高效液相色谱法测定马尾松松针中莽草酸的含量
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1 材 料 与 方 法
1 . 1 主要仪 器
岛津 L C一1 0 A v p高 效 液 相 色 谱 仪 : 日本 岛 津
文章编号
1 0 0 0— 5 2 6 9 ( 2 0 1 3 ) 0 4— 0 0 5 0— 4 0
高效 液 相 色谱 法测 定 马尾 松 松 针 中莽草 酸 的含 量
程 兰香 , 周 文 美 一 , 赵 辰 路 , 张建 敏 , 。
( 1 . 贵州大学 贵州省发酵工程与生物制药重点实验室 , 贵州 贵阳 5 5 0 0 2 5; 2 . 贵州大学 化学 与化工学院 , 贵州 贵 阳 5 5 0 0 2 5 )
中图分 类 号 : T S 2 0 2 . 1 文献标识 码 : A S H z 一 Ⅲ循 环水 式 真空 泵 : 上海亚荣生化仪器厂; 电动离 心机 : 常州澳 华仪 器有 限公 司。
1 . 2 试 剂与原 料
马尾松 属松 科 植 物 , 是 我 国特 产 的 乡 土树 种 ,
松针 是松属 植物 的代 表性药 用部位 , 是 一种再 生速
度快 、 可一 年 四季 采 收 、 可持 续 利用 的天 然 再生 资
源 。松针 中含 有 丰富 的黄 酮 、 木 脂素 、 莽 草 酸等 活 性物 质及 丰富 的 C a 、 P、 Mn等矿 物质 l J j 。
莽草 酸对照品 ( 贵州迪大生物有 限公 司 , 纯度 ≥
精 密 称 取 干 燥 至 恒 重 的莽 草 酸 对 照 品 5 . 1 mg , 置于 5 0 m L容量 瓶 中用 超 纯 水 溶 解 并 定 容 至 刻度 , 摇匀 , 即得浓 度 为 0 . 1 0 2 m r , / m L的对 照 品储 备液 。 1 . 4 样品供 试液 的制 备 通过单 因素试 验 , 可 以得 出最佳 的提取工 艺条
4 . 6 m m X 2 5 0 m m) 色谱 柱 ; 乙腈 一 2 %H 3 P 0 4 ( 8 0 : 2 0 ) ; 流速 0 . 8 m L / m i n ; 测定 波 长 2 1 3 n m, 柱 温
4 0℃ . 结果表 明 , 线性 范 围为 4 . 0 8— 2 4 . 4 8 g / m L( r = 0 . 9 9 9 7 ) , 平均 回收 率为 9 7 . 9 2 %, R S D为
精密 称 取 已干燥 粉 碎 ( 过4 0 目筛 ) 的 马尾 松
松针 样 品 2 . 0 0 0 0 g于 圆底 烧 瓶 中 , 加入 5 O m L蒸 馏水 8 5 q C 下 回流提取 2 h . 提 取液 过滤 , 离心 , 在减
压水 浴装 置下浓 缩 , 将 浓缩 液 倒 人 1 0 0 mL容 量瓶 中用 超纯水 定容 至刻 度 。从 容量 瓶 中移取 1 mL提 取 液于 2 5 m L容量瓶 中用 超纯水 定容 至刻度 , 临用 前用 0 . 4 5 m微 孑 L 滤膜 过滤 。 莽草 酸含 量 ( % )=提 取 液 中莽 草 酸 的 质 量/ 松相 色谱 法对 马尾松松 针 中的 莽草 酸进 行 含 量测 定 。马尾 松 松针 原 料 以 蒸馏
水 为提 取 溶 剂 加 热 回流 进 行 提 取 得 样 品 供 试 液 。 色谱 条 件 为 : S h o d e x A s a h i p a k N H , ( 5 m,
9 8 %) ; 乙腈 为 色谱 纯 , 其 他 试 剂 均 为 国 产分 析 纯 。
马尾松松针样 品 , 采集 于贵州省贵 阳市花溪 区。
1 . 3 对 照 品储 备液 的制 备
莽草 酸分 子式 为 c , H 。 O , 是 一种 白色精 细粉
末, 易 溶 于水 , 气 味辛 酸 。莽 草 酸有 着 非 常重要 的 药理 作用 , 它能抗 炎 、 镇痛 、 是抗病 毒和抗 癌药 物 中
间体 。 是 可有效 对付致 命 H 5 N 1型禽流 感病 毒 的 药
物“ 达菲 ” 的重要 成 分 。获得 莽 草酸 的 途径 主 要有
两种 : 微 生物 发酵 和从 天 然 植 物 中提 取 , 也 可 用 化 学 方法合 成 j 。 目前 莽 草 酸 主要 从 野 生八 角 茴 香
中提取得 到 J , 但 是 八角 茴 香 资 源有 限 , 需 要 寻 求 新 的 资源来满 足市 场 。马尾松 松针 中含有 莽草 酸 ,
第3 O卷 第 4期 2 0 1 3年 8月
贵州大学学报( 自然 科 学 版 ) J o u r n a l o f G u i z h o u U n i v e r s i t y( N a t u r a l S c i e n c e s )
Vo 1 .3 O NO .4 Au g. 2 01 3
1 . 2 3 0 %( n= 9 ) . 莽草 酸 的保 留时 间约为 5 . 8 5 mi n , 含量 为 3 . 2 0 %. 此方 法准 确 、 简便 , 适 用 于马
尾松松 针 中莽 草酸 的定量 分析 。
关键 词 : 马尾松松 针 ; 莽草 酸 ; 高效液相 色谱 ; 含 量
件: 马尾松 松针粉 碎过 4 0目筛 ( 0 . 4 2 mm) , 料 液 比
1 : 2 5, 8 5 o C 下 回流 提取 2 h .
陈骁 熠等 人采 用高 效 液相 色 谱 法 分析 马 尾松 松
针 中 莽 草 酸 的含 量 为 5 . 7 1 %. 为 了充 分 利 用其 资 源, 本实 验采 用 H P L C法测 定 马尾松松 针 中莽 草 酸 的含量 , 为有 针对性 的开 发利用 我 国各 地 丰富 的马 尾 松资 源 中的莽 草酸提 供科学 依据 。