骨髓染色

骨髓细胞过氧化物酶染色标准操作程序1. 检验目的急性白血病类型鉴别；诊断遗传性过氧化物酶缺乏症。

2. 检测原理（包括结果计算）pereira 建立的碘化钾MPO染色法，安全、实用，其原理未明。

一般认为髓过氧化物酶分解H2O2，产生新生态氧，后者氧化KI析出碘，碘与W-G结合，生成颗粒状沉淀定位于细胞浆中。

3. 性能特征无。

4. 标本要求4.1 病人准备：了解病人是否对局麻药有过敏史。

凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病，穿刺部位有炎症或有畸形，晚期妊娠妇女作骨髓穿刺时要慎重。

4.2 标本类型：骨髓。

4.3标本容器：洁净载玻片。

4.4 标本存放:4.4.1未检测标本的存放：放于细胞室未检测标本架上。

4.4.2已检测标本的存放：骨髓存片柜，保存10年以上。

4.5 标本运输:室温条件下运输。

4.6 标本拒收标准：参照《采集手册》。

5.仪器和试剂5.1试剂名称：瑞吉氏染色液、过氧化物酶染色液。

5.2试剂成份：5.2.1 氧化瑞吉氏染色液：Wright 染色剂粉 1 gGiemsa 染色剂粉 0.5 g甘油 10 ml无水甲醇 500 ml加30% H202 50～100 ul，储存于棕色瓶，备用。

5.2.2过氧化物酶染色液：100 μl碘化钾溶液和1 ml磷酸盐缓冲液混和。

（1）磷酸盐缓冲液：0.067 mol/ L 磷酸盐，pH 5.8（2）碘化钾溶液：碘化钾 500 mg，蒸镏水50 ml，储存于棕色瓶，备用。

5.3 试剂来源：自配试剂。

6. 环境和安全此试剂为体外诊断用，存在一定的刺激性和毒性；不要入口，避免和眼睛，皮肤或衣服接触，一旦接触，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟，接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。

7. 检测前准备在玻片头端贴上标签编号。

8. 校准/定标无。

9. 质量控制无。

10. 标本检测10.1在干燥的骨髓涂片或外周血涂片体尾处用红蜡笔划两条平行线，防止染液溢出；在两条平行线间滴加氧化瑞吉氏染色液，并布满，立即滴加等量过氧化物酶染色液，染色1-2分钟；在显微镜下观察到阳性对照，即用过氧化物酶染色液冲洗；晾干，镜检。

骨髓细胞化学染色简易操作卡
中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）
工作液配制：取B液30μl,C液30μL混匀，静置2分钟，再加蒸馏水1ml，D液30μl,混匀。

染色步骤：1.干燥涂片，滴加A液固定剂（用前恢复室温，并充分摇匀）固定约30-60秒，蒸馏水冲洗，甩干；
2.滴加或浸入工作液15分钟，蒸馏水冲洗2-3分钟，甩干
3.E液(使用前务必摇匀！)复染1-2分钟，蒸馏水冲洗，干后镜检
酸性α-醋酸萘酚酯酶染色（ANAE）
工作液配制：于试管内加B液50μL，C液50μL混匀，静置1分钟，再加D液1.5ml，E 液50μl,混匀，（分为两份，其中一份作为NaF抑制试验加NaF液1滴）静置2分钟备用。

染色步骤：1.干燥涂片，直接滴加工作液做第二步或滴加A液（用前恢复室温，并充分摇匀）固定约30-60秒，蒸馏水冲洗，待干或滤纸吸干（涂片不固定直接做ANAE
染色，阳性反应强于固定者）；
2.滴加或浸入工作液布满涂片（37℃）孵育分钟，蒸馏水冲洗，待干或滤纸吸干。

3.F液复染1-2分钟，蒸馏水冲洗，干后镜检。

糖原染色(PAS)
滴染：1.干燥涂片，滴加A液（用前恢复室温，并充分摇匀），布满涂片固定约30~60秒，蒸馏水冲洗，待干或滤纸吸干。

2.滴加B液布满涂片作用5~10分钟，蒸馏水冲洗5分钟，待干或滤纸吸干。

3.滴加C液布满涂片作用10~15分钟，蒸馏水冲洗5分钟。

4.D液复染2~5分钟，干后镜检。

骨髓片染色方法一、前言骨髓片染色是一项重要的实验技术，用于检测血液病变和诊断疾病。

本文将介绍骨髓片染色方法的详细步骤和注意事项。

二、实验器材和试剂1. 骨髓样本2. 血液计数板3. 75%乙醇4. 碘化钾5. Wright-Giemsa染料6. 磷酸盐缓冲液（pH7.2）三、实验步骤1. 准备样本从患者或小鼠等动物的胫骨中采集约1ml的骨髓，将其分别注入两个含有抗凝剂的离心管中。

轻轻倒置离心管，使抗凝剂与样本充分混合。

然后，用血液计数板检测白细胞、红细胞和血小板的数量。

2. 制备干片取出一支离心管，将其中0.5ml的样本加入到试管中，并加入0.5ml 75%乙醇进行固定。

固定后，在试管中加入碘化钾溶液，静置10-15分钟。

然后，将样本离心5分钟，倒掉上清液，留下沉淀。

用吸管吸取沉淀，并滴在玻璃片上制成干片。

3. 染色将干片放入Wright-Giemsa染料中浸泡5-10分钟。

然后，用磷酸盐缓冲液洗涤干片3次，每次洗涤5分钟。

最后，在空气中晾干。

四、注意事项1. 采集骨髓样本时需注意卫生和安全，避免交叉污染。

2. 在制备干片时需要控制好乙醇和碘化钾的时间和浓度，以免影响样本质量。

3. 在染色过程中要避免过度染色和过度洗涤，否则会影响结果的准确性。

4. 染色后的干片应在阴凉干燥处保存，并避免阳光直射。

五、总结以上就是骨髓片染色方法的详细步骤和注意事项。

通过正确操作和控制实验条件，可以得到高质量的样本和准确的结果。

这项技术对于诊断血液疾病具有重要的意义，希望本文能够对读者有所帮助。

骨髓细胞病理学检查及诊断全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：骨髓细胞病理学检查及诊断是一种重要的临床检查方法，用于帮助医生诊断和治疗各种血液疾病。

骨髓细胞病理学检查主要是通过对骨髓细胞的形态、数量、组织形态学等方面进行分析和判断，从而明确病变的性质和病情的严重程度。

接下来，我们将详细介绍骨髓细胞病理学检查及诊断的方法和意义。

一、骨髓细胞病理学检查的方法1. 骨髓穿刺：骨髓穿刺是获取骨髓细胞最直接、最常用的方法。

医生在骨骼中穿刺抽取骨髓液和组织，然后通过显微镜观察细胞形态学变化。

2. 骨髓涂片染色：骨髓涂片染色是将骨髓细胞涂在载玻片上，然后用不同染色剂染色，如Wright染色、Giemsa染色等。

通过观察染色后的细胞形态，可以分析出异常细胞的数量和性质。

3. 流式细胞术（FCM）：流式细胞术是一种通过激光散射和荧光标记技术，对细胞表面抗原进行定量和定性分析的方法。

通过流式细胞仪，可以准确地检测骨髓细胞中的各种蛋白质及其表达水平。

4. 分子生物学检测：利用PCR技术、融合基因检测等技术，对骨髓细胞的基因突变、融合基因进行检测，帮助医生对骨髓疾病进行诊断和治疗。

1. 辅助疾病诊断：通过骨髓细胞病理学检查，可以辅助医生对各种血液疾病进行诊断，如白血病、骨髓增生异常综合征、再生障碍性贫血等。

2. 判断疾病严重程度：通过对骨髓细胞病理学检查结果的分析，可以判断疾病的进展程度和严重程度，为医生制定治疗方案提供重要依据。

3. 指导治疗策略：根据骨髓细胞病理学检查结果，医生可以选择合适的治疗方法，如化疗、干细胞移植等，提高治疗效果。

4. 监测疾病疗效：在治疗过程中，通过不断监测骨髓细胞的病理学变化，可以及时评估治疗效果，调整治疗方案，提高治疗成功率。

5. 预测疾病预后：一些骨髓疾病具有较高的复发率和预后不良的特点，通过骨髓细胞病理学检查，可以帮助医生预测患者的预后，并采取相应的治疗措施。

1. 白血病：白血病是一种由于造血干细胞发生异常增生，导致血液恶性肿瘤的疾病。

骨髓特殊染色及酶组织化学染色检查骨髓特殊染色及酶组织化学染色检查是一种用于诊断血液疾病的特殊检查方法。

该检查可以通过染色技术直接观察血液细胞中特定的染色体、酶或其他化学物质，进而判断疾病的类型和程度。

下面我们将从步骤、原理及应用等多个方面进行细致的阐述。

一、步骤1.取样骨髓特殊染色及酶组织化学染色检查需要从患者的骨髓中取得样本。

通常采用穿刺取骨髓的方法，使用空心针将骨髓组织抽取出来。

2.制片将采集到的骨髓组织用特定的方法制成薄片，然后将制片玻片放入预处理液中，去除组织中的脂肪和血液。

3.固定用甲醛等化学物质将薄片固定在制片玻片上，以免组织失去结构。

4.染色根据不同的需求，使用不同的染色方法染色。

常用的染色方法有Gear （G）染色、Wright（W）染色、Giemsa（G）染色、PAS染色、酶组织化学染色等。

5.观察染色完成后，使用显微镜观察染色后的组织和细胞，看到目标物质的颜色或形态变化，从而判断患者的疾病类型及程度。

二、原理骨髓特殊染色及酶组织化学染色检查的原理是通过染色技术观察不同的物质反应，从而帮助医生确定患者的诊断。

例如，由于白血病细胞存在着特殊的染色体核型，因此通过染色技术可以直接观察到这些染色体。

又如，用PAS染色技术可以看到细胞中的糖原，发现是否存在糖尿病等疾病。

这些染色方法可以同时应用于细胞形态与细胞化学特性的研究。

三、应用骨髓特殊染色及酶组织化学染色检查广泛用于对各种血液疾病的诊断，特别是在白血病、贫血、血小板疾病、骨髓增生异常综合症等疾病的确诊和辅助诊断中得到了广泛应用。

通过该检查方法的组织学检查，可以检查人体中蛋白质、酶液、糖原、脂肪等物质，并进一步辅助疾病的诊断和治疗。

而且，该检查方法具有操作简便、灵敏度高、结果准确等优势，可以为医生提供诊断血液疾病的重要实验依据，为患者提供更好的诊治服务。

总之，骨髓特殊染色及酶组织化学染色检查是一种具有较高研究价值和应用前景的检查方法。

骨髓细胞内外铁染色临床意义1. 引言大家好，今天咱们聊聊一个可能听起来有点专业，但其实挺有趣的主题——骨髓细胞内外的铁染色。

别看名字长，其实这东西跟我们的身体健康息息相关，简直就是“隐藏的宝藏”。

你有没有想过，骨髓里那些小小的细胞，怎么就能透露出你身体的秘密？接下来就让我们一起探讨一下它的临床意义。

2. 什么是骨髓铁染色？2.1 基础知识首先，得说说什么是骨髓铁染色。

简单来说，就是通过特殊的染色方法，观察骨髓中铁的含量。

铁，这个我们常说的“金属元素”，在血液的运输、氧气的供给上可是个“大功臣”。

没它可真不行！而骨髓是生产血细胞的地方，所以铁的状况直接影响到我们的健康。

2.2 临床检测在医院里，医生通常会根据病人的情况，要求做骨髓检查。

如果检查结果显示骨髓里铁的含量异常，医生就能迅速找到问题的根源。

这就像是破案，越早发现，越能对症下药，不然可就得花费一番周折。

3. 骨髓铁染色的临床意义3.1 贫血的“侦探”说到骨髓铁染色，咱们不得不提一个大热门话题——贫血。

贫血就像个“隐形人”，早期不太明显，但越到后面，越让人受不了。

通过铁染色，医生能很快判断出是缺铁性贫血，还是其他类型的贫血。

这可是为病人节省了不少时间和精力啊！3.2 白血病的“警报”再说说白血病，这可是个让人闻风丧胆的病。

骨髓铁染色可以帮助医生判断骨髓中是否存在异常细胞。

假如有不正常的铁沉积，可能就暗示着白血病的潜在风险。

及时发现问题，及时采取措施，就能把风险降到最低。

3.3 铁负荷过量的“监测”不仅仅是贫血和白血病，骨髓铁染色还能够监测铁负荷过量的问题。

你看，有的人身体里铁太多，反而成了“铁人”。

这种情况也不容小觑，长期下去可会引发其他疾病。

因此，医生通过这种检查，就能及时发现并进行干预。

4. 结论总的来说，骨髓细胞内外的铁染色，虽然听起来有些生涩，但它在临床上可真是个大帮手。

通过这项检查，医生可以迅速了解病人身体的铁状态，帮助诊断多种疾病。

骨髓涂片瑞氏染色步骤
骨髓涂片瑞氏染色步骤如下:
1. 采集骨髓涂片:通常使用新鲜骨髓或骨髓提取物制备涂片。

在采集过程中,需要使用一次性手套和消毒工具,确保不会对样本造成污染。

2. 处理骨髓涂片:将骨髓涂片放入含有酒精的消毒溶液中浸泡,以去除表面的细胞和血小板。

然后,将涂片放入含有单克隆抗体的溶液中浸泡,以识别不同的细胞类型和生物标记。

3. 标记细胞:使用标记抗体将骨髓涂片上的细胞类型进行分类。

常用的标记包括CD3、CD4、CD8、CD10、CD19、CD30、CD45、CD133、B220等。

在采集骨髓涂片之前,需要使用标记抗体进行预处理,以确保涂片上有足够的细胞类型。

4. 染色:将骨髓涂片与瑞氏染色液混合,并轻轻地涂抹在涂片上。

染色后,涂片会被染成红色或深红色,以显示不同的细胞类型。

常用的瑞氏染色液包括瑞氏试剂盒和瑞氏试剂管。

5. 分析细胞类型:将染色后的骨髓涂片放入显微镜下观察,以确定细胞类型。

可以使用光学显微镜或电子显微镜进行观察和分析。

骨髓涂片是一种常用的细胞学检测方法,可以用于诊断多种血液疾病和其他疾病。

通过使用瑞氏染色步骤,可以识别不同的细胞类型,帮助医生确定病情和制定治疗方案。

【实验原理】染色体是染色质的高度凝集状态，化学成分与染色质相同，都由DNA和组蛋白等成分组成。

在细胞分裂中期染色体的形态最清晰，最易于观察。

动物骨髓细胞是制作动物细胞染色体标本的理想材料。

骨髓细胞始终保持较强的分裂活性，且细胞数量较多，给动物活体内注射秋水仙素，可以抑制细胞分裂时的纺锤体形成，使处于增殖状态的骨髓细胞停止在中期。

从而收集到较多的中期分裂相，通过低渗处理，可使细胞膜胀破、染色体分散；固定液处理使染色体结构清晰。

为此，骨髓细胞制备染色体标本比利用其它组织可获得更多的分裂相。

同时该方法还具有简便易行，不需要特殊的设备和无菌操作等优点。

【实验用品】1．器具：显微镜、离心机、恒温水浴箱、天平、酒精灯、火柴、预冷载玻片、解剖盘、剪刀、镊子、吸管、10ml刻度离心管、试管架、5ml注射器、染色架、二甲苯、香柏油、擦镜纸。

2．材料：小白鼠。

3.试剂：0.01%的秋水仙素、0.075 mol/L KCl、 Carnoy固定液、10% Giemsa 染液。

【试剂配制】1．0.01%的秋水仙素：秋水仙素10mg，加灭菌生理盐水至100ml。

（抑制微管聚集，纺锥丝不能形成，使染色体停留于中期时像，具最典型形态）2．0.075 mol/L KCl：称取KCl 5.6 g , 加蒸馏水至1000ml。

3．Carnoy固定液：甲醇与冰醋酸按 3 ：1 容积比混合即可。

4．10% Giemsa染液：（1）贮存液：Giemsa粉末1 g、纯甘油66ml、甲醇66ml.称取Giemsa粉末1 g 置于研钵中，加少量甘油充分研磨，成无颗粒糊状。

再将全部甘油加入，置于560C温箱2小时，然后加入甲醇混匀，静止1天后过滤，保存于棕色瓶中，2周后即可使用。

（2）1/15 mol/L 磷酸盐缓冲液(pH6.8) ：A液（1/15 mol/LKH2PO4）：称取 KH2PO4? 9.08g，加蒸馏水至1000ml，混匀溶解即可。

骨髓细胞铁染色标准操作程序1.检验目的缺铁性贫血、铁粒幼红细胞贫血、难治性贫血伴环形铁粒幼细胞增多(RARS)的辅助诊断。

2.检测原理骨髓小粒中的含铁血黄素(细胞外铁)和幼红细胞内的铁粒(细胞内铁)在酸性环境下与亚铁氧化钾作用，生成亚铁氰化铁，即普鲁士蓝反应。

3.性能特征无。

4.标本要求（包括病人准备、容器、样本类型等）4.1 病人准备：了解病人是否对局麻药有过敏史。

凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病，穿刺部位有炎症或有畸形，晚期妊娠妇女作骨髓穿刺时要慎重。

4.2 标本类型：骨髓。

4.3标本容器：洁净载玻片。

4.4 标本存放:4.4.1未检测标本的存放：放于细胞室未检测标本架上。

4.4.2已检测标本的存放：骨髓存片柜，保存10年以上。

4.5 标本运输:室温条件下运输。

4.6 标本拒收标准：参照《采集手册》。

5.仪器和试剂5.1试剂名称：浓盐酸、20 g/L 亚铁氰化钾溶液、1 g/L 中性红液。

5.2 试剂来源：自配试剂。

5.3 试剂储存：20 g/L 亚铁氰化钾溶液保存于2～8℃，浓盐酸、中性红液保存于室温。

6.环境和安全浓盐酸与亚铁氰化钾溶液避免相互污染，应分别不同位置存放。

20 g/L 亚铁氰化钾溶液为剧毒液体，避免污染环境。

7.检测前准备在玻片头端贴上标签编号。

8.校准/定标无9.质量控制正常骨髓阳性对照。

10.标本检测10.1选取洁净干燥试管， 20 g/L 亚铁氧化钾液500ml加浓盐酸100ml，混匀，滴加到干净玻璃皿中。

选骨髓小粒丰富的髓片，倒扣在玻璃皿的混合液中，染色30分钟。

流水冲洗10分钟。

中性红复染1-2分钟。

水洗，晾干，镜检。

10.2结果判断10.2.1 细胞外铁：分五级标准：-：无颗粒所见1+：有少数颗粒或偶见铁小珠2+：有较多的铁颗粒和小珠3+：有很多的铁颗粒、小珠和少数小块状4+：有极多的铁颗粒、小珠并有很多的小块，密集成堆10.2.2细胞内铁：用油镜计数100个中、晚幼红细胞，记录胞浆中含有蓝色细小颗粒细胞（铁粒幼细胞）的百分率。

骨髓片染色操作方法
骨髓片染色是一种常用的检查方法，可以通过观察骨髓细胞的形态和数量来判断是否存在异常情况。

以下是骨髓片染色的操作方法：
1. 取少量骨髓涂片放在玻片上。

2. 用95%酒精脱水，脱水时间根据不同的染色方法会有所不同。

3. 按照不同的染色方法选择相应的染液。

常用的染色方法有透明质酸盐溶液-伊红（Wright）染色、格拉姆（Gram）染色、MPO（Myeloperoxidase）染色等。

4. 将染液滴在骨髓涂片上，进行染色，不同的染色方法有不同的染色时间，一般为5-20分钟。

5. 用蒸馏水洗净染液，洗至染色液没有颜色出现就可。

6. 用95%酒精脱水。

7. 再用绝对酒精加速脱水。

8. 最后用苯乙烯或其它透明质酸溶液将玻片覆盖片。

通过以上步骤，就能得到一张完整的骨髓片，可以用显微镜观察细胞形态和数量，以确定患者是否存在骨髓异常情况。

骨髓组织化学染色检查骨髓组织化学染色检查，听起来像是个高大上的科学名词，其实就是个让人捉摸不透但又相当重要的东西。

咱们的骨髓，别看它在骨头里静静待着，其实可是个大忙人，负责生产咱们体内的血细胞。

想象一下，一个小小的骨髓工厂，每天在忙碌地造血、造细胞，简直像个不知疲倦的“血液制造商”。

可是，咱们怎么知道它的工作情况呢？这就得靠组织化学染色检查了。

说到这个检查，首先得知道它可不是单纯的拿个显微镜瞧瞧就行。

它就像是给骨髓穿上一件色彩斑斓的衣服，咱们的科学家通过各种化学染料，把骨髓里的细胞染得五颜六色。

想象一下，像给小朋友画画一样，各种颜色混搭，这样一来，细胞的不同种类、不同状态都能一目了然。

真的是，妙不可言，太神奇了。

咱们常说，检查不痛不痒，反正也没啥大不了的。

但骨髓检查的过程还真是有点小紧张。

医生得从你的骨头里抽取一些骨髓，哎，这可不是个轻松的事。

想象一下，像是在骨头里打个小洞，抽出一小勺骨髓，虽然听起来有点可怕，但其实技术娴熟的医生来搞定，基本上没啥问题。

之后，把这小勺骨髓送到实验室，科学家们就开始了他们的“调色盘”工作。

实验室里，各种化学药剂就像调色师的颜料，咕噜咕噜地混合在一起。

通过这些染色，咱们的细胞被染得五彩斑斓，不同的细胞类型就像穿上了不同的制服，特别好认。

医生通过显微镜观察，细胞的形态、数量，甚至是否有异常情况，统统都能看得清清楚楚。

真是个小小的魔法，让复杂的生物学变得简单易懂。

检查结果出来之后，医生就能告诉你骨髓的健康状况。

如果一切正常，那就像是给了你一张“健康通行证”，可以高高兴兴地继续生活。

如果发现了什么问题，那就得引起重视了。

毕竟，身体是革命的本钱，咱们得好好爱护它。

你可能会想，骨髓检查是不是只有那些有疾病的人才需要呢？其实不然。

即使你感觉好好的，定期检查也是个不错的主意，毕竟早发现早治疗，咱们可不想让小病小痛变成大麻烦。

就像是赶紧打理一下花园，剪剪杂草，没准就能让花儿开得更艳丽。

骨髓涂片检查方法及报告内容（1）骨髓涂片制作、染色方法1）制片骨髓涂片制作方法与血片制作方法基本相同，但因有骨髓小粒和脂肪滴，有核细胞较多，因此较血液黏稠，推片略难于血片，推片时角度要小一些，速度要慢一些，避免骨髓片过厚。

2）染色临床常用的染色方法主要有：①瑞氏(Wright)染色②吉姆萨(Giemsa)染色③Marshall提出的标准化的Romanowsky染色④R-G(Romanowsky- Giemsa)染色⑤wittekind1987年介绍的R-G染色（2）骨髓片检查的程序及方法1）检查步骤[骨髓涂片检查]①低倍镜Ⅰ.观察取材、涂片、染色是否满意等。

Ⅱ.判断有核细胞增生程度低倍镜下选择细胞分布均匀部位观察骨髓片有核细胞增生情况，根据骨髓片中有核细胞的密度或有核细胞与成熟红细胞的比例来估计有核细胞的增生程度。

骨髓有核细胞增生程度通常分为五级，如表2-1。

表2-1骨髓有核细胞增生程度五级估计标准增生程度成熟红细胞：有核细胞有核细胞均数（高倍镜视常见病例野）增生极度活跃1：1＞100各种白血病增生明显活跃10：150-100各种白血病、增生性贫血增生活跃20：120-50正常骨髓象、某些贫血增生减低50：15-10造血功能低下增生极度减低200：1<5再生障碍性贫血Ⅲ.观察全片巨核细胞的数量巨核细胞数量变化较大，如将骨髓膜标准化为×，则参考值为7-35个。

Ⅳ.观察骨髓片边缘和尾部有无体积较大的或成堆的特殊病理细胞。

②油镜分类计数200或500个有核细胞（不包括分裂型细胞和破碎细胞）。

按各细胞的种类、发育阶段分别记录，并计算出百分比。

同时仔细观察各系、各阶段细胞的形态是否正常。

[血涂片检查]分类记数100-200个白细胞，计算各类白细胞的百分率，描述红细胞形态，血小板数量和分布情况。

如见到幼红细胞按分类100个白细胞中幼红细胞的数量来报告，并说明其阶段性。

（3）骨髓报告1）结果计算计算出各系和各阶段细胞占有核细胞总数的百分数；再算出各阶段粒细胞百分数的总和与各阶段幼红细胞百分数之总和，将前者除以后者即得出粒：红比值（G:E）。

1.仪器OLYMPUS 显微镜2.方法骨髓细胞学检查应抽取骨髓少量制成薄片。

采用骨髓小粒丰富、制片厚薄均匀的涂片，经瑞氏—姬姆萨混合染色后，于显微镜下检查细胞质和量的变化。

3.试剂3.1. 瑞氏染色液：瑞氏染粉18g，置洁净干操的研钵内，加甘油3.5ml，研磨片刻，使瑞氏染粉充分溶解，加甲醇50ml，继续研磨片刻后，收集上层染液；残余部分再加甲醇50ml研磨：再收集上层染液，重复几次后，用甲醇冲洗研钵，倒入同一瓶内，最后加甲醇至500ml。

开始几周应经常振摇染色液。

染色液存放的时间越长，染色效果也越佳。

此外，研磨时染粉内应先加甘油，以免染粉在研磨过程中结成块，更易溶解。

染粉未经研磨配成的染液不宜用作骨髓片染色。

3.2. 姬姆萨浓缩染液：将姬姆萨染粉3．8g放入纯甘油250ml中，置60℃水浴2小时，溶解后加60℃预热的甲醇250m1混匀，于室温、棕色瓶内保存，配后数天即可使用，可长期保存。

3.3. pH6．5磷酸盐缓冲液：磷酸二氢钾1．5g，磷酸氢二钠1．0g、加蒸馏水到5000ml。

最后纠正pH6．5。

3.4. 姬姆萨稀释液：取姬姆萨浓缩溶液50m1，加pH6．5磷酸盐缓冲液到500ml，混匀。

此液为姬姆萨应用液，可直接作涂片复染用。

作瑞氏稀释液时，取此液10一20mL加蒸馏水至100ml，混匀即可。

4.材料4.1. 消毒骨髓穿刺包：骨髓穿刺针（16号、14号）；10ml注射器（干燥）；7号针头；纱布；孔巾；橡皮手套；4.2. 2％碘酒、75％酒精、棉球；4.3. 5ml:0.1g盐酸利多卡因；4.4. 推片、载玻片。

5.操作 (以髂后上棘为例)5.1.骨髓抽取:5.1.1.病人侧卧，两腿向胸部弯曲，腰骶部向后突出，在髂后上棘处做上记。

5.1.2.在标记处用碘酒、酒精作螺旋状由内而外消毒，戴消毒手套将孔巾盖于已消毒的局部，孔巾孔口对准穿刺部位。

5.1.3.注射5ml:0.1g盐酸利多卡因麻醉局部皮肤、皮下组织并至骨膜，按摩注射处至药液扩散为止。

骨髓铁染色报告书写格式一、缺铁性贫血（IDA）骨髓片：1、取材、涂片、染色良好。

2、骨髓有核细胞增生活跃，粒系占35。

5％，红系占54.5%，粒红比值为1.54:1.3、红系增生明显活跃，以中晚幼红增生为主，晚幼红增生尤其明显,细胞体积小，胞浆蓝染，胞浆量少，边缘不整齐，成熟红细胞中心淡染区扩大,可见嗜多色性红细胞。

4、粒系增生活跃，各阶段比值形态无异常改变.5、淋巴系统正常，均为成熟淋巴.6、单核细胞正常。

7、其他非造血细胞未见.8、巨核细胞易见,血小板成群分布，形态正常。

9、未见血液寄生虫及其他异常细胞.血片：1、涂片、染色可，白细胞分布正常。

2、白细胞分类正常，成熟红细胞同骨髓样改变。

3、血小板易见,三五成群分布,形态正常。

4、未见血液寄生虫及其他异常细胞。

组化染色：铁染色：内铁（—)，外铁（—）网织红计数:正常结合骨髓象、血象、组化染色，提示为缺铁性贫血。

二、再生障碍性贫血(AA）骨髓片：1、取材、涂片、染色良好.2、骨髓有核细胞增生减低，粒系占26。

8％，红系占10%,粒红比值为2.68：1。

3、红系增生减低，幼稚红细胞形态无异常改变，成熟红细胞形态正常。

4、粒系增生减低，各阶段幼稚粒细胞形态正常。

5、淋巴系统比值相对升高,均为成熟淋巴。

6、单核细胞正常。

7、其他非造血细胞可见.8、巨核细胞未见，血小板分布减少，体积小.9、未见血液寄生虫及其他异常细胞。

血片：1、涂片、染色可，白细胞分布减少。

2、白细胞分类正常，成熟红细胞形态正常.3、血小板分布减少，呈散在单个分布。

4、未见血液寄生虫及其他异常细胞。

组化染色:铁染色：内铁升高，外铁正常网织红计数：减少结合骨髓象、血象、组化染色，提示为再生障碍性贫血。

三、急性髓细胞白血病部分成熟型(M2a型）骨髓片：1、取材、涂片、染色良好。

2、骨髓有核细胞增生极度活跃，粒系占60。

8%，红系占13。

2％,粒红比值为4.61:1。

3、粒系极度增生，比值明显增大，以原粒增生为主，原粒38.9%，NFC86.8%,白细胞大小均匀,可见大原粒或小原粒，核有畸形，胞浆少,可出现空泡及奥氏小体,核仁显著，核分裂易见.4、红系增生受抑制，比值减少，幼红细胞和成熟红细胞形态正常。

PAS（糖原）1.固定PAS髓片用甲醇固定10min(或糖原固定液5min)，水洗2.PASⅠ加血膜覆盖，置10min,水洗干燥3.加PASⅡ液（雪夫试剂）10ml于试管，玻片插入置37 ℃水浴箱暗处，30-45min后水洗（水下冲10min，干燥）4.复染：苏木素复染3min，水洗，干燥结果判读（-）胞质无红色（+/-）少量红色颗粒1-3个（+）少量红色颗粒4-10个（++）红色颗粒>10个（+++）暗红色粗大颗粒（++++）紫红色粗大颗粒附：原单：胞浆边缘或伪足呈颗粒状原粒：胞质内均匀弥散细小颗粒原淋：粗大颗粒（核周）阳性程度：粒<单<淋，M7 PAS最强。

（异常早幼粒，内浆弥散状，外浆细小颗粒）ＰＯＸ（过氧化物酶）：１.POXⅠ液铺满玻片１ｍｉｎ，小玻片１５滴，大玻片２０滴２.２滴H2Ｏ２＋５ｍｌH2O（蒸馏水），混匀后直接加于上步玻片上（１：１比例），混匀，５ｍｉｎ后水洗３.９５％乙醇脱色１０ｍｉｎ，水洗，干燥４.瑞氏染色３０ｍｉｎ，水洗，干燥结果判读：（-）无棕黑色颗粒（+/-）散在稀疏的小颗粒（+）颗粒较粗，局部分布（++）粗大较密集，占胞质１／２—２／３（+++）粗大，团块分布，布满胞质（++++）胞质内充满团块并覆盖胞核附：１.POX强阳性会呈黄色颗粒，＞２％为阳性２.＞＝３％髓系＜３％淋系老年人POX＜３％慎打急淋３.POX散在阳性单POX局部阳性粒CE：特异性酯酶１.固定用AKP固定液固定３０S，水洗，干燥２.Ａ液０.００１ｇＣＥ萘酚０.５ｍｌＮＮ－二甲酰胺混匀使溶解B液付品红２滴４％NａＮO２２滴９.５ｍｌＣＥ缓冲液A液与B液倾倒混匀８次３.玻片插入试管后放３７℃水浴１ｈ，放在流水下冲洗１０ｍｉｎ，待干４.复染苏木素复染１０ｍｉｎ，水洗，干燥附：CE缓冲液配制（PH7.6）Na2HPO4 87ml+KH2PO4 13ml 混匀结果判读（-）胞质无红色（+）淡红色（++）布满鲜红（+++）布满深红（+）>2% M1—M4（+）<=2% M5,ALLAE：非特异性酯酶１.固定玻片先用甲醛固定10min,水洗，干燥2. A0.005gAE 萘酚0.5ml丙酮（先加）0.5ml丙二酮（再加）B 取锥形瓶，加入PH7.0AE缓冲液20ml３.用吸管吸取A液慢慢滴加入B瓶内，边加边摇晃锥形瓶４.加入坚固兰0.02g充分混匀后再分为a,b两管。

试验一骨髓穿刺术、涂片制备及染色技术一、骨髓穿刺1.穿刺部位选择骨髓穿刺部位选择通常要从以下多个方面考虑：①骨髓腔中红髓要丰富，②穿刺部位应浅表、易定位，③应避开关键脏器。

故临床上成人最为理想穿刺部位是髂骨上棘（包含髂骨前、髂骨后上棘），还可穿刺胸骨、胫骨等，各穿刺部位特点为；（1）髂骨后上棘：此部位骨质薄，进针轻易，骨髓液丰富，被血液稀释可能性小，故髂后上棘为临床上最常见穿刺部位。

（2）髂骨前上棘：此部位骨质硬、骨髓腔小，故易造成穿刺失败，所以髂前上棘常见于翻身困难、需多部位穿刺等患者。

（3）胸骨：1929年德国人Arinkin首先在胸骨进行穿刺，建立了骨髓穿刺吸收术。

即使胸骨是人体骨髓造血功效最旺盛部位，但胸骨后面相关键脏器，故临床上不常见。

当骨髓纤维化、骨髓增生低下、白血病等情况下，其它常规部位穿刺不成功时，可考虑胸骨穿刺，但必需由操作经验丰富医学工作者来做。

（4）其它部位：小于三岁小儿还可选择胫骨头内侧。

局部有症状者，可直接穿刺有症状部位（即定位穿刺），如局部压痛处、X线下可疑病灶等，定位穿刺临床上常见于骨髓转移癌、多发性骨髓瘤等。

2.穿刺步骤（1）选择体位：穿刺部位不一样其体位也有所不一样。

如髂骨后上棘采取侧卧位或俯卧位，髂骨前上棘和胸骨采取仰卧位。

（2）定位：髂骨前、髂后上棘部位较易定位，胸骨穿刺部位穿刺点第二、三肋间所对应胸骨，胫骨穿刺部位在膝关节下3 cm处。

穿刺位点确定后，用指甲按“十”字形，这么铺孔巾时能将穿刺部位暴露在中央，避免定位错误。

（3）常规消毒：用2%碘酒、75%酒精严格根据无菌操作要求消毒。

消毒后，打开消毒骨髓穿刺包，带上无菌手套，铺上孔巾。

（4）局部麻醉：用2%利多卡因，在皮内注射形成一小皮丘，然后垂直进针，在进针同时注射麻醉剂，直至骨膜。

拔除针筒后，局部按摩。

（5）进骨髓穿刺针：将穿刺针套上针心后，用两指将穿刺部位皮肤固定，将穿刺针垂直进针，直至骨皮质时阻力增加，再用力后阻力显著下降，此时即进入了骨髓腔。