毛细管电泳电化学发光联用技术及应用新进展
- 格式:doc
- 大小:45.00 KB
- 文档页数:9
毛细管电泳技术的研究现状与进展摘要:毛细管电泳是近年发展最快的分离分析技术之一。
它具有高灵敏度、高分辨率、高速度等优点.广泛应用于各个领域。
随着毛细管电泳技术的不断发展,逐渐出现了7种电泳分离模式[关毽词] 毛细管电泳;毛细管区带电泳;毛细管凝胶电泳;现状;进展;毛细管电泳的原理(1)毛细管电泳是以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法.毛细管电泳所用的石英毛细管柱,在pH>3的情况下,其内表面带负电,与缓冲液接触时形成双电层,在高压电场作用下形成双电层一侧的缓冲液由于带正电而向负极方向移动,从而形成电渗流.同时在缓冲溶中,带电粒子在电场作用下,以各自不同速度向其所带电荷极性相反方向移动,形成电泳.目前,毛细管电泳分离模式主要如下:1.毛细管区带电泳(CZE)2.毛细管凝胶电泳(CGE)3.细管胶柬电动色谱(mECC)4.细管等电聚焦(CIEF)5.细管等速电泳(CITP)6.亲和毛细管电泳7.毛细管电色谱上述七种分离模式相瓦渗透,各有利弊,用途不一,目前较为常用的主要为CZE和CGE。
1.毛细管区带电泳(CZE)将待分析的溶液引入毛细管进样的一端,施加直流电压后,各组分按各自的电泳流和电渗流的矢量和流向毛细管出口端,按阳离子、中性粒子和阴离子及其电荷大小的顺序通过检测器.中性组分彼此不能分离,出峰时间称为迁移时间,相当于高效液相色谱中的保留时间.为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁涂层.CZE是毛细管电泳中最基本的模式,目前.在所有基于毛细管电泳的研究中有60%系运用此模式。
适于CZE分析模式的研究对象包括金属离子、无机阴离子、小分子有机酸和有机碱、肽类以及蛋白质。
应用CZE模式的前提是分析对象必须或能够带有一定的电荷,这样才能使分析物质在电场力的作用下泳动.已有人总结了运用毛细管电泳进行各种离子分析的分离机制和优化策略(2)2.毛细管凝胶电泳(CGE)分离分析是在聚丙烯酰胺或者琼脂糖凝胶填充的毛细管内进行的,样品的分离是基于填充凝胶孔隙所产生的分子筛作用。
毛细管电泳技术在化学分析中的应用随着科学技术的不断进步,越来越多的新技术应用于化学分析领域。
其中,毛细管电泳技术是一种非常有潜力的技术,其应用广泛,可以应用于食品、医药、环境等多个领域,极大地提高了化学分析的效率和准确性。
下面,本文将从毛细管电泳技术的原理、优点、应用以及发展前景等方面,分析其在化学分析中的应用。
一、毛细管电泳技术的原理毛细管电泳技术是基于毛细管内样品分子的电荷和尺寸的差异进行分离的一种方法,其分离原理是利用电场力、液相流动力和溶剂静电引力等相互作用力,将带电分子分离开来的过程。
其中,毛细管电泳分离过程是在毛细管内部一个微小的空间内进行的,这个微小的空间称为分离柱。
分离柱中填充有分离介质,通常使用胶体硅、聚丙烯酰胺凝胶、聚合物微球等。
当外加高压电场作用于分离柱时,其他因素不影响下,分别具有不同电荷的分子将因其电荷大小而在分离柱内发生移动,这样就完成了样品分析。
二、毛细管电泳技术的优点毛细管电泳技术在化学分析中的应用范围非常广泛,具有以下优点:1.分离效率高:毛细管电泳技术分离效果很好,可以分离出电泳物质的同分异构体和混杂物,从而使分析的结果更加准确可靠。
2.快速分析:毛细管电泳技术可以在短时间内完成分析,不仅提高了分析效率,而且缩短了分析时间。
3.高选择性:毛细管电泳技术在分离和检测过程中,只会对一些特定的物质进行分离,因此,在检测过程中可以不用去关注所有的物质,从而可以降低实验成本和实验时间。
4.成本低:毛细管电泳技术不需要使用昂贵的设备,其使用成本比较低,适合化学实验室使用。
三、毛细管电泳技术在化学分析中的应用非常广泛,主要包括以下几个方面:1.食品领域:毛细管电泳技术可以用于饮料、果汁、啤酒等中硫酸盐和氰化物的检测和分析。
2.环境领域:毛细管电泳技术可以用于环境污染物的检测和分析,如有机污染物、金属离子等。
3.医药领域:毛细管电泳技术可以用于药物的研究和分析,包括药物分子的结构、成分、质量等。
毛细血管电泳法在药物中应用及发展的论文摘要:毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)是离子或荷电粒子以电场为驱动力,在毛细管中按其淌度和分配系数不同进行高效、快速分离分析的一种新技术。
被认为是当代分析科学最具活力的前沿研究课题,也是近20年来发展最快的分离技术之一。
本文就CE的发展和工作原理做了有关介绍并对其在药物分析中的应用及相关发展做了毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(HPCE)或毛细管分离法(CESM)是以高压直流电场为驱动力,内径为25一100娜的弹性石英熔融毛细管柱内荷电粒子按其淌度(mobility)或迁移速度(migrationvelocity)的差异而实现分离的一类液相分离技术。
CE迅速发展于20世纪80年代中后期,可以说是经典电泳技术与现代微柱分离技术完美结合的产物,是分析科学中继气相色谱(gaschromatography)和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)之后的又一重大进展,它使分析科学得以从微升水平进入纳升水平,并使细胞分析乃至单分子分析成为可能,并被认为是当代分析科学最具活力的前沿研究课题,也是近20年来发展最快的分离技术之一,它将分离柱效提高到上百万塔板数。
长期困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转机,尤其是多通道集成芯片毛细管电泳技术的出现,极大提高了DNA测序的速度,使人类基因组草图的绘制工作提前三年完成。
CE具有分离效能高、分析速度快、样品用量少、分析对象广,多模式化和环保等特点,已成为一种重要的分离分析手段,在生物、医药、化工、环保、食品等领域具有广阔的应用前景。
1 毛细管电泳在药物分析中的有关应用毛细管电泳的药物分析大致可分为三部分:一是原药的定量,原药中杂质的测定、药剂的分析以及对它们的稳定性的评价等以药品质量管理为目的的测试方法。
毛细管电泳的应用和发展趋势HPCE检测方法的选择流程1.了解样品类型、是否溶于水、是否带电荷等2.根据样品的性质选择合适的分离模式3.选择合适的检测方法4.确定样品处理方式5.确定缓冲体系和pH值6.优化其它操作条件(毛细管内径、分离电压、添加剂等)不同物质分离模式的选择离子分子肽蛋白质多聚核酸DNA CZE MEKC CZE CZE CGE CGE CITP CZE MEKC CGE MEKCCITP CIEF CIEFCGE CITPCITP一、无机金属离子的分析1. K +;2. Ba 2+;3. Sr 2+;4. Na +;5. Ca 2+;6. Mg 2+;7. Mn 2+;8. Cd 2+;9. Li +;10. Co 2+;11. Pb 2+;12. Ni 2+;13. Zn 2+;14. La 3+;15. Ce 3+;16. Pr 3+;17. Nd 3+;18. Sm 3+;19. Gd 3+ ;20. Eu 3+;21. Tb 3+;22.Dy 3+;23. Ho 3+;24. Er 3+;25. Tb 3+;26. Yb 3+;27. Lu 3+无机阳离子在对甲苯胺背景中的高速高效分离 毛细管:60 cm ⨯ 75 μm缓冲液:15 mmol ⋅L -1乳酸+8 mmol ⋅L -1 4-甲基苯胺+5%甲醇pH4.25工作电压:30 kV检测波长:214 nm电泳模式:CZE二、蛋白质分析•毛细管对蛋白有强烈的吸附作用,导致分离下降或不出峰。
•三种抑制蛋白吸附的方法样品处理:利用变性剂或其它表面活性剂形成复合物。
管壁惰性化处理:利用化学方法在毛细管内形成亲水涂层。
缓冲液改性:在缓冲液中加入非离子表面活性剂。
聚乙烯醇添加到缓冲体系分离蛋白质谱图毛细管:57/75 cm ⨯ 75 μm缓冲液:20 mmol ⋅L -1磷酸盐+30 mmol ⋅L -1NaCl+0.05%(质量分数)PV A 1500pH 3.0工作电压:5 kV电动进样:5 s色谱峰:1.细胞色素;2. 溶菌酶;3. 胰蛋白酶; 4. 胰蛋白酶原;5. α-糜蛋白酶原三、核酸片段分析•毛细管凝胶电泳(CGE)1)琼脂糖凝胶电泳适合分离小于1000bp 的DNA2)聚丙烯酰胺凝胶:短链凝胶适合分离短链DNA;长链凝胶适合分离长链DNA。
毛细管电泳—电化学检测联用技术及其应用研究【摘要】:毛细管电泳(CapillaryElectrophoresis,CE)是近二十年来发展最快的分离分析技术之一,是分析科学中继高效液相色谱之后的又一重大进展,进样量从微升水平进入纳升水平。
作为一种经典电泳技术与现代微柱分离有机结合的新兴分离技术,其研究和应用涉及环境分析、药物分离、生化分析等几乎所有的分析领域。
极细的毛细管内径带来了很高的分离效能,但同时也给样品组分的检测带来困难,因此对检测技术相应提出了较高的要求,发展了许多类型的检测器,有光学、电化学、质谱学检测器及化学发光等。
电化学检测中的安培检测技术,具有比紫外检测更高的灵敏度,且仪器简单、价格成本低、线性范围宽、操作简便,因而其与毛细管电泳联用后在分析化学领域得到了广泛的研究和应用,研究对象大到生命大分子,小到单细胞分析和无机离子分析。
近年来,随着人们对生活质量的关注,环境分析和药物分析也成为分析化学研究的重点和热点。
本论文探讨了毛细管电泳—安培检测联用技术在环境分析、药物分析等领域中的一些应用,主要内容分为以下六章:第一章绪论简单地概述了毛细管电泳(CE)的特点、分离模式、理论基础、联用的检测器、发展趋势以及毛细管电泳安培检测的理论研究和应用现状等,并简单介绍了本论文的目的和意义。
第二章毛细管电泳安培检测分离测定硝基苯胺位置异构体的研究采用简单的CZE分离模式,不加任何添加剂,在极端pH值条件下,成功地分离了环境中硝基苯胺类化合物。
研究了背景缓冲溶液、pH值、分离电压及进样时间等因素对分离的影响,在选定的实验条件下18min内实现了3种苯胺类化合物的分离,得到分析物的标准曲线、线性范围及加样回收率,同时测定了2种染料废水样品中被测物的含量。
结果表明该方法快速,准确,重现性好。
第三章毛细管电泳安培检测联用检测印染废水中的硝基苯酚异构体本文利用毛细管电泳—安培检测联用技术,通过在缓冲液中添加有机溶剂,成功地实现了硝基酚异构体的分离。
毛细管电泳技术在化学分析中的应用研究毛细管电泳是一种高效、高分辨、低耗时的化学分析技术。
通过特定的毛细管,将样品移动到电泳平台上,并通过电流、电场等作用力来分离、检测并分析样品中的各种物质成分和化学性质。
干净、精确、快速的分析过程,使得毛细管电泳在化学分析中得到了广泛的应用。
一、毛细管电泳技术的发展历程毛细管电泳技术源于20世纪60年代中期,最初是由Albert J.P. Martin和Richard L. Synge发明了新的色谱技术--纸片色谱和薄层色谱,奠定了毛细管电泳技术的基础。
20世纪70年代,Schneider 和Righetti首次在毛细管内进行电泳实验,标志着毛细管电泳技术的诞生。
而在90年代初期,由于技术的突破和研究的深入,毛细管电泳技术得到了广泛的应用。
二、毛细管电泳技术的特点毛细管电泳技术具有以下特点:(1)高效:毛细管电泳作用的实际是分子电荷或尺寸。
在电性或性质不同的电场中,化合物在毛细管中的运动速度各异,从而实现了对化合物的分离。
(2)高分辨:由于毛细管的细小直径,使得实验分离效果很好,可以实现化合物的单一成分分离和检测。
(3)低耗时:毛细管电泳技术的分析时间不能超过几十分钟,而且分析成本低,测量灵敏度高。
(4)宽适用范围:毛细管电泳技术广泛适用于化合物的分离和检测,特别适用于药物分析。
三、毛细管电泳技术在化学分析中的应用毛细管电泳技术在化学分析中有着广泛的应用,具体展现在以下四个方面:(1)药物分析:毛细管电泳技术可以被用于药物分析,比如在药物杂质中检测和物质质量光谱图的分析。
家门口的诊所可以购买这样的仪器来检测药物杂质。
(2)食品分析:毛细管电泳技术可以快速准确的检测食品中的残留物。
比如,毛细管电泳技术可以快速准确地分离和检测牛奶中的脂肪、蛋白质、糖等成分。
(3)生物学分析:毛细管电泳技术可以快速分离、检测和测定生物学系统中的多种元素。
毛细管电泳在DNA碱基对的分离和分析以及其他生物分子的分析中都得到了广泛应用。
【资料】毛细管电泳技术发展及应用前景毛细管电泳技术(Capillary Electrophoresis, CE)又称高效毛细管电泳(HPCE)或毛细管分离法(CESM),毛细管电泳方法虽新工艺,但历史悠久,它是在电泳技术的基础上发展的一种分离技术。
电泳作为一种技术出现,已有近百年的历史,但真正被视为一种在生物化学中有重要意义的技术,是由1937年A. Tiselius 首先提出。
传统电泳最大的局限是难以克服由高电压引起的焦耳热,1967年Hjerten最先提出在直径为3mm的毛细管中做自由溶液的区带电泳(Capillary Zone Electro-phoresis, CZE)。
但他没有完全克服传统电泳的弊端。
现在所说的毛细管电泳技术(CE)是由Jorgenson和Lukacs在1981年首先提出,他们使用了75mm的毛细管柱,用荧光检测器对多种组分实现了分离。
1984年Terabe将胶束引入毛细管电泳,开创了毛细管电泳的重要分支:胶束电动毛细管色谱(MEKC)。
1987年Hjerten等把传统的等电聚焦过程转移到毛细管内进行。
同年,Cohen发表了毛细管凝胶电泳的工作。
近年来,将液相色谱的固定相引入毛细管电泳中,又发展了电色谱,扩大了电泳的应用范围。
当电泳从凝胶板上移到毛细管中以后,发生了奇迹般的变化:分析灵敏度提高到能检测一个碱基的变化,分离效率达百万理论塔片数;分析片段能大能小,小到分辨单个核苷酸的序列,大到分离Mb到DNA;分析时间由原来的以小时计算缩减到以分、秒计算。
CE可以说是经典电泳技术与现代微柱分离技术完美结合的产物。
它使分析科学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞分析,乃至单分子分析成为可能。
长期困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转机。
毛细管电泳技术是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力,根据样品中各组分之间迁移速度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术,迅速发展于80年代中后期,它实际上包含电泳技术和色谱技术及其交叉内容,是分析科学中继高效液相色谱之后的又一重大进展,它使分析科学得以从微升水平进入纳升水平,并使细胞分析,乃至单分子分析成为可能。
信阳师范学院研究生课程论文2014—2015学年第1学期毛细管电泳电化学发光联用技术及应用新进展提交日期:2015 年 1 月 6 日研究生签名:毛细管电泳电化学发光联用技术及应用新进展姓名:学号:2摘要:生命与健康是关系人类生活和可持续发展的永恒话题。
为了检测食品中的有毒物质和人类身体内的有害物质,并达到快速检测和灵敏度高的目的,毛细管电泳(CE)和电化学发光(ECL)技术相结合的方法应运而生。
这种方法充分利用了CE技术快速、灵敏、需样量少的优点及ECL线性范围宽和仪器简单的特点,使其在生命和医药等方面得到了广泛的应用。
关键词:毛细管电泳;电化学发光;生命;医药引言毛细管电泳法(Capillary Electrophoresis,CE)也叫做高效毛细管电泳(HPCE),是二十世纪八十年代问世的高效液相分离法之一[1],是将经典的电泳技术和现代微柱分离相结合的产物。
它是一类以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,以样品的多种特性(大小、电荷、等电点、极性、亲和行为、相分配特性等)为依据的液相微分离分析技术。
与传统的分离分析方法相比,毛细管电泳显著特点是简单、高效、快速和微量。
另外,毛细管电泳还有经济、清洁、易于自动化和环境污染小等优点。
因此,毛细管电泳迅速发展为高效的分离和检测技术,广泛应用于物质的检测与分离。
电化学发光(electrochemiluminescence,ECL)是指电极表面通过电子的转移形成激发态,电子从激发态返回基态而产生的发光过程[2],由电极上施加的电压所引发和控制[3],以电激发为驱动力,通过电化学反应产生光信号。
因此,电化学发光兼有化学发光的特点,是一种可控性强,灵敏度高的检测方法。
将毛细管电泳和电化学发光技术联用,产生了毛细管电泳-电化学发光检测技术(CE-ECL),该技术兼有CE微量、迅速、高效及ECL高选择性、高灵敏等特点。
这些特点使CE-ECL检测技术在药物分析、生命分析等领域应用越来越广泛,在实际样品的分离和分析工作中也发挥着重要的作用。
本文主要简述毛细管电泳-电化学发光联用技术在各个领域的应用进展。
1. 毛细管电泳-电化学发光联用技术目前,电化学发光分析发展快速,与其它技术和方法相结合有利于其实用性。
具有代表性的是CE-ECL联用技术,尤其是CE与Ru(bpy)32+ECL联用技术获得了重要发展,原因在于:Ru(bpy)32+水溶性好,自身发光,ECL反应迅速、灵敏度高、循环可逆,无须外加光源及分光系统,避免了杂散光和光源不稳定的影响,由于反应发生在工作电极附近的特定区域,因此,时空可控性强。
毛细管电泳-联吡啶钌Ru(bpy)32+电化学发光法不仅具有毛细管电泳快速高效分离、样品用量少等特点,又兼顾了电化学发光法高灵敏的优点,己成功用于一些药物[4-6]、农药[7,8]和胺类[9-11]等物质的检测。
这种技术一经出现,就得到了迅猛的发展。
CE-Ru(bpy)32+ECL的检测机理可表述为:首先,Ru(bpy)32+在工作电极上被氧化为Ru(bpy)33+;然后Ru(bpy)33+与毛细管中流动的分析物进行一系列的反应生成Ru(bpy)32+的激发态(Ru(bpy)32+*);最后,Ru(bpy)32+由激发态回到基态并释放出光子产生了电化学发光信号,电化学发光的强速与分析物的浓度成正比。
由以上检测机理可知,在CE-ECL的检测过程中,Ru(bpy)32+可以循环使用。
2. CE-ECL技术的应用进展20世纪80年代以来,电化学发光分析法已广泛用于有机物、无机物的分析与检测[12,13]。
联吡啶钌电化学发光用于胺类化合物、氨基酸、草酸等的测定也是当时的重大发现之一[14]。
电化学发光分析技术以其固有的优势,成功的应用于生命中有害物质的测定、药物分析及食品分析等方面。
2.1. CE-Ru(bpy)32+ECL技术在生命科学领域的应用毛细管电泳和电化学发光技术的结合可以成为一种低成本及快速简便的分离分析技术。
CE-Ru(bpy)32+ECL在生命科学领域应用的报道很多,如糖类、氨基酸、酶类的分析。
Li等[15]采用2-二乙基氨基乙基硫醇(DEAET)作为衍生剂,利用CE-Ru(bpy)32+ECL对木糖、鼠李糖、葡萄糖和葡糖胺进行了检测,并与紫外检测的结果做了对比,然后对中药当归中葡萄糖的含量进行了测定。
只含有一级胺或二级胺官能团的氨基酸与Ru(bpy)32+反应的灵敏度较低,采用乙醛对这种氨基酸进行衍生化,其发光强度可提高20~70倍,利用这种方法对精氨酸、脯氨酸、缬氨酸和亮氨酸的衍生物分离检测,只需要22 min就能达到目的[16]。
汪尔康等采用CE-Ru(bpy)32+ECL方法对酶反应的动力学进行了探究,利用氨酰基脯氨酸二肽酶对二肽底物Gly-Pro、Val-Pro和Leu-Pro进行分解,得到Pro并对其测定,从而反映出氨酰基脯氨酸二肽酶的活性[17]。
2.2. CE-Ru(bpy)32+ECL技术在医学分析方面的应用CE-Ru(bpy)32+ECL技术在药物分析方面的应用发展迅速。
联吡啶钌电化学发光体系具有高的检测灵敏度和宽的线性范围,能够满足毛细管电泳高灵敏度的需求。
将这种方法应用于医学方面,有利于提高检测药物的检出限,增强其灵敏度,降低医学成本。
2.2.1. 对药物的分离分析医学的发展,新药的研发是一种趋势。
因此,药物的分离与分析成为了研究热点。
CE-Ru(bpy)32+ECL是最有效的药物检测手段之一。
为了提高药物的检测灵敏度,Li等首先对分析药物进行了预衍生,然后采用CE-Ru(bpy)32+ECL体系对异氰酸酯予以分析测试[19]。
Deng等[20]结合甲磺酸培氟沙星(PM)可以增强Ru(bpy)32+电化学发光,并能直接参与反应的特性,通过排出尿液中PM的含量测定,对人尿中的PM进行了药代动力学研究。
采用CE-Ru(bpy)32+ECL方法可以检测富马酸酮替芬的含量,且该方法已成功用于富马酸酮替芬片及胶囊含量的测定。
此外,研究发现盐酸帕罗西汀能增强钌联吡啶的电化学发光信号,并已用于盐酸帕罗西汀片剂的测定[21]。
目前,CE-ECL已用于诺氟沙星/左氧氟沙星[22]、红霉素[23]、双氧异丙嗪[24]等的检测,效果良好。
2.2.2. 在中药中的分析应用CE-Ru(bpy)32+ECL技术在提取中药中活性成分的探究中也进行了尝试。
Gao 等首次将CE-Ru(bpy)32+ECL应用于中药分析,有效的分离了天仙子中的活性成分[25]。
在此基础上,Gao等将离子液体应用于电泳分离体系,通过场放大样品的堆积效应,从而提高中药罂粟中四种生物碱的检测灵敏度[26]。
类似的,Gao等利用高选择性的CE-Ru(bpy)32+ECL技术,采用离子液体灵敏的分离了中药贝母中结构相似的两种活性成分[27]。
Li[15]等利用CE-Ru(bpy)32+ECL的高灵敏度于快速检测的优点,对当归中的木糖、鼠李糖、葡萄糖和葡糖胺进行了检测。
CE-ECL 体系还被用于对中药苦参中槐糖苷碱、苦参碱及喹诺里西啶生物碱的分析[28]。
2.2.3. 在临床分析中的应用CE-ECL技术目前主要应用于对生物大分子(蛋白质、氨基酸和核酸)的研究和用于有机酸、有机胺、葡萄糖、药物、免疫等分析和其他物质的测定,在临床检验诊断中尚无全面的报道。
丙吡胺能够有效的预防和治疗心律不齐,将这种药物与蛋白质结合,依据结合作用研究具有重要的临床价值,因为游离药物的浓度会影响药物分布以及药物效应。
药物蛋白结合率是药物动力学研究的重要参数之一。
利用透析袋平衡透析,采用CE-ECL检测技术测定丙吡胺和人血浆蛋白的结合率,效果良好。
在临床检测中,Hsich[29]等应用CE-ECL测定了血浆中的乙胺丁醇和甲氧基非那明。
研究表明,此方法的灵敏度高、线性范围宽、成本低,适用于临床研究。
2.3. CE-Ru(bpy)32+ECL技术在食品分析方面的应用Ru(bpy)32+由于自身所具有的电化学发光特性被广泛的用于胺类物质的分析检测[30-32]。
Li[33]等采用CE-Ru(bpy)32+ECL技术对鳕鱼体内三甲胺的成分含量进行了有效的检测,灵敏度高,检测速度快。
Chiu等[34]鉴于草甘膦作为一种除草剂的广泛运用,被农作物吸收过多,可能对人造成很大的危害,故对大豆中的草甘膦及其主要代谢物氨甲基磷酸进行了含量检测,检出限低、检测线性范围广。
Zhou等[35]基于恩诺沙星是牲畜中的一种广谱杀菌剂,检测食品中的恩诺沙星是十分有意义的目的,对牛奶中的恩诺沙星及其代谢物盐酸环丙沙星进行了检测,与此同时,也检测了其中的恩氟沙星和环丙沙星,表现出较高的灵敏度。
CE-Ru(bpy)32+ECL技术的快速、灵敏度检测对加强食品安全,规范食品生产起到了至关重要的作用。
3. 结语基于Ru(bpy)32+电化学发光(ECL)特性的检测器具有选择性高,灵敏度高的特性,将其与毛细管电泳(CE)联用所组成的毛细管电泳-电化学发光(CE-ECL)系统具有高效快速、样品消耗少、操作简单、成本低的特点,在现代分析化学中已成为一种有效的痕量和超痕量分析技术。
本文简要介绍了CE-Ru(bpy)32+ECL的优点以及在生命科学、医学和食品分析方面的应用,同时也表明了此方法的应用前景。
但从已有的文献报道来看,无论从检测灵敏度还是从分离效率等方面都存在一些技术上的薄弱之处。
由于毛细管电泳的进样量很小,因此检测灵敏度受到了限制;如何设计毛细管与工作电极的界面以提高其分离效率,这些问题的解决将使CE-ECL以其快速、灵敏、高效、经济等优势,成为具有实际应用价值的高灵敏度分离检测方法。
参考文献[1] Lauer H H, McManigill D. Capillary zone electrophoresis of proteins in untreatedfused silica tubing[J]. Anal. Chem., 1986, 58: 166-170.[2] Dufford R T, Nightingale D, Gaddum L W. Luminescence of grignard compoundsin electric and magnetic fields, and related electrical phenomena[J]. Journal of the American Chemical Society, 1927, 49: 1858-1864.[3] 王鹏, 张文艳, 周鸿, 等. 免疫电化学发光[J]. 分析化学, 1998, 26(7): 898-903.[4] 吕海燕, 李明月, 于洪玲, 唐玉海. 毛细管电泳-电化学发光法测定盐酸伊托必利[J]. 药物分析杂志, 2010, 30(1): 91-94.[5] Li H J, Shi L H, Liu X Q, Niu W X, Xu G B. Determination of isoeyanates bycaPillary eleetrophoresis with tris(2,2’-biPyridine)rutheulum(II) electrochemiluminescence[J]. Eleetrophoresis, 2009, 30(22): 3926-3931.[6] 谭贵良, 李向丽, 江迎鸿, 林里. 毛细管电泳-电化学发光联用测定玻乙红霉素[J]. 中山大学学报(自然科学版), 2009, 48: 82-85.[7] 成美容, 王园朝, 肖亮. 毛细管电泳-间接电化学发光法对茶叶中百草枯农药残留的检测[J]. 分析测试学报, 2009, 25(12): 1444-1447.[8] Chen Y T, Lin Z Y, Chen J H, SunJ J, Zhang L, Chen G N. New capillaryeleetrophoresis-eleetrochemiluminescence detection system equipped with an eleetrically heated Ru(bpy)32+/multi-wall-earbon-nanotube paste eleetrode[J].J.Chlomatogr.A, 2007, 1172(1): 84-91.[9] Yun W, Dong P, Xu Y, Yang L Z, He P G, Fang Y Z. Seleetive immobilization oftris(2,2’-biPyridyl)ruthenium(II) onto array eleetrode for solid-state electrochemilumninescene sensor fabrication[J]. Sensor. Aetuat. B-Chem, 2009, B141(l), 244-248.[10] Li M, Lee S H. Determination of trimethylamine in fish by capillaryelectrophoresis with eleetrogenerated tris(2,2’-bipyridyl) ruthenium(II) chemiluminescence detection[J]. Luminescence, 2007, 22(6): 588-593.[11] Chen Y T, Lin Z Y, Sun J J, Chen G N. A new eleetroehemiluminescent deteetionsystem equipped with an eleetrieally heated carbon paste electrode for CE[J].EleetroPhoresis, 2007, 28(18): 3250-3259.[12] Knihgt A W. A review of recent trends in analytical applications ofelectrogenerated chemiluminescence[J]. Trends in Analytical Chemistry, 1999, 18(l): 47-62.[13] Fahnrich K A, Pravda M, Guilbault G G. Recent applications of electrogeneratedchemiluminecence in chemical analysis[J].Talanta, 2001, 54: 531-559.[14] Rubinstein I, Bard A J. Polymer films on electordes: Electrochemistry andchemiluminescence at Nafion-coated electrodes[J]. J. Am. Chem. Soc, 1981, 103: 5007-5013.[15] Li M, Lee S H. Analysis of Monosaccharides by Capillary Electrophoresis withElectrochemiluminescence Detection[J]. Anal. Sci., 2007, 23: 1347-1349. [16] Li J G, Yan Q Y, Gao Y L, et al. Electrogenerated chemiluminescence detectionof amino acids based on precolumn derivatization coupled with capillary electrophoresis separation[J]. Anal. Chem., 2006, 78(8): 2694-2699.[17] Zhou L L, Yuan J P, Yin J Y, et al. Kinetic study of prolidase activity inerythrocytes against different substrates using capillary electrophoresis with electrochemiluminescence detection[J]. J Chromatogr A, 2008, 1200(2): 255-259.[18] Li H, Shi L, Liu X, et al. Determination of isocyanates by capillaryelectrophoresis with tris(2,2.-bipyridine) ruthenium(II) electrochemilumines- cence[J]. Electrophoresis, 2009, 30: 3926-3931.[19] Deng B Y, Li L Q, Shi A H, et al. Pharmacokinetics of pefloxacin mesylate inhuman urine using capillary electrophoresis electrochemiluminescence detection[J]. J Chromatogr B, 2009, 877(24): 2585-2588.[20] 熊凤梅, 唐玉海州, 孙四娟, 等. 毛细管电泳电化学发光法测定盐酸帕罗西汀的研究[J]. 分析试验室, 2008, 27(10): 63-65.[21] Chang P L, Lee K H, Hu C C, et al. CE with sequential light-emittingdiodeinduced fluorescence and electrochemiluminescence detections for the determination of amino acids and alkaloids[J]. Electrophoresis, 2007, 28:1092-1099.[22] Liu Y M, Cao J T, Wang H. Capillary electrophoresis withelectrochemiluminescence detection for the analysis of quinolone drugs and pharmacokinetics study[J]. Chinese Chemical Letters, 2008, 19: 962-964. [23] Deng B Y, Kang Y H, Li X F, et al. Determination of erythromycin in rat plasmawith capillary electrophoresis-electrochemiluminescence detection of tris(2,2’-bipyridyl) ruthenium(II)[J]. J Chromatogr B, 2007, 857: 136-141. [24] Yuan B Q, Huang J S, Sun J Y, et al. A novel technique for NACE coupled withsimultaneous electrochemiluminescence and electrochemical detection for fast analysis of tertiary amines[J]. Electrophoresis, 2009, 30: 479-486.[25] Ying G, Tian Y L, Wang E K. Simultaneous determination of two activeingredients in Flos daturae by capillary electrophoresis with electrochemiluminescence detection[J]. Analytica Chimica Acta, 2005, 545: 137-141.[26] Ying G, Xiang Q, Xu Y H, et al.The use of CE-electrochemiluminescence withionic liquid for the determination of bioactive constituents in Chinese traditional medicine[J]. Electrophoresis, 2006, 27: 4842-4848.[27] Gao Y, Xu Y, Han B, et al. Sensitive determination of verticine and verticinone inBulbus Fritillariae by ionic liquid assisted capillary electrophoresis-electrochemiluminescence system[J]. Talanta, 2009, 80: 448-453.[28] Yin Ji Y, Xu Y H, Li J, et al. Analysis of quinolizidine alkaloids in Sophoraflavescensait by capillary electrophoresis with tris(2,2’-bipyridyl) ruthenium (II)- based electrochemiluminescence detection[J].Talanta, 2008, 75: 38-42.[29] Sun J Y, Xu X Y, Wang C Y, et al. Analysis of amphetamines in urine withliquid-liquid extraction by capillary electrophoresis with simultaneous electrochemical and electrochemiluminescence detection[J]. Electrophoresis, 2008, 29: 3999-4007.[30] Noffsinger J B, Danielson N D. Generation of chemiluminescence upon reactionof aliphatic amines with tris(2,2’-bipyridine) ruthenium(III)[J]. Anal. Chem., 1987, 59(6): 865-868.[31] Yuan B, Zheng C, Teng H, et al. Simultaneous determination of atropine,anisodamine and scopolamine in plant extract by nonaqueous capillary electrophoresis coupled with electrochemiluminescence and electrochemistry dual detection[J]. Journal of Chromatography A, 2010, 1217(1): 171-174. [32] Deng B, Li L, Shi A, et al. Pharmacokinetics of pefloxacin mesylate in humanurine using capillary electrophoresis electrochemiluminescence detection[J].Journal of Chromatography B, 2009, 877(24): 2585-2588.[33] Li M, Lee S H. Determination of trimethylamine in fish by capillaryelectrophoresis with electrogenerated tris(2,2′-bipyridyl) ruthenium(II) chemiluminescence detection[J]. Luminescence, 2007, 22:588-593.[34] Chiu H Y, Lin Z Y, Tu H L, et al. Analysis of glyphosate andaminomethylphosphonic acid by capillary electrophoresis with electrochemiluminescence detection[J]. J Chromatogr A, 2008, 1177(1): 195-198.[35] Zhou X M, Xing D, Zhu D B, et al. Development and application of a capillaryelectrophoresis electrochemiluminescent method for the analysis of enrofloxacin and its metabolite ciprofloxacin in milk[J]. Talanta, 2008, 75(5): 1300-1306.。