毛细管胶束电动色谱法分析PTH氨基酸

胶束电动毛细管色谱法分离12种肾上腺皮质激素类药物的研
究
田勇;内仓和雄
【期刊名称】《药物分析杂志》
【年(卷),期】1998(0)S1
【总页数】3页(P6-8)
【关键词】胶束电动毛细管;肾上腺皮质;激素类药物;色谱法;改性剂;分离效果;醋酸曲安奈德;毛细管胶束电泳;醋酸氟氢可的松;醋酸地塞米松
【作者】田勇;内仓和雄
【作者单位】天津市药品检验所;日本国际协力事业团
【正文语种】中文
【中图分类】TQ463
【相关文献】
1.应用毛细管区段灌注技术对胶束电动毛细管柱色谱法分离6种二硝基甲苯异构体条件的优化 [J], 高苏亚;党高潮;李华
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4.三种维生素的毛细管电泳和胶束电动毛细管色谱法分离与安培电化学检测 [J], 李关宾;范春生;邢存章
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毛细管电泳在氨基酸分析中的应用大连大学环境与化学工程学院化学112 刘纪程1.概述毛细管电泳（Capillary electrophoresis，CE）又称高效毛细管电泳（HPCE）或毛细管电分离法（CESM），是经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物。

毛细管电泳(CE)的应用包括很多内容。

已在生命科学、生物工程、医药、环境保护、食品检验等领域获得了广泛应用。

被分析的物质有离子、小分子、生物大分子乃至高分子和粒子的分析；分析对象从无机物、有机物、生物体系乃至活体单个细胞的分析；含量测定范围可从常量到微量乃至几个分子的测定电泳技术是蛋白质分离的重要手段，而毛细管电泳技术一经发明，就在多肽、蛋白质等生物活性物质的分离分析方面显示出了巨大的优越性。

1.2 CE 的分离模式CE 基于分离介质和分离原理的不同，常见的有以下几种分离模式[1， 2]：此外，还有毛细管矩阵电泳（CAE）、芯片式毛细管电泳（CCE）及非水毛细管电泳（CNACE）等，对于蛋白质和多肽的检测而言，应用最多的还是CZE和CIEF 这两种。

近年来，一些新型的电泳溶剂也得到了应用，如非水相的或者水相+ 有机相的电解液、等电点缓冲溶液，离子性液体也被用于电泳分离，这大大拓展了其应用范围[3]1.3 CE 的检测技术由于CE 进样量小的特性，对检测器的灵敏度要求很高，通常采用柱上检测。

在蛋白质和多肽的检测中，因为芳香类氨基酸有紫外吸收，故常用紫外检测器；在样品含量较低时，可采用荧光或者激光诱导荧光检测器；由于蛋白质溶液具有导电性，因此对毛细管进行改进以后，采用电导或安培电流也能检测出峰；另外，伴随蛋白质酶谱技术的发展，将CE 与质谱串联定性检测蛋白质水解后的多肽链的技术也得到了较快发展[4]。

2.氨基酸分析由于只有少数几种氨基酸在紫外范围内有吸收，所以对氨基酸分析的主要问题在于检测方式。

虽然也有报道用间接紫外、间接荧光、间接电化学、检测器测定未衍生化的氨基酸，但最灵敏的方法是采用荧光试剂将氨基酸衍生后再进行分离测定。

高效毛细管区带电泳快速测定复方氨基酸注射液中三种氨基酸
的含量
林红;柯丹如
【期刊名称】《福建医科大学学报》
【年(卷),期】2002(36)1
【摘要】@@ 氨基酸测定常用方法为离子色谱法和反相高效液相色谱法[1],这些方法分析成本高、费时.氨基酸的衍生化方法有很多种[2],本文采用2,4-二硝基氟苯(DNFB)作为衍生化试剂[3],选择具有典型代表性的Ser(中性)、Asp(酸性)和Lys(碱性)三种氨基酸为分析对象,以区带毛细管电泳为分离模式,建立了一种氨基酸衍生化方法.该法为毛细管电泳技术在氨基酸分析中的广泛应用奠定了基础.
【总页数】2页(P105-106)
【作者】林红;柯丹如
【作者单位】福建省药品检验所,福州,350001;福建医科大学,临床药理研究所,福州,350004
【正文语种】中文
【中图分类】R446.9
【相关文献】
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毛细管电泳电化学检测分离测定毛发中的色氨酸酪氨酸和半胱氨酸1.试验部分1.1仪器与试剂毛细管电泳-电化学检测系统(CE - ED) 为自组装, 包括±30 kV 高压电源(上海原子核研究所) ；三电极工作系统（直径为300μm的碳圆盘电极为检测电极、铂丝为辅助电极、饱和甘汞电极为参比电极）；三维定位调节器（上海联谊光纤激光器械厂）；BAS LC- 3D 安培检测器(Bioanalytical Systems , USA) ；HW色谱工作站（上海千谱软件有限公司）；熔融石英毛细管(长70cm，内径25μm，河北永年光导纤维厂)；超声波清洗器；毛细管清洗器（上海医科大学仪器厂）；分析天平色氨酸，酪氨酸，半胱氨酸；头发样品：志愿者提供；其它试剂为分析纯。

1.2标准溶液及样品溶液的制备标准溶液：色氨酸，半胱氨酸储备液：1.0×10- 3 g/m L，酪氨酸储备液：0.5×10- 3 g/m L，用50mmol/L硼砂－20mmol/L氢氧化钠溶液配置，再用运行缓冲液稀释至所需浓度。

样品溶液：将头发用石油醚脱脂，干燥后称取50mg置于水解管中，加入3mL6mol/L氢氧化钠（含0.5％可溶性淀粉）；水解管用真空泵抽真空3min，在酒精喷灯上封管；然后，将封好的水解管置于110o C烘箱中水解20小时。

将水解液置于已加有2.9mL6mol/L盐酸溶液的25mL容量瓶中，用蒸馏水洗涤水解管3～4次，最后用蒸馏水定容。

1.3 试验方法毛细管使用前依次用0.1mol/L的NaOH、二次水、缓冲液各冲洗5min、2min、10min。

自制碳圆盘电极使用前要用细砂纸打磨，并用超声波清洗2min，使用自组装的CE-ED检测系统，通过三维定位调节器使工作电极与毛细管的出口在同一直线上，并尽可能靠近毛细管的末端，以50mmol/L的硼砂（pH ＝8.98）缓冲液为运行液，采用电动进样，检测池内为0.1mol/L的NaO H溶液，阴极电泳槽为检测端。

收稿日期:1997-12-25毛细管气相色谱法分析氨基酸周建华(山东师范大学生物系食品教研室,济南,250014)摘要 使用弹性石英毛细管气相色谱(固定相OV )101)法,研究了十八种蛋白质氨基酸的衍生条件,选择了较理想的酯化和酰化条件,在二十分钟内成功地分离分析了十八种蛋白质氨基酸,其中大多数氨基酸分析的相对误差<5%。

关键词 氨基酸,毛细管气相色谱法,酯化,酰化中图法分类号 O657气相色谱分析是一种高效能、选择性好、灵敏度高、操作简单、应用广泛的分析、分离方法。

气相色谱法分析氨基酸成本低,并且便于与质谱联用,确定氨基酸的结构,从而有可能发现新的氨基酸或测定非蛋白质氨基酸,这是自动化氨基酸分析仪所不及的。

我们采用毛细管气相色谱法分析氨基酸,把氨基酸制备成N )三氟乙酰基正丁酯的衍生物,对氨基酸衍生条件及氨基酸的定性定量做了大量实验,最终取得了令人满意的结果,达到在二十分钟内可以定性、定量分析十八种氨基酸。

1 仪器和试剂111 仪器及实验装置日本岛津GC )9A 气相色谱仪、日本岛津C )R6A 数据处理机、上海分析仪器厂LM 14)264型平衡自动记录仪、西德sartorius 4503MP6电子微量天平、D )M S )I 直流磁力搅拌器、电热板、2ml 、10ml 安瓶112 试剂十八种标准氨基酸:l )leu 、l )Ile 、l )Val 、l )Thr 、l )Ser 、l )Met 、l )His 、l )Ala 、l )T yr 、l )Pro 、l )Lys 、l )Phe 、l )Arg 、Gly 、l )Glu 、l )H yp 、l )T rp 、l )Asp(购自中国科学院东方仪器设备公司);三氟醋酸酐(产自德国MERCK 公司);对羟基苯甲酸乙酯(化学纯);正丁醇3mol ÞL-3.5mol ÞL 盐酸溶液;二氯甲烷(分析纯);乙酸乙酯(分析纯);高纯氮。

氨基酸的分析方法
氨基酸的分析方法主要包括色谱分析、电泳分析和光谱分析。

1. 色谱分析：氨基酸的色谱分析主要包括气相色谱（GC）和高效液相色谱（HPLC）。

气相色谱通常使用气相色谱质谱联用技术（GC-MS）来鉴定和定量氨基酸。

高效液相色谱可以应用于复杂样品的分离和定量分析。

2. 电泳分析：氨基酸的电泳分析包括毛细管电泳（CE）和聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）。

毛细管电泳是一种高效、快速的氨基酸分析方法，常用于药物、食品等领域的检测。

聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于分析氨基酸的线性序列。

3. 光谱分析：氨基酸的光谱分析主要包括紫外-可见光谱（UV-Vis）、红外光谱（IR）和核磁共振光谱（NMR）。

紫外-可见光谱用于测定氨基酸的吸收特性，红外光谱可用于检测氨基酸的官能团，核磁共振光谱可提供氨基酸的结构信息。

这些方法可以单独应用或联合使用，以提供对氨基酸的定性和定量分析。

第 卷第 期色 谱 年 月 单纯形算法动态优化毛细管胶束电动色谱分离体系α王 洪 胡汉芳 尚素芬 丁天惠 顾峻岭 傅若农河北大学化学系 保定 北京理工大学化工与材料学院 北京 提 要 采用控制加权可变步长单纯形算法对 氨基酸的毛细管胶束电动色谱分离体系进行动态优化∀寻优过程中同时考虑背景电解质的 值 十二烷基硫酸钠浓度和有机添加剂浓度对体系分离效果的影响∀分别使用 系数法和均匀设计表法确定初始单纯形顶点对分离体系进行动态优化∀优化结果使 种 氨基酸获得了比较满意的分离∀关键词 毛细管胶束电动色谱法 单纯形算法 动态优化 氨基酸分类号前言毛细管胶束电动色谱法 是在毛细管区带电泳 基础上发展起来的一种高效分离技术 ∀同 一样 分离效果的影响因子较多 这些影响因子之间存在复杂的非线性相互关联性∀采用通常的优化方法 单因子方法 获得的最佳分离条件实际上可能不是最佳的∀因此 运用化学计量学方法 充分考虑各种影响因子之间的相互关联性对体系进行优化的研究已引起人们的高度重视∀全因子设计 正交设计 旋转设计和格点搜寻算法等已在毛细管电泳研究中得到应用 ∗ ∀这些方法的局限性是实验设计受影响因子数目限制 不能在优化过程中根据目标函数的优化结果调整实验设计 即不能进行动态寻优∀我们曾利用 进行了 氨基酸在应用方面的研究 ∗ 但用 进行 氨基酸的研究尚未见报道∀本文使用一种动态优化方法 控制加权可变步长单纯形算法 研究 氨基酸的 分离体系∀分别采用 系数法和均匀设计表法确定初始单纯形顶点 对影响体系分离效果的主要因素如背景电解质 的 值 十二烷基硫酸钠 的浓度和有机添加剂的浓度同时进行优化 使 种 氨基酸均获得令人满意的分离结果∀实验部分仪器型高效毛细管电泳仪 中国专利 河北大学研制 石英毛细管 ≅ Λ 有效长度 河北永年光纤厂 ∀试剂三乙胺 水解氨基酸标液 异硫氰酸苯酯 购自 公司 单个氨基酸标准 生化试剂 上海 乙腈 甲醇 磷酸 磷酸氢二钠 硼酸均为分析纯 水为二次石英蒸馏水∀实验方法电泳条件 工作电压 检测波长 毛细管冲洗和进样均通过气压进样装置 冲洗压力 进样压力 ∀每天实验前将毛细管依次使用 和 各冲洗 再进样分析 进样时间 ∀实验间隔中需用 冲洗 再进行下次分析∀由 硼酸盐 磷酸缓冲体系加 和有机添加剂组成∀氨基酸 以 为衍生试剂 其衍生步骤参见文献 ∀采用二次进样技术确定 氨基酸的出峰位置∀控制加权可变步长单纯形算法单纯形 是指多维空间的凸多边形 若分离体系的影响因子数目为ν 则单纯形是ν维空间中由ν 个顶点组成的凸多边形∀单纯形算法自 年由 提出至今 经过简单单纯形 改进单纯形 加权形心单纯形和控制加权形心单纯形的不断改进而趋于完善∀它与正交设计法 旋转设计法及均匀表设计法相比具有实验设计简单 不受所取因子数目限制的特点 尤其它的优化过程是根据实验过程中目标函数的响应情况逐步调优的 属于非线性动态寻优过程∀控制加权形心法 通过对形心加权控制使优化点的搜索方向更靠近最优区域 避免α本文收稿日期 修回日期了单纯形退化和优化速度减慢∀ 初始单纯形顶点的确定分别采用 系数法和均匀设计表法确定初始单纯形顶点 优化流程框图见图 ∀预分离试验 单因子方法 确定影响因子 初始值 步长和上下限确定初始单纯形顶点确定优化的目标函数单纯形算法优化所确定的影响因子是否获得最佳分离否是结束图 单纯形算法优化流程框图Φιγ Τηεφλοωχηαρτοφο τι ιζατιονυσινγσι λεξαλγοριτη目标函数以平均分离度和出峰数目为衡量分离效果的目标函数 平均分离度Ρ用下式表示ΡΕΜιτι τι ι ιΜ其中 Μ为被分离样品的组分总数 τι为第ι个峰峰顶处的迁移时间ι为第ι个峰的基线宽度∀结果与讨论用Λονγ系数法确定初始单纯形顶点使用单因子方法进行 氨基酸的 预分离试验 确定影响体系分离效果的影响因子为 的 值 浓度和异丙醇浓度∀其使用范围 步长和初始值列于表 ∀采用 系数法确定初始单纯形顶点并使用 软件进行 可变步长单纯形算法动态寻优 结果列于表 ∀由表 可知 当 的 值为 ∗ 浓度为 ∗ 异丙醇浓度为 ∗ 时 氨基酸可获得比较理想的分离效果∀用均匀设计表法确定初始单纯形顶点根据表 数据 采用均匀设计表法确定初始单形顶点 并使用 软件进行 可变步长单纯形算法动态寻优 结果列于表 ∀由表 可知 当 的 值为 ∗ 浓度为表 单因子法确定影响因子使用范围 步长和初始值Ταβλε Τηελι ιτσ ιντερϖαλανδινιτιαλϖαλυεοφτηεινφλυενχεφαχτορσδετερ ινεδβψσινγλεφαχτορ ετηοδ影响因子的值浓度异丙醇浓度上限下限步长初始值∗ 异丙醇浓度为 ∗ 时 氨基酸可获得比较理想的分离效果∀以上研究结果表明 用 系数法和均匀设计表法确定初始单纯形顶点进行 可变步长单纯形算法动态优化 所得最终结果相似∀当 的 值为 ∗ 的浓度为 ∗ 异丙醇的浓度为 ∗ 时 氨基酸 体系即可获得比较满意的分离结果∀用单纯形算法动态优化所获得的优化结果是各个影响因子的最佳使用范围 而不是通常由单因子优化所给出的最佳点∀由于均匀设计表法确定初始单纯形纯顶点时更充分地考虑了各影响因子之间的相互关联性 因此与 系数法相比 均匀设计表法经过较少的优化步骤就能获得比较满意的分离结果∀图 是采用均匀设计表法确定初始单纯色 谱 卷表 Λονγ系数法确定初始单纯形顶点Ταβλε Σταρτϖερτεξεσωερεδετερ ινεδβψΛονγΧοεφφιχιεντ ετηοδ顶点异丙醇浓度浓度Ρ淘汰点单纯形操作反射 扩展 收缩 出峰数目 ∀形顶点进行 可变步长单纯形算法动态优化至第 步时的 氨基酸 分离谱图 条件 硼砂 Κ ∀ 结论影响 氨基酸 体系分离效果的主要影响因子是 的 值 浓度和异丙醇浓表 均匀设计表法确定初始单纯形顶点Ταβλε Σταρτϖερτεξεσωερεδετερ ινεδβψΥνιφορ ∆εσιγνΤαβλε ετηοδ顶 点异丙醇浓度Ρ淘汰点单纯形操作意义同表 ∀期 王 洪等 单纯形算法动态优化毛细管胶束电动色谱分离体系图 Χ ΧΜ可变步长单纯形算法优化至第 步时ΠΤΧ氨基酸的ΜΕΚΧ图Φιγ ΤηεΜΕΚΧελεχτρο ηερογρα οφΠΤΧ-α ινοαχιδαττηε τηοφο τι ιζατιον ροχεδυρεωιτηΧ ΧΜϖαριαβλε-σιζεσι λεξαλγοριτη度∀这些影响因子不是独立地影响体系的分离效果 而是以复杂的非线性相互关联的关系对体系的分离效果产生影响∀尽管其相互关系很难用确定的数学方程予以描述 但通过使用控制形心加权可变步长单纯形算法 无需考虑各影响因子之间确切的关联性 就可对分离体系进行动态优化 给出各影响因子的最佳使用范围∀该优化方法与其它方法相比 实验设计简单 不受因子数目影响 是一种动态优化∀参考文献尚素芬 王 洪 色谱 ∗尚素芬 王 洪 色谱 ∗∆ψνα ιχΣχουτινγΟ τι ιζατιονφορτηεΧα ιλλαρψΜιχελλαρΕλεχτροκινετιχΧηρο ατογρα ηψ ΜΕΚΧ Σε αρατιονΣψστε ΥσινγαΧοντρολλεδ ειγητεδΧεντροιδςαριαβλε-ΣιζεΣι λεξΑλγοριτη∆ε αρτ εντοφΧηε ιστρψ ΗεβειΥνιϖερσιτψ ΒαοδινγΣχηοολοφΧηε ιχαλΕνγινεερινγ ΜατεριαλΣχιενχε ΒειϕινγΙνστιτυτεοφΤεχηνολογψ Βειϕινγ Αβστραχτ Ρ ∴ Κεψωορδσ色 谱 卷。

氨基酸检测方法1. 氨基酸色谱法氨基酸色谱法是一种常用的氨基酸检测方法。

该方法是利用氨基酸的特性，在具有特定氨基酸浓度梯度的柱子中流动时，各种氨基酸会按照一定的顺序在柱子中被分离出来。

利用这种分离技术加上不同的检测方法，可以精确地测量样品中各种氨基酸的含量。

该方法准确度高，响应灵敏，但需要高昂的仪器和耗材。

2. 离子交换色谱法离子交换色谱法也是一种常用的氨基酸检测方法。

该方法是在离子交换柱中，将混合的氨基酸样品与柱内的离子交换树脂进行交换，实现各种氨基酸的分离和测量。

该方法测量精度高，但某些疏水性氨基酸分离效果不佳。

3. 毛细管电泳法毛细管电泳法是一种高效而准确的氨基酸检测方法。

其基本原理是将氨基酸样品在带电的毛细管中进行分离，利用质量分析仪器对氨基酸进行检测。

毛细管电泳法能够在非常短的时间内对混合氨基酸进行快速、准确的测量。

4. 气相色谱法气相色谱法是一种相对快速而精确的氨基酸检测方法。

在气相色谱法中，氨基酸样品首先通过氨基酸衍生化反应使其变得易于气相分析，然后在气相色谱仪中将氨基酸进行分离和测量。

该方法准确度较高，同时也提供了氨基酸的结构信息。

5. 氢化技术法氢化技术法是一种经典的氨基酸检测方法。

该方法是将氨基酸样品加入到盛有氢气的高压釜中，加热反应，利用氢化反应将氨基酸转化为氨基酸替代物，然后对替代物进行定量测量。

该方法简单易行，但需要高压釜及氢气供应等耗材。

6. 高效液相色谱法高效液相色谱法是一种可靠的氨基酸检测方法。

其基本原理是使混合样品在高效液相色谱柱中分离，使各种氨基酸有序地流过柱中吸附剂，并使用各种检测方法获得氨基酸含量的定量信息。

该方法测量范围广，准确度高，但仍需要较昂贵的仪器和耗材。

7. 红外光谱法红外光谱法是一种非常方便和易行的氨基酸检测方法。

该方法利用分子中各个化学键的振动所导致特定波长的吸收光谱来区分各种氨基酸。

虽然红外光谱法不能直接定量测量氨基酸，但是可以通过特定的计算和数据分析方法来获得氨基酸的含量和结构信息。

1. 分光光度法氨基酸检测： 主要是利用氨基酸与衍生剂发生化学反应，产生蓝紫色化合物，该化合物在某一波长处有最大吸收峰，根据吸收值大小得到氨基酸含量。

常用的衍生剂为茚三酮。

分光光度法具有操作方便、仪器要求简单、成本低、应用范围广以及适用于芳香族氨基酸检测等特点。

2. 毛细管电泳法氨基酸检测： 根据分离原理的不同，可分为毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电电泳、毛细管等速电泳以及胶束电动力学毛细管电泳。

其中，毛细管区带电泳和胶束电动力学毛细管电泳可用于氨基酸检测。

毛细管电泳法具有分离效率高、分析时间短、溶剂用量少、无须梯度洗脱以及适用于氨基酸的手性分离等特点，但该方法分析结果重现性较差。

3. 近红外光谱法氨基酸检测： 利用有机化合物的含氢基团在特定波长区域跃迁，产生光谱的变化，结合统计学方法间接地实现氨基酸的定量检测。

近红外光谱法具有高效、无污染、无破坏性以及可同时检测多组分等特点。

4. 气相色谱法氨基酸检测：将氨基酸衍生化处理变为容易气化的物质，根据气态样品中各组分在流动相和固定相中的分配系数的不同，实现对氨基酸的定量分析。

GC法不仅能检测氨基酸含量，还可以发现新氨基酸，但缺点在于操作复杂、干扰因素多，专一性差。

5. 高效液相色谱法氨基酸检测： 是最常用的一种氨基酸检测方法。

由于大多数氨基酸本身没有紫外吸收和荧光反应，因此需要对样品进行衍生化处理将其转化为有紫外吸收和发射荧光的物质，衍生可分为柱前衍生和柱后衍生。

1)柱前衍生：是样品在进入色谱柱之前，氨基酸经衍生化转变为适合反相高效液相色谱检测的物质，常用的衍生剂有丹酰氯、邻苯二甲醛、萘二甲醛等。

实验常用的色谱柱有C8柱、C18柱和CN柱，检测方法有HPLC-UV、HPLC-ELSD、HPLC-FLD、HPLC-MS等。

2)柱后衍生：是样品经离子交换柱分离，分离后的氨基酸再进行衍生化处理。

常用的柱后衍生化试剂有茚三酮和荧光胺，其中荧光胺的灵敏度比茚三酮高大约 3个数量级。

基本原理毛细管电色谱(Capillary electrochromatography, 简称 CEC)是在毛细管中填充或在管壁涂布、键合液相色谱的固定相,然后在毛细管的两端施加高压直流电，在电场作用下产生电渗流(Electroosmotic flow ，简称EOF）,流动相在电渗流的驱动下通过色谱柱。

对中性化合物，其分离过程和HPLC类似，即通过溶质在固定相和流动相之间的分配差异而获得分离；当被分析的物质在流动相中带电荷时，除了和中性化合物一样的分配机理外，自身电泳淌度的差异对物质的分离也起相当的作用。

毛细管电色谱（capillary electro chromatography，CEC）以内含色谱固定相的毛细管为分离柱，兼具毛细管电泳及高效液相色谱的双重分离机理，既可分离带电物质也可分离中性物质。

毛细管电色谱法是用电渗流或电渗流结合压力流来推动流动相的一种液相色谱法。

因此，毛细管电色谱法可以说是HPLC和HPCE 的有机结合，它不仅克服了HPLC 中压力流本身流速不均匀引起的峰扩展，而且柱内无压降，使峰扩展只与溶质扩散系数有关，从而获得了接近于HPCE 水平的高柱效，同时还具备了HPLC 的选择性。

HPLC是用压力驱动流动相。

流速是随填充微粒的大小和柱长而变化的。

流速在管中呈抛物线轮廓，因而造成了色谱峰谱带的展宽，降低了柱效。

而CEC是采用电场推动流动相。

其线速度是与柱的直径和填微粒的大小无关的，因而在毛细管中几乎没有流速梯度。

谱带展宽效应相应的就十分小。

这点是CEC与HPLC的本质差别，也是CEC效率高于HPLC 的根本。

依靠电渗流（EOF）和电渗流结合压力流推动流动相，使中性和带电荷的样品分子根据它们在色谱固定相和流动相间吸附、分配平衡常数的不同和电泳速率不同而达到分离分析。

仪器设备: 毛细管电色谱的早期研究是在改装的CE商品仪器上进行的，随着研究的深入和对研究前景的良好预期，现在已有商品仪器既可进行电泳模式也可方便地进行电色谱研究。

毛细管电泳-电化学检测法测定淮山中8种必需氨基酸含量胡月芳;黄志强;李金芳【摘要】将8种人体内必需氨基酸(苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、色氨酸)与邻苯二甲醛(OPA)发生衍生化反应,再采用毛细管电泳-电化学检测(CE-ED)方法对其含量进行测定考察了衍生化时间、检测电位、运行缓冲液浓度和pH值、分离电压及进样时间等的影响.在优化条件下,8种氨基酸在12 min内实现了分离,线性范围为0.1～1 500 μg/L;检出限为0.01～0.05 μg/L,峰高的相对标准偏差(RSD)为1.3％～1.8％,迁移时问的RSD为0.6％～ 1.0％该方法已用于淮山样品中8种必需氨基酸的测定,加标回收率为96.8％～102.0％,RSD均不大于2.4％.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2016(035)004【总页数】5页(P471-475)【关键词】毛细管电泳;电化学检测;淮山;氨基酸【作者】胡月芳;黄志强;李金芳【作者单位】贺州学院化学与生物工程学院,广西贺州542899;贺州学院化学与生物工程学院,广西贺州542899;贺州学院化学与生物工程学院,广西贺州542899【正文语种】中文【中图分类】O657.8;O629.7淮山别名山药、怀山药等，含有氨基酸(包括人体必需的8种氨基酸)、活性多糖、薯蓣皂苷、尿囊素、胆碱、黄酮、淀粉等成分，是一种常用药材和较佳的保健食品[1]。

氨基酸是构成蛋白质的基本单位，是化学、生物、医药、农业、食品等领域的重要物质[2-3]。

随着人们对淮山营养成分认识的加深，测定淮山中氨基酸的含量，尤其是8种人体必需的氨基酸含量成为评定淮山营养价值的基本指标之一。

近年来，一般采用传统的液相色谱法或氨基酸分析仪分离氨基酸[4-6]，但色谱法在样品分离前需对色谱柱进行预处理或改性，色谱柱价格昂贵，分离效率不高，检测速度慢，操作较繁琐；氨基酸分析仪分析成本较高。

毛细管胶束电动色谱分离原理概述在电泳缓冲液中加入离子表面活性剂，当溶液中表面活性剂浓度超过临界胶束浓度时，表面活性剂的单体就结合在一起，形成一个球体，称为胶束。

胶束一般是由10--50个碳原子单位的长链分子组成，具有头部(或外层)亲水、尾部(或内层)疏水的特性。

在溶液中，头部露在外面，尾部包在胶束中。

这种胶束的形成是疏水效应的结果，能使系统的自由能减少。

胶束可分为正相胶束和反相胶束两类，以前者应用较多。

反相胶束则是指在有机溶剂中形成的胶束，尚未作系统研究。

用来作为表面活性剂的化合物很多，大体有四类:阴离子、阳离子、两性离子和非离子表面活性剂，其典型化合物及主要性质如表4.1所示。

应用最多的是前两类，且尤以十二烷基硫酸钠(SDS)等使用最为普遍。

图4.1是SDS胶束的结构示意，里面有一个疏水内核，外面布满了.S03ˉ离子。

在MECC系统中，实际上存在着类似于色谱的两相，一是流动的水相，另一是起到固定相作用的胶束相，溶质在这两相之间分配，由其在胶束中不同的保留能力而产生不同的保留值。

与毛细管区带电泳一样，由于缓冲液在靠近管壁处形成的正电，使其显示出强烈的电渗流而向阴极移动。

对于SDS胶束来说，由于其外壳带很大的负电荷，本应以较大的淌度朝阳极迁移，但由于在一般情况下电渗流的速度大于胶束的迁移速度，这就迫使胶束最终以较低的速度向阴极移动，如图4.2所示。

由此可见，毛细管胶束电动色谱有别于普通色谱的一个重要特性为它的“固定相”是移动的，这种移动的“固定相”又被称之为“准固定相’。

在毛细管胶束电动色谱中，中性粒子由于本身疏水性的不同而得以分离.具有不同疏水性的粒子与胶束的相互作用不同，疏水性强的作用力就大，其留在胶束相中的时间就长。

由于胶束相的绝对速度很小，组分的保留时间就长;反之组分较多地停留在缓冲液中按电渗的速度移动，保留时间就较短。

以上所述为使用阴离子表面活性剂的情况，如果使用阳离子表面活性别，则清况相反。