在蛋白质混合样品中各蛋白质组分的分子大小和形状 以及所带电荷多少等因素所造成的电泳迁移率有差别。在 聚丙烯酰胺凝胶系统中,加入一定量的十二烷基硫酸钠 (SDS),形成蛋白质-SDS复合物,这种复合物由于结 合了大量的SDS,使蛋白质丧失了原有的电荷状态,形成 了仅保持原有分子大小为特征的负离子团块,从而降低或 消除了各种蛋白质分子之间的天然的电荷差异,此时,蛋 白质分子的电泳迁移率主要取决于它的分子量大小,而其 它因素对电泳迁移率的影响几乎可以忽略不计。
四、浓缩胶的配制(5%)
试剂
H2O 凝胶贮备液 分离胶缓冲液(pH6.8) 10% SDS
TEMED 10%过硫酸铵
总体积
体积 2.92(ml) 0.8(ml) 1.25(ml) 0.05(ml)
5(ul) 25(ul) 5.05(ml)
五、浓缩胶的灌注和聚合
用移液管将所配制的浓缩胶缓冲液沿 着凝胶腔的长玻璃板的内面缓缓注入,将 梳子插入胶液顶部,放置室温下待其聚合。
• 必须学会欣然面对的一种结果----被接纳
• 以具体的形式感谢招聘单位的接纳,如邮件、短信 • 考虑怎样使自己的知识能力更适应工作需要 • 把走进工作岗位当作职业生涯的重要的第一步,认
真思考如何为以后的发展开好头。
结束语
当你尽了自己的最大努力时,失败也是伟大的, 所以不要放弃,坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End
相对迁移率mR=蛋溴白酚质蓝样区品带距中分心离距胶分顶离端 胶迁 顶移 端距 距离 离((ccmm))
以标准蛋白质分子量的对数对相对迁移 率作图,得到标准曲线,根据待测样品相对 迁移率,从标准曲线上计算出其分子量。