Antioxidant and Cytotoxic Phenolic Compounds of Areca Nut(Areca catechu)
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ＣＨＥＭ．ＲＥＳ．ＣＨＩＮＥＳＥ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＩＥＳ ２０１０，２６（１），１６１—１６４ Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｎｄ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｐｈｅｎｏｌｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｏｆ Ａｒｅｃａ Ｎｕｔ（Ａｒｅｃａ ｃａｔｅｃｈ ｕ）
ＺＨＡＮＧ Ｘｉｎｇ，ＷＵ Ｊｉａｏ，ＨＡＮ Ｚｈｕａｎｇ，ＭＥＩ Ｗｅｎ—ｌｉ ａｎｄ ＤＡＩ Ｈａｏ．ｆｕ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆＴｒｏｐｉｃａｌ Ｃｒｏｐ Ｂｉｏｔｅｅｈｎｏｌｏｇｙ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆＴｒｏｐｉｃａｌ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆＴｒｏｐｉｃａｌＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｈａｉｋｏｕ ５７１１０１． Ｒ．Ｃｈｉｎａ
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ Ａｒｅｃａ ｃａｔｅｃｈｕ；Ｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏｉｄ；ＤＰＰＨ；Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ；Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ Ａｒｔｉｃｌｅ ＩＤ １００５－－９０４０（２０１０）－－Ｏ１—－１６１－－０４
１ ｌｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ａｒｅｃａ ｃａｔｅｃｈｕ Ｌ．（Ｐａｌｍａｅ），ｃｏｍｍｏｎｌｙ ｋｎｏｗｎ ａｓ ａｌｌ ｊｍｐｏｒｔａｎｔ ｅｃｏｎｏｍｉｃａｌ ｓｅｅｄ ｃｒｏｐ．ｊｓ ｗｉｄｅｌｙ ｃｕｌｔｉ． ｖａｔｅｄ ｉｎ ｔｒｏｐｉｃａｌ ａｎｄ ｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌ ａｒｅａｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｉｎｄｉａ， Ｓｏｕｔｈｅａｓｔ Ａｓｉａ，Ｅａｓｔ Ａｆｒｉｃａ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｇｕｉｎｅａ．Ａｒｅｃａ ｎｕｔ（ｆｒｅｑｕｅｎｔｌｙ ｋｎｏｗｎ ａｓ ｂｅｔｅ１ ｎｕｔ）ｉｓ ｔｈｅ ｒｉｐｅ ｆｒｕｉｔ ｏｆ ｔｈｅ ｔｒｅｅ Ａ．ｃａｔｅｃｈｕ．Ａｒｅｃａ ｎｕｔ ｃａｎ ｂｅ ｃｈｅｗｅｄ ａｎｄ ｉｔ ｉｓ ａ ｃｏｍｍｏｎ ｍａｓｔｉｃａｔｏｒｙ ｉｎ ｔｒｏｐｉｃａｌ ａｎｄ ｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌ ｃｏｕｎｔｒｉｅｓ．Ｉｔ ｗａｓ ｅｓｔｉｍａｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｅａｒｌｙ １９９０ｓ ｔｈａｔ １０％ ｔ０ ２０％ｏｆ ｔｈｅ ｗｏｒｌｄ’ｓ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｃｈｅｗｅｄ ｂｅｔｅＩ ｑｕｉｄ ｄａｉｌｙ “．Ａｒｅｃａ ｎｕｔ ｉｓ ｃｏｍｍｏｎｌｙ ｕｓｅｄ ｉｎ ｆｏｌｋｌｏｒｅ ｍｅｄｉ． ｃｉｎｅ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｖａｒｉｏｕｓ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｓｕｃｈ ａｓ ｄｙｓｐｅｐ－ ｓｉａ，ｃｏｎｓｔｉｐａｔｉｏｎ，ｂｅｒｉｂｅｒｉ ａｎｄ ｏｅｄｅｍａ．Ｉｔ’ｓ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｍａｔ ｔｈｅ ａｒｅｃａ ｎｕｔ ｏｆＡ．ｃａｔｅｃｈｕ ｐｏｓｓｅｓｓｅｓ ａｎｔｈｅｌｍｉｎｔｉｃ． ａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ，ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ［ ｐｓｙｃｈｏａｃｔｉｖｅ【３＇４】， ａｎｔｉｄｅｐｒｅｓｓａｎｔ｛５１．ａｎｔｉ－Ｈ１Ｖ－１ ｔ６】ｅｆｆｅｃｔｓ ａｎｄ ｓｏ ｏｎ．Ａｒｅ． ｃａ ｎｕｔ ｃｏｎｔａｉｎｓ ５０％一６０％ｓｕｇａｒｓ． １ ５％ｌｉｐｉｄｓ （ｇｌｙｃｅｒｉｄｅ ｏｆ ｌａｕｒｉｅ，ｍｙｒｉｓｔｉｃ ａｎｄ ｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ），１ ５％ ｃｏｎｄｅｎｓｅｄ ｔａｎｎｉｎｓ（ｐｈｌｏｂａｔａｎｎｉｎ，ｃａｔｅｃｈｉｎ），ｐｏｌｙｐｈｅ－ ｎｏｌｉｃｓ（ＮＰＦ．８６ ．ＮＰＦ．８６ＩＢ．ＮＰＦ．８６１ＩＡ ａｎｄ ＮＰＦ一 ８６ＩＩＢ） ａｎｄ ０．２％一０－３％ａｌｋａｌｏｉｄｓ（ａｒｅｃｏｌｉｎｅ．ａｒｅｃａｉ． ｄｉｎｅ．ｇｕｖａｃｉｎｅ ａｎｄ ｇｕｖａｃｏｌｉｎｅ） ．Ａｌｔｈｏｕｇｈ ａ ｌｏｔ ｏｆ ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅＬ ＇６ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ａｒｅｃａ ｎｕｔ ｈａｄ ａ ｓｔｒｏｎｇ ａｎｔｉ． ｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｎｏ ｅｘａｃｔ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｎｇ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｔｏ ａｒｅｃａ ｎｕｔ ｈａｓ ｂｅｅｎ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｖｅｔ． Ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｃｏｕｒｓｅ ｏｆ ｏｕｒ ｓｅａｒｃｈｉｎｇ ｆｏｒ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｇｅｎｕｓ ｆｒｏｍ ｔｒｏｐｉｃａｌ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｌａｎｔｓ，ｌ１ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｐｏｓｓｅｓｓｉｎｇ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗｅｒｅ ｉｓｏ． １ａｔｅｄ ｂｙ ｂｉｏａｓｓａｙ．ｇｕｉｄｅｄ ｆｒａｃｔｉｏｎａｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｔＩｌｅ ＥｔｏＡｃ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｒｅｃａ ｎｕｔ．ｗｈｉｃｈ ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ ｃｏｎｓｉ． ｄｅｒａｂｌｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｖ ＤＰＰＨ ａｓｓａｙ ｉｎ ｏｕｒ ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ ｔｅｓｔ．Ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ｄｅｓｃｒｉｂｅｓ ｔｈｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，ｔｈｅｉｒ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｂｙ ＤＰＰＨ ａｓｓａｙ，ａｎｄ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ＭＴＴ ｍｅｔｈｏｄ． ２ ＭａｔｅｒｉａＩ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ ２．１ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ Ａｌ１ ｍｅｌｔｉｎｇ ｐｏｉｎｔｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ａ Ｂｅｊ— ｊｉｎｇ Ｔａｉｋｅ Ｘ－－５ ｍｅｌｔｉｎｇ ｐｏｉｎｔ ａｐｐａｒａｔｕｓ ａｎｄ ｗｅｒｅ ｕｎ・－ ｃｏｒｒｅｃｔｅｄ．Ｏｐｔｉｃａ１ ｒｏｔａｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｗｉｔｈ ａ Ｒｕｄｏｌｐｈ Ａｕｔｏｐｏｌ Ｉｌｌ ｄｉｇｉｔａｌ ｐｏｌａｒｉｍｅｔｅｒ．Ｔｈｅ ＵＶ ｓｐｅｃｔｒａ ａｎｄ ＤＰＰＨ ｒａｄｉｃａ１．ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ａｓｓａｙ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ａｎｄ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｏｎ ａ Ｂｅｃｋｍａｎ ＤＵ８００ ｓｐｅｃ－ 打ｏｍｅｔｅＬ ＩＲ ｓｐｅｃｔｒａ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｏｎ ａ Ｎｉｃｏｌｅｔ ３８０ ＦＴＩＲ ｓｐｅｃ仃ｏｍｅｔｅｒ．Ｔｈｅ Ｈ ａｎｄ”Ｃ ＮＭＲ ｓｐｅｃｔｒａ ｗｅｒｅ ｒｅｃｏｒｄｅｄ ｏｎ ａ Ｂｒｕｋｅｒ ＡＶ．４００ Ｎ Ⅱ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ Ｔｈｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｈｉｆｌｓ ｗｅｒｅ ｇｉｖｅｎ ｏｎ ｓｃａｌｅ ｗｉｔｈ ＴＭＳ ａｓ ａｎ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ，ａｎｄ ｃｏｕｐｌｉｎｇ ｃｏｎｓｔａｎｔ（Ｊ）ｗａｓ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ Ｈｚ．Ｔｈｅ ＭＳ ｄａｔａ ｗａｓ ｒｅｃｏｒｄｅｄ ｏｎ ＡＰＩ Ｑｓｔａｒ—Ｐｕｌｓａｒ ａｎｄ ＶＧ－Ａｕｔｏ—Ｓｐｅｃ一３０００ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒｓ． ＭＴＴ Ｒａｄｉｃａｌ－ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ａｓｓａｙ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｏｎ ａ Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ ｒｅａｄｅｒ（ＥＬ￣８００，Ｂｉｏ・Ｔｅｋ Ｃｏｍｐａｎｙ）．
２．２ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｒｅａｇｅｎｔｓ ＤＰＰＨ ａｎｄ ａｓｃｏｒｂｉｃ ａｃｉｄ（Ｓｉｇｍａ１ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｅｓｔ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ，Ｔｈｅ ｅｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ＳＧＣ．７９０ １ （ｈｕｍａｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）ａｎｄ ＳＭＭＣ－７７２ １（ｈｕｍａｎ ｌｉｖｅｒ ｃａｎｃｅｒ）ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ Ｃｅｌｌ Ｂａｎｋ ｏｆ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ．Ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ ｓｉｌｉｃａｌ ｇｅｌ（Ｑｉｎｇｄａｏ Ｈａｉｙａｎｇ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｇｒｏｕｐ Ｃｏ．， ２００—３００ ａｎｄ ６０—８０ ｍｅｓｈ）ｗａｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｃｏｌｕｍｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｐｒｅｃｏａｔｅｄ ｓｉｌｉｃａｌ ｇｅｌ（Ｑｉｎｇｄａｏ Ｈａｉｙａｎｇ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｇｒｏｕｐ Ｃｏ．）ｗａｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ａｎａｌｙｔｉ・ ｃａｌ ＴＬＣ．Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ一２０（２５—１ ００ ｇｍ，Ｍｅｒｃｋ）ｗａｓ
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ．Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｆｄａｉ＠ｙａｈｏｏ．ｃｎ；ｍｅｉｗｅｎｌｉ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｒｌ１．ｃｎ Ｒｅｃｅｉｖｅｄ Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２３，２００８；ａｃｃｅｐｔｅｄ Ｊａｎｕａｒｙ １ ３，２００９． Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｐｒｏｇｒａｍｓ ｆｏｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｉｎａ（Ｎｏ．２００７Ｂ １ ２７Ｂ０４） １６２ ＣＨＥＭ．ＲＥＳ．ＣＨＩＮＥＳＥ ＵＮⅣＥＲＳＩＴＩＥＳ Ｖｌｏ１．２６
ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｃｏｌｕｍｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
２．３ Ｐｌａｎｔ Ｍａｔｅｒｉａｌ Ｔｈｅ ａｒｅｃａ ｎｕｔ ｏｆ Ａ．ｃａｔｅｃｈｕ ｗａｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｄｉｎｇ’ａｎ Ｃｏｔｍｔｙ，Ｈａｉｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ．Ｃｈｉｎａ．ｊｎ Ｍａｒｃｈ ２００６．ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅ Ｐｒｏｆｅｓｓｏｒ ＤＡＩ Ｚｈｅｎｇ．ｆｕ ｏｆ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｂｉｏ— ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ｗｈｅｒｅ ａ ｖｏｕｃｈｅｒ ｓｐｅｃｉｍｅｎ（ＢＬ２００６０３０６１ ｗａｓ ｄｅｐｏｓｉｔｅｄ．
２．４ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｌｓｏｌａｔｉｏｎ Ｔｈｅ ｆｒｅｓｈｌｙ ｍｉｌｌｅｄ ａｒｅｃａ ｎｕｔ ｏｆ Ａ．ｃａｔｅｃｈｕ（３９．７ ｋｇ）ｗａｓ ｅｘｈａｕｓｔｉｖｅｌｙ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ９５％ＥｔＯＨ ａｔ ｒｏｏｍ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ．Ａｆｔｅｒ ｅｖａｐｏｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｒｅｓｉｄｕｅ ｗａｓ ｓｕｓｐｅｎｄｅｄ ｉｎ ｗａｔｅｒ ａｎｄ ｐａｒｔｉｔｉｏｎｅｄ ｗｉｔｈ ｌｉｇｈｔ ｐｅｔｒｏ－ ｌｅｕｍ，ＥｔＯＡｃ ａｎｄ，２－ＢｕＯＨ ｓｕｃｃｅｓｓｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｃｒｕｄｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ．ＥｔＯＡｃ ａｎｄ －ＢｕＯＨ ｆｆａｃ－ ｔｉｏｎｓ ｓｈｏｗｅｄ ＳＣｓ０ ｖａｌｕｅｓ（ＳＣ５０ ｖａｌｕｅ ｗａｓ ｅｘｔｒａｐｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｌｉｎｅｒ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ ｄｅｎｏｔｅｄ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｍｐｌｅ ｒｅｑｕｉｒｅｄ ｔｏ ｓｃａｖｅｎｇｅ ５０％ｏｆ ＤＰＰＨ ｒａｄｉｃａｌｓ）ｏｆ＞１００，２７．６ ａｎｄ ８５．１ ｌｘｇ／ｍＬ，ｂｙ ＤＰＰＨ ａｓｓａｙ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ｔｈａｔ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ ｗｅｒｅ ｍａｉｎｌｙ ｃｏｎｔａｉｎｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ＥｔＯＡｃ ｆｒａｃｔｉｏｎ，ｗｈｉｃｈ ｆｕｒｔｈｅｒ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｗａｓ ｆｏｃｕｓｅｄ ｏｎ． Ｔｈｅ ＥｔＯＡｃ ｆｒａｃｔｉｏｎ（２ １．６ ｇ）ｗａｓ ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ ｔｏ ｃｏｌｕｍｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｏｖｅｒ ｓｉｌｉｃａｌ ｇｅｌ ｅｌｕｔｅｄ ｗｉｔｈ ＣＨＣｌ ．ＭｅＯＨ ｇｒａｄｉｅｎｔｓ（ｖｏｌｕｍｅ ｒａｔｉｏ ５０：１ ｔｏ ０：１）ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ７ ｆｒａｃｔｉｏｎｓ（Ａ １一Ａ７）．Ｒｅｐｅａｔｅｄ ｃｏｌｕｍｎ ｃｈｒｏ— ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｏｎ ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｅｌｕｔｅｄ ｗｉｔｈ ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ ｅｔｈｅｒ－ａｃｅｔｏｎｅ ｇｒａｄｉｅｎｔｓ（４：ｌ一２：１．ｖｏｌｕｍｅ ｒａｔｉｏ１ ａｎｄ Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ．２０（９５％ＥｔＯＨ），ｌｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄｓ １（１１．９ ｒａｇ），２（５．４ ｍｇ），ａ（１６．６ ｍｇ）ａｎｄ ９（１３．６ ｍｇ）ｆｒｏｍ Ａ１（２．５ ｇ）．Ｆｒａｃｔｉｏｎ Ａ２（４．３ ｇ） ｗａｓ ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ ｔｏ Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ一２０ ａｎｄ ｔｈｃｎ ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ ｔｏ ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｔｏ ｙｉｅｌｄ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｓ（２０．０ ｒａｇ），６（１９．０ ｍｇ），７（３．１ ｒａｇ）ａｎｄ １１（１１．６ ｒａｇ）． Ｆｒａｃｔｉｏｎ Ａ３（３．４ ｇ）ｗａｓ ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ ｔｏ Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ一２０ （９５％ＥｔＯＨ）ｔｏ ｙｉｅｌｄ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ４（１８．２ ｍｇ）ａｎｄ ８（１６．１ ｍｇ）．Ａｄ６．３ ｇ）ｗａｓ ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ ｔｏ ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｅｌｕｔｅｄ ｗｉｔｈ ＣＨＣＩ３一ＭｅＯＨ（２０：ｌ一５：１． ｖｏｌｕｍｅ ｒａｔｉｏ）ｔｏ ｙｉｅｌｄ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｌｏ（１ １．６ ｍｇ）． Ｈ１ＣＯ ２．５ ＤＰＰＨ Ｒａｄｉｃａｌ—ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ Ａｓｓａｙ Ｔｈｅ ＤＰＰＨ ａｓｓａｙ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ａｓ ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ［ ． Ｉｎ ｔｈｉｓ ａｓｓａｙ，ａｓｃｏｒｂｉｃ ａｃｉｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｎ— ｔｒｏｌ，ａ ０．１ ｍｍｏｌ／Ｌ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ＤＰＰＨ（１，１－ｄｉｐｈｅｎｙｌ一２一 ｐｉｃｒｙｌｈｙｄｒａｚｙ１）ｉｎ ｍｅｔｈａｎｏｌ ｗａｓ ｐｒｅｐａｒｅｄ ａｎｄ ｔｏ ２ ｍＬ ｏｆ ｍｉｓ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｗａｓ ａｄｄｅｄ ０．１ ｍＬ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｉｎ ｍｅｔｈａｎｏ１ ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｒ １．５６一ｌ ００￣ｔｇ／ｍＬ）．Ｔｈｅ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｍｉｘｔｕｒｅｓ ｗｅｒｅ ｉｎ・ ｃｕｂａｔｅｄ ａｔ ｒｏｏｍ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｆｏｒ ３０ ｒａｉｎ．Ａｆｔｅｒ ｉｎｃｕｂａ－ ｔｉｏｎ，ｔｈｅ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ｗａｓ ｒｅａｄ ａｔ ５１７ ｎｍ，ａｎｄ ｍｅａｎ ｖａｌｕｅ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｒｅｅ ｄｕｐｌｉｃａｔｅｄ ｒｅａｄｉｎｇｓ． Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｆｏｌｌｏｗ ｅｑｕａｔｉｏｎ：ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙ（％）＝【 ０ｎｌＴｏｌ—ＡｓａｍＤｌｅ）／ ｃｏｎｔｒ０ｌ】×１００％． ２．６ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ａｓｓａｙ Ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｅｅｌｌ ｌｉｎｅ（ＳＧＣ．７９０ ｌ、 ａｎｄ ｈｕｍａｎ ｌｉｖｅｒ ｃａｎｃｅｒ（ＳＭＭＣ一７７２ １、ｗｅｒｅ ｍａｉｎ． ｔａｉｎｅｄ ｉｎ ＲＰＭＩ．１ ６４０ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ ｌ ０％ｆｅｔａＩ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ（ＦＢＳ）．１ ００ ｕｎｉｔｓ／ｍＬ ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ ａｎｄ ｌ ００ ｇｇ／ｍＬ ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ ｓｕｌｆａｔｅ ａｔ ３７。Ｃ．５％Ｃｏ，．Ｔｈｅ ＭＴＴ ａｓｓａｙ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｖｉｏｕｓ ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ【 Ｊ．
