卵巢组织细胞植入

２０２０年㊀９月第４０卷㊀第９期基础医学与临床Ｂａｓｉｃ＆ＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅＳｅｐｔｅｍｂｅｒ２０２０Ｖｏｌ.４０㊀Ｎｏ.９收稿日期:２０１９￣０６￣２８㊀㊀修回日期:２０１９￣１１￣０６基金项目:国家自然科学基金(８１７７１５８３)∗通信作者(ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ):ｓｔｏｎｅ９１０２１＠１６３.ｃｏｍ文章编号:１００１￣６３２５(２０２０)０９￣１２５２￣０４短篇综述㊀人造卵巢的研究进展吴思婷１ꎬ２ꎬ李㊀娜１ꎬ２ꎬ魏敏丽２ꎬ３ꎬ郑莉萍１ꎬ２ꎬ３∗(南昌大学江西医学院１ 护理学院ꎻ２ 江西省生殖生理与病理重点实验室ꎻ３ 医学实验教学中心ꎬ江西南昌３３００００)摘要:由于女性生殖器官的易衰老性ꎬ如何延缓卵巢功能减退乃至重塑卵巢功能已成为生殖医学领域的研究热点ꎮ随着生物医学工程的进一步发展ꎬ人造卵巢的出现为重塑卵巢功能提供了一个崭新的选择ꎮ关键词:人造卵巢ꎻ基质ꎻ卵泡ꎻ因素中图分类号:㊀㊀文献标志码:ＡＲｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆａｒｔｉｆｉｃｉａｌｏｖａｒｙＷＵＳｉ￣ｔｉｎｇ１ꎬ２ꎬＬＩＮａ１ꎬ２ꎬＷＥＩＭｉｎ￣ｌｉ２ꎬ３ꎬＺＨＥＮＧＬｉ￣ｐｉｎｇ１ꎬ２ꎬ３∗(１ ＳｃｈｏｏｌｏｆＮｕｒｓｉｎｇꎻ２ ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄＰａｔｈｏｌｏｇｙｉｎＪｉａｎｇｘｉＰｒｏｖｉｎｃｅꎻ３ ＭｅｄｉｃａｌＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＴｅａｃｈｉｎｇＣｅｎｔｅｒꎬＪｉａｎｇｘｉＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅꎬＮａｎｃｈａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＮａｎｃｈａｎｇ３３００００ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ａｓａｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｔｈｅｃｈａｌｌｅｎｇｅｆｒｏｍｔｈｅａｇｉｎｇｏｆｆｅｍａｌｅｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｏｒｇａｎｓꎬｈｏｗｔｏｄｅｌａｙｔｈｅｏｖａｒｉａｎｆｕｎｃｔｉｏｎｄｅｃｌｉｎｅａｎｄｅｖｅｎｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｔｈｅｏｖａｒｉａｎｆｕｎｃｔｉｏｎｈａｓｂｅｃｏｍｅａｒｅｓｅａｒｃｈｈｏｔｓｐｏｔｉｎｔｈｅｆｉｅｌｄｏｆｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｍｅｄｉｃｉｎｅ.Ｗｉｔｈｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇꎬｔｈｅｅｍｅｒｇｅｎｃｅｏｆａｒｔｉｆｉｃｉａｌｏｖａｒｉｅｓｐｒｏｖｉｄｅｓａｎｅｗｏｐｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｏｖａｒｉａｎｆｕｎｃｔｉｏｎ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ａｒｔｉｆｉｃｉａｌｏｖａｒｙꎻｍａｔｒｉｘꎻｆｏｌｌｉｃｌｅꎻｆａｃｔｏｒｓ㊀㊀卵巢(ｏｖａｒｙ)作为女性的生殖器官ꎬ具有生殖功能和分泌性激素功能ꎮ随着环境变化㊁生活与工作压力加大等原因的出现ꎬ女性卵巢功能提前减退发病率日益增多ꎬ且发病年龄逐年下降ꎬ对女性患者的生活质量构成严重影响[１]ꎮ近年来ꎬ针对逐年增加的肿瘤患者ꎬ放化疗治疗一方面在提高女性癌患者生存率方面起着重要作用ꎬ另一方面也常常导致其卵巢早衰和不孕[２]ꎮ故探究卵巢功能的保持与重塑对于改善女性生活质量和恢复生育能力具有重要意义ꎮ２０１０年首次报道 人造卵巢(ａｒｔｉｆｉｃｉａｌｏｖａｒｙ) ꎬ为重塑卵巢功能提供了一个崭新的选择[３]ꎬ同年被美国«时代»(Ｔｉｍｅ)周刊列为十大医学突破之一ꎬ引起全球生殖科学者的关注和积极探索[４]ꎮ本文主要从 人造卵巢 的概念㊁制造方法简要介绍以及所需要的条件与因素等方面进行综述ꎬ并提出发展趋势ꎬ为重塑或替代卵巢功能提供参考ꎮ１㊀人造卵巢的概念科学家模拟卵巢结构构造模型ꎬ并将该模型植入雌性活体内能替代卵巢发挥作用ꎮ一般情况下从组织中分离窦前卵泡并封装于基质中ꎬ维持卵泡３Ｄ结构情况下构建卵巢模型并进行移植入体ꎬ该模型取代卵巢发挥作用ꎬ为卵泡提供适宜的生存环境ꎬ促进卵泡生存发育[５￣６]ꎮ吴思婷㊀人造卵巢的研究进展２㊀人造卵巢制造方法简要介绍一般来说ꎬ人造卵巢模型由基质构成的支架封装㊁保护和维持卵泡的３Ｄ结构ꎬ基质能够有效降解来促进卵泡的生存发育㊁细胞的增殖分化以及血管的形成ꎮ研究人员于２０１０年研制了第一个 人造卵巢 ꎬ研究人员从育龄女性窦前卵泡中分离鞘细胞和颗粒细胞ꎬ将其植入微模凝胶中组成三维显微组织ꎬ进行体外培养卵母细胞至其成熟ꎬ该研究也可以作为卵泡的生理性和毒理性研究[３]ꎮ这个人造卵巢的构建为生育研究提供了一个有潜力的新工具并可运用于不孕治疗ꎮ一项研究显示ꎬ科学家成功研制出３Ｄ打印卵巢并运用于小鼠体内并繁殖后代[７]ꎬ７只小鼠里有３只用新卵巢排卵并正常怀孕生下健康的鼠崽[８]ꎮ３㊀条件与因素３ １㊀基质(ｓｕｂｓｔｒａｔｅ)层面人造卵巢作为一个新取代 卵巢样 结构ꎬ为卵泡提供适当的生存环境ꎬ基质需要降解来促进卵泡生长㊁血管形成以及周围细胞分化ꎮ不同的材料被用来构建人造卵巢ꎬ血浆凝块作为自体材料被成功作为生物材料移植细胞ꎬ由于其良好的相容性以及富含生长因子ꎬ促进细胞的黏附㊁增殖与分化[９]ꎬ但其存在降解率快ꎬ卵泡易丢失等缺点ꎮ纤维蛋白凝胶由纤维蛋白原与凝血酶组成ꎬ由于其具有低炎性反应㊁相容性好㊁良好的降解能力以及促进血管形成等优点被广泛运用于在组织工程中充当基质[１０]ꎮ而且ꎬ其降解率㊁硬度㊁形状以及纤维结构可以根据纤维蛋白原与凝血酶的浓度调节[１１]ꎮ藻盐酸不仅在移植人造卵巢中而且在体外培养人造卵巢中用于封装分离出的卵泡ꎬ其良好的生物相容性以及广泛性在再生医学中被广泛充当基质[１２]ꎮ胶原同样被广泛运用于工程组织中ꎮ合成聚合物由于其生物相容性以及其降解率㊁多孔性㊁弹性可以依据临床应用进行调整运用于再生医学中[１３]ꎮ卵巢进入皮质和髓质区域存在不同的硬度ꎬ因此在选用生物材料策略同时考虑空间变化来模拟结构使人造卵巢的性能和功能达到最佳ꎮ未来的研究需要进一步实验根据需要选用合适的基质来构建人造卵巢ꎮ３ ２㊀卵泡(ｆｏｌｌｉｃｌｅ)层面卵泡是卵巢的基本单位ꎬ卵泡的生存发育影响着卵巢功能ꎮ构建人造卵巢关键的一步是从卵巢组织中分离卵泡ꎬ不同的分离方法影响着卵泡的分离质量ꎬ卵泡移植不仅要考虑移植的数量ꎬ而且需要注重移植卵泡的质量ꎮ近年来ꎬ探索出不同的分离卵泡的方法ꎬ科学家优化了分离卵泡的技术运用于临床实践中ꎮ在构建人造卵巢的过程中ꎬ发现运用肿瘤分离酶对卵巢皮质进行消化提取卵泡相比运用释放酶提取卵泡在植入后卵泡的活性力更好[１４]ꎮ根据个体开发了一种量身定制的卵泡分离程序ꎬ最大程度提高了分离卵泡的质量和数量ꎬ可以运用于人造卵巢的临床实践中[１５]ꎮ初步发现在使用低浓度纤维蛋白酶原为基质构造人造卵巢过程中ꎬ相比植入原始￣初级卵泡ꎬ植入次级卵泡恢复率高于前者ꎮ维持卵母细胞和颗粒细胞之间的联系对于促进卵泡的生成很有必要[１６]ꎮ一般情况下ꎬ卵泡需要维持３Ｄ结构来维持颗粒细胞与卵母细胞之间的联系ꎬ因此构建人造卵巢需要有效维持卵泡的３Ｄ结构ꎬ创造适合卵母细胞成熟的条件ꎮ关于构建人造卵巢ꎬ明确哪些因素影响卵泡的生成过程很必要ꎬ这样能在植入第一时间控制卵泡的生存与发育ꎮ３ ３㊀细胞(ｃｅｌｌｕｌａｒ)层面在构建人造卵巢的过程中ꎬ并入卵巢细胞对于刺激卵巢微环境以及促进卵泡的生存和成熟起着重要作用ꎮ卵巢细胞(间质细胞和内皮细胞)的分离可以像分离卵泡一样从卵巢组织中分离ꎮ通过评估从皮质和髓质㊁冷冻和新鲜卵巢中分离卵巢细胞发现ꎬ在新鲜髓质的卵巢中分离出的细胞数量多且有效性高以及有利于改善移植后血管的形成[１７]ꎮ卵巢间质细胞对于早期卵泡的形成很有必要ꎬ为卵泡提供结构支持以及传达信号ꎮ在移植卵巢细胞的研究中ꎬ科学家发现从人类卵巢组织中分离的间质细胞的存在可以提高基质的降解率以及在异种移植之后易形成卵巢样结构[１８]ꎮ卵泡的生存发育离不开血液的供应ꎬ在移植的第１个月血管的形成对于卵泡的存活异常关键ꎬ因此移植人造卵巢要积极促成血管的形成ꎮ内皮细胞对改善血管形成条件起重要作用ꎬ科学家同样发现在移植人造卵巢同时移植内皮细胞在促进血管形成方面的重要性[１８]ꎮ３５２１基础医学与临床㊀㊀Ｂａｓｉｃ＆ＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ２０２０ ４０(９)３ ４㊀血管化(ｖａｓｃｕｌａｒｉｚｅｄ)层面移植后由于没有血液的灌注ꎬ缺血会导致大量原始卵泡的丢失ꎬ直接影响移植的成功率ꎮ因此ꎬ移植后血管的形成对于移植成功有重要意义ꎬ具备有孔结构的支架以及一些促血管形成因子的加入有利于改善血管形成条件ꎮ有研究发现在小鼠腹主动脉植入有孔的支架被证实能增加血管化ꎬ有孔结构有利于氧气交换以及代谢物排出ꎬ为卵泡生存发育创造良好环境[１９]ꎮ血管生成因素可以通过化学方法或者物理方式嵌入支架ꎮ基本成纤维细胞生长因子(ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒꎬｂＦＧＦ)有促成血管形成的作用ꎬ科学家研究发现将释放ｂＦＧＦ的支架移入小鼠体内诱导血管形成ꎮ除了维持颗粒细胞与卵母细胞必要的联系㊁植入间质细胞与内皮细胞提供结构支持以及改善移植后血管形成条件来促进卵泡的生存与发育[２０]ꎬ从冷冻组织中分离卵泡需要评估是否引入癌细胞ꎬ研究者在用纤维蛋白封胶的人造卵巢中植入１００个左右白血病细胞ꎬ移植２０周后观察发现没有出现白血病迹象[２１]ꎮ但是在临床上ꎬ即使最轻微的风险也应该避免ꎬ移植前确保清除恶性癌细胞ꎮ４㊀未来与展望人造卵巢其结构和组成与天然卵巢相当ꎬ同时具备正常的分泌性激素与生育功能ꎮ人造卵巢的出现为卵巢功能减退年轻患者重塑卵巢功能恢复生育力迎来曙光ꎬ也可以用于绝经患者改善绝经期女性症状ꎬ提高女性绝经期生活质量ꎮ此外ꎬ亦可以用作体外药物试验以及一些生物学机制研究ꎮ目前ꎬ构建人造卵巢依旧处于起步阶段ꎬ大多数实验都是在小鼠体内进行ꎬ人类的卵泡大小以及生理周期与小鼠存在差别ꎬ接下来需要进一步在人体进行实验验证ꎮ未来ꎬ在什么位置植入人造卵巢最佳发挥其生殖功能和分泌功能以及对人造卵巢寿命的考量也是科学家需要解决的问题ꎮ近年来以干细胞和生物材料为主的再生医学也将成为未来人类生命科学及医学诊疗新的突破口ꎬ为重塑卵巢功能指引新的方向ꎮ人造卵巢在人造生殖技术领域迈出了坚实的一步ꎬ相信在不久的将来ꎬ人造卵巢会成功运用于人体ꎬ在重塑卵巢功能方面开辟新天地ꎮ参考文献:[１]鲁雅娟ꎬ张秀ꎬ王佩娟.王佩娟教授治疗卵巢储备功能低下常用药对[Ｊ].吉林中医药ꎬ２０１６ꎬ３６:１２１１￣１２１３.[２]ＧｒｅｅｎＤＭꎬＳｋｌａｒＣＡꎬＪｒＢＪꎬｅｔａｌ.Ｏｖａｒｉａｎｆａｉｌｕｒｅａｎｄｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｏｕｔｃｏｍｅｓａｆｔｅｒｃｈｉｌｄｈｏｏｄｃａｎｃｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔ:ｒｅｓｕｌｔｓｆｒｏｍｔｈｅｃｈｉｌｄｈｏｏｄｃａｎｃｅｒｓｕｒｖｉｖｏｒｓｔｕｄｙ[Ｊ].ＪＣｌｉｎＯｎｃｏｌꎬ２００９ꎬ２７:２３７４￣２３８１.[３]ＫｒｏｔｚＳＰꎬＲｏｂｉｎｓＪＣꎬＦｅｒｒｕｃｃｉｏＴＭꎬｅｔａｌ.Ｉｎｖｉｔｒｏｍａｔｕ￣ｒａｔｉｏｎｏｆｏｏｃｙｔｅｓｖｉａｔｈｅｐｒｅ￣ｆａｂｒｉｃａｔｅｄｓｅｌｆ￣ａｓｓｅｍｂｌｅｄａｒｔｉ￣ｆｉｃｉａｌｈｕｍａｎｏｖａｒｙ[Ｊ].ＪＡｓｓｉｓｔＲｅｐｒｏｄＧｅｎｅｔꎬ２０１０ꎬ２７:７４３￣７５０.[４]张婷ꎬ王晓民.解读«时代»周刊２０１０年度十大医学突破[Ｊ].首都医科大学学报ꎬ２０１１ꎬ３２:１５９￣１６３. [５]ＡｍｏｒｉｍＣＡꎬＳｈｉｋａｎｏｖＡ.Ｔｈｅａｒｔｉｆｉｃｉａｌｏｖａｒｙ:Ｃｕｒｒｅｎｔｓｔａｔｕｓａｎｄｆｕｔｕｒｅｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ[Ｊ].ＦｕｔｕｒｅＯｎｃｏｌꎬ２０１６ꎬ１２:２３２３￣２３３２.[６]ＤｏｎｎｅｚＪꎬＤｏｌｍａｎｓＭＭ.Ｆｅｒｔｉｌｉｔｙｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｉｎｗｏｍｅｎ[Ｊ].ＮａｔＲｅｖＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌꎬ２０１７ꎬ３７７:１６５７￣１６６５.[７]关毅.３Ｄ打印卵巢结构重塑小鼠的生育能力[Ｊ].自然杂志ꎬ２０１７ꎬ３９:１７２.[８]ＬａｒｏｎｄａＭＭꎬＲｕｔｚＡＬꎬＸｉａｏＳꎬｅｔａｌ.Ａｂｉｏｐｒｏｓｔｈｅｔｉｃｏ￣ｖａｒｙｃｒｅａｔｅｄｕｓｉｎｇ３Ｄｐｒｉｎｔｅｄｍｉｃｒｏｐｏｒｏｕｓｓｃａｆｆｏｌｄｓｒｅｓｔｏｒｅｓｏｖａｒｉａｎｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｓｔｅｒｉｌｉｚｅｄｍｉｃｅ[Ｊ].ＮａｔＣｏｍ￣ｍｕｎꎬ２０１７:１５２６１￣１５２７０.[９]ＳｅｙｂｏｌｄＤꎬＳｃｈｉｌｄｈａｕｅｒＴＡꎬＧｅｓｓｍａｎｎＪꎬｅｔａｌ.Ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌｓｉｓｐｒｏｍｏｔｅｄｂｙａｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｆｉｂｒｉｎｍａｔｒｉｘ[Ｊ].ＬａｎｇｅｎｂｅｃｋｓＡｒｃｈＳｕｒｇꎬ２０１０ꎬ３９５:７１９￣７２６. [１０]ＬｉＹꎬＭｅｎｇＨꎬＬｉｕＹꎬｅｔａｌ.Ｆｉｂｒｉｎｇｅｌａｓａｎｉｎｊｅｃｔａｂｌｅｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅｓｃａｆｆｏｌｄａｎｄｃｅｌｌｃａｒｒｉｅｒｆｏｒｔｉｓｓｕｅｅｎｇｉｎｅｅｒ￣ｉｎｇ[Ｊ].ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＷｏｒｌｄＪｏｕｒｎａｌꎬ２０１５ꎬ２０１５:６８５６９０.ｄｏｉ:１０.１１５５/２０１５/６８５６９０.[１１]ＬｕｙｃｋｘＶꎬＤｏｌｍａｎｓＭＭꎬＶａｎａｃｋｅｒＪꎬｅｔａｌ.Ｆｉｒｓｔｓｔｅｐｉｎｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇａ３Ｄｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅｆｉｂｒｉｎｓｃａｆｆｏｌｄｆｏｒａｎａｒｔｉｆｉ￣ｃｉａｌｏｖａｒｙ[Ｊ].ＪＯｖａｒｉａｎＲｅｓꎬ２０１３ꎬ６:８３￣９２. [１２]ＳｕｎＪꎬＴａｎＨ.Ａｌｇｉｎａｔｅ￣ｂａｓｅｄｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓｆｏｒｒｅｇｅｎｅｒａ￣４５２１吴思婷㊀人造卵巢的研究进展ｔｉｖｅｍｅｄｉｃｉｎｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ[Ｊ].Ｍａｔｅｒｉａｌｓꎬ２０１３ꎬ６:１２８５￣１３０９.[１３]ＬｉｎＨＫꎬＭａｄｉｈａｌｌｙＳＶꎬＰａｌｍｅｒＢꎬｅｔａｌ.Ｂｉｏｍａｔｒｉｃｅｓｆｏｒｂｌａｄｄｅｒｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ[Ｊ].ＡｄｖＤｒｕｇＤｅｌｉｖＲｅｖꎬ２０１５:４７￣６３.[１４]ＳｃｈｍｉｄｔＶＭꎬＩｓａｃｈｅｎｋｏＶꎬＲａｐｐｌＧꎬｅｔａｌ.ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｔｈｅｅｎｚｙｍａｔｉｃｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆＬｉｂｅｒａｓｅＴＭａｎｄｔｕｍｏｒｄｉｓ￣ｓｏｃｉａｔｉｏｎｅｎｚｙｍｅ:Ｅｆｆｅｃｔｏｎｔｈｅｖｉａｂｉｌｉｔｙｏｆｃｅｌｌｓｄｉｇｅｓｔｅｄｆｒｏｍｆｒｅｓｈａｎｄｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖｅｄｈｕｍａｎｏｖａｒｉａｎｃｏｒｔｅｘ[Ｊ].ＪＢｉｏｍｅｄＭａｔｅｒＲｅｓꎬ２０１８ꎬ１６:５７￣７０.[１５]ＣｈｉｔｉＭＣꎬＤｏｌｍａｎｓＭＭꎬＨｏｂｅｉｋａＭꎬｅｔａｌ.Ａｍｏｄｉｆｉｅｄａｎｄｔａｉｌｏｒｅｄｈｕｍａｎｆｏｌｌｉｃｌｅｉｓｏｌａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｄｕｒｅｉｍｐｒｏｖｅｓｆｏｌｌｉｃｌｅｒｅｃｏｖｅｒｙａｎｄｓｕｒｖｉｖａｌ[Ｊ].ＪＯｖａｒｉａｎＲｅｓꎬ２０１７ꎬ１０:７１￣７９.[１６]ＣｈｉｔｉＭＣꎬＤｏｌｍａｎｓＭＭꎬＯｒｅｌｌａｎａＯꎬｅｔａｌ.Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｆｏｌｌｉｃｌｅｓｔａｇｅｏｎａｒｔｉｆｉｃｉａｌｏｖａｒｙｏｕｔｃｏｍｅｕｓｉｎｇｆｉｂｒｉｎａｓａｍａｔｒｉｘ[Ｊ].ＨｕｍＲｅｐｒｏｄꎬ２０１６ꎬ３１:４２７￣４３５. [１７]ＳｏａｒｅｓＭꎬＳａｈｒａｒｉＫꎬＣｈｉｔｉＭＣꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅｂｅｓｔｓｏｕｒｃｅｏｆｉｓｏｌａｔｅｄｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌｓｆｏｒｔｈｅａｒｔｉｆｉｃｉａｌｏｖａｒｙ:Ｍｅｄｕｌｌａｏｒｃｏｒｔｅｘꎬｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖｅｄｏｒｆｒｅｓｈ?[Ｊ].ＨｕｍＲｅｐｒｏｄꎬ２０１５ꎬ３０:１５８９￣１５９８.[１８]ＤａｔｈＣꎬＤｅｔｈｙＡꎬＶａｎＬＡꎬｅｔａｌ.Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓａｒｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｆｏｒｏｖａｒｉａｎｓｔｒｏｍａｌｔｉｓｓｕｅｒｅｓｔｒｕｃｔｕｒｉｎｇａｆｔｅｒｘｅｎｏ￣ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｏｆｉｓｏｌａｔｅｄｏｖａｒｉａｎｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＨｕｍＲｅｐｒｏｄꎬ２０１１ꎬ２６:１４３１￣１４３９.[１９]ＺｈａｎｇＺꎬＷａｎｇＺꎬＬｉｕＳＭ.Ｐｏｒｅｓｉｚｅꎬｔｉｓｓｕｅｉｎｇｒｏｗｔｈꎬａｎｄｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｓｍａｌｌ￣ｄｉａｍｅｔｅｒｍｉｃｒｏｐｏｒｏｕｓｐｏｌｙ￣ｕｒｅｔｈａｎｅｖａｓｃｕｌａｒｐｒｏｓｔｈｅｓｅｓ[Ｊ].Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓꎬ２００４ꎬ２５:１７７￣１８７.[２０]ＰｅｒｅｔｓＡꎬＢａｒｕｃｈＹꎬＷｅｉｓｂｕｃｈＦꎬｅｔａｌ.Ｅｎｈａｎｃｉｎｇｔｈｅｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｔｈｒｅｅ￣ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｐｏｒｏｕｓａｌｇｉｎａｔｅｓｃａｆｆｏｌｄｓｂｙｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｎｇｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｒｅｌｅａｓｅｂａｓｉｃｆｉｂｒｏ￣ｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ[Ｊ].ＲｅｐｒｏｄＢｉｏｌＥｎｄｏｃｒｉ￣ｎｏｌꎬ２００３ꎬ６５:４８９￣４９７.[２１]ＳｏａｒｅｓＭꎬＳａｕｓｓｏｙＰꎬＳａｈｒａｒｉＫꎬｅｔａｌ.Ｉｓｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｏｆａｆｅｗｌｅｕｋｅｍｉｃｃｅｌｌｓｉｎｓｉｄｅａｎａｒｔｉｆｉｃｉａｌｏｖａｒｙａｂｌｅｔｏｉｎ￣ｄｕｃｅｌｅｕｋｅｍｉａｉｎａｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｍｏｄｅｌ?[Ｊ].ＪＡｓｓｉｓｔＲｅｐｒｏｄＧｅｎｅｔꎬ２０１５ꎬ３２:５９７￣６０６.新闻点击不是所有身体活动都对心脏有益当谈到预防心血管疾病时ꎬ身体活动是经常被提到的有效方法ꎮ不过ꎬ最近一项研究指出ꎬ在某些情况下ꎬ身体活动可能伤害心血管健康ꎮ这份发表在美国«每日健康新闻»(ＨｅａｌｔｈＤａｙＮｅｗｓ)上的研究分析了巴黎前瞻性研究的数据ꎬ该数据追踪了１万多名参与者的健康状况长达１０年ꎬ这些参与者的年龄在５０~７５岁之间ꎮ参与者填写了一份关于在３种情境下的身体活动的频率㊁持续时间和强度的调查表:运动时的身体活动㊁工作时的身体活动及和休闲时的身体活动(如园艺)ꎮ研究使用颈动脉超音波成像技术ꎬ根据其动脉的健康状况评估参与者的心血管健康ꎮ这种方法可用于测量 压力感受性反射(ｂａｒｏｒｅｆｌｅｘ) 的敏感度ꎬ这是身体自动适应血压突然变化的机制ꎮ当该机制受损时ꎬ可能会导致严重的健康问题ꎬ并增加心脏骤停的风险ꎮ研究人员区分了两种压力感受性反射: 机械压力反射 和 神经压力反射 ꎮ异常的机械压力反射往往与衰老引起心血管疾病有关ꎬ而异常的神经压力反射往往与可能导致心脏骤停的心律失常有关ꎮ研究显示ꎬ高强度的运动与更好的神经压力反射有关ꎮ相反ꎬ工作中的身体活动似乎与异常的神经压力反射和动脉硬化程度较高密切相关ꎬ因此可能对心血管有害ꎬ尤其可能与心律失常有关ꎮ研究提醒ꎬ结果并不代表工作中的身体活动对健康有害ꎬ而是指长期做很吃重的工作如举重物可能对健康有负面影响ꎮ刘晓荻㊀译王㊀欣㊀编５５２１。

㊃综述㊃d o i:10.3969/j.i s s n.1671-8348.2022.12.034网络首发h t t p s://k n s.c n k i.n e t/k c m s/d e t a i l/50.1097.r.20220129.1345.008.h t m l(2022-01-30)上皮性卵巢癌腹腔转移机制及治疗的研究进展*金福军1综述,龙行涛2ә审校(1.重庆市东南医院肿瘤科401336;2.重庆大学附属肿瘤医院妇科肿瘤中心400030)[摘要]卵巢癌病死率高居妇科肿瘤首位,多数患者确诊时已为晚期㊂腹腔转移是卵巢癌患者死亡的主要原因之一,其病理生理过程复杂,相关治疗进展迅速㊂本文结合最新国内外相关领域研究,从上皮性卵巢癌腹腔转移分子途径㊁转移分子机制㊁最新治疗策略(腹腔常规化疗㊁腹腔热灌注化疗㊁靶向治疗㊁光动力学治疗等)进行综述,为相关领域基础研究者及临床医生提供参考㊂[关键词]卵巢癌;肿瘤转移;腹腔;治疗;综述[中图法分类号] R737.31[文献标识码] A[文章编号]1671-8348(2022)12-2140-05 P r o g r e s s o n t h e m e c h a n i s m a n d t r e a t m e n t o f e p i t h e l i a lo v a r i a n c a n c e r i n t r a p e r i t o n e a l m e t a s t a s i s*J I N F u j u n1,L O N G X i n g t a o2ә(1.D e p a r t m e n t o f O n c o l o g y,C h o n g q i n g S o u t h e a s t H o s p i t a l,C h o n g q i n g401336,C h i n a;2.G y n e c o l o g i c a l O n c o l o g y C e n t e r,C h o n g q i n g U n i v e r s i t y C a n c e r H o s p i t a l,C h o n g q i n g400030,C h i n a)[A b s t r a c t] O v a r i a n c a n c e r h a s t h e h i g h e s t m o r t a l i t y r a t e a m o n g g y n e c o l o g i c a l t u m o r s,a n d m o s t p a-t i e n t s a r e d i a g n o s e d a t a n a d v a n c e d s t a g e.I n t r a p e r i t o n e a l m e t a s t a s i s i s o n e o f t h e m a i n c a u s e s o f d e a t h i n p a-t i e n t s w i t h e p i t h e l i a l o v a r i a n c a n c e r.I t s p a t h o p h y s i o l o g i c a l p r o c e s s i s c o m p l e x,a n d t h e r e l a t e d t r e a t m e n t s h a v e m a d e r a p i d p r o g r e s s.C o m b i n e d w i t h t h e l a t e s t d o m e s t i c a n d f o r e i g n s t u d i e s i n r e l a t e d f i e l d s,t h i s p a p e r r e-v i e w e d t h e m o l e c u l a r p a t h w a y,m o l e c u l a r m e c h a n i s m a n d t h e l a t e s t t r e a t m e n t s t r a t e g i e s(r o u t i n e i n t r a p e r i t o-n e a l c h e m o t h e r a p y,i n t r a p e r i t o n e a l h y p e r t h e r m i c p e r f u s i o n c h e m o t h e r a p y,t a r g e t e d t h e r a p y,p h o t o d y n a m i c t h e r a p y,e t c.)o f p e r i t o n e a l m e t a s t a s i s o f e p i t h e l i a l o v a r i a n c a n c e r,t o p r o v i d e r e f e r e n c e s f o r b a s i c r e s e a r c h e r s a n d c l i n i c i a n s i n r e l a t e d f i e l d s.[K e y w o r d s]o v a r i a n c a n c e r;t u m o r m e t a s t a s i s;a b d o m i n a l c a v i t y;t h e r a p y;r e v i e w卵巢癌是致死率最高的女性生殖系统恶性肿瘤㊂由于缺乏早期有效的筛查手段,高达70%的卵巢癌患者在晚期才被发现,晚期卵巢癌5年生存率仅为30%左右[1]㊂卵巢癌细胞腹腔种植转移是一个复杂的病理生理过程,不仅涉及肿瘤细胞之间㊁肿瘤细胞与宿主细胞之间的相互作用,而且还涉及许多生物活性分子之间复杂的相互调控机制㊂卵巢癌腹腔种植转移是最常见的转移方式,但卵巢癌扩散的潜在机制尚不明确㊂多年来,大多数研究人员认为卵巢癌通过被动机制转移[2]㊂然而,最近发现卵巢癌细胞也可以通过循环肿瘤细胞血源性转移到大网膜[3],这促使研究者们重新思考卵巢癌腹腔转移的多种方式㊂本综述结合最新研究进展,讨论卵巢癌细胞从原发肿瘤转移到腹腔的可能机制,以及临床治疗潜在靶点与治疗热点㊂1上皮性卵巢癌腹腔转移的分子途径1.1物理流动学说(被动扩散)卵巢癌细胞从原发肿瘤中脱离,沿着腹腔液的循环路径,从盆腔转移到结肠旁㊁肠系膜㊁大网膜等部位,也可借助重力㊁呼吸运动和持续肠蠕动造成肿瘤细胞从下腹部种植上腹部[4]㊂腹水被认为在卵巢癌细胞被动扩散中起着关键作用㊂腹水的具体病因尚不清楚,但临床前和临床观察表明,血管内皮生长因子(v a s c u l a r e n d o t h e l i a l g r o w t h f a c t o r,V E G F)在腹水的积聚中起重要作用,另外癌细胞阻塞淋巴管也可能导致腹水的积聚[5]㊂在大多数卵巢癌病例中,腹水由恶性细胞㊁大量白细胞和高水平的乳酸脱氢酶组成㊂分离的癌细胞通常以多细胞球体的形式漂浮在腹水中,球体植入腹膜器官涉及癌细胞和间皮细胞的相互作用[6]㊂1.2血行转移学说0412重庆医学2022年6月第51卷第12期*基金项目:中国抗癌协会-肿瘤研究青年科学基金(C A Y C18A45)㊂作者简介:金福军(1982-),主治医师,硕士,主要从事恶性肿瘤的相关临床及研究工作㊂ә通信作者,E-m a i l:l o n g x i n g t a o2009@163.c o m㊂尽管腹腔内播散种植一直被认为是卵巢癌腹腔镜转移的主要机制,但腹腔内转移灶并非随机,大网膜是最常见种植器官,部分患者腹腔种植病灶并不明显,但已出现腹腔外转移㊂这促使研究者们探索上皮性卵巢癌转移腹腔的其他可能机制㊂研究者们在卵巢癌患者的血液发现了循环肿瘤细胞,这表明卵巢癌的转移可能通过血液途径进行[7]㊂最近,P R A D E E P 等[8]利用动物模型证明卵巢循环肿瘤细胞优先生长在大网膜中,随后扩散到其他腹膜表面㊂大网膜中人表皮生长因子受体3/神经调节蛋白1基因(E R B3/ N R G1)呈显著高表达,干扰其表达后转移到大网膜的能力明显下降,提示E R B3/N R G1轴可调控卵巢癌血液中循环细胞向大网膜转移㊂Y U E等[9]研究发现,在卵巢癌血行和淋巴转移患者中成骨细胞特异因子-2 (P O S T N)㊁L u m i c a n(L U M)㊁血小板反应蛋白2 (T H B S2)㊁Ⅲ型胶原蛋白基因α1链(C O L3A1)㊁Ⅴ型胶原蛋白基因α1链(C O L5A1)㊁Ⅴ型胶原蛋白基因α2链(C O L5A2)㊁F a s相关磷酸酯酶-1(F A P1)和原纤维蛋白-1(F B N1)基因明显高表达,且与患者不良预后相关㊂这些基因具有活化细胞外基质的作用,而基质细胞中成纤维细胞的募集和激活与血液转移密切相关㊂1.3淋巴转移学说晚期卵巢癌后腹膜淋巴结转移率较高[10]㊂研究者认为,血管内皮生长因子受体3(v a s c u l a r e n d o t h e l i a l g r o w t h f a c t o r r e c e p t o r-3,V E G F R-3)参与淋巴管生成和维持,V E G F-C㊁V E G F-D激活该受体㊂免疫组织化学显示,V E G F-A㊁V E G F-C和V E G F-D在卵巢癌中高表达,92%的Ⅲ期卵巢癌患者其表达呈阳性,显示V E G F-C的高表达与腹膜后转移相关㊂V E G F-C与V E G F R-3相互作用在上皮性卵巢癌中促进淋巴结转移㊂V E G F-C高表达也与较短的总生存率相关[11]㊂另一项研究描述泛素特异性蛋白酶7(u b i q u i t i n s p e c i f i c p r o t e a s e7, U S P7)的高表达与淋巴结转移明显相关[12]㊂卵巢癌细胞黏着斑激酶(f o c a l a d h e s i o n k i n a s e,F A K)的上调也与淋巴结转移的发生率呈正相关[13]㊂2上皮性卵巢癌细胞腹腔转移的分子机制2.1各种黏附分子参与卵巢癌细胞与间皮细胞和基质细胞的结合整合素是一种由α和β-亚单位组成的异二聚体糖蛋白,在卵巢癌细胞中高表达,促进卵巢癌细胞与腹膜间的黏附㊂整合素与纤维连接蛋白结合后暴露在间皮细胞而促进腹膜转移[14]㊂其他整合素配体包括细胞间黏附分子(i n t e r c e l l u l a r a d h e s i o n m o l e c u l e, I C AM)-1和血管细胞黏附分子(v a s c u l a r c e l l a d h e-s i o n m o l e c u l e,V C AM)-1㊂I C AM-1和V C AM-1也是由间皮细胞表达,并与炎症反应的产生介质结合,如组织坏死因子(t u m o r n e c r o s i s f a c t o r,T N F)-α㊁干扰素(i n t e r f e r o n,I F N)-γ㊁白细胞介素(i n t e r l e u k i n, I L)-1β和I L-6㊂这些炎症介质进一步刺激间皮细胞纤维连接蛋白的表达,从而促进与黏附分子的结合[15]㊂体外三维细胞培养的研究证明,当α5β1整合素及其配体纤维连接蛋白暴露在卵巢癌细胞球上,抗β1整合素单克隆抗体能抑制肿瘤球的形成,提示β1整合素-纤维连接蛋白相互作用在腹腔肿瘤细胞聚集中的重要作用㊂此外,体内研究表明,肿瘤球的生长是由腹水的微环境支持的,且球体对化疗的敏感性降低㊂假设在卵巢癌患者中,腹腔漂浮癌细胞球初期抵抗化疗,在腹水中存活,随后可在腹膜表面出现复发㊁转移灶㊂这可能阐明了在完成满意的肿瘤细胞减灭术及化疗后仍有高复发率的原因[16]㊂间皮细胞分泌溶血磷脂酸(l y s o p h o s p h a t i d i c a c i d,L P A),也有助于表达L P A受体的卵巢癌细胞的间皮黏附㊂大量的体外和体内研究证明,卵巢癌细胞本身表达许多膜受体,有助于它们与间皮细胞黏附分子受体结合㊂大网膜成纤维细胞在调节这种器官特异性转移中也起着重要作用㊂T N F-转化生长因子(T G F)-表皮生长因子受体(E G F R)相互作用使卵巢癌细胞和位于大网膜的成纤维细胞之间形成了环状结构,并促进腹膜转移[17]㊂基质细胞是肿瘤微环境的重要组成部分,包括成纤维细胞㊁内皮细胞㊁网状细胞㊁脂肪细胞㊁间充质细胞及多种免疫细胞㊂如肿瘤细胞可通过分泌细胞因子促进肿瘤相关成纤维细胞(c a n c e r a s s o c i a t e d f i-b r o b l a s t s,C A F s)活化,从而分泌多种细胞因子如T G F-β㊁血小板源性生长因子(P D G F)和肝细胞生长因子(H G F)等直接作用于肿瘤细胞,促进肿瘤的增殖㊁侵袭及血管生成㊂研究者发现,C A F s可通过促进淋巴和血管的生成及肿瘤细胞侵袭能力的增强,而促进卵巢癌转移㊂肿瘤诱导血管生成是卵巢癌血液转移的重要基础[18]㊂大网膜主要由脂肪组织组成,研究人员推测卵巢癌细胞优先种植于大网膜是由于其缺乏基底膜和很少的中胚层乳状斑表面的上皮细胞,这有助于癌变细胞浸润;此外,大网膜参与体液腹腔引流,可能被动增加了癌细胞附着于大网膜的机会㊂研究发现,来源于人的大网膜脂肪细胞可以在体外诱导卵巢癌细胞的增殖及浸润[19]㊂2.2肿瘤微环境诱导肿瘤细胞的上皮间转化(E MT)E MT的主要特征是上皮表型的缺失及间质特性的获得,E MT在促使肿瘤细胞侵袭并转移至远端组织的同时,也有助于形成肿瘤宏观转移灶并产生多重耐药[20]㊂近来有研究发现,C a2+可以调节局灶性黏附复合物的成分,卵巢癌转移到大网膜的倾向性不仅是化学信号的结果,也是机械信号的结果[21];在软基质上培养的人卵巢癌细胞牵引力和极化程度增加;此外,卵巢癌细胞通过R h o/R h o激酶(R h o/R O C K)信号途径进行E MT,提示这种转化是卵巢癌播散种植和血行途径中的关键步骤㊂3上皮性卵巢癌腹腔转移的治疗策略3.1腹腔化疗1412重庆医学2022年6月第51卷第12期70%初治上皮性卵巢癌患者发生腹腔转移,引发研究者对腹腔化疗进行了一系列研究㊂3项大型临床研究(G O G104㊁G O G114㊁G O G172)证实,晚期卵巢癌患者行满意减瘤术后,辅助腹腔化疗较静脉化疗有更好的生存获益㊂美国国家癌症综合网(N C C N)指南也将腹腔化疗纳入一线推荐中㊂但是腹腔化疗给药方式复杂且毒性反应增加,临床应用未能全面普及[22]㊂腹腔化疗的理论基础为腹腔肿瘤细胞与化疗药物接触面积增大,促进药物渗透;腹腔化疗局部获得的化疗药物浓度显著高于静脉途径㊂第4项随机Ⅲ期试验G O G252研究均加入了贝伐单抗,但结果显示卡铂或顺铂腹腔化疗对比静脉化疗,并没有更好的无进展生存(P F S)和总生存(O S)的获益㊂对于Ⅱ/Ⅲ期患者,不论R0或R1切除,P F S也均未显示出获益[23]㊂分析G O G172研究获益的可能原因:更高比例的患者是R1切除,而G O G252临床研究中贝伐单抗的加入可能增加了临床获益,掩盖了腹腔化疗的获益㊂G O G-172的回顾性分析显示,B R C A突变患者腹腔化疗O S获益优于静脉化疗㊂目前研究证实,聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(p o l y a d e n o s i n e d i p h o s p h a t e r i b o s e p o l y m e r a s e,P A R P)抑制剂作为维持治疗用药疗效优于贝伐单抗[24],所以对B R C A突变或同源重组缺陷(H R D)人群,未来可以进一步探索,以找到更合适的化疗或联合方案㊂近年来,为提高腹腔化疗疗效,腹腔热灌注化疗(H I P E C)被推荐用于腹腔化疗㊂其理论依据为H I P E C除了具有腹腔化疗固有的药物代谢动力学优势外,热疗还能协同作用于多种化疗药物而提高渗透入肿瘤细胞内的药物浓度;热疗可影响蛋白质变性从而抑制肿瘤微环境中的氧化代谢,促进溶酶体活化和细胞凋亡;热疗还可借助大容量灌洗液的力学作用对盆腔和腹腔内残余的瘤灶进行浸透并冲击净化腹腔内环境㊂2018年新英格兰杂志报道了H I P E C治疗Ⅲ期卵巢癌的多中心㊁随机对照临床试验结果,该试验总共纳入245例患者,按1ʒ1随机分配至试验组和对照组,结果发现与单纯手术组相比,手术+ H I P E C组的中位无复发生存时间和中位总生存时间分别为14.2个月和45.7个月,而单纯手术组分别为10.7个月和33.9个月,前者分别延长了3.5个月和11.8个月,两组治疗相关的副作用和生活质量无明显差异[25]㊂这些发现提示,H I P E C治疗较G O G172研究推荐的方案更易被接受㊂各亚组分析结果表明,手术+H I P E C组在各亚组中均优于单纯手术组[25]㊂3.2靶向治疗P A R P抑制剂已经用于铂敏感复发卵巢癌维持治疗及一线维持治疗,显著改善了患者P F S[26]㊂但是,尚缺少P A R P抑制剂控制腹水或控制腹膜疾病的相关临床试验研究㊂除P A R P抑制剂外,V E G F抑制剂㊁多靶点抗血管生成靶向抑制剂㊁抗人E G F R药物㊁磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(P I3K/A K T/m T O R)信号通路抑制剂等在卵巢癌的治疗中也显示了一定的疗效㊂在随机对照A U R E L I A试验中,伴随腹水的患者使用贝伐单抗联合标准化疗,腹水控制满意[27]㊂恶性的腹水常与腹膜转移有关,因此,其结果提示贝伐单抗以抗血管生成为靶点治疗腹膜转移[27]㊂除贝伐单抗外,V E G F靶向单克隆抗体,多个抗血管生成小分子酪氨酸激酶抑制剂在Ⅱ期和Ⅲ期临床试验中得到评估㊂如舒尼替尼是V E G F受体的多靶点抑制剂(V E G F R-1㊁V E G F R-2和V E G F R-3),在一项Ⅱ期临床研究纳入的35例患者中,有30例接受了治疗,中位P F S为2.7个月,中位O S为12.8个月[28]㊂E G F R在上皮性卵巢癌中高表达,且与预后不良有关,相关酪氨酸激酶抑制剂或抗体单一治疗卵巢癌疗效不尽人意[29]㊂而相关联合治疗正在开展,如吉非替尼(I r e s s a)是E G F R的小分子抑制剂,目前正与拓扑替康联合治疗复发的卵巢癌㊁腹膜癌和输卵管癌患者(N C T00317772)㊂β1-整合素在卵巢癌进展中起关键作用,如伏罗昔单抗是一种嵌合单克隆抗体,能结合并抑制α5β1-整合素活性;Ⅱ期临床试验中,单药治疗原发性铂耐药晚期上皮卵巢癌或腹膜癌,虽然单用该药不能临床获益,但副作用低,需进一步开发针对α5β1-整合素的优化分子[30]㊂西地尼布也是一种靶向P D G F受体(P D G F R)和c-k i t 的酪氨酸激酶抑制剂,最近一项Ⅱ期临床研究结果显示,西地尼布联合奥拉帕尼对比单药奥拉帕尼治疗90例卵巢癌患者,联合治疗组中位P F S明显长于单药奥拉帕尼治疗(17.7个月v s.9.0个月,P=0.005)㊂这些研究结果表明,联合小分子药物(如P A R P抑制物)或细胞毒性化学药物(如顺铂和紫杉醇)可能会达到更佳的治疗效果[31]㊂3.3光动力学治疗晚期上皮性卵巢癌的腹膜转移率高,术中探查腹膜广泛粟粒样病灶,需要开发局部治疗策略㊂光动力疗法是一种已经在外科肿瘤治疗中运用的有效疗法㊂其原理为在癌细胞中使用光敏剂,用足够波长的光照射可能会引起光敏剂与组织氧之间的光化学反应,从而导致活性氧的产生和细胞毒性现象㊂光动力疗法用于治疗大面积浅表种植病灶,达到理想的细胞减灭术效果,可降低腹膜复发率㊂但腹膜内光动力疗法的发展受其耐受性的限制,该耐受性与光敏剂缺乏特异性和癌细胞转移到邻近腹膜内器官附近的位置有关[32]㊂4小结与展望卵巢癌腹腔转移是一个复杂的病理过程,包括肿瘤细胞获得强大转移能力,细胞间黏附能力下降,癌细胞对细胞外基质和基底膜的降解与破坏,细胞骨架重构引起细胞运动与迁移,细胞因子诱导的癌细胞器官特异性靶向聚集,肿瘤血管和淋巴管生成等诸多因素㊂本文描述了卵巢癌转移的两个主要途径和卵巢2412重庆医学2022年6月第51卷第12期癌细胞腹腔转移的分子机制㊂此外,还强调了不同基质细胞类型,包括C A F s㊁内皮细胞㊁癌相关巨噬细胞和染色体臂非整倍体(C A A s)在转移中的参与和作用㊂目前,化疗在卵巢癌腹腔转移治疗中仍具有重要作用,但H I P E C或化疗联合靶向药物治疗改善了预后,提高了腹腔转移治疗疗效,引起越来越多的关注㊂随着研究人员进一步阐明肿瘤微环境中不同基质成分在卵巢癌进展和转移中的作用,越来越全面的疾病观正在形成㊂随着对新发现和验证的预后标志物及治疗靶点的报道,新的有效治疗方案正在研究中㊂参考文献[1]S T E WA R T C,R A L Y E A C,L O C KWO O D S.O v a r i a n c a n c e r:a n i n t e g r a t e d r e v i e w[J].S e m i nO n c o l N u r s,2019,35(2):151-156.[2]MO F F I T T L,K A R I MN I A N,S T E P H E N S A,e t a l.T h e r a p e u t i c t a r g e t i n g of c o l l e c t i v e i n v a-s i o n i n o v a r i a n c a n c e r[J].I n t J M o l S c i,2019, 20(6):1466.[3]Y E U N G T L,L E U N G C S,Y I P K P,e t a l.C e l-l u l a r a n d m o l e c u l a r p r o c e s s e s i n o v a r i a n c a n c e rm e t a s t a s i s.A R e v i e w i n t h e t h e m e:c e l l a n d m o-l e c u l a r p r o c e s s e s i n c a n c e r m e t a s t a s i s[J].A m J P h y s i o l C e l l P h y s i o l,2015,309(7):C444-456.[4]K U O C L,J I A N G Z Y,WA N G Y W,e t a l.I n v i v o s e l e c t i o n r e v e a l s a u t o p h a g y p r o m o t e s a d-a p t a t i o n o f m e t a 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l t e r s i n t e g r i n a n d c a d-h e r i n e x p r e s s i o n b y o v a r i a n c a n c e r s p h e r o i d s a n d i n h i b i t s t u m o r i g e n e s i s a n d m e t a s t a s i s[J].E x p C e l l R e s,2018,369(1):90-104.[16]C A S E Y R C,B U R L E S O N K M,S K U B I T Z KM,e t a l.B e t a1-i n t e g r i n s r e g u l a t e t h e f o r m a-t i o n a n d a d h e s i o n o f o v a r i a n c a r c i n o m a m u l t i-c e l l u l a r s p h e r o id s[J].A m J P a t h o l,2001,159(6):2071-2080.[17]L A U T S,C HA N L K,WO N G E C,e t a l.A l o o p o f c a n c e r-s t r o m a-c a n c e r i n t e r a c t i o n p r o-m o t e s p e r i t o n e a l m e t a s t a s i s o f o v a r i a n c a n c e rv i a T N Fα-T G Fα-E G F R[J].O n c o g e n e,2017,36(25):3576-3587.[18]L E U N G C S,Y E U N G T L,Y I P K P,e t a l.C a n c e r-a s s o c i a t e d f i b r o b l a s t s r e g u l a t e e n d o t h e-l i a l a d h e s i o n p r o t e i n L P P t o p r o m o t e o v a r i a nc a n c e r c h e m o r e s i s t a n c e[J].J C l i n I n v e s t,2018,128(2):589-606.[19]D E S P O S I T O V,P A S S A R E T T I F,H AMMAR S T E D T A,e t a l.A d i p o c y t e-r e l e a s e d i n s u l i n-3412重庆医学2022年6月第51卷第12期l i k e g r o w t h f a c t o r-1i s r e g u l a t e d b y g l u c o s e a n df a t t y a c i d s a n d c o n t r o l s b r e a s t c a n c e r c e l lg r o w t h i n v i t r o[J].D i a b e t o l o g i a,2012,55(10):2811-2822.[20]E R I N N,G R A HO V A C J,B R O Z O V I C A,e t a l.T u m o r m i c r o e n v i r o n m e n t a n d e p i t h e l i a l m e s e n-c h y m a l t r a n s i t i o n a s t a r g e t s t o o v e r c o m e t u m o rm u l t i d r u g r e s i s t a n c e[J].D r u g R e s i s t U p d a t, 2020,53:100715.[21]Z H A N G L Y,C H E N Y,J I A J,e t a l.M i R-27ap r o m o t e s E MT i n o v a r i a n c a n c e r t h r o u g h a c-t i v e W n t/βc a t e n i n s i g n a l l i n g b y t a r g e t i n gF O X O1[J].C a n c e r B i o m a r k,2019,24(1): 31-42.[22]F U J I W A R A K,M A R K M A N M,M O R G A N M,e ta l.I n t r a p e r i t o n e a l c a rb o p l a t i n-b a s e dc h e m o-t h e r a p y f o r e p i t h e l i a l o v a r i a n c a n c e r[J].G y n e-c o l O n c o l,2005,97(1):10-15.[23]WA L K E R J L,B R A D Y M F,W E N Z E L L,e ta l.R a n d o m i z e d t r i a l o f i n t r a v e n o u s v e r s u s i n-t r a p e r i t o n e a l c h e m o t h e r a p y p l u s b e v a c i z u m a b i n a d v a n c e d o v a r i a n c a r c i n o m a:a n N R G o n c o l o-g y/g y n e c o l o g i c o n c o l o g y g r o u p s t u d y[J].J C l i nO n c o l,2019,37(16):1380-1390. [24]M O N K B J,C H A N J K.I s i n t r a p e r i t o n e a l c h e m o-t h e r a p y s t i l l a n a c c e p t a b l e o p t i o n i n p r i m a r y a d j u-v a n t c h e m o t h e r a p y f o r a d v a n c e d o v a r i a n c a n c e r[J].A n n O n c o l,2017,28(S u p p l8):v i i i40-45.[25]V A N D R I E L W J,K O O L E S N,S O N K E G S.H y p e r t h e r m i c i n t r a p e r i t o n e a l c h e m o t h e r a p y i n o v a r i a n c a n c e r[J].N E n g l J M e d,2018,378(14):1363-1364.[26]E L Y A S H I V O,WO N G Y N S,L E D E R MA N N J A.F r o n t l i n e m a i n t e n a n c e t r e a t m e n t f o r o v a r i-a n c a n c e r[J].C u r r O n c o l R e p,2021,23(8):97.[27]T R I L L S C H F,M A H N E R S,H I L P E R T F,e t a l.P r o g n o s t i c a n d p r e d i c t i v e e f f e c t s o f p r i m a r yv e r s u s s e c o n d a r y P l a t i n u m r e s i s t a n c e f o r b e v-a c i z u m ab t r e a t m e n t f o r p l a t i n u m-r e s i s t a n t o-v a r i a n c a n c e r i n t h e A U R E L I A t r i a l[J].A n nO n c o l,2016,27(9):1733-1739. [28]C H A N J K,B R A D Y W,MO N K B J,e t a l.Ap h a s eⅡe v a l u a t i o n o f s u n i t i n i b i n t h e t r e a t-m e n t o f p e r s i s t e n t o r r e c u r r e n t c l e a r c e l l o v a r i-a n c a r c i n o m a:a n N R G O n c o l o g y/G y n e c o l o g i cO n c o l o g y G r o u p S t u d y(G O G-254)[J].G y n e-c o l O n c o l,2018,150(2):247-252.[29]H A L D A R K,G A I T S K E L L K,B R Y A N T A,e t a l.E p i d e r m a l g r o w t h f a c t o r r e c e p t o r b l o c k e r s f o r t h e t r e a t m e n t o f o v a r i a n c a n c e r[J].C o c h r a n e D a t a b a s eS y s t R e v,2011(10):C D007927.[30]B E L L-M C G U I N N K M,M A T T H E W S C M,H OS N,e t a l.A p h a s eⅡ,s i n g l e-a r m s t u d y o f t h e a n t i-α5β1i n t e g r i n a n t i b o d y v o l o c i x i m a b a sm o n o t h e r a p y i n p a t i e n t s w i t h p l a t i n u m-r e s i s t-a n t a d v a n c e d e p i t h e l i a l o v a r i a n o r p r i m a r y p e r i-t o n e a l c a n c e r[J].G y n e c o l O n c o l,2011,121(2): 273-279.[31]L I U J F,B A R R Y W T,B I R R E R M,e t a l.O-v e r a l l s u r v i v a l a n d u p d a t e d p r o g r e s s i o n-f r e e s u r v i v a l o u t c o m e s i n a r a n d o m i z e d p h a s eⅡs t u d y o f c o m b i n a t i o n c e d i r a n i b a n d o l a p a r i bv e r s u s o l a p a r i b i n r e l a p s e d p l a t i n u m-s e n s i t i v eo v a r i a n c a n c e r[J].A n n O n c o l,2019,30(4): 551-557.[32]A Z AÏS H,MO R D O N S,C O L L I N E T P.I n t r a p-e r i t o n e a l p h o t o d y n a m i c t h e r a p yf o r p e r i t o n e a lm e t a s t a s i s o f e p i t h e l i a l o v a r i a n c a n c e r.L i m i t s a n d f u t u r e p r o s p e c t s[J].G y n e c o l O b s t e t F e r t i lS e n o l,2017,45(4):249-256.(收稿日期:2021-11-18修回日期:2022-02-08)(上接第2139页)[29]B U R G I N H J,L O P E Z S M,S M I T H C M,e t a l.P i o g l i t a z o n e a n d d e o x y r i b o n u c l e o s i d e c o m b i n a-t i o n t r e a t m e n t i n c r e a s e s m i t o c h o n d r i a l r e s p i r a-t o r y c a p a c i t y i n m.3243A>G M E L A S c y b r i dc e l l s[J].I n t J M o l S c i,2020,21(6):2139.[30]D E V R I E S M C,B R OWN D A,A L L E N M E,e t a l.S af e t y o f d r ug u s e i n p a t i e n t s w i th a p r i-m a r y m i t o c h o n d r i a l d i s e a s e:a n i n t e r n a t i o n a lD e l p h i-b a s e d c o n s e n s u s[J].J I n h e r i t M e t a bD i s,2020,43(4):800-818.[31]MA N C A R D I M M,N E S T I C,F E B B O F,e t a l.F o c a l s t a t u s a n d a c u t e e n c e p h a l o p a t h y i n a13-y e a r-o l d b o y w i t h d e n o v o D NM1L m u t a t i o n: v i d e o-p o l y g r a p h i c p a t t e r n a n d c l u e s f o r d i f f e r-e n t i a l d i a g n o s i s[J].B r a i n D e v,2021,43(5): 644-651.(收稿日期:2021-11-23修回日期:2022-02-21)4412重庆医学2022年6月第51卷第12期。

考生版组织学与胚胎学考试（五）2014级临床15班《组织学与胚胎学》（五）考试范围：胚胎全部内容考试时间：90分钟题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 答案题号14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 答案题号27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 答案题号40 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 答案一、选择题（共40分、每题1分）1、关于原始血细胞，下列哪项错误？（）A、人胚第 15～16 天后即出现B、是来自胚外中胚层的细胞C、就是造血干细胞D、可分裂形成某些无核的细胞E、可分裂形成某些多核的细胞2、胃的发生（）A、胃最初为中肠前端的一个梭形膨大B、以腹背系膜与脏壁中胚层相连C、胃各部生长均匀D、发育中胃大弯由腹侧转向左侧E、胃的尾端因 12 指肠的固定，而被固定于腹后壁3、卵裂（）A、即卵细胞的分裂B、常在输卵管中进行C、卵裂产生的子细胞称卵裂球，是单倍体细胞D、12～16 个卵裂球构成的实心胚称桑椹胚，此时透明带已消失E、每天可卵裂近百次4、生后肾原基（）A、由中肾嵴尾端的中胚层组织形成B、只能形成肾小管C、肾小体全都由生后肾原基形成D、可形成后肾小管与后肾管相通E、生后肾原基的外侧部分将形成浅表肾单位5、关于心内膜垫，下列哪项错误？（）A、开始发生时有两个，分别称背、腹心内膜垫B、由心内膜组织增生形成C、位于心房与心室之间D、最主要作用是参与构成室间隔膜部E、可与第一房间隔融合6、关于舌的发生，下列哪项错误？（）A、由鳃弓近咽底部的间充质增生形成B、由侧舌隆起、奇结节及联合突三部分发育而成C、舌根来自奇结节D、舌体与舌根间有“V”字形界沟E、舌的上皮来自内胚层7、关于血岛的描述，下列哪项错误？（）A、发生于胚胎第 4 周初B、由卵黄囊的胚外中胚层形成C、其周边的细胞可分化为内皮细胞D、其中央的细胞可分化为造血干细胞E、相邻血岛形成的内皮管可互相连通8、关于心房的分隔，下列哪项错误？（）A、从胚胎第 4 周末开始B、原发隔为薄的半月形额状隔C、所有的房间隔均与心内膜垫融合D、出生前，所有的房间隔上均有孔E、盖于卵圆孔上的原发隔称卵圆孔瓣9、关于输尿管芽，下列哪项错误？（）A、是中肾管末端近泄殖腔处长出的盲管B、属于中胚层组织C、部分分化物参与构成泌尿小管D、其分支末端诱导生后肾原基形成肾小体E、其分支末端将与肾小管接通10、下列哪项不是胎儿出生后血液循环的变化？（）A、腹腔内的脐静脉闭锁成为肝圆韧带B、卵圆孔闭锁C、脐动脉完全闭锁成为脐外侧韧带D、右心房压力降低E、动脉导管闭锁11、关于后肾的发生，下列哪项错误？（）A、后肾发育为成体的永久肾B、起源于生后肾原基及输尿管芽C、输尿管芽分化形成的管道无重吸收作用D、生后肾原基分化形成的管道有重吸收作用E、肾的原始位置较低，以后逐渐升高12、关于静脉窦，下列哪项错误？（）A、发生早期位于原始横隔内B、可分左、右两角，分别与左、右总主静脉、脐静脉、卵黄静脉连通C、静脉窦可参与左、右心房的形成D、静脉窦右角回收的血液远多与左角的E、静脉窦左角远侧段成为左房斜静脉根部13、原始生殖细胞（）A、来自卵黄囊前壁的内胚层B、第 6 周经腹侧肠系膜迁入生殖腺嵴C、在男性，将演变为生精小管的所有上皮细胞D、在女性，将演变为卵泡细胞E、其分化受组织相容性 Y 抗原的影响14、关于卵巢的发生，下列哪项错误？（）A、未分化性腺有向卵巢分化的自然趋势B、卵巢的形成比睾丸晚C、卵巢的初级性索在第 10 周前退化D、初级性索与卵巢网退化后成为卵巢髓质E、人胚第 16 周，皮质索断裂成原始卵泡15、关于生殖管道的发生，下列哪项错误？（）A、人胚第 6 周时，男女两性都有两套生殖管道B、中肾旁管上端开口于腹膜腔，下端为盲端C、中肾管开口在窦结节的两侧D、生殖管道的分化受雄激素的影响E、中肾旁管将分化为输卵管、子宫及阴道全长16、关于心脏外形的演变，下列哪项错误？（）A、原始心管为一条纵管B、心管各段因生长速度不同，首先出现三个膨大，从头到尾依次是心球、心室和心房C、心房尾端可出现静脉窦D、心球的远侧份细长称动脉干E、心球与心室可形成球室袢17、原始消化管（）A、是内胚层与脏壁中胚层在胚体内形成的纵行管道B、分为咽、前肠、中肠、后肠及泄殖腔五部分C、中肠背侧与卵黄囊相通D、通常在胚胎发育的第 5 周，前肠头端由口咽膜封闭E、胚胎早期（第 6 周前）后肠末端以肛膜封闭18、关于甲状腺的发生，下列哪项错误？（）A、由联合突和奇结节间的内胚层细胞增生而成B、甲状舌管为一盲管C、甲状舌管末端形成甲状腺间质D、甲状舌管沿颈部正中延伸向下E、舌盲孔为甲状腺发育遗迹19、中肾管（）A、上连前肾管，下连后肾管B、在男性，与中肾管相连的部分中肾小管不退化C、中肾管只能演变为男性的生殖管道D、在女性，中肾管在第 6 周时即已退化E、在女性，中肾管之所以退化是因雌激素过多20、关于泌尿系统的畸形，下列哪项错误？（）A、多囊肾是因集合小管未与远端小管接通所致B、马蹄肾是因两肾上端异常融合所致C、双输尿管是因输尿管芽过早分支所致D、脐尿瘘是因脐尿管未闭锁所致E、异位肾是因肾在上升过程中受阻所致21、羊水（）A、来源：胎儿的排泄B、去路：羊膜吸收及胎儿吞饮C、羊水内无细胞D、正常量：500～1000 mlE、除对胎儿有保护作用外，无其他作用22、关于生殖细胞，下列哪项错误？（）A、生殖细胞又称配子，包括精子和卵子B、生殖细胞均为单倍体细胞C、生殖细胞均含有一条性染色体，在男性为 Y 染色体，在女性为X 染色体D、女性的生殖细胞在出生后数量不断减少E、睾丸刚产生的精子无受精的能力23、中肠的演变（）A、小肠均由中肠演变而成B、生长迅速，先后形成若干弯曲C、中肠的生长始终在腹膜腔中进行D、盲肠是中肠形成的最终末部分E、阑尾由盲肠始基的近侧份萎缩退化而成24、植入（）A、是受精卵逐渐埋入子宫内膜的过程B、植入的时间相当于月经周期的第 6～7 天C、植入时，内细胞群一侧的滋养层首先与子宫内膜相接触D、植入很少发生在子宫后壁，多见于子宫底E、植入后，子宫内膜改称为绒毛膜25、后肠的演变（）A、形成横结肠及其以下的大肠B、末端膨大部为泄殖腔，其背侧壁与尿囊相连C、来自外胚层的尿直肠隔将泄殖腔分隔成背、腹两部分D、泄殖腔参与生殖系统的发生E、泄殖腔腹侧份发育为直肠和肛管上段26、下列哪项结构不是起源于内胚层？（）A、生精细胞B、阴道前庭C、男性尿道海绵体部D、膀胱与输尿管交界处E、女性尿道27、关于肝和胆的发生，下列哪项错误？（）A、第 4 周初，开始形成肝憩室B、肝憩室末端可膨大，并形成头、尾两支C、肝索及肝内胆管系均为内胚层细胞D、胆囊的上皮来自肝憩室的尾支E、出生前，肝细胞合成甲胎蛋白的能力逐渐增强28、关于内皮管，下列哪项错误？（）A、可由血岛形成B、可不断向外出芽延伸C、所有的由中胚层演化的组织中均有内皮管D、胚外和胚内的内皮管可经体蒂彼此沟通E、有的内皮管可萎缩消失29、关于蜕膜，下列哪项错误？（）A、植入后的子宫内膜称蜕膜B、可分为基蜕膜、包蜕膜和壁蜕膜C、基蜕膜参与构成胎盘D、包蜕膜可与壁蜕膜合并E、蜕膜出现后，受外界影响常发生蜕膜反应30、关于呼吸系统的发生，下列哪项错误？（）A、鼻腔的上皮来自外胚层B、喉气管沟是整个呼吸系统发生的原基C、分隔喉气管憩室与食管的结构为气管食管隔D、喉气管憩室将发育为喉、气管、支气管和肺E、肺的间质来自间充质31、关于鳃弓的发生，下列哪项错误？（）A、由头部两侧的间充质增生而成B、相邻鳃弓间为鳃沟，共 6 对C、鳃沟与咽囊相对应，两者间隔以鳃膜D、鳃膜的外表面是外胚层，内表面是内胚层E、鳃弓中有血管及神经32、关于中胚层，下列哪项错误？（）A、可分为轴旁中胚层、间介中胚层、侧中胚层和间充质四部分B、轴旁中胚层可分化为真皮、中轴骨骼及骨骼肌C、两个侧中胚层之间为原始体腔D、所有的泌尿生殖系统的器官都来自间介中胚层E、胚胎头侧无中胚层的区域称口咽膜33、关于鼻的发生，下列哪项错误？（）A、额鼻隆起下缘两侧的间充质增生形成鼻板B、鼻板中央凹陷形成鼻窝C、外侧鼻隆起将形成鼻外侧及鼻翼D、人中由内侧鼻隆起形成E、腭将口与鼻分开34、胎盘（）A、由母体的各种蜕膜与胎儿的丛密绒毛膜组成B、内有母体和胎儿两套血循环，两者可互通，以利物质交换C、胎盘膜依次由下列几层组成：细胞滋养层，合体滋养层及其基膜，薄层结缔组织，毛细血管内皮及其基膜D、除血细胞外，所有的物质均可经胎盘进行物质交换E、胎盘可产生多种激素35、关于内胚层，下列哪项错误（）A、卷折后形成原始消化管B、原始消化管头端起自口咽膜C、原始消化管尾端止于泄殖腔膜D、以后分化为消化系统和呼吸系统的所有上皮E、还可分化为甲状腺和胸腺等的上皮36、受精（）A、是精子与停留在第二次成熟分裂前期的卵母细胞相互融合的过程B、精子在进入女性生殖管道前必须获能C、卵母细胞在精子进入后完成第二次成熟分裂D、受精大多发生在排卵 12 小时以后E、受精多发生在输卵管的狭窄部位37、关于内细胞群，下列哪项错误？（）A、是突入胚外体腔中的一群细胞B、可增殖分化为胚盘C、在发育过程中，首先形成内、外胚层D、外胚层与滋养层间有羊膜腔E、卵黄囊由内胚层向下延伸围成38、中胚层的形成（）A、起于原条，有原条的一侧为胚胎的头端B、原条增长后，纵贯整个胚胎中轴C、原条退化后形成脊索D、脊索以后发育成脊柱E、原条的消失是因脊索增长所致39、关于心室的分隔，下列哪项错误？（）A、以室间隔肌部为主要分隔物B、室间隔肌部上缘凹陷C、心内膜垫参与心室的分隔D、左、右球嵴亦参与心室的分隔E、心室未开始分隔前，左、右心室间有室间孔40、关于颜面的发生，下列哪项错误？（）A、早期的颜面由五个隆起及其间的一个凹陷组成B、颜面形成与口、鼻的发生过程密切相关C、左右上颌隆起向中线生长并愈合D、左右下颌隆起形成下颌及下唇E、早期原始鼻腔与口腔相通二、填空题（）脐带外包，内含分化的结缔组织，其内有闭锁的和，以及脐动、静脉。

卵巢组织的冻存复苏方法卵巢是女性生殖器官之一，它主要担负着卵子的产生和调节女性激素，对于女性的健康和生育力至关重要。

然而，由于各种原因，比如癌症治疗，卵巢功能受损，导致女性无法再自然地受孕。

在这种情况下，卵巢组织的冻存与复苏技术成为可行的选择，通过这种方法，女性可以在未来恢复卵巢功能，实现自然孕育。

一、卵巢组织冻存1. 采集卵巢组织首先需要采集卵巢组织，这个过程需要注意方法和卫生，避免损伤卵巢和潜在的感染。

可以通过手术在子宫下方切开腹壁到达卵巢，也可以经阴道入路将此处的卵巢穿刺吸取。

卵巢组织的数量和质量要足够，这样才能保证冻存后的存活率和复苏率。

2. 处理卵巢组织采集到卵巢组织后，需要人工分离出卵泡，避免冻存过程中倾向于坏死的组织损伤。

此外，需要用适当的溶液抑制细胞在冻存前的生长和分裂。

这可以有助于避免过程中细胞凋亡和其他形式的细胞损伤。

3. 低温冻存完成处理后，卵巢组织需要在液氮等极低温度下冻存。

目前，一般采用不同的低温冻存方法，主要包括慢速冷却和速冻两种方法。

两种方法都有其优缺点。

速冻可以更快地完成冷冻过程，但冷却过程中的甜味剂和其他化学物质可能会引起细胞损伤。

慢速冷却由于减小细胞冻结时的冰晶体积而减少细胞损伤。

二、卵巢组织复苏卵巢组织冻存后，如果有需要，可以经过逆向操作来恢复卵巢功能。

这需要逐步提升组织融化的温度，并使其逐渐回复生理状态。

以下是卵巢组织复苏的方法：1. 融解卵巢组织需要逐步升高冷冻样本的温度，以避免温度变化对组织的损伤。

先将卵巢组织从液氮箱中取出，直接放到干燥吸水纸上，缓慢的加温到室温。

在这个过程中需要注意，卵巢组织的溶解可以依靠增加热源的温度来实现。

2. 制备组织培养粉在组织复苏的过程中，需要用到一定的培养基，以为组织提供最佳的生理环境和条件。

可以将生理盐水和特定的液体添加剂混合在一起，配置出最适合卵巢组织生长的营养液。

3. 培养卵巢组织将融化的卵巢组织，分离后放到上述准备好的培养液中培养。