毛细管电泳电化学发光联用技术及其应用进展
- 格式:pdf
- 大小:306.04 KB
- 文档页数:4
毛细管电泳技术在化学分析中的应用随着科学技术的不断进步,越来越多的新技术应用于化学分析领域。
其中,毛细管电泳技术是一种非常有潜力的技术,其应用广泛,可以应用于食品、医药、环境等多个领域,极大地提高了化学分析的效率和准确性。
下面,本文将从毛细管电泳技术的原理、优点、应用以及发展前景等方面,分析其在化学分析中的应用。
一、毛细管电泳技术的原理毛细管电泳技术是基于毛细管内样品分子的电荷和尺寸的差异进行分离的一种方法,其分离原理是利用电场力、液相流动力和溶剂静电引力等相互作用力,将带电分子分离开来的过程。
其中,毛细管电泳分离过程是在毛细管内部一个微小的空间内进行的,这个微小的空间称为分离柱。
分离柱中填充有分离介质,通常使用胶体硅、聚丙烯酰胺凝胶、聚合物微球等。
当外加高压电场作用于分离柱时,其他因素不影响下,分别具有不同电荷的分子将因其电荷大小而在分离柱内发生移动,这样就完成了样品分析。
二、毛细管电泳技术的优点毛细管电泳技术在化学分析中的应用范围非常广泛,具有以下优点:1.分离效率高:毛细管电泳技术分离效果很好,可以分离出电泳物质的同分异构体和混杂物,从而使分析的结果更加准确可靠。
2.快速分析:毛细管电泳技术可以在短时间内完成分析,不仅提高了分析效率,而且缩短了分析时间。
3.高选择性:毛细管电泳技术在分离和检测过程中,只会对一些特定的物质进行分离,因此,在检测过程中可以不用去关注所有的物质,从而可以降低实验成本和实验时间。
4.成本低:毛细管电泳技术不需要使用昂贵的设备,其使用成本比较低,适合化学实验室使用。
三、毛细管电泳技术在化学分析中的应用非常广泛,主要包括以下几个方面:1.食品领域:毛细管电泳技术可以用于饮料、果汁、啤酒等中硫酸盐和氰化物的检测和分析。
2.环境领域:毛细管电泳技术可以用于环境污染物的检测和分析,如有机污染物、金属离子等。
3.医药领域:毛细管电泳技术可以用于药物的研究和分析,包括药物分子的结构、成分、质量等。
毛细管电泳技术研究进展胡晓峰(中国矿业大学化工学院,徐州)摘要:本文对毛细管电泳技术基本原理进行回顾,并简要介绍了当前毛细管电泳技术发展情况。
关键词:毛细管电泳技术;原理;发展毛细管电泳法(capillary electrophoresis,CE)是20世纪80年代发展起来的一种以电场为推动力的高效分离技术,利用离子在电场力作用下迁移速度的不同对组分进行分离和分析,该方法具有成本低、污染小、高效和操作简单等优点[1]。
1.原理离子或带电粒子在外加电场的作用下,在分散介质中定向移动的现象称作电泳。
粒子带电量不同,在电场中电泳速率也不同,因而可以获得分离,因此电泳技术是适合分离离子和带电粒子的技术。
毛细管电泳以毛细管为分离通道,毛细管能有效减少因焦耳热效应导致的区带展宽,以高压电场为驱动力,在外电场作用下,带电粒子在毛细管内电解质溶液中作定向移动,获得很高的分离效率,分析时间也大大缩短,试样分析范围宽,检出限低。
当pH>3时,毛细管内壁的硅羟基Si-OH电离成SiO-,使其带负电荷。
与所接触的电解质溶液形成双电层,于是毛细管内溶液表层形成了一个圆筒形的阳离子套,在高压作用下,该阳离子套将携带整个溶液向负极方向流动。
管内液体在外加电场的作用下朝一个方向移动的现象,称为电渗流(EOF)。
电渗流与溶液成分、浓度及pH、毛细管材质、溶液离子淌度有关。
通过对电渗流大小的控制可以影响电泳分离的效率、选择性和分离度。
带电粒子在毛细管内电解质溶液中的迁移速率等于电泳速率和电渗速率的总和。
电渗流方向正极到负极,阳离子向阴极迁移,与电渗流方向一致,移动速率最快,最先流出;阴离子向阳极运动与电渗流方向相反,但是电渗流移动速率比电泳速率大,所以,阴离子缓慢的在电渗流作用下移向阴极,最后流出:中性分子随电渗流迁移,利用中性分子出峰时间可以测定电渗流迁移速率的大小[2]。
2.毛细管电泳仪组成毛细管电泳仪主要由高压电源、毛细管、电泳槽和检测器等部件组成。
毛细管电泳—电化学检测联用技术及其应用研究【摘要】:毛细管电泳(CapillaryElectrophoresis,CE)是近二十年来发展最快的分离分析技术之一,是分析科学中继高效液相色谱之后的又一重大进展,进样量从微升水平进入纳升水平。
作为一种经典电泳技术与现代微柱分离有机结合的新兴分离技术,其研究和应用涉及环境分析、药物分离、生化分析等几乎所有的分析领域。
极细的毛细管内径带来了很高的分离效能,但同时也给样品组分的检测带来困难,因此对检测技术相应提出了较高的要求,发展了许多类型的检测器,有光学、电化学、质谱学检测器及化学发光等。
电化学检测中的安培检测技术,具有比紫外检测更高的灵敏度,且仪器简单、价格成本低、线性范围宽、操作简便,因而其与毛细管电泳联用后在分析化学领域得到了广泛的研究和应用,研究对象大到生命大分子,小到单细胞分析和无机离子分析。
近年来,随着人们对生活质量的关注,环境分析和药物分析也成为分析化学研究的重点和热点。
本论文探讨了毛细管电泳—安培检测联用技术在环境分析、药物分析等领域中的一些应用,主要内容分为以下六章:第一章绪论简单地概述了毛细管电泳(CE)的特点、分离模式、理论基础、联用的检测器、发展趋势以及毛细管电泳安培检测的理论研究和应用现状等,并简单介绍了本论文的目的和意义。
第二章毛细管电泳安培检测分离测定硝基苯胺位置异构体的研究采用简单的CZE分离模式,不加任何添加剂,在极端pH值条件下,成功地分离了环境中硝基苯胺类化合物。
研究了背景缓冲溶液、pH值、分离电压及进样时间等因素对分离的影响,在选定的实验条件下18min内实现了3种苯胺类化合物的分离,得到分析物的标准曲线、线性范围及加样回收率,同时测定了2种染料废水样品中被测物的含量。
结果表明该方法快速,准确,重现性好。
第三章毛细管电泳安培检测联用检测印染废水中的硝基苯酚异构体本文利用毛细管电泳—安培检测联用技术,通过在缓冲液中添加有机溶剂,成功地实现了硝基酚异构体的分离。
毛细管电泳技术在化学分析中的应用研究毛细管电泳是一种高效、高分辨、低耗时的化学分析技术。
通过特定的毛细管,将样品移动到电泳平台上,并通过电流、电场等作用力来分离、检测并分析样品中的各种物质成分和化学性质。
干净、精确、快速的分析过程,使得毛细管电泳在化学分析中得到了广泛的应用。
一、毛细管电泳技术的发展历程毛细管电泳技术源于20世纪60年代中期,最初是由Albert J.P. Martin和Richard L. Synge发明了新的色谱技术--纸片色谱和薄层色谱,奠定了毛细管电泳技术的基础。
20世纪70年代,Schneider 和Righetti首次在毛细管内进行电泳实验,标志着毛细管电泳技术的诞生。
而在90年代初期,由于技术的突破和研究的深入,毛细管电泳技术得到了广泛的应用。
二、毛细管电泳技术的特点毛细管电泳技术具有以下特点:(1)高效:毛细管电泳作用的实际是分子电荷或尺寸。
在电性或性质不同的电场中,化合物在毛细管中的运动速度各异,从而实现了对化合物的分离。
(2)高分辨:由于毛细管的细小直径,使得实验分离效果很好,可以实现化合物的单一成分分离和检测。
(3)低耗时:毛细管电泳技术的分析时间不能超过几十分钟,而且分析成本低,测量灵敏度高。
(4)宽适用范围:毛细管电泳技术广泛适用于化合物的分离和检测,特别适用于药物分析。
三、毛细管电泳技术在化学分析中的应用毛细管电泳技术在化学分析中有着广泛的应用,具体展现在以下四个方面:(1)药物分析:毛细管电泳技术可以被用于药物分析,比如在药物杂质中检测和物质质量光谱图的分析。
家门口的诊所可以购买这样的仪器来检测药物杂质。
(2)食品分析:毛细管电泳技术可以快速准确的检测食品中的残留物。
比如,毛细管电泳技术可以快速准确地分离和检测牛奶中的脂肪、蛋白质、糖等成分。
(3)生物学分析:毛细管电泳技术可以快速分离、检测和测定生物学系统中的多种元素。
毛细管电泳在DNA碱基对的分离和分析以及其他生物分子的分析中都得到了广泛应用。
【资料】毛细管电泳技术发展及应用前景毛细管电泳技术(Capillary Electrophoresis, CE)又称高效毛细管电泳(HPCE)或毛细管分离法(CESM),毛细管电泳方法虽新工艺,但历史悠久,它是在电泳技术的基础上发展的一种分离技术。
电泳作为一种技术出现,已有近百年的历史,但真正被视为一种在生物化学中有重要意义的技术,是由1937年A. Tiselius 首先提出。
传统电泳最大的局限是难以克服由高电压引起的焦耳热,1967年Hjerten最先提出在直径为3mm的毛细管中做自由溶液的区带电泳(Capillary Zone Electro-phoresis, CZE)。
但他没有完全克服传统电泳的弊端。
现在所说的毛细管电泳技术(CE)是由Jorgenson和Lukacs在1981年首先提出,他们使用了75mm的毛细管柱,用荧光检测器对多种组分实现了分离。
1984年Terabe将胶束引入毛细管电泳,开创了毛细管电泳的重要分支:胶束电动毛细管色谱(MEKC)。
1987年Hjerten等把传统的等电聚焦过程转移到毛细管内进行。
同年,Cohen发表了毛细管凝胶电泳的工作。
近年来,将液相色谱的固定相引入毛细管电泳中,又发展了电色谱,扩大了电泳的应用范围。
当电泳从凝胶板上移到毛细管中以后,发生了奇迹般的变化:分析灵敏度提高到能检测一个碱基的变化,分离效率达百万理论塔片数;分析片段能大能小,小到分辨单个核苷酸的序列,大到分离Mb到DNA;分析时间由原来的以小时计算缩减到以分、秒计算。
CE可以说是经典电泳技术与现代微柱分离技术完美结合的产物。
它使分析科学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞分析,乃至单分子分析成为可能。
长期困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转机。
毛细管电泳技术是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力,根据样品中各组分之间迁移速度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术,迅速发展于80年代中后期,它实际上包含电泳技术和色谱技术及其交叉内容,是分析科学中继高效液相色谱之后的又一重大进展,它使分析科学得以从微升水平进入纳升水平,并使细胞分析,乃至单分子分析成为可能。
毛细管电泳-电化学发光技术及其在临床中的应用
郭炫
【期刊名称】《国际检验医学杂志》
【年(卷),期】2011(032)001
【摘要】@@ 电化学发光技术具有简单、原位和高灵敏度的特点,使其能与毛细管电泳、微芯片毛细管电泳检测器联合运用,并逐渐应用于生命科学领域.本文结合近年的研究,总结了毛细管电泳-电化学发光技术以及在临床研究中的应用,并综述如下.【总页数】3页(P57-59)
【作者】郭炫
【作者单位】西安交通大学医学院附属第一医院检验科,710061
【正文语种】中文
【相关文献】
1.毛细管电泳电化学发光联用技术及其应用进展 [J], 高英;向前;李传杰
2.非水毛细管电泳-电化学发光/电化学双检测技术在药物分析中应用 [J], 袁柏青;由天艳
3.毛细管电泳-电化学发光分离检测技术在分析化学中的应用 [J], 高秀霞;徐春荧;袁柏青;杨秀云
4.基于三联吡啶钌的毛细管电泳电化学发光联用技术及其在药物分析中的应用 [J], 孙双姣;粟雯;陈志良
5.毛细管电泳免疫高灵敏电化学发光检测新技术和新方法及在生化分析中应用研究[J], 本刊编辑部
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
文章编号:100421656(2001)0120004206毛细管电泳技术和应用新进展毛 煜,徐建明(第二军医大学基础医学部化学教研室,上海 200433)摘要:毛细管电泳(CE)是当前分析化学前沿领域和研究重点之一。
本文对毛细管电泳技术—分离模式、进样技术和检测器为线索对最近的研究进展进行了综述,探讨了各种模式和技术的分析效率。
并介绍了CE很有实用价值的几个方面的应用,包括在基因工程和单细胞分析中的突出表现,在手性分离和小分子离子分析方面的广泛应用。
关键词:毛细管电泳技术;基因工程;单细胞分析;手性分离;离子分析中图分类号:O5819 文献标识码:A α1 前言毛细管电泳作为一种经典电泳技术与现代微柱分离有机结合的新兴分离技术,近年来发展迅猛并得到广泛应用。
由于CE显示了对生物分子如神经递质、肽、蛋白、核苷酸的分离分析和DNA 快速测序等的巨大潜力,符合以生物工程为代表的生命科学对各种对象的分离分析和微量制备的需求,所以它正逐步成为一种常用分析手段。
与经典电泳相比,CE克服了由于焦耳热引起的谱带展宽,柱效较低的缺点,确保引入高的电场强度,改善分离质量。
柱效高的可达每米几百万乃至几千万理论板数以上。
CE与高效液相色谱(H PL C)一样同是液相分离技术,很大程度上CE 与H PL C互为补充,但无论从效率、速度、用量和成本来说,CE都显示了它的优势。
CE没有泵输运系统,成本相对要低,且可通过改变操作模式和缓冲液成分,根据不同的分子性质(如大小、电荷数、手征性、疏水性等)对极广泛的物质进行有效分离,相比之下,为达到相同目的,H PL C要用价格昂贵的柱子和溶剂。
另外,CE在进样和检测时均没有象H PL C那样的死体积,且CE以电渗流为推动力,使溶质带在毛细管中原则上不会扩散,而H PL C以压力驱动,柱中流呈抛物线型导致谱带变宽,柱效降低。
概括起来CE有高灵敏度、高分辨率、高速度、低成本、低耗样、应用范围广等优点。
苏州大学研究生考试答卷封面考试科目:考试得分:________________ 院别:材料与化学化工学部专业:分析化学学生姓名:饶海英学号:20114209033授课教师:考试日期:2012 年 1 月 6 日毛细管电泳-电致化学发光联用技术在分析上的应用趋势摘要:电致化学发光(ECL)方法已经在HPLC和流动注射、免疫分析、DNA探针分析应用,成功用于疾病诊断、临床分析、DNA测序等领域。
近些年,该技术已成功与毛细管电泳(CE)技术联用,显示出快速,高效,灵敏等优点,本文论以ECL-CE联用技术在药物分析方面的研究进行了总结,并且展望了该联用技术的发展前景。
关键词:毛细管电泳分离电致化学发光毛细管电泳法(CE)作为一种新型微量分离技术, 具有分离效率高、分析速度快、样品消耗量少、装置简单等优点, 已广泛应用于复杂物质分离检测中。
由于其进样量低( nL级) , 因此对检测器的灵敏度有较高的要求。
发展高选择性、高灵敏度的检测技术用于CE成为分析科学的研究热点。
电致化学发光( ECL)是电化学技术和化学发光方法结合在一起的一种高灵敏检测新技术, 具有灵敏、原位、高选择性和高重复性等优点。
将CE与ECL联用, 兼有CE的高分离率及ECL的高灵敏度等特点, 可直接用于样品中微量组分的分离和测定[ 1]。
因此, CE-ECL在药物分析、生物样品分析、环境分析、食品分析等各领域得到了越来越广泛的应用。
1 毛细管电泳-电致化学发光联用技术概述1.1 CE-ECL技术的原理电致化学发光或电化学发光( Electrogenerate Chemilumnescence or Electrochemiluminescence ,简称ECL) 是在化学发光基础上发展起来的一种新的分析方法,其基本过程是在电极表面产生电活性物质经历电子转移反应形成激发态,之后激发态能量一光的形式释放出来,利用检测器对光信号进行检测,对物质定性定量的分析。
毛细管电泳—电化学发光技术毛细管电泳—电化学发光技术综合了毛细管电泳(CE)和电化学发光(ECL)两方面优点,利用不同粒子在毛细管中迁移速率不同,到达电化学发光检测器的时间不同,光谱峰出现的时间也不同而使各组分得以分离。
目前CE-ECL广泛应用于各领域,在分析科学领域的地位日趋上升。
1在生命科学领域的应用在DNA分析方面:CZE和MECC用来分离碱基核苷酸等。
CE也可用于点突变测定用单链构象多态性分析(SSCP)和限制片段长度多态性分析(RFLP)等。
如,Kyupers等用毛细管电泳法对14号和8号染色体进行RFLP分析,检测出基因的突变(二染色体基因的交换)并用于诊断淋巴瘤。
而Motmas等却利用ECL和PCR技术相结合对人T细胞中肿瘤坏死因子(TNF-α),干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-2(IL-2)的水平进行了定量。
在免疫分析方面:TAO.L用CE技术在PH=8.0的缓冲溶液中用5µmd×8cm的毛细管在4000V/cm的高压下对胰岛素进行了分析,时间不到一秒。
盂凡华等用ECL免疫法测定甲胎蛋白,最低检测浓度为0.8g/L,准确度和精密度均优于传统的酶联免疫法。
Forest用IECL 法测定了癌胚抗原CEA和PAS等。
分别用CE、ECL法对生命科学领域中DNA、免疫系统、核酸成分及蛋白质的分析报道甚多,同一种物质的分析也有分别用两种方法进行的,而综合用CE-ECL法的却很少。
但是,Mei-Tsu chiang已经用CE-ECL检测了叔胺和氨基酸,其中包括TPrA,TEA,脯氨酸,组氨酸,羟基脯氨酸和色胺基酸.这说明CE-ECL将是生命科学领域的一大应用趋势。
2在药物分析和临床医学方面的应用目前, CE-ECL在医药领域趋于成熟,已经分别用于几百种药物及各种剂型中主要成分分析,相关杂质检测、纯度检测及定性鉴别等.Peter Mikus等对肝磷脂的特性分析表明CZE对原料中肝磷脂的定性、定量是很可靠的方法。
毛细管区带电泳技术及应用毛细管区带电泳技术(Capillary Zone Electrophoresis,CZE)是一种高效的分离和分析技术,利用背景电解质在毛细管中形成的电动流动及外加电场的作用,将被检测的样品分离开来。
毛细管区带电泳技术具有高分离效率、灵敏度高、样品需量小、分析速度快、适用于各种离子、小分子有机化合物、大分子如蛋白质和核酸等的分析等优点。
下面将介绍毛细管区带电泳技术的基本原理及其应用。
1. 毛细管区带电泳技术基本原理:毛细管区带电泳技术是基于电泳分离原理的一种分析方法。
毛细管内的电测电流和电压作为工具信号直接测量电导率,由于电导率与离子浓度成正比,通过计算可知样品中离子的浓度。
其基本原理如下:- 外加电场:在毛细管两端施加直流电场,样品中的带电粒子会被拉动向阳极或阴极方向移动。
- 毛细管内电动流动:在毛细管内部,背景电解质(电导率较高的缓冲溶液)通过浓度梯度与电场作用下形成电动流动,背景电解质的流动速度较高,背景电解质流动会带动样品分子的运动。
- 电渡效应:毛细管内的带电粒子在电渡效应的作用下会不同程度地移动,不同的离子在电场下移动速率不同,从而实现离子和样品分子的分离。
2. 毛细管区带电泳技术的应用:毛细管区带电泳技术在分析化学、生物医学等领域得到广泛应用,下面列举几个常见的应用领域:- 离子分析:毛细管区带电泳技术可以用于离子的分离和测定。
它可以是无色离子,如金属离子、无机阴离子、有机阴离子等的分析,也可以是发色离子的分析。
- 小分子有机物分析:毛细管区带电泳技术可以用于分离和检测食品、药物、环境样品等中的小分子有机物。
例如,可以用于药物成分的分析、食品添加剂的检测等。
- 蛋白质分析:毛细管区带电泳技术在蛋白质分析方面得到广泛应用。
由于毛细管区带电泳技术分离效率高、分析速度快,对蛋白质样品需求量小,可以有效地分离和定量测定多肽、蛋白质混合物。
- 核酸分析:毛细管区带电泳技术可用于分离和分析DNA、RNA等核酸样品。
毛细管电泳—电化学发光分离检测技术在分析化学中的应用孙凯(黄冈师范学院)摘要:毛细管电泳-电化学发光(CE-ECL)由于其具有操作简单、灵敏度高、分离效率高、分析速度快以及试剂消耗少等优点,已经发展为非常重要的分析工具,并且被广泛地用于食品、环境、临床和药物分析。
本文对CEECL最新的研究进展进行了及时地报道,并且详细地介绍了CE-ECL的检测机理、模式,及其在实际样品中的应用。
关键词:毛细管电泳;电化学发光毛细管电泳(CE)是一类以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,以样品的多种特性(电荷、大小、等电点、极性、亲和行为、相分配特性等)为依据的液相微分离分析技术[1]。
它具有分离效率高、分析时间短、样品消耗量少等优点[2]。
但是,由于毛细管小的尺寸,它需要高灵敏的检测器与之联用。
电化学发光(ECL)是一种在电场的作用下,在电极表面将电能转化为辐射能的化学发光方法。
ECL发光试剂在电极表面发生氧化,然后和分析物进行一系列反应产生激发态,之后激发态回到基态并发射出光子,从而得到光信号。
在ECL体系中,三联吡啶钌(Ru(bpy)32+)是最常用的发光试剂,它不仅具有稳定性好,灵敏度高,线性范围宽以及背景噪音低等优点,而且它在水中和有机溶剂中都具有很高的发光效率[3]。
近几年,Ru(bpy)32+ ECL 技术已经成功应用于CE,简称CE-ECL。
它主要用来检测胺类化合物,并且成功用于各种实际样品的分析。
CE-ECL 具有以下的优点:操作简单、灵敏度高、分离效率高、分析速度快以及试剂消耗少等。
本文主要对CEECL的检测机理、模式,及其对实际样品分析等方面进行了综述。
1 机理首先,Ru(bpy)32+在工作电极上氧化生成Ru(bpy)33+;然后,Ru(bpy)33+与毛细管中流出的分析物进行一系列反应生成Ru(bpy)32+的激发态(Ru(bpy)32+*);最后,Ru(bpy)32+*回到基态并释放出光子产生电化学发光信号,电化学发光强度通常和被分析物浓度成正比。
毛细管电泳技术及在微生物学中的应用摘要: 毛细管电泳技术是一种新型高效液相分离技术,应用领域广泛。
本文分别从毛细管电泳技术的发展概况及在微生物学检测中的应用加以综述。
关键词: 毛细管电泳;微生物;应用毛细管电泳迅速发展于80年代中后期,是分析科学中继高效液相色谱技术之后的又一重大进展,使分析科学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞分析乃至单分子分析成为可能[1]。
毛细管电泳(CE)是一类以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。
广泛应用于核酸、蛋白质、多肽、药物等大分子物质的分析,但是,不同于毛细管电泳在无机离子、有机小分子和生物大分子等方面取得的巨大成功,毛细管电泳在微生物方面的应用在最近几年才取得较大进展,并逐渐显现出巨大的应用潜力。
在微生物学领域,毛细管电泳除了在微生物基因测序方面得到广泛应用外,在微生物学检测方面应用的报道不多见。
本文主要介绍了毛细管电泳的发展、原理、特点、分离模式及在微生物检测中的应用。
1、毛细管电泳技术1.1毛细管电泳发展历史1937年瑞典化学家Tiselius[2]利用电泳技术第一次从人血清中分离出白蛋白和α、β、γ球蛋白,并研制成第一台电泳仪,使电泳作为一种分离分析技术有了突破性的进展。
经典电泳法最大的局限性在于存在焦耳热,只能在低电场强度下操作,直接影响了其分离效率和分析速度的提高,为了解决这一问题,人们进行了多方探索。
1981年,Jorgenson和Lukacs[3]使用内径75um的石英毛细管进行电泳,成功地对丹酰化氨基酸进行了快速,高效分离获得了40万块/m理论塔板的高效率。
这一开创性工作成为电泳发展史上一个里程碑,使经典的电泳技术发展为高效毛细管电泳(HPCE)。
从此,毛细管电泳在理论研究,分离模式,商品仪器,应用领域等各方面获得了迅猛发展。
如今,HPCE可与GC、HPLC相媲美,成为现代分离科学的重要组成部分[4]。
1.2毛细管电泳基本原理和分离模式按毛细管内分离介质和分离原理的不同,毛细管电泳有以下几种分离模式[5]:(1)毛细管区带电泳毛细管区带电泳(CZE)的分离原理是基于各个分离物质的净电荷与其质量比(比荷)间的差异而进行物质的分离。
毛细管电泳-电化学发光法检测鳀鱼中氧氟沙星毛细管电泳-电化学发光法检测鳀鱼中氧氟沙星氧氟沙星是一种广泛使用的激素类药物,常用于畜牧业生产中预防和治疗家禽、家畜的感染病。
然而,该药物在鱼类养殖中的应用也较为普遍,因此对其在鳀鱼中残留量的检测显得尤为关键。
为了保证鱼类及其产品的质量安全,必须采用敏感、准确、可靠的检测方法进行检测。
毛细管电泳-电化学发光法(CE- ECL)是近年来快速、高灵敏度的分离与检测技术。
该技术结合了毛细管电泳(CE)和电化学发光(ECL)的优势,其基本原理是利用毛细管电泳对药物分子进行分离,然后通过电化学发光技术对制备的荧光体系进行检测,使得荧光信号具有较高的灵敏度和非常强的特异性。
在鳀鱼样品中检测氧氟沙星残留量的首要步骤是样品制备。
样品制备包括样品的处理、提取和净化。
样品的处理过程中需要使用离心机进行离心分离,以获得鱼肉、骨和脂肪等成分。
样品提取中使用甲醇进行提取,然后使用二氯甲烷进行净化。
这种提取方法能够减少基质的干扰,提高分析的精确性。
毛细管电泳则是将样品中的氧氟沙星分子根据电荷和分子大小进行分离。
在分离的过程中,需要注意电泳缓冲液的选择,以获得最好的分离效果。
常用的缓冲液包括硼酸、磷酸和乳酸缓冲液等。
对于CE-DDS系统来说,荧光体系是需要制备的,且直接与样品中药物的检测结果有关。
通常,荧光体系是由荧光物质、辅助的电化学还原剂和添加剂组成。
在CE分离完成后,通过荧光物质的固有特性发出光信号,从而得出检测结果。
此外,对于该检测方法的灵敏度、准确性和特异性等也需要进行优化,包括选择合适的电化学还原剂、荧光物质和添加剂,优化荧光体系的pH值,控制样品注射的时间和分离的电压等。
总的来说,毛细管电泳-电化学发光法是一种理想的检测方法,具有快速、高灵敏度、高特异性、不需要复杂的预处理和抽提过程等优点,能够满足对鳀鱼中氧氟沙星进行快速、准确、灵敏度高的定量分析需求。
随着该技术的不断发展和完善,相信该检测方法在鱼类中药物残留检测中发挥的作用也将越来越大。