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车前子降尿酸作用机制研究进展作者：邓雨于思明陈瑞艳来源：《新医学》2022年第09期【摘要】随着社会进步，膳食结构多样化发展，导致人体体内血尿酸水平居高不下，使得高尿酸血症、痛风和代谢综合征等发病率逐年上升。
目前西医降尿酸疗效显著但存在一定不良反应，因此开发降尿酸的天然产物逐渐成为研究热点。
车前子作为利水渗湿类中药，是临床治疗高尿酸血症和痛风的常用中药之一，现代药理研究证实其主要化学成分通过抑制黄嘌呤氧化酶活性、抑制尿酸转运蛋白等机制降尿酸。
该文对车前子化学成分和其降尿酸作用研究作一综述。
【关键词】车前子;尿酸;高尿酸血症;作用机制;研究进展Research progress on the mechanism of Plantaginis semen in reducing uric acid Deng Yu， Yu Siming， Chen Ruiyan. Heilongjiang University of Chinese Medicine， Harbin 150040，ChinaCorresponding author， Chen Ruiyan， E-mail：****************【Abstract】 With social progress and diversified development of dietary structure， a high level of uric acid has been caused in human body， leading to an increase in the prevalence of hyperuricemia， gout and metabolic syndrome year by year. At present， the efficacy of western medicine in lowering uric acid is remarkable， but certain adverse reactions may be induced. Hence， the development of natural products of uric acid reduction has gradually become a research hotspot. As a clearing damp and promoting diuresis traditional Chinese medicine， Plantaginis semen is one of the commonly used Chinese medicines for the clinical treatment of hyperuricemia and gout. Modern pharmacological studies have confirmed the main chemical components can reduce uric acid level by inhibiting the activity of xanthine oxidase and suppressing uric acid transporter. In this article， the chemical components and uric acid-lowering effect of Plantaginis semen were reviewed.【Key words】 Plantaginis semen; Uric acid; Hyperuricemia; Mechanism; Research progress高尿酸血癥（HUA）是多种因素导致体内血尿酸合成增多和（或）排泄不足，血液中尿酸水平高于溶解极限的代谢性疾病，也是痛风、代谢综合征、慢性肾损伤和心血管疾病等的潜在危险因素[1-3]。
超快速液相色谱法同时测定车前子中京尼平苷酸和毛蕊花糖苷的含量关皎;朱鹤云;冯春;张颖;郝乘仪;冯波【摘要】建立超快速液相色谱法同时测定车前子中京尼平苷酸和毛蕊花糖替的含量,为车前子药材的质量控制提供参考.采用Shim-Pack XR-ODS柱(75 mm ×3.0 mm,2.2μm);流动相为0.1％甲酸水(A)-甲酵(B),梯度洗脱(0 ～11min,20％～65％B),平衡时间为3min;流速为0.4 mL/min;检测波长为254 nm;柱温为35℃.结果:京尼平苷酸和毛蕊花糖苷分别在16-160 μg,/mL(R =0.9996)、8-80μg/mL(R=0.9995)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=9)分别为99.0％和99.4％.结论:该方法结果准确、操作简便、具有良好的重现性和稳定性,可用于车前子药材的质量控制,同时为新兽药开发利用提供参考.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2016(052)011【总页数】3页(P104-106)【关键词】车前子;京尼平苷酸;毛蕊花糖苷;超快速液相色谱法【作者】关皎;朱鹤云;冯春;张颖;郝乘仪;冯波【作者单位】吉林医药学院药学院,吉林吉林132013;吉林医药学院药学院,吉林吉林132013;吉林医药学院药学院,吉林吉林132013;吉林医药学院药学院,吉林吉林132013;吉林医药学院药学院,吉林吉林132013;吉林医药学院药学院,吉林吉林132013【正文语种】中文【中图分类】R917车前子为车前科植物车前(L.Plantago asiatica)或平车前(Plantago depressa Willd).的干燥成熟种子。
性寒、味甘、归肾、膀胱、肝、肺经，具有利水通淋、渗湿止泻、清肝明目、清热化痰的功效[1]。
主要分布于江西、黑龙江、辽宁、河北等省。
车前子主要含有环烯醚萜类、苯乙醇苷类、黄酮类、多糖等化合物[2-3]。
车前子超微速溶饮片中京尼平苷酸与毛蕊花糖苷的含量测定作者：邱倬星熊学敏胡晓艳熊犇陈乐谢玲来源：《中国医药科学》2013年第05期[摘要] 目的建立一种同步测定车前子超微速溶饮片中京尼平苷酸与毛蕊花糖苷含量的高效液相色谱方法。
方法采用液相色谱法，色谱柱为Hypersil ODS2 C18柱（4.6 mm×250 mm，5μm），流速：1.0 mL/min，检测波长： 254 nm，柱温： 30℃。
结果京尼平苷酸与毛蕊花糖苷的线性范围分别为0.191～1.910μg （r2= 0.999 8）和0.2002～2.002μg（r2=0.999 9）；平均加样回收率分别为100.1%（RSD=0.57%，n=6）和99.8%（RSD=0.28%，n=6）。
结论本方法操作简便，测定结果准确，重复性好，可作为该产品质控的方法。
[关键词] 京尼平苷酸；毛蕊花糖苷；高效液相色谱法[中图分类号] R284 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）05-41-03车前子为车前科（Plantaginaceae）植物车前（Plantago asciatica L.）或平车前（Plantago depressa Willd.）的干燥成熟种子[1]，具有清热利尿、渗湿通淋、明目祛痰的功效还具有调节血脂和保护高脂血症大鼠血管内皮细胞损伤的功能[2]。
目前关于车前子中含量测定的报道多集中于多糖，车前子苷及桃叶珊瑚苷[3-4]，而京尼平苷酸与毛蕊花糖苷的含量的文献报道甚少[5]。
本实验在对车前子粉末研究的基础上，采用HPLC法，建立同步测定车前子超微速溶饮片中的京尼平苷酸与毛蕊花糖苷含量的研究，通过试验证明，由于药材的超微分化作用，其含量比对应的车前子药材含量要高。
本研究在制备单味中药超微速溶饮片工艺中，首次将超微粉碎技术、微波灭菌技术、真空包装等新技术同步运用到中药饮片的研究及加工领域，将中药饮片加工成微米级的颗粒饮片，使中药饮片从内在质量到外观包装都有了新的提高。
![一种车前子药材与其配方颗粒中四种成分的含量测定方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s1/m/b9d579ba690203d8ce2f0066f5335a8102d26637.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201611112346.6(22)申请日 2016.11.30(71)申请人 河北中医学院地址 050200 河北省石家庄市鹿泉经济开发区杏苑路3号(72)发明人 牛丽颖 田伟 甄亚钦 王鑫国 韩桂茹 (51)Int.Cl.G01N 30/02(2006.01)(54)发明名称一种车前子药材与其配方颗粒中四种成分的含量测定方法(57)摘要本发明涉及一种车前子药材与其配方颗粒中京尼平苷酸、咖啡酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的含量测定方法。
其特征：以乙腈为A相、0.5％乙酸为B相，经4次比例变换梯度洗脱，流速0.3mL/min；柱温30℃；检测波长：京尼平苷酸为239nm、咖啡酸为325nm、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷为330nm；同时测定了车前子药材与其配方颗粒中四成分的含量。
波峰保留时间京尼平苷酸约3分钟、咖啡酸约6.5分钟、毛蕊花糖苷约10.7分钟、异毛蕊花糖苷约12.5分钟，在15分钟内四种成分出峰完毕，且各波峰分离良好，分离度都在3以上。
方法简便、快捷，易于普及掌握。
权利要求书1页 说明书8页 附图4页CN 106645470 A 2017.05.10C N 106645470A1.一种车前子药材与其配方颗粒中京尼平苷酸、咖啡酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的含量测定方法，其特征在于：(1)色谱条件与系统适用性试验 以乙腈为A相、0.5％乙酸为B相，采用梯度洗脱方式，即0～1min，6％～15％A；1～13min，15％～20％A；13～13.5min，20％～6％A；13.5～20min，6％A；流速0.3mL/min；柱温30℃；检测波长：京尼平苷酸为239nm、咖啡酸为325nm、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷为330nm；理论板数按京尼平苷酸峰计算应不低于3000；(2)对照品溶液的制备 精密称取京尼平苷酸、咖啡酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷对照品适量，置棕色量瓶中，加甲醇制成质量浓度分别为0.2921，0.0034，0.0476，0.1027mg/mL 的混合对照品溶液；(3)供试品溶液的制备 取车前子药材细粉1.5g，精密称定；或车前子配方颗粒0.5g，研细，精密称定；分别置棕色具塞锥形瓶中，精密加入60％甲醇25ml，密塞，称定重量，药材细粉以功率250W，频率33kHz超声处理30分钟；配方颗粒以功率250W，频率33kHz超声处理10分钟；放冷，再称定重量，用60％甲醇补足各自减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，用0.45μm的微孔滤膜滤过，续滤液作为供试品溶液；(4)测定法 分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定京尼平苷酸、咖啡酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷的含量。
车前子中毛蕊花糖苷及异毛蕊花糖苷降低急性高尿酸血症小鼠血尿酸水平及其机制曾金祥;许兵兵;王娟;毕莹;王晓云;钟国跃;任刚;朱继孝;李敏【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2016(038)007【摘要】目的探讨车前子中毛蕊花糖苷与异毛蕊花糖苷对急性高尿酸血症小鼠血尿酸水平的影响及作用机理.方法口服氧嗪酸钾建立急性高尿酸血症模型,80只模型小鼠均分成模型组(生理盐水),低、中、高剂量毛蕊花糖苷(50、100、200mg/kg)组,低、中、高剂量异毛蕊花糖苷(50、100、200 mg/kg)组与别嘌呤醇(10 mg/kg)组,另设正常组(生理盐水).连续灌胃7d,观察急性高尿酸血症小鼠血清尿酸、肌酐、肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)的活性,毛蕊花糖苷对肾脏转运蛋白Oat1(有机阴离子转运体1)、Urat1(尿酸盐阴离子转运体1)及Glut9(果糖转运体9) mRNA表达的影响.结果与正常组相比,模型组显著增高小鼠血清尿酸与肌酐含有量和肝脏XOD活性,并下调肾脏尿酸转运体Oat1的mRNA表达,上调肾脏尿酸转运体Urat1及Glut9的mRNA表达.与模型组比较,毛蕊花糖苷与异毛蕊花糖苷均显著降低肌酐水平,而毛蕊花糖苷有降尿酸活性.结论毛蕊花糖苷降低血尿酸水平的作用机制可能为抑制XOD活性,下调肾脏转运蛋白Urat1与Glut9的mRNA表达.而异毛蕊花糖苷能改善肾脏功能防止肾脏损伤,具有轻微降血尿酸作用.【总页数】6页(P1449-1454)【作者】曾金祥;许兵兵;王娟;毕莹;王晓云;钟国跃;任刚;朱继孝;李敏【作者单位】江西中医药大学中药资源与民族药研究中心,江西南昌330004;江西中医药大学中药资源与民族药研究中心,江西南昌330004;江西中医药大学中药资源与民族药研究中心,江西南昌330004;南昌市第三医院,江西南昌330009;江西中医药大学中药资源与民族药研究中心,江西南昌330004;江西中医药大学中药资源与民族药研究中心,江西南昌330004;江西中医药大学中药资源与民族药研究中心,江西南昌330004;江西中医药大学中药资源与民族药研究中心,江西南昌330004;江西中医药大学中药资源与民族药研究中心,江西南昌330004【正文语种】中文【中图分类】R966【相关文献】1.栀子提取物降低小鼠急性高尿酸血症血尿酸水平及机理研究 [J], 朱继孝;朱玉野;罗光明;曾金祥;师晶晶;徐赟峰;王晓云;吴波2.HPLC法同时测定苁蓉总苷胶囊中松果菊苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷的含量* [J], 杨素德;胡军华;李家春;徐忠坤;毕宇安;萧伟3.超快速液相色谱法同时测定车前子中京尼平苷酸和毛蕊花糖苷的含量 [J], 关皎;朱鹤云;冯春;张颖;郝乘仪;冯波4.离心分配色谱法对达乌里芯芭中毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的分离纯化 [J], 夏莹;张明旭;秦玲;高冰;李旻辉5.车前草提取物降低急性高尿酸血症小鼠血尿酸水平及机理研究 [J], 曾金祥;毕莹;魏娟;朱玉野;朱继孝;王晓云;罗光明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
XXXXXXXX有限公司成品质量标准及检验操作规程1 品名：1.1 中文名：车前子盐车前子1.2 汉语拼音：Cheqianzi Yancheqianzi2 代码：车前子盐车前子3 取样文件编号：4 检验方法文件编号：5 依据：《中国药典》（2015年版一部）。
6 质量标准：7 检验操作规程：7.1 试药与试剂：甲醇、乙酸乙酯、甲酸、水、香草醛、硫酸、醋酸溶液、京尼平苷酸对照品、毛蕊花糖苷对照品、甲基红乙醇指示液、氢氧化钠滴定液。
7.2 仪器与用具：显微镜、电子天平、硅胶GF254薄层板、三用紫外分析仪、烘箱、马弗炉、高效液相色谱仪、超声波清洗器、电热套、中药二氧化硫测定仪。
7.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。
7.4 鉴别：7.4.1取本品置10×10显微镜下做显微观察。
7.4.2取本品粗粉1g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。
另取京尼平苷酸对照品、毛蕊花糖苷对照品，加甲醇分别制成每1ml各含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录7）试验，吸取上述三种溶液各5µl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水（18 ：2 ：1.5 ：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；喷以0.5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
7.5 检查：7.5.1车前子7.5.1.1水分：不得过12.0％（附录15第一法）。
7.5.1.2总灰分：不得过6.0％（附录17）。
7.5.1.3酸不溶性灰分：不得过2.0％（附录17）。
7.5.1.4膨胀度：取本品1g，称定重量，照膨胀度测定法（附录50)测定，应不低于4.0。
7.5.1.5二氧化硫残留量：照二氧化硫残留量测定法（附录58）测定，不得过150mg/kg。
53--畜牧兽医•水产蚕桑 引用格式：周小玲，舒 燕，程刚毅，等. 五子衍宗方散剂对罗曼蛋鸡生产性能和血清生化指标的影响[J]. 湖南农业科学，2023（11）：53-58. DOI:DOI:10.16498/ki.hnnykx.2023.011.011产蛋初期由于生殖系统发生急剧变化，例如卵巢卵泡快速生长、输卵管迅速变粗变长以及重量迅五子衍宗方散剂对罗曼蛋鸡生产性能和血清生化指标的影响周小玲1,2，舒 燕1,2，程刚毅1，曾发姣1，曾 奥1,2，周映华1,2，高书锋1,2，王升平1,2（1. 湖南省微生物研究院，湖南 长沙 410009；2. 湖南省农用微生物应用工程技术研究中心，饲用微生态制剂湖南省工程实验室，湖南 长沙 410009）摘 要：以130日龄罗曼蛋鸡为研究对象，在其基础日粮中添加0（CK ）、0.5%（Ⅰ组）、1.0%（Ⅱ组）、1.5%（Ⅲ组）、2.0%（Ⅳ组）、2.5%（Ⅴ组）的五子衍宗方散剂，饲喂68 d ，研究饲粮中添加不同水平五子衍宗方散剂对产蛋初期罗曼蛋鸡生产性能、血液生化指标的影响。
结果表明：与CK 相比，各试验组的平均日采食量以及蛋鸡血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白、谷丙转氨酶、总胆红素、直接胆红素、间接胆红素含量均无显著差异；但I 组能够显著降低蛋鸡血清中肌酐、尿酸和总胆汁酸的含量，且对血清中碱性磷酸酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶含量无显著影响；I~Ⅱ组能够显著降低试验蛋鸡料蛋比并显著提高试验蛋鸡全期产蛋率；I~Ⅲ组均能显著降低蛋鸡血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇含量；而Ⅲ~Ⅴ组蛋鸡血清中肌酐含量显著升高；Ⅴ组能够显著提高血清中谷草转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶含量，Ⅱ~Ⅳ组血清中碱性磷酸酶含量显著升高。
综上所述，在基础日粮中添加0.5%的五子衍宗方散剂可改善产蛋初期罗曼蛋鸡的生产性能、血清生化指标，并调节蛋鸡血脂代谢，但添加1.0%~2.5%的五子衍宗方散剂会给蛋鸡带来不利影响。
盐炙对车前子中京尼平苷酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷含量的影响卢丹逸，黄婉茹，马志国*暨南大学药学院，广东广州510632*通讯作者：马志国，副教授，从事中药炮制学与中药药剂学的教学和科研工作。
Tel:(020)85223784，E-mail:mzg79@摘要：目的：建立车前子中京尼平苷酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的RP-HPLC 含量测定方法，并研究三个成分在盐炙前后的含量变化情况；方法：采用Phecda ODS(150 mm × 4.6 mm，5 μm)色谱柱，柱温：30℃；流动相为甲醇（A）-0.1%甲酸（B），梯度洗脱（0 min，15% A；5 min，20% A；30 min，55% A）,流速：1.0 mL/min；检测波长：250 nm和330 nm。
比较7批车前子盐炙前后京尼平苷酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的含量。
结果：方法学考察结果表明，所建立的HPLC方法准确、稳定、可靠；车前子中的京尼平苷酸、毛蕊花糖苷炮制后含量降低，异毛蕊花糖苷盐炙后含量增加。
结论：车前子中毛蕊花糖苷在炮制过程中可能部分转化为异毛蕊花糖苷。
将京尼平苷酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷共同作为评价车前子及其炮制品的质量控制的指标成分更加合理。
关键词：车前子；盐炙；京尼平苷酸；毛蕊花糖苷；异毛蕊花糖苷Reaserch on the main components in Semen Plantaginis about processingLU Danyi，HUANG Wanru，MA Zhi-guo *College of Pharmacy, Jinan University, Guangzhou 510632, China;Abstract: Objective: To establish an RP-HPLC method for determination of Geniposidic acid, Acteoside and Isoacteoside in Semen Plantaginis pieces, and the three components in the change situation, stir fried with salt. Method: the Phecda ODS (150 mm × 4.6 mm, 5 μ m) column, the column temperature: 30 ℃; the mobile phase of methanol (A) -0.1% acid (B), Gradient elution (0 min, 5 min, 15% A; 20% A;30 min, 55% A), flow rate: 1 mL/min; the detection wavelength: 250 nm and 330 nm. Comparison of different batches of plantain seed processing fingerprint determination of the contents of Geniposidic acid, Acteoside and Isoacteoside and psyllium Plantago in pieces and salt. Results: The study results show that the HPLC method, the method is accurate, stable, reliable, Geniposidic acid, Acteoside content decreased after processing after processing, isoacteoside content increased. Conclusion: Acteoside in Plantago may be partially converted into isoacteoside in the processing process, Geniposidic acid, acteoside and isoacteoside as the common evaluation of Semen Plantaginis plantain seeds index and quality control components more reasonable. Keywords: Plantago; Stir fried with salt; Geniposidic acid; Acteoside; Isoacteoside车前子为车前科植物车前(Plantago asiatica L)或平车前(Plantago depressssa Wiltd)的干燥成熟种子，具有清热利尿通淋，渗湿止泻，明目，祛痰等功效，用于热淋涩痛，水肿胀满，暑湿泄泻，目赤肿痛，痰热咳嗽。
盐炙对车前子中京尼平苷酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷含量的影响卢丹逸，黄婉茹，马志国*暨南大学药学院，广东广州510632*通讯作者：马志国，副教授，从事中药炮制学与中药药剂学的教学和科研工作。
Tel:(020)85223784，E-mail:mzg79@摘要：目的：建立车前子中京尼平苷酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的RP-HPLC 含量测定方法，并研究三个成分在盐炙前后的含量变化情况；方法：采用Phecda ODS(150 mm × 4.6 mm，5 μm)色谱柱，柱温：30℃；流动相为甲醇（A）-0.1%甲酸（B），梯度洗脱（0 min，15% A；5 min，20% A；30 min，55% A）,流速：1.0 mL/min；检测波长：250 nm和330 nm。
比较7批车前子盐炙前后京尼平苷酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷的含量。
结果：方法学考察结果表明，所建立的HPLC方法准确、稳定、可靠；车前子中的京尼平苷酸、毛蕊花糖苷炮制后含量降低，异毛蕊花糖苷盐炙后含量增加。
结论：车前子中毛蕊花糖苷在炮制过程中可能部分转化为异毛蕊花糖苷。
将京尼平苷酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷共同作为评价车前子及其炮制品的质量控制的指标成分更加合理。
关键词：车前子；盐炙；京尼平苷酸；毛蕊花糖苷；异毛蕊花糖苷Reaserch on the main components in Semen Plantaginis about processingLU Danyi，HUANG Wanru，MA Zhi-guo *College of Pharmacy, Jinan University, Guangzhou 510632, China;Abstract: Objective: To establish an RP-HPLC method for determination of Geniposidic acid, Acteoside and Isoacteoside in Semen Plantaginis pieces, and the three components in the change situation, stir fried with salt. Method: the Phecda ODS (150 mm × 4.6 mm, 5 μ m) column, the column temperature: 30 ℃; the mobile phase of methanol (A) -0.1% acid (B), Gradient elution (0 min, 5 min, 15% A; 20% A;30 min, 55% A), flow rate: 1 mL/min; the detection wavelength: 250 nm and 330 nm. Comparison of different batches of plantain seed processing fingerprint determination of the contents of Geniposidic acid, Acteoside and Isoacteoside and psyllium Plantago in pieces and salt. Results: The study results show that the HPLC method, the method is accurate, stable, reliable, Geniposidic acid, Acteoside content decreased after processing after processing, isoacteoside content increased. Conclusion: Acteoside in Plantago may be partially converted into isoacteoside in the processing process, Geniposidic acid, acteoside and isoacteoside as the common evaluation of Semen Plantaginis plantain seeds index and quality control components more reasonable. Keywords: Plantago; Stir fried with salt; Geniposidic acid; Acteoside; Isoacteoside车前子为车前科植物车前(Plantago asiatica L)或平车前(Plantago depressssa Wiltd)的干燥成熟种子，具有清热利尿通淋，渗湿止泻，明目，祛痰等功效，用于热淋涩痛，水肿胀满，暑湿泄泻，目赤肿痛，痰热咳嗽。
车前子中的主要化学成分是以京尼平苷酸为代表的环烯醚萜及其苷类成分，以毛蕊花糖苷为代表的苯乙醇苷类成分。
《中国药典》2010年版以京尼平苷酸和毛蕊花糖苷作为其质量控制指标：规定车前子含京尼平苷酸(C16H22O10)不得少于0.50％，毛蕊花糖苷(C29H36O15)不得少于0.40％；盐车前子含京尼平苷酸(C16H22O10)不得少于0.40％，毛蕊花糖苷(C29H36O15)不得少于0.30％[1]，炮制品的含量限度低于生品，提示在炮制过程中指标成分含量降低。
关于盐炙对车前子中指标成分的影响研究报道很少，高明哲等曾比较了盐炒和清炒两种炮制方法对车前子苷含量的影响，结果表明车前子苷性质稳定受不同炮制方法影响较小[2]。
刘荣华等采用HPLC法，对江西大粒车前子的微波炮制品、清炒品、盐炙品以及生品的水提液进行指纹图谱研究，结果表明不同炮制方法对化学成分有较大的影响，其中微波炮制品对化学成分影响最大[3]。
李丽等曾用高效液相色谱法对车前子炮制前后阿克苷（即毛蕊花糖苷）含量变化进行了研究，实验结果表明阿克苷的含量明显降低[4]。
为此，我们拟对盐炙前后车前子中京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷的含量进行比较，考察盐炙对其的影响，为车前子及盐车前子的质量评价提供参考，为车前子炮制原理的研究提供研究基础。
1 实验仪器与试药Agilent 1200 Series高效液相色谱仪（美国，G1316B DAD检测器，G1311A 四元低压梯度泵，G1322A在线真空脱气机，G1329A自动进样器，G1316A柱温箱）；Agilent Chemstation 色谱工作站；ALC-110.4万分之一电子天平（北京塞多利斯仪器系统有限公司），KQ—250E型超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司），DFY—200摇摆式高速中药粉碎机（温苓市中德中药机械有限公司）；小保姆FK-130S型家用电热锅购于电器超市。
京尼平苷酸对照品购自成都瑞芬思生物科技有限公司，毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷对照品为实验室自制(利用1H NMR、13C NMR、MS等波谱技术鉴定了化学结构)，HPLC检出纯度均大于98%；甲醇（色谱纯，购自上海晶纯试剂有限公司）；甲醇（分析纯，广州化学试剂厂）；甲酸（分析纯，天津市富宇精细化工有限公司）；实验用水为纯净水(华润怡宝食品饮料有限公司)；其他试剂均为分析纯。
7批不同批次车前子，经暨南大学药学院生药学教研室张英副教授鉴定为车前科植物车前（Plantago asiatica L）的干燥成熟种子。
2 方法与结果2.1溶液的制备2.1.1对照品溶液的制备精密称取2.53 mg京尼平苷酸、2.65 mg毛蕊花糖苷和1.13 mg异毛蕊花糖苷对照品。
置5 mL容量瓶中，加50% 甲醇定容，配成浓度分别为506、530、226 μg/mL的京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷混合对照品溶液，置4℃冰箱备用。
2.1.2供试品溶液的制备盐炙车前子的制备：参照《中国药典》（2010版）盐炙法(附录ⅡD)，取不同批次车前子各50 g，放入经预热后的锅内，清炒车前子至有轻微爆鸣声，喷洒20% 盐水5 mL至车前子全部浸润，炒干，放凉，即得盐车前子。
将车前子生品及其盐炙品粉碎，过筛（40目），各取1 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入50% 甲醇25 mL，回流提取1 h，放凉，用50%甲醇补足重量，滤过，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得。
2.2色谱条件采用Phecda ODS(150mm×4.6mm，5μm)色谱柱；流动相：甲醇(A)-0.1%甲酸(B)梯度洗脱（0 min，15% A；5 min，20% A；30 min，55% A），流速：1.0 mL/min；柱温：30℃；进样量：20 μL；检测波长：京尼平苷酸在250 nm处检测，毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷在330 nm处检测。
在该条件下，3种成分的色谱图见图1。
图1 对照品、车前子生品、盐炙品的代表性液相色谱图1. 京尼平苷酸，2. 毛蕊花糖苷，3. 异毛蕊花糖苷2.3 线性关系精密吸取混合对照品溶液适量，分别稀释至不同浓度，使京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷的浓度分别为 2.53-506.0μg/mL、2.65-530.0μg/mL、1.13-226.0μg/mL，按“2.2”项下色谱条件分别进样，以3个对照品的进样浓度( μg/mL ) 为横坐标，对应的色谱峰面积为纵坐标，进行线性回归。
结果表明各成分在各自进样范围内线性关系良好，见表1。
表1 京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷的线性关系化合物标准曲线r 线性范围（μg/mL）京尼平苷酸Y = 18.909X - 5.997 1.0000 2.53-506毛蕊花糖苷异毛蕊花糖苷Y = 33.733X - 51.788Y= 26.105X - 22.4220.99990.99992.65-5301.13-226.002.4 精密度试验三个连续工作日内，每天将对照品溶液连续进样分析6次，测定京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷峰面积积分值，计算日内精密度RSD值分别为1.20、0.83、1.31%，日间精密度RSD值分别为0.47、1.63、0.33%，表明仪器精密度良好。
2.5 稳定性试验精密吸取同一供试品溶液20 μL，于制备后0、2、4、8、16、24 h分别进样测定京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷峰面积积分值，计算RSD值分别为1.28、1.03、0.84%，表明供试品溶液在24 h内测定稳定。
2.6 重复性试验精密称取同一样品6份，照“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件进样20μL。
