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黄精多糖对神经细胞的毒性及抗缺氧性坏死和凋亡作用研究文珠;肖移生;唐宁;吴东风;张进;聂荣庆;胡国柱【期刊名称】《中药药理与临床》【年(卷),期】2006(022)002【摘要】目的:探讨黄精多糖对体外培养的神经细胞的毒性反应及抗缺氧性坏死和凋亡的保护作用.方法:采用Neurobasal 加 B27 Supplement体外无血清培养、缺氧复氧培养、免疫细胞化学染色、Trypan blue拒染法、Hoechst 33342荧光染色法以及Annexin V/PI双染流式细胞仪测定法观察对体外培养新生大鼠神经细胞的影响.结果:黄精多糖在6mg/ml以内对正常培养的神经细胞无明显毒性作用,在500μg/ml～1.5mg/ml范围内随着浓度增加抗缺氧复氧培养诱导的神经细胞坏死作用增大.黄精多糖在500μg/ml～1.5mg/ml范围内有抗缺氧复氧培养诱导的神经细胞凋亡作用,且随着浓度增加而增大.流式细胞仪测定显示500μg/ml～1.5mg/ml的黄精多糖有抗缺氧性神经细胞坏死作用,1mg/ml～1.5mg/ml范围内有抗缺氧性神经细胞凋亡作用.结论:黄精多糖有抗缺氧性神经细胞坏死和凋亡作用.【总页数】3页(P29-31)【作者】文珠;肖移生;唐宁;吴东风;张进;聂荣庆;胡国柱【作者单位】江西省医学科学研究所,南昌,330006;江西医学院,南昌,330006;深圳市西丽人民医院,深圳,518055;江西省中医医药研究院,南昌,330077;江西省中医医药研究院,南昌,330077;江西省中医医药研究院,南昌,330077;江西省中医医药研究院,南昌,330077【正文语种】中文【中图分类】R2【相关文献】1.党参皂苷L1抗缺氧缺糖再给氧诱导大鼠皮质神经细胞凋亡的作用 [J], 张壮;闫彦芳;韦颖;林海;崔巍;王硕仁;牛福玲;朱陵群2.黄精多糖对新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的影响 [J], 胡国柱;聂荣庆;肖移生;张进;文珠;吴东风3.中药抗缺氧性神经细胞凋亡保护作用的研究 [J], 李扣华;文珠4.党参总皂苷抗缺氧缺糖再给氧诱导大鼠皮质神经细胞凋亡的作用 [J], 张壮;闫彦芳;韦颖;林海;孙塑伦;王硕仁;牛福玲;朱陵群5.三七总皂苷抗缺氧缺糖再给氧诱导大鼠海马神经细胞凋亡的研究 [J], 朱陵群;范吉平;黄启福;孙塑伦;高颖;邹忆怀;张壮;何丽云;郑宏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
刘晓丹，肖瀛，周建金，等. 基于体外消化与发酵模型的多花黄精多糖对肠道菌群的影响[J]. 食品工业科技，2024，45（9）：115−123.doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023050261LIU Xiaodan, XIAO Ying, ZHOU Jianjin, et al. Effects of Polyonatum cyrtonema Hua. Polysaccharide on Intestinal Microorganisms Based on in Vitro -Simulated Digestion and Fermentation Model[J]. Science and Technology of Food Industry, 2024, 45(9): 115−123.(in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2023050261· 生物工程 ·基于体外消化与发酵模型的多花黄精多糖对肠道菌群的影响刘晓丹1,2，肖 瀛1,2, *，周建金2，高 雅3，王伊朋3，唐庆九4，俞 苓3（1.上海城建职业学院食品与旅游学院，上海 201415；2.三明市农业科学研究院，福建省（山区）作物遗传改良与创新利用重点实验室，福建三明 365051；3.上海应用技术大学香料香精化妆品学部，上海 201418；4.上海市农业科学院食用菌研究所，上海 201403）摘 要：本研究采用模拟消化模型结合体外粪便菌群厌氧发酵模型，通过16S rDNA 基因高通量测序分析肠道菌群结构，并通过GC-MS 法测定短链脂肪酸含量的变化，从而探究多花黄精多糖（Polyonatum cyrtonema Hua.Polysaccharide ，PCP ）的益生元活性。
结果显示：PCP 经体外口腔、胃、小肠模拟消化，其未发生明显的变化。
中国组织工程研究 第17卷 第33期 2013–08–13出版Chinese Journal of Tissue Engineering Research August 13, 2013 Vol.17, No.33doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2013.33.015 []刘先宁，朱秀萍，吴洁，王莉芳，银勇. 干燥脱水保存鸵鸟脱细胞角膜基质载体材料的细胞毒性[J].中国组织工程研究，2013，17(33): 5995-6000.ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH 5995www.CRTER .org刘先宁，女，1965年生，陕西省蓝田县人，汉族，2005年西安交通大学医学检验专业毕业，研究员，主要从事角膜干细胞及组织工程角膜的基础研究工作。
Lxn65@中图分类号:R318 文献标识码:B 文章编号:2095-4344 (2013)33-05995-06收稿日期：2013-01-03 修回日期：2013-01-23 (20120330027/W ·C)Liu Xian-ning, Researcher, Shaanxi Institute ofOphthalmology, Xi’an 710002, Shaanxi Province, China Lxn65@Supported by: Innovation Co-ordinator Project of Shaanxi Province, No. 2012KTCQ03-11*Received: 2013-01-03 Accepted: 2013-01-23干燥脱水保存鸵鸟脱细胞角膜基质载体材料的细胞毒性*刘先宁1，朱秀萍1，吴 洁1，王莉芳2，银 勇1 (1陕西省眼科研究所，陕西省西安市 710002；2陕西省食品药品检验所，陕西省西安市 710002)文章亮点：1 鸵鸟眼睛视锐度及视觉分辨率高，前期实验研究证实成年鸵鸟角膜中央厚度、总屈光力、角膜基质结构等解剖结构，光学特性与人眼组织基本相同。
［J］.内蒙古中医药，2014，33（1）：31-32.［15］ 龚年金，梁欢.越婢加术汤加减治疗急性加重期慢性阻塞性肺疾病临床研究［J］.中医学报，2017，32（9）：1609-1612.［16］ 何春凝.麻杏石甘汤加减治疗慢性阻塞性肺疾病急性发作（AECOPD）的疗效探讨［J］.世界最新医学信息文摘，2017，17（22）：82，85.［17］ 王建军.加味千金苇茎汤对急性加重期慢阻肺的临床价值［J］.光明中医，2016，31（23）：3453-3454.［18］ 罗丹.桂枝加厚朴杏子汤合玉屏风散联合西药治疗慢阻肺缓解期随机平行对照研究［J］.实用中医内科杂志，2013，27（8）：82-84.［19］ 倪烨，王丽新.加味小青龙汤治疗慢性阻塞性肺病急性发作机理探讨［J］.亚太传统医药，2016，12（19）：136-138.［20］ 赵婧彤.加味苓甘五味姜辛汤合肾气丸治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期（寒饮停肺，脾肾阳虚）的临床研究［D］.长春中医药大学，2010.［21］ 高振，李风森，徐丹，等.小青龙汤治疗慢性阻塞性肺疾病发作期临床疗效的Meta分析（2016年更新版）［J］.中华中医药杂志，2017，32（2）：721-730.［22］ 余白桦，张丹芳，陈瑞发，等.苓甘五味姜辛汤加味治疗慢性阻塞性肺疾病临床研究［J］.河南中医，2016，36（5）：768-770.［23］ 夏自银.加味麻辛附子汤对慢阻肺急性加重期（肺肾阳虚型）患者SAA、hsCRP及PCT干预的临床观察［D］.云南中医学院，2017.［24］ 马力群，王琦.王琦教授运用消癥通络法治疗慢性阻塞性肺疾病临证经验［J］.临床医药文献电子杂志，2016，3（59）：11896-11897.［25］ 柯诗文，朱伟，刘良徛.国医大师洪广祥教授温清并用治疗慢性阻塞性肺疾病浅析［J］.中华中医药杂志，2018，33（5）：1965-1967.［26］ 王燕青，王宁，胡海波，等.真武汤合麻杏甘石汤治疗慢性阻塞性肺疾病合并Ⅱ型呼吸衰竭的研究［J］.中国中医急症，2014，23（2）：256-257.［27］ 满国玉.真武汤合麻杏甘石汤治疗慢性阻塞性肺病合并Ⅱ型呼吸衰竭的研究［J］.中西医结合心血管病电子杂志，2018，6（12）：129，132.［28］ 罗红涛，漆成军.和解少阳法治疗慢阻肺的临床研究［J］.中国医学创新，2013，10（4）：141-142.［收稿日期］2019-10-30多糖又称多聚糖，是中药重要成分，也是中药的有效成分［1］，随着深入研究，已有300多种多糖被提取出来。
1**（1.长春中医药大学药学院…长春……130117；2.长、秋葵（花、种子、果实）中金丝桃苷、杨梅素、槲皮素的含量。
µm），流动相乙腈-0.4%磷酸溶液（28∶72），检测波长360nm，Inertsil®…ODS-3…（4.6mm×250mm，5μm），流动相乙腈-0.4%），检测波长360nm，流速1mL/min，柱温30℃，进样量10μL。
结0.019…7%；秋葵花中含有金丝桃苷0.131%、槲皮素0.001…5%。
0.000…25%、槲皮素0.000…51%。
而秋葵果实重现性好，优化了《中国药典》中黄蜀葵花的含量测定方法，…葵Abelmoschus esculentu（L.）Moench均为锦葵科秋葵属一年生或多年生草本植物，黄蜀葵花具有清利湿热、消肿解毒的作用［1］。
而黄蜀葵种子具有清热解毒、凉血消肿的功效，可用于淋证、水肿、便秘、乳汁不通、痈肿、跌打损伤的治疗，为“催生及利小便之要药”［2］。
国外研究种子油有多种医疗保健作用，但国内对其开发利用报道较少［3］。
秋葵是一种保健蔬菜，其中含有丰富的蛋白质、不饱和脂肪酸、游离氨基酸、矿物质、维生素、生物碱等多种生物活性成分［4-5］。
具有抗疲劳、健胃保肝、能减少肺损伤、提高机体免疫力、抗癌作用、利尿、增强血管扩张力、保护心脏等保健功能［6］。
据报道黄蜀葵和秋葵中主要含有黄酮类成分，且部分成分尚未建立适宜的质量评价方法。
本实验对黄蜀葵花、种子，秋葵花、种子、果实中金丝桃苷、杨梅素、槲皮素的含量测定方法进行了研究，为黄蜀葵、秋葵的质量控制标准研究提供了理论依据。
1…材料1.1…仪器…岛津LC-2030高效液相色谱仪（岛津企业管理中国有限公司）；FA1004B十万分之一电子天平（上海佑科仪器仪表有限公司）；JA2603B 万分之一天平（上海天美天平仪器有限公司）；KQ-500E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。
第3期（总第523期）2021年3月农产品加工Farm Products ProcessingNo.3Mar.文章编号：1671-9646（2021）03a-0064-02秋葵籽代咖啡产品的研究张军，郭嘉萌，乔舒敏（青岛农业大学海都学院食品系，山东莱阳265200）摘要：以黄秋葵种子为主要原料，添加一定原辅料制得黄秋葵籽类咖啡，在此咖啡的基础上添加从莱阳梨渣中提取的膳食纤维，使该咖啡产品在具有普通咖啡的功能性之外，还具有美容瘦身、营养保健等功效。
关键词：黄秋葵籽；咖啡；功能性中图分类号：TS273文献标志码：A doi：10.16693/ki.1671-9646（X）.2021.03.018Study on Okra Seed Coffee Substitute ProductsZHANG Jun,GUO Jiameng,QIAO Shumin（Food Department，Haidu College，Qingdao Agricultural University，Laiyang，Shandong265200，China）Abstract：Okra seed was used as the main raw material to produce okra seed coffee with certain raw materials.On the basis of this coffee，dietary fiber extracted from Laiyang pear residue was added，so that the coffee product could not only have the functions of ordinary coffee，but also have the functions of beauty，slimming，nutrition and health care.Key words:okra seed；coffee；functional随着经济的飞速发展，人们的生活品质不断提升，饮品日益多样化。
茶叶学报 2023，64 （6）：26−36Acta Tea SinicaDOI：10.20045/ki.issn.2096-0220.2023.06.003引文格式：杨龙宇，李虎，许鹏飞，等. 夏秋季‘石佛翠’茶树鲜叶多糖提取、分离纯化与抗氧化活性研究［J］. 茶叶学报，2023，64（6）：26−36.夏秋季‘石佛翠’茶树鲜叶多糖提取、分离纯化与抗氧化活性研究杨龙宇1,2,3，李 虎1,2，许鹏飞1,2，吴 凯1,2，宋 娜1,2，范文慧1,2，许馨云1,2，费心瑶1,2，张明珠1,2*（1. 安庆师范大学生命科学学院，安徽 安庆 246133； 2. 皖西南生物多样性研究与生态保护安徽省重点实验室，安徽 安庆 246133； 3. 上海科技大学生命科学与技术学院，上海 201210）摘 要：【目的】探究优化‘石佛翠’茶树鲜叶多糖的提取工艺，并对获得的纯化多糖组分进行理化性质和体外抗氧化活性测定，为其在功能食品中的开发利用提供一定参考，并为夏秋茶资源多样化开发提供途径。
【方法】以石佛翠多糖（CSTP）提取率为评价指标，采用单因素实验结合响应面法探究水提法提取石佛翠多糖的最佳条件；通过琼脂糖凝胶CL-4B柱层析得到纯化多糖组分CSTP-1、CSTP-2，采用苯酚硫酸法与间羟基联苯法检测其糖含量，高效液相色谱（HPLC）法测定其分子量，并进行红外光谱扫描；以DPPH·、·OH、O2−·清除率为指标，探究2个纯化多糖组分的抗氧化活性。
【结果】响应面分析结果表明，CSTP最佳提取条件为：液料比23∶1（mL·g−1），提取温度71.6℃，提取时间4.2 h，提取率为1.31%。
HPLC结果表明，CSTP-1和CSTP-2是分子量分别为9.23×105 Da和4.56×104 Da的均质多糖；纯化后糖醛酸含量均有所提高，其中CSTP-1的中性糖含量明显提高。
中华中医药学刊DOI：10．13193/j．issn．1673-7717．2014．04．059黄秋葵黄酮抗小鼠运动性疲劳的作用及其机理研究徐天姿1，单雪峰1，孙炜2，胡斐媛1，陈蕾蕾1，王瑶瑶1，徐丽华1，李南奇1，王慧铭1（1．浙江中医药大学药学院，浙江杭州310053；2．浙江省中医药学会，浙江杭州310003）摘要：目的：研究黄秋葵黄酮抗小鼠运动性疲劳的作用及其机理。
方法：清洁级ICＲ小鼠随机分为五组：分别给予低、中、高剂量黄秋葵黄酮75、150、300mg·kg－1·d－1和蒸馏水（空白对照组）、生晒参水提液200mg·kg－1·d－1（阳性对照组）连续灌胃21d。
测定小鼠负重游泳时间、血清尿素氮、肝糖原和血乳酸含量。
结果：黄秋葵黄酮能明显延长小鼠负重游泳时间（P＜0．05）、提高肝糖原含量（P＜0．05）、降低血清尿素氮和乳酸水平（P＜0．05），其效果与生晒参水提液相当（P＞0．05）。
结论：黄秋葵黄酮具有抗小鼠运动性疲劳的作用，其作用机理可能通过提高肝糖原含量、增加运动时的能源供给、减少蛋白质的分解和葡萄糖的无氧酵解、提高产能效率而发挥作用。
关键词：黄秋葵；黄酮；运动性疲劳；小鼠中图分类号：Ｒ285．5文献标志码：A文章编号：1673-7717（2014）04-0880-03Study on Anti－Fatigue Effect of Flavones from Okra in MiceXU Tianzi1，SHAN Xuefeng1，SUN Wei2，HU Feiyuan1，CHEN Leilei1，WANG Yaoyao1，XU Lihua1，LI Nanqi1，WANG Huiming1（1．College of Pharmaceutical Science，Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou310053，Zhejiang，China；2．Association of Traditional Chinese Medicine in Zhejiang，Hangzhou310003，Zhejiang，China）Abstract：Objective：To investigate the anti－fatigue effect of the flavones from Okra in mice so as to provide an ex-perimental basis for the development of anti－fatigue health beverages based on the material．Methods：40male mice were randomly divided into5groups including low－，middle－and high－dose groups（treated with the flavones from Okra at doses of75，150，300mg·kg－1·d－1）and control group（treated with distilled water）and positive control group（trea-ted with water extract of Dried Fresh Ginseng at dose of200mg·kg－1·d－1）．All the five groups were treated by gavage for continuously21days and tested for their weight－loaded swimming times as well as blood urea nitrogen，blood lactic acid and hepatic glycogen levels．Ｒesults：The groups treated with the flavones from Okra at doses of150，300mg·kg－1·d－1significantly prolonged the exhaustive swimming time of mice，decreased the contents of both blood urea nitrogen and blood lactic acid and increased the content of hepatic glycogen，and their effects were as good as that of Dried Fresh Gin-seng．Conclusion：The flavones from Okra could resist fatigue in mice in a dose－dependent manner．Key words：Okra；flavones；sports fatigue；mice收稿日期：2013－11－22基金项目：浙江省科技厅重大科技专项项目（2010C12013）作者简介：徐天姿（1992－），女，浙江临安人，本科生，研究方向：新食品资源与功能食品开发。
黄蜀葵花的研究进展高雷1,张平1,2,程钢2(1.安徽医科大学药学院,安徽合肥230032;2.安徽医科大学第一附属医院药剂科,安徽合肥230022)摘要:黄蜀葵花为锦葵科秋葵属植物黄蜀葵A bel m oschus m anihot(L.)M e d ic.的干燥花,民间应用历史悠久。
近年来研究表明黄蜀葵花的黄酮类成分具有广泛的药理活性,本文对黄蜀葵花化学成分、提取方法、含量测定及药理作用的研究现状作一综述,提出了今后的研究和发展方向。
关键词:黄蜀葵;研究进展Advances in studies on flower of Abelmoschus mani hot(L.)M edic.GAO L ei1,Z HANG P i ng1,2,C H E NG G ang2(1.School of P har m acy,A nhu iM e d ical University,H e f ei230032,China;2.Pharmacy D epart m ent,T he F irst A ff ili ated H osp it al of A nhu iM e d ical University,H e f ei230022,China)Abstrac t:F los A bel m oschus m ani hot has a long h i story of app licati on.R ecen t st udies sho w t hat flavono ids of A bel m oschus m anihot(L.) M e d ic.have a w i de range of phar m acolog i ca l ac tiv ity.T his artic l e is a rev ie w m a i n l y on chem ica l co m pos iti on,ex tracti ng m ethod,assay i ng and phar m aco l og ic acti on o f A bel moschus mani ho t(L.)M edic,and it ra i ses research and deve l op m ent directi on.K ey word s:A bel mo schus m aniho t(L.)M e d ic.;st udy advance黄蜀葵花最早记载于5嘉佑本草6,分布广泛、资源丰富, 5本草纲目6记载:其花气味甘、寒、滑、无毒,主治小便淋及催生,治诸恶疮脓水久不瘥者,作末敷之即愈,为疮家要药,消疽肿,浸油涂汤火伤等。
方便面调料对蚕豆根尖细胞的遗传毒性研究姓名：周敏同组者：白霞、闫媛媛、郭凯红、胡雅琦、孔丽娜（生物系生物科学102班学号2010131234 指导老师:郝雪峰）摘要运用蚕豆根尖细胞微核技术，以微核千分率和污染指数作为指标，研究豫竹方便面调料的水溶液对蚕豆根尖细胞的遗传毒性效应。
豫竹方便面调料水溶液对蚕豆根尖进行污染处理后，通过观察微核的形态，记录微核的数目，测定蚕豆根尖细胞的微核率，并且在实验中以未经污染处理的蚕豆根尖作为对照，来比较测定该方便面调料的毒性.该方便面调料的水溶液具有轻度伤害，利用蚕豆根尖微核技术对其污染效应进行监测和评价既简便又比较可靠。
Genotoxic effects of aqueous solution of V icia faba root tip cells using Vicia faba root tip cells with micronucleus, the micronucleus rate and the pollution index as an indicator of Henan bamboo instant noodles. On V icia faba, pollution treatment, Henan bamboo instant noodles solution to observe the form of micronuclei, the number of recorded micronuclei measured micronucleus rate of V icia faba root tip cells of V icia faba root tip and in the experiment without pollution treatment as a control, to compare the determination of the toxicity of the instant noodles. aqueous solution of the instant noodles with a mild injury, the use of micronucleus their pollution effects monitoring and evaluation of both simple and relatively reliable.关键词蚕豆微核实验豫竹方便面调料核变异引言微核（Nicronucleus，MCN）是真核生物细胞中的一种异常结构，它是由于细胞受到损伤后，由细胞分裂过程中丧失着丝粒的染色体断片或落后染色体产生的。
裙带菜多糖的结构及抗氧化、免疫调节活性游丽君;黄诗铭;郑桂青;赵振刚;韩锐;孟赫诚【摘要】采用水提醇沉法制备裙带菜多糖(UPP),提取率为11.00％±0.25％,UPP 由葡萄糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、岩藻糖、半乳糖、鼠李糖组成,分子质量为691.05 ku.体外抗氧化实验测得UPP的氧自由基吸收(ORAC)能力、ABTS自由基清除能力和DPPH自由基清除能力分别为164.54±4.85 μmol/g(以Trolox为标准品计)、64.93±4.76和46.80±6.06 μmol/g(后两者均以Trolox为阳性对照).选用RAW264.7细胞对UPP的体外免疫调节活性进行研究,发现UPP在50～1500 mg/L质量浓度范围内对该细胞无明显毒性,且可显著增强该细胞的吞噬能力,当UPP质量浓度为600mg/L时,相对细胞吞噬能力达113.22％±2.75％.当UPP质量浓度为600 mg/L时,促RAW264.7细胞释放NO量达12.60±1.01μmol/L;UPP在100～800 mg/L的质量浓度范围内可显著上调诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达量.以上研究结果表明,裙带菜多糖具有良好的体外抗氧化能力和免疫调节活性,可应用于保健食品的工业生产中.【期刊名称】《华南理工大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2018(046)011【总页数】10页(P29-38)【关键词】裙带菜;多糖;抗氧化活性;免疫调节活性;结构分析【作者】游丽君;黄诗铭;郑桂青;赵振刚;韩锐;孟赫诚【作者单位】华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州510640;食品营养与健康学科创新引智基地(111基地),广东广州510640;华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州510640;食品营养与健康学科创新引智基地(111基地),广东广州510640;华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州510640;食品营养与健康学科创新引智基地(111基地),广东广州510640;华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州510640;食品营养与健康学科创新引智基地(111基地),广东广州510640;华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州510640;食品营养与健康学科创新引智基地(111基地),广东广州510640;华南理工大学食品科学与工程学院,广东广州510640【正文语种】中文【中图分类】TS201.1裙带菜(Undaria pinnatifida)也被称为“裙带”或“海芥菜”，为褐藻门、褐子纲、海带目、翅藻科、裙带菜属的一种大型经济褐藻，生长于温暖海洋中，在我国主要分布于辽宁、浙江、山东等地.裙带菜中含有多糖、蛋白质、挥发油、甘油酯、不饱和脂肪酸、甾醇、类胡萝卜素、微量元素等多种化学成分[1- 2]，其中多糖在裙带菜中的含量尤为丰富.相关文献表明，裙带菜多糖(UPP)具有良好的生理活性，如抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗病毒活性等.Phull等[3]研究发现，当裙带菜多糖质量浓度为500 mg/L时，其DPPH自由基清除率达80%，羟基自由基清除率达71.92%，总抗氧化值为402.29 mg/g(以VC计算)；Wang等[4]的研究表明，裙带菜多糖能够调节磷脂酰肌醇-3激酶的PI3K/Akt和ERK信号通路，抑制NF-кB信号通路，从而抑制小鼠源Hca-F肝癌细胞的生长、迁移和入侵，并降低其粘附能力，而且，多糖的这种抗癌作用有明显的质量浓度和作用时间依赖性；Kim等[5]研究了来源于裙带菜孢子叶的一个低分子质量(5～30 ku)多糖组分的抗炎活性，结果表明该多糖组分可抑制MAPK信号通路和氧化应激作用，明显抑制IL-1β、IL-1和TNF-α细胞因子的表达.文中采用热水提取法制备裙带菜多糖，通过研究其基本化学组成、结构、抗氧化活性和免疫调节活性，初步探讨裙带菜多糖的免疫调节机制，为裙带菜的深加工和利用提供理论依据，为促进海洋生物活性资源产业的发展提供参考依据.1 实验1.1 材料与设备1.1.1 材料与试剂裙带菜购自山东省威海市；BCA蛋白浓度测定试剂盒购自江苏碧云天生物科技有限公司；半乳糖醛酸、福林-酚试剂、各单糖标准品、脂多糖(LPS)、荧光素钠、Trolox以及1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2，2-偶氮双脒基丙烷(ABAP)、2,2′-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)均购自美国Sigma公司；三氟乙酸、甘油、赤藓醇均为色谱纯，购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司；DMEM低糖培养基、胎牛血清(FBS)购自美国Gibco公司；总RNA提取试剂盒购自广州东盛公司；反转录试剂盒购自日本TaKaRa公司；STBR GREEN荧光定量酶购自美国Bio-Rad公司；其他化学试剂均为国产分析纯；各基因引物由生工生物工程(上海)股份有限公司设计并提供.1.1.2 仪器与设备FW135型中草药粉碎机，天津泰斯特仪器有限公司生产；DU730型核酸蛋白分析仪，美国贝克曼库尔特公司生产；Breeze高效凝胶渗透色谱仪，美国Waters公司生产；Vector 33型傅里叶红外变换光分光光度计，德国Bruker公司生产；FilterMax F5型酶标仪，美国美谷分子仪器公司生产；BCG401型生物安全柜，美国Baker公司生产；CKX41型倒置显微镜，日本奥林巴斯株式会社生产；311型CO2培养箱，美国Thermo公司生产；MiniOptionTM实时荧光定量PCR仪，美国Bio-Rad公司生产.1.2 实验方法1.2.1 裙带菜的预处理裙带菜按以下步骤进行预处理：1.2.2 裙带菜多糖的提取裙带菜多糖按以下步骤进行提取：多糖提取率按以下公式计算：多糖提取率=(m样×w)/m裙带菜干粉×100%(1)式中，m样、m裙带菜干粉分别为所得多糖样品和裙带菜藻粉的干重(mg)，w为所得多糖样品的总糖含量(质量分数，%，下同).1.2.3 裙带菜多糖的基本化学组成分析(1)裙带菜多糖的基本化学组成测定依据最新的国家标准[6]，采用直接干燥法测定UPP的水分含量；采用苯酚-硫酸法测定UPP样品中的总糖含量；采用BCA试剂盒，依据试剂盒方法说明测定UPP的蛋白质含量；采用Folin-Ciocalteu法[7]测定UPP的多酚含量；以半乳糖醛酸为标准品，采用咔唑比色法[8]测定UPP的总糖醛酸含量；以硫酸钾为标准品，采用硫酸钡比浊法[9]测定UPP的硫酸基含量.(2)多糖的紫外光谱分析将UPP配制成1 g/L的水溶液，采用核酸蛋白分析仪在200～400 nm波长范围内对其进行紫外光谱扫描分析.(3)多糖分子量测定利用高效凝胶色谱技术(HPGPC)测定UPP的分子量分布.将2 mg多糖样品溶于1mL 0.02 mol/L的磷酸二氢钾溶液中，过0.22 μm有机滤膜，上样体积20 μL，以0.02 mol/L的磷酸二氢钾溶液为流动相，采用Agilent G-5000 PWXL(7.8×300 mm i.d.,10 μm)和G-3000PWXL(7.8×300 mm i.d.,5 μm)串联凝胶柱，以0.6 mL/min的流速洗脱分离，采用Agilent 1260示差检测器检测.(4)单糖组成测定采用糖腈乙酸酯衍生物气相色谱法[10]对UPP的单糖组成进行测定.色谱柱：安捷伦HP-5MS(30 m×0.25 mm×0.25 μm)；升温程序：进样口温度250 ℃，初始柱温140 ℃，先以2 ℃/min的速率缓慢升至220 ℃并保持1 min，再以10 ℃/min的速率升至250 ℃并保持2 min；样品进样体积为1 μL，流动相为氦气，分流比为4∶1，流速为1 mL/min.1.2.4 裙带菜多糖的结构测定(1)红外光谱分析称取2 mg UPP样品，与KBr混合并充分研磨，压成薄片后采用傅里叶变换红外光谱仪在400～4 000 cm-1范围内进行扫描测试.(2)高碘酸氧化及Smith降解分析以NaIO4为标准品，参考Xu等[11]的方法对UPP进行高碘酸氧化分析；参考Li 等[12]的方法对UPP进行Smith降解分析：将高碘酸氧化后的剩余溶液装入3 000 u透析袋，在4 ℃冰箱中透析48 h，接着减压浓缩至8～10 mL，加入70 mg硼氢化钠并反应24 h，然后采用50%醋酸调节溶液pH值至7，再透析48 h，之后减压浓缩至干，残留物按照本段前述方法进行水解、衍生化和萃取处理，并在相同色谱条件下对样品进行气相色谱(GC)分析.1.2.5 裙带菜多糖的抗氧化活性测定(1)氧自由基吸收能力测定采用氧自由基吸收能力(ORAC)评价UPP的抗氧化能力，测定方法参考Zheng等[7]的报道.以Trolox为标准品计算样品的ORAC值，以μmol/g表示.(2)ABTS自由基清除能力测定裙带菜多糖的ABTS自由基清除能力测定参考Wang等[13]的方法.将1.5 mL UPP溶液和1.5 mL ABTS工作液混合并振荡混匀，于室温下避光反应30 min后测734 nm波长下的吸光值As，1.5 mL去离子水和1.5 mL ABTS工作液混合反应后测得的吸光值为Ac，以1.5 mL缓冲溶液+1.5 mL去离子水混合液调零，以良好抗氧化剂Trolox为阳性对照.ABTS自由基清除率的计算公式如下：ABTS自由基清除率=(Ac-As))/Ac×100%(2)(3)DPPH自由基清除能力测定裙带菜多糖DPPH自由基清除能力的测定参考Tohidi等[14]的方法.1.2.6 裙带菜多糖的免疫调节活性研究(1)裙带菜多糖对RAW264.7细胞的毒性实验参考Felice等[15]的方法并稍作修改，研究UPP对RAW264.7细胞的毒性.小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7细胞在5% CO2、37 ℃的培养箱中培养，选用美国Gibco公司的DMEM低糖(质量浓度<1 000 mg/L)培养基，加入10%的胎牛血清，并加入青霉素(100单位/mL)和链霉素(100 mg/L)，对细胞进行培养和传代.用胰酶消化并收集对数生长期的RAW264.7细胞，以1.5×105个/mL的密度铺96孔板，贴壁培养24 h后弃旧培养基，各孔分别加入100 μL溶有UPP(50～1 500 mg/L)或者LPS(150 μg/L)的培养基，继续培养24 h后弃培养基，用磷酸盐缓冲液(PBS)清洗2次并向每孔加入50 μL的亚甲基蓝溶液(Hank’s平衡盐溶液+1.25 %戊二醛+0.6%甲基蓝)，在37 ℃下孵育1 h，然后用PBS清洗3次，再向每孔加入100 μL细胞洗脱液(1%乙酸+49% PBS+50%乙醇)，振荡混匀后采用酶标仪测定各孔溶液在570 nm波长处的吸光值，并分析各孔的细胞活力.(2)RAW264.7细胞吞噬能力的测定参考Yu等[16]的方法并稍作修改，研究UPP对RAW264.7细胞吞噬能力的影响.收集对数生长期的RAW264.7细胞并以1.5×105个/mL的密度铺96孔板，贴壁培养24 h后，弃培养基并用PBS清洗2次，各孔分别加入100μL溶有UPP(50～800 mg/L)或LPS(150 μg/L)的DMEM培养基，继续培养24 h后弃培养基，用PBS清洗2次后，每孔各加入100 μL 0.075%的中性红溶液，于37 ℃下孵育3 h.吸弃上层中性红溶液，并用PBS清洗多次，每孔各加入100 μL细胞洗脱液，室温下摇床振荡30 min后测定各孔溶液在540 nm波长下的吸光值. (3)裙带菜多糖对RAW264.7巨噬细胞NO释放量的影响参考Ren等[17]的方法并稍作修改，研究UPP对RAW264.7巨噬细胞NO释放量的影响，具体操作如下.①NaNO2标准曲线测定——配制0.781 25～50 μmol/L的NaNO2标准溶液，按照Shen等[18]的方法测定并绘制标准曲线.②RAW264.7NO释放量的测定——采用Griess法，将RAW264.7细胞以1.5×105个/mL的密度铺96孔板(每孔100 μL)，贴壁培养24 h后弃培养基，用PBS清洗后加入溶有UPP(50～1 000 mg/L)的培养基，同时以150 μg/L的LPS 作为阳性对照；继续培养24 h后，取细胞上清液，按照与标准曲线制作相同的方法操作并测定吸光值，并依据NaNO2标准曲线计算NO浓度.(4)裙带菜多糖对RAW264.7细胞iNOS因子的mRNA表达量的影响参考Ren等[17]的方法，利用实时荧光定量PCR技术研究RAW246.7细胞的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)因子的mRNA表达情况.将目的基因引物加入适当稀释后的cDNA中，并与通用型SYBR Green预混液(iTaqTM Universal SYBR® Green Supermix)混合，以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GADPH)为内参，利用MiniOptionTM 实时荧光定量PCR仪对iNOSmRNA进行荧光定量，系统自动计算Cq值，并采用2-ΔΔCq值法[19]计算基因相对表达量.实验以正常细胞为正常对照，LPS组为阳性对照.所用小鼠源基因引物的碱基序列如表1所示.表1 RT-QPC实验基因引物的碱基序列Table 1 Primer sequences in RT-QPCR experiment基因引物碱基序列GADPH-Forward(F)5′-TTTGTCAAGCTCATTTCCTGGATATG-3′GADPH-Reverse(R)5′-TGGGATAGGGCCTCTCTTGC-3′iNOS-F5′-CGGCAAACATGACTTCAGGC-3′iNOS-R5′-GCACATCAAAGCGGCCATAG-3′1.2.7 数据分析数据结果以“平均值±标准偏差”的形式表示.采用SPSS Statistics 22软件进行单因素one-way ANOVA分析组间显著性差异.2 结果与讨论2.1 裙带菜多糖的基本化学组成2.1.1 多糖提取率及基本化学组成经计算得，实验中UPP 的提取率为11.00%±0.25%.经水提醇沉、Sevag法脱蛋白后所得UPP的总糖、蛋白质、糖醛酸、硫酸基等的含量和分子质量如表2所示. 表2 UPP的化学组成Table 2 Chemical composition of UPP名称含量/%单糖种类摩尔分数/%总糖50.02±1.14葡萄糖40.84糖醛酸14.98±0.52木糖30.55硫酸基11.19±0.40甘露糖8.19蛋白质2.37±0.17阿拉伯糖7.34水分4.65岩藻糖5.47多酚—半乳糖4.09分子质量/ku691.05鼠李糖3.52由表2可知，UPP除含有多糖类化合物以外，还含有一定量的非糖类成分.脱蛋白前，裙带菜多糖提取物中的蛋白质含量为5.76%±0.88%，经脱蛋白处理后的UPP 蛋白质含量降为2.37%±0.17%，该部分蛋白质可能以糖蛋白的形式存在，因此并未在脱蛋白过程中除尽.此外，UPP还含有较多的糖醛酸和硫酸基团，两者含量分别达14.98%±0.52%和11.19%±0.40%，其中硫酸基含量与张大雷等[20]的研究结果相接近.有较多研究表明硫酸基含量对多糖的生物活性有很大的影响.Nishino等[21]的早期研究结果便表明，硫酸基含量对从昆布中提取的岩藻聚糖硫酸酯的抗凝血活性有重要贡献.Xie等[22]经研究发现，青钱柳多糖经硫酸化修饰后，其体外抗氧化能力得到大大提高.裙带菜多糖中未检测出多酚，说明多酚类化合物已在原料脱色和提取后的醇沉过程中除尽.另外，除表2中所列成分外，UPP中可能还存在灰分等杂质，导致总糖含量过低，但本研究中未涉及此方面内容.UPP 的单糖组成的摩尔分数如表2所示，由表2可知UPP主要由葡萄糖和木糖组成(两者摩尔分数之和达71.39%).已有文献报道裙带菜多糖中岩藻糖通常含量较高，如Kim等[23]通过获得的裙带菜孢子叶多糖，测得其中的岩藻糖、半乳糖和甘露糖摩尔分数分别为50.9%、44.6%和4.2%.本研究所得裙带菜多糖中的葡萄糖和木糖含量最高，岩藻糖则含量较低(摩尔分数仅为5.47%)，这可能是由于原料产地、收获季节和提取工艺的差异所致，同时也说明文中所获得的是一种目前尚未见报道的裙带菜新多糖组分.2.1.2 裙带菜多糖的紫外光谱UPP的紫外光谱如图1所示.由图可知，UPP在260和280 nm波长处有明显的吸收峰，表明其含有一定的核酸和蛋白质，这与BCA试剂盒法测得的蛋白含量结果相一致.图1 UPP的紫外光谱Fig.1 UV spectrum of UPP2.2 裙带菜多糖的结构2.2.1 红外光谱分析UPP的傅里叶变换红外光谱如图2所示.3 000～3 500 cm-1处(UPP对应于3 337 cm-1)的主要吸收峰由O—H伸缩振动产生[24]；2 930和1 300 cm-1处有明显吸收峰，分别对应C—H的伸缩振动和C—H的弯曲振动[25]，以上3处均是多糖类物质的特征峰.1 417和1 609 cm-1处的吸收峰分别由C—O的伸缩振动和的非对称伸缩振动产生，两者共同表明UPP可能有羧基[26]，这与糖醛酸测定结果相吻合.1 259 cm-1处有较弱吸收峰，对应于—O—SO3—中的不对称伸缩振动，822 cm-1处的明显出峰则由C—O—S的不对称伸缩振动产生[27]，两者结合可知UPP中含有硫酸基，与化学组成测定结果相符.1 038 cm-1处的吸收峰对应C—C的伸缩振动[28].1 142 cm-1处的微弱吸收峰对应C—O—C的伸缩振动，是吡喃环的特征峰[12,29]；951 cm-1处的弱吸收峰为β-糖苷键的特征峰[29,30]，892 cm-1处出峰则对应β-端基C—H的变角振动，是β-吡喃糖的特征峰[31].图2 UPP的红外光谱Fig.2 IR spectrum of UPP2.2.2 糖苷键连接方式分析根据实验结果，结合高碘酸氧化的反应原理可计算得到UPP中1→或1→6位糖苷键的摩尔分数仅为1.86 %，1→2或1→4位糖苷键的摩尔分数则达62.36%，1→3位糖苷键的摩尔分数为35.78%.高碘酸氧化后的多糖样品经水解和衍生化处理后，采用气相色谱对其进行分析，得到的色谱图如图3所示.结果显示：在保留时间5.35 min/处有丙三醇检出，说明UPP糖链中含有1→2或1→6位糖苷键；在11.84 min/处有赤藓醇检出，说明UPP糖链中含有1→4位糖苷键；同时有岩藻糖、甘露糖等单糖检出，说明糖链中含有1→3位糖苷键.综合高碘酸氧化所得结果，可以确定UPP中主要含有1→2或1→4位糖苷键，同时含有较多1→3位糖苷键，而1→或1→6位糖苷键含量极少.图3 UPP的Smith降解产物的气相色谱Fig.3 Gas spectrum of Smith degradation product of UPP2.3 裙带菜多糖的抗氧化活性2.3.1 氧自由基吸收能力氧自由基吸收能力实验是一种快速、灵敏、便捷的体外抗氧化能力测定方法，广泛用于多酚[32- 33]、多肽[34- 35]、多糖[36- 37]等的抗氧化活性研究中.实验测得UPP的ORAC值为164.54±4.85 μmol/g，同条件下抗坏血酸ORAC值为62.79±1.46 μmol/μmol(VC).实验数据表明UPP的氧自由基吸收能力远弱于抗坏血酸，但UPP的分子量远大于抗坏血酸的分子量，若以浓度计算，则UPP与抗坏血酸的ORAC值之间的差距将大大减小(低于10倍).因此认为UPP具有一定的氧自由基吸收能力.2.3.2 ABTS自由基清除能力不同浓度(25～500 μmol/L)的Trolox和不同质量浓度(0.5～10.0 g/L)的UPP的ABTS自由基清除率如图4所示.可以看出，UPP在0.5～10.0 g/L质量浓度范围内的ABTS自由基清除能力呈剂量依赖性上升，Trolox则表现出很强的ABTS自由基清除能力，其浓度仅为300 μmol/L时清除率已接近90%.对于UPP，取具有良好质量浓度依赖性的至少3个点，根据ABTS清除率标准曲线计算UPP的平均Trolox当量，得到UPP的ABTS自由基清除能力为64.93±4.76 μmol/g.图4 Trolox和UPP的ABTS自由基清除率Fig.4 ABTS scavenging ability of Trolox and UPP2.3.3 DPPH自由基清除能力不同浓度(25～500 μmol/L)Trolox和不同质量浓度(0.5～10.0 g/L)UPP的DPPH 自由基清除能力见图5.UPP在0.5～10 g/L质量浓度范围内的DPPH自由基清除能力呈剂量依赖性上升，而Trolox具有相当强的DPPH自由基清除能力，其半数抑制浓度IC50<200 μmol/L.参考Chen等[38]的方法及2.3.2节的数据结果处理方法，以Trolox摩尔当量表示UPP的DPPH自由基清除能力，得到UPP的DPPH清除能力当量值为46.80±6.06 μmol/g.图5 Trolox和UPP的DPPH自由基清除率Fig.5 DPPH scavenging ability of Trolox and UPP综合ORAC、ABTS和DPPH 3种不同抗氧化实验结果，可知UPP具有一定的抗氧化能力.多数研究者认为，多糖的抗氧化活性取决于多糖的结构特性，例如硫酸化程度、硫酸盐基团在多糖主链的分布、分子量、单糖组成及立体结构等[39- 40].Rocha等[41]研究发现，墨角藻多糖具有很强的超氧阴离子自由基清除能力，并且多糖的抗氧化作用强弱与其硫酸基含量正相关.文中提取的UPP硫酸基含量为11.19%±0.40%，与文献[42]结果相比较低，这可能是导致UPP的抗氧化能力略低于前人报道的原因.2.4 裙带菜多糖的免疫调节活性2.4.1 裙带菜多糖对RAW264.7细胞生长的影响UPP和LPS(150 μg/L)对RAW264.7巨噬细胞生长的影响如图6所示.由图可知，LPS对该细胞有极显著的毒性作用(P<0.01)；在50～400 mg/L的质量浓度范围内，UPP有极显著的促RAW264.7细胞增殖作用(P<0.01)，而且UPP在试验范围内(50～1 500 mg/L)对RAW264.7细胞没有明显毒性(P>0.05).“*”和“**”分别表示与对照组之间存在显著性(P<0.05) 和极显著性(P<0.01)差异，图7、8、9同图6 UPP和LPS对RAW264.7细胞生长的影响Fig.6 Effects of UPP and LPS on cell viability of RAW264.7 cells2.4.2 裙带菜多糖对RAW264.7细胞吞噬作用的影响UPP及LPS(150 μg/L)对RAW264.7细胞吞噬作用的影响如图7所示.在50～600 mg/L的质量浓度范围内，UPP对RAW264.7细胞的吞噬能力均有不同程度的增强作用，该增强作用在UPP质量浓度为600 mg/L时达到最强，与对照组相比有极显著差异(P<0.01)；LPS对RAW264.7细胞的吞噬能力则没有增强作用. 图7 UPP和LPS对RAW264.7细胞吞噬能力的影响Fig.7 Effects of UPP and LPS on pinocytic capability of RAW264.7 cells2.4.3 裙带菜多糖对RAW264.7巨噬细胞NO释放量的影响UPP和LPS(150 μg/L)对RAW264.7细胞释放NO的影响的实验结果见图8.由图可知，阳性对照LPS能明显提高NO释放量.UPP在100～1 000 mg/L的质量浓度范围内能明显促进NO的释放，在质量浓度为600 mg/L时UPP的促NO释放效果最强，可达对照组的3.64倍，但其数值仍然明显低于阳性对照组，其原因可能是UPP的分子量达LPS的100倍，在相同质量浓度下，其(摩尔)浓度远小于LPS.如果将二者换算为相同的浓度单位再进行比较，UPP的促NO释放效果则是比较好的.此外，在50～600 mg/L的质量浓度范围内，UPP对NO释放的促进效果有较好的质量浓度依赖性.由图8还可以发现，当质量浓度≥800 mg/L时，UPP 对NO释放的促进效果反而开始明显下降.图8 UPP和LPS对RAW264.7细胞NO释放量的影响Fig.8 Effects of UPP and LPS on NO release of RAW264.7 cells2.4.4 裙带菜多糖对RAW264.7细胞iNOS mRNA表达量的影响UPP对RAW264.7细胞iNOS mRNA表达量的影响如图9所示.由图可知，UPP在100～800 mg/L的质量浓度范围内能显著上调iNOS因子的mRNA表达量(P<0.01)，这进一步证实裙带菜多糖具有显著的免疫调节活性.与2.4.3节类似，由于UPP的分子量达LPS的100倍，在相同质量浓度下，其(摩尔)浓度远小于LPS.若将二者换算为相同浓度单位再进行比较，可以发现UPP对iNOS因子的mRNA表达量上调作用是比较好的.NO是免疫应答系统中的多功能细胞介质，与许多传染性疾病、肿瘤、自身免疫性疾病的发病机理及控制密切相关，巨噬细胞释放的NO不仅具有直接杀死病原体、使病原体复制功能降低的作用，还能够抑制癌细胞生长甚至致死[43].机体内的NO 可以由3种不同的一氧化氮合酶催化合成，分别为神经型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导性一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS).其中iNOS能够在巨噬细胞受到刺激并被活化时发挥功效，催化合成NO，协助巨噬细胞在免疫系统中发挥作用.以上实验结果表明，适宜质量浓度的UPP不仅对RAW264.7细胞具有显著的促细胞增殖作用和吞噬能力增强作用，还具有显著的促NO释放作用及上调iNOS的mRNA表达量的作用，强有力地说明裙带菜多糖具有显著的免疫调节活性.图9 UPP和LPS对RAW264.7细胞iNOS mRNA表达量的影响Fig.9 Effects of UPP and LPS on the mRNA expression of iNOS inRAW264.7 cells3 结论采用水提醇沉法提取裙带菜中的活性多糖，并采用Sevag法脱蛋白后，裙带菜多糖中的蛋白质含量有效降低.该多糖的分子质量为691.05 ku，总糖含量为50.02%±1.14%，主要由葡萄糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖、岩藻糖、半乳糖和鼠李糖组成；UPP中主要含有1→2或1→4位糖苷键，同时含有较多的1→3位糖苷键，1→或1→6位糖苷键则含量极少.采用3种不同方法测定UPP的抗氧化能力，结果表明UPP具有良好的氧自由基吸收能力、ABTS自由基清除能力和DPPH自由基清除能力.采用RAW264.7细胞研究UPP的免疫调节活性，结果表明适宜质量浓度的UPP能明显促进RAW264.7细胞增殖，并对RAW264.7细胞的吞噬能力有增强作用；UPP在适宜质量浓度范围内具有促NO释放的作用，且能显著上调iNOS因子的mRNA表达量，增强机体的免疫调节活性.文中研究结果为裙带菜的深加工和裙带菜多糖的开发利用提供了理论依据和参考.裙带菜多糖对机体免疫调节作用的构效关系及其作用机理则有待于进一步探索.参考文献：【相关文献】[1] 张文竹,刘红兵,管华诗.裙带菜的化学成分及其生物活性研究进展 [J].海洋科学,2009,33(4):72- 75.ZHANG Wen-zhu,LIU Hong-bing,GUAN Hua-shi.Advances in the studies on the chemical constituents and biological activity of marine sea weed 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中英文缩略词对照表英文缩写英文全名中文译名DN Diabetes Nephropathy糖尿病肾病PBS Phosphate Buffered Saline磷酸盐缓冲溶液ROS Reactive Oxygen Species活性氧ECM Extra Cellular Matrix细胞外基质AMPK AMP-activated protein kinase腺苷酸活化蛋白激酶FC Flavonoids of Coreopsis tinctoria Nutt.两色金鸡菊黄酮纯化物ICAM-1intercellular adhesion molecules-1细胞间黏附分子1 MCP-1Monocyte Chemoattractant Protein-1人单核细胞趋化蛋白-1SREBP1sterol regulatory element-bindingprotein-1甾醇调节元件结合蛋白1ACC1Acetyl Coenzyme A Carboxylase1乙酰辅酶a羧化酶1 eNOS endothelial Nitric Oxide Synthase一氧化氮合酶NOX4Nicotinamide adenine dinucleotidephosphate oxidase4尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4SIRT3silent information regulator3沉默信息调节因子2相关酶3 FN Fibronectin纤维连接蛋白α-SMAα-Smooth Muscle Actinα-平滑肌肌动蛋白TGF-β1Transforming Growth Factor-β1转化生长因子-β1 Smad2Smad2Sma and Mad homologue丝/苏氨酸激酶受体p-MYPT1Myosin phosphatase target subunit1肌球蛋白磷酸酶靶标亚基1WB Western-blot蛋白质免疫印迹法目录摘要 (1)ABSTRACT (3)前言 (5)内容与方法 (8)1.两色金鸡菊黄酮纯化物对高糖软脂酸诱导HBZY-1细胞能量代谢紊8乱的调控作用研究……………………………………………………………………1.1实验材料 (8)1.2实验方法 (11)1.3实验结果 (16)1.4讨论 (23)2.马里苷通过AMPK通路抑制高糖软脂酸诱导大鼠肾小球系膜细胞氧化24应激及炎症损伤的作用机制……………………………………………………………………………2.1实验材料 (24)2.2实验方法 (27)2.3实验结果 (29)2.4讨论 (38)小结 (42)致谢 (43)参考文献 (44)综述 (51)攻读硕士学位期间发表的学位论文 (61)导师评阅表 (62)两色金鸡菊黄酮及主成分对高糖软脂酸诱导HBZY-1细胞能量代谢紊乱的调控作用研究研究生：阿米拉·阿不拉提导师：姚蓝副教授摘要目的：高糖软脂酸诱导大鼠肾小球系膜细胞（HBZY-1）细胞建立体外糖尿病肾病（DN）代谢紊乱细胞模型，探讨两色金鸡菊黄酮纯化物（Flavonoids of Coreopsis tinctoria Nutt,FC）及主成分马里苷对模型细胞能量代谢紊乱的保护作用及其机制研究。
