毛细管电泳电化学检测含乳饮料中游离的甘氨酸
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饮料中各组分的分离测定色谱科学自从1903年俄国的茨维特发明了液固柱色谱之后,已有近100年的历史。
但是在20世纪末的20年间,以前所未有的速度发展,特别是进人生命科学。
材料科学和信息科学时代,对分离分析提出越来越高的要求。
常见的色谱可分为气相色谱、液相色谱、毛细管电泳。
气相色谱法(GC)分离效率、选择性、灵敏度都很高,但是它只适用于热稳定性好、易挥发的物质。
高效液相色谱法(HPLC)不受热稳定性及挥发性的限制,可以分析热稳定性差。
难挥发的物质,但是和GC相比,缺乏灵敏的通用型检测器,实验中需消耗大量的有机溶剂,特别是对于大分子物质因其分子扩散系数小、传质阻力大,使柱效率大大降低,以至于难以分离分子量大于2000的物质。
经典电泳技术和色谱理论相结合,利用毛细管电泳的分离模式多样化,毛细管内壁的修饰方法及流动的缓冲液中的添加剂的不同,以及新检测技术的发展,使毛细管电泳的应用非常广泛。
可分离多种阴阳离子、生物大分子等,利用多种手性选择剂,具有高分离能力的毛细管电泳在手性分离中极为重要。
饮料中的成份相对比较复杂,其中各种不同的物质选择不同的色谱分离检测方法至关重要。
本实验选取饮料中不同物质分别采用气相色谱、液相色谱、毛细管电泳等方法分离检测。
通过实验对比,对各类色谱进行较深入了解。
气相色谱仪分离测定奶茶中胆固醇1 实验目的(1)了解外标法定量的基本原理及操作步骤,掌握其计算方法及注意事项。
(2)了解奶茶的前处理过程,掌握仪器的基本操作。
2 实验原理外标法也叫标准曲线法,适用于在成分很复杂的样品中对某一种或几种组分定量,常用于常规分析。
外标法首先要配置一系列浓度的标准溶液,分别测定峰面积,以峰面积对浓度作图(下图):A i~c i 关系曲线A i=fC i+a(a是常数),用线性回归法求出f 和a,代入未知样的峰面积求出未知样的组分含量。
在用外标法定量时,要注意进样量一定要标准不能有误差,否则会导致标准曲线上的点偏高或偏低,影响结果的准确性。
高效毛细管电泳-紫外检测法分离测定氨基酸的含量
孔红星
【期刊名称】《食品信息与技术》
【年(卷),期】2004(000)005
【总页数】1页(P53)
【作者】孔红星
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】TQ920.1
【相关文献】
1.高效毛细管电泳-紫外检测法分离测定氨基酸的含量 [J], 孔红星;刘正西;伍时华;李利军
2.以咪唑离子液体为紫外吸收试剂的高效液相色谱/间接紫外检测法分离测定烷基磺酸盐 [J], 郑秀荣;马亚杰;于泓
3.高效毛细管电泳-间接紫外吸收检测法测定食品中的氨基酸 [J], 陈冰;李小戈;何萍;项小兰
4.阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法分离测定氨基酸注射液中的氨基酸和葡萄糖 [J], 于泓;丁永胜;牟世芬
5.高效毛细管电泳-紫外检测法快速分离测定三种抗肿瘤药物 [J], 李兴华;李甜;段婕;石红梅
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植物体内游离氨基酸总量的测定方法一:一、原理游离氨基酸的氨基可与水合茚三酮反应,产生蓝紫色化合物,其颜色的深浅与游离氨基酸的含量成正比。
二、仪器设备分光光度计;电子天平;容量瓶25ml 或50ml 3 个;漏斗(直径6 厘米)3 个、滤纸适量;20ml刻度试管7支;移液管0.5ml 3支、5ml 1支;试管架;玻棒;吸耳球;剪刀;移液管架;橡皮筋、塑料薄膜(封试管口);吸水纸;擦镜纸适量;电炉;水浴锅(含铁丝筐)。
三、试剂1.3% 茚三酮试剂称3g 茚三酮用95%乙醇溶解定容到100ml 容量瓶里,贮于棕色瓶中。
此试剂应放在冷凉处,不宜久放,使用期约10 天。
2.氰酸盐缓冲液(按以下方法配制):(1) NaCN±备液0.01mol/L (490mg/L)。
(2)醋酸缓冲液:称360g醋酸钠(含三分子结晶水)溶于约300ml无氨蒸馏水中,加66.67ml 冰醋酸再用无氨蒸馏水稀释至1L。
取溶液(1)20ml,用溶液(2)定容到1L。
3. 标准氨基酸精确称取在80°C下烘干的亮氨酸13.1mg (或a -丙氨酸8.9mg)溶于10%勺异丙醇中,并在100ml容量瓶中用10%异丙醇稀释至刻度,混匀,即为1mmol/L 的标准氨基酸贮备液,置冰箱中保存。
为了制备工作液,可取贮备液与等量无氨蒸馏水混合,此液浓度为0.5mmol/L,即1ml含氨基酸0.5卩mol,或氨基氮7卩g。
4. 95% 乙醇;异丙醇(分析纯)四、操作步骤1.标准曲线的制作取20ml刻度试管18支,按下表1加入各试剂。
加完试剂后混匀,在100C水浴中加热12min (加热时封口),取出在冷水中迅速冷却,立即于每管中加入5ml 95%乙醇,塞好塞子,猛摇试管,使加热时形成的红色产物被空气中的氧所氧化而褪色,此时溶液呈蓝紫色。
于570nm 波长下测其光密度(以空白管为参比),以氨基酸浓度为横坐标,光密度为纵坐标,绘制标准曲线,求出直线方程。
柱前衍生高效液相色谱法测定乳制品中甘氨酸的含量赵志红,张逢秋,朱慧,施文蓉(杭州娃哈哈集团有限公司研发中心,杭州310018)摘要:采用单磺酰氯柱前衍生高效液楣色谱法测定乳制品中甘氨酸的含量。
应用单磺酰氯作为柱前衍生试剂,55'E温度下,反应15r a i n。
衍生产物用C18柱(3.9m m×150r am,5t r m)分离,0.I m oV L醋酸钠(pI-17.2):乙腈75:25为流动相进行洗脱,流速1.O m I./m i n,在330nm的波长下,能准确检测出乳制品中游离甘氧酸。
方法回收率在98.2%~102%之间,在0~205m g/L范围内。
线性方程相关系数为0.99994,相对标准偏差R SD为0.87%。
该方法衍生反应简单,时间短。
衍生产物在330hm具有较强的紫外吸收。
且产物单一稳定,冰箱中存放可稳定一星期以上,分析速度快,7m i n内可与其他峰完全分离。
本方法具有操作简单、结果重复性好、准确等优点。
关键词:甘氨酸;单磺酰氯;柱前衍生色谱法;乳制品中国分类号:T S207.3文献标识码:A文章编号:1006—251312009}04—0169—04D et er m i nat i on of gl yci n i n da i r y pr oduct s by pr e-col um nder i vat i zat i on H PL CZ][-I A O Z hi-hong,Z H A N GFeng-qi u,Z H U H ut,SH/W e n t ong (R&D depar tm ent of H an gzh ou W aha ha G r o up C om pany L i m i t ed,H angzh ou310018)A bst r ac生:T he gl yei n i n dai r y pr od uct s w a s de t er m i ne d by dan syl c hl or i de勰t he pr o—c ol um n der i vat i on r ea gent a t 55℃h15I I,i n.1k de dvaf i on C毪I I be det ec t ed e爆si l y andaccur at el yby肿L c.-11l e pro—col um n der i vat i on W S S s ep a-m t e d by C18col um n(3.9m皿×150r t t m,5t t m),and el ut ed by m obi l e pha se of0.1tool/L s odi岫aeetal[e(pH7.2) a nd acetoni t ri l e w i t h pr opor t i on of75:25,de t ect e d at330n m w a vel e ngt h,I n7m i nut os,t he der i vat i on W a n t ef fect i vel y se pa ra t ed。
毛细管电泳-间接紫外法测定饮用水中草甘膦、草铵膦及其代谢产物李小娟;孟品佳;王燕燕;周信康【摘要】提出了毛细管电泳-间接紫外分析方法测定饮用水中草甘膦及其代谢产物氨甲基膦酸、草铵膦及其代谢产物3-甲基磷酸亚基丙酸.样品与25 mmol·L-1乙酸铵溶液混匀后,采用SAX型固相萃取小柱提取待测物.洗脱液经毛细管电泳分离,以o-磷酸基-DL-苏氨酸为内标物,紫外检测波长为214 nm.草甘膦、草铵膦、氨甲基膦酸和3-甲基磷酸亚基丙酸的线性范围为0.10~20.0 mg·L-1,检出限(3S/N)分别为0.22,0.30,0.18,0.03 mg·L-1,加标回收率在82.1%~108%之间.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2015(051)003【总页数】5页(P307-311)【关键词】毛细管电泳;间接紫外法;草甘膦;草铵膦;代谢产物【作者】李小娟;孟品佳;王燕燕;周信康【作者单位】中国人民公安大学刑事科学技术学院,北京100038;中国人民公安大学刑事科学技术学院,北京100038;北京市公安司法鉴定中心,北京100085;中国人民公安大学刑事科学技术学院,北京100038【正文语种】中文【中图分类】O657.8草甘膦(Glyp)和草铵膦(Gluf)与百草枯等其它种类的除草剂相比毒性较低,且具有非选择性,是两种被广泛使用的含磷氨基酸型除草剂(PAAHs)[1],两者在环境中通常被降解为具有一定毒性的氨甲基膦酸(AMPA)与3-甲基磷酸亚基丙酸(MPPA)[2]。
4种化合物均为极性物质且不存在紫外吸收基团,因此,最直接的方法是采用离子色谱法或液相色谱-质谱法对其进行测定。
《生活饮用水标准检验方法》中采用离子色谱法对草甘膦进行测定,灵敏度可达0.05mg·L-1;《进出口食品中草甘膦残留量检测方法-液相色谱串联质谱法》中对茶叶中的草甘膦进行检测,检出限可达0.1mg·kg-1;气相色谱分离后采用氮磷检测器进行检测(GC-NPD)[34];高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)或高效液相色谱-荧光光谱法(HPLC-FL)等。
HPLC方法测定甘氨酸的研究方法第三组甘氨酸是一种重要的氨基酸,在生物化学和医学研究中有广泛的应用。
为了准确快速地测定甘氨酸的含量,高效液相色谱(HPLC)是一种常用的分析方法。
以下是一种可用于测定甘氨酸含量的HPLC方法的详细步骤。
材料和设备:1.HPLC系统(包括色谱仪、流动相槽、注射器和检测器)2.反相色谱柱(C18柱)3.甘氨酸标准品4.甘氨酸样品5.溶剂:多甲醇、乙腈6.pH2.5磷酸溶液步骤:1.准备样品:将甘氨酸样品溶解在pH2.5的磷酸溶液中,摇匀并过滤以去除杂质。
2.准备标准曲线:取不同浓度的甘氨酸标准品(例如10、20、40、60、80和100μg/mL),分别进行HPLC分析,并绘制标准曲线。
3.准备流动相:将多甲醇和乙腈按照一定比例混合,作为流动相。
4.设置HPLC参数:将色谱柱安装到HPLC系统中,并设置流动相槽的流速和梯度淋洗方案。
典型的梯度方案是以多甲醇和乙腈为流动相,初始时使用多甲醇,然后在一定时间内逐渐增加乙腈的浓度。
5.注射样品:将甘氨酸样品注入HPLC系统的注射器中,设定合适的体积。
6.分析样品:将样品通过色谱柱进行分离和检测,通过检测器测量甘氨酸的峰高度或面积。
7.计算结果:使用标准曲线来计算甘氨酸样品中的含量。
通过峰高度或面积与标准曲线上的相应浓度进行比较,可以计算出甘氨酸的含量。
优化HPLC方法的关键点:1.选择适当的柱:根据需要选择适当的色谱柱,C18柱是常用的反相柱,较好地保留和分离甘氨酸。
2.流动相的选择:根据甘氨酸的性质和溶解度,选择合适的流动相组成。
3.优化分析条件:包括流速、梯度方案和检测器灵敏度等,以获得最佳的分离和检测效果。
4.样品预处理:样品的预处理步骤(如pH调节和过滤)对于获得准确结果至关重要。
总结:HPLC是一种快速、准确、灵敏的方法,可用于测定甘氨酸含量。
根据上述步骤和关键点指导,可以成功地开展甘氨酸的HPLC分析。
同时,建议在进行实验前,对所使用的方法进行验证,以确保方法的准确性和重复性。
毛细管电泳-电化学检测法测定淮山中8种必需氨基酸含量胡月芳;黄志强;李金芳【摘要】将8种人体内必需氨基酸(苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、色氨酸)与邻苯二甲醛(OPA)发生衍生化反应,再采用毛细管电泳-电化学检测(CE-ED)方法对其含量进行测定考察了衍生化时间、检测电位、运行缓冲液浓度和pH值、分离电压及进样时间等的影响.在优化条件下,8种氨基酸在12 min内实现了分离,线性范围为0.1~1 500 μg/L;检出限为0.01~0.05 μg/L,峰高的相对标准偏差(RSD)为1.3%~1.8%,迁移时问的RSD为0.6%~ 1.0%该方法已用于淮山样品中8种必需氨基酸的测定,加标回收率为96.8%~102.0%,RSD均不大于2.4%.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2016(035)004【总页数】5页(P471-475)【关键词】毛细管电泳;电化学检测;淮山;氨基酸【作者】胡月芳;黄志强;李金芳【作者单位】贺州学院化学与生物工程学院,广西贺州542899;贺州学院化学与生物工程学院,广西贺州542899;贺州学院化学与生物工程学院,广西贺州542899【正文语种】中文【中图分类】O657.8;O629.7淮山别名山药、怀山药等,含有氨基酸(包括人体必需的8种氨基酸)、活性多糖、薯蓣皂苷、尿囊素、胆碱、黄酮、淀粉等成分,是一种常用药材和较佳的保健食品[1]。
氨基酸是构成蛋白质的基本单位,是化学、生物、医药、农业、食品等领域的重要物质[2-3]。
随着人们对淮山营养成分认识的加深,测定淮山中氨基酸的含量,尤其是8种人体必需的氨基酸含量成为评定淮山营养价值的基本指标之一。
近年来,一般采用传统的液相色谱法或氨基酸分析仪分离氨基酸[4-6],但色谱法在样品分离前需对色谱柱进行预处理或改性,色谱柱价格昂贵,分离效率不高,检测速度慢,操作较繁琐;氨基酸分析仪分析成本较高。