生物反应器及其研究技术进展_王永红
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动物乳腺生物反应器的原理及进展摘要:动物乳腺生物反应器技术是转基因技术的应用,于上世纪80年代提出,其目的是利用动物乳腺产生目的蛋白。
利用该技术生产的蛋白具有低成本,高活性,易提取纯化的优点。
虽然该技术尚处于发展时期,但具有广阔的应用前景和巨大地商业潜力,是许多公司大力发展的对象。
关键词:动物乳腺生物反应器、原理、进展、优点动物乳腺生物反应器(mammary gland reactor)是指利用动物乳腺特异性启动子调控元件指导外源基因在乳腺中特异性表达,并能从转基因动物乳汁中获取重组蛋白的一种生物反应器。
1生物反应器(bioreactor) 经历了3 个发展阶段:细菌基因工程、细胞基因工程、转基因动物生物反应器。
细菌基因工程产物往往不具备生物活性,必须经过糖基化、羟基化等一系列修饰加工后, 才能成为有效的药物,而细胞基因工程又因为哺乳动物细胞的培养条件要求相当苛刻,成本太高,限制了规模生产。
动物生物反应器具有产品质量高,容易提纯的特点,弥补了其它各类基因表达系统的缺陷。
它是在转基因技术体系基础上发展起来的。
7自从上世纪80年代出现以来,已经取得了许多突破,现己成为生物技术研究的热点。
并向商业化阶段转变,显示了广阔的应用前景。
并且利用转基因动物乳腺生物反应器生产饮用奶,以期望获得既能满足蛋白质需要,又能增加抵抗力的品质全面的奶,为人类服务。
21、动物乳腺生物反应器的原理乳腺生物反应器的原理是应用重组DNA 技术和转基因技术,将目的基因转移到尚处于原核阶段的动物胚胎中,经胚胎移植得到转基因乳腺表达的个体。
1 外源基因在乳腺特异性表达需要乳蛋白基因的一个启动子和调控区,即需要一个引导泌乳期乳蛋白基因表达的序列,这样才能将外源基因置于乳腺特异性调节序列控制之下,使其在乳腺中表达再通过回收奶获得具有生物活性的目的蛋白。
它是一个专门化的分泌腺体,可以生产出具完全生物活性的药用重组蛋白质,其纯化简单,生产投资及成本相对较少,而且对环境不具污染性,也被称为“分子农场”。
水处理生物膜反应器的优化研究随着城市人口和工业化的不断增长,水污染问题变得越来越突出。
水处理技术因此成为现代城市必不可少的基础设施之一。
其中,生物膜反应器(Biofilm Reactor,简称BFR)在各种水处理技术中有着广泛应用。
BFR是一种维持在固体基质表面的生物膜中的生物技术。
这种处理方法下,基质表面分解有机物并获得能量的微生物群落(细菌、藻类等)会集成为薄膜状结构(生物膜)。
生物膜滞留时间长,对环境变化响应迅速,也比传统生物反应器有更高的降解效率。
BFR可以应用于各种废水处理场所,如城市污水处理厂、饮料厂、餐饮服务业、农业生态渔场等。
同时,BFR也可以应用于水质的改善、水体的脱氮脱磷以及生物膜制备等方面。
但是,BFR还存在着很多技术瓶颈,包括水动力设计、水质调控、滞留时间、反应器配置等等。
基于这些技术瓶颈,对BFR的优化研究就显得格外重要。
水动力设计水动力设计是BFR设计中的一个重要部分。
水动力设计考虑的是反应器的水流性能,包括混合、颗粒输送和质量扩散等。
BFR设计中的水动力学参数和设计参数(如滞留时间、水力周期和水力加载率等)对反应器的性能和污染物降解有着很大的影响。
因此,如何控制水动力学参数,在保证污染物降解效率的同时保证反应器的稳定性成为优化研究的一个重要方向。
为此,实验研究和理论计算相结合是一个很好的解决方法。
比如,实验室中可以通过高精度的控制系统来研究不同水力加载率下的降解效率、固-液相转换的规律等,从而为BFR设计提供理论基础支持。
水质调控由于水质是决定BFR反应效率的主要因素,因此产生了如何控制水质的问题。
BFR反应器中要控制的水质有氨氮、总氮、总磷、COD和BOD等。
BFR的水质控制具体包括几个方面:1.预处理:在BFR反应器之前进行预处理可以降低BFR系统中污染物的浓度。
预处理技术包括去除颗粒物、调整PH值、氧化去除有机物等。
2.添加特定的细菌群:有些污染物BFR系统中因为缺乏对应的微生物而难以迅速降解。
污水处理技术中的高效生物反应器研究一、引言污水处理技术是环保领域中非常重要的一个专业领域,其中高效生物反应器是一种关键的技术手段。
本文将从高效生物反应器的定义、研究历史、优势和发展前景等多个方面介绍该技术的相关知识。
二、高效生物反应器的定义高效生物反应器是污水处理技术中的一种用于生物处理污水的设备。
其通过菌类在生物膜内附着生长吸附、吸收和转化有害物质,将污染物质分解为无害物质,达到治理环境的目的。
该技术亦称高效生物接触氧化法,是利用微生物的吸附和附着能力,将废水中的有害物质转化为无害物质的一种处理方式。
三、高效生物反应器的研究历史早在20世纪60年代,高效生物反应器技术被广泛应用于下水道和排水处理中。
60年代末至70年代初的德国、美国、日本、加拿大等国,为了解决城市污染水处理的问题不断地开发和研究高效生物反应器技术。
近年来高效生物反应器技术逐渐成为国际上新兴的废水处理技术,已逐渐成为我国小型污水处理工程中使用的一项重要技术。
高效生物反应器技术在实践应用中也不断升级改进,提高其处理效率。
四、高效生物反应器的优势相较于其他的污水处理方法,高效生物反应器具有以下优势:1. 高处理效率:高效生物反应器的反应器容积较小,能快速地对废水进行处理,运营成本相对较低。
2. 适应性强:高效生物反应器技术可以处理各种不同性质的废水,应用范围广。
3. 净化效果好:高效生物反应器技术经过一段时间的运作后,废水的有害物质已经被生物降解吸收或氧化,水的净化效果明显可见,处理后的废水质量稳定可靠。
4. 维护方便:高效生物反应器的结构简单,设备维护管理相对较方便。
五、高效生物反应器的发展前景随着世界人才经济社会的快速发展,环境治理和保护更为重要,高效生物反应器技术将逐渐得到广泛应用。
未来,高效生物反应器技术将朝着更智能化、更高效率、更低成本以及更安全的方向发展。
在中国,随着全国纳污水处理厂的逐步扩建和改造,高效生物反应器技术将会取得更大的进步。
生物反应器稳定性及其影响因素分析随着科技的不断发展与人们环保意识的逐渐提高,环境污染问题愈加严重,使得环境保护成为全社会非常关注的问题。
其中,生物反应器作为一种有效的废气废水处理设备,扮演着重要的角色。
但是,生物反应器运行稳定性是影响其处理效果的一个重要因素。
本文将重点分析生物反应器稳定性及其影响因素。
一、生物反应器运行稳定性生物反应器运行稳定性是指生物反应器在长时间运行过程中,处理效果的稳定性和生物活性的稳定性。
稳定性不足会导致基础生物膜的破坏和废水处理效果下降,从而影响工程项目的安全和稳定运行。
二、生物反应器运行中影响稳定性的因素1.水质参数水质是影响生物反应器运行稳定性的最主要因素,其中影响反应器运行稳定性的水质参数主要包括溶解氧、温度、pH值、COD 和TOC等多个参数。
其中,温度、pH值和溶解氧是影响生物活性的关键因素,这些参数不应出现剧烈波动,以免影响微生物的生存和活动。
2.洗涤物洗涤物是指排放到生物反应器中的含有重金属、难以降解物等有害成分的液体,这些物质可能会对生物膜造成损伤,进而导致反应器运行不稳定。
因此,需要在反应器中添加一种特别的吸附剂以去除洗涤剂,在反应器中去除这些剂可以提高生物薄膜的稳定性。
3.营养物营养物是指对微生物生长有重要作用的物质,包括碳源、氮源和磷源等。
如果营养物不足或者过多,都会导致反应器运行不稳定。
通常微生物在生长过程中需要的碳、氮、磷比例为C:N:P=100:5:1。
反应器中的营养物浓度应该保持稳定。
4.反应器液位反应器液位也是影响反应器运行稳定性的关键因素之一。
由于液位的变化会影响到反应器中氧气流量的分配和微生物的生活环境,所以需要定期检查反应器的液位情况,并及时调整。
5.水力负荷水力负荷是指反应器中进出水流量的比例,过高的水力负荷可能会导致微生物被冲走,从而导致生物反应器的稳定性降低。
因此,在生物反应器运行的过程中,要定期检测水力负荷情况,并适时进行调整。
生物反应器的工作原理及应用生物反应器是一种用于生物工程学实验和研究的仪器设备,它使用微生物、细胞或其他生物体来生产有用化合物和产品。
生物反应器在制药、食品、化学等领域都有着广泛的应用,成为了现代生物技术行业必不可少的设备之一。
一、生物反应器的基本原理生物反应器的基本原理是利用微生物在适宜的环境中进行代谢,从而生产有用的活性物质。
这个过程中,微生物进入反应器中,通过呼吸代谢过程吸收营养,释放废物。
营养成分是微生物繁殖和生产的原料,而废物是代谢产物,必须及时排出反应器,以避免毒性产物的积累。
反应器的外部有一套控制系统,可清除废物,维持反应器内部的温度、压力和物质的浓度。
对反应器的控制非常重要,如果控制失误,反应器内部会出现废物积聚、温度失控等问题,严重时会使微生物死亡,导致产品销毁或者严重缩水。
二、生物反应器的基本组成生物反应器基本由反应室、进料系统、排出系统、控制系统和取样系统组成。
这些系统分别完成进料、排出、控制、采样等操作,在反应器的正常运行过程中扮演着重要的角色。
1. 反应室:生物反应器的核心设备,相当于一个容器或者瓶子,微生物在其中进行生长、繁殖、代谢等过程。
2. 进料系统:用于提供反应室内的养分原料、营养液等,进料系统包括喷泉、泵、管道、阀门等,可根据实际需要配置。
3. 排出系统:用于收集反应室中的废物产物和副产物,排出系统包括泵、管道、阀门等,需要定期清理和检修。
4. 控制系统:主要用于对反应器的温度、压力、气体含量、搅拌速度、pH值等进行调节控制,避免微生物死亡和产物损失。
5. 取样系统:用于取出反应室内的样品,以进行后续的分析和实验研究。
三、生物反应器的应用生物反应器在生物制药、食品工程、环境保护、合成化学等领域都有着广泛的应用。
1. 生物制药:生物反应器广泛应用于生产抗生素、酶、蛋白质等。
比如生产人胰岛素,就需要利用生物反应器培养细胞系统合成,随后分离纯化及检测。
2. 食品工程:大量的食品和饮料都需要微生物或酵素发酵才能制成,而反应器则是此过程的关键。
生物反应器的研发与应用生物反应器是一种将生物化学反应与物理、化学过程相结合的系统设备,被广泛地应用于化工、制药、食品、生命科学等领域。
生物反应器技术已成为实验室研究和工业生产中最为重要的技术之一,因此,生物反应器的研发和应用也成为了当代科技领域的热门话题。
一、生物反应器的概述生物反应器是一种人工建设独立的微生物活动环境,用于控制微生物生长、代谢、复制特性以及生物反应过程的设备。
它的基本功能是培养、调控和收获目标微生物群体,实现高效生产。
生物反应器研发起源于20世纪50年代,随着生物工程、生物技术的广泛应用,生物反应器逐渐成为生产和研究领域中不可或缺的设备。
二、生物反应器的类型生物反应器的种类根据生产目的及微生物物种不同而有多种不同形式。
其中,常用的生物反应器类型包括:1.批式生物反应器:适用于微生物的生长和代谢活动,反应物只在开始时加入,然后进行反应,反应后产物一起分离。
批式反应器可用于研究化学反应或生物反应的动力学和其他反应特性。
2.连续式生物反应器:连续进料反应器,也称稳态反应器,一般为流体床反应器。
它完全不同于批式反应器的工作方式。
连续式生物反应器一直进行,反应物质不断进入容器,反应物一直在其中运转,反应后产物也一直输出,经过处理和分离后,剩余废物会从反应器中排出。
3.复合式生物反应器:根据反应器要求进一步细分为浸渍式反应器、旋转床反应器、纤维填料床反应器、膜反应器、气液糖化发酵一体化反应器等。
三、生物反应器的应用生物反应器的广泛应用是基于其优越的技术特性和稳定性,适用于带有生物活性的物质,如细胞、酶、蛋白质、抗生素、小分子有机化合物等。
生物反应器的应用主要包括以下几个方面:1.生物化学工程领域:生物反应器是化工、制药和食品工程领域的最常见设备,可以用于生产医药、食品和化工中的生化产品。
2.生命科学研究领域:生物反应器被广泛应用于生命科学领域中的基础研究、医学研究和临床应用方面,能够有效地提高研究效率和准确性。
生物反应器技术在细胞培养中的应用随着科技的不断发展,生物工程技术逐渐成为了人类社会中普遍而重要的一项技术。
在这个领域中,人们经常使用生物反应器来进行细胞培养和生产等操作,这一技术的应用范围非常广泛。
本文将从生物反应器的基本原理、种类和应用等方面入手,探讨生物反应器技术在细胞培养中的应用。
一、生物反应器基本原理生物反应器是一种用于维护和控制细胞培养环境中生物反应的设备。
其基本原理是将压缩空气、氧气、二氧化碳、氮气、水等科学制剂按一定比例掺入培养基里,通过阀门和传感器来调整培养环境的温度、pH值、营养成分和气体浓度等,使得细胞在理想的条件下进行生存和增殖。
在生物反应器中,培养基可以通过不同的方式进入反应器内部。
比如,盘式马达等传统的方法,也有现代设备采用磁力轮等更加灵活的方式。
为了加快细胞培养速度,生物反应器中还往往会加入一些适当的激素、细胞因子等生物制剂,以及人工构建的生物足迹、三维介质等。
二、生物反应器种类根据控制方式的不同,生物反应器大致可以分为静态反应器和动态反应器两大类。
其中,静态反应器通常被人们用来进行较为简单的细胞培养工作,例如免疫细胞的分离和培养等。
而更为重要的动态反应器,又可以分为机械式反应器、泡沫式反应器、悬浮式反应器和附着式反应器四类。
其中,机械式反应器是利用机械装置来控制培养液搅拌的反应器。
这种反应器具有体积小、机器造价相对较低等优点,但其流体力学性质有一些不足之处,对于细胞培养的影响比较大。
泡沫式反应器则通过控制气泡的大小和密度来调整培养液内的气体浓度,以使培养环境更为理想。
悬浮式反应器可以使细胞长在培养液中,通过机械或气体力学力量对培养液进行搅拌,以使细胞与营养液的接触更加均匀。
这种反应器具有易于操作、细胞生长均匀等优点。
附着式反应器则可以模拟体内细胞壁对其周围环境的影响,使得细胞培养环境更加精细。
三、生物反应器技术在细胞培养中的应用由于生物反应器技术具有高效、可控的特点,在细胞培养中得到了广泛应用。
生物膜反应器技术在饮用水处理中的应用研究一、前言随着人口增加和经济发展,水资源的需求量不断增加,而水资源却变得日益缺乏。
因此,水质污染问题已经成为全球性问题。
其中,饮用水的质量对人的健康和生命安全至关重要。
生物膜反应器技术作为一种先进的技术,可以有效地处理饮用水中的污染物,保证饮用水的安全和健康。
二、生物膜反应器技术简介1.生物膜反应器技术的发展历程生物膜反应器技术是20世纪70年代兴起的一种生物处理技术,经过40多年的发展,已经成为一种成熟、先进的废水处理技术。
其主要特点是使用固定生物膜来附着和生长微生物,以达到净化水体的目的。
2.生物膜反应器技术的原理生物膜反应器技术是利用生物膜作为载体,形成微生物附着生长的微生物群落,以微生物的代谢反应作用来降解和转化废水中的有机物质和氮、磷等营养物质。
同时,利用填料内的空隙来满足废水和氧气的接触,促进微生物的代谢过程,从而达到净化水体的目的。
三、生物膜反应器技术在饮用水处理中的应用1.生物膜反应器技术在自来水处理中的应用自来水处理是指对自然水体进行处理,去除其中的有害物质,使之符合安全、卫生的要求,可以作为人们饮用和生活的用水。
生物膜反应器技术在自来水处理中的应用中,主要是针对废水处理后存量余氯、氨氮、难降有机物等特别难处理的问题。
通过生物膜反应器的处理,可以有效地去除废水中的有机物和氮、磷等营养物质,降低废水中的COD和氨氮含量,同时能够有效地去除臭味和颜色,提高水的透明度,并达到标准饮用水的要求。
2.生物膜反应器技术在地下水处理中的应用地下水是天然的水源,主要分布在地球的岩石、煤层、泥层和沙砾层等地层中。
生物膜反应器技术可以应用于地下水中的污染物去除,包括有机化合物、氮、汞等重金属离子等。
与传统的水处理工艺相比,生物膜反应器技术在处理过程中具有更低的成本和更高的效率。
同时,该技术具有可持续性和环保性,可以最大程度地保护地下水资源。
3.生物膜反应器技术在城市污水处理中的应用城市污水是城市生活污水和工业排放污水的混合物,通常含有大量的有机物质、氮、磷和重金属等有害物质。
片状载体培养生物反应器设备工艺原理生物反应器是用于生物学和生化学研究的重要工具,在制药、生物技术、食品工业等领域发挥着巨大的作用。
片状载体培养生物反应器设备是生物反应器中的一种,具有独特的设计和工艺原理。
本文将详细介绍片状载体培养生物反应器设备的工艺原理。
片状载体培养技术的介绍片状载体培养技术是一种新型的生物反应器培养技术,其特点是使用片状载体代替传统的悬浮液体系进行微生物培养。
片状载体是一种具有大孔径和高比表面积的材料,可以提供微生物所需要的适宜生长的环境。
片状载体培养技术的优点是可以提高微生物的生长速度和质量,可以降低微生物之间的竞争压力,此外,还可以降低培养过程中的氧气和营养物浪费,改善培养效果。
片状载体培养生物反应器设备的组成结构片状载体培养生物反应器设备主要由以下几部分组成:1.外壳:反应器的外壳通常采用不锈钢材料,具有较好的耐腐蚀性和高温性能,可以保证反应器的长期运行稳定。
2.内胆:反应器的内胆是用于固定片状载体的组件,通常采用多层网板表面,使载体更加稳定,并提供更大的表面积供微生物生长。
3.气体分配系统:在反应器的底部和侧面设置有进气口,可以通过气体分配系统实现进气和排气的功能,保证反应器在培养过程中的氧气供应和二氧化碳排放。
4.水循环系统和温度控制系统:反应器设备内配有水循环系统,可以通过循环水来控制反应器的温度,为微生物提供合适的生长环境。
5.空气泵:空气泵是用于将空气喷到反应器内,使片状载体和微生物得到充分的气体交换。
通过调节空气泵的运行情况,就可以控制反应器的氧气供应和碳源排放。
片状载体培养生物反应器设备的工艺原理片状载体培养生物反应器设备的工艺原理主要包括以下几个方面:1.培养物料投放:将培养物料投放到片状载体培养生物反应器内,加入合适的营养物质和生长因子,促进微生物生长和繁殖。
2.氧气供应和二氧化碳排放:通过空气泵将空气泵入反应器内,满足微生物对氧气和二氧化碳的需求。
3.水温控制:通过水循环系统和温度控制系统控制反应器的温度,为微生物提供合适的生长环境。
生物技术中的生物反应器技术生物技术广泛应用于医药、食品、环保等多个领域,其中生物反应器技术是生物技术的核心。
生物反应器是一种设备,能够在一定条件下,控制生物体的生长和代谢过程,从而合成所需的生物化学产物。
本文就生物反应器技术进行论述。
一、生物反应器基本结构生物反应器主要由进料装置、搅拌器、控制系统、反应器本体、出料系统等组成。
进料装置包括输液泵、管道、阀门等,将营养物质输送到反应器内。
搅拌器则能够均匀搅拌反应器内的物质,保证反应的均匀性。
控制系统则能够监测反应器内的压力、温度、pH值、氧气浓度等参数,从而调整反应器内的环境条件。
出料系统包括取料管道、出料泵、过滤器等,可以将合成好的生物制品从反应器内取出。
二、反应器的控制策略生物反应器中的微生物可通过正常代谢、细胞分裂和产品合成等过程产生由碳和氮组成的生物物质和能量。
生物反应器能够调节反应环境(如温度、PH值、氧气浓度等),以促进反应物质的转化。
反应器的控制策略包括控制温度、调节pH值、控制转速、控制通气量等。
其中,控制温度是反应器控制策略中最重要的一项,因为温度直接影响微生物代谢过程。
pH值对于微生物的生长和代谢都有重要影响,因此控制pH值也是一项重要的策略,可以通过添加酸、碱和缓冲剂来调节pH值。
同时,通过调节反应器内的搅拌速度、通气量和空气流速等参数,可以更好地控制反应器的反应过程,从而实现合成产品的最佳效果。
三、反应器分类根据反应器内部的操作条件和反应方式,生物反应器可分为以下几种类型:1.批量反应器。
一次只进行一次反应,适用于小规模、少量样品的合成。
2.连续反应器。
一次能够进行多次反应,适用于大规模、大量样品的合成。
3.半连续反应器。
反应器内同时进行着批量反应和连续反应的混合模式。
4.气液悬浮式反应器。
通过气流和液流共同作用,使得反应物能够更好地混合,可以实现高效合成。
5.固定床反应器。
微生物固定在反应器床上进行代谢反应,适用于少量大分子物质的合成。
组织工程生物反应器的研究进展标签::组织工程;生物反应器;研究组织工程是指用工程科学和生命科学的原理和主法,制备组织和器官替代物,以恢复、维持或改善人体组织、器官的功能,是一个发展迅速、意义深远的生物医学工程应用领域。
而目前,骨组织是仅次于血液的第二大移植物,正需要与组织工程学结合,解决大量需求的问题。
阻碍骨组织工程发展和临床应用的主要因素至少包括两点:(1)对调控组织的功能化培养的物理-生物化学因素知之还少;(2)高昂的生产成本和缺乏商业化的功能性组织工程产品。
而解决上述问题,组织工程生物反应器的角色至关重要。
组织工程生物反应器与细胞规模化扩增,细胞在基质上高密度、均匀化生长,营养物的供给和代谢物的移除等重要物质传递过程式,以及对细胞所施加的力学刺激密切相关。
它一方面可成为研究组织细胞培养的不同环境因素如何影响特定细胞、组织的三维功能化培养的重要技术手段,另一方面它是改进功能化组织质量、降低生产成本的关键之一;同时它也是组织工程从实验到标准的工业化、规模化生产,到临订应用过程中的一个关键环节。
目前应用于骨组织工程的生物反应器主要有搅拌式生物反应器、灌注式生物反应器和旋转壁式生物反应器三大类。
本文将就以上三种反应器的力学环境、细胞接种和传质作用综述如下:1力学环境在生理状态下,骨组织为适应机体活动所需的物理支持而在不断的改建和塑形,以满足不同个体对动作或姿势的特殊需求,当骨组织长期失去正常的力学刺激,骨骼可出现明显的脱钙、疏松。
在体内,成骨细胞所处的这种力学环境极为复杂,而在体外细胞培养的基础上力学刺激通常分为压应力系统、张应力系统、流体剪切应力系统和离心力培养系统。
1.1搅拌式生物反应器其主要原理是通过叶轮或是浆式搅拌器搅动培养液从而提供传质能力,为细胞培养提供一定的氧浓度和均匀的养分分布的环境,有利于细胞保持天然形态,并维持其新陈代谢在正常的生理范围。
但由于是通过搅拌,使培养液中的切应力较大,从某种意义上来说这是不适合组织工程式细胞和组织的培养。
生物反应器工程的研究与应用生物反应器工程是指通过近代工学技术研究和控制生物反应器的物质转化过程及其机理,在实践中完成对工程化生物反应器的设计、执行和管理的学科。
它是生物学、化学、机械工程、控制工程等多学科交叉的产物,应用十分广泛。
本文将从生物反应器的定义、工程化设计、发展历程以及应用等角度来探讨生物反应器工程的研究与应用。
一、生物反应器的定义生物反应器是指在有机物的存在下利用微生物、细胞或其发酵代谢产生的酶等反应催化剂对物质进行转化的设备,具有非常广泛的应用范围,例如食品工业、医药工业、农业等领域。
在生物反应器中,微生物种类繁多,包括细菌、真菌、酵母等,可以利用它们的生理代谢反应来实现许多工程化转化,从而达到特定的目的。
二、工程化设计工程化设计是生物反应器工程的重要环节之一。
工程化设计不仅需要考虑反应器的物理、化学特性,还需要考虑生物过程的生化反应机理,以及微生物种类和其代谢产物等因素,因此,工程化设计需要交叉许多学科。
在设计生物反应器的过程中,需要考虑反应器的体积、反应的温度和压力条件、搅拌条件等因素。
同时,也需要考虑反应器所处的环境条件,例如水质、氧气含量等。
对于一些特殊的微生物种类或生化反应,需要借助一些辅助设备,例如膜分离组件、气体传送系统等。
三、发展历程生物反应器工程的发展历程是由近代化学进展和生物学研究的结合而形成的。
19世纪开始,化学家们已经发现了很多化学反应,但是这些反应往往是由于温度、压力等物理条件导致的,而且往往需要添加昂贵的催化剂才能完成。
随着20世纪的到来,生物学开始成为新的研究方向,这项研究成果为生物反应器的发展奠定了基础。
20世纪之后,生物反应器工程得到飞速发展,这主要是由于微生物产生的酶和代谢产物的应用开始得到广泛关注。
在生物反应器工程中,微生物种类广泛,其生理代谢反应也各不相同,可以通过这些微生物和其代谢组分来实现一些有用的工程化任务,例如制药、食品加工、环境治理等。
生物反应器原理生物反应器是一种用于生物过程的设备,它能够提供适宜的环境条件,使生物体能够进行繁殖、生长、代谢和产生有用产物等活动。
生物反应器原理是指通过控制和优化反应器内的环境参数,以实现最佳生物反应过程的基本理论和方法。
一、生物反应器的基本构成和工作原理生物反应器由反应器本体、控制系统以及传感器组成。
反应器本体通常由容器、进出料口、搅拌装置、温度调节装置和通气系统等组件组成。
控制系统是用来监测和调整反应器内的温度、压力、酸碱度和营养物浓度等参数,以保持反应器内的环境稳定。
传感器用于实时监测和传输反应器内的各种参数数据。
生物反应器的工作原理是通过提供适宜的温度、pH值、溶解氧以及养分等条件,使微生物或细胞在反应器中进行代谢和生长,从而实现有机物的生物转化或产物的生物合成。
在反应器内,微生物或细胞与底物进行接触、酶促反应或代谢反应,并在适当的环境和资源供给下完成所需的生物过程。
二、典型的生物反应器类型1. 批量型生物反应器批量型生物反应器是最简单的反应器类型,它在反应开始时一次性放入所有的反应物,反应过程没有进料或排放。
它适用于小规模实验室研究和部分生物制药工艺。
2. 连续型生物反应器连续型生物反应器是将底物连续地输送到反应器中,同时将产物连续地排放出来。
它有稳定的温度、pH值和营养物浓度等产出,适用于大规模生产。
3. 循环型生物反应器循环型生物反应器是将反应物和生物体连续地循环,使反应物始终与生物体接触。
这种反应器能够获得更高的产物含量,并减少废物的排放。
4. 固定化生物反应器固定化生物反应器是将微生物或细胞固定在固体载体上,用来提高微生物或细胞的稳定性、降低操作成本和提高产物纯度。
三、生物反应器的参数控制和优化生物反应器的参数控制包括温度控制、pH值控制、氧气供应控制和营养物浓度控制等。
温度控制是生物反应器中最重要的参数之一,适宜的温度有利于微生物或细胞的生长和代谢。
pH值控制是确保反应器内酸碱度稳定的关键,不同微生物或细胞对pH值有不同的要求。
第11卷第2期2013年3月生物加工过程ChineseJournalofBioprocessEngineeringVol.11No.2Mar.2013
doi:10.3969/j.issn.1672-3678.2013.02.003
收稿日期:2012-12-18基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)(2012AA021201);国家重大科学仪器设备开发专项项目(2012YQ150087)作者简介:王永红(1966—),女,湖南省桂阳人,教授,研究方向:生物过程工程;张嗣良(联系人),教授,E-mail:siliangz@ecust.edu.cn
生物反应器及其研究技术进展王永红,夏建业,唐寅,杭海峰,易小萍,潘江,许建和,张嗣良(华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237)
摘要:阐述了生物反应器设计、放大的新理念及关键技术发展,并在此基础上综述了应用于生物技术产品生产的生物反应器的主要发展趋势,包括以代谢流分析为核心的生物反应器系统、基于计算流体力学模拟技术的传统发酵罐改良、微型生物反应器、动物细胞反应器和酶反应器。关键词:生物反应器;计算流体力学;微型生物反应器;动物细胞反应器;酶反应器中图分类号:TQ051文献标志码:A文章编号:1672-3678(2013)02-0014-10
RecentadvancesinbioreactoranditsengineeringWANGYonghong,XIAJianye,TANGYin,HANGHaifeng,YIXiaoping,PANJiang,XUJianhe,ZHANGSiliang
(StateKeyLaboratoryofBioreactorEngineering,EastChinaUniversityofScienceandTechnology,Shanghai200237,China)
Abstract:Theengineeringmethodologiesandkeytechnologiesforthebioreactordesignandthescale-upwerediscussed.Thedevelopmenttrendsinbioreactorsfortheproductionofbiotechnologyproductsweredescribed,includingabioreactorsystemfocusingonmetabolicfluxdetectionandanalysis,theimprovedstirred-tankbioreactorbasedoncomputationalfluiddynamics,microbioreactor,bioreactorformammaliancell,andenzymaticbioreactor.Keywords:bioreactors;computationalfluiddynamics;microbioreactors;bioreactormammaliancell;enzymaticbioreactors
1生物技术产业发展与生物反应器
随着全球社会经济快速发展,现有石油煤炭等化石资源的充分供应变得不可持续,难以支撑人类社会的高级发展目标。人类社会发展将从依赖于化石燃料等碳氢化合物资源转变为依靠淀粉、纤维素、多糖、植物和微生物油脂等可利用太阳能持续合成的碳水化合物资源。这种能源和资源结构的转变将为生物技术及其产业发展带来极大机遇和挑战。借助于各种生物系统可利用碳水化合物来规模生产现代社会所需的化学品和能源。这些生物系统包括酶、微生物、动物细胞、植物细胞和动植物组织。而生物系统进行物质转化的生化反应是在生物反应器这个相对封闭的小生境中进行的。生物反应器为生物系统的生化反应提供了可控的环境条件以促使生物过程高效进行,例如,温度、pH、溶氧、混合、剪切、补料等。另外,生物反应器系统供氧与混合效率、操作稳定性和可靠性与生物制造过程节能降耗密切相关,对生物产品生产成本产生很大影响。因而生物反应器设计、放大和操作优化技术及其产业化生产在生物产业发展中起着重要作用。传统反应器一般包括悬浮培养系统反应器和固定化培养系统反应器。前者主要包括搅拌式反应器、气升式反应器;后者主要包括膜反应器、填充床反应器。随着全球对生物技术包括生物基产品需求的快速增长和生物技术相关学科发展,生物反应器出现了一些新的发展趋势,主要表现为高通量、微型化生物反应器应用于生物过程工艺快速开发和优化;工业规模生物反应器朝着大型化、自动化方向发展,并且计算流体力学技术被应用于反应器设计与放大,增强了对于生物反应器供氧、混合与剪切性能的可预期性;对于生物加工过程高密度高产率要求,使得包含新型空气分布系统与搅拌系统有机组合的生物反应器得到了广泛的应用,极大地提高了能源使用效率;多种先进传感技术被运用于生物过程的在线测定,提高了对于生物过程生理代谢状态认识的准确性和即时性;而针对具体培养对象的特殊性,出现了一些专门反应器,如光生物反应器、动物细胞一次性反应器、酶反应器等,这些新型生物反应器也正逐步实现工业规模应用。另外,不同于一般化学或物理过程,生物反应过程涉及基因、蛋白、代谢以及细胞与环境相互作用相关的关系,因而很难用普适公式来总结描述其过程并为生物加工过程相关工程及反应器设计提供理论依据。继续研究生物反应过程基本规律及其新的表征方法是生物反应器工程及其应用获得根本重大进展的基础。在目前阶段,发展生物加工过程新型传感技术、研究可对生物过程进行表征的状态参数群并确定影响工艺优化及反应器放大的敏感参数,已被证明是针对生物加工过程的一种行之有效的工程学方法[1]。笔者在关注生物反应器设计、放大和检测、控制等关键技术的同时,着重阐述应用于生物技术产品生产的生物反应器的主要发展趋势。2以代谢流分析为核心的生物反应器系统2.1系统设计原理及构成生物过程是生物系统在生物反应器中进行生化反应的过程。生物反应器中生物系统及其所处环境构成了相对封闭的生态系统。在这一生态系统中,生物系统与环境因子间存在相互作用。生物系统,特别是以细胞为主体的生物系统,其表型不仅与基因型密切相关,也与细胞所处的微观或宏观环境条件(营养种类、pH、温度、溶解氧、生物反应器的混合与传递特性等)密切相关,也就是说基因型与环境共同决定了生物系统的表型特征。另一方面,生物过程具有高度非线性和时变性特征,难以用环境操作参数的检测与控制为目的的宏观动力学来表征其复杂的本体特征。既然以环境操作参数的检测与控制为目的的宏观动力学研究并不能真正代表生物细胞体复杂的本体特征,因而所开展的过程优化就可能成为无本之木、无水之源。有研究者提出应该结合发酵过程中参数相关的代谢特性,系统地分析细胞的代谢变化,强调细胞的生理状态与参数相关是生物反应器中物料、能量或信息传递、转换以及平衡作用的结果。随着系统生物学和合成生物学研究的深入,也有人提出环境组学研究,Klumpp等[2]开展“垂直研究”(verticalapproach)来补充组学(omics)“水平研究”(horizontalapproach)的不足。因此,尽管其微观影
响因素也许只是发生在基因、酶、细胞或反应器水平的某一个尺度上,但最终会在宏观过程中有所反映,这为研究生物反应器中不同尺度的数据关联分析方法提供了线索。因此,张嗣良等[3]提出了生物反应器生物过程的多尺度问题,认为以细胞为主体的细胞大规模培养的生物反应过程呈现出基因分子尺度、细胞尺度与生物反应器尺度的网络结构,且不同尺度的网络间有着输入输出关系,存在着信息流、物质流与能量流,不同尺度的参数相关关系更能反映生物过程的本质特征,找到影响细胞代谢流的敏感参数是生物过程控制和优化的关键。而理想的生物反应器系统应该要尽可能对于不同尺度操作参数和状态参数进行检测和分析,从而有可能构建一种优化的外在环境,使微生物的基因表达及代谢调控最有利于某种目的产物的生物合成,最大限度地积累目的产物。以上表明了生物过程的工程科学问题,即由宏观动力学研究发展到基于生物过程信息处理的多尺度理论方法研究,由此来指导以生物反应器为核心的生物过程相关工程技术发展。基于上述观点,科技部国家生化工程技术研究中心(上海)设计了一种以代谢流分析为核心的生物反应器系统,已由上海国强生化工程装备有限公
51第2期王永红等:生物反应器及其研究技术进展司组织生产。该生物反应器系统包括各种用于细胞生理代谢特性检测的先进传感器、用于生物过程微观代谢流分析的传感反应器及控制系统、适用于细胞生理代谢参数相关分析的计算机软件包和用于发酵过程数据处理及远程分析的计算机互联网系统等。该系统能够尽可能多地获得生物加工过程各尺度的生物信息,然后基于多尺度参数相关原理,通过计算机软件的实时数据处理,在海量数据中找到以参数相关性特征为依据的过程优化关键参数,进而用来指导工艺操作、设备设计或菌种筛选改造,最终实现过程优化与放大。该系统先后成功地应用于青霉素、红霉素、鸟苷、金霉素、链霉素、黄霉素、泰乐霉素、克拉维酸、基因工程白蛋白、基因工程疟疾疫苗、基因工程可利霉素、重组植酸酶、头孢菌素C、辅酶Q和维生素B12等多种产品的生产过程优化,大幅提高了发酵单位的能力,其优化工艺一般可由几十升发酵罐直接放大到上百立方米的工业生产发酵罐。2.2先进在线仪表开发和应用以代谢流分析为核心的生物反应器系统配备了先进的传感系统。除了具有pH、温度、搅拌转速、溶氧、转子流量计等常规检测控制参数外,还根据精确测定生物过程氧消耗速率(OUR)和CO2释放速率(CER)的需要配置了热质量流量计(进行进气流量的精确测定和控制,保证其不受进气压力的影响)、发酵液称量系统、尾气氧和CO2测量仪(尾气成分测定仪或过程尾气质谱分析仪)、置顶式硅油压力传感器。还可根据需要配置微观代谢流分析传感反应器及控制系统、原位活细胞浓度在线测定仪、细胞形态在线显微观测仪等在线传感器。根据测定得到的直接参数,通过用于细胞生理代谢参数相关分析的计算机软件包,可以计算得到CER、OUR和RQ等重要生理代谢状态参数。过程尾气质谱分析仪主要用于尾气中O2、CO2和N2浓度测定。该质谱仪采用电子轰击离子源,来源于不同发酵罐的尾气经过在线预处理后,通过多通路旋转阀不断地输入电离室形成离子,利用带电粒子在电场中的运动规律,四极杆质量分析器将离子源产生的离子按其质荷比(质量和电荷的比,m/z)进行分离,测定离子质量强度分布,得到化合物种类及其浓度信息,准确反映发酵尾气成分变化。测量结果可被输入到针对发酵过程设计的专用软件包,实现与其他发酵参数的相关分析。尾气质谱仪对相对分子质量300以内的挥发性气体成分都可以进行测定,因此还可根据发酵需要对乙醇、甲醇等小分子物质进行检测。该仪器目前已由上海舜宇恒平科学仪器有限公司实现国产化。生物量是发酵过程重要参数。目前通常通过一些经典测定方法,如干质量、浊度等,进行离线测定而得到。原位活细胞浓度在线测定仪不但可以进行即时的在线测定,而且获得的是生物学意义更为丰富的活细胞浓度。这对于那些培养基中含有不溶固体物质的发酵过程尤为合适。活细胞测定仪原理是基于0.1~10MHz频率范围的交变电场中,发酵液中细胞表面如细胞膜会发生非导电极化,使得有完整原生质膜的活细胞基本上像一个电容器(一般脂质原生质膜的非传导性本质使得电荷增长),而死细胞、裂解细胞、细胞碎片、气泡和其他基质组分基本上不可极化。利用双电极施加上述频率范围交变电场,双电极之间的电容测量值依赖于细胞类型和细胞大小,并在一定范围内与活菌浓度成正比。原位活细胞浓度在线测定仪适用范围包括各种动植物细胞、酵母、细菌及藻类等。但对于那些需用酸碱作为目的产物中和剂的发酵过程不合适,因为发酵液中过大的离子强度会干扰电容的准确测定。