毛细管胶束电动色谱分离技术
- 格式:pdf
- 大小:151.33 KB
- 文档页数:2
毛细管电泳色谱在手性药物拆分中的应用毛细管电泳色谱(CE)作为一种高效,高灵敏度,高分辨率,快速,经济的分离技术,在分析和拆分手性药物方面拥有极大的潜力。
手性药物通常由左右对映异构体组成,其中只有一种异构体具有治疗价值,另一种异构体可能会对人体产生负面影响。
因此,拆分出具有治疗效果的单一手性异构体对于药物的研究和开发至关重要。
毛细管电泳色谱是通过基于电场的毛细管胶体电泳技术进行分离,同时结合对分子电荷和大小的分析实现拆分的。
对于手性药物的拆分而言,毛细管电泳色谱避免了传统的手性色谱技术所需的手性色谱柱、手性试剂等昂贵的试剂和设备成本。
此外,毛细管电泳色谱还可以在光学比旋、荧光检测和质谱检测等多种检测方法下进行分析,同时可用于在线监测反应进程,这些特点使其成为一种非常有前景的手性药物拆分技术。
在毛细管电泳色谱中,选择合适的胶体和电解液对于药物分离至关重要。
对于药物分析,它们通常是带电离子。
因此,电解质的浓度和pH值的调整为药物分离中电荷作用至关重要。
此外,对手性药物的分离和拆分,还需要使用手性配体,如大环糖或丙氨酸等手性药物分离剂,以进行拆分操作。
手性配体能够与药物形成配合物,并使药物具有差异化的亲和力,从而实现手性药物的有效分离。
通过毛细管电泳色谱实现的手性药物分离与拆分,使得我们能够更好地了解药物对人体的影响,并确保临床治疗中使用的药物具有最大的疗效和安全性。
此外,这项技术还可以用于药品质量控制和新药的研发,对于药品的制造工艺控制及质量保证具有重要意义。
总之,毛细管电泳色谱作为一种高效,经济,便捷的手性药物拆分技术,使分析化学家能够更好地探索手性药物的分子结构、性质、制造工艺以及临床应用。
它在药学、环境科学、生物技术和食品科学等领域也得到了广泛应用。
毛细管胶束电动色谱法用于石韦药材中绿原酸、槲皮素和山奈酚的分离测定宋子旺;刘远环;张兰【期刊名称】《质量技术监督研究》【年(卷),期】2010(000)006【摘要】本文采用毛细管电泳胶束电动色谱法同时分离测定石韦中绿原酸、山奈酚、槲皮素含量,同时讨论了运行缓冲液的pH值、浓度以及表面活性剂SDS浓度等条件对分离的影响.以未涂层石英毛细管(75μm×70cm,有效长度60cm)为分离通道,电泳介质为20mmol/LNa2B4O7-H3BO3缓冲液(pH8.7)+40 mmol/L十二烷基硫酸钠(SDS),压力进样(0.5Psi,10s),分离电压21kV,检测波长254nm,柱温25℃,三组分在10min内达到基线分离.在最佳分离条件下,绿原酸、槲皮素、山奈酚在两个数量级范围内峰面积与浓度之间有着良好的线性关系,检测限分别为:0.2 μ g/mL,0.4μg/mL,0.5μg/mL,相关系数不低于0.999.在石韦实际样品的测定中,绿原酸、槲皮素、山奈酚的平均回收率分别为99.3%,106.1%,109.2%.该方法简单、快速、准确、重现性好,可作为天然药物石韦的质量检验与控制的一种有效工具.【总页数】6页(P8-13)【作者】宋子旺;刘远环;张兰【作者单位】福州大学食品安全分析与检测教育部重点实验室,化学化工学院,福建,福州,350108;福州大学食品安全分析与检测教育部重点实验室,化学化工学院,福建,福州,350108;福州大学食品安全分析与检测教育部重点实验室,化学化工学院,福建,福州,350108【正文语种】中文【相关文献】1.应用胶束电动毛细管色谱法分离测定银杏叶提取物中的芦丁和槲皮素 [J], 朱加虹2.毛细管电泳-电化学检测法用于中药石韦中绿原酸和槲皮素的同时测定 [J], 张兰;刘远环;何聿;陈国南3.离子液体修饰毛细管胶束电动色谱法分离测定槲皮素、绿原酸和异槲皮甙 [J], 王月伶;胡中波;袁倬斌4.分离测定鱼腥草和山楂果实中槲皮素、芸香苷和绿原酸反向迁移胶束毛细管电泳新方法 [J], 陈兴国;禹凯;朱金花5.在线扫集-胶束毛细管电动色谱法分离测定急支糖浆中阿魏酸、原儿茶醛和原儿茶酸 [J], 李利军;张瑞瑞;孙科;杨兰兰;崔福海;罗应;李彦青因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
基本原理
毛细管电色谱(Capillary electrochromatography, 简称 CEC)是在毛细管中填充或在管壁涂布、键合液相色谱的固定相,然后在毛细管的两端施加高压直流电,在电场作用下产生电渗流(Electroosmotic flow ,简称EOF),流动相在电渗流的驱动下通过色谱柱。
对中性化合物,其分离过程和HPLC类似,即通过溶质在固定相和流动相之间的分配差异而获得分离;当被分析的物质在流动相中带电荷时,除了和中性化合物一样的分配机理外,自身电泳淌度的差异对物质的分离也起相当的作用。
毛细管电色谱(capillary electro chromatography,CEC)以内含色谱固定相的毛细管为分离柱,兼具毛细管电泳及高效液相色谱的双重分离机理,既可分离带电物质也可分离中性物质。
毛细管电色谱法是用电渗流或电渗流结合压力流来推动流动相的一种液相色谱法。
因此,毛细管电色谱法可以说是HPLC和HPCE 的有机结合,它不仅克服了HPLC 中压力流本身流速不均匀引起的峰扩展,而且柱内无压降,使峰扩展只与溶质扩散系数有关,从而获得了接近于HPCE 水平的高柱效,同时还具备了HPLC 的选择性。
HPLC是用压力驱动流动相。
流速是随填充微粒的大小和柱长而变化的。
流速在管中呈抛物线轮廓,因而造成了色谱峰谱带的展宽,降低了柱效。
而CEC是采用电场推动流动相。
其线速度是与柱的直径和填微粒的大小无关的,因而在毛细管中几乎没有流速梯度。
谱带展宽效应相应的就十分小。
这点是CEC与HPLC的本质差别,也是CEC效率高于HPLC 的根本。
依靠电渗流(EOF)和电渗流结合压力流推动流动相,使中性和带电荷的样品分子根据它们在色谱固定相和流动相间吸附、分配平衡常数的不同和电泳速率不同而达到分离分析。
仪器设备: 毛细管电色谱的早期研究是在改装的CE商品仪器上进行的,随着研究的深入和对研究前景的良好预期,现在已有商品仪器既可进行电泳模式也可方便地进行电色谱研究。
目前,主要是Beckman公司的
P/ACE 系列和HP公司的HP3D系列。
检测器根据分析样品性质的不同,可选UV 检测器( 包括DAD ) 、电化学检测器、LIF及CE-MS等。
类型:在毛细管电色谱(CEC)中,色谱柱是电色谱的心脏,按照固定相的装填方式不同可以分为[7]:填充毛细管电色谱(PCCEC),开管毛细管电色谱(OTCEC),整体式毛细管电色谱(MCEC)。
PCCEC是将固定相装填在毛细管中,OTCEC是将固定相涂渍或键合在毛细管内壁上,MCEC是通过在毛细管内原位聚合或固化的方法,制成的具有多孔结构的整体式固定相。
根据分离过程中驱动力的不同可以将毛细管电色谱分
为电驱动和压力驱动电色谱。
前者是靠电渗流作为驱动力,这种情况下样品区带可以保持塞状流型,分离效率比较高。
在最初的研究中人们都使用电驱动电色谱。
压力驱动是指除了使用电渗流作为驱动力外,同时可以使用压力作为驱动力,这样可以加快分析速度,便于梯度洗脱,减小气泡生成的可能性。
其缺点是流体力学所引起的抛物线流型使柱效有所损失,一般的操作过程中所使用的压力都比较低。
操作:毛细管电色谱柱的制备
应用和前景
从目前文献报道的情况看,当采用梯度洗脱技术、与质谱联用技术、热光吸收检验器以及无孔ODS快速分析等方法时,毛细管电色谱可成功地实现氨基酸分析。
毛细管电色谱还被应用于肽、蛋白质、核苷酸和DNA 添加物等的分析中。
此外,毛细管电色谱还在离子分析、染料分析、食品分析、环境污染化合物的分离分析;石油化工产品组分的分离分析;手性对映体拆分;样品富集和预浓缩等。
中得到了应用,柱效和分离度均达到令人满意的效果。
目前CEC或pCEC的报道中,很多是以药物为模型化合物来研究评价色谱柱的性能;同时也有很多研究尝试将CEC或pCEC用于生物体液,如尿液等临床药品分析检测中,这为临床或相关药检
机构实现药品的快速高效检测提高了更新更好的选择。
毛细管电色谱(CEC)结合了高效液相色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE)的共同优点,其分离机理中即包含溶质分配系数的不同又包含电泳淌度的不同,因而选择性好,CEC中流动相是由电渗流驱动的,由于电渗流呈平面流型,因而分离柱效高,又由于电渗流不存在反压,因而可以采用小粒子填料进一步提高柱效。
CEC的理论及应用研究已成为分离分析科学领域研究的热点。
尽管CEC的研究与应用飞速发展,但人们对其认识并不深刻,研究尚处在理论探索阶段。
存在着诸如气泡产生、柱子易断、检测灵敏度低、填料种类有限等问题。
特别是在分离大分子生物样品,如DNA、蛋白质时,尚存在方法匮乏、重现性差等问题。
而这恰是CE、HPLC的优势。
因此,预计在很长一段时间内,三种方法将呈互相补充及相互验证的关系。
CEC能否成为一种实用的分离分析技术主要取决于CEC试验技术的发展。
目前,随着装柱技术、联用技术、梯度洗脱技术等的发展和完善,毛细管电色谱研究已进入实际分析应用研究阶段。
毛细管电色谱技术作为新型的分离分析技术,将有着很大的发展前景。