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介绍一种快速提取免疫球蛋白G的方法
吴健敏;袁书智
【期刊名称】《广西畜牧兽医》
【年(卷),期】1996(012)002
【摘要】介绍一种快速提取免疫球蛋白Ｇ的方法吴健敏，袁书智，贺荣莲广西区兽医研究所５３０００１目前，提取免疫球蛋白Ｇ（ＩｇＧ）常用的方法有饱和硫酸按盐析法、离子交换层析法、凝胶过滤法、亲和层析法等，这些方法往往操作繁琐、费时费力，对ＩｇＧ活性影响较大。
现介绍一...
【总页数】2页(P14-15)
【作者】吴健敏;袁书智
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】TQ936.21
【相关文献】
1.介绍一种快速提取胎鼠基因组DNA进行基因型分析的改良方法 [J], 杨瑞;麻献华;唐君仪;章卫平;谢志芳
2.介绍一种简易、快速提取和纯化质粒的方法 [J], 李小林;赵晓冬;等
3.介绍一种快速提取白细胞DNA和RNA的新方法 [J], 李雅琴;杨杰
4.一种改进的遥感影像水体信息快速提取方法 [J], 王帆;李崇贵;马婷;刘梦霞;张志超
5.一种快速提取三孢布拉霉基因组的方法 [J], 董雪田;朱恺丽;曲音波;杨培龙;余晓斌;罗玮
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免疫球蛋白分离方法免疫球蛋白分离方法是一种用于分离和纯化免疫球蛋白的技术。
免疫球蛋白是一类在人体中起着重要免疫作用的蛋白质，也常被称为抗体。
抗体是一种能够特异性地与抗原结合的蛋白质，其产生是由B细胞分泌的。
在临床和研究中，我们经常需要从复杂的混合物中分离并纯化抗体，以便进行后续的分析和使用。
免疫球蛋白分离的两个主要目标是分离一个特定的抗体（或一类抗体）以及去除其他非特异性的蛋白质污染物。
以下是一些常见的免疫球蛋白分离方法：1.亲和层析法:亲和层析法是一种利用特定的亲和力来分离和纯化抗体的方法。
通常，需要使用一种被固定在固定载体上的抗原或其他抗体，以捕获和保留目标抗体。
然后，通过适当的洗脱步骤，将目标抗体从固定载体上洗脱下来。
常见的亲和层析实验包括蛋白A/G层析和抗原亲和层析。
2.凝胶过滤法:凝胶过滤法是一种根据免疫球蛋白的分子大小差异进行分离的方法。
这种方法使用从大到小排列的分子筛（或凝胶）来分离不同大小的蛋白质。
通过选择适当的筛选孔径，可以分离目标抗体并去除较大或较小的污染物。
3.离子交换层析法:离子交换层析法是一种通过蛋白质与活性基团之间的电荷作用来分离蛋白质的方法。
在离子交换层析柱中，带有正电荷的离子交换基团可以吸附并保留带有负电荷的免疫球蛋白。
通过适当的洗脱步骤，可以将目标抗体从柱上洗脱下来。
4.透析法:透析法是一种通过溶液的分子大小和性质的差异来分离和纯化蛋白质的方法。
通过选择适当的透析膜，可以让目标抗体与其他分子的大小和性质分别通过膜。
这种方法通常适用于以小分子或低浓度的溶液中进行分离。
此外，还可以使用其他分离方法，如斑点杂交、加速选择、免疫磁珠法等。
免疫球蛋白分离方法的选择应根据具体的实验要求和实验样品的特点进行。
不同的方法侧重于不同的目标和操作条件，因此需要根据实际情况灵活选择。
总的来说，免疫球蛋白分离是免疫学和生物化学领域中常用的一种技术，在研究和诊断领域有着广泛的应用。
通过适当的方法，可以高效地分离和纯化免疫球蛋白，为后续的研究和应用提供了可靠的基础。
对鸡卵黄免疫球蛋白两种提取方法的比较皮晋魁;张焕容【摘要】本文比较了水稀释-饱和硫酸铵沉淀法（法一）和水稀释-冰乙醇分级沉淀法（法二）分离提纯鸡卵黄免疫球蛋白（IgY）的产率、纯度及抗体效价。
结果表明：两种方法提取的IgY纯度均较高,法一纯化的IgY的产率及蛋白活性相对更好。
%Two methods for extracting IgY：water diluted-saturated ammonium sulfate precipitation method（method 1）and water diluted-iced ethanol centrifugation precipitation（method 2）,which were compared about IgY extraction rate,purity and antibody titer.The result showed that IgY extracted by both methods had high purity and method 1 was relatively better than method 2 in extraction rate and protein activity of IgY.【期刊名称】《四川畜牧兽医》【年(卷),期】2011(038)010【总页数】3页(P26-28)【关键词】卵黄免疫球蛋白;纯化;产率;纯度;活性【作者】皮晋魁;张焕容【作者单位】西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041【正文语种】中文【中图分类】S852.46本试验采用水稀释法初提IgY，然后分别用硫酸铵沉淀法和冰乙醇分级沉淀法进一步提取IgY，检测IgY提取量、纯度以及活性效价，为选择较好的鸡卵黄免疫球蛋白（IgY）提取方法提供依据。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 新鲜鸡蛋购自成都农业科技职业学院实训中心。
血清免疫球蛋白（Immunoglobulin，IgG）的分离制备―盐析法（一）原理IgG是免疫球蛋白（Immunoglobulin，简称IgG）的主要成分之一，分子量约为15万~16万，沉降生活费数约为7s。
IgG是动物和人体血浆的重要成分之一。
血浆蛋白质的成分多达70余种，要从血浆中分离出IgG，首先要进行尽可能除去其他蛋白质成分的粗分离程序，使IgG在样品中比例大为增高，然后再纯化而获得IgG。
盐析法是粗分离蛋白质的重要方法之一。
许多蛋白质在纯水或低盐溶液中溶解度较低，若稍加一些无机盐则溶解度增加，这种现象称为“盐溶”（Salting in）。
而当盐浓度继续增加到某一浓度时，蛋白质又变得不深而自动析出，这种现象称为“盐析‘（Salting out）。
这些现象的原理大致是由于蛋白质是亲水胶体，带有羧基解离的负电荷或氨基解离的正电荷，其极性基团使分子间相互排斥，同时与水分子形成水膜，这些因素保证蛋白质形成溶于水的溶胶状态。
当加入少量盐时，增多了蛋白质分子上的极性基团，因而增大了蛋白质在水中溶解度，出现“盐溶”现象。
钽当盐浓度增加到一定浓度时，一方面大量的水同盐分子结合，使得蛋白质没有足够的水维持溶解状态，破坏了维持蛋白质亲水胶的水膜，容易沉淀出来；另一方面加入的盐离子中和了蛋白质分子相互磁撞时即发生相互聚集沉淀出来，这样就出现了“盐析”现象。
由于各种蛋白质“盐析”出来所需的盐浓度也各异，盐析所需的最小盐量称做盐析浓度。
盐析法就是通过控制盐的浓度，使蛋白质混合溶液中的各个成分分步“盐析”出来，达到分离目的蛋白质。
盐析法是1878年Hammarster首次使用的，他用硫酸镁成功地将血清蛋白分成为清蛋白、球蛋白两部分。
自那以后曾使用过硫酸钠、氯化钠、磷酸钠和硫酸铵等中性盐来盐析蛋白质，其中运用最广的是硫酸铵。
因为硫酸铵有许多其他盐所不具备的优点，如在水中化学性质稳定；溶解度大，25℃时能达到4.1mol/L的浓度；溶解度的温度系数变化较小，在0~30℃范围内溶解度变化不大，如25℃时饱和溶解度为4.12mol /L，即767g/L，0℃时饱和溶解度为3.9mol/L，即676g/L。
测定静脉注射人免疫球蛋白IgG含量的三种方法比较
王淼;薛巧如;姚敏菲;谢正福
【期刊名称】《解放军药学学报》
【年(卷),期】2010(026)006
【摘要】目的对检测静脉注射人免疫球蛋白中IgG含量的3种方法进行比较.方法采用紫外分光光度法、酶联免疫法、高效亲和色谱法对静脉注射人免疫球蛋白进行IgG含量测定.结果紫外分光光度法与高效亲和色谱法及酶联免疫法之间有显著性差异,高效亲和色谱法与酶联免疫法之间无显著性差异,高效亲和色谱法的重复性较好,RSD为0.8%.结论为选定静脉注射人免疫球蛋白中IgG含量测定方法提供了依据.
【总页数】4页(P517-520)
【作者】王淼;薛巧如;姚敏菲;谢正福
【作者单位】510180,广东广州,广东省药品检验所生化室;510180,广东广州,广东省药品检验所生化室;510275,广东广州,中山大学化学与化学工程学院;510080,广东广州,广东省食品药品监督管理局审评认证中心
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.三种方法测定人血清IgG抗A、抗B效价的比较 [J], 谢作听;王春香;陈钦宏;郭瑞德
2.静脉注射人免疫球蛋白中IgG含量的测定方法的比较 [J], 赵立哲;杨红育;陈立新;边芳;顾丽丽;康辉;聂荣国
3.三种方法检测静注免疫球蛋白中IgG含量的比较 [J], 唐玉琴;黄凤琼;张月星;毛秀珍;林晓军;王叔桥
4.改良火箭免疫电泳法测定静脉注射用丙种球蛋白的IgG含量 [J], 黄凤琼;陈晓东;栗克喜;毛秀珍;邹澄川
5.用高压液相色谱法测定静脉注射用人免疫球蛋白(pH4)中麦芽糖含量 [J], 宋青因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
免疫球蛋白的提取方法根据猪血中含有的各种蛋白质的分子大小、电荷多少、溶解度以及免疫学特征等,从血液中提取免疫球蛋白,常用的有盐析法、有机溶剂沉淀法、有机聚合物沉淀法、变性沉淀法等。
免疫球蛋白的提取盐析法盐析法是分离蛋白质的重要方法之一,是利用抗体与杂质之间对盐浓度敏感程度的差异性进行的。
选择一定浓度范围的盐溶液使部分杂质呈“盐析”状态,抗体成分呈“盐溶”溶解状态。
离心去除盐析沉淀状态的杂蛋白,得到的上清液再选择一定浓度范围的盐溶液使抗体成分呈盐析状态,离心得到的沉淀物即为纯化的目标抗体。
目前常用的盐析法有饱和硫酸铵分步盐析法、辛酸沉淀法、氯化铁沉淀法、多聚磷酸盐盐析法等。
饱和硫酸铵分步盐析硫酸铵是盐析法最常用的无机盐,主要原因是它溶解度大,随温度变化小,对蛋白质有保护作用,高浓度时可抑制微生物和蛋白酶的活性,价格也不贵。
免疫球蛋白的饱和硫酸铵分步盐析法操作简单,对设备和操作条件要求不高,便于工业化生产。
其具体步骤为:取一定量血浆,加生理盐水稀释,边搅拌边缓慢加入饱和硫酸铵溶液至硫酸铵终浓度20%,4℃静置1h,4000r/min离心10min,弃沉淀,上清液中继续加入饱和硫酸铵溶液至硫酸铵终浓度50%,浓氨水调pH值至7.0,4℃静置2h,4000r/min离心20m弃上清,将沉淀溶于生理盐水,超滤除盐浓缩,滤液中无S2- 4为止,即得IgG粗提物。
免疫球蛋白的辛酸沉淀法辛酸沉淀法提取IgG时,对设备和操作条件要求较高,在离心时,转速为10000 r/min,普通离心机达不到要求。
在调节溶液pH值时,要控制得当,pH值稍低或稍高对IgG的得率和纯度都有很大影响,这些都限制了它的广泛应用。
其具体步骤为:取一定量0.1mol调pH值至4.5;室温下边搅拌边缓慢加入辛酸(按辛酸25 μl/mL血清混合液添加),继续搅拌30min 后,10000r/min离心30min,弃沉淀,留上清液,上清液用多层纱布过滤,留滤液,然后将滤液装入透析袋中析48h,每8～10h换一次透析液,最后超滤浓缩即得1gG粗提液。
五种免疫球蛋白产生顺序免疫球蛋白（immunoglobulin，简称Ig）是一类在动物体内产生且具有重要免疫功能的蛋白质。
免疫球蛋白主要由一种特殊的免疫细胞——B细胞合成分泌。
人体内的免疫球蛋白有很多种，每一种都有不同的作用和产生顺序。
下面我们就来探究一下免疫球蛋白产生的五种顺序。
免疫球蛋白是由B细胞分泌的，而B细胞分泌的免疫球蛋白又分为五个类别，分别是IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。
它们的产生顺序是相对固定的，按照从早到晚的顺序分别产生。
接下来我们就来详细介绍一下这五种免疫球蛋白的产生顺序。
首先是IgM免疫球蛋白的产生。
IgM是最早产生的免疫球蛋白，也是最基本的免疫球蛋白。
它在免疫应答的早期阶段被合成并释放到体液中。
IgM通过结合病原体表面的抗原来中和病原体，并激活其他免疫细胞参与免疫应答。
在感染初期，IgM是起到主要作用的一种免疫球蛋白。
接着是IgD免疫球蛋白的产生。
IgD相对于其他免疫球蛋白来说更不常见。
它主要存在于B细胞的表面，并和IgM一起参与免疫应答。
IgD的确切功能尚不明确，但研究表明它可能是B细胞发育和活化的信号分子。
然后是IgG免疫球蛋白的产生。
IgG是最丰富的免疫球蛋白，约占体内总免疫球蛋白的75%。
IgG具有多种免疫活性，包括中和病原体、促进巨噬细胞吞噬病原体、调节其他免疫细胞等。
IgG的合成需要更长的时间，但它的抗原结合能力和特异性要比IgM高。
这也是为什么在感染后的较晚时期，IgG起到主要作用的一个重要原因。
接下来是IgA免疫球蛋白的产生。
IgA是主要存在于黏膜组织中的免疫球蛋白。
它具有重要的保护作用，可以中和黏膜表面的病原体，阻止它们侵入机体。
IgA的合成主要发生在肠道和呼吸道的黏膜下淋巴组织中，然后通过黏膜上皮细胞分泌到体液中。
最后是IgE免疫球蛋白的产生。
IgE是体内最少的免疫球蛋白，它在免疫应答的晚期阶段产生。
IgE主要参与过敏反应，例如花粉、尘螨等过敏原与IgE结合后，会引起巨噬细胞和嗜酸性粒细胞释放大量的组织胺，导致过敏症状的发生。
免疫球蛋白G提纯方法的研究进展李登亮;伊淑帅;郭衍冰;刘宏凯;牛江婷;董国英;胡桂学【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2018(054)012【总页数】3页(P65-67)【作者】李登亮;伊淑帅;郭衍冰;刘宏凯;牛江婷;董国英;胡桂学【作者单位】吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;吉林省畜牧兽医科学研究院,吉林长春130022;吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;北京师范大学全球变化与地球系统科学研究院,北京海淀100875;吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118【正文语种】中文【中图分类】Q512.2免疫球蛋白(IgG)是血液中除白蛋白外最丰富的蛋白，由通过二硫键连接的两条轻链和两条重链组成，呈“Y”型。
免疫球蛋白(IgG)约占血液总免疫球蛋白的75%，并且是与体液免疫应答相关的主要免疫球蛋白[1]，作为参与机体对抗感染的主要分子，具有与病原体或毒素结合，激活补体，加强吞噬作用的杀伤作用，启动过敏反应和减轻移植器官排斥的能力，是临床应用中使用最广泛的免疫球蛋白[2-3]。
IgG 与其他免疫球蛋白相比，具有持续时间长、含量高、稳定性强等优点，一般情况下，通过对动物机体或动物性产品内特异性IgG 含量的测定，可判断该动物是否曾患有相关疾病或其产品是否合格，这在动物的出入境检验检疫及其产品的质量评价中应用十分广泛，因此IgG 的分离纯化倍受关注。
本文对不同的血清IgG 提纯工艺进行了详细的阐述与比较，以期为IgG 生产工艺的改良提供理论参考。
1 免疫球蛋白的粗提1.1 有机溶剂沉淀法目前，有机溶剂沉淀法是一种被广泛应用于蛋白质制剂生产的提纯方法，其中，低温乙醇沉淀法是生产中应用最为广泛的一种方法，也是WHO 规程和中国生物制品规程推荐用的方法。
免疫球蛋白IgG的提取-3五、蛋白质的盐析法向蛋白质溶液中加入不同浓度的中性盐，可以把不同的蛋白质分别沉淀出来。
这种方法称为蛋白质的盐析。
利用蛋白质的盐析法，可以得到我们所需的不同的免疫球蛋白。
最常用的中性盐包括，硅酸铵、硫酸镁、硫酸钠等，其中以硫酸铵最为常用：（一）、优点1、在水中溶解度大，其饱和溶液含有大量盐；2、在水中的溶解度受温度的影响很小；3、一般不会引起蛋白变性。
（二）、缺点提取的纯度较差，所以只能用它作为粗提。
饱和硫酸铵溶液配法：取760g～800g硫酸铵，放人70～80℃蒸馏水1000mL中，搅拌约20min，室温静置过液，硫酸铵结晶析出，即上清为饱和硫酸铵，再用NH40H调pH为7.0。
六、实验内容（一）稀释血清向血清中加入生理盐水，做1�U1稀释，主要目的，以防蛋白质溶液浓度过稠，引起其它蛋白质共沉，或局部蛋白质变性。
（二）用50%饱和度硫酸铵提取免疫球蛋白将用生理盐水按l�U1稀释的动物血清置于三角烧瓶或烧杯中，在电磁搅拌器不断搅拌下，逐滴加入与稀释的蛋白液等量的饱和硫酸铵（血清1体积+生理水1体积+饱和硫酸铵2体积），搅拌的目的是为了防止局部硫酸铵浓度过高。
搅拌后，室温放置0.5～1h，或置4℃冰箱过夜，次日取出，以每分钟4000转离心30min（离心管周围加冰块或冰水），离心后弃上清（内含白蛋白等），沉淀物中即含γ和β球蛋白。
硫酸铵溶液的饱和度是指在整个溶液中所占的百分比，与原蛋白液的浓度无关。
分子量大的蛋白质先沉淀，分子量小的蛋白质后沉淀，球蛋白的分子量20～30万，而白蛋白的分子量只有69000，所以50%饱和度硫酸铵沉淀的是球蛋白，而白蛋白则留在上清液中。
（三）用33%饱和度硫酸铵提取血清中的γ球蛋白当血清中饱和硫酸铵为50%饱和度时，沉淀三次，仍含有大量的α、β球蛋白及极少量的白蛋白，当硫酸铵饱和度由50%减少到33～35%时，沉淀蛋白质中的α、β球蛋白和白蛋白的含量相应逐渐减少，而γ球蛋白的纯度逐渐提高，第三次沉淀物只含有少量的α、β球蛋白及白蛋白。
免疫胶体金法和免疫单扩散法检测牛初乳中IgG含量的比较
研究
刘春龙;李忠秋
【期刊名称】《吉林农业大学学报》
【年(卷),期】2006(028)004
【摘要】建立了检测牛初乳中免疫球蛋白(IgG)含量的免疫胶体金法,并与常用的免疫单扩散法进行了比较.结果表明:免疫胶体金法灵敏度为200μg/mL,操作简单快速,不需要特殊仪器和设备,适合现场的快速检测.单扩散法灵敏度较高,约为10～20
μg/mL,但试验步骤较繁琐,单扩散需要恒定的时间、温度等条件,适合于实验室的精细测定.2种方法可结合使用,从而在保证检测灵敏度和特异性的前提下,大大提高检测速度.
【总页数】4页(P458-461)
【作者】刘春龙;李忠秋
【作者单位】中国科学院东北地理与农业生态研究所,哈尔滨,150081;黑龙江省农业科学院畜牧研究中心,哈尔滨,150086
【正文语种】中文
【中图分类】S852.4
【相关文献】
1.HPLC法测定牛初乳乳清蛋白粉中免疫球蛋白IgG的含量 [J], 康孟丹;黄宏南;林宏琳;刘琳琳
2.免疫单扩散法检测牛初乳IgG含量方法改良及牛初乳样品的检测 [J], 李忠秋;刘春龙;李勐;王君伟
3.免疫胶体金半定量检测牛初乳IgG含量方法的建立及初步应用 [J], 李忠秋;刘春龙;李勐;王君伟
4.免疫单扩散法（SRID）测定纯化灭活流感病毒疫苗血凝素含量及其方法学的研究 [J], 尹少甫
5.酶联免疫双抗体夹心法检测牛初乳素中免疫球蛋白IgG [J], 项新华;尹香君;赵丹慧;李成文
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蛋黄中免疫球蛋白的分离纯化技术
郭本恒;石进财
【期刊名称】《肉禽蛋》
【年(卷),期】1993(000)006
【摘要】本文综述了从蛋黄中分离水溶性浆蛋白的工艺方法，水溶性组份中ＩｇＹ在ｐＨ５．０－５．２经６倍水稀释后培养的６ｈ，其回收率达９３－９６％，其中ｐＨ值是影响ＩｇＹ回收率的最重要因素，高回收率的活性高纯ＩｇＹ可通过盐沉淀，乙醇沉淀，超滤，凝胶过滤和离子交换色谱法等分离技术制得，盐沉淀，超滤和凝胶过滤是一种值得广泛应用的方法，通常１个鸡蛋可制得电泳纯ＩｇＹ１００ｍｇ左右。
【总页数】4页(P15-18)
【作者】郭本恒;石进财
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】TS253.4
【相关文献】
1.蛋黄中免疫球蛋白的提取 [J], 陈中;王荣民
2.免疫球蛋白IgG和IgM分离纯化技术现状与展望 [J], 刘生杰;余为一
3.蛋黄免疫球蛋白制备和应用研究进展 [J], 戴浪
4.蛋黄免疫球蛋白粉增强小鼠免疫力的功能 [J], 张金秋; 杨磊; 高畅; 刘念远; 刁旭; 姜文月
5.酶联免疫吸附技术用于蛋黄中免疫球蛋白活性的测定 [J], 唐莉莉;杨严俊;马培松;徐榕榕
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