扫描电镜SEM制样步骤
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sem的实验方法
SEM(扫描电子显微镜)是一种常用的显微镜技术,用于观察和分析样品的表面形貌和微观结构。
下面是SEM实验的基本方法:
1. 样品制备:根据需要观察的物体或材料,选择合适的样品制备方法。
常见的方法包括金属蒸发覆盖、碳薄膜覆盖、冷冻断裂、超声清洗等。
2. 样品固定:将样品固定在SEM的样品台上。
通常可以使用导电胶或双面导电胶带将样品固定在样品台上,并确保样品与样品台之间有良好的电导性。
3. 真空处理:将样品放入SEM的真空室中,并进行真空处理,以确保在SEM观察过程中减少气体干扰。
4. 调节参数:在开始观察之前,需要根据样品的性质和要观察的目标,设置适当的加速电压、束流亮度、探针电流等参数。
5. 扫描观察:调整SEM的对焦和扫描参数,使电子束在样品表面扫描。
观察过程中可以通过调整探针电流和探针尺寸来获得所需的表面细节。
6. 图像获取:使用SEM中的二次电子或反射电子检测器,捕捉样品表面反射出的电子信号,并将其转换成图像。
可以通过调整对比度、亮度等参数来优化图像质量。
7. 数据分析:对获得的SEM图像进行分析和解读,可以使用图像处理软件进行形貌特征、颗粒分布、晶体结构等的测量和分析。
需要注意的是,SEM操作需要在专门的实验室环境下进行,并且
需要遵循安全操作规程,以确保操作人员和设备的安全。
此外,不同样品的性质和要求可能需要不同的处理方法和参数设置,因此在实验前应充分了解样品的特性和研究目标,以便选择合适的实验方法。
利用聚焦离子束双束扫描电镜制备透射样品的主要流程聚焦离子束双束扫描电镜(Focused Ion Beam Dual Beam Scanning Electron Microscope,简称FIB-SEM)是一种高分辨率的表面形貌和微结构分析技术,可以实现对样品进行原位观察和制备。
利用FIB-SEM可以制备透射电镜(Transmission Electron Microscopy,简称TEM)样品,即通过FIB切割和修整样品,使其达到适合TEM观察的薄片形态。
本文将详细介绍利用FIB-SEM制备透射样品的主要流程。
1. 样品准备首先需要准备待制备的样品。
这些样品可以是固体材料、生物组织或其他需要进行透射电镜观察的材料。
为了便于FIB切割和修整,样品应具有一定的硬度和稳定性。
2. 样品固定将待制备的样品固定在一个小型支撑台上,并使用导电胶或其他导电材料将其牢固地粘附在支撑台上。
导电胶能够提供良好的导电性,以便在后续的FIB切割和修整过程中排除电荷积累的干扰。
3. FIB切割将固定在支撑台上的样品放入FIB-SEM设备中,调整好样品位置。
然后使用离子束对样品进行切割。
离子束由高能离子组成,可以精确地切割样品表面。
通过控制离子束的扫描速度和电流密度,可以实现不同形状和尺寸的切割区域。
4. FIB修整在完成初始切割后,需要对样品进行进一步的修整以达到透射电镜观察的要求。
使用较低能量和较小电流密度的离子束,在已经切割好的区域上进行精细修整。
通过逐渐去除样品表面的材料,可以获得更加平坦、光滑且薄片形态良好的透射样品。
5. 清洗和抛光经过FIB修整后,样品表面可能存在一些污染物或残留物。
为了获得更好的透射图像质量,需要对样品进行清洗和抛光处理。
这可以通过离子束轰击、溅射或化学腐蚀等方法来实现。
清洗和抛光的目的是去除样品表面的污染物,并使其更加平整和透明。
6. TEM观察完成清洗和抛光后,将样品转移到透射电镜中进行观察。
环境扫描电镜操作流程英文回答:Scanning Electron Microscopy (SEM) is a powerful tool used to investigate the surface morphology and composition of materials. It allows for high-resolution imaging and analysis, making it widely used in various fields such as materials science, biology, and nanotechnology. In this response, I will outline the general steps involved in conducting an SEM operation.1. Sample Preparation: The first step is to prepare the sample for analysis. This involves cleaning the sample and ensuring it is properly mounted on a sample holder. The sample should be conductive or coated with a thin layer of conductive material to prevent charging during imaging.2. Chamber Preparation: Before placing the sample in the SEM chamber, the chamber needs to be prepared. This involves pumping down the chamber to create a vacuumenvironment. The vacuum helps to minimize the scattering of electrons and improves image quality.3. Sample Loading: Once the chamber is ready, the sample can be loaded into the SEM. The sample holder is carefully inserted into the chamber, ensuring that it is properly aligned and secured.4. Electron Beam Alignment: The next step is to alignthe electron beam. This involves adjusting the beam's focus, astigmatism, and aperture settings to optimize image quality. The beam should be properly centered and focusedon the sample surface.5. Imaging and Analysis: With the sample loaded and beam aligned, the SEM can now be used for imaging and analysis. The electron beam scans across the sample surface, and the resulting signals (secondary electrons, backscattered electrons, etc.) are detected and used to generate an image. The operator can adjust various imaging parameters to enhance contrast and resolution.6. Data Interpretation: Once the images are obtained, they need to be interpreted and analyzed. This may involve measuring dimensions, identifying features, or comparing samples. Specialized software can be used to analyze the data and extract quantitative information.7. Maintenance and Cleaning: After the analysis is complete, it is important to properly shut down and clean the SEM. This includes venting the chamber, removing the sample, and cleaning any contamination that may have accumulated during the operation.中文回答:环境扫描电镜(SEM)是一种用于研究材料表面形态和成分的强大工具。
sem制样方法及注意事项以SEM制样方法及注意事项为标题,我将介绍SEM制样方法的基本原理和操作步骤,并提供一些在实践中需要注意的事项。
SEM(扫描电子显微镜)是一种常用的表面形貌观察和分析技术,可以在纳米至微米尺度下观察样品的形貌和结构。
SEM制样是实施SEM观察的前提,它的目的是将样品制备成适合SEM观察的形式。
一、SEM制样方法1. 样品选择:首先需要确定要观察的样品类型,包括材料、形状、尺寸等。
不同样品可能需要不同的制样方法。
2. 样品固定:根据样品的特性和尺寸,选择合适的固定方法。
常见的固定方法包括化学固定、机械固定和冷冻固定等。
3. 前处理:根据需要,对样品进行预处理,如去除杂质、修整表面等。
这一步骤可以改善SEM观察的效果。
4. 制备导电层:由于SEM需要对样品进行电子束照射,所以样品表面需要制备导电层以避免电荷积累。
常用的导电层材料有金属薄膜、碳薄膜和导电胶等。
5. 制备薄片:将样品制备成适合SEM观察的薄片。
常用的制备方法有机械剥离、切割、研磨和离心等。
制备薄片的目的是获得样品的横截面或断面信息。
6. 脱水和干燥:对于水溶性样品,需要进行脱水处理以避免SEM 观察时的水蒸气干扰。
常用的脱水方法有自然蒸发、冷冻干燥和真空脱水等。
7. 导入SEM:将制备好的样品放入SEM中进行观察。
在导入过程中要注意样品的定位和对焦,以确保观察的准确性和清晰度。
二、SEM制样注意事项1. 样品处理时要注意避免污染和损坏。
使用无尘室或洁净台进行制样操作,避免灰尘和其它杂质的污染。
对于易损样品,要采取适当的操作方法和保护措施。
2. 制备导电层时要注意均匀涂覆和适当厚度。
导电层的均匀性和良好的导电性能对于SEM观察结果的准确性和清晰度非常重要。
3. 制备薄片时要控制厚度和平整度。
薄片的厚度和平整度对于SEM 观察的分辨率和细节展示有着重要影响。
制备过程中要小心操作,避免样品的破损和变形。
4. 脱水和干燥过程中要避免过度处理。
利用聚焦离子束双束扫描电镜制备透射电镜样品的主要流程一、前言透射电镜(Transmission Electron Microscopy, TEM)是一种用于观察物质内部结构和原子级别的技术。
为了制备TEM样品,需要使用聚焦离子束双束扫描电镜(Focused Ion Beam-Scanning Electron Microscope, FIB-SEM)进行切割和处理。
本文将介绍利用FIB-SEM 制备TEM样品的主要流程。
二、样品准备1. 样品制备:首先需要选择合适的样品,通常选择的是薄片或纤维。
将样品固定在金属支架上,并使用导电胶粘贴。
2. 预处理:在进行TEM样品制备之前,需要对样品进行预处理。
这包括去除表面污染物、涂覆保护层等步骤。
三、FIB-SEM操作1. 定位:在FIB-SEM中,首先需要对样品进行定位。
使用扫描电镜观察样品表面,并确定需要切割的位置。
2. 切割:使用离子束在定位好的位置上进行切割。
切割过程中,需要根据所需厚度和形状调整离子束参数,并不断观察切割进度。
3. 清理:完成切割后,需要清理掉切割过程中产生的碎屑。
使用离子束和扫描电镜观察样品表面,并清理掉残留的碎屑。
4. 薄化:在清理完毕后,需要对样品进行薄化处理。
使用离子束在切割过的位置上进行薄化,直到达到所需厚度。
在薄化过程中,需要不断调整离子束参数,并观察样品表面。
5. 制备TEM样品:完成薄化后,需要将样品制备成TEM样品。
这包括使用离子束在薄片上进行打孔、切割等操作,以便将其放入TEM中观察。
四、后续处理1. 清洗:完成TEM样品制备后,需要对其进行清洗处理。
这包括去除导电胶和保护层等步骤。
2. 观察:最后,将TEM样品放入透射电镜中观察。
通过透射电镜可以观察到物质内部结构和原子级别的细节。
五、总结利用FIB-SEM制备TEM样品是一项复杂的工作,需要精密的仪器和操作技巧。
本文介绍了制备TEM样品的主要流程,包括样品准备、FIB-SEM操作和后续处理。
扫描电镜的样品制备
扫描电镜(Scanning Electron Microscope,SEM)是一种高分辨率的显微镜,对于复杂的样品结构、微观形态和表面形貌的分析非常有用。
然而,要获得良好的扫描电镜显像效果,样品的制备至关重要。
下面将介绍几种常用的扫描电镜样品制备技术。
1. 金属喷涂法
金属喷涂法是扫描电镜样品制备的经典方法。
该方法使用金属喷涂仪将金属颗粒喷在样品表面,使其形成一层均匀、导电性良好的金属膜,以便在扫描电镜中观察样品的表面结构。
该方法适用于非导电样品,如细胞、生物组织、聚合物等。
2. 离子切割法
离子切割法利用离子切割机将样品切割成纤细的薄片,以便于在扫描电镜中观察。
这种方法适用于非常薄的样品,如材料薄片、芯片等。
它可以提供非常高分辨率的图像,并且可以通过纵向切割获得样品的三维结构。
3. 冷冻切片法
冷冻切片法是一种用于生物样品的扫描电镜制备方法。
该方法使用超低温技术将样品冻结,并使用超薄刀片切割成极薄的切片,通常为50~200纳米。
这可以保留样品的水感性和原始形态,并使其在扫描电镜中观察更加清晰。
4. 化学蚀刻法
化学蚀刻法是用于金属样品的扫描电镜制备方法。
该方法使用酸或碱对样品表面进行蚀刻,以去除不需要观察的材料,形成清晰的样品结构。
该方法适用于金属薄膜、晶体和合金等金属材料。
总之,良好的扫描电镜样品制备是获得高品质扫描电镜图像的关键。
每种样品都有其独特的制备方法,为了获得最好的结果,在选择合适的制备方法时需要谨慎选择。
扫描电镜S E M制样步骤-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN扫描电镜观察制样步骤固定:1、用灭菌镊子挑出少量的的样品(碳粒/碳毡),放入 5ml 的离心管中,2、加入2.5%戊二醛, 加量为淹没碳粒/碳毡样品为宜,室温固定1小时3、置于 4℃冰箱中固定12小时。
冲洗:用 0.2mol pH 7.4的磷酸缓冲溶液冲洗 3 次,每次 10 分钟。
每次冲洗时先用注射器缓慢吸走上一步骤的冲洗液。
Or 离心脱水:分别用浓度为30%, 50%,75%,90%, 95%, 100% v/v 的乙醇进行脱水,每次10分钟,干燥:将样品放在离心管里,置入干燥器中干燥 12 小时。
粘样:用双面胶将样品观察面向上粘贴在扫描电镜铜板上预处理好的样品放入干净离心管中待检。
SEM上机测样--测定条件参数设置分子克隆实验指南第三版,1568页:25度下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制;先配0.1mol/L K2HPO4,0.1mol/L KH2PO4配PH7.4,100ml磷酸钾缓冲液需:0.1mol/L K2HPO4,80.2ml0.1mol/L KH2PO4,19.8ml混合即是,不用酸碱调PH。
参考文献:DOI:?10.1021/es902165yMicrobial fuel cell?based on Klebsiella pneumoniae biofilmSelecting?anode-respiring bacteria based on?anode?potential: phylogenetic, electrochemical, and?microscopic?characterizationA severe reduction in the cytochrome C content of?Geobacter sulfurreducens?eliminates its capacity for extracellular electron transfer2。
sem生物样品制备步骤
SEM(扫描电子显微镜)是一种高分辨率的显微镜,常用于观察生物样品的微观结构。
生物样品制备是SEM观察的关键步骤之一,以下是一般的生物样品制备步骤:
1. 固定样品,首先,生物样品需要被固定以保持其原始结构。
常用的固定剂包括乙醛、戊二醛或glutaraldehyde等。
固定样品的方法可以根据具体的样品类型而有所不同。
2. 脱水,固定后的样品需要被脱水以去除水分,通常使用酒精逐渐替代水分。
这个过程需要逐渐提高酒精浓度,最终将样品置于无水酒精中。
3. 干燥,脱水后的样品需要被干燥以去除残留的溶剂。
常用的干燥方法包括自然干燥、临界点干燥或者冻干等。
4. 样品制备,干燥后的样品需要被切割、切片或者表面处理以展示所需的结构。
这可能涉及到金属喷镀以增加导电性,或者使用特殊的切割技术。
以上是一般的SEM生物样品制备步骤,不同类型的生物样品可能需要特定的处理步骤。
在进行SEM观察之前,样品制备的质量对于最终观察结果至关重要。
希望这些信息能够帮助到你。
扫描电镜实验报告一、背景介绍扫描电镜(Scanning Electron Microscope,SEM)是一种常用于观察材料表面形貌的高分辨率显微镜。
与光学显微镜不同,SEM使用电子束来对样品进行扫描,从而获得样品表面的高清晰度图像。
本文将对扫描电镜实验进行详细描述和分析。
二、实验目的本次实验的目的是研究和观察不同样品的表面形貌及其微观结构。
通过使用扫描电镜,我们可以进一步了解材料的性质和特征,并为后续的研究工作提供有力的支持。
三、实验步骤1. 样品制备:将待观察的样品进行必要的处理,例如切割、研磨、涂覆导电剂等,以保证样品的表面光滑且导电性良好。
2. 装备样品:将处理完成的样品放置在SEM样品台上,固定好并调整角度,确保样品表面垂直于电子束的入射方向。
3. 调整参数:根据不同样品的特性和需求,调整加速电压、放大倍数、探头电流等参数,以获得最佳的图像质量。
4. 扫描观察:打开SEM仪器,开始对样品进行扫描观察。
电子束在样品表面扫描时,与样品表面相互作用,产生二次电子信号,这些信号被探测器接收并转换成图像。
四、实验结果与分析在本次实验中,我们观察了不同样品的表面结构,并获得了一系列高分辨率的SEM图像。
以一块常见的金属材料——铝为例,通过SEM观察,我们可以清晰地看到铝表面的微观结构。
观察结果显示,铝表面呈现出许多沟槽和凸起的特征,这些特征是铝晶粒的显著标记。
SEM图像还揭示了铝表面的晶粒大小和分布情况,有助于我们进一步研究金属的力学性质和形变行为。
同样,我们还观察了纳米颗粒的表面形貌。
SEM图像显示,纳米颗粒具有较大的表面积和丰富的形态结构,这使得纳米颗粒在催化剂、材料科学等领域有着广泛的应用价值。
通过SEM观察,我们可以研究纳米颗粒的大小分布、形状特征以及粒子间的相互作用,为相关研究提供了重要的依据。
五、实验的意义与应用前景扫描电镜作为一种重要的表征工具,在材料科学、生物学、纳米技术等领域具有广泛的应用和重要意义。
扫描电镜胶体金实验步骤扫描电镜(Scanning Electron Microscope, SEM)是一种常用的高分辨率显微镜,可用于观察样品表面的形貌和微观结构。
胶体金是一种常用的探针,可用于增强扫描电镜中的样品表面信号。
下面是一种扫描电镜胶体金实验的步骤:1. 准备样品:选择所需观察的样品,并进行固定和制备。
固定样品的方法因样品的性质而异,可以使用化学固定(如用福尔马林固定生物样品)或物理固定(如用冷冻固定保留样品中的结构)等方法。
制备样品包括将样品切割成适当尺寸,通常在1x1 cm的方形抛光样品盘上固定。
2.抛光样品:使用一系列研磨纸(从较粗砂纸到较细砂纸)和抛光嵌脂片,将样品抛光至光滑平整。
抛光的目的是去除样品表面的凹凸和粗糙部分,以便获得更清晰的图像。
3.制备胶体金:取一小量胶体金溶液,并进行适当的稀释。
稀释的目的是使胶体金颗粒分散均匀,并降低胶体金对样品表面的覆盖程度,以便获得更高的图像对比度。
4.涂覆胶体金:将制备好的胶体金溶液滴于样品表面,并等待一段时间,通常为5-10分钟。
胶体金颗粒会在样品表面吸附,并形成一层较为均匀的覆盖层。
过长或过短的时间都可能导致胶体金覆盖量的不均匀。
5.冲洗样品:将涂覆了胶体金的样品轻轻地冲洗干净,以去除未被吸附的胶体金颗粒。
此步骤旨在使胶体金颗粒仅留在样品表面,增加信号对比度。
6.干燥样品:将样品在环境温度下静置,使其自然干燥。
可以使用氮气吹干或真空冷冻干燥器加速干燥过程。
注意尽量避免过渡干燥的情况,以免导致胶体金颗粒脱落。
7.导入扫描电镜:将干燥的样品安置在扫描电镜的样品台上,并通过样品台的固定装置将其固定。
确保样品与电子束的对准正确,以获得清晰的图像。
8.调整参数:根据样品的特性和所需的分辨率,调整扫描电镜的参数,如加速电压和探针电流等。
一般来说,加速电压越高,分辨率越好,但也容易导致样品损伤。
探针电流的选择要根据样品的性质和信号强度等因素来确定。
扫描电镜S E M制样步
骤
-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN
扫描电镜观察制样步骤
固定:
1、用灭菌镊子挑出少量的的样品(碳粒/碳毡),放入 5ml 的离心管中,
2、加入2.5%戊二醛, 加量为淹没碳粒/碳毡样品为宜,室温固定1小时
3、置于 4℃冰箱中固定12小时。
冲洗:
用 0.2mol pH 7.4的磷酸缓冲溶液冲洗 3 次,每次 10 分钟。
每次冲洗时先用注射器缓慢吸走上一步骤的冲洗液。
Or 离心
脱水:
分别用浓度为30%, 50%,75%,90%, 95%, 100% v/v 的乙醇进行脱水,每次10分钟,
干燥:
将样品放在离心管里,置入干燥器中干燥 12 小时。
粘样:用双面胶将样品观察面向上粘贴在扫描电镜铜板上
预处理好的样品放入干净离心管中待检。
SEM上机测样--测定条件参数设置
分子克隆实验指南第三版,1568页:
25度下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制;
先配0.1mol/L K2HPO4,0.1mol/L KH2PO4
配PH7.4,100ml磷酸钾缓冲液需:
0.1mol/L K2HPO4,80.2ml
0.1mol/L KH2PO4,19.8ml
混合即是,不用酸碱调PH。
参考文献:
DOI:?10.1021/es902165y
Microbial fuel cell?based on Klebsiella pneumoniae biofilm
Selecting?anode-respiring bacteria based on?anode?potential: phylogenetic, electrochemical, and?microscopic?characterization
A severe reduction in the cytochrome C content of?Geobacter sulfurreducens?eliminates its capacity for extracellular electron transfer
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