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云南元宝枫黄酮诱导个旧肺鳞癌细胞YTMLC凋亡的实验研究_李丽华

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石见穿诱导铁死亡抑制小鼠食管癌发生发展的研究

石见穿诱导铁死亡抑制小鼠食管癌发生发展的研究

石见穿诱导铁死亡抑制小鼠食管癌发生发展的研究林鑫荣;贾蕾;李丽峰;黄鸣;吴忠冰;李晶【期刊名称】《中国全科医学》【年(卷),期】2024(27)30【摘要】背景食管癌是一种在中国乃至全球范围内常见的消化道恶性肿瘤,具有很高的发病率和致死率。

石见穿(SJC)作为传统中药,其清热解毒、活血镇痛之功常用于食管癌的治疗中。

药理实验研究证明,SJC具有抗癌性,可有效治疗多种恶性肿瘤。

目的基于铁死亡探讨SJC抑制C57小鼠食管原位癌发生发展的作用和机制。

方法2022年2月—2023年2月选取SPF级C57BL/6雌鼠90只,随机分为对照组(Control组,n=15)、单纯4NQO诱癌组(4NQO组,n=25)、4-硝基喹啉N-氧化物(4NQO)+SJC低剂量组[4NQO/SJC(91 mg)组,n=25]和4NQO+SJC高剂量组[4NQO/SJC(182 mg)组,n=25]。

采用4NQO诱导的方式进行C57小鼠食管癌原位模型的制备。

观察小鼠活动情况,记录其精神状况和进食饮水情况,每隔8周分组测量小鼠体质量并进行记录。

32周后进行食管组织苏木素-伊红(HE)染色和病理学分析。

测定食管组织Fe^(2+)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量,采用蛋白质印迹法检测小鼠食管组织中核受体共激活因子4(NCOA4),谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白质的表达水平。

采用Kaplan-Meier法绘制小鼠的生存曲线,生存曲线的比较采用Breslow检验。

结果造模8、16、24、32周4NQO组、4NQO/SJC(91 mg)组、4NQO/SJC(182 mg)组小鼠体质量低于Control组,32周4NQO/SJC(91 mg)组、4NQO/SJC(182 mg)组小鼠体质量高于4NQO组(P<0.05)。

Breslow检验结果显示,4组小鼠生存曲线比较,差异有统计学意义(χ^(2)=9.907,P=0.019)。

三氧化二砷诱导肿瘤细胞凋亡

三氧化二砷诱导肿瘤细胞凋亡
砷 及 其 化 合 物 是 一种 剧 毒 物 质 ，但 砷 剂作 为药 物 治 疗 恶性 肿 瘤 已 有 百年 历 史 ，在 我 国用 于 治疗 慢 ７ ０ 、Ｑ Ｙ 一７ ０ 、Ｑ Ｙ一７ ０ ４２ Ｇ ７１ Ｇ ７ ３和 Ｈ Ｐ ２细 胞 株 、 ｅＣ
小 鼠 ７１ ９ ９细 胞 株 和 小 鼠 肝 癌 移 植 瘤 组 织 中 均 可 观
亡 效 应谱 ．
性 Ｄ Ａ内 切 酶 的激 活 ， 自己结 束 其 生命 的过 程 ， Ｎ
属 于 生 理 性 的 细 胞 死 亡 而 不 是 坏 死 性 改 变 ，现 已 明
确 细 胞 凋亡 不 仅 是 由特 定 的 基 因 控 制 ，还 受 周 围刺 激 因 素 的诱 导 或 抑 制 ．细 胞 凋 亡 的诱 导 主 要 有 化 疗
胞死亡过低 的疾病 ，
２ 细 胞 凋 亡 的概 述
细胞凋亡概 念 是指在 一定 的生理 病理条 件 下 ，
遵 循 自身 的 程 序 ，通 过 启 动 内 部 机 制 ，主 要 是 内源
亡 效 应 ，现 已 证实 Ａ ２ 对 胃癌 、胰 腺 癌 细 胞 有 诱 ｓ０
导 凋亡 作 用 ， 对 多 发 性 骨 髓 瘤 （ ＭＭ） 系 、食 管 癌和 神 经 母 细 胞 瘤 也 有 抵 制 生 长 和 诱 导 凋 亡 效 应 【 ．Ａ ２ 具 有 一个 相 对 较 广 的 诱 导 肿 瘤 细 胞 凋 ７ ＿ ｓ０
３ Ａ ２ ３ 导 肿 瘤 细 胞 的 凋 亡 Ｓ０ 诱 ３ １ 秦 叔 逵 … 一３等 报 告 ，在 体 内 外 用 低 、 中 剂 ． ｌ ＿
效抑制肺癌细胞株 Ａ ９ 的生 长 ，且 对 人 外 周 血 淋 巴 细 胞 影 响 较 小 ，并 证 实 这 种 作 用 主 要 是 诱 发 肺 癌 的

肾元颗粒通过线粒体介导平滑肌细胞凋亡对糖尿病肾病模型小鼠血管钙化的改善作用

肾元颗粒通过线粒体介导平滑肌细胞凋亡对糖尿病肾病模型小鼠血管钙化的改善作用

中华中医药杂志(原中国医药学报)2021年5月第36卷第5期CJTCMP，May 2021，Vol.36, No.5•2641 ••优博专栏•肾元颗粒通过线粒体介导平滑肌细胞凋亡对糖尿病肾病模型小鼠血管钙化的改善作用邓丹芳\孙龙\林腊梅、金善善12•'郑毅2,王岚王小琴123f1湖北中医药大学，武汉430061; 2湖北省中医院，武汉430074; 5湖北省中医药研究院，武汉430061 >摘要：目的：探讨肾元颗粒通过线粒体介导平滑肌细胞凋亡对糖尿病肾病小鼠血管钙化的影响3方法：将 40只SPF级dh/db小鼠随机分为模型组和肾元颗粒高、中、低剂量组，每组10只，10只同系背景野生型（W T)小鼠作为对照组。

模型组、肾元颗粒各剂f t组予以高磷饲料（含磷丨.2%),对照组？以普通饲料，肾元颗粒高、中、低剂f l组分别予以6.0, 3.0、1.5g. kg—1"(T1肾元颗粒灌胃，对照组、模型组予以等体积的0.9%氣化钠溶液灌胃，干预12周后，检测血清钙（Ca )、磷（P )、血肌酐（CREA )、尿素氮（UREA )。

Vnn Kossa染色观察小鼠胸主动脉病理形态变化以及钙盐沉枳情况，透射电镜观察胸主动脉血管平滑肌细胞线粒体结构形态，K T-PC R法检测各组小鼠胸主动脉B淋巴细胞瘤-2 (B(_l-2)、丨5淋巴细胞瘤-2关联X蛋(4 (B a x)、a-平滑肌蛋H( a-S M A)、成骨细胞特异性转录因子（O s te rix) m RNA表达水平，W estern b l o t、免疫组化法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(C a s p a s e)-3、（:aspasp-9,细胞色素C(C y卜C)蛋白表达水平，ELISA法检测胸主动脉匀浆上B d-2, Bax蛋A表达含量：结果：透射电镜显示模型组平滑肌细胞呈合成型，线粒体结构肿胀，空泡变.线粒体基质熔解，嵴消失，而肾元颗粒各剂量组平滑肌细胞呈半合成型或收缩型，线粒体结构呈不同程度改善，肿胀减轻，嵴存在，膜较完整V tm K ossa染色显示模型组血管壁可!Al明显钙盐沉积与对照组比较，模型组血P、C R E A、UREA水平升高显著，血Ca水平显著下降，胸主动脉O sterixm R N A表达显著升高，cx-SM A m RN A表达显著下降，B r卜2表达显著下调，B ax, C a sp a se-3、Ca sp a se-9, Cyt-C表达显著上调（P<0.01 );与模型组比较，肾元颗粒各剂量组血P、C R E A、UREA7JC平显著下降（P<〇.〇l,户<0.05),血Ca7K平显著升高（P<〇.〇l)。

大黄素对人肺肿瘤细胞(H522)增殖与凋亡的效应及作用机制

大黄素对人肺肿瘤细胞(H522)增殖与凋亡的效应及作用机制
用不同浓度（０、５、２０、１００μｍｏｌ／Ｌ）的大黄素作 用 Ｈ５２２细胞 ４８ｈ，观察细胞的形态变化。收集细 胞，将细胞按照密度为 ４．０×１０５ 接种于 ９６孔板中， 于 ３７℃ ＣＯ２培养箱中培养 ２４ｈ，进行细胞爬片，１Ｘ ＰＢＳ清洗，用 ４％的多聚甲醛固定 １０ｍｉｎ后，避光条 件下，加入 Ｔｕｎｅｌ溶液于 ３７℃孵育 ６０ｍｉｎ，最后加 入 ＤＡＰＩ溶 液 封 片。荧 光 显 微 镜 下 观 察 细 胞 形 态 变化。 １．２．５ Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ实验
用不同浓度（０、５、２０、１００μｍｏｌ／Ｌ）的大黄素作 用 Ｈ５２２细胞 ２４ｈ、４８ｈ与 ７２ｈ。收集生长状态良 好的细胞，消化、清洗、离心，在 ９６孔板的每孔加入 ２．５×１０３浓度的细胞，于 ３７℃ ＣＯ２培养箱中培养。 每个孔中加入 １０μｌＣＣＫ－８溶液，在培养箱中孵育 ２ｈ，使用酶标仪测量 ４５０ｎｍ处的吸光度（ＯＤ），计 算比较不同浓度大黄素的细胞抑制率：抑制率 ＝［１ －ＯＤ大黄浓度组 ／ＯＤ空白对照组］×１００％。
采用 ＳＰＳＳ１３．０软件进行统计分析，实验数据 用均数 ±标准差（ｘ±ｓ）表示，采用单因素方差分析 （ＡＮＯＶＡ）方法对多组间实验数据进行分析比较，均 继以 ＬＳＤ进行两两比较。Ｐ＜０．０５为差异有统计 学意义。
２ 结 果
２．１ 大黄素对 Ｈ５２２细胞增殖的影响 ＣＣＫ８实验结果发现：不同浓度（５、２０、１００μｍｏｌ／
１．２．３ 流式细胞实验 用不同浓度（０、５、２０、１００μｍｏｌ／Ｌ）的大黄素作
用 Ｈ５２２细胞 ２４ｈ、４８ｈ与 ７２ｈ。收集生长状态良 好的细胞，弃去原培养基，消化、清洗、离心，制成细 胞悬液，经 ９５％乙醇固定过夜，清洗，加入适量 Ａｎ ｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ溶液与 ＰＩ染色液孵育 ２０ｍｉｎ左右， 轻轻混匀，转 移 至 上 样 管 中，通 过 流 式 细 胞 仪 检 测 细胞的凋亡与细胞周期的变化。 １．２．４ Ｔｕｎｅｌ免疫荧光实验

姜黄油诱导人肝癌细胞凋亡及其机制

姜黄油诱导人肝癌细胞凋亡及其机制

姜黄油诱导人肝癌细胞凋亡及其机制雷慧;谭佳妮;李绍平;李海涛;季晖【期刊名称】《中国药科大学学报》【年(卷),期】2013(44)3【摘要】探讨姜黄油的抗肝癌作用及其作用机制,采用二甲基噻唑蓝比色法(MTT)检测肝癌细胞的活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率以及线粒体膜电位的变化,Western blot方法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3、caspase-9以及细胞色素C的表达。

结果发现,姜黄油能时间依赖性地抑制肝癌细胞的生长,降低线粒体膜电位并诱导其凋亡;升高细胞内Bax与Bcl-2的比值;诱导细胞色素C从线粒体中的释放并激活caspase-9和caspase-3。

结果提示姜黄油可能通过线粒体途径诱导肝癌细胞的凋亡。

【总页数】4页(P263-266)【关键词】姜黄油;肝癌;凋亡【作者】雷慧;谭佳妮;李绍平;李海涛;季晖【作者单位】南京中医药大学药理学教研室;中国药科大学药理学教研室;澳门大学中华医药研究院【正文语种】中文【中图分类】R965【相关文献】1.人端粒酶逆转录酶干扰增强肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体诱导肝癌细胞凋亡的机制 [J], 张汝钢;房殿春;宁晓燕;王国安2.石蒜碱诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡机制研究 [J], 李吉业;张晶;于淼;刘斌;辛国松3.大黄素诱导人肝癌索拉菲尼耐药细胞凋亡的作用机制 [J], 俞清江;张浩;王清清4.瑞戈非尼联合哌立福辛诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的分子机制研究 [J], 陈雪健;王伟;周健;李宁;张浩鹏;徐力善5.花姜酮调控miR-490-3p/Bcl-w诱导肝癌细胞凋亡和抑制细胞迁移、侵袭的机制 [J], 曹斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

小白菊内酯对胃癌BGC823细胞凋亡表型的影响

小白菊内酯对胃癌BGC823细胞凋亡表型的影响

小白菊内酯对胃癌BGC823细胞凋亡表型的影响赵立杰;李岩【期刊名称】《现代肿瘤医学》【年(卷),期】2009(017)004【摘要】目的:探讨小白菊内酯对胃癌BGC823凋亡表型影响.方法:MTT法检测BGC823增殖能力的变化,同时在倒置显微镜下观察细胞形态;采用流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位的变化; ELISA法检测caspase-3活性;western blot法检测细胞Bcl-2表达.结果:Par以浓度和时间依赖方式抑制胃癌细胞增殖,镜下可见细胞凋亡形态学改变 .经Par 处理后,随着Par浓度增加,细胞线粒体膜电位逐渐下降,经100μmol/L Par处理6h后,细胞caspase-3活性增加, 24h后下降, 至48h仍保持在高水平,western blot法检测到细胞Bcl-2表达下调.结论: Par通过下调Bcl-2和上调caspase-3活性来诱导细胞凋亡.【总页数】4页(P621-624)【作者】赵立杰;李岩【作者单位】中国医科大学附属盛京医院消化内科,辽宁,沈阳,110004;中国医科大学附属盛京医院消化内科,辽宁,沈阳,110004【正文语种】中文【中图分类】R730.53;R735.2【相关文献】1.天南星醇提取液诱导人胃癌BGC823细胞凋亡的实验研究* [J], 汤建华;张鹤鸣;董运成;杨仲红2.下调CDH17基因表达对顺铂耐药的人胃癌BGC823细胞凋亡与增殖的影响 [J], 刘蒙;韩峥;朱庆曦;谭洁;田霞3.5-FU增强TRAIL诱导的胃癌BGC823细胞凋亡的实验研究 [J], 徐玲;曲秀娟;刘云鹏;刘静;于萍;石晶;侯科佐4.紫杉醇增强TRAIL诱导的胃癌BGC823细胞凋亡的机制 [J], 徐玲;曲秀娟;刘云鹏;刘静;金波;于萍;侯科佐5.DADS诱导人胃癌BGC823细胞凋亡及其与smac和survivin表达的关系 [J], 王丽鑫;师水生;何润源因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

水飞蓟宾诱导肺腺癌Anip973细胞凋亡的分子机制

水飞蓟宾诱导肺腺癌Anip973细胞凋亡的分子机制研究李文海1胡运生2周勇安1雷杰1苏凯1李小飞△（1第四军医大学唐都医院胸腔外科陕西西安710038；2第四军医大学唐都医院骨科陕西西安710038）摘要目的：探讨水飞蓟宾诱导肺腺癌Anip973细胞系细胞凋亡的分子机制。

方法：采用MTT 法、倒置显微镜和电子显微镜等形态学检测以及流式细胞仪(FCM)技术检测、DNA Ladder 分析、凋亡分子PARP 的表达检测细胞凋亡，同时进行凋亡相关蛋白Bax 、Bcl-2、caspase-3和caspase-9表达活性分析。

结果：(1)水飞蓟宾对人肺腺癌Anip973细胞系细胞的增殖有显著抑制作用；(2)水飞蓟宾作用Anip973细胞48h 后，随着浓度的增加，倒置显微镜下可见细胞数目减少，胞体变小、变圆，到高浓度时出现较多的死亡细胞；(3)扫描电镜观察发现，随着水飞蓟宾作用浓度的增加，Anip973细胞中出现增多的凋亡细胞，凋亡细胞表现出典型的超微结构特征；(4)流式细胞仪检测的结果发现，随着药物作用时间的延长，Anip973细胞的G1期细胞比例增多，S 期细胞明显减少，G2期细胞略有减少，并出现明显的凋亡峰。

（5）水飞蓟宾作用后的Anip973细胞出现明显的DNA Ladder 和PARP 降解增加等凋亡特征；（6）水飞蓟宾作用后，Anip973细胞中的凋亡相关蛋白Bax 表达增加、caspase-3和caspase-9酶活性增加，而Bcl-2表达降低。

结论：水飞蓟宾在体外有抑制人肺腺癌细胞Anip973的增殖作用，并通过激活线粒体依赖的caspase 凋亡通路，诱导其凋亡。

关键词：水飞蓟宾；肺癌细胞系Anip973；细胞凋亡；caspase 中图分类号：R734.2文献标识码：A 文章编号：1673-6273（2011）09-1670-05Molecular Mechanism of Sliybinin-induced Apoptosis of Lung CancerCell Anip973LI Wen-hai 1,HU Yun-Sheng 2,ZHOU Yong-An 1,LEI Jie 1,SU Kai 1,LI Xiao-fei △（1Department of Thoracic Surgery,Tangdu Hospital,Fourth Military Medical University,XI'an 710038,P.R.China;2Department of Orthopaedics Surgery,Tangdu Hospital,Fourth Military Medical University,XI'an 710038,P.R.China ）ABSTRACT Objective:To investigate the molecular mechanism of Sliybinin-induced apoptosis of Lung Cancer Cell Anip973.Methods:The cancer cell apoptosis was detected by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT)colorimetric assay,morphological observations with inverted microscope and electron microscope,flow cytometry,DNA ladder analysis,expression analysis of PARP as well as the ex-pression and activity analysis of some apoptosis-related proteins including Bax,Bcl-2,caspase-3and caspase-9.Results:(1)Sliybinin had significant inhibiting effect on the cellular proliferation of Anip973cells;(2)When treated by Sliybinin for 48hours,with the increasing of the concentrations,the number of Anip973cells decreased,the cell body became smaller and more circular under light microscope,and the number of dead cells escalated with an increased concentration of silymarin treatment.(3)More Anip973cells presented apopto-sis and these cells appeared typical ultrastructural features with the increasing of Sliybinin concentration;(4)The proportion of Anip973cells in G1phase increased,and the number of cells in S phase decreased significantly,which reduced slightly in G2phase and also pre-sented significant apoptotic peak with the prolongation of drug action;(5)The Anip973cells treated with Sliybinin presented distinct apoptotic features including DNA ladder,PARP degradation,etc;(6)In Anip973cells treated with Sliybinin,the expression of Bax and the enzyme activities of caspase-3and caspase-9increased,while the expression of Bcl-2decreased.Conclusions:Sliybinin can inhibit the proliferation of human lung adenocarcinoma cell line Anip973and induce its apoptosis by activating the mitochondria-dependent cas-pase cascade pathway.Key words:Sliybinin;Lung cancer cell Anip973;Apoptosis;Caspase Chinese Library Classification(CLC):R734.2Document code:A Article ID:1673-6273(2011)09-1670-05作者简介：李文海（1973-），男，博士，主治医师、讲师，主要研究方向：肺癌的发病机制。

中药材中黄酮类化合物的提取及药理作用研究进展


中草 药 中黄 酮 类成 分 多为 多 酚类 化 合 物 ， 因
基金项 目： 国家 自 然科学基金 资助项 目（ １６０５ 云南省 自 ２０２２ ）； 然科学基金资助项 目（２０Ｂ ０６ ） （０７ ００Ｚ 作者简 介 ： 颢 （９ ５ ）， ， 陈 １８ ． 男 云南 曲靖人 ， 硕士研究 生 ， 主要从事天然药物化学 等方 面的研究 。 导师简 介李 良（９ ５）， ， １６ 男 云南文 山人 ， 教授 ， 主要从 事天然药物化学方面的研究 。
２ １ 第 ４期 ０ １年
陈 颢等 ： 中药 材 中黄 酮 类 化 合 物 的 提 取 及 药理 作 用研 究进 展
・ ５ｌ・
其 结 构 中具 有 酚 羟 基 ， 可 用碱 性 水 或 碱 性 稀 醇 故
液来 提取 中草 药 中的黄 酮类 化 合 物 。黄 酮母 核 的
技术 ， 利用其频率在 ３０ Ｈ ～ ０ Ｈ 之间的电 ０ ｚ ３０ ｚ Ｍ Ｇ
１ １２ 碱性 水 、 性 稀醇浸 提 法 ．． 碱
调节 等药 理 作 用 ｊ 。本 文 综 述 了 黄酮 类 化 合 物
提取 方 法 、 理作 用 等方 面 的研 究进 展 ， 中药 材 药 为
中黄酮类化合物的更好研究提供参考。
收稿 ：０ １ ５２ ２ １－ ．５ ０ 接受 ：０ １ ６０ ２ １－ －２ ０
黄酮 类 化 合 物 是 一类 植 物 中分 布 很 广 而 且 重 要 的 多 酚 类 天 然 产 物 。 黄 酮 类 化 合 物 （ｎ － ａ ｖｎｉｓ 又称 生 物 类 黄 酮 化 合 物 、 酮 体 、 碱 素 ｏｏｄ） 黄 黄 和类 黄酮 ，是 色 原 酮 或 色 原 烷 的 衍 生 物 ， 要 存 主 在 于桦 木科 、 香科 、 科 、 形 科 、 楠 科 、 参 芸 樟 唇 石 玄 科、 豆科 、 苣 苔科 、 鹃科 和菊 科 等 高等 植 物 中 。 苦 杜 黄 酮 类 化 合 物 的基 本 骨架 为 具 有 １ 碳 原 子 组 ５个 ６

三氧化二砷诱导肿瘤细胞凋亡分子机制的研究进展


来 了一定的治愈希望 ， 因年 龄、 体及 费用等诸多 因素的 限 但 供 制 ， 难以普遍开展 。对大 多数患者来 说 ， 疗的主要 目的仍 仍 治 是减轻症状 、 延长生存期及改善 生存 质量。基础研究 已证
实 Ａ： ， ｓＯ 具有 调节机 体免疫功 能、 抗血管 生成 ， 促进 骨髓 瘤细 胞凋亡 。不依赖维 甲酸调节途径 而发挥作用 ， 诱导 Ｎ 细胞凋 Ｂ 亡， 不能与二巯基功能基团的蛋白结合诱导细胞凋亡 。有可 能 成为新的 ＭＭ有效治疗 手段。最早 应用 于临床的治疗 方法为
１ ６． ９
循 ， 三氧化 二砷 对多发性骨髓瘤 细胞 的 等． 健 ， 三氧化二砷对骨髓细胞周 期及其调 等．
影响 ［ ］ 中国癌症 杂志 ，００ １ （ ）４ ９ ５９ Ｊ． ２０ ， ６ ： — ０ ． ０ ９ 节蛋 白表达 的影响 ［ ］ 中华 血液学 杂 志 ，０ ３ ２ （ ） １３— Ｊ． ２ ０ ，４ ４ ：９
维普资讯
内
斟
２０ ０ ８年 ８月 第 ３卷
第 ４期
５３ ６
异有 统 计 学意 义 。
始应用于 ＭＭ的治疗 ， 研究表明 干扰素联合化疗较单纯 化疗
有效率 明显提 高。近期有较多报道应用 Ａ ２ ， ｓ０ 治疗 ＭＭ 取锝 ｓ０ 用量较大 （ ８～１ ｇｄ 。 目前未见 ２ｍ ／ ） 本 组存活 １ ， ５例 死亡 １ ９例。Ａ组部 分 了很好 的疗效但 Ａ ： ， 我们在化疗的基 础上加用小剂量 Ａ ： ， ４～６ｍ ／ ） ｓＯ （ ｇｄ 治疗
髓瘤 的随机对照研究 ［］ 华西医学 ， ０ ， （ ） ５ — ６ Ｊ． ２ ４ １ １ ：５ ５ ． ０ ９ ［ ］ 周宇红 ， ４ 蔡循 ， 黄晓瑁 ， 三氧化 二砷诱导骨髓瘤细胞 凋亡机制 等． 研究 ［ ］ 中华肿瘤 杂志，０ １２ （ ） １１ １ ３ Ｊ． ２０ ， ３ ： — ８ ． ３ ８ ［ ］ 黄 晓瑁， ５ 周宇红 ， 蔡 ［ ］ 陈玉 宝， ６ 傅卫军 ， 侯

一个新颖的人参皂苷元衍生物及其抗肿瘤活性

一个新颖的人参皂苷元衍生物及其抗肿瘤活性李瑞;陈晨;邹澄;赵庆;郭巍怡;黄丽;杜如男;杨为民【期刊名称】《昆明医科大学学报》【年(卷),期】2017(000)008【摘要】目的研究人参皂苷元衍生物及其抗肿瘤活性．方法通过Smith降解法水解人参皂苷Rg1和Rb1，采用硅胶柱层析分离和纯化水解得到的产物，通过NMR的数据分析鉴定产物的结构．结果分离得到20（S）-原人参三醇、20（S）-原人参二醇、1，-羟基双氧乙基原人参三醇（1），1，-羟基双氧乙基原人参二醇（2）．结论smith降解法能得到人参皂苷元衍生物，化合物（2）为新颖的人参皂苷元衍生物，其能抑制细胞周期分裂蛋白25B,具有抗肿瘤的活性.【总页数】5页(P6-10)【作者】李瑞;陈晨;邹澄;赵庆;郭巍怡;黄丽;杜如男;杨为民【作者单位】[1]昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室,云南昆明650500;[2]云南中医学院中药学院,云南昆明650500【正文语种】中文【中图分类】R927【相关文献】1.人参皂苷Rg3的脂肪酸衍生物的合成及其体外抗肿瘤活性 [J], 叶慧;张兵;蒋海伟;程文娟;邓泽元;胡蒋宁2.一个新颖的三七皂苷元衍生物及其抗肿瘤活性 [J], 李瑞;段文越;邹澄;赵庆;黄丽;周金娜;胡建林;杨为民3.一个新颖的人参皂苷元衍生物及其抗肿瘤活性 [J], 李瑞;陈晨;邹澄;赵庆;郭巍怡;黄丽;杜如男;杨为民4.一个新颖的人参皂苷元衍生物及其抗肿瘤活性（英文） [J], 李瑞;陈晨;邹澄;赵庆;郭巍怡;黄丽;杜如男;杨为民;5.一个新颖的三七皂苷元衍生物及其抗肿瘤活性 [J], 李瑞;段文越;邹澄;赵庆;黄丽;周金娜;胡建林;杨为民;;;;;;;;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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DOI :10.3971/j .issn .1000-8578.2010.04.004收稿日期:2008-12-04;修回日期:2009-05-21基金项目:云南省科技厅-昆明医学院联合专项基金资助项目(2007C 0024R )作者单位:1.650118昆明医学院第三附属医院云南省肿瘤医院肿瘤研究所;2.云南威达元宝枫产业开发有限公司通信作者:王熙才,E -mail :wa ng xc 2005323@ 作者简介:李丽华(1972-),女,硕士,副主任医师,主要从事肿瘤生物免疫治疗及抗肿瘤天然药物研究云南元宝枫黄酮诱导个旧肺鳞癌细胞Y TM LC 凋亡的实验研究李丽华1,王熙才1,邱宗海2,李　新1,刘　馨1,伍治平1,金从国1,李　勇1,左曙光1Flavone of Yunnan Purpleblow Maple Is a Potent Apoptosis Inducer in YTMLC CellsLI Li -hua 1,WA N G Xi -cai 1,QI U Zhong -hai 2,L I Xin 1,L IU Xin 1,W U Z hi -ping 1,JI N Co ng -guo 1,L I Yo ng 1,Z UO Shu -g uang 11.Y unnan T umor Research I nstitute ,T hird A f f i liated Hospital o f K unming Medical Univ ercity ,T umor Hospi tal of Y unnan Prov ince ,K unming 650018,China ;2.Y unnan Wei da F lavone o f Purple -blow Map le Industrial Limited Com panyCorresponding Author :WA N G X i -cai ,E -mail :w ang xc 2005323@A bstract :Objective T o evalua te the apo pto sis -inducing effect o f flavo ne (which was e xt racted fro m Yun -nan pur pleblow maple )on Y TM LC (Y unnan Gejiu Lung Squamo us Carcinoma Cells )cell line and rela ted altered ge ne ex pressio n change ,this study w ould pro vide ex pe rimental ba sis for the clinical use of lung cancer ther aphy .Methods M T T (M ethy t riazoly l te trazolium )assay w as used to evalua te the g row th inhibiting effects of the flavone o n Y T M L C cells .F lo w cy tome try T UN EL assay was a pplied to detect the apopto sis rate of YT M LC cells after incuba tion w ith the flavo ne .A po pto sis r elated gene ex pression of Y T M L C cells w as tested by rev erse t ranscriptive po ly me rase chain reactio n (RT -PC R ).Results T he flavo ne ex hibited a gr ow th inhibito ry effect on YT M LC cells ,with 50%inhibition co ncentration (I C 50)value (108.53±8.22)mg /L ,after incuba ted for 48h .F lo w cy to metry show ed that the flavo ne of Yun -nan pur pleblow maple induced bo th apoptosis and nec rosis .W hile upregula ting the ex pression of p 53、p 21、Bax and Caspa se -3,the flav one also dow nreg ulated the ex pression level of Bcl -2.Conclusion T he flavo ne o f Yunnan purpleblow maple can inhibit the g ro wth o f lung cancer cell (Y T M LC )in vitro ,and leads to apo pto sis and nec rosis of the tumo r ce lls .T he ex pre ssio n levels of apopto sis -rela ted ge nes we re altered ,w hich implie s its mechanism .Key words :F lav one ;Lung cancer ;Flow cy tome try ;A po pto sis ;RT -PCR摘　要:目的　研究云南元宝枫黄酮对个旧肺鳞癌细胞(YT M LC )凋亡诱导作用及相关基因表达的影响,为开发应用元宝枫黄酮提供实验依据。

方法　采用四甲基偶氮唑蓝(M T T )比色法检测元宝枫黄酮对Y T M LC 细胞的生长抑制作用,流式细胞术T U N EL 法检测元宝枫黄酮对YT M LC 细胞凋亡的影响,RT -PC R 检测元宝枫黄酮对Y T M LC 细胞p 53、p 21、bcl -2、bax 和caspase -3基因表达的影响。

结果　元宝枫黄酮作用Y T M L C 细胞48h 后,IC 50为(108.53±8.22)mg /L 。

流式细胞术显示元宝枫黄酮既可以诱导Y T M LC 细胞凋亡,也可以引起YT M LC 细胞坏死。

元宝枫黄酮对p 53、p 21、bax 和caspase -3的基因表达均有明显上调作用;对bcl -2基因表达有下调作用。

结论　云南元宝枫黄酮可以抑制个旧肺鳞癌细胞(Y T M L C )体外生长,引起肿瘤细胞坏死,诱导肿瘤细胞凋亡,其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制是通过上调p 53、p 21、bax 和caspase -3基因的表达,下调bcl -2基因表达。

关键词:元宝枫黄酮;肺癌;流式细胞术;凋亡;RT -PCR中图分类号:R 734.2 文献标识码:A 文章编号:1000-8578(2010)04-0382-050　引言黄酮类化合物(flavonoid )是一类含有苯吡并γ吡喃酮结构的衍生物,它是一个巨大的低分子多酚类化合物家族,包括黄酮(flavone )、异黄酮(isoflavone )、黄烷醇(flavanol )、黄烷酮(flavanones )、前花色素(proan -thocyanidins )、花色素(anthocyanidins )、黄酮醇(flavo -nol )等。

黄酮类化合物在植物中存在广泛,常见的槲皮素、儿茶素、芹菜黄素、橙皮素、金雀异黄素、蛇葡萄素等都属于黄酮类化合物。

研究发现,黄酮类药物是一种具有多种药理功能的药物,它的作用涵盖抗感染、抗过敏、抗菌、抗病毒、抗糖尿病、抗骨质疏松、抗血栓、抗致癌物质、肝脏保护、心血管保护等多个方面[1-9]。

近年来发现,黄酮类化合物可以通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤效应,其诱导肿瘤细胞凋亡的主要有机制为调控bcl-2基因家族、p53抑癌基因、细胞因子和端粒酶基因表达[10-13]。

元宝枫黄酮是从云南元宝枫的枫叶中提取的总黄酮,元宝枫易于人工栽种,其黄酮含量高,为开发应用提供了可靠的来源。

经M TT试验筛选后发现,其对个旧肺鳞癌细胞株(YTM LC)具有生长抑制和细胞毒性作用,其作用机制与诱导细胞凋亡有关。

因此,本实验选取个旧肺鳞癌细株(YTMLC)作为研究对象,研究云南元宝枫黄酮体外抑制肺鳞癌细胞效应及其可能的作用机制。

1　材料和方法1.1　材料1.1.1　药物　云南元宝枫黄酮,由云南威达元宝枫产业开发有限公司提供,用少量DM SO(Sigma公司)溶解配制成200g/L的母液,4℃保存。

实验前用RPMI-1640培养液稀释至所需浓度(DMSO终浓度<0.1%)。

1.1.2　细胞株及细胞培养　个旧肺鳞癌YTLMC 细胞株由本研究室保存,用含10%胎牛血清的PR-M I-1640培养液,37℃、5%CO2饱和湿度条件下培养,0.25%胰蛋白酶消化传代。

1.1.3　试剂　RPMI-1640培养液、胎牛血清购自GIBCO公司;噻唑蓝(M T T)购自Sigm a公司; T UNNEL试剂盒购自苏州生物基因技术有限公司;Trizo l购自Invitrogen公司;DEPC购自Am res-co公司;Taq聚合酶、DNA M arker购自TAKARA 公司;RT-PCR Sy stem购自Fermentas公司1.1.4　仪器　CO2培养箱购自Therm o公司For-m a seriesⅡ型;生物安全柜购自Thermo公司For-m a classⅡA2型;培养液过滤器:M illipo re X8200型;流式细胞仪购自BACKMAN CO ULTER公司EPICS XL4C IR型;倒置显微镜:Oly mpusCKX41型;酶标仪:Bio-Rad550型。

1.1.5　PCR引物　根据文献报道或从GenBank 获取cDNA全序列后,由Primer5软件设计,由上海生工生物科技有限公司合成。

内参GA PDH上游引物为5′-CGGAGTCAACGGA T TGG TCG-TA T-3′,下游引物为5′-AGCCT TCTCCA TGGTG-G TGAAGAC-3′;扩增片段长度为306bp;β-actin 上游引物为5′-TCATCACCAT TGGCAA TGAG-3′,下游引物为5′-CAC TG TGT TGGCG TACAG-GT-3′;扩增片段长度为154bp;p53上游引物为5′-CCCAGGTCCAGATGAAG-3′,下游引物为5′-CAGACGGAAACCG TAGC-3′;扩增片段长度为163bp;p21上游引物为5′-GCAGCGGAACAAG-GAG T-3′,下游引物为5′-GGAGAAACGGGAAC-CAG-3′;扩增片段长度为251bp;Bcl-2上游引物为5′-G TGGAGGAGCTC TTCAGGGA-3′,下游引物为5′-GG TGAGCACTCCCGCCACAAAGAT-3′;扩增片段长度为304bp;Bax上游引物为5′-A TG-GACGGG TCCGGGAGCAGCCC-3′,下游引物为5′-GGTGAGCAC TCCCGCCACAAAGA T-3′;扩增片段长度为546bp;Caspase-3上游引物为5′-GCTA TTG TGAGGCGGT TGT-3′,下游引物为5′-GG TGAGCAC TCCCGCCACAAAGA T-3′,扩增片段长度为148bp。