场发射扫描电镜的样品制备和操作步骤

扫描电镜标本制备技术扫描电镜Scanningelectronmicroscope，SEM)与透射电镜在观察中获得的超微结构信息各有所长，并互相补充。

透射电镜样品制备技术主要用于观察生物样品内部的二维平面的微细结构，而扫描电镜所收集的主要是电子束照射在样品上所产生的二次电子。

由于扫描电镜景深长，故其图像层次丰富，立体感强，可显示生物样品表面及其断面的三维立体结构。

一、SEM生物样品制备的基本要求及操作程序生物样品与金属、矿物等材料不同，具有质地柔软、容易变形、导电性能差、二次电子发射率低、含水量多(有的含水达80%以上)等特点，因此对热、干燥、电子轰击等十分敏感，所以扫描电镜生物样品的制备有以下基本要求：1.注意表面的清洁，防止污染。

2.样品要干燥，不能变形，尽量保持样品表面的微细结构。

3.导电性能要好，应进行导电处理。

4.二次电子的发射率要高。

5.注意确认和保护样品的观察面。

尽管不同的生物样品可以采用不同的制备方法，但一般情况下除了比较坚硬的组织(骨骼、牙齿、指甲、毛发、贝壳、昆虫及某些植物样品)和需采用某些特殊制备技术者(管道铸型扫描、低电压观察法等)外，均需要经过取材、清洗、固定、脱水、干燥及金属镀膜等基本操作程序。

(一)取材1.取材前应作好药品及器材的准备，每次取材的品种及数量不宜过多，以免延误时间、影响制样效果。

2.动作要迅速，材料应尽快进入固定液。

3.取材部位要准确。

观察组织细胞表面结构为主的样品，直径最大不宜超过5mm，高度可在3～5mm之间。

观察组织细胞内部结构为主的样品，直径应小于2mm，高度可在3mm左右。

为了提高固定、脱水、干燥及镀膜效果，在满足所需要观察内容的条件下，样品块以尽量小一些为宜。

4.机械损伤要小，解剖器械要锋利，取材动作要轻巧，避免牵拉和钳夹，并做好对观察面的标记。

5.操作应在低温(0～4℃)下进行。

(二)样品情况在样品制备过程中，应注意清除覆盖于样品表面的粘液、分泌物、组织液、血液、细胞碎片、药物反应沉淀物等所造成的污染，否则不仅会掩盖样品表面的微细结构，甚至会得出错误的判断。

扫描电镜S E M制样步骤-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN扫描电镜观察制样步骤固定：1、用灭菌镊子挑出少量的的样品（碳粒/碳毡）,放入 5ml 的离心管中,2、加入2.5%戊二醛, 加量为淹没碳粒/碳毡样品为宜,室温固定1小时3、置于 4℃冰箱中固定12小时。

冲洗：用 0.2mol pH 7.4的磷酸缓冲溶液冲洗 3 次，每次 10 分钟。

每次冲洗时先用注射器缓慢吸走上一步骤的冲洗液。

Or 离心脱水：分别用浓度为30%， 50%，75%，90%, 95%, 100% v/v 的乙醇进行脱水，每次10分钟，干燥：将样品放在离心管里，置入干燥器中干燥 12 小时。

粘样：用双面胶将样品观察面向上粘贴在扫描电镜铜板上预处理好的样品放入干净离心管中待检。

SEM上机测样--测定条件参数设置分子克隆实验指南第三版，1568页：25度下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制；先配0.1mol/L K2HPO4，0.1mol/L KH2PO4配PH7.4，100ml磷酸钾缓冲液需：0.1mol/L K2HPO4，80.2ml0.1mol/L KH2PO4，19.8ml混合即是，不用酸碱调PH。

参考文献：DOI:?10.1021/es902165yMicrobial fuel cell?based on Klebsiella pneumoniae biofilmSelecting?anode-respiring bacteria based on?anode?potential: phylogenetic, electrochemical, and?microscopic?characterizationA severe reduction in the cytochrome C content of?Geobacter sulfurreducens?eliminates its capacity for extracellular electron transfer2。

扫描电镜实验步骤
扫描电镜是一种高分辨率的显微镜，可以用于观察微小的物体表面结构。

在进行扫描电镜实验时，需要按照以下步骤进行操作。

第一步：样品制备
样品制备是扫描电镜实验的关键步骤之一。

样品应该具有一定的厚度和尺寸，以便于在扫描电镜中进行观察。

通常情况下，样品需要进行固定、切片、染色等处理，以便于观察。

第二步：样品表面处理
在进行扫描电镜实验之前，需要对样品表面进行处理。

这是因为扫描电镜只能观察样品表面的结构，而不能观察样品内部的结构。

常用的样品表面处理方法包括金属喷镀、碳喷镀、真空蒸镀等。

第三步：扫描电镜操作
在进行扫描电镜实验时，需要将样品放置在扫描电镜的样品台上，并调整扫描电镜的参数，如电子束的加速电压、扫描速度、探针电流等。

然后，通过扫描电镜的探针扫描样品表面，将样品表面的结构转化为电子信号，并通过电子显微镜将其显示出来。

第四步：图像处理和分析
在获得样品表面的图像之后，需要对图像进行处理和分析。

常用的
图像处理方法包括增强对比度、去噪、调整亮度和对比度等。

而图像分析则可以通过计算机软件进行，如图像分割、形态学分析、三维重建等。

扫描电镜实验是一项复杂的实验，需要进行样品制备、样品表面处理、扫描电镜操作和图像处理和分析等多个步骤。

只有在严格按照实验步骤进行操作的情况下，才能获得准确的实验结果。

扫描电镜操作规程扫描电镜（Scanning Electron Microscope，SEM）是一种将电子束聚焦在样品表面，通过扫描方式来获得样品高分辨率3D表面形貌和成分信息的仪器。

为了确保SEM操作的有效性和安全性，以下是SEM操作规程。

一、设备准备：1.认真阅读并了解SEM操作说明和安全规范。

2.检查SEM主机和附件是否处于正常工作状态，包括真空度、电源和冷却系统。

3.确保SEM试样台和样品夹具是干净的，无油污和灰尘。

二、样品处理：1.样品制备前，需要了解样品性质和要求，选择合适的样品制备方法。

2.对于生物样品，应优先使用冷冻切片等方法固定样品形态，以避免形变。

3. 样品尺寸应适合SEM观察，常规样品尺寸为10mm×10mm。

三、真空系统操作：1.打开SEM干净室门前，请先关闭室门内的LED灯进行暗室操作。

2.打开真空系统电源，并调节抽真空系统排气阀门，观察真空度是否达到工作要求。

若真空泄漏现象，请通知维修人员。

3.室外样品台安装完成后，请确保样品台和附件干净，并将样品固定到样品夹具上。

4.朝样品夹具上的固体样品均匀喷涂金属薄层来提高导电性。

四、SEM主机操作：1.打开SEM主机电源开关，仪器会进行自检程序，确认系统启动正常后才能进行操作。

2.将SEM控制软件打开，并加载上一次使用的配置文件，确认加热丝和工作功能正常。

3.调节电子枪电流和加速电压，以达到最佳分辨率和清晰度。

4.运用选择二级电子或回散二级电子来实现图像形成，根据具体需求调整像素率和扫描速度。

五、SEM样品观察：1.在获得清晰的样品图像之前，调整样品和悬臂梁的位置，以保证电子束准确的投射到样品表面。

2.调节电子束扫描范围、分辨率和时间，以获得高质量的SEM图像。

六、SEM样品操作结束：1.操作完成后，关闭SEM主机电源开关和控制软件。

2.关闭系统真空排气阀门，并观察真空泵的运行情况，确保真空度恢复正常。

3.清理和保养SEM主机和附件，如清除样品夹具上的残留物。

场发射扫描电子显微镜（S-4800）操作规程开机1. 检查真空、循环水状态。

2. 开启“Display”电源。

3. 根据提示输入用户名和密码，启动电镜程序。

样品放置、撤出、交换1. 严格按照高度规定高样品台，制样，固定。

2. 按交换舱上“Air”键放气，蜂鸣器响后将样品台放入，旋转样品杆至“Lock”位，合上交换舱，按“Evac”键抽气，蜂鸣器响后按“Open”键打开样品舱门，推入样品台，旋转样品杆至“Unlock”位后抽出，按“Close”键。

观察与拍照1. 根据样品特性与观察要求，在操作面板上选择合适的加速电压与束流，按“On”键加高压。

2. 用滚轮将样品台定位至观察点，拧Z轴旋钮（3轴马达台）。

3. 选择合适的放大倍数，点击“Align”键，调节旋钮盘，逐步调整电子束位置、物镜光阑对中、消像散基准。

4. 在“TV”或“Fast”扫描模式下定位观察区域，在“Red”扫描模式下聚焦、消像散，在“Slow”或“Cssc”扫描模式下拍照。

5. 选择合适的图像大小与拍摄方法，按“Capture”拍照。

6. 根据要求选择照片注释内容，保存照片。

关机1. 将样品台高度调回80mm。

2. 按“Home”键使样品台回到初始状态。

3. “Home”指示灯停止闪烁后，撤出样品台，合上样品舱。

4. 退出程序，关闭“Display”电源。

注意1. 每天第一次加高压后，进行灯丝Flashing去除污染。

2. 冷场发射电镜一般不断电，如遇特殊情况需要大关机时，依次关闭主机正面的“Stage”电源、“Evac”电源，半小时后关闭离子泵开关和显示单元背面的三个空气开关，关闭循环水。

开机时顺序相反。

3. 每半个月旋开空压机底阀放水一次。

4. 待测样品需烘干处理，不能带有强磁性，不能采用铁磁性材料做衬底制样。

5．实验室温度限定在25±5℃，相对湿度小于70% 。

仪器维护1. 每月进行电镜离子泵及灯丝镜筒烘烤。

2. 每半年进行一次机械泵油维护或更新。

扫描电镜样品制备方法一、取材组织块小于3立方毫米（单细胞培养或收集展片于盖玻片或滤膜上）。

二、固定前固定：2.5%戊二醛（磷酸缓冲液配制）固定2小时或更长时间。

用0.1M pH7.4磷酸盐缓冲液漂洗三次，每次10分钟。

三、脱水＊脱水在4度冰箱内进行，所有脱水步骤建议在专用的冷冻干燥杯中进行，冷冻干燥杯请于实验前一天到电镜室领取。

＊整个过程，样品不要暴露于空气。

1.乙醇脱水，每一级10-20分钟：30%乙醇—50%乙醇—70%乙醇—90%乙醇—95%乙醇—100%乙醇；2.然后从乙醇逐步过渡到叔丁醇，纯叔丁醇每次10分钟，3次以上；此系列操作均在25度环境中进行；3.纯叔丁醇4度冰箱过夜，样品结晶。

四、冷冻干燥＊需事先预约冷冻干燥时间；第二天上午八点半讲冷冻结冰的样品用冰盒送至电镜室进行冷冻干燥。

五、喷金附件1：细菌类样品的前处理方法1.盖玻片泡酸，清洗，烘干。

用剪刀剪碎，挑出5mm*5mm大小玻片备用。

玻片过大或者过厚影响观察效果。

2.菌液或样品悬液离心，需要可进行清洗，加入固定液，吹散固定，于4度冰箱固定2小时左右。

3.固定结束后，去固定液，加入PBS浸泡清洗，10分钟。

离心去PBS，固体沉淀根据量多少，加入适量PBS，制成浓度较高的悬液（目测较混浊）。

样品浓度对后期吸附有较大影响，浓度过低可能吸附量会很少。

4.取鸡蛋清，稀释3-5倍（一定要稀释！蛋清过浓会包裹样品），之前准备好的玻片放入液体内蘸一下，取出晾干至触摸感觉有点黏的状态（快干的状态）。

将第3步取得的悬液滴在玻片上，吸附30秒到1分钟，用滤纸吸去多余液体。

（样品悬液在玻片上停留时间过长将导致样品被蛋清完全包裹而无法观察）。

5.在玻片上滴加固定液，固定10分钟，固定后用PBS浸泡清洗10分钟，放入干燥杯开始进行脱水。

磷酸盐缓冲液(PBS)a.磷酸盐缓冲液（0.2M）甲液：0.2M的磷酸氢二钠溶液乙液：0.2M的磷酸二氢钠溶液Na2HPO42H2O 35.61g (Na2HPO47H2O) 53.65g (Na2HPO412H2O) 71.64g NaH2PO4H2O 27.60g ( NaH2PO42H2O) 31.21g加蒸馏水溶解成1000ml 加蒸馏水溶解成1000ml按下表混合甲、乙两液既得所需pH的0.2M缓冲液0.2M磷酸盐缓冲液的配制将溶液用蒸馏水1：1稀释，则配得0.1M的缓冲液。

扫描电镜样品制备流程
1.样品准备与固定（实验室完成）
a)固体培养样品：在固体琼脂平板上培养至合适阶段，用刀片切5mm*5mm大小样
品2至4块，置于预冷的2.5%戊二醛-PBS溶液中，4℃固定2小时以上或过夜；
b)液体培养样品：在液体培养基中摇培至合适阶段，离心去上清，加入预冷的2.5%
戊二醛-PBS溶液，轻轻弹起混匀，4℃固定2小时以上或过夜；
2.样品梯度脱水（实验室或平台）
a)准备50%，70%，85%，95%，100%乙醇溶液；
b)梯度脱水操作：
i.固体样品可以直接置于2ml EP管中操作，液体样品离心后去上清，将样品取
出置于滤纸中包好；
ii.分别用50%，70%，85%，95%乙醇脱水15分钟；
iii.用100%乙醇脱水3次；
3.样品超临界流体干燥（平台）
4.样品喷金（平台）
5.扫描电镜观察（平台）。

场发射电子显微镜的样品制备方法场发射电子显微镜（Field Electron Microscope，简称FEM）是一种常用于观察材料微观结构的高分辨率显微镜。

在使用FEM进行样品观察前，必须进行样品制备，以确保得到清晰且可靠的图像。

本文将介绍一些常见的场发射电子显微镜样品制备方法，并探讨它们的优缺点。

首先，常见的样品制备方法之一是机械研磨。

这种方法适用于较硬的材料，如金属和陶瓷。

制备过程中，需要使用砂纸、研磨液和研磨机等工具。

首先，用较粗的砂纸对样品进行粗磨，以去除表面污物和不平整处。

然后，逐渐使用精细砂纸进行研磨，直到得到平滑的表面。

最后，使用亮度研磨材料进行最后的抛光，以减少表面粗糙度。

然而，机械研磨方法有一定的局限性。

首先，它对材料的要求较高，只适用于较硬的材料。

其次，研磨过程中难免会产生机械变形和残留应力，可能导致样品结构的改变。

除此之外，机械研磨法还需要较长时间，且对操作人员的技术要求较高。

另一种常见的样品制备方法是电解抛光。

该方法适用于各种材料，特别是对于软材料和易氧化的材料具有较好的效果。

制备过程中，需要将样品置于电解槽中，通过在电解液中加入适当的抛光剂，通过电流控制和短时间的抛光，有效地去除样品表面的氧化物和不均匀物质。

然而，电解抛光方法也存在着一些问题。

首先，由于电解液中的化学成分和操作条件的不同，可能导致样品表面的化学成分和形貌发生改变。

因此，在选择电解液和抛光条件时，需要根据具体要求进行合理的选择。

其次，电解抛光需要关注电流的选择和控制，以避免过度抛光或抛光不均匀的问题。

此外，电解抛光需要较为复杂的设备和操作步骤，对操作人员的技术要求较高。

除了机械研磨和电解抛光之外，还有一些其他的样品制备方法，如离子刨削、化学刻蚀等。

离子刨削是利用离子束撞击样品表面，去除表面原子层的方法。

这种方法适用于各种材料，可以得到较低表面粗糙度和较少的机械变形。

然而，离子刨削过程中可能会导致样品表面的化学变化和电荷效应，需要进行相应的补偿和处理。

场发射新扫描电镜基本操作规程1检查仪器状态,放入样品,必须戴手套操作,将制备好的样品放入样品座中。

调节样品高度，样品不得高于样品座上边沿。

2 预抽室放气，按下“Vent”键，打开预抽室仓门，将样品座平边推入样品座卡槽，关上仓门并扣紧，按下“EVAC”键，抽真空。

3观察样品，待真空抽至“4.4×10-4”后，点加电压“ON”，待电流上升至10uA的发射电流后，按下“GUN”。

4 加速电压逐步从低到高升到5kv，工作距离一般选用10mm。

5 控制图像移动可用鼠标右键单击实现，可将点击目标移至屏幕中央。

6 Low Mag（快速移动到要观察的样品上），ACB（自动黑白对比）--调焦—改变放大倍数--配合Alignment，和像散调节—得到一幅满意的图像；7 图像存储，在保存一幅图像之前，直接在Quick View时按Photo键，在操作下一步之前点Freeze解除。

8 取出样品，先关闭“Gun”灯亮，关闭高压，按下“Exchange P osition”键。

确认“EXCH POSN”灯亮；9 将样品杆放下置水平位置，向前轻推样品杆至无法再推动为止。

10 按下“Vent”键，待Vent指示灯停止闪烁，松开预抽室锁扣，打开预抽室，取出样品，将预抽室抽好真空（按“EVAC”键）。

场发射新扫描电镜注意事项（1）在接触到样品座的所有操作，必须戴手套；（2）在拧样品座上的螺丝时，要轻拧，不得使大力，防止固定螺丝损坏；（3）换样品时样品杆只能在水平方向上平行滑动，不得随意倾斜、旋转等，样品杆操作要在水平方向上轻推轻拉；（4）样品预抽室放大气前必须关闭高压系统；（5）关闭高压系统前必须先关闭“Gun”--灯亮。

操作顺序不得反转；（6）在打开“Gun”--灯灭时，样品室真空度必须达到4.4×10-4Pa；（7）严禁测试磁性材料样品；（8）样品测试前必须确定其粘结的牢固程度，防止悬浮颗粒进入电镜；（9）禁止操作样品杆、样品升降台、轨迹球外旋钮、背散射按钮（否则出现问题，后果自负，仪器损坏，负责赔偿）.预约扫描电镜须知1.样品必须清洗干净，特别是腐蚀样品，需用乙醇彻底清洗，之后在测试之前烘箱烘干2-5小时；2.禁止送磁性材料样品测试，请提前确认样品有无磁性；3.禁止使用U盘或外带光盘拷贝数据，以免电脑软件中毒；4.块体样品大小8mm*8mm*8mm以内，超出的请提前切割处理；5.测试时禁止在实验室打闹，禁止学生触摸实验设备，设备有高压电，以免发生危险；6.预约请提前1天以上，周末和晚上请勿打扰；7.未经培训的人员，禁止操作仪器设备；8.仪器设备贵重，请来测试人员注意，如有损坏照价赔偿；9.测试完请填写实验记录，打扫实验室。

扫描电镜操作流程操作扫描电镜是一项需要仔细操作和准确实施的过程。

以下是一份详细的扫描电镜操作流程，请按照顺序操作。

1. 准备工作在进行扫描电镜操作之前，您需要做一些准备工作。

首先，确保扫描电镜的工作环境整洁，没有灰尘或杂物。

然后，检查电镜的供电情况和仪器状态，确保电源正常连接并处于稳定状态。

2. 样品制备选择您要观察的样品，并进行适当的制备。

具体制备步骤会因不同的样品类型而有所不同，但一般包括固定样品、切片和上样。

确保样品处理过程中遵循相应的安全规范，并使用适当的工具和试剂。

3. 装载样品将制备好的样品装入扫描电镜样品室。

这一步需要小心操作，以免损坏样品或者导致其他问题。

确保样品正确而稳定地安装在样品台上，并避免触碰到样品表面。

4. 调整仪器参数在开始观察前，您需要调整扫描电镜的一些参数，以获得最佳观察效果。

首先，调整电子束的加速电压。

根据您的样品类型和需要观察的细节，选择适当的加速电压。

然后，调整电子束的聚焦和对准，以确保电子束能够准确地照射到样品表面。

5. 图像获取调整好仪器参数后，您可以开始进行图像获取。

使用扫描电镜软件控制图像采集过程。

在获取图像前，确保样品所在区域是清晰可见的，并根据需要选择适当的放大倍数。

同时，确保在图像获取过程中保持仪器的稳定性，避免外部干扰。

6. 数据分析与保存当您获得一组满意的图像后，可以对这些图像进行进一步的分析。

使用扫描电镜软件可以进行图像增强、测量、标记等操作。

根据您的需要，对图像进行必要的分析，并将结果进行记录和保存。

7. 清理与关闭当完成扫描电镜操作后，确保对实验环境进行清理。

处理好使用过的化学试剂和样品残留物，并将仪器内外部进行清洁。

断开电源，并依据实验室的相关规定进行仪器关闭。

通过遵循以上流程，您可以顺利进行扫描电镜操作，并获得准确可靠的结果。

请确保在操作过程中保持耐心和仔细，以确保实验的成功进行。

场发射扫描电子显微镜实验操作扫描电子显微镜（SEM）是一种能够获得高分辨率表面形貌信息的重要工具。

在实验室中，我们经常会使用场发射扫描电子显微镜来观察样品的微观结构和形貌。

本文将介绍场发射扫描电子显微镜的实验操作步骤。

实验准备在进行场发射扫描电子显微镜实验之前，我们需要进行一些准备工作。

首先，确保实验室环境干净整洁，以避免样品受到污染。

其次，检查扫描电子显微镜设备，确保设备正常工作。

最后，准备好待观察的样品，并确保样品表面平整干净。

样品处理与加载处理样品是进行场发射扫描电子显微镜实验的关键步骤。

首先，将待观察的样品切割成适当大小，并利用相关方法处理表面以去除可能的杂质。

然后，将样品加载到扫描电子显微镜样品台上，并使用夹具固定样品。

参数设置在进行扫描电子显微镜实验前，需要设置合适的参数以获得清晰的显微结构图像。

首先，调整加速电压和工作距离，以适应待观察样品的性质和尺寸。

其次，设置扫描速度和倍率，以获得所需的图像分辨率。

最后，根据需要选择不同的检测模式和滤波器。

图像获取与分析当参数设置完成后，可以开始进行样品的图像获取。

通过扫描电子束对样品进行成像，获得样品表面的细微结构信息。

在获取图像后，可以利用相应软件对图像进行分析，包括测量尺寸、分析形貌等。

同时，可以记录图像和相应数据以备后续分析。

结束实验与维护实验结束后，及时关闭扫描电子显微镜设备，并对设备进行清洁和维护。

将样品从样品台取下，妥善保存或处理。

同时，整理实验记录和数据，保留有关信息以备后续参考。

通过以上步骤，我们可以完成一次成功的场发射扫描电子显微镜实验操作。

这不仅可以帮助我们深入了解材料的微观结构和形貌，还可以为科学研究和工程应用提供重要参考。

希望本文对您进行场发射扫描电子显微镜实验操作有所帮助。

仪器操作流程扫描电子显微镜的样品制备步骤仪器操作流程扫描电子显微镜的样品制备步骤扫描电子显微镜（Scanning Electron Microscope，SEM）是一种高分辨率的显微镜，广泛应用于材料科学、生命科学、纳米技术等领域中的表面形貌和成分分析。

在使用SEM之前，样品的制备步骤十分重要，本文将介绍扫描电子显微镜样品制备的流程。

步骤一：样品选择和切割首先，根据实验需求选择合适的样品。

样品可以是均匀材料的薄片，也可以是复杂材料的小块或碎片。

对于均匀材料，可以使用切割机或者砂轮切割机将样品切割成适当大小的薄片。

对于复杂材料，可以使用砂纸和十字锯来切割。

切割时要注意选择合适的切割液、切割速度和切割角度，以避免样品损坏和变形。

步骤二：样品固定将切割好的样品放入合适的试管或者样品架中，使用合适的固定剂将样品固定。

常用的固定剂有蜡、树脂和聚合物等。

固定剂的选择要根据样品的性质和实验需求来确定。

对于坚硬的材料，可以使用聚合物来固定，对于易破碎的材料，可以使用蜡或树脂来固定。

步骤三：样品研磨和抛光为了获得平滑的样品表面，需要对样品进行研磨和抛光。

首先，使用粗砂纸或者砂轮对样品进行研磨，去除表面的粗糙度和切割痕迹。

然后，使用逐渐细化的砂纸或研磨液对样品进行抛光，直到获得所需的光洁度和平整度。

在抛光过程中，要注意使用合适的抛光液和抛光时间，避免过度抛光导致样品表面变形或者损坏。

步骤四：样品清洁抛光完成后，需要对样品进行清洁，以去除表面的杂质和污染物。

首先，使用去离子水或酒精将样品浸泡，去除表面的油脂和有机物。

然后，使用超声波清洗仪将样品进行超声波清洗，以去除较为顽固的污染物。

最后，用去离子水将样品冲洗干净，并用氮气吹干。

步骤五：导电涂层扫描电子显微镜需要样品具有良好的导电性能，因此需要对样品进行导电涂层。

常用的导电涂层材料有金、铂、银和碳等。

涂层可以使用喷雾法、溅射法或者真空蒸镀法来完成。

涂层过程中要注意涂层均匀度和厚度的控制，以确保样品的导电性能和显微观察效果。

3。

1 试样制备技术试样制备技术在电子显微术中占有重要的地位，它直接关系到电子显微图像的观察效果和对图像的正确解释。

如果制备不出适合电镜特定观察条件的试样，即使仪器性能再好也不会得到好的观察效果.和透射电镜相比,扫描电镜试样制备比较简单。

在保持材料原始形状情况下，直接观察和研究试样表面形貌及其它物理效应（特征），是扫描电镜的一个突出优点。

扫描电镜的有关制样技术是以透射电镜、光学显微镜及电子探针X射线显微分析制样技术为基础发展起来的，有些方面还兼具透射电镜制样技术，所用设备也基本相同。

但因扫描电镜有其本身的特点和观察条件,只简单地引用已有的制样方法是不够的.扫描电镜的特点是：①观察试样为不同大小的固体（块状、薄膜、颗粒），并可在真空中直接进行观察。

②试样应具有良好的导电性能,不导电的试样，其表面一般需要蒸涂一层金属导电膜。

③试样表面一般起伏（凹凸）较大。

④观察方式不同,制样方法有明显区别。

⑤试样制备与加速电压、电子束流、扫描速度（方式）等观察条件的选择有密切关系。

上述项目中对试样导电性要求是最重要的条件.在进行扫描电镜观察时，如试样表面不导电或导电性不好，将产生电荷积累和放电，使得入射电子束偏离正常路径，最终造成图像不清晰乃至无法观察和照相。

3。

1。

1 块状试样制备1．导电性材料导电性材料主要是指金属,一些矿物和半导体材料也具有一定的导电性。

这类材料的试样制备最为简单.只要使试样大小不得超过仪器规定（如试样直径最大为φ25mm,最厚不超过20mm等)，然后用双面胶带粘在载物盘，再用导电银浆连通试样与载物盘（以确保导电良好）,等银浆干了（一般用台灯近距离照射10分钟，如果银浆没干透的话，在蒸金抽真空时将会不断挥发出气体，使得抽真空过程变慢）之后就可放到扫描电镜中直接进行观察。

但在制备试样过程中，还应注意：①为减轻仪器污染和保持良好的真空，试样尺寸要尽可能小些。

②切取试样时，要避免因受热引起试样的塑性变形，或在观察面生成氧化层。

场发射扫描电镜使用方法一、场发射扫描电镜的基本了解。

1.1 场发射扫描电镜是个相当厉害的家伙呢。

它就像一个超级放大镜，可以把微观世界的东西看得清清楚楚。

这东西构造可不简单，有电子枪、电磁透镜这些重要部件。

电子枪就像是它的能量源，产生电子束，然后通过电磁透镜聚焦，最后打到样品上。

1.2 它能观察的样品类型可多啦。

不管是金属、陶瓷，还是生物样品，它都能一展身手。

不过不同的样品，在观察之前得做不同的处理，这就像是给不同的人梳妆打扮，各有各的讲究。

二、样品的制备。

2.1 对于金属样品，如果表面比较粗糙，那得先打磨得光滑平整些。

这就好比把一块坑坑洼洼的石头打磨成漂亮的鹅卵石。

打磨之后呢，还得清洗干净，可不能让杂质留在上面捣乱。

2.2 生物样品就更麻烦些了。

有的生物样品含水量高，那得先进行脱水处理。

这脱水就像把湿漉漉的衣服晾干一样重要。

然后还得固定、镀膜等一系列操作。

如果这些步骤没做好，就像盖房子没打好地基，后面观察就会出问题。

2.3 陶瓷样品相对来说可能没那么复杂，但也得把表面处理干净，确保没有灰尘或者其他脏东西附着。

这就如同洗脸一样，要把脸洗得干干净净才能见人。

三、电镜的操作。

3.1 开机那可得小心谨慎。

就像启动一辆超级跑车，得按照步骤来。

先打开电源，然后预热一段时间。

这个预热就像运动员比赛前的热身，必不可少。

预热完了，要检查各种参数设置是否正确，这就好比出门前检查钥匙有没有带一样重要。

3.2 放置样品的时候也要轻拿轻放。

把样品放到样品台上，要确保它放得稳稳当当的。

这时候就像把宝贝放在一个安全的地方一样。

然后调整电子束的参数，像调整电子束的强度、聚焦等。

这就像调整相机的焦距一样，要让图像清晰。

在观察过程中，可能还需要根据实际情况不断调整参数，直到得到满意的图像。

这就像厨师做菜，得不断调味才能做出美味佳肴。

四、图像的获取与分析。

4.1 当参数调整好后，就可以获取图像啦。

这图像就像是微观世界的一扇窗户，通过它能看到很多奇妙的东西。