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基于网络药理学探讨白芍治疗2型糖尿病的作用机制作者：金美英潘韦韦崔镇海来源：《中国医药科学》2021年第23期[摘要]目的運用网络药理学探讨白芍治疗2型糖尿病的具体作用机制。
方法应用 TCMSP 数据库筛选白芍的有效活性成分，应用 TTD、DrugBank、DisGeNET数据库筛选2型糖尿病相关作用靶点，运用Cytosape 3.2.1软件进行可视化处理及拓扑参数分析，应用 STRING 数据库进行蛋白相互作用分析，应用 DAVID 数据库进行 GO 及 KEGG 通路富集分析。
结果白芍抗2型糖尿病的主要活性成分为山柰酚、芍药苷、桦木酸等，其中 BP 主要涉及类固醇激素介导的信号通路、RNA 聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、RNA 聚合酶Ⅱ启动子的转录起始等;CC 涉及细胞器膜、膜、内质网膜等;MF 主要涉及类固醇激素受体、RNA 聚合酶Ⅱ转录因子活性配体激活序列特异性 DNA 结合、锌离子结合等，通路主要涉及糖尿病相关通路有 HIF-1信号通路、 AMPK 信号通路、VEGF 信号通路等。
结论白芍可能是通过作用炎症反应、胰岛素抵抗、糖尿病并发症等相关靶点及通路，起到治疗2型糖尿病的作用。
[关键词]网络药理学;白芍;2型糖尿病;作用机制[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号]2095-0616（2021）23-0035-05A probe into the action mechanism of treating type 2 diabetes with debark peony root based on network pharmacologyJINMeiying1 PANWeiwei2 CUIZhenhai1.Department of Endocrinology and Metabolic Diseases， the Third Affiliated Hospital of Changchun University of Chinese Medicine， Jilin， Changchun 130117， China;2.College of Traditional Chinese Medicine， Changchun University of Chinese Medicine， Jilin， Changchun 130117， China;3.Orthopedic Center， the Third Affiliated Hospital of Changchun University of Chinese Medicine， Jilin， Changchun 130117， China[Abstract] Objective To probe into the specific action mechanism of treating type 2 diabetes（T2D） with debark peony root by applying network pharmacology. Methods TCMSP database was used to screen the effective active components of debark peony root. TTD， DrugBank and DisGeNET databases were used to screen the T2D-related action targets. Cytosape 3.2.1 software was used for visualization processing and topological parameter analysis. STRING database was used for protein interaction analysis. DAVID database was used for GO and KEGG pathway enrichment analysis. Results The main active components of debark peony root against T2D were kaempferol，paeoniflorin and betulinic acid， etc.， among which BP mainly involved steroid hormone-mediated signaling pathway， positive regulation of transcription from RNA polymerase Ⅱ promoter， and transcription initiation of RNA polymerase Ⅱ promoter， etc.， CC involved organelle membrane，membranes， endoplasmic reticulum membrane， etc.， MF mainly involved steroid hormone receptor， RNA polymerase Ⅱ transcription factor active ligand-activated sequence-specific DNA binding， zinc ion binding， etc.， and the pathways were mainly diabetes-related pathways such as HIF-1 signaling pathway， AMPK signaling pathway， VEGF signaling pathway， etc. Conclusion It can be concluded that debark peony root may be effective in treating T2D through acting on the relevant targets and pathways of inflammatory response， insulin resistance and diabetic complications， etc.[Key words] Network pharmacology; Debark peony root; Type 2 diabetes; Action mechanism糖尿病（diabetes mellitus，DM）是以血中葡萄糖水平升高为生化特征及多饮、多食、多尿、消瘦、乏力为临床特征的代谢紊乱综合群[1]，其中2型糖尿病患病人数占糖尿病患者总数的90%以上[2]。
白芍总苷通过下调TLR4／NF－κB／TGF－β1信号通路改善阿霉素肾病大鼠肾纤维化朱亚利;关凤军;安娜;白沙沙;杨珊珊【摘要】目的：探讨白芍总苷（totalglucosidesofpaeony，TGP）对阿霉素肾病大鼠肾组织纤维化的影响及其机制。
方法30只健康雄性SD大鼠尾静脉注射阿霉素制备模型，成模后随机分为模型对照组（ ADRN组）和白芍总苷干预组（ TGP组），同时设立正常对照组（ CON组）；干预8周后ELISA法检测血清Cr、BUN；尿蛋白定量法测24 h尿蛋白；Masson染色观察肾脏纤维化程度；RT－PCR法检测肾组织TLR4／NF－κB／TGF－β1 mRNA表达；免疫组化法检测肾组织TLR4／NF－κB／TGF－β1蛋白含量。
结果与CON组相比， ADRN组大鼠血清Cr、BUN、24 h尿蛋白水平升高（ P＜0．01），肾组织纤维化程度加重（ P＜0．01）， TLR4／NF－κB／TGF－β1表达升高（P＜0．05）；与ADRN相比，TGP组大鼠Cr、BUN、24 h尿蛋白水平下降（P＜0．01），肾组织纤维化程度减轻（P＜0．01），TLR4／NF－κB／TGF－β1表达下降（ P＜0．05）。
结论 TGP可以改善阿霉素肾病大鼠的肾脏功能，减轻病理损伤，其机制可能与下调TLR4／NF－κB／TGF－β1通路进而改善阿霉素大鼠肾纤维化有关。
%Objective To study effect and its possible mechanism of total glucosides of paeony ( TGP ) on adriamycin-induced nephropathyrats.Methods Thirty male SD rats were randomly divided into normal group ( CON) , adriamycin-induced nephropathy group ( ADRN) and TGP-treated ADRN group (TGP).The rat nephropathy model was established by adriamycin injection.At the end of the 8th week after treatment, ELISA was used to detect the level of Cr and BUN.The values of 24 urine protein wasdetermined by urinary protein kit.Masson staining was used to observe the fibrosis.RT-PCR was used to detect the mRNA levels of TLR4/NF-κB/TGF-β1 .Immunohistochemical method was used to det ect the content ofTLR4/NF-κB/TGF-β1.ResuIts Compared with the CON group, the level of Cr, BUN, 24 urine protein of ADRN group rised(P<0.01), the degree of fibrosis of ADRN group were aggravated(P<0.01), and the expressions of TLR4/NF-κB/TGF-β1 of ADRN gro up increased significantly.However, compared with ADRN group, the(P<0.01) level of Cr, BUN, 24 urine protein of TGP-treated rats reduced(P<0.01), the degree of fibrosis of TGP-treated ratseased(P<0.05), and the expressions of TLR4/NF-κB/TGF-β1 of TGP-treated rats decreased significantly.ConcIusion TGP retards the process of fibrosis and reduces the pathological damage in adriamycin-induced rats by down-regulating the expression of TLR4/NF-κB/TGF-β1 signaling.【期刊名称】《中国生化药物杂志》【年(卷),期】2015(000)007【总页数】4页(P43-46)【关键词】白芍总苷;TLR4/NF-κB/TGF-β1 信号通路;阿霉素大鼠;肾纤维化【作者】朱亚利;关凤军;安娜;白沙沙;杨珊珊【作者单位】徐州医学院附属医院儿科，江苏徐州 221002;徐州医学院附属医院儿科，江苏徐州 221002;徐州医学院附属医院儿科，江苏徐州 221002;徐州医学院附属医院儿科，江苏徐州 221002;徐州医学院附属医院儿科，江苏徐州221002【正文语种】中文【中图分类】R692原发性肾病综合征(Primary nephrotic syndrome, PNS)为儿童常见的肾脏疾病，其中微小病变肾病及局灶节段性肾小球硬化分别占儿童原发性肾病综合征的80%～90%与5%～10%[1-2]。
第47卷第2期2021年3月吉林大学学报（医学版）Journal of Jilin University（Medicine Edition）Vol.47No.2Mar.2021DOI：10.13481/j.1671⁃587Ⅹ·20210219白芍总苷介导TLR4/NF-κB信号通路对类风湿关节炎模型大鼠的治疗作用及其机制燕丽君,佟胜全,刘静,高冬梅,陈南芳,胡杰（河北医科大学附属唐山工人医院风湿免疫科，河北唐山063000）［摘要］目的目的：探讨白芍总苷（TGP）通过调控Toll样受体4（TLR4）/核因子κB（NF-κB）信号通路对类风湿关节炎（RA）大鼠关节情况、炎症因子及凋亡因子的影响，并阐明其作用机制。
方法：利用牛Ⅱ型胶原蛋白溶液和完全弗氏佐剂构建胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠模型，将CIA模型大鼠随机分为CIA组、低剂量（25mg·kg－1）TGP组（TGP-LD组）、中剂量（50mg·kg－1）TGP组（TGP-MD）和高剂量（100mg·kg－1）TGP组（TGP-HD组），每组10只；另选取10只健康SD 大鼠作为对照组。
记录各组大鼠体质量、关节炎指数及关节肿胀度；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α），白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素1β（IL-1β）水平；采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western blotting法检测各组大鼠关节滑膜组织中TLR4、NF-κB、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved caspase-3）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA和蛋白表达水平。
结果结果：与对照组比较，CIA组大鼠体质量和关节滑膜组织中Cleaved caspase-3和Bax mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05），关节炎指数、关节肿胀度、关节滑膜组织中Bcl-2、TLR4、NF-κB p65mRNA及蛋白表达水平，血清中TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显升高（P<0.05）。
白芍总苷对糖尿病肾病大鼠的治疗作用及对肾组织 TGF-β1、CTGF 表达的影响宋菲;杨发奋【摘要】目的：观察白芍总苷（ TGP）对糖尿病肾病（ DN）大鼠的治疗作用，及其对肾组织TGF-β1、CTGF表达的影响，探讨其肾脏保护机制。
方法采用腹腔注射链脲佐菌素（ STZ）的方法建立DN模型，随机分成正常对照组、DN组及TGP低、中、高剂量组。
正常对照组、DN组每天给予生理盐水灌胃，TGP低、中、高剂量组分别给予50、100、200 mg／（kg· d） TGP灌胃。
实验8周末观察各组体质量、血糖、尿素氮（ BUN）、肌酐（ Scr）、24 h尿蛋白定量，并行免疫组化法检测肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）与结缔组织生长因子（CTGF）的表达。
结论与正常对照组相比， DN组血糖升高、体质量下降、BUN 和24 h尿蛋白定量明显升高（P均＜0．01）。
与DN组相比，TGP各剂量组大鼠BUN水平均降低，TGP高剂量组24 h尿蛋白定量减少（ P均＜0．01）；TGP中、高剂量组肾组织CTGF、TGF-β1表达均降低（P＜0．05或＜0．01）。
结论 TGP灌胃对DN大鼠具有治疗作用，可改善肾功能，下调TGF-β1、CTGF在肾组织中的表达，从而发挥保护肾脏、延缓DN进展的作用。
【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2017(057)006【总页数】3页(P35-37)【关键词】白芍总苷;糖尿病肾病;大鼠;转化生长因子;结缔组织生长因子【作者】宋菲;杨发奋【作者单位】右江民族医学院附属医院，广西百色533000;右江民族医学院附属医院，广西百色533000【正文语种】中文【中图分类】R587.2糖尿病肾病(DN)是糖尿病(DM)并发微血管改变的最常见并发症之一，是引起终末期肾病的主要原因，同时也是DM患者的主要死亡原因之一。
DN进展可能与持续性的低浓度炎症反应和细胞外基质(ECM)不断累积有关[1]，转化生长因子β1(TGF-β1)与结缔组织生长因子(CTGF)在DN的发生发展中起重要作用。
白芍总苷对糖尿病大鼠肾组织中内质网应激的影响武晓旭,章超群,许㊀坤,徐兴欣,吴永贵2014-03-20接收基金项目:国家自然科学基金(编号:81270813㊁81374034);教育部高等学校博士学科点专项科研基金(编号:20093420110003)作者单位:安徽医科大学第一附属医院肾脏内科,合肥㊀230022作者简介:武晓旭,女,硕士研究生;吴永贵,男,教授,主任医师,博士生导师,责任作者,E-mail:wuyongguixialiang@摘要㊀目的㊀探讨白芍总苷(TGP)对糖尿病肾脏组织中内质网应激(ERS)的影响㊂方法㊀50只大鼠随机分为对照组㊁模型组和TGP 给药组[50㊁100㊁200mg /(kg㊃d)灌胃]㊂用链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠制备糖尿病模型,8周后留取适量肾组织用免疫组织化学法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)㊁磷酸化的蛋白激酶样内质网激酶(p-PERK)及磷酸化的真核细胞翻译起始因子2α(p-eIF2α)蛋白的表达㊂结果㊀各TGP 给药组大鼠尿白蛋白排泄率(UAER)较模型组明显减少(P <0．01),模型组大鼠UAER 水平明显高于对照组(P <0．01)㊂与对照组相比,模型组大鼠p-PERK 在肾小管-间质中的表达以及GRP78㊁p-eIF2α在肾小球㊁肾小管-间质中的表达均显著增加(P <0．01)㊂与模型组相比,TGP 各给药组大鼠GRP78㊁p-PERK 在肾小管-间质中的表达以及p-eIF2α在肾小球㊁肾小管-间质中的表达明显降低(P <0．01)㊂结论㊀糖尿病大鼠肾脏中ERS 反应明显,TGP 对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护可能与抑制ERS 反应有关㊂关键词㊀糖尿病肾病;内质网应激;白芍总苷中图分类号㊀R 587.24;R 285.5文献标志码A 文章编号1000-1492(2014)06-0768-05㊀㊀近年来研究[1-2]表明炎症机制是糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)发生㊁发展的主要机制之一,而内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)反应可以引起一系列压力信号的传导,其中包括氧化应激和炎症反应㊂在体外培养的实验[3]中,有学者用不同浓度的晚期终末产物刺激鼠足细胞,发现葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated pro-tein 78,GRP78)的表达增加,同时诱导ERS㊂在用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立大鼠1型糖尿病模型的动物实验[4]中,显示模型组肾组织GRP78和CHOP /GADD153表达升高,表明ERS 和DN 相互联系㊂白芍总苷(total glucosides of paeony,TGP)是从中国传统中药芍药的干燥根中提取的混合物,具有抗炎和抑制自身免疫反应的作用[5]㊂TGP 在临床上已用于类风湿性关节炎患者改善病情;在大量人及动物实验[6-9]中,也表明其对系统性红斑狼疮㊁强直性脊柱炎㊁变应性接触性皮炎及佐剂性关节炎具有治疗作用,且无明显毒副作用㊂有研究[10]表明TGP 对DN 有明显的保护作用,在此基础上,该实验从ERS 通路观察TGP 对DN 大鼠的影响㊂1㊀材料与方法1.1㊀材料1.1.1㊀实验动物㊀50只Munich-Wistar 大鼠(购自安徽医科大学实验动物中心),昆明种,普通级,180~200g㊂1.1.2㊀主要试剂㊀STZ(美国Sigma 公司);尿白蛋白测定试剂盒(法国SPI 公司);兔抗大鼠GRP78多克隆抗体(美国Santa Cruz 公司);兔抗大鼠磷酸化的蛋白激酶样内质网激酶(protein kinase R-like ER kinase,p-PERK)多克隆抗体及兔抗大鼠磷酸化的真核细胞翻译起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α,p-eIF2α)多克隆抗体(美国Cell Signaling 公司);山羊血清㊁3%H 2O 2去离子水㊁二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒㊁二步法免疫组化检测试剂盒PV-9000(北京中杉金桥生物技术公司)㊂1.1.3㊀干预药物㊀TGP 由安徽医科大学魏伟教授惠赠㊂1.2㊀方法1.2.1㊀饲养条件㊀实验前所有大鼠均在室温(22ʃ2)ħ㊁相对湿度(55ʃ5)%㊁光照周期12~12h的环境中适应饲养1周㊂实验期间保证所有大鼠饮水㊁标准饮食充足,定时更换敷料,不予胰岛素治疗,连续观察8周㊂1.2.2㊀糖尿病大鼠分组和模型制备㊀大鼠适应饲养1周后,被随机分为对照组(n =10)㊁模型组(n =10)和TGP 给药组(n =30)㊂STZ 使用前用0．01mmol /L 的无菌柠檬酸缓冲液配制为6．5g /L,pH4．5,模型组和TGP 给药组大鼠腹腔单次注射STZ (65mg /kg),对照组注射等量柠檬酸缓冲液㊂2~3d 后用血糖仪经尾静脉采血测血糖,随机血糖ȡ16．7mmol /L 者视为糖尿病大鼠,TGP 给药组再随机分为3组(n=10),TGP使用前溶于1%羧甲基纤维素钠溶液中,每天按50㊁100㊁200mg/kg灌胃给药,对照组和模型组给予等量蒸馏水㊂1.2.3㊀标本收集㊀实验8周末,用代谢笼收集所有大鼠24h尿液,记尿量,置于-80ħ冰箱保存待测尿白蛋白㊂称量大鼠体重,腹腔注射戊巴比妥麻醉大鼠,行右颈总动脉插管取血,置于-20ħ冰箱中待测血糖㊂再通过右颈总动脉插管注入生理盐水反复灌洗肾脏,去除包膜后称量肾重㊂1.2.4㊀生化指标的检测㊀尿白蛋白含量使用酶联免疫法测定,尿白蛋白含量与24h尿量乘积即为UAER㊂血糖使用葡萄糖氧化酶法,用全自动生化分析仪测定㊂1.2.5㊀免疫组化测定GRP78㊁p-PERK及p-eIF2α的表达㊀肾组织用4%多聚甲醛溶液固定,石蜡包埋,制成2μm厚经多聚赖氨酸处理的切片,采用PV 两步法,石蜡切片烤片后常规脱蜡至水,微波热修复抗原,3%H2O2去离子水室温孵育以阻断内源性过氧化物酶,PBS冲洗,甩干后滴加山羊血清37ħ孵育封闭非特异性抗原,甩去山羊血清,分别滴加GRP78一抗(1ʒ1000),p-PERK一抗(1ʒ100)及p-eIF2α一抗(1ʒ100),用PBS代替一抗作为阴性对照,4ħ过夜,PBS冲洗,依次滴加聚合物辅助剂和辣根酶标记山羊抗兔/小鼠IgG多聚体37ħ孵育,应用二氨基联苯胺(DAB)显色,自来水充分冲洗㊁复染㊁脱水㊁透明㊁封片,镜下观察,阳性细胞呈棕黄色㊂1.2.6㊀半定量分析㊀高倍镜视野(ˑ400倍)下每张切片随机采集5个肾皮质区,使用Image Pro Plus 6.0图像分析软件处理图像,用平均光密度(mean optical density,MOD)值判定结果㊂1.3㊀统计学处理㊀采用SPSS17.0统计软件进行分析,计量资料以ʏxʃs表示,UAER为非正态分布资料,采用对数转换后以几何均数ˑ/ː耐受因子表示㊂采用单因素方差分析㊂2㊀结果2.1㊀各组一般情况及生化指标的变化㊀实验期间,模型组及TGP给药组大鼠均出现体重减轻,多饮㊁多尿㊁多食㊂实验8周末,TGP不能阻止大鼠血糖增高和体重减低㊂与对照组相比,模型组大鼠相对肾重(肾重/体重)明显增加(P<0．05),血糖㊁UAER 显著升高(P<0．01)㊂与模型组相比,各TGP给药组大鼠相对肾重有所下降,但差异无统计学意义;各TGP给药组大鼠UAER明显下降(P<0．05,P< 0．01),见表1㊂表1㊀各组大鼠一般指标变化(n=10,ʏxʃs)组别剂量[mg/(kg㊃d)]血糖(mmol/L)肾重/体重(g/100g体重)UAER a(mg/24h)对照- 6.94ʃ1.640.30ʃ0.040.38ˑ/ː1.3模型-31.97ʃ4.19∗∗0.56ʃ0.05∗1.87ˑ/ː1.1∗∗TGP给药5030.62ʃ4.350.52ʃ0.02 1.32ˑ/ː1.1#10032.05ʃ4.240.50ʃ0.06 1.15ˑ/ː1.1#20027.20ʃ4.250.50ʃ0.040.65ˑ/ː1.1## P值<0.01<0.01<0.01F值76.1033.69 5.41㊀㊀与对照组比较:∗P<0．05,∗∗P<0．01;与模型组比较:#P<0．05,##P< 0．01;a表示为几何均数ˑ/ː耐受因子2.2㊀各组GRP78蛋白的表达㊀GRP78在对照组远曲小管和集合管上皮细胞胞质中呈弱表达,在模型组表达增强,主要在近曲小管胞质中,部分肾小球细胞胞质也呈强阳性表达㊂与对照组相比,模型组大鼠GRP78蛋白在肾小球和肾小管-间质中表达明显升高(P<0．01)㊂与模型组相比,TGP各组大鼠GRP78在肾小球中表达低于模型组,但差异无统计学意义;但在肾小管-间质中表达明显降低(P< 0．01)㊂见表2,图1A1~E1㊂表2㊀各组大鼠肾组织免疫组化指标GRP78变化(n=10,ʏxʃs)组别剂量[mg/(kg㊃d)]肾小球(MOD)肾小管-间质(MOD)对照-0.00181ʃ0.001060.00418ʃ0.00152模型-0.00855ʃ0.00124∗∗0.03616ʃ0.00936∗∗TGP给药500.00848ʃ0.002320.02053ʃ0.00708## 1000.00777ʃ0.001540.01594ʃ0.01054##2000.00722ʃ0.002020.01316ʃ0.00564## P值<0.01<0.01F值26.7224.75㊀㊀与对照组比较:∗∗P<0．01;与模型组比较:##P<0．012.3㊀各组p-PERK蛋白的表达㊀p-PERK在对照组大鼠肾小管上皮细胞内呈弱表达,肾小球内无表达㊂与对照组相比,模型组大鼠p-PERK蛋白在肾小管上皮细胞胞质中表达明显增强(P<0．01)㊂与模型组相比,TGP各组p-PERK蛋白在肾小管-间质中表达明显降低(P<0．01)㊂见表3,见图1A2~E2㊂2.4㊀各组p-eIF2α蛋白的表达㊀对照组p-eIF2α蛋白少量表达于肾小球与肾小管-间质㊂与对照组相比,模型组大鼠p-eIF2α蛋白在肾小球及肾小管-间质中表达均显著增加(P<0．01)㊂与模型组相比,TGP各组p-eIF2α蛋白在肾小球及肾小管-间质中表达均明显降低(P<0．01)㊂见表4㊁图1A3~E3㊂图1㊀各组肾组织中GRP78㊁p-PERK ㊁p-eIF2α的表达㊀PV 二步法ˑ400㊀㊀1:GRP78;2:p-PERK;3:p-eIF2α;A:对照组;B:模型组;C:TGP 50mg /(kg㊃d)组;D:TGP 100mg /(kg㊃d)组;E:TGP 200mg /(kg㊃d)组表3㊀各组大鼠肾组织免疫组化指标p-PERK 变化(n =10,ʏx ʃs )组别剂量[mg /(kg㊃d)]肾小管-间质(MOD)对照组-0.00171ʃ0.00063模型组-0.01420ʃ0.00324∗∗TGP 组500.00696ʃ0.00098##1000.00416ʃ0.00106##2000.00380ʃ0.00116##P 值<0.01F 值77.88㊀㊀与对照组比较:∗∗P <0．01;与模型组比较:##P <0．01表4㊀各组大鼠肾组织免疫组化指标p-eIF2α变化(n =10,ʏx ʃs )组别剂量[mg /(kg㊃d)]肾小球(MOD)肾小管-间质(MOD)对照-0.00022ʃ0.000070.0027ʃ0.0017模型-0.00612ʃ0.00233∗∗0.0750ʃ0.0074∗∗TGP 给药500.00188ʃ0.00093##0.0639ʃ0.0075##1000.00089ʃ0.00025##0.0594ʃ0.0070##2000.00047ʃ0.00014##0.0324ʃ0.0068##P 值<0.01<0.01F 值44.63296.69㊀㊀与对照组比较:∗∗P <0．01;与模型组比较:##P <0．013㊀讨论内质网稳态情况下,内质网膜上有3种ERS 元件与内质网分子伴侣GRP78结合,这些蛋白分别是肌醇需求酶1,蛋白激酶样内质网激酶(protein ki-nase R-like ER kinase,PERK)和活化转录因子6㊂ERS 发生时,为使细胞适应应激,GRP78离开上述3种跨膜蛋白,触发未折叠蛋白反应(unfolded proteinresponse,UPR)[11]㊂PERK 是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,当未折叠蛋白及错误蛋白在内质网内腔内积聚时,PERK 发生自身二聚化和磷酸化,继而使eIF2α发生磷酸化,从而衰减大部分蛋白翻译,消除不成熟蛋白,减轻内质网负荷[12]㊂近年来越来越多的研究[13-14]显示ERS 与肾脏疾病联系紧密㊂Lindenmeyer et al [15]以DN 患者为研究对象,行肾穿刺或组织检查,发现DN 患者肾组织中UPR 相关基因GRP78等的mRNA 较对照组患者显著增高,且ERS 水平与DN 的病变程度密切相关㊂另一研究中,研究者用STZ 处理的9个月和22个月年龄的小鼠,经过4个月的DM 病程后,这些小鼠出现蛋白尿,肌酐升高,肾小球硬化,肾小管炎症浸润和纤维化,同时糖尿病组小鼠肾组织中GRP78㊁CHOP㊁p-PERK 和p-eIF2α表达增加,而在22个月的小鼠中表达更加明显[16]㊂对肾组织中ERS 的抑制可能延缓DN 的发展㊂4-苯基丁酸是一种分子伴侣,研究者用4-苯基丁酸处理糖尿病大鼠,结果显示用药组UAER 较糖尿病组显著降低,同时肾组织中GRP78和p-PERK 的表达较糖尿病组明显降低,炎症因子及纤维化因子也显著降低[17]㊂国内也有动物模型实验表明糖尿病大鼠肾小管中p-PERK 和p-eIF2α较正常组增多,经血管紧张素转换酶抑制剂治疗可明显降低二者的表达[18]㊂均提示中断ERS 反应在防治DN 病程进展中具有重要的意义㊂TGP为毛茛科植物芍药的干燥根中提取的一组糖苷类物质,对T㊁B淋巴细胞的增殖有双向调节作用,具有抗炎㊁抗氧化和免疫调节的作用,对类风湿性关节炎㊁系统性红斑狼疮及免疫性肝损害等疾病有明确疗效㊂大量国内研究[6-9]证实TGP对控制急慢性及免疫炎症性疾病有明显的作用,在对系膜增生性肾小球肾炎(mesangial proliferative glomerulo-nephritis,MsPGN)大鼠的实验研究中,发现TGP可以改善MsPGN大鼠肾小球系膜细胞增生和系膜基质聚积,同时减轻蛋白尿和血肌酐㊁尿素氮,提示TGP可以部分逆转受损的肾小球病理改变[19]㊂该课题组前期研究[20-22]显示TGP既可减少ICAM-1㊁IL-1及TNF-α,也可抑制氧化应激,从而推测TGP 对糖尿病大鼠肾脏的保护反应与其抑制炎症免疫反应及氧化应激有关㊂本实验中,TGP给药可以显著降低模型组大鼠UAER,明显减少肾组织中ERS相关蛋白GRP78㊁p-PERK和p-eIF2α的表达,提示TGP有保护DN大鼠肾脏的作用,并且可能与抑制DN大鼠肾组织中的UPR反应,抑制PERK-eIF2α通路有关㊂提示TGP对DN肾脏的保护作用可能与抑制ERS反应有关,但因ERS与炎症反应通过一系列信号传导通路包括产生活性氧㊁内质网钙离子的释放㊁核因子κB和有丝分裂原激活蛋白激酶等相互关联[2],其具体机制尚不明确,可在今后的研究中得以阐述㊂参考文献[1]㊀Lenz O,Fornoni A,Ijaz A,et al.Role of inflammation in diabeticnephropathy[J].Curr Diabetes Rev,2008,4(1):10-7. 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白芍总苷对糖尿病大鼠肾组织氧化应激的影响的开题报告
一、研究背景
糖尿病是一种慢性代谢性疾病，通过影响胰岛素的分泌或作用来影响葡萄糖的代谢，导致高血糖及其他代谢紊乱，长期影响可导致肾功能损害，这种损害主要是由于肾脏血管受损和肾小球滤过功能的受限而导致。
目前糖尿病的药物治疗主要以降低血糖为主，但是并不能改善糖尿病患者的肾功能。
因此，寻找预防和治疗糖尿病肾病的药物具有重要意义。
二、研究目的
本研究旨在探究白芍总苷对糖尿病大鼠肾组织氧化应激的影响，从细胞水平探究白芍总苷对糖尿病肾病的治疗作用。
三、研究方法
1.动物模型建立：采用高脂饲料联合低剂量链脲佐菌素注射法建立糖尿病模型。
2.实验分组：将模型鼠随机分为3组，分别为模型组、白芍总苷低剂量组和白芍总苷高剂量组，同时设置正常对照组。
3.处理方法：给予实验组连续灌胃白芍总苷液体，正常对照组和模型组则同步灌胃蒸馏水。
4.指标检测：用超微量分光光度计检测血糖的变化，用肾脏病理学检测肾小球肾小管的变化，用Western blot检测相关蛋白的表达，同时测定清除自由基的能力和生物抗氧化反应试验测定抗氧化能力。
四、研究意义
白芍总苷具有多种药理作用，包括抗氧化、降血糖、抗炎等，但其是否对糖尿病肾病具有治疗作用还需要进一步探究。
本研究将从细胞水平对白芍总苷的治疗作用进行探究，为糖尿病肾病的治疗提供新的思路和方法，具有一定的理论和实践意义。
白芍总苷对糖尿病大鼠肾脏巨噬细胞浸润及增殖的影响沈阳;王坤;齐向明;吴永贵【期刊名称】《安徽医学》【年(卷),期】2011(032)006【摘要】目的探讨白芍总苷(TGP)对糖尿病大鼠肾脏保护作用的机制是否与抑制肾脏巨噬细胞浸润及增殖有关.方法采用链脲佐菌素诱导大鼠糖尿病模型,随机分对照组、模型组与TGP给药组[50,100和200 mg·kg-1·d-1],8周后应用免疫组化及免疫双染技术检测各组大鼠肾组织巨噬细胞浸润、增殖情况.结果 TGP呈剂量依赖性降低糖尿病大鼠24 h尿清蛋白排泄率.模型组大鼠肾脏PCNA+细胞数、浸润巨噬细胞数及PCNA+巨噬细胞数明显高于对照组(P＜0.01);TGP组大鼠肾脏PCNA+细胞数、浸润巨噬细胞数及PCNA+巨噬细胞数明显低于模型组(P＜0.05,P＜0.01).结论 TGP可明显改善糖尿病大鼠早期肾损害,其机制可能部分与调节肾脏同有细胞增殖,抑制肾组织内巨噬细胞的浸润及增殖有关.【总页数】5页(P709-712,封3)【作者】沈阳;王坤;齐向明;吴永贵【作者单位】230022,合肥,安徽医科大学第一附属医院肾脏内科;230022,合肥,安徽医科大学第一附属医院肾脏内科;230022,合肥,安徽医科大学第一附属医院肾脏内科;230022,合肥,安徽医科大学第一附属医院肾脏内科【正文语种】中文【相关文献】1.赤芍对糖尿病肾病大鼠肾脏TNF-α、MCP-1、ICAM-1表达及巨噬细胞浸润的影响 [J], 郑亚萍;康红钰2.他克莫司对糖尿病大鼠肾组织巨噬细胞浸润、增殖及活化的影响 [J], 苏双全;赵莉;夏林;胡梅芬;吴永贵3.化瘀通络中药通过TAK1/JNK通路抑制巨噬细胞浸润及活化改善糖尿病肾病大鼠肾脏炎症 [J], 郭帅;方敬;李雅纯;杨帆;陈志强4.PKCβ抑制剂LY333531对大鼠糖尿病模型肾脏巨噬细胞浸润的影响 [J], 林辉;吴永贵;赵珉;钱浩;周典;郝丽;张伯科5.缬沙坦对早期糖尿病鼠肾脏巨噬细胞浸润的影响 [J], 唐平;刘丹;杨川;刘珊英;李红辉;王碧飞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
