肝衰竭模型研究进展
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1.3 多能干细胞来源的肝样细胞随着干细胞技术的革新,多个研究团队通过模拟胚胎发育过程中肝脏的发育过程,定向诱导胚胎干细胞(human embryonic stem cells,ESCs)为肝样细胞[17],并能够表达包括药物代谢酶和外排转运蛋白在内的几乎完整的生物转化系统[18]然而,无论何种诱导分化方案,所获得的肝样细图1 2D培养的人原代肝细胞用于非酒精性脂肪肝病模型研究[31]图2 肝素-水凝胶三明治夹心培养体系[37]。
(A) 肝素-聚乙二醇水凝胶夹心法培养肝细胞体系制备示意图。
(B) 分别培养7天,15天后肝素-水凝胶夹心与胶原夹心体系MRP2(形成胆小管网络)表达水平Figure 2. Heparin-hydrogel sandwich. (A) Schematic diagram of preparation of heparin-polyethylene glycol hydrogel sandwich model. expression of MRP2 (forming a bile duct network) in the heparin-hydrogel or collagen sandwich system after 7 or 15days of culture基于生物支架的3D培养模型结合高内涵技术的药物安全性评价体系[42]。
(A) 基于生物支架的3D培养模型构建及高内涵成像分析示意图。
(B) 利用高内涵成像技术对多种潜在肝毒性药物可能引起的关键事件分析Figure 3. A 3D culture drug safety evaluation system based on biological scaffolds combined with a high-content . (A) Schematic diagram of 3D culture modelbiological scaffolds and high-content(B) Using high-content imaging technologykey events that may be caused bypotentially hepatotoxic drugs图4 多种细胞混合培养模型与微流控技术结合构建人工[51]。
HBV相关慢加急性肝衰竭免疫病理发病机制研究进展李晓东【期刊名称】《实用肝脏病杂志》【年(卷),期】2015(018)003【摘要】慢加急性肝衰竭(ACLF)是在慢性肝病基础上发生的急性肝功能失代偿.在我国,引起ACLF的首要病因是乙型肝炎病毒感染,其中病毒诱发的淋巴毒性T细胞活化和细胞因子大量分泌为代表的免疫病理损伤是肝衰竭发病的中心环节.本文将从抗原递呈、效应细胞的直接杀伤、宿主遗传背景、免疫相关细胞因子和免疫过激状态的抑制性调节等方面介绍HBV相关A-CLF免疫病理发病机制的研究进展.%Acute-on-chronic liver failure (ACLF) refers to an acute decompensated liver function in patients with chron-ic liver diseases and the most common cause of ACLF in China is HBV infection. Activation of cytotoxic T lymphocytes and increased cytokines can cause immunopathogenetic injuries in liver tissues. This article mainly reviewed the immunopathogenesis progress of HBV related ACLF.【总页数】4页(P317-320)【作者】李晓东【作者单位】100853 北京市解放军医学院;解放军第302医院【正文语种】中文【相关文献】1.HBV相关慢加急性肝衰竭患者Treg细胞、Th17细胞表达特点及其与HBV前C 区/BCP区变异的相关性 [J], 高海兵;郑瑞丹;王香梅;刘宝荣;潘晨;方建凯;林升龙;马华晳;陈秀敏;林明华2.磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶在急性肝衰竭小鼠模型及HBV相关慢加急性肝衰竭患者肝组织中的表达及意义磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶在急性肝衰竭小鼠模型及HBV相关慢加急性肝衰竭患者肝组织中的表达及意义 [J], 陈婧;刘晓燕;杨昊臻;黄坤;胡瑾华;辛绍杰3.HBV相关慢加亚急性肝衰竭患者外周血Th1、Th2、Th17的表达和意义 [J],顾静;甘建和;陈丽;王艳;姚运海4.HBV相关性慢加亚急性肝衰竭中医症候群积分与疾病分期及预后相关性研究 [J], 周意;孙克伟;阳航;黄裕红;张涛;朱文芳5.HBV相关慢加亚急性肝衰竭患者中Th17细胞、Treg细胞的变化及其与肝功能和HBV-DNA载量间的研究 [J], 沈敏;林明强;冯奇桃;吕友凯;李永武因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
急性肝功能衰竭临床诊治进展摘要】急性肝功能衰竭属于临床上多见的一种急危重症,该病病因主要是由于药物引发肝损伤、免疫性肝炎或者病毒性的肝炎等,临床表现主要是消化道的症状严重,黄疸发展快速、出血,而且会先后发生多种并发症,具体的临床过程是发展性多器官的功能逐渐衰竭。
目前,排除因中毒导致的急性肝功能衰竭病患能以解毒药进行治疗之外,对于其它因素导致的急性肝功能衰竭,在目前没有特效的疗法,临床病死率十分高。
该病主要的治疗方法有肝移植、植病因学治疗、人工肝支持治疗以及并发症治疗等。
如下笔者关于急性肝功能衰竭的诊治研究进展展开综述。
【关键词】急性肝功能衰竭;诊断;治疗1.前言急性肝功能衰竭(ALF)是由于肝脏合成功能和代谢功能发生急性损伤之后引起的,主要以凝血机制发生障碍、肝性脑病以及其它肝功能发生衰竭为临床表现的临床综合征[1]。
通常ALF 的临床预后不良,死亡率极高,做好早期诊治能够有效改善病患的预后效果。
2.急性肝功能衰竭的诊断急性肝功能衰竭主要是依靠临床诊断,多是以组织病理学来辅助检查[2]。
进行组织病理学辅助检查过程中,要注意病患凝血功能的降低,会导致肝穿刺的实施产生风险。
以中华医学会的引病学分会以及感染病学分会在2006 年编制的功能衰竭相关的诊疗指南为依据[3], 急性肝功能衰竭的主要的诊断标准如下:属于急性起病,在14d 之内发生II 度以及肝性脑病,(按照IV度分类法进行划分,而且有如下的临床表现:(1)极度乏力.而且显著厌食、恶心以及腹胀、呕吐等一系列的消化道症状。
(2)在短时间内黄疽快速加深。
(3)有出血现___________象显著,PTA<40%,排除其它的原因。
(4)肝脏出现发展性缩小[4]。
急性肝功能衰竭的典型病理主要表现为肝细胞发生一次性坏死,肝细胞坏死的面积缩小占肝实质的三分之二。
又或者是桥接坏死、亚大块出现坏死,并且存活的细胞伴有严重的变性,肝窦网状支架没有发生塌陷[5]。
非生物型人工肝治疗肝功能衰竭的研究进展作者:王琨李海红邱焕昀杨建波卜超颖纪薇谢凤杰来源:《中国现代医生》2021年第03期[摘要] 肝衰竭是临床常见的严重肝脏损害,病情凶险,死亡率极高。
内科药物治疗效果不佳,肝移植是有效的解决手段,但受供体短缺的限制,难以在临床上广泛应用。
目前,非人工生物型肝支持系统常作为肝衰竭治疗的一线手段,血浆置换、双重血浆分子吸附及血浆透析滤过为临床常用的三种非生物型人工肝治疗方法,这三种治疗方法均可在一定程度上改善肝脏功能,但均存在不足之处。
本文旨在对这三种方法治疗肝衰竭的疗效进行综述,以供临床参考和借鉴。
[关键词] 肝衰竭;非生物型人工肝;血浆置换;双重血浆分子吸附;血浆透析滤过;治疗[中图分类号] R575.3 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2021)03-0184-04Research progress of non-biologic artificial liver in the treatment of hepatic failureWANG Kun1 LI Haihong2 QIU Huanyun2 YANG Jianbo2 BU Chaoying2 JI Wei2 XIE Fengjie21.Mudanjiang Medical University, Mudanjiang 157000, China;2.Intensive Care Unit,Hongqi Hospital Affiliated to Mudanjiang Medical University, Mudanjiang 157000, China[Abstract] Hepatic failure is a common and serious liver damage in clinical practice with extremely dangerous conditions and a very high mortality rate. Liver transplantation is an effective solution to the poor therapeutic effects of internal medicines. However, limited by the shortage of donors, it could hardly be widely applied in clinical practice. At present, non-biological artificial liver support system is often used as the first-line means for treating hepatic failure. Plasmapheresis,double plasma molecular adsorption and plasma diafiltration are three commonly used methods for treatment of non-biological artificial liver, all of which can improve liver function to some extent,but all of them have some shortcomings. This paper aims to review the therapeutic effects of these three methods in treatment of hepatic failure to provide clinical reference.[Key words] Hepatic failure; Non-biologic artificial liver; Plasmapheresis; Double plasma molecular adsorption; Plasma diafiltration; Treatment肝衰竭是由多種因素所致的严重肝脏损害[1],为临床多发病和常见病,具有发病率高、病死率高、治愈率低等特点。
2022慢性肝病患者进展成慢加急肝衰竭前的分层管理(全文)慢加急性肝衰竭(ACLF )是一种综合征,指在患有慢性肝病的患者中肝功能急性恶化的一组临床症候群,与多器官衰竭和短期死亡的高风险有关。
欧洲肝脏研究协会(EASL)慢性肝衰竭(EASL-CLI F)联盟在一个主要由酒精性肝硬化患者组成的大型前瞻性队列的基础上提出了ACLF的诊断标准。
在我国HBV 感染是慢性肝炎、代偿性或失代偿性肝硬化和肝功能衰竭的主要原因。
多项研究表明,EASL-ACL F诊断标准和预后评分也适用于HBV相关慢性肝病住院患者。
在欧洲的一个前瞻性队列PREDlCT研究中,pre-ACLF患者被定义为肝硬化急性失代偿(AD )后90天内发生ACLF的患者,90天死亡率高(67% )。
在我们的回顾性乙肝相关队列研究中,AD患者在入院后28天内发生ACLF的患者全身炎症反应程度高,短期死亡率高,与ACLF患者无明显区别。
在西方队列中有10.8%~13.7%的AD患者28天内发生ACLF ,在我们的HBV相关AD患者中为13.3%o在以慢乙肝基础上急性肝损伤和肝硬化代偿期为研究人群的队列中,有8.7%~12.7%在住院期间发生ACLF o因此无论是慢乙肝患者还是其他病因的患者,无论有无肝硬化和是否既往失代偿,都有在28天内进展至ACLF的可能,且一旦进展至ACLF ,病死率明显升高。
这些在28天内进展至ACLF的患者短期病死率高,需早期识别以图及时救治、减少疾病进展;而28天内未发生ACLF的患者短期病死率极低,基层医疗机构住院救治即可、无需向上转诊。
然而,PREDICT研究虽提出并描述了Pre-ACLF的定义,并没有提供一个令人满意的模型来识别出pre-ACLF o因此我们通过以下两个研究,在HBV相关既往代偿的急性加重患者,及急性失代偿的肝硬化患者中,分别进行进一步分层,识别出28天内发生ACLF的低风险和高风险人群,为临床的慢性病管理提供分层管理思路。
・164・阳ts.CIinMedJ,2005.118:192—197.15ChistopherJ.Parsons,BIairU,Bradford,eta1.AntifibmticeffectsofatissueinhibiterofMetalloproteinase.1AntibodyonEstablishedLiverFibrosisofRats.Hepatology,2IJI)4,4l,z1106—1115.16GuidoM.DeFL。()livariN.eta1.EffectsofinterferonplusribavirintreatmentonNFkappaB、TGF-betalandmetalloproteinaseactivityinchmnichepatitisC.ModPathol,2I)I)6,19l1I)47—1054.17LebensztejnDM.Da而uszM,SDbanlec-LotowskaME。eta1.!;erumfibrosismarkersasDredictorsofanantifibroticeffectof
interferonalfainchildrenwithchronichepatitisB.EurJ
GastfoenterolHepatol,2I)I)5,17;843—848.
18Sc.ottI。.Friedman.MechanismsofHepaticFIbmgenesis.GaStroenterology,2(Jt)8,134:1655—1669.(收稿f1期;2I)IJ8一118一‘)1)(本文编辑:赖荣陶)
肝衰竭模型研究进展王华利杨永峰赵伟肝衰竭(HF)病因主要包括病毒、药物、血流动力学异常、代谢异常等【1。2】。研究合适HF的模型不仅可以更好的理解HF的病理生理学状态,还可为发展和改进HF的治疗措施提供条件。在过去30年中,已发展了多种动物模型,多为急性肝衰竭(FHF)模型,方法主要包括外科手术、药物和基因敲除。近年来,有学者用肝衰竭患者血浆培养HepG2,C3A,HHY41,猪肝.成人肝等细胞。观察其对细胞影响,方法多集中于对细胞生长和活力的影响,抑制细胞大分子生物合成,对肝细胞凋亡及肝细胞解毒作用的影响。一、动物模型(一)外科手术模型(SurgicalModels)外科手术模型是较早发展的FHF模型,包括肝全部或部分切除模型和肝血流阻断模型。通过切除全部肝脏或大部肝脏制造出FHF动物模型,均不可逆转,主要应用人工肝支持系统方面的研究[3“。早期动物模型是门腔静脉吻合术(PCA)加肝动脉结扎术(HAL)[5]。与肝切除模型一样,通过永久结扎肝动脉造成完全血流阻断模型也不可逆,因此学者们转而关注暂时性缺血模型,允许肝脏有恢复潜能【6]。(二)化学药物模型(ChemicalModels)n氨基半乳糖(Dgal)是一种选择性肝毒性药物。不同的物种对半乳糖胺的易感性不同,大鼠较敏感。而小鼠可抵抗其毒性至给药剂量大于19/kgc”。不论是大动物还是小动物模型均显示,给予半乳糖胺后引起的FHF是一可逆过程。对乙酰氨基酚主要在肝脏代谢,其主要缺点是可重复性较差,因动物种类不同,其肝毒性也不同;此外,对氨基乙酰酚还可引起肝外毒性,包括肾毒性、心脏毒性以及肺损伤等n‘1…。在七√k十年代,四氯化碳广泛用于制造肝损伤的动物模型,但发现其可重复性差,动物种属差异也较明显【l“。硫代乙酸胺(TAA)在大鼠和小鼠模型中应用广泛,但在作者单位:21(×,t'3东南大学附属南京市第二医院通信作者:赵伟。E-mail:zhaoweil95612@163.com其他动物中应用时个体差异较大。特别是家兔TAA模型在临床表现和组织学改变中都体现了较大差异。刀豆球蛋白A(ConA)是一种植物凝血素,用于诱导小鼠肝损伤【I“。而不累及其他器官。该模型的发病机制与自身免疫性肝炎和病毒性肝炎致肝损伤的机制相似,常用于上述疾病的研究。脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁的一种成分,单独使用l,PS常用于制备内毒素休克模型【l”“。制备HF模型时,常使用小剂量的I。PS和其他肝毒性药物合用,可引起明显肝损害,并使动物对LPS的敏感性提高近千倍,例如和胁gal、TNF-a等合用。(三)基因修饰模型最早用于FHF研究的基因模型是alb_uPA转基因模型【”】,在该裸鼠系中,白蛋白启动子(AlbuminPromoter)促进尿激酶型纤维蛋白溶解酶原(uPA)活
性,异位uPA过渡表达可引起肝细胞坏死,使小鼠死于肝衰竭。除非albIuPA转基因自发突变而失活。()、,erturf等[川用基因敲除的方法,将小鼠延胡索酰乙酰乙酸水解酶(FAH)基因敲除。制成FAH“一小鼠,该小鼠可做为I型遗传性高酪氮酸血症的基因模型,该模型可出现FHF。以上两种模型主要用于研究代谢性疾病的病理生理过程,肝细胞生长,肝细胞移植的可能性及其增生潜能。Schuchmann等【”3报道了一种白喉毒素(DT)受体为媒介的转基因鼠动物模型,自然条件下,鼠细胞不存在DT受体,因此对DT有抵抗力;而在DT受体转基因鼠,注射DT后可引起肝细胞损伤和FHF,该模型的主要优点是具有重复性。二、细胞模型正常培养液多采用DMEM、RPMl-1640等加小牛血清(FCS)或胎牛血清(FBs),与此相比,肝衰竭患者(LFP)或肝衰竭患者血清(1,Fs)对体外培养肝细胞生长有抑制作用¨…,因此用这种特定LFP或I。Fs培养肝细胞。构建HF细胞模型,对进一步研究HF的临床治疗有一定意义。(一)HepG2细胞模型H印G2细胞来源于一例15岁白
万方数据人肝癌组织。该细胞分泌多种血浆蛋白:清蛋白、a2一巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原、铁传递蛋白等。该细胞能大容量培养。乙型肝炎表面抗原阴性。分化程度较高,人类原代肝实质细胞分离后。只能经历有限的几次分裂,其内在的代谢酶很快失活¨…,因此常用HepG2替代肝细胞用于实验研究。很早就有学者发现LFS能抑制HepG2细胞生长,DNA合成也是减少的‘2…。(二)C3A细胞模型C3A细胞株是从肝纤维母细胞瘤细胞转化获得。分化程度高于HepG2细胞。并具有良好的肝细胞特异功能,如分泌白蛋白与甲胎蛋白,参与尿素合成与糖原合成等。陈煜等【2¨与国外研究结果不同的是从MTT结果及形态学上均观察到C3A细胞在慢性LFP中的增殖速度明显高于正常血浆组。反映生物转化功能的安定代谢量与国外研究结果一致,在慢性组明显低于NHP组。(三)HHY41细胞HHY41是经传代建立的永生化细胞株,Kono等[22]将人肝实质细胞培养于胶原中,在强化条件下培养获得。持续传代1年以上,仍与正常人肝细胞功能相同。Northern转印证实胞浆内存在人白蛋白mRNA,细胞核型与正常人肝细胞相同。体外培养时具有快速增殖能力,并能低温保存。McCloskey等[23]发现与NHP、FBs相比,用急性I,FP培养HHY41细胞16h后,细胞的氧化应激和毒性反应增强;细胞活性、DNA合成、蛋白合成及细胞色素P4501A(CYP4501A)活性都降低。(四)猪肝细胞猪肝细胞能合成多种蛋白、凝血物质等,但不能代替人自身功能,只能利用猪肝细胞的解毒功能。有研究提示,猪肝细胞分泌的促肝细胞生长类物质能对HF患者有一定的促肝细胞生长作用。另外,从细胞分离、培养生长的角度考虑,乳猪肝细胞明显优于成年猪肝细胞。但存在免疫反应和内源性反转录病毒感染的问题。程永波等乜们研究发现用I。FP体外培养的猪肝细胞。在培养第1d时即抑制。对体外培养猪肝细胞大分子合成也有抑制作用,AST和l。DH漏出比对照组显著升高。另外形态变化显示细胞膜有损害,细胞浆中出现大量空泡。(五)肝细胞株肝细胞是细胞模型中最理想的细胞材料,主要体现在细胞生物学功能相同。但来源匮乏,价格昂贵,细胞分离困难,活力难以长时间维持。Papadimitriou等[25]研究发现在解毒方面,肝细胞新鲜分离时比冷冻保存时能力强。Saich等[261发现LFP培养原代肝细胞时。可通过caspase3和caspase8等死亡受体途径诱导肝细胞凋亡。三,讨论细胞模型与动物模型相比具有价格低廉、易获取、重复性好、模型范围广泛,可采用不同I。FP,对其代谢、解毒、合成、生物转化功能进行研究。同时HF研究离不开动物实验,合适的动物模型是各种基础和治疗的性能评价及进一步临床应用的重要条件。细胞模型和动物模型互相补充,可从不同角度对HF进行研究。参考文献tChangAJ,DixitV,SaabS.Fulminan“epaticfailure.CurrTr∞t・165・()ptionsGastroenterol。2('()3,6:473—479.2KevinEJ.GunningHepaticfa订ure.Anaesthesia&intensivecaremedicine。20I)6.7:119—12(J.3NilsR。F巾hauf・KarlJ.eta1.Abioanificialliversupportsystemusingprimaryhepatocytes:apreclinicalstudyinanewporcinehepatectomymodel.Surgery,2lM}4,136:47—56.4NieuwoudtaM.KunnikebR,SmutscM,eta1.Standardizationcriteriafbranischemicsurgjcalmodelofacutehepalicfai】uf芑inpigs.Biomaterials,2I'‘16.27:3836・3845.5HanidMA.MackenzieRL。JennerRE。eta1.Intracranialpressureinpigswithsurgicallyinducedacuteliverfailure.GaStroenterology,1979,76:123—131.6BenoistS,SarkisR,BaudrimontM.eta1.AReversibIeModelofAcuteHepaticFailufebyTemporaryHepaticlschemiainthePig.JSurRes,2lJ()【).88:63.69.7I。eistM,GantnerF.KunstleG,eta1.The55-kDtumornecrosisfactorreceptorandC【为5irIdependentlysignalmurinehepatocyteapoptosisandsubsequentliverfailure.MolMed,1996。2:1{)9—124.8EguiaL。MatersonBJ.Acetaminophe小relatedacuterenalfa订urewithoutfulminantliverfailure.Pharmacotherapy,1997.17:363—370.9LubekBM,BasuPK,WellsPG.MetaboIicevidencefortheinvolvementofenzymaticbioactivationinthecataractogenicityofacetaminopheningeneticallysusceptibIe(C57BI。/6)andresistant(DBA/2)murinestrains.ToxicolApplPhamac01.1988。94:487-495.10BaudouinSV。HowdleP.()’GradyJG.eta1.Acutelunginjury