不同外植体,取材方法也不同,通常取花梗节之间1~2cm长的幼嫩部分,切取长 2~3mm 的切段作为外植体。
2 基本培养基的选择蝴蝶兰组织培养所采用的基本培养基包括 MS、1/2MS、VW、B5、KC、花宝及其改良型等,其中1/2MS对蝴蝶兰原球茎增殖效果最好。
3 外源激素的选择目前常使用的外源激素主要是生长素类(如IAA、2,4-D和NAA)和细胞分裂素类(如BA、ZT、KT)。
蝴蝶兰组织培养中常用的细胞分裂素为 6-BA,较高浓度(1~8mg/L)的 6-BA 能促进蝴蝶兰原球茎增殖,较低浓度(0.1~0.5mg/L)的 6-BA 则能促进原球茎分化。
适宜浓度的 6-BA 配合较低浓度的 NAA,更有利于原球茎的增殖,2.0mg/L 6-BA 和 0.3mg/L NAA配合使用是蝴蝶兰原球茎增殖的最佳组合。
4 培养基添加物对蝴蝶兰增殖和分化的影响蝴蝶兰组织培养中常加入一些天然物质如椰乳、香蕉泥、番茄汁、苹果汁等,这些物质能提供一些必要的微量营养成分、生理活性物质和生长激素等,如加入100~200mg/L香蕉泥,具有较大的 pH 缓冲作用,有利于兰科植物的壮苗和生根。
蝴蝶兰组织培养关键技术探讨蝴蝶兰是一种十分美丽的兰花,因其独特的翅膀形状和迷人的色彩而备受欢迎。
为了满足市场需求,蝴蝶兰的培养与繁殖技术也越来越受关注。
本文将探讨蝴蝶兰组织培养的关键技术。
组织培养是一种无菌技术,可以在无菌环境中培养植物组织。
在蝴蝶兰组织培养中,最重要的是获取一个无菌的种子库。
蝴蝶兰的种子通常较小,容易受到细菌和真菌的污染。
在进行组织培养之前,必须对种子进行消毒处理。
一种常用的方法是使用含有消毒剂的溶液进行浸泡。
消毒剂可以杀死种子表面的细菌和真菌,在一定程度上保证种子的无菌性。
蝴蝶兰的组织培养需要一个适宜的培养基。
培养基是供给植物生长所需的营养物质的介质。
对于蝴蝶兰来说,常用的培养基是MS培养基,其中含有适宜的无机盐、维生素和植物生长调节剂。
在组织培养的过程中,可以通过调整培养基的配方来促进植物生长和分化。
在增殖阶段,可以添加植物生长素来促进茎的增长。
而在分化阶段,可以添加植物激素来促进花器官的分化。
除了消毒和培养基,蝴蝶兰的组织培养还需要优化培养条件。
首先是温度。
蝴蝶兰是热带植物,其生长温度通常在20-30摄氏度之间。
温度过高或过低都会对植物的生长产生不良影响。
其次是光照。
蝴蝶兰是光合植物,需要足够的光照进行光合作用。
在组织培养过程中,可以使用光培养箱来提供适宜的光照条件。
最后是湿度。
蝴蝶兰喜欢湿润的环境,在培养过程中要保持适宜的湿度,可以通过喷水、遮荫等方法来调节。
蝴蝶兰的组织培养还需要注意无菌操作。
无菌操作是组织培养中最关键的一步,任何一点不慎都可能导致细菌或真菌的污染。
在进行组织培养的过程中,必须严格遵守无菌操作的要求,包括灭菌操作、佩戴无菌手套、使用无菌器械等。
只有做到严格的无菌操作,才能确保蝴蝶兰组织培养的成功。
蝴蝶兰的组织培养是一项关键的技术,需要注意消毒、培养基的选择、优化培养条件和无菌操作等方面。
只有掌握了这些技术,并进行合理的调试和优化,才能成功地培养出健康的蝴蝶兰植株。
蝴蝶兰组织培养术————————————————————————————————作者:————————————————————————————————日期:毕业论文(设计)学生姓名:指导教师:专业名称:园林技术所在系部:园林系2010年 3 月 9 日辽宁林业职业技术学院毕业论文评审书论文摘要(由论文作者填写)摘要:被誉为“洋兰王后”的蝴蝶兰,几年来一直都处于花卉销售的首位,一直受到花迷们的青睐。
近年来除了盆花,还大量被用作切花材料,切花中除我们常见的插花用途之外,还是制作胸花的好材料,在开会庆典场合备受瞩目,至于用来制作新娘捧花,也是目前国内流行的新风潮,深受广大消费者的好评,这就使得高品质的蝴蝶兰需求量逐年增加。
但目前由于专业性培育蝴蝶兰的整体水品不是很高,关键的生产环节技术薄弱,造成蝴蝶兰生产成本较高繁殖系数偏低,工业化生产效率不高,许多名贵品种短缺,品质较低,且市场售价较高。
因此建立和完善蝴蝶兰组培快繁技术是解决这一问题的关键环节.本文针对植物组织培养中常见的褐变现象,详细地分析了其产生的机理及影响因素,并提出了相应的对策,为科研和生产提供了一定的理论和实践依据。
指导教师评语(含观点、内容、文字表达方面的评价)指导教师评定成绩:指导教师:年月日评审小组意见及成绩:评审小组组长签字:年月日答辩小组意见及成绩:答辩小组组长签字:年月日毕业论文成绩:备注:蝴蝶兰品种组织培养技术摘要:被誉为“洋兰王后”的蝴蝶兰,几年来一直都处于花卉销售的首位,一直受到花迷们的青睐。
近年来除了盆花,还大量被用作切花材料,切花中除我们常见的插花用途之外,还是制作胸花的好材料,在开会庆典场合备受瞩目,至于用来制作新娘捧花,也是目前国内流行的新风潮,深受广大消费者的好评,这就使得高品质的蝴蝶兰需求量逐年增加。
但目前由于专业性培育蝴蝶兰的整体水品不是很高,关键的生产环节技术薄弱,造成蝴蝶兰生产成本较高繁殖系数偏低,工业化生产效率不高,许多名贵品种短缺,品质较低,且市场售价较高。
因此建立和完善蝴蝶兰组培快繁技术是解决这一问题的关键环节.本文针对植物组织培养中常见的褐变现象,详细地分析了其产生的机理及影响因素,并提出了相应的对策,为科研和生产提供了一定的理论和实践依据。
关键词:蝴蝶兰;快繁技术;养殖;褐变目录前言……………………………………………………………………………………………第一章蝴蝶兰的生态习性…………………………………………………第二章蝴蝶兰的快速繁殖技术…………………………………………………2.1茎尖培养…………………………………………………2.2蝴蝶蝶兰的诱导培养基为VW、KC、MS、BK……………………………2.3叶片培养…………………………………………………2.4花梗腋培养…………………………………………………2.5根尖培养…………………………………………………2.6 原球茎的继代培养与育苗…………………………………………………第三章蝴蝶兰的栽培管理…………………………………………………3.1栽培介质…………………………………………………3.2温度……………………………3.3浇水………………………………………………………………………3.4光照……………………………………………………………………3.5通风……………………………………………………………………3.6营养………………………………………………3.7花后管理………………………………………第四章蝴蝶兰褐变产生的影响因素…………………………………4.1植物种类及基因型不同的植物和不同的基因型……………………………………4.2外植体部位及生理状态外植体的部位及生理状态不同……………………………………4.3培养基成分…………………………………………………………………4.4培养条件…………………………………………………………………第五章防止外植体产生褐变的对策…………………………………5.1适当外植体的选择…………………………………………………………………5.2对外植体的处理………………………………………………………………5.3适宜的培养基………………………………………………………………5.3.1适当的无机盐浓度………………………………………………………5.3.2适当和适量的激素………………………………………………………5.3.3培养基的硬度………………………………………………………5.3.4培养基中水的硬度………………………………………………………5.3.5培养基的pH值………………………………………………………5.3.6培养条件………………………………………………………5.4添加褐变抑制剂和吸附剂………………………………………………5.5进行细胞筛选和多次转移………………………………………………总结………………………………………………………………………………………致谢………………………………………………………………………………………参考文献…………………………………………………………………………………1 蝴蝶兰的生态习性喜高温、高湿、半阴环境,越冬温度不低于18度。
由于蝴蝶兰出生于热带雨林地区,本性喜暖畏寒。
生长适温为15~20℃,冬季10C以下就会停止生长,低于5℃容易死亡。
蝴蝶兰的气根颇多,其根尖翠绿,相当敏感,要细心加以保护,切不可触动损伤,否则,就好像打坏了人的嘴巴,要正常进食就困难了。
蝴蝶兰喜欢潮湿和半阴的环境,要求空间经常保持湿度50%~70%,盆内不能淋水过多。
在夏秋季节不能让阳光直射。
但早上的朝阳对它生长最好,应充分加以利用。
如果春季阴雨天过多,晚上要用光管给它增加光照,以利日后开花。
蝴蝶兰对病虫害的抵抗力较弱,经常会发生叶斑病和根腐病,可采用农药百菌清或达仙冲1000倍溶液喷射,每隔七八天喷1次,连喷3次。
这些药液沾在叶上留有白色痕迹,可不必抹去,以利于继续发挥杀菌作用。
2蝴蝶兰的快速繁殖技术2.1茎尖培养将除去叶的茎用流水冲洗干净,再用10%的漂白粉表面消毒15min,除去叶原基后,用5%漂白粉用业灭菌10min,用无菌水冲洗干净。
在无菌条件下将茎尖及叶基部腋芽切成大小约2~3mm的方块,进行接种。
2.2蝴蝶蝶兰的诱导培养基为VW、KC、MS、BK用培养基附加15%的椰乳进行液体和固体培养。
液体培养时,至于以160转/min速度震荡培养,10d左右更新新的培养液。
培养温度为25℃,光强2000LX,每天光照16~24h,1个月左右诱导出原球茎,这时可转到固体培养基上继续培养。
也可取试管苗植株的直径约为0.30mm的茎尖,不需要消毒接种在MS+BA3mg/1的培养基上,培养温度为23-27℃,光强1500LX,14d后茎尖膨大,颜色转绿,三个月后,原球茎直径生长达6mm。
2.3叶片培养取试管实生苗片尾外植体,实生苗年龄以3~4个月为最好,其诱导率及每个外植体上的原球增殖的个数最高。
对于120d的小苗,可将整叶切下直接插入培养基中,效果比将叶切断好。
并且取自第1叶的外植体,原球茎形成率较老叶好;将幼叶骗切断进行培养时,中间部分原球茎形成率比顶部和基部好;成年植株用叶片基部好;切断大小与诱导率直接相关,切断太小成活率低,以0.50cm 左右为最好。
原球茎的诱导培养基选用。
2.4花梗腋培养增殖,最后分化成苗。
另一种培养方式是不切下腋芽,取带叶芽的花梗先进行消毒,想消毒后的芽接种到卡特兰属1号培养基上并在培养基中加入10%的香蕉匀浆。
也可用VW液体培养基震荡培养一段时间后,产生原球茎,进行切割转移、取带腋芽的花梗节。
消毒后直接插入培养基上,接种7天后,侧芽膨大并向外伸长。
2.5根尖培养将150天实生苗根尖培养在附加肌醇100mg/l、烟酸1mg/l、VB6 mg/l、VB110 mg/l、蔗糖30g/l,PH=5.5的B5培养基上,或以30转/min的转速液体震荡培养,培养温度5℃,光强2000lx每天光照12h,结果光培养与暗培养的诱导率差异不大,KT10mg/l和NAA5mg/Ld的激素配比诱导率最高达70%。
原球茎的增殖在同样的培养基上,6个月后可形成幼苗。
2.6 原球茎的继代培养与育苗继代培养基可选用诱导培养基,也可选用KC、KYOTO。
可适当加人某些附加物质及调整激素含量以促进原球茎的生长。
育苗时用培养基可选用继代培养基,加入一定量复合添加物质促进小植株的发育,如香蕉匀浆或椰乳,也可加人少量的维生素,促进根的生长。
进行球茎增殖时,将需要转移的球茎切成几小块,转人新培养基进行增殖培养,培养一段时间后,再进行切割转移,通过这种方式原球茎成倍增长。
不需继代的原球茎在继代培养基或育苗培养基上分化出芽,并逐渐发育成丛生小植株,切开丛生小植株,转人育苗培养基上,不久小植株生根,等长到一定大小时可移人温室。
切离丛生小植株时,基部未分化的原球茎及刚分化的小芽不要丢弃,收集起来植人另一育苗培养基中,作为种苗。
异端时间后将长大的种苗挑出,种植,小苗和原球茎可继续增殖分化。
这样既能得到大量的种苗,又能得到大量的不断分化的试管苗。
3蝴蝶兰的栽培管理3.1栽培介质蝴蝶兰常见的栽培介质主要以水草、苔藓为主。
3.2温度蝴蝶兰喜欢高温高湿的环境,生长时期最低温度应保持在15℃以上,蝴蝶兰适宜生长温度为16℃至30℃。
秋冬和冬春之交以及冬季气温低时应注意增温。
夏季温度偏高时需要降温,并注意通风,若温度高于32℃,蝴蝶兰通常会进入半休眠状态,要避免持续高温。
春节前后为盛花期,适当降温可延长观赏时间,开花时夜间温度最好控制在13℃至16℃之间,但不能低于13℃。
3.3浇水蝴蝶兰原产于原始森林中,雾气较多,温度较高。
zB Wlwm)9蝴蝶兰没有粗大的假球茎储存养分,如果空气中温度不足,则叶面发皱且软弱无力。
因此,蝴蝶兰宜在通风、湿度高的环境中栽培养护。
蝴蝶兰适宜生长空气湿度为50%至80%。
3.4光照尽管蝴蝶兰较喜阴,但仍需要使兰株能接受部分光照,尤其花期前后,适当的光可促使蝴蝶兰开花,使开出的花艳丽持久,一般应放在室内有散射光处,勿让阳光直射。
3.5通风蝴蝶兰的正常生长需要流动的新鲜空气,尤其是在夏季高湿期,一定要以良好的通风来防暑,同时也能避免病虫害的感染。
3.6营养蝴蝶兰要全年施肥,除非低温持续很久,否则不应停肥。
冬天为蝴蝶兰的花芽分化期,停肥很容易导致无花或花少。
春夏期间为生长期,可每隔7天至10天施用一次稀薄液肥,宜用有机肥,也可施用蝴蝶兰专用营养液,但有花蕾时勿施,否则容易提早落蕾。
夏天长叶(即花期过后),可以追施氮肥和钾肥。
秋冬花茎生长期则可用磷肥,但要稀薄,约每隔2周至3周施用一次。
施肥的时间在下午浇水以后,施肥数次后,要用大量水冲洗兰盆及兰株,以免残留的无机盐类危害根部。